BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Pada tahun 1964 sebuah ekspedisi Kanada ke pulau Rapa Nui Pasifik Selatan yang
terisolasi (juga dikenal sebagai Pulau Paskah) mengumpulkan satu set sampel tanah dengan
tujuan untuk mengidentifikasi agen antimikroba baru. Pada bakteri yang diisolasi dari salah
satu sampel ini, Sehgal dan rekan menemukan senyawa dengan sifat antijamur, imunosupresif,
dan antitumor yang luar biasa (Eng et. al. 1984; Martel et. al. 1977; Vezina et. al 1975).
Analisis lebih lanjut dari senyawa ini, bernama rapamycin setelah situs penemuannya (secara
klinis disebut sebagai sirolimus), mengungkapkan bahwa ia bekerja sebagian dengan
membentuk kompleks fungsi dengan peptidyl-prolyl-isomerase FKBP12 untuk menghambat
jalur transduksi sinyal yang diperlukan untuk sel. pertumbuhan dan proliferasi (Chung et. al.,
1992). Terlepas dari wawasan ini, mekanisme penuh tindakan rapamycin tetap sulit dipahami
hingga tahun 1994 ketika studi biokimia mengidentifikasi Target mekanistik (sebelumnya
"mamalia"). Rapamycin (mTOR) sebagai target langsung kompleks rapamycin-FKBP12 pada
mamalia (Brown et. al. 1994; Sabatini et. al. 1994; Sabres et. al 1995), dan mengungkapkannya
sebagai homolog dari ragi TOR gen / DRR yang sebelumnya telah diidentifikasi dalam
penapisan genetik untuk resistensi rapamycin (Cafferkey et. al. 1993; Heitman et. al. 1991;
Kunz et. al. 1993). Dalam lebih dari dua dekade sejak penemuan ini, penelitian dari lusinan
laboratorium di seluruh dunia telah mengungkapkan bahwa mTOR protein kinase membentuk
nukleasi jaringan pensinyalan eukariotik utama yang mengoordinasikan pertumbuhan sel
dengan kondisi lingkungan dan memainkan peran mendasar dalam fisiologi sel dan organisme.
Banyak aspek fungsi dan regulasi mTOR yang baru saja dijelaskan, dan masih banyak lagi
pertanyaan yang belum terjawab. Dalam ulasan ini, kami memberikan ikhtisar tentang
pemahaman kami saat ini tentang jalur mTOR dan perannya dalam pertumbuhan, metabolisme,
dan penyakit. mTOR adalah protein kinase serin/treonin dalam keluarga PI3K-related kinase
(PIKK) yang membentuk subunit katalitik dari dua kompleks protein yang berbeda, yang
dikenal sebagai mTOR Complex 1 (mTORC1) dan 2 (mTORC2) (Gbr. 1A). mTORC1
didefinisikan oleh tiga komponen intinya: mTOR, Raptor (protein pengatur yang terkait dengan
mTOR), dan mLST8 (mematikan mamalia dengan protein Sec13 8, juga dikenal sebagai GβL)
(Gbr. 1B, Kim et al. 2002; Hara et al. 2002; Kim et al. 2003). Raptor memfasilitasi perekrutan
substrat ke mTORC1 melalui pengikatan ke motif pensinyalan TOR (TOS) yang ditemukan
pada beberapa substrat mTORC1 kanonik (Nojima et al., 2003; Schalm et al., 2003), dan,
seperti dijelaskan nanti, diperlukan untuk subselular yang benar lokalisasi mTORC1. mLST8
sebaliknya berasosiasi dengan domain katalitik mTORC1 dan dapat menstabilkan loop aktivasi
kinase (Yang et al. 2013), meskipun penelitian genetik menunjukkan bahwa fungsi esensial
mTORC1 dapat diabaikan (Guertin et al., 2006). Selain tiga komponen inti ini, mTORC1 juga
mengandung dua subunit penghambat PRAS40 (substrat Akt kaya prolin 40 kDa) (Sancak et
al. 2007; Vander Haar et al. 2007; Wang et al. 2007) dan DEPTOR (DEPTOR domain yang
mengandung mTOR berinteraksi protein) (Peterson et al. 2009).
Studi struktural mTORC1 telah menghasilkan wawasan yang signifikan tentang
perakitan, fungsi, dan gangguannya oleh rapamycin. Rekonstruksi Cryo-EM dari mTORC1
dan ragi TORC1 telah mengungkapkan bahwa kompleks tersebut membentuk dimer berbentuk
"permen" 1 mDa, dengan antarmuka dimerisasi yang terdiri dari kontak antara pengulangan
HEAT mTOR serta antara Raptor dan mTOR (Gbr. 1B, Aylett et al.2016; Baretic et al., 2016;
Yip et al.2010). Selain itu, struktur kristal domain mTOR kinase yang terikat pada mLST8
menunjukkan bahwa kompleks rapamycin-FKBP12 berikatan dengan domain FRB mTOR
untuk mempersempit celah katalitik dan menutup sebagian substrat dari situs aktif (Yang et al.,

1
2013). Sementara kompleks rapamycin-FKBP12 secara langsung menghambat mTORC1,
mTORC2 ditandai dengan ketidakpekaannya terhadap pengobatan rapamycin akut. Seperti
mTORC1, mTORC2 juga mengandung mTOR dan mLST8 (Gbr. 1C). Namun, alih-alih
Raptor, mTORC2 mengandung Rictor (pendamping mTOR yang tidak sensitif rapamycin),
protein yang tidak terkait yang kemungkinan besar memiliki fungsi analog (Jacinto et al. 2004;
Sarbassov et al. 2004). mTORC2 juga mengandung DEPTOR (Peterson et al. 2009), serta
subunit pengatur mSin1 (Frias et al. 2006; Jacinto dkk. 2006; Yang dkk. 2006) dan Protor1/2
(Pearce et al. 2007; Thedieck et al. 2007; Woo et al., 2007). Meskipun kompleks rapamycin-
FKBP12 tidak secara langsung mengikat atau menghambat mTORC2, pengobatan rapamycin
yang berkepanjangan membatalkan pensinyalan mTORC2, kemungkinan karena
ketidakmampuan mTOR yang terikat rapamycin untuk bergabung ke dalam kompleks
mTORC2 baru (Lamming et al., 2012)

1.2 Rumusan Masalab

Apa Itu Protein mTOR?

