)
Steenis) TERHADAP KADAR HIGH DENSITY LIPOPROTEIN PADA
TIKUS HIPERKOLESTEROLEMIA
PROPOSAL SKRIPSI
Oleh :
NUR WAFA HIDAYASARI
193110084
MENYETUJUI
Komisi Pembimbing
Pembimbing I Pembimbing II
ii
DAFTAR ISI
JUDUL....................................................................................................i
HALAMAN PERSETUJUAN................................................................ii
DAFTAR ISI...........................................................................................iii
BAB I. PENDAHULUAN.....................................................................1
A. Latar Belakang............................................................................1
B. Rumusan Masalah.......................................................................4
C. Tujuan Penelitian.........................................................................4
D. Manfaat Penelitian.......................................................................4
E. Hipotesis......................................................................................5
A. Hiperkolesterolemia.................................................................... 6
1. Pengertian.............................................................................. 6
2. Klasifikasi.............................................................................. 7
3. Etiologi.................................................................................. 8
4. Patofisiologi.......................................................................... 9
5. Faktor Resiko........................................................................ 10
6. Gejala Klinis.......................................................................... 11
7. Pengobatan Hiperkolesterolemia........................................... 12
a. Pengobatan Farmakologi................................................. 12
b. Pengobatan Non Farmakologi......................................... 14
B. Kolesterol.................................................................................... 14
1. Pengertian.............................................................................. 14
2. Klasifikasi.............................................................................. 15
a. Kilomikron...................................................................... 16
b. Very Low Density Lipoprotein (VLDL).......................... 16
c. Low Density Lipoprotein (LDL)..................................... 16
d. Trigliserida...................................................................... 17
e. High Density Lipoprotein (HDL).................................... 17
iii
3. Proses kolesterol dalam darah............................................... 18
C. Tanaman Binahong (Anredera cordifolia).................................. 19
1. Klasifikasi Tanaman Binahong (Anredera cordifolia).......... 19
2. Nama Daerah......................................................................... 19
3. Nama Asing........................................................................... 19
4. Habitat................................................................................... 20
5. Morfologi.............................................................................. 20
D. Metabolit Sekunder..................................................................... 21
1. Alkaloid................................................................................. 21
2. Flavonoid............................................................................... 21
3. Fenol...................................................................................... 22
4. Saponin.................................................................................. 22
5. Terpenoid.............................................................................. 23
E. Simplisia...................................................................................... 24
1. Pengertian.............................................................................. 24
2. Klasifikasi Simplisia............................................................. 25
3. Tahapan Pembuatan Simplisia.............................................. 25
a. Pengumpulan Bahan Baku.............................................. 25
b. Sortasi Basah................................................................... 25
c. Pencucian........................................................................ 26
d. Perajangan....................................................................... 26
e. Pengeringan..................................................................... 26
f. Sortasi Kering.................................................................. 27
g. Penyimpanan................................................................... 27
h. Suhu Penyimpanan.......................................................... 27
i. Tanda dan Penyimpanan................................................. 27
j. Benda Asing.................................................................... 28
F. Standarisasi Simplisia.................................................................28
1. Parameter Spesifik.................................................................28
2. Parameter Non Spesifik.........................................................28
G. Ekstrak......................................................................................... 29
1. Pengertian Ekstrak................................................................. 29
iv
2. Jenis-jenis Ekstrak................................................................. 29
H. Ekstraksi...................................................................................... 30
1. Pengertian.............................................................................. 30
2. Jenis-jenis Ekstraksi.............................................................. 31
a. Ekstraksi Cara Dingin..................................................... 31
1) Maserasi..................................................................... 31
2) Perkolasi.................................................................... 32
b. Ekstraksi Cara Panas....................................................... 32
1) Dekok ....................................................................... 32
2) Digesti....................................................................... 32
3) Infusa ........................................................................ 32
4) Reflux ....................................................................... 32
5) Soxhlet ...................................................................... 33
c. Destilasi Uap................................................................... 33
I. Tikus Putih (Rattus norvegicus).................................................. 34
J. Rancangan Penelitian.................................................................. 35
1. Prinsip Penelitian................................................................... 35
2. Kerangka Teori...................................................................... 36
3. Kerangka Konsep.................................................................. 36
4. Variabel Penelitian................................................................ 37
5. Definisi Operasional ............................................................. 37
v
K. Persiapan Sampel .................................................................... 48
L. Penetapan Kadar HDL ............................................................ 49
M. Analisa Data............................................................................. 49
Daftar Pustaka....................................................................................... 51
Lampiran................................................................................................ 57
vi
BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
Penyakit kardiovaskular merupakan suatu proses inflamasi yang
berlangsung komplek dan ditandai dengan adanya peningkatan inflamasi dan
akumulasi lipid pada dinding vaskuler. Penyakit jantung koroner, hipertensi,
diabetes melitus dan hiperkolesterolemia merupakan salah satu faktor risiko
penyakit kardiovaskuler. Hiperkolesterolemia terjadi jika konsumsi buah dan
sayur rendah, obesitas, aktivitas rendah, strees, merokok penggunaan alkohol
dan juga dapat terjadi jika asupan makanan tidak sehat seperti mengkonsumi
junkfood jika dikonsumsi secara terus menerus mengakibatkan kolesterol
meningkat secara berlebih. Ketika kadar kolesterol total naik, kadar kolesterol
LDL naik, dan kadar kolesterol HDL turun, kondisi ini dikenal sebagai
sebagai hiperkolesterolemia (1),(2),(3)
Hiperkolesterolemia merupakan suatu kondisi dimana kadar kolesterol
pada darah meningkat melebihi kadar normal yaitu diatas 200 mg/dl melalui
pengukuran kolesterol total darah perifer menggunakan reagen kolesterol.
Metabolisme kolesterol dikatakan normal apabila jumlah kolesterol sesuai
dengan kebutuhan dan tidak melebihi jumlah yang dibutuhkan (4)
Berdasarkan data World Health Organitation (WHO) pada tahun 2018,
tercatat hiperkolesterolemia lebih dari 160 juta penduduk dunia memiliki
kadar kolesterol total > 200 mg/dl yang termasuk kategori cukup tinggi dan
lebih dari 34 juta penduduk dewasa Amerika memiliki kadar kolesterol total >
240mg/dl yang termasuk tinggi dan membutuhkan terapi (5)
Hasil Riset Kesehatan Dasar 2013 ada 35,9 % dari penduduk Indonesia
yang berusia > 15 tahun dengan kadar kolesterol abnormal yang berisiko
2
B. Rumusan Masalah
Bagaimana aktivitas infusa daun binahong (Anredera cordifolia) terhadap
kadar High Density Lipoprotein (HDL) pada tikus hiperkolesterolemia?
4
C. Tujuan Penelitian
1. Tujuan Umum
Untuk menentukkan aktivitas daun binahong (Anredera cordifolia)
terhadap kadar High Density Lipoprotein (HDL) pada tikus
hiperkolesterolemia
2. Tujuan Khusus
a. Untuk menentukkan kadar High Density Lipoprotein (HDL) pada tikus
putih hiperkolesterolemia
b. Untuk menetukkan konsentrasi efektif infusa daun binahong
(Anredera cordifolia) terhadap kadar High Density Lipoprotein (HDL)
pada tikus hiperkolesterolemia
D. Manfaat Penelitian
1. Manfaat Bagi Perguruan Tinggi
Penelitian ini diharapkan dapat dijadikan sebagai bahan rujukan atau
acuan lebih lanjut untuk mahasiswa farmasi khususnya dibidang bahan
alam dengan memanfaatkan kandungan yang terdapat didalam daun
binahong sebagai obat yang dapat mengatasi kolesterol
2. Manfaat Bagi Peneliti
Penelitian ini dapat dijadikan sebagai informasi ilmiah dalam
pengembangan tanaman obat khusunya tanaman daun binahong yang
dapat digunakan untuk pengobatan kolesterol
3. Manfaat Bagi Umum
Penelitian ini dapat memberikan informasi dan pengetahuan bagi
masyarakat untuk mengobati penyakit hiperkolesterolemia menggunakan
daun binahong
E. Hipotesis
TINJAUAN PUSTAKA
A. Hiperkolesterolemia
1. Pengertian
Hiperkolesterolemia adalah peningkatan kadar kolesterol di dalam
darah melebihi batas yang diperlukan oleh tubuh. Peningkatan kadar
kolesterol dalam darah merupakan salah satu faktor penting perkembangan
arteri koroner dan sangat berperan terhadap gangguan kardiovaskular yang
disebut aterosklerosis. Hiperkolesterolemia terjadi karena dipengaruhi oleh
beberapa faktor yaitu faktor genetik, jenis kelamin, umur dan diet.