1.3 Tujuan Masalah

Untuk mengetahui protein mTOR

2
BAB II
PEMBAHASAN

2.1 Jaringan Pensinyalan mTOR

Untuk tumbuh dan membelah, sel harus meningkatkan produksi protein, lipid, dan
nukleotida sambil juga menekan jalur katabolik seperti autophagy. mTORC1 memainkan
peran sentral dalam mengatur semua proses ini, dan karenanya mengontrol keseimbangan
antara anabolisme dan katabolisme sebagai respons terhadap kondisi lingkungan (Gbr. 2, A
dan B). Di sini kami meninjau substrat kritis dan proses seluler hilir mTORC1 dan bagaimana
mereka berkontribusi pada pertumbuhan sel.
Sebagian besar fungsi yang dibahas di sini diidentifikasi dan dicirikan dalam konteks
garis sel mamalia, sedangkan konteks fisiologis di mana proses ini penting akan dibahas lebih
rinci nanti. Sintesis protein—mTORC1 mendorong sintesis protein sebagian besar melalui
fosforilasi dua efektor utama, p70S6 Kinase 1 (S6K1) dan eIF4E Binding Protein (4EBP)
(Gambar 2B). mTORC1 secara langsung memfosforilasi S6K1 pada situs motif hidrofobiknya,
Thr389, memungkinkan fosforilasi dan aktivasi selanjutnya oleh PDK1. S6K1 memfosforilasi
dan mengaktifkan beberapa substrat yang mempromosikan inisiasi terjemahan mRNA
termasuk eIF4B, regulator positif dari kompleks eIF4F pengikat 5′cap (Holz et al., 2005).
S6K1 juga memfosforilasi dan mendorong degradasi PDCD4, penghambat eIF4B (Dorello et
al. 2006), dan meningkatkan efisiensi translasi mRNA yang disambung melalui interaksinya
dengan SKAR, komponen kompleks sambungan ekson (Ma et al., 2008 ). Substrat mTORC1
4EBP tidak terkait dengan S6K1 dan menghambat translasi dengan mengikat dan
mengasingkan eIF4E untuk mencegah perakitan kompleks eIF4F. mTORC1 memfosforilasi
4EBP di beberapa situs untuk memicu pemisahannya dari eIF4E (Brunn et al., 1997; Gingras
et al. 1999), memungkinkan terjadinya terjemahan mRNA yang bergantung pada 5′cap.
Meskipun telah lama dihargai bahwa pensinyalan mTORC1 mengatur terjemahan mRNA,
apakah dan bagaimana pengaruhnya terhadap kelas transkrip mRNA tertentu telah
diperdebatkan. Namun, analisis pencetakan kaki ribosom global mengungkapkan bahwa
sementara penghambatan mTOR akut secara moderat menekan terjemahan mRNA umum, hal
itu paling memengaruhi mRNA yang mengandung motif 5 ′ TOP atau "mirip TOP" yang kaya
pirimidin, yang mencakup sebagian besar gen yang terlibat dalam sintesis protein (Hsieh et al
.2012; Thoreen et al. 2012). Metabolisme lipid, nukleotida, dan glukosa—Sel yang tumbuh
membutuhkan lipid yang cukup untuk pembentukan dan perluasan membran baru. mTORC1
mempromosikan sintesis lipid de novo melalui faktor transkripsi protein pengikat elemen
responsif sterol (SREBP), yang mengontrol ekspresi gen metabolik yang terlibat dalam
biosintesis asam lemak dan kolesterol (Porstmann et al., 2008). Sementara SREBP diaktifkan
secara kanonik sebagai respons terhadap kadar sterol rendah, pensinyalan mTORC1 juga dapat
mengaktifkan SREBP secara independen melalui mekanisme yang bergantung pada S6K1
(Duvel et al., 2010) serta melalui fosforilasi suatu substrat tambahan, Lipin1, yang
menghambat SREBP tanpa adanya pensinyalan mTORC1 (Peterson et al., 2011).
Studi terbaru menetapkan bahwa mTORC1 juga mempromosikan sintesis nukleotida
yang diperlukan untuk replikasi DNA dan biogenesis ribosom dalam sel yang tumbuh dan
berkembang biak. mTORC1 meningkatkan ekspresi MTHFD2 yang bergantung pada ATF4,
komponen kunci dari siklus tetrahidrofolat mitokondria yang menyediakan unit satu karbon
untuk sintesis purin (Ben-Sahra et al., 2016). Selain itu, S6K1 memfosforilasi dan
mengaktifkan sintetase karbamoil-fosfat (CAD), komponen penting dari jalur sintesis pirimidin
de novo (Ben-Sahra et al., 2013; Robataille et al., 2013). mTORC1 juga memfasilitasi
pertumbuhan dengan mempromosikan pergeseran metabolisme glukosa dari fosforilasi
oksidatif ke glikolisis, yang kemungkinan memfasilitasi penggabungan nutrisi ke dalam
biomassa baru. mTORC1 meningkatkan translasi faktor transkripsi HIF1α (Gbr. 2C), yang

3
mendorong ekspresi beberapa enzim glikolitik seperti fosfo-frukto kinase (PFK) (Duvel et al.,
2010). Selanjutnya, aktivasi SREBP yang bergantung pada mTORC1 mengarah pada
peningkatan fluks melalui jalur oksidatif pentosa fosfat (PPP), yang menggunakan karbon dari
glukosa untuk menghasilkan NADPH dan metabolit perantara lainnya yang diperlukan untuk
proliferasi dan pertumbuhan. Regulasi pergantian protein—Selain berbagai proses anabolik
yang diuraikan di atas, mTORC1 juga mendorong pertumbuhan sel dengan menekan
katabolisme protein (Gbr. 1B), terutama autophagy. Langkah awal yang penting dalam
autophagy adalah aktivasi ULK1, suatu kinase yang membentuk kompleks dengan ATG13,
FIP2000, dan ATG101 dan mendorong pembentukan autophagosome. Dalam kondisi penuh
nutrisi, mTORC1 memfosforilasi ULK1, sehingga mencegah pengaktifannya oleh AMPK,
aktivator kunci atau autophagy (Kim et al., 2011). Dengan demikian, aktivitas relatif mTORC1
dan AMPK dalam konteks seluler yang berbeda sangat menentukan tingkat induksi autophagy.
mTORC1 juga mengatur autophagy sebagian dengan memfosforilasi dan menghambat
translokasi nuklir dari faktor transkripsi TFEB, yang mendorong ekspresi gen untuk biogenesis
lisosom dan mesin autophagy (Martina et al., 2012; Roçzniak-Ferguson et al., 2012; Settembre
et al., 2012).
Jalur utama kedua yang bertanggung jawab untuk pergantian protein adalah sistem
ubiquitin-proteasome (UPS), di mana protein ditargetkan secara selektif untuk degradasi oleh
proteasome 20S setelah modifikasi kovalen dengan ubiquitin. Dua studi baru-baru ini
menemukan bahwa penghambatan mTORC1 akut dengan cepat meningkatkan proteolisis yang
bergantung pada proteasome melalui peningkatan umum dalam ubiquitylation protein, atau
peningkatan kelimpahan pendamping proteasomal melalui penghambatan Erk5 (Gbr. 2B,
Rousseau et al., 2016, Zhao et al. , 2015). Namun, penelitian lain menemukan bahwa
hiperaktivasi genetik pensinyalan mTORC1 juga meningkatkan aktivitas proteasome, melalui
peningkatan ekspresi subunit proteasome di hilir Nrf1 (Zhang et al., 2014). Satu penjelasan
yang mungkin untuk perbedaan ini adalah bahwa sementara penghambatan mTORC1 akut
mempromosikan proteolisis untuk memulihkan kumpulan asam amino bebas, aktivasi
mTORC1 yang berkepanjangan juga memicu peningkatan kompensasi dalam pergantian
protein untuk menyeimbangkan peningkatan laju sintesis protein. Mengingat bahwa UPS
bertanggung jawab atas sebagian besar degradasi protein dalam sel manusia, tepatnya
bagaimana mTORC1 mengatur proses ini merupakan pertanyaan penting di masa mendatang.