Seseorang dikatakan menderita hiperkolesterolemia bila kadar kolesterol
total plasma melebihi keadaan normal yaitu > 240 mg/dL (16)
Hiperkolesterolemia dapat terjadi karena dipengaruhi oleh beberapa
faktor yaitu faktor genetik, jenis kelamin, umur, diet, hipertensi dan
merokok. Semakin tinggi kolesterol semakin tinggi pula terjadinya
hipertensi. Dan semakin banyak jumlah rokok yang dihisap perharinya,
maka total kolesterol juga meningkat. Ketika kadar kolesterol dalam darah
meningkat merupakan salah satu faktor penting perkembangan penyakit
arteri koroner dan sangat berperan terhadap gangguan kardiovaskular yang
disebut aterosklerosis (17),(18)
Aterosklerosis adalah suatu perubahan yang ditandai dengan adanya
penebalan dinding pembuluh areri karena adanya penumpukan kolesterol
di tunika intima pembuluh darah. Aterosklerosis dapat terjadi perubahan
pada dinding arteri yang memiliki karakteristik akumulasi lipid
ekstraseluler, akumulasi leukosit, terbentuknya foam cell, migrasi dan
proliferasi miosit, serta deposit materi ekstraseluler yang dipicu oleh
berbagai pathogenesis yang bersifat kronik progresif, fokal atau difus
serta memiliki manifestasi akut maupun kronis yang memicu penebalan
dinding arteri serta kekakuan otot (19)
7
2. Klasifikasi
Klasifikasi hiperkolesterolemia sebagai berikut :
a. Hiperkolesterolemia Primer
Suatu penyakit yang menyebabkan seseorang mewarisi kelainan
gen pembentuk reseptor lipoprotein berdensitas rendah pada
permukaan membran sel tubuh. Tanpa adanya absorpsi tersebut,
kolesterol di sel hati menjadi tidak terkontrol dan membentuk
kolesterol baru secara terus menerus yang mengakibatkan jumlah
lipoprotein berdensitas sangat rendah yang dilepaskan oleh hati ke
dalam plasma menjadi semakin meningkat. Banyak pasien yang
meninggal sebelum berusia 20 dikarenakan terjadinya sisa
penyumbatan aterosklerosis diseluruh pembuluh darah tubuh (21)
b. Hiperkolesterolemia Sekunder
Suatu penyakit yang diakibatkan karena adanya gangguan atau
suatu penyakit lain misalnya hipotiroidisme, sindroma nefrotik,
diabetes melitus dan sindroma metabolic (22)
3. Etiologi
Banyak faktor yang menyebabkan terjadinya hiperkolesterolemia. Bisa
disebabkan karena faktor genetik seperti pada hiperkolesterolemia familil
dan hiperkolesterolemia poligenik, juga bisa disebabkan oleh faktor
sekunder dari penyakit lain seperti diabetes melitus, serta faktor kebiasaan
diet, kegemukan dan kurang olahraga. Namun, penyebab yang paling
umum adalah :
8
a. Pola Diet
Terlalu banyak mengkonsumsi lemak jenuh dapat menyebabkan
kolesterol tinggi. Biasanya, lemak terkandung dalam makanan yang
berasal dari olahan hewani seperti babi, sapi, telur, mentega, susu,
atau keju (23)
b. Berat Badan
Kondisi perut buncit tidak hanya mengganggu kehidupan sosial,
tetapi juga Ketika kelebihan beart badan makan dapat menaikkan
kadar trigliserida dan menurunkan kadar HDL dalam darah (23)
c. Tingkat Aktivitas
Kekurangan Gerakan fisik dapat meningkatkan kadar LDL serta
menurunkan kadar HDL. Kolesterol LDL dapat melekat pada dinding
arteri dan bisa menyebabkan perkembangan penutupan-penutupan
pembuluh nadi, sedangkan peranan kolesterol HDL dapat membawa
kembali kolesterol buruk ke organ hati untuk pemprosesan lebih lanjut
(23)
d. Usia dan Jenis Kelamin
Bagi para pria, tingkat kolesterol secara umum akan berhenti
setelah usia 50 tahun. Sedangkan bagi para wanita, tingkat kolesterol
berada dalam kondisi cukup rendah sampai masa menopause tiba.