2.2 Hilir mTOR

Sementara mTORC1 mengatur pertumbuhan dan metabolisme sel, mTORC2 malah
mengontrol proliferasi dan kelangsungan hidup terutama dengan memfosforilasi beberapa
anggota keluarga protein kinase AGC (PKA / PKG / PKC) (Gbr. 2D). Substrat mTORC2
pertama yang diidentifikasi adalah PKCα, pengatur sitoskeleton aktin (Jacinto et al., 2004,
Sarbassov et al., 2004). Baru-baru ini, mTORC2 juga telah terbukti memfosforilasi beberapa
anggota keluarga PKC lainnya, termasuk PKCδ (Gan et al., 2012), PKCζ (Li dan Gao, 2014),
serta PKCγ dan PKCε (Thomanetz et al., 2013), yang semuanya mengatur berbagai aspek
remodeling sitoskeletal dan migrasi sel. Namun, peran mTORC2 yang paling penting
kemungkinan adalah fosforilasi dan aktivasi Akt, efektor utama pensinyalan insulin / PI3K
(Sarbassov et al., 2005). Setelah aktif, Akt mempromosikan kelangsungan hidup sel,
proliferasi, dan pertumbuhan melalui fosforilasi dan penghambatan beberapa substrat utama
termasuk faktor transkripsi FoxO1/3a, pengatur metabolisme GSK3β, dan penghambat
mTORC1 TSC2. Namun sementara fosforilasi yang bergantung pada mTORC2 diperlukan
untuk Akt untuk memfosforilasi beberapa substrat in vivo, seperti FoxO1 / 3a, itu dapat
diabaikan untuk fosforilasi yang lain termasuk TSC2 (Guertin et al., 2006; Jacinto et. al., 2006).
Akhirnya, mTORC2 juga memfosforilasi dan mengaktifkan SGK1, AGC-kinase lain yang
mengatur transpor ion serta kelangsungan hidup sel (Garcia-Martinez dan Alessi, 2008).

4
2.3 Hulu mTOR
Pergeseran yang bergantung pada mTORC1 menuju peningkatan anabolisme
seharusnya hanya terjadi dengan adanya sinyal endokrin pro-pertumbuhan serta blok bangunan
energi dan kimia yang cukup untuk sintesis makromolekul. Pada mamalia, input ini sangat
bergantung pada diet, sehingga mTORC1 diaktifkan setelah makan untuk meningkatkan
pertumbuhan dan penyimpanan energi di jaringan seperti hati dan otot, tetapi dihambat selama
puasa menghemat sumber daya yang terbatas. Di sini kita membahas jalur seluler hulu
mTORC1 dan mekanisme yang digunakan untuk mengontrol aktivasi mTORC1. Faktor
Pertumbuhan—Studi rapamycin pada awal 1990-an mengungkapkan bahwa mTORC1 adalah
mediator hilir dari beberapa faktor pertumbuhan dan jalur pensinyalan yang bergantung pada
mitogen, yang semuanya menghambat regulator negatif utama dari pensinyalan mTORC1 yang
dikenal sebagai kompleks Tuberous Sclerosis Complex (TSC). TSC adalah kompleks
heterotrimerik yang terdiri dari TSC1, TSC2, dan TBC1D7 (Dibble et al., 2012), dan berfungsi
sebagai protein pengaktif GTPase (GAP) untuk GTPase Rheb kecil (Inoki et al., 2003; Tee et
al., 2003), yang secara langsung mengikat dan mengaktifkan mTORC1 (Long et al., 2005;
Sancak et al., 2007). Meskipun Rheb adalah aktivator penting mTORC1, bagaimana persisnya
ia merangsang aktivitas mTORC1 kinase masih belum diketahui. Banyak jalur faktor
pertumbuhan menyatu pada TSC (Gbr. 2A, diulas dalam Huang dan Manning, 2008), termasuk
jalur insulin/insulin-like growth factor-1 (IGF-1), yang memicu fosforilasi multisite yang
bergantung pada Akt dari TSC2. Fosforilasi ini menghambat TSC dengan memisahkannya
dari membran lisosom, di mana setidaknya beberapa fraksi Rheb seluler terlokalisasi (Menon
et al., 2014). Demikian pula dengan reseptor tyrosine kinase-dependent Pensinyalan ras
mengaktifkan mTORC1 melalui MAP Kinase Erk dan p90RSK efektornya, keduanya juga
memfosforilasi dan menghambat TSC2. Namun tidak jelas apakah masukan ini juga
mengontrol lokalisasi TSC, atau lebih tepatnya menghambat aktivitas GAP melalui mekanisme
yang berbeda. Jalur faktor pertumbuhan tambahan di hulu TSC termasuk Wnt dan sitokin
inflamasi TNFα, yang keduanya mengaktifkan mTORC1 melalui penghambatan TSC1.
Tepatnya bagaimana kompleks TSC mengintegrasikan banyak sinyal ini dan dampak relatifnya
pada aktivitas mTORC1 dalam berbagai konteks tetap menjadi pertanyaan terbuka.
Kerusakan energi, oksigen, dan DNA—mTORC1 juga merespons tekanan intraseluler
dan lingkungan yang tidak sesuai dengan pertumbuhan seperti tingkat ATP yang rendah,
hipoksia, atau kerusakan DNA. Penurunan muatan energi seluler, misalnya selama kekurangan
glukosa, mengaktifkan AMPK pengatur metabolisme yang responsif terhadap stres, yang
menghambat mTORC1 baik secara tidak langsung, melalui fosforilasi dan aktivasi TSC2, serta
secara langsung melalui fosforilasi Raptor (Gwinn et al., 2008 ; Inoki et al., 2003b; Shaw et
al., 2004). Menariknya, kekurangan glukosa juga menghambat mTORC1 dalam sel yang
kekurangan AMPK, melalui penghambatan Rag GTPases, menunjukkan bahwa mTORC1
merasakan glukosa melalui lebih dari satu mekanisme (Efeyan et al., 2013; Kalender et al.,
2010). Demikian pula, hipoksia menghambat mTORC1 sebagian melalui aktivasi AMPK,
tetapi juga melalui induksi REDD1 (Diatur dalam kerusakan dan pengembangan DNA 1), yang
mengaktifkan TSC (Brugarolas et al., 2004). Akhirnya, jalur respons kerusakan DNA
menghambat mTORC1 melalui induksi gen target p53 termasuk subunit pengatur AMPK
(AMPKβ), PTEN, dan TSC2 itu sendiri, yang semuanya meningkatkan aktivitas TSC (Feng et
al., 2007). Asam Amino—Selain pelepasan insulin yang bergantung pada glukosa, pemberian
makan juga menyebabkan peningkatan kadar asam amino serum karena pencernaan protein
makanan. Karena asam amino tidak hanya merupakan bahan penyusun protein yang penting
tetapi juga sumber energi dan karbon untuk banyak jalur metabolisme lainnya, aktivasi
mTORC1 terkait erat dengan perubahan konsentrasi asam amino yang disebabkan oleh diet.
Terobosan dalam pemahaman penginderaan asam amino oleh mTORC1 datang dengan
penemuan Rag GTPase heterodimerik sebagai komponen jalur mTORC1 (Kim et al., 2008;