Setelah itu, kadar kolesterol akan merambat naik sampai kira kira
menyamai keadaan yang dialami oleh para pria (23)
e. Kondisi Kesehatan Secara Keseluruhan
Pemeriksaan kesehatan setiap tahun sebaiknya dilakukan dan
meminta penjelasan dari dokter untuk mengetahui adanya
kemungkinan resiko terkena serangan jantung (23)
f. Merokok
Merokok dapat menyebabkan turunnya kadar kolesterol baik dalam
darah (23)
9
g. Genetik
Hiperkolesterolemia cenderung terjadi dalam keluarga atau yang
disebut familial hypercholesterolemia (FH), kelainan genetik yang
mempengaruhi fungsi reseptor LDL, dimana 80% kolesterol dalam
darah diproduksi oleh tubuh sendiri, ada sebagian orang yang
mempunyai kolesterol lebih banyak dibandingkan yang lain. Pada
kelompok tersebut, walaupun mereka mengkonsumsi lemak jenuh
atau kolesterol sedikit, tubuh tetap memproduksi kolesterol lebih
banyak (24)
h. Obesitas
Obesitas dapat meningkatkan dikarenakan IMT yang menyebabkan
fungsi metabolik tubuh menjadi naik yang akhirnya membutuhkan
suplai oksigen lebih besar sehingga beban kerja otot jantung
meningkat (24)
4. Patofisiologi
1. Jalur Metabolisme Eksogen
Selain kolesterol yang berasal dari makanan, dalam usus juga
terdapat kolesterol dari hati yang dieksresikan bersama empedu ke
usus halus. Baik lemak di usus halus yang berasal dari makanan
maupun organ hati disebut dengan lemak eksogen yang Sebagian
diperoleh dari asupan makanan. Didalam usus halus, asam lemak
bebas akan diubah menjadi trigliserida, sedangkan kolesterol
mengalami esterifikasi menjadi kolesterol ester dan keduanya bersama-
sama dengan fosfolipid dan apoluprotein membentuk lipoprotein yang
dikenal sebagai kilomikron. Kilomikron masuk kedalam saluran limfa
dan akhirnya melalui saluran limfa masuk kedalam darah. Kilomikron
yang sudah kehilangan Sebagian besar trigliserida akan menjadi
kilomikron remnant (kilomikron sisa) yang mengandung ester
kolesterol dan dibawa ke hati (25)
10
5. Gejala Klinis
Hiperkolesterolemia tidak menimbulkan gejala, bahkan jika kadar
kolesterol di cek sebanyak 3 kali normal. Biasanya jika memiliki penyakit
hiperkolesterolemia dapat diketahui setelah tes darah di laboratorium
11
klinis, stroke, atau penyakit arteri koroner. Gejala umum yang biasanya
diderita oleh penderita hiperkolesterolemia yaitu sesak napas yang
disebabkan oleh penyumbatan lemak dalam darah, pusing, merasa pegal-
pegal hingga bagian Pundak, mudah mengantuk, migrain yang sering
kambuh dan mual (26),(27)
6. Pengobatan Hiperkolesterolemia
1) Terapi Farmakologi
(1) Golongan Statin
Golongan statin adalah obat yang efektif dan ditoleransi
dengan baik untuk mengobati hiperkolesterolemia. Statin juga
dikenal sebagai obat yang merupakan inhibitor kuat pada proses
inflamasi. Mekanisme statin dalam menyebabkan modulasi respon
imun merupakan hal yang kompleks. Selain berfungsi menurunkan
merupakan hal yang kompleks. Selain berfungsi menurunkan
kolesterol LDL, statin juga mempunyai efek meningkatkan
kolesterol HDL dan menurunkan Trigliserida. Cara kerja statin
adalah dengan menghambat kerja HMG-CoA reductase (25), (26)
(2) Bile Acid Sequestrant
Terdapat 3 jenis bile acid sequestrant yaitu kolestiramin,
kolesevelam dan kolestipol. Obat golongan ini mengikat asam
empedu (bukan kolesterol) di usus sehingga menghambat sirkulasi
enterohepatik dari asam empedu dan meningkatkan perubahan
kolesterol menjadi asam empedu di hati. Dosis harian kolestiramin,
kolestipol dam kolesevelam berurutan adalah 4-24 gram, 5-30
gram dan 3,8 – 4,5 gram. Penggunaan dosis tinggi dapat
menurunkan konsentrasi LDL sebesar 18-25% walaupun tidak
mempunyai efek terhadap kolesterol HDL tetapi konsenterasi
Trigliserida dapat meningkat (29)
(3) Fibrat
Fibrat adalah agonis dari PPAR-a. Melalui reseptor ini, fibrat
menurunkan regulasi gen apoC-III serta meningkatkan regulasi gen
12
B. Kolesterol
1. Pengertian
Kolesterol adalah zat alamiah dengan sifat fisik berupa lemak
tetapi memiliki rumus steroida. Kolesterol merupakan bahan pembangun
esensial bagi tubuh untuk sintesis zat-zat penting seperti membran sel dan
bahan isolasi sekitar serat saraf, begitu pula hormon kelamin dan anak
ginjal, vitamin D serta asam empedu (32)
Kolesterol dalam darah adalah elemen esensial yang terdapat
dalam sel membran manusia dan merupakan komponen struktural dari
hormon steroid dan asam empedu. Kolesterol dibutuhkan tubuh dalam
batas tertentu untuk berbagai proses metabolisme seperti membentuk
14
2. Klasifikasi
15
2. Nama Daerah
Beberapa nama daerah di Indonesia, binahong mempunyai nama yang
berbeda-beda, misalnya Sumatera : Sirih Raja (Jambi), Jawa : Binahong
dan Sulawesi : Penahong (Sulawesi Tengah) (39)
3. Nama Asing
Di beberapa negara, binahong mempunyai nama yang berbeda-beda
misalnya, Heartleaf madeiravine, basell-potatoes, potato vine (Inggris),
anredera, enreadera del moisquito, parra de madeira (Spanyol), deng
sanchi,du sanchi, luo kui shu (Cina), Pia, tapau (Cook Islands), luna luna
19
5. Morfologi
D. Metabolit Sekunder
Kandungan kimia yang terdapat pada daun binahong, antara lain :
1. Alkaloid
Alkaloid adalah senyawa metabolit sekunder terbanyak yang memiliki
atom nitrogen, yang ditemukan dalam jaringan hewan dan tumbuhan.
Alkaloid berkhasiat sebagai antidiare, antidiabetes, antimikroba dan anti
malaria. Akan tetapi, beberapa senyawa golongan alkaloid bersifat racun
sehingga diperlukan adanya identifikasi senyawa golongan alkaloid yang
dapat diketahui manfaatnya (40)
2. Flavonoid
Flavonoid merupakan salah satu kelompok senyawa metabolit
sekunder yang paling banyak ditemukan di dalam jaringan tanaman.