5
Sancak et al., 2008). Rags adalah heterodimer wajib dari RagA atau RagB dengan RagC atau
RagD, dan ditambatkan ke membran lisosom melalui hubungannya dengan kompleks
Ragulator pentamerik yang terdiri dari MP1, p14, p18, HBXIP dan c7ORF59 (Sancak et al.,
2010; Bar- Peled et al., 2012). Stimulasi asam amino mengubah Rags menjadi keadaan terikat
nukleotida aktifnya, memungkinkan mereka untuk mengikat Raptor dan merekrut mTORC1
ke permukaan lisosomal, tempat Rheb juga berada. Oleh karena itu, arsitektur jalur ini
membentuk "gerbang-AND", di mana pensinyalan mTORC1 hanya aktif ketika Rags dan Rheb
diaktifkan, menjelaskan mengapa faktor pertumbuhan dan asam amino diperlukan untuk
aktivasi mTORC1. Terlepas dari wawasan ini, identitas sensor asam amino langsung di hulu
mTORC1 masih sulit dipahami hingga baru-baru ini. Sekarang jelas bahwa mTORC1
merasakan asam amino intra-lisosom dan sitosol melalui mekanisme yang berbeda. Asam
amino di dalam lumen lisosom mengubah keadaan nukleotida Rag melalui mekanisme yang
bergantung pada v-ATPase lisosom, yang berinteraksi dengan kompleks Ragulator-Rag untuk
mempromosikan guanin-aktivitas faktor penukar nukleotida (GEF) Ragulator terhadap
RagA/B (Zoncu et al., 2011; Bar-Peled et al., 2012). Transporter asam amino lisosom
SLC38A9 berinteraksi dengan kompleks Rag-Ragulator-v-ATPase dan diperlukan arginin
untuk mengaktifkan mTORC1, menjadikannya kandidat yang menjanjikan untuk menjadi
sensor asam amino lisosom (Jung et al., 2015; Rebsamen et al. , 2015; Wang et al., 2015).
Sinyal leusin dan arginin sitosolik ke mTORC1 melalui jalur berbeda yang terdiri dari
kompleks GATOR1 dan GATOR2 (Bar-Peled et al., 2013). GATOR1 terdiri dari DEPDC5,
Nprl2 dan Nprl3, dan menghambat pensinyalan mTORC1 dengan bertindak sebagai GAP
untuk RagA/B. Kompleks KICSTOR yang baru diidentifikasi (terdiri dari Kaptin, ITFG2,
c12orf66, dan SZT2) menambatkan GATOR1 ke permukaan lisosom dan diperlukan untuk
kontrol yang tepat dari jalur mTORC1 oleh nutrisi (Wolfson et al., 2017). GATOR2 sebaliknya
adalah kompleks pentamerik yang terdiri dari Mios, WDR24, WDR59, Seh1L dan Sec13, dan
merupakan pengatur positif pensinyalan mTORC1 yang berinteraksi dengan GATOR1 pada
membran lisosom (Bar-Peled et al., 2013). Wawasan penting tentang mekanisme penginderaan
asam amino sitosol datang dengan identifikasi Sestrin2 sebagai protein interaksi GATOR2
yang menghambat pensinyalan mTORC1 di bawah kekurangan asam amino (Chantranupong
et al., 2014; Parmigiani et al., 2014). Analisis biokimia dan struktural selanjutnya menetapkan
bahwa Sestrin2 adalah sensor leusin langsung di hulu mTORC1 yang mengikat dan
menghambat fungsi GATOR2 tanpa adanya leusin, dan berdisosiasi darinya setelah pengikatan
leusin (Saxton et al., 2016a; Wolfson et al., 2016) . Selain itu, afinitas Sestrin2 untuk leusin
menentukan sensitivitas pensinyalan mTORC1 terhadap leusin dalam sel kultur, menunjukkan
bahwa Sestrin2 adalah sensor leusin utama untuk mTORC1 dalam konteks ini. Masih harus
dilihat apakah dan dalam jaringan apa konsentrasi leusin berfluktuasi dalam kisaran yang
relevan untuk dirasakan oleh Sestrin2 in vivo, karena tingkat leusin interstisial atau sitosolik
tidak diketahui. Menariknya, studi lain baru-baru ini menemukan bahwa Sestrin2 diinduksi
secara transkripsi pada kelaparan asam amino yang berkepanjangan melalui faktor transkripsi
yang responsif terhadap stres ATF4 (Ye et al., 2015), menunjukkan bahwa Sestrin2 berfungsi
sebagai sensor leusin akut serta mediator tidak langsung dari kelaparan asam amino yang
berkepanjangan. Arginin sitosol juga mengaktifkan mTORC1 melalui jalur GATOR1/2-Rag
dengan secara langsung mengikat sensor arginin CASTOR1 yang baru diidentifikasi (Sensor
Arginin Seluler untuk mTORC1). Sama seperti Sestrin2, CASTOR1 mengikat dan
menghambat GATOR2 tanpa adanya arginin, dan berdisosiasi pada pengikatan arginin untuk
mengaktifkan aktivasi mTORC1 (Chantranupong et al., 2016; Saxton et al., 2016b). Dengan
demikian, leusin dan arginin merangsang aktivitas mTORC1 setidaknya sebagian dengan
melepaskan inhibitor dari GATOR2, menjadikan GATOR2 sebagai simpul pusat dalam
pensinyalan asam amino ke mTORC1. Namun yang penting, fungsi molekuler GATOR2 dan
mekanisme pengaturan Sestrin2 dan CASTOR1 tidak diketahui.

6
 Beberapa mekanisme tambahan di mana asam amino mengatur pensinyalan mTORC1
juga baru-baru ini dilaporkan, termasuk identifikasi kompleks Folliculin-FNIP2 sebagai GAP
untuk RagC/D yang mengaktifkan mTORC1 dengan adanya asam amino (Petit et al., 2013;
Tsun et al., 2013). Studi lain menemukan bahwa asam amino glutamin, yang digunakan
sebagai nitrogen dan sumber energi dengan memperbanyak sel, mengaktifkan mTORC1 secara
independen dari Rag GTPase melalui keluarga Arf GTPases terkait (Jewell et al., 2015).
Akhirnya, sebuah laporan baru-baru ini menemukan bahwa SPAR polipeptida kecil berasosiasi
dengan kompleks v-ATPase-Ragulator untuk menekan perekrutan mTORC1 ke lisosom,
meskipun bagaimana hal ini terjadi tidak jelas (Matsumoto et al., 2016).