Flavonoid termasuk dalam golongan senyawa phenolik dengan struktur
kimia C6-C3-C6. Kerangka flavonoid terdiri atas satu cincin aromatik A,
satu cincin aromatik B, dan cincin tengah berupa heterosiklik yang
mengandung oksigen dan bentuk teroksidasi cincin ini dijadikan dasar
pembagian flavonoid ke dalam sub-sub kelompoknya. Sistem penomoran
digunakan untuk membedakan posisi karbon di sekitar molekulnya (41)
Senyawa flavonoid dalam binahong berfungsi sebagai antioksidan
yang mencegah oksidasi asam lemak dan LDL dalam darah Pemberian
ekstrak etanol daun binahong pada hewan yang diinduksi lemak tinggi,
mampu menurunkan absorbs kolesterol dalam darah dan meningkatkan
pengubahan kolesterol menjadi asam empedu sehingga akan
meningkatkan eliminasi kolesterol sehingga kadar kolesterol dalam darah
menurun. Penelitian Lestari dkk, ekstrak etanol daun binahong dengan
21
dosis 100 dan 200 mg/kg mampu menurunkan kadar kolesterol dan
trigliserida dalam darah tikus (14)
3. Fenol
Senyawa fenolik adalah senyawa yang memiliki gugus hidroksil dan
paling banyak terdapat dalam tanaman, polifenol memiliki banyak gugus
fenol dalam molekulnya dan spektrum yang luas dengan kelarutan yang
berbeda-beda, serta menunjukkan banyak fungsi biologis seperti
perlindungan terhadap stress oksidatif dan penyakit degenerative secara
signifikan. Fenol memiliki banyak manfaat kesehatan seperti antioksidan,
antikarsinogenik, antimikrobia dan sebagainya (42)
4. Saponin
Saponin merupakan salah satu jenis dari metabolit sekunder yang dapat
meningkatkan permeabilitas lipid bilayer untuk mengatur akses antibody
menuju permukaan sitoplasma sel sehingga protein transmembran
teragregasi. Saponin mempunyai peranan sebagai antimikroba, antijamur,
antitumor, sitotoksik, antikanker, antiinflamasi dan memiliki aktivitas
hepatoprotektif (43)
5. Terpenoid
Terpenoid mempunyai peran fungsional yang beragam pada tanaman
sebagai hormone, pigmen fotosintesis, pembawa electron, mediator
perakitam polisakarida dan komponen struktural membran. Terpenoid
yang tersedia dalam jumlah yang relatif besar karena minyak atsiri, resin
dan lilin adalah sumber daya terbarukan yang penting dan menyediakan
berbagai produk yang bermanfaat termasuk pelarut, perasa, wewangian,
perekat, pelapis dan zat antara sintesis (44)
Biosintesis terpenoid dapat dibatasi oleh struktur fisik pada tingkat
histologis, seluler, dan subseluler. Dimana sejumlah besar terpenoid
hidrofobik diproduksi dan diakumulasikan, struktur sekretori khusus
biasanya di sisihkan (44)
E. Simplisia
1. Pengertian
22
2. Klasifikasi Simplisia
Simplisia dibagi menjadi tiga kelompok yaitu :
1. Simplisia Nabati
Simplisia nabati berupa tanaman utuh, bagian tanaman atau
eksudat tanaman. Eksudat tanaman adalah isi sel yang secara spontan
keluar dari tanaman atau isi sel dengan cara tertentu dari selnya, atau
zat-zat nabati lainnya yang dengan cara tertentu dipisahkan dari
tanamannya dan dalam berupa zat kimia murni (46)
2. Simplisia Hewani
Simplisia hewani adalah simplisia yang berupa hewan utuh,
bagian hewan atau zat-zat berguna yang dihasilkan oleh hewan,
belum berupa zat kimia murni (46)
3. Simplisia Pelican (mineral)
Simplisia pelikan adalah simplisia yang berupa bahan pelikan atau
mineral yang belum diolah dengan cara sederhana dan belum berupa zat
kimia murni (46)
23
F. Standarisasi Simplisia
Standarisasi merupakan serangkaian parameter, pengukuran unsur-unsur
terkait paradigma mutu yang memenuhi syarat standar. Bisa juga dikatakan
sebagai serangkaian proses yang akan melibatkan analisis fisik dan
mikrobiologi yang didasarkan dengan kriteria umum keamanan dan
toksikologi terhadap suatu ekstrak alam (48)
26
1. Parameter Spesifik
Parameter spesifik merupakan aspek analisis kimia secara kualitatif
maupun kuantitatif terhadap kadar senyawa aktif yang berkaitan dengan
aktivitas farmakologis dari suatu ekstrak yang terdiri dari uji makroskopik
dan mikroskopik, penentuan kadar sari larut dalam etanol dan larut dalam
air (49)
G. Ekstrak
1. Pengertian
Ekstrak adalah sediaan kental yang diperoleh dengan mengekstarksi
senyawa aktif dari simplisia nabati atau simplisia hewani menggunakan
pelarut yang sesuai, kemudian semua atau hamper semua pelarut diuapkan
dan massa atau serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian hingga
memenuhi baku yang telah ditetapkan (50)
2. Jenis-Jenis Ekstrak
Jenis-jenis ekstrak berdasarkan sifatnya sebagai berikut :
1. Ekstrak encer (extractum tenue)
Sediaan ini memiliki konsistensi seperti madu dan dapat dituang (51)
2. Ekstrak kental (extractum spissum)
Sediaan ini liat dalam keadaan dingin dan tidak dapat dituang.
Ekstrak kental mengandung air tidak lebih dari 30% (51)
3. Ekstrak kering (extractum siccum)
27
H. Ekstraksi
1. Pengertian
Ekstraksi merupakan suatu proses pemisahan kandungan senyawa
kimia dari jaringan tumbuhan ataupun hewan dengan menggunakan
penyari tertentu. Ekstrak adalah sediaan pekat yang diperoleh dengan cara
mengekstraksi zat aktif dengan menggunakan pelarut yang sesuai,
kemudian semua atau hampir semua pelarut diuapkan dan massa atau
serbuk yang tersisa diperlakukan sedemikian, hingga memenuhi baku yang
ditetapkan (52)
Ekstraksi bertujuan untuk menarik semua komponen kimia yang
terdapat dalam simplisia. Ekstraksi didasarkan pada perpindahan massa
komponen zat padat ke dalam pelarut dimana perpindahan mulai terjadi
pada lapisan antar muka, kemudian berdifusi masuk ke dalam pelarut.
Proses pengekstraksian komponen kimia dalam sel tanaman yaitu pelarut
organik akan menembus dinding sel dan masuk ke dalam rongga sel yang
mengandung zat aktif, zat aktif akan larut dalam pelarut organik di luar
sel, maka larutan terpekat akan berdifusi keluar sel dan proses ini akan
berulang terus sampai terjadi keseimbangan antara konsentras cairan zat
aktif di dalam dan di luar sel. Faktor-faktor yang dapat mempengaruhi laju
ekstraksi adalah tipe persiapan sampel, waktu ekstraksi, kuantitas pelarut,
suhu pelarut, dan tipe pelarut (52)
Ada beberapa target ekstraksi, diantaranya adalah :
1. Senyawa bioaktif yang tidak diketahui
2. Senyawa yang diketahui ada pada suatu organisme
3. Sekolompok senyawa dalam suatu organisme yang berhubungan
secara struktural (52)
28
2. Jenis-Jenis Ekstraksi
Jenis-jenis metode ekstraksi yang dapat digunakan adalah :
1) Ekstraksi Cara Dingin
(1) Maserasi
Maserasi merupakan metode sederhana yang paling banyak
digunakan. Cara ini sesuai, baik untuk skala kecil maupun skala
industri. Metode ini dilakukan dengan memasukkan serbuk
tanaman dan pelarut yang sesuai ke dalam wadah inert yang
tertutup rapat pada suhu kamar. Proses ekstraksi dihentikan ketika
tercapai kesetimbangan antara konsentrasi senyawa dalam pelarut
dengan konsentrasi dalam sel tanaman. Setelah proses ekstraksi,
pelarut dipisahkan dari sampel dengan penyaringan. Kerugian
utama dari metode maserasi ini adalah memakan banyak waktu,
pelarut yang digunakan cukup banyak, dan besar kemungkinan
beberapa senyawa hilang. Selain itu, beberapa senyawa mungkin
saja sulit diekstraksi pada suhu kamar. Namun di sisi lain, metode
maserasi dapat menghindari rusaknya senyawa-senyawa yang
bersifat termolabil (53)
29
(2) Perkolasi
Pada metode perkolasi, serbuk sampel dibasahi secara
perlahan dalam sebuah perkolator (wadah silinder yang dilengkapi
dengan kran pada bagian bawahnya). Pelarut ditambahkan pada
bagian atas serbuk sampel dan dibiarkan menetes perlahan pada
bagian bawah. Kelebihan dari metode ini adalah sampel senantiasa
dialiri oleh pelarut baru. Sedangkan kerugiannya adalah jika
sampel dalam perkolator tidak homogen maka pelarut akan sulit
menjangkau seluruh area. Selain itu, metode ini juga membutuhkan