2.4 Konservasi evolusioner dari jalur TOR

Salah satu fitur luar biasa dari jalur TOR adalah konservasinya sebagai pengatur
pertumbuhan utama di hampir semua eukariota. Seperti mamalia, S. cerevisiae juga memiliki
dua kompleks yang mengandung TOR berbeda, TORC1 dan TORC2 (ditinjau dalam Loewith
dan Hall, 2011) serta homolog dari Raptor (Kog1), mLST8 (Lst8), Rictor (Avo3), dan mSin1
(Avo1 ), meskipun beberapa komponen tambahan spesifik untuk ragi atau mamalia.
Selanjutnya ragi TORC1 juga terutama mengontrol pertumbuhan sel dan metabolisme
anabolik, termasuk aktivasi sintesis protein dan penghambatan autophagy, sementara TORC2
ragi terutama berfungsi untuk mengaktifkan kinase keluarga AGC seperti YPK1, homolog
SGK1 mamalia. Seperti halnya mTORC1, ragi TORC1 juga merasakan dan merespons
beragam rangsangan lingkungan, meskipun input spesifik dan komponen pensinyalan hulu
berbeda dalam beberapa hal, seperti yang diharapkan mengingat kondisi lingkungan yang
sangat berbeda yang relevan untuk organisme ini (Gbr. 1). 3A). Misalnya, pensinyalan
reseptor hormon dan faktor pertumbuhan adalah perkembangan khusus untuk organisme
multisel, dan TSC regulator mTORC1 tidak ditemukan di S. cerevisiae. Sebaliknya, ragi
TORC1 tampaknya terutama sensitif terhadap input biosintetik langsung seperti sumber
karbon, nitrogen dan fosfat.
Tidak seperti mamalia, ragi mampu mensintesis semua 20 asam amino, dan kelaparan
asam amino individu seperti leusin atau arginin tidak menghambat pensinyalan TORC1 pada
galur tipe liar. Deprivasi leucine memang menghambat TORC1 dalam leucine-auxotrophs
(Binda et al., 2009), menunjukkan mungkin ada mekanisme untuk menandakan kadar asam
amino ke TORC1, meskipun ini juga bisa disebabkan oleh penginderaan sumber nitrogen yang
terganggu dalam hal ini. konteks. Kompleks Rag GTPases dan GATOR1/2 hadir dalam S.
cerevisiae masing-masing dalam bentuk Gtr1/2 dan kompleks SEACIT/SEACAT (Gbr. 3A,
Panchaud et al., 2009), sedangkan Kompleks EGO ragi adalah homolog struktural Ragulator
yang berinteraksi dengan Gtr1/2 dan kemungkinan memiliki fungsi analog (Powis et al., 2015;
Zhang et al., 2012). Berbeda dengan mamalia, bagaimanapun, asam amino tidak
mempengaruhi lokalisasi TORC1 ragi, yang secara konstitutif terikat pada kompleks Gtr-Ego
pada membran vakuolar (Binda et al., 2009), menunjukkan adanya mekanisme penginderaan
alternatif. Konsisten dengan ini, sensor asam amino mamalia SLC38A9, Sestrin2, dan
CASTOR1 semuanya tidak memiliki homolog yang jelas dalam ragi. Sementara sebagian besar
komponen jalur TORC1 juga dilestarikan dengan baik pada organisme model multiseluler
lainnya, sensor asam amino langsung tampaknya telah menyimpang (Gbr. 3B). Misalnya,
meskipun SLC38A9 dan CASTOR1 dilestarikan di banyak garis keturunan metazoa, keduanya
tidak ada di D. melanogaster, menunjukkan bahwa organisme ini tidak merasakan arginin atau
melakukannya melalui mekanisme yang berbeda. Baik D. melanogaster dan C. elegans
memiliki homolog Sestrin, dan dmSestrin juga mengikat leusin (Wolfson et al., 2016).
Menariknya, baik ceSestrin dan dmSestrin mengandung perbedaan halus dalam kantong
pengikat leusin mereka yang diperkirakan akan mengurangi afinitasnya terhadap leusin relatif

7
terhadap Sestrin2 manusia, kemungkinan memungkinkan penginderaan tingkat leusin yang
relevan secara fisiologis dalam organisme ini (Saxton et al., 2016a)

2.5 Peran fisiologis mTOR

Perubahan sumber energi yang tersedia setelah puasa atau makan membutuhkan
perubahan metabolisme seluruh tubuh untuk mempertahankan homeostasis. Di bawah
kelaparan, tingkat nutrisi dan faktor pertumbuhan turun, menginduksi keadaan katabolik di
mana simpanan energi dimobilisasi untuk mempertahankan fungsi esensial (Gbr. 4A).
Alternatifnya, tingkat nutrisi yang tinggi dalam keadaan makan memicu peralihan menuju
pertumbuhan anabolik dan penyimpanan energi. Konsisten dengan perannya dalam
mengoordinasikan metabolisme anabolik dan katabolik pada tingkat sel, studi fisiologis pada
tikus telah mengungkapkan bahwa pensinyalan mTOR juga penting untuk regulasi
metabolisme yang tepat pada tingkat organisme. Namun yang penting, aktivasi mTOR
konstitutif juga dikaitkan dengan hasil fisiologis negatif, yang menunjukkan bahwa modulasi
pensinyalan mTOR yang tepat sebagai respons terhadap perubahan kondisi lingkungan sangat
penting.
• homeostatis glukosa
Ketika kadar glukosa darah turun, hati mengaktifkan respon kompensasi yang
melibatkan induksi autophagy, glukoneogenesis, dan pelepasan sumber energi alternatif dalam
bentuk badan keton. Beberapa bukti menunjukkan bahwa regulasi mTORC1 pensinyalan
sangat penting untuk respons hati terhadap diet. Misalnya, tikus dengan penghapusan TSC1
spesifik hati, yang telah mengaktifkan pensinyalan mTORC1 secara konstitutif, gagal
menghasilkan badan keton selama puasa karena penekanan PPARa yang bergantung pada
mTORC1, aktivator transkripsi gen ketogenik (Sengupta et al., 2010). Pentingnya
menghambat mTORC1 di hati selama puasa juga telah diamati melalui tikus generasi dengan
knock-in sementara tubuh dari alel RagA (RagAGTP) yang aktif secara konstitutif. Meskipun
mereka berkembang secara normal, tikus ini mati dengan cepat setelah lahir karena
ketidakmampuan untuk mempertahankan kadar glukosa darah selama periode puasa perinatal
(Efeyan et al., 2013). Analisis lebih lanjut dari tikus ini mengungkapkan bahwa aktivitas
mTORC1 yang berkelanjutan selama periode puasa ini mencegah induksi autophagy di hati,
yang sangat penting untuk memasok asam amino bebas untuk glukoneogenesis. Akibatnya,
tikus RagAGTP menampilkan hipoglikemia yang fatal sebagai respons terhadap puasa,
konsisten dengan fenotip serupa pada tikus yang kekurangan autophagy (Kuma et al., 2004).
Pensinyalan mTORC1 juga memainkan peran penting dalam homeostasis glukosa dengan
mengatur fungsi sel β pankreas. Studi menggunakan tikus β-sel spesifik TSC2 knock out (β-
TSC2KO) mengungkapkan bahwa hiperaktivasi mTORC1 memiliki efek bifasik pada fungsi
sel β, dengan tikus muda β-TSC2KO menunjukkan peningkatan massa sel β, kadar insulin yang
lebih tinggi, dan peningkatan glukosa toleransi (Mori et al., 2009; Shigeyama et al., 2008).
Efek ini dibalik pada tikus β-TSC2KO yang lebih tua, yang lebih cepat mengembangkan massa
sel β yang berkurang, kadar insulin yang lebih rendah, dan hiperglikemia. Dengan demikian,
aktivitas mTORC1 yang tinggi di pankreas pada awalnya bermanfaat untuk toleransi glukosa,
tetapi juga menyebabkan penurunan fungsi sel β yang lebih cepat dari waktu ke waktu
Efek bifasik dari pensinyalan mTORC1 ini mengingatkan pada perkembangan diabetes
yang diinduksi diet (tipe 2), di mana sel β pankreas awalnya berkembang dan menghasilkan
lebih banyak insulin untuk mengkompensasi peningkatan beban glikemik, tetapi akhirnya
mengalami kelelahan. Memang, tikus yang diobati dengan obesitas atau diet tinggi lemak
(HFD) memiliki pensinyalan mTORC1 yang tinggi di banyak jaringan, termasuk pankreas,
kemungkinan karena peningkatan kadar insulin yang bersirkulasi, asam amino, dan sitokin
proinflamasi (Khamzina et al., 2005). Peningkatan pensinyalan mTORC1 dalam jaringan ini
juga berkontribusi terhadap resistensi insulin perifer karena peningkatan penghambatan umpan