banyak pelarut dan memakan banyak waktu (53)
2) Ekstraksi Cara Panas
(1) Dekok
Dekok adalah infus pada waktu yang lebih lama (~ 30oC)
dan temperature sampai titik didih air (47)
(2) Digesti
Digesti adalah maserasi kinetik (dengan pengaduk kontinu)
pada temperature yang lebih tinggi dari temperature ruangan
(kamar), yaitu secara umum dilakukan pada temperature 40-50o
(47)
(3) Infusa
Infusa adalah sediaan cair yang dibuat dengan
mengekstraksi simplisia nabati dengan air pada suhu 90 ̊C selama
15 menit. Pembuatan dengan cara pemanasan simplisia di atas
pemanas air selama 15 menit terhitung mulai suhu mencapai 90 ̊C
sambil sesekali diaduk. Setelah itu diangkat dan dilakukan
penyarian dalam keadaan panas (53)
Infusa juga merupakan ekstraksi yang menggunakan pelarut
polar yaitu air. Senyawa yang memiliki kepolaran yang sama akan
lebih mudah tertarik atau terlarut dengan pelarut yang memiliki
tingkat kepolaran yang sama, sehingga infusa kulit jeruk purut
adalah cara efektif untuk mendapatkan isolasi komponen senyawa
30
dalam menentukkan tikus putih sebagai hewan percobaan antara lain : kontrol
(recording) pakan, kontrol kesehatan , kontrol perkawinan, jenis (strain),
umur, bobot badan, jenis kelamin dan silsilah genetik (54)
J. Rancangan Penelitian
1. Prinsip Penelitian
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental memggunakan metode
pre dan post test with controlled group design.
32
2. Kerangka Teori
- Umur
- Makanan siap saji
- Makanan berlemak Hiperkolesterolemia
- Obesitas
- Olahraga
3. Kerangka Konsep
Hiperkolesterolemia
Trigliserida
Daun Binahong
(Anredera cordifolia)
5. Definisi Operasional
Definisi Operasional dalam penelitian ini adalah :
hormon steroid
dan asam
empedu
METODE PENELITIAN
E. Rancangan Penelitian
Rancangan penelitian dilakukan menggunakan metode rancangan
eksperimental dengan metode Pre and post test with controlled group design.
25 ekor hewan uji diadaptasikan selama 7 hari kemudian ditimbang bobot
badan masing-masing hewan uji. Semua hewan uji diinduksi dengan diberikan
pakan diet lemak tinggi dan larutan PTU 0,1% selama 14 hari hingga kadar
44
F. Prosedur Penelitian
1. Determinasi
Determinasi dilakukan di laboratorium Botani Jurusan Biologi Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam (FMIPA) Universitas Lampung.
Determinasi bertujuan untuk membuktikan bahwa Daun Binahong yang
digunakan adalah spesies Anredera Cordifolia
2. Adaptasi Hewan Uji
Sebelum pengujian tikus putih (Rattus norvegicus) diadaptasi selama 7
hari untuk melakukan penyuasaian terhadap suhu, cahaya dan kelembapan
di lingkungan baru. Tikus putih (Rattus norvegicus) di berikan pakan pur
kemudian diseling dengan timun. Kondisi kendang dijaga kebersihannya
untuk mencegah kembali terinfeksi karena faktor kendang yang kotor
3. Pembuatan Simplisia
Daun binahong (Anredera cordifolia) diambil dari pekarangan rumah
di perkebunan di Desa Kertosari Kec. Tanjungsari Kab.Lampung Selatan
sebanyak 5 kg. Kemudian bahan baku disortasi untuk