8
balik pensinyalan insulin/PI3K/Akt, yang dicegah pada tikus yang kekurangan S6K1/2 (Gbr.
4D, Um et al., 2004). Bahwa hiperaktivasi mTORC1 dari hasil manipulasi genetik atau diet
pada resistensi insulin telah membuat banyak orang berspekulasi bahwa penghambat mTORC1
dapat meningkatkan toleransi glukosa dan melindungi dari diabetes tipe 2. Paradoksnya,
bagaimanapun, penghambatan farmakologis kronis mTORC1 menggunakan rapamycin
memiliki efek sebaliknya, menyebabkan resistensi insulin dan gangguan homeostasis glukosa
(Gambar 4D, Cunningham et al., 2007). Hasil ini dijelaskan setidaknya sebagian oleh fakta
bahwa pengobatan rapamycin yang berkepanjangan juga menghambat pensinyalan mTORC2
in vivo (Lamming et al., 2012). Karena mTORC2 secara langsung mengaktifkan Akt hilir
pensinyalan insulin/PI3K, tidak mengherankan bahwa penghambatan mTORC2 mengganggu
respons fisiologis terhadap insulin. Konsisten dengan ini, tikus knockout Rictor spesifik hati
memiliki resistensi insulin yang parah dan intoleransi glukosa (Hagiwara et al., 2012; Yuan et
al., 2012), seperti halnya tikus yang kekurangan Rictor di otot atau lemak (Kumar et al., 2008
& 2010).
• Massa dan fungsi otot
Meskipun pentingnya pensinyalan mTOR dalam mempromosikan pertumbuhan otot
sangat dihargai oleh ilmuwan dasar dan binaragawan, mekanisme yang mendasari proses ini
masih kurang dipahami, sebagian karena kesulitan memanipulasi miosit multinukleat secara
genetik in vivo. Meskipun demikian, studi awal tentang pensinyalan mTOR di otot
mengungkapkan bahwa aktivasi mTORC1 dikaitkan dengan hipertrofi otot (Bodine et al.,
2001) dan bahwa IGF-1 dan leusin meningkatkan hipertrofi melalui aktivasi pensinyalan
mTORC1 dalam sel yang dikultur dan pada tikus ( Anthony et al., 2000; Rommel et al., 2001).
Selain itu, tikus knockout Raptor spesifik otot menampilkan atrofi otot yang parah dan
penurunan berat badan yang menyebabkan kematian dini (Bentzinger et al., 2008). Fenotip
dramatis ini juga diamati pada tikus knockout mTOR spesifik otot, tetapi bukan tikus yang
kekurangan Rictor, menunjukkan bahwa fungsi kritis mTOR dalam otot rangka adalah melalui
mTORC1 (Bentzinger et al., 2008; Risson et al., 2009). Sementara aktivasi akut pensinyalan
mTORC1 in vivo meningkatkan hipertrofi otot dalam jangka pendek (Bodine et al., 2001)
aktivasi mTORC1 kronis pada otot melalui hilangnya TSC1 juga menyebabkan atrofi otot yang
parah, massa tubuh rendah, dan kematian dini, terutama karena kurangnya ketidakmampuan
untuk menginduksi autophagy pada jaringan ini (Castets et al, 2013). Mempertimbangkan
bahwa pergantian jaringan tua atau rusak memainkan peran penting dalam pertumbuhan otot,
hasil ini menunjukkan bahwa periode aktivitas mTORC1 tinggi dan rendah bergantian, seperti
yang terjadi dengan siklus makan dan puasa normal, sangat penting untuk menjaga kesehatan
dan fungsi otot yang optimal Kumpulan bukti menunjukkan bahwa kontraksi otot juga
mengaktifkan mTORC1 di otot; berpotensi menjelaskan setidaknya sebagian bagaimana
peningkatan penggunaan otot mendorong anabolisme (Baar dan Esser, 1999). Sebuah studi
baru-baru ini menemukan bahwa rangsangan mekanis mengaktifkan pensinyalan mTORC1
dengan menginduksi fosforilasi Raptor (Frey et al., 2014), meskipun bagaimana hal ini terjadi
tidak jelas. Memahami bagaimana mTORC1 dapat mengintegrasikan sinyal yang berbeda dari
insulin, asam amino, dan kekuatan mekanik dalam otot akan menjadi tujuan penting ke depan
dan dapat menginformasikan pendekatan untuk mengobati gangguan pengecilan otot seperti
yang terkait dengan tidak digunakan dan penuaan
• Adipogenesis dan homeostasis lipid
Banyak penelitian selama dua dekade terakhir juga mengungkapkan peran mTOR
dalam mempromosikan pembentukan adiposit dan sintesis lipid sebagai respons terhadap
pemberian makan dan insulin (Gambar 4D, diulas dalam Lamming dan Sabatini, 2013).
mTORC1 mempromosikan adipogenesis dan peningkatan lipogenesis dalam kultur sel dan in
vivo , konsisten dengan tikus raptor spesifik adiposit (Ad-RapKO) yang menampilkan
lipodistrofi dan steatosis hati (Lee et al., 2016). Namun, peran mTORC1 dalam adiposa

9
diperumit oleh fakta bahwa tikus Ad-RapKO juga resisten terhadap diet yang menyebabkan
obesitas karena berkurangnya adipogenesis, menunjukkan bahwa penghambatan mTORC1
pada jaringan ini dapat memiliki efek positif dan negatif (Polak et al., 2008 ). Demikian pula,
hilangnya aktivitas mTORC2 dalam adiposit terutama menghasilkan resistensi insulin karena
berkurangnya aktivitas Akt (Kumar et al., 2010), tetapi juga dalam sintesis lipid yang lebih
sedikit karena berkurangnya ekspresi ChREBPβ, faktor transkripsi utama untuk gen lipogenik.
(Tang et al., 2016). mTORC2 juga telah terbukti mempromosikan lipogenesis di hati,
menunjukkan peran umum mTORC2 dalam sintesis lipid (Hagiwara et al., 2012; Yuan et al.,
2012) Dengan demikian, mTORC1 dan mTORC2 memainkan peran penting dalam berbagai
aspek fungsi adiposit dan metabolisme lipid.
• Fakta Imun
Studi awal tentang sifat biologis rapamycin mengungkapkan peran dalam memblokir
proliferasi limfosit, yang mengarah pada persetujuan klinis akhirnya sebagai imunosupresan
untuk transplantasi ginjal pada tahun 1999. Tindakan imunosupresif rapamycin sebagian besar
dikaitkan dengan kemampuannya untuk memblokir aktivasi sel-T, sebuah aspek kunci dari
respon imun adaptif (diulas dalam Powell et al., 2012). Secara mekanis, mTORC1
memfasilitasi peralihan menuju metabolisme anabolik yang diperlukan untuk aktivasi dan
ekspansi sel-T, dan terletak di hilir beberapa sinyal pengaktif yang ada di lingkungan mikro
imun termasuk IL-2, reseptor CD28 co-stimulator, serta asam amino. Menariknya,
penghambatan mTORC1 selama presentasi antigen menghasilkan alergi sel-T, di mana sel
gagal diaktifkan setelah paparan antigen berikutnya (Zheng et al., 2007). Karena induksi alergi
sel-T melalui penipisan nutrisi atau sinyal penghambat lainnya adalah mekanisme yang
digunakan oleh tumor dalam penghindaran kekebalan, data ini menunjukkan bahwa
mempromosikan aktivasi mTORC1 dalam sel kekebalan sebenarnya dapat bermanfaat dalam
beberapa konteks, seperti imunoterapi kanker. Studi terbaru juga menemukan peran mTORC1
dalam mempengaruhi pematangan sel-T, karena rapamycin mempromosikan diferensiasi dan
perluasan CD4 + FoxP3 + sel T regulator dan sel T memori CD8 + sambil menekan populasi
sel T efektor CD8 + dan CD4 + (Araki et al., 2009; Haxhanisto et al., 2008), konsisten dengan
profil metabolisme dari tipe sel ini. Memang, sebuah laporan baru-baru ini menemukan bahwa
selama pembelahan asimetris sel T CD8 + yang diaktifkan, aktivitas mTORC1 yang tinggi
tinggi pada sel anak "seperti efektor", tetapi rendah pada sel anak "mirip memori", karena
partisi asimetris pengangkut asam amino (Polizzi et al., 2016; Verbist et al., 2016). Dengan
demikian, peran pensinyalan mTOR dalam sistem kekebalan jelas lebih kompleks dari yang
diperkirakan sebelumnya. Mengingat penggunaan klinis inhibitor mTOR saat ini baik dalam
imunosupresi dan kanker, pemahaman yang lebih komprehensif tentang bagaimana
pensinyalan mTOR memengaruhi keseluruhan respons imun in vivo akan menjadi tujuan
penting ke depan.

2.6 mTOR dalam Kanker

Seperti dibahas di atas, mTORC1 berfungsi sebagai efektor hilir untuk banyak jalur
onkogenik yang sering bermutasi termasuk jalur PI3K/Akt serta jalur Ras/Raf/Mek/Erk
(MAPK), menghasilkan hiperaktivasi mTORC1 dalam persentase kanker manusia yang tinggi
( Gambar 5A). Selain itu, penekan tumor umum TP53 dan LKB1 adalah pengatur negatif
mTORC1 hulu TSC1 dan TSC2, yang juga merupakan penekan tumor yang awalnya
diidentifikasi melalui analisis genetik dari sindrom kanker familial TSC. Beberapa komponen
input penginderaan nutrisi ke mTORC1 juga telah terlibat dalam perkembangan kanker,
termasuk ketiga subunit kompleks GATOR1, yang bermutasi dengan frekuensi rendah pada
glioblastoma (Bar-Peled et al., 2013), serta RagC, yang baru-baru ini ditemukan bermutasi
pada frekuensi tinggi (~18%) pada limfoma folikel (Okosun et al., 2015). Selain itu, mutasi
pada folliculin penyandi gen (FLCN) adalah lesi penyebab pada sindrom kanker herediter Birt-

10
Hogg-Dube (Nickerson et al., 2002), yang bermanifestasi mirip dengan TSC. Akhirnya, mutasi
pada MTOR itu sendiri juga ditemukan dalam berbagai subtipe kanker, konsisten dengan peran
mTOR dalam tumorigenesis (Grabiner et al., 2014; Sato et al., 2010). Pensinyalan mTORC2
juga terlibat dalam kanker sebagian besar karena perannya dalam mengaktifkan Akt, yang
mendorong proses pro-proliferatif seperti pengambilan glukosa dan glikolisis sambil juga
menghambat apoptosis. Memang, setidaknya beberapa tumor yang digerakkan oleh PI3K/Akt
tampaknya bergantung pada aktivitas mTORC2, karena Rictor sangat penting dalam model
tikus kanker prostat yang didorong oleh hilangnya PTEN, serta pada jalur sel kanker prostat
manusia yang kekurangan PTEN (Guertin et al., 2009; Hietakangas et al., 2008). Sementara
banyak proses yang digerakkan oleh mTORC1 kemungkinan berkontribusi pada
tumorigenesis, program translasi yang diprakarsai oleh fosforilasi 4EBP kemungkinan adalah
yang paling kritis, setidaknya pada model tikus dari kanker prostat yang digerakkan oleh Akt
dan limfoma sel-T (Hsieh et al., 2010 & 2012). Konsisten dengan ini, berbagai lini sel kanker
yang digerakkan oleh Akt dan Erk bergantung pada fosforilasi 4EBP, dan rasio ekspresi 4EBP
terhadap eIF4E berkorelasi baik dengan sensitivitasnya terhadap penghambat mTOR (Alain et
al., 2012; She et al., 2010).
Inhibitor mTOR pertama yang disetujui untuk digunakan pada kanker adalah kelas
turunan rapamycin yang dikenal sebagai "rapalogs". Rapalog temsirolimus (Pfizer) pertama
kali disetujui untuk pengobatan karsinoma sel ginjal lanjut pada tahun 2007, diikuti oleh
everolimus (Novartis) pada tahun 2009. Meskipun sejumlah kecil "penanggap luar biasa" telah
dilaporkan, rapalog ini kurang berhasil di klinik. dari yang diantisipasi dari model kanker pra-
klinis. Beberapa penjelasan untuk kurangnya kemanjuran ini telah disarankan. Yang pertama
datang dengan kesadaran bahwa, sebagai penghambat alosterik, rapalog memblokir fosforilasi
beberapa tetapi tidak semua substrat mTORC1 (Gbr. 5B, Choo et al., 2008; Feldman et al.,
2009; Kang et al., 2013; Thoreen et al., 2009). Secara khusus, fosforilasi 4EBP sebagian besar
tidak sensitif terhadap rapamycin. Kedua, menghambat mTORC1 melepaskan umpan balik
negatif pada pensinyalan insulin/PI3K/Akt, dan karenanya secara paradoks meningkatkan
kelangsungan hidup sel dan mencegah apoptosis dalam beberapa konteks. Memang,
peningkatan pensinyalan Akt telah diamati dalam biopsi pasien kanker setelah pengobatan
everolimus, dan dapat membantu menjelaskan mengapa rapalog sebagian besar memiliki efek
sitostatik, tetapi tidak sitotoksik, pada tumor (Tabernero et al., 2008). Akhirnya, penghambatan
mTORC1 juga menginduksi autophagy, yang dapat membantu menjaga kelangsungan hidup
sel kanker dengan vaskularisasi buruk, lingkungan mikro yang miskin nutrisi seperti pada
tumor pankreas. Memang, penghambatan mTORC1 juga mendorong makropinositosis, di
mana protein ekstraseluler diinternalisasi dan terdegradasi untuk menyediakan asam amino
untuk tumor yang kekurangan nutrisi (Palm et al., 2015). Data ini menunjukkan bahwa
menggabungkan rapalog dengan inhibitor autophagy dapat meningkatkan kemanjuran,
konsisten dengan uji klinis fase 1 baru-baru ini menggunakan temsirolomus dan
hydrochloroquine inhibitor autophagy pada pasien melanoma, yang menunjukkan peningkatan
dibandingkan temsirolomus saja (Rangwala et al., 2014).
Untuk mengatasi beberapa kelemahan dari rapalog, “generasi kedua,” penghambat
katalitik kompetitif ATP terhadap mTOR juga telah dikembangkan dan sekarang sedang dalam
uji klinis. Tidak seperti rapamycin, senyawa ini secara langsung menghambat aktivitas
katalitik mTOR dan karenanya sepenuhnya menekan mTORC1 dan mTORC2 (Gbr. 5B),
menjadikannya lebih efektif daripada rapalog dalam berbagai model kanker praklinis.
Meskipun penghambat mTOR generasi kedua ini awalnya menekan pensinyalan Akt karena
penghambatan mTORC2, pelepasan umpan balik negatif pada pensinyalan Insulin/PI3K
akhirnya mengatasi blokade ini dan Akt diaktifkan kembali setelah pengobatan jangka panjang
(Rodrik-Outmezguine et al., 2011) . Salah satu solusi yang mungkin untuk masalah ini adalah
penggunaan inhibitor PI3K/mTOR ganda, yang menghambat domain katalitik yang terkait erat

11
dari PI3K dan mTOR, sehingga lebih sepenuhnya memblokir fosforilasi Akt dan 4EBP (Gbr.
5B). Inhibitor ini juga telah menunjukkan beberapa janji dalam data uji klinis praklinis dan
awal, tetapi telah menimbulkan kekhawatiran atas toksisitas yang membatasi dosis. Kasus-
kasus di mana rapalog paling sukses hingga saat ini umumnya melibatkan mutasi pada jalur
mTOR itu sendiri, seperti di TSC1 atau MTOR (Iyer et al., 2012; Wagle et al., 2014a). Bahkan
dalam kasus ini, respons awal yang luar biasa telah diikuti oleh mutasi tambahan pada domain
kinase atau FRB dari MTOR, yang mengarah ke resistensi yang didapat (Wagle et al., 2014b).
Salah satu cara kreatif mengatasi resistensi mutasi tersebut mungkin dengan inhibitor mTOR
"generasi ketiga" yang baru-baru ini dijelaskan yang disebut "RapaLink," di mana inhibitor
mTOR ATP-kompetitif terkait secara kimiawi dengan rapamycin, memungkinkan
penghambatan mutan mTOR yang resisten terhadap MLN0128 atau rapamycin saja (Rodrik-
Outmezguine et al., 2016).

12
 BAB III
PENUTUP

Sekarang jelas bahwa jalur mTOR memainkan peran sentral dalam merasakan kondisi
lingkungan dan mengatur hampir semua aspek metabolisme baik pada tingkat seluler maupun
organisme. Hanya dalam beberapa tahun terakhir, banyak wawasan baru tentang fungsi dan
regulasi mTOR telah dijelaskan, dan studi genetik dan farmakologis yang ekstensif pada tikus
telah meningkatkan pemahaman kita tentang bagaimana disfungsi mTOR berkontribusi
terhadap penyakit. Sementara banyak input ke mTORC1 sekarang telah diidentifikasi dan
mekanisme penginderaannya dikarakterisasi, pemahaman terintegrasi tentang kepentingan
relatif dari sinyal-sinyal ini dan konteks di mana mereka penting sebagian besar masih belum
jelas. Sebagai contoh, tetap misterius masukan mana ke kompleks TSC yang dominan dan
bagaimana hal ini bergantung pada konteks fisiologis. Pertanyaan serupa ada untuk
penginderaan nutrisi oleh Rag GTPase, khususnya mengenai tujuan penginderaan asam amino
lisosom dan sitosol, serta jaringan di mana sensor nutrisi seperti Sestrin2, CASTOR1, dan
SLC38A9 paling penting. Wawasan seperti itu kemungkinan akan membutuhkan studi
biokimia yang lebih dalam dari kompleks ini secara in vitro serta model tikus yang lebih baik
yang memungkinkan gangguan dan pemantauan yang lebih bernuansa dari sensor ini secara in
vivo.
Namun, fokus utama penelitian mTOR ke depan adalah untuk membahas apakah
wawasan molekuler ini dapat meningkatkan penargetan terapeutik mTOR di klinik. Meskipun
rapalog dan penghambat mTOR katalitik telah berhasil dalam konteks imunosupresi dan
sebagian kecil jenis kanker, keterbatasan yang jelas telah muncul yang membatasi
kegunaannya. Secara khusus, mengingat fungsi kritis mTOR di sebagian besar jaringan
manusia, penghambatan katalitik lengkap menyebabkan toksisitas pembatas dosis yang parah,
sementara rapalog juga mengalami kekurangan yang terkait dengan kurangnya spesifisitas
jaringan dan gangguan mTORC2 yang tidak diinginkan. Pekerjaan di masa depan harus fokus
pada pengembangan terapi penargetan mTOR di luar dua modalitas ini, seperti inhibitor
spesifik mTORC1 untuk digunakan pada diabetes, degenerasi saraf, dan perpanjangan rentang
hidup, atau agonis mTORC1 spesifik jaringan untuk digunakan pada penyakit pemborosan
otot. dan imunoterapi. Pendekatan semacam itu kemungkinan akan membutuhkan lebih dari
sekadar menargetkan mTOR secara langsung untuk mengembangkan senyawa yang
memodulasi reseptor spesifik jaringan atau molekul pensinyalan di hulu mTOR, seperti sensor
asam amino Sestrin2 dan CASTOR1 yang baru-baru ini dikarakterisasi, yang berisi kantong
pengikat molekul kecil dan secara khusus mengatur mTORC1 . Pada akhirnya, wawasan
semacam itu memungkinkan penargetan rasional pensinyalan mTOR untuk membuka potensi
terapeutik penuh dari jalur luar biasa ini.

13
DAFTAR PUSTAKA

Alain T, Morita M, Fonseca BD, Yanagiya A, Siddiqui N, Bhat M, Zammit D, Marcus V,

Metrakos P, Voyer LA, et al. eIF4E/4E-BP ratio predicts the efficacy of mTOR targeted
therapies. Cancer research. 2012; 72:6468–6476. [PubMed: 23100465]
Anthony JC, Yoshizawa F, Anthony TG, Vary TC, Jefferson LS, Kimball SR. Leucine
stimulates translation initiation in skeletal muscle of postabsorptive rats via a
rapamycin-sensitive pathway. The Journal of nutrition. 2000; 130:2413–2419.
[PubMed: 11015466]
Araki K, Turner AP, Shaffer VO, Gangappa S, Keller SA, Bachmann MF, Larsen CP, Ahmed
R. mTOR regulates memory CD8 T-cell differentiation. Nature. 2009; 460:108–112.
[PubMed: 19543266]
Arriola Apelo SI, Neuman JC, Baar EL, Syed FA, Cummings NE, Brar HK, Pumper CP,
Kimple ME, Lamming DW. Alternative rapamycin treatment regimens mitigate the
impact of rapamycin on glucose homeostasis and the immune system. Aging cell. 2016;
15:28–38. [PubMed: 26463117]
Aylett CH, Sauer E, Imseng S, Boehringer D, Hall MN, Ban N, Maier T. Architecture of human
mTOR complex 1. Science. 2016; 351:48–52. [PubMed: 26678875]
Baar K, Esser K. Phosphorylation of p70(S6k) correlates with increased skeletal muscle mass
following resistance exercise. The American journal of physiology. 1999; 276:C120–
127. [PubMed: 9886927]
Bar-Peled L, Chantranupong L, Cherniack AD, Chen WW, Ottina KA, Grabiner BC, Spear
ED, Carter SL, Meyerson M, Sabatini DM. A Tumor suppressor complex with GAP
activity for the Rag GTPases that signal amino acid sufficiency to mTORC1. Science.
2013; 340:1100–1106. [PubMed: 23723238]
Bar-Peled L, Schweitzer LD, Zoncu R, Sabatini DM. Ragulator is a GEF for the rag GTPases
that signal amino acid levels to mTORC1. Cell. 2012; 150:1196–1208. [PubMed:
22980980]
Baretic D, Berndt A, Ohashi Y, Johnson CM, Williams RL. Tor forms a dimer through an N
terminal helical solenoid with a complex topology. Nature communications. 2016;
7:11016.
Basel-Vanagaite L, Hershkovitz T, Heyman E, Raspall-Chaure M, Kakar N, Smirin-Yosef P,
Vila- Pueyo M, Kornreich L, Thiele H, Bode H, et al. Biallelic SZT2 mutations cause
infantile encephalopathy with epilepsy and dysmorphic corpus callosum. American
journal of human genetics. 2013; 93:524–529. [PubMed: 23932106]

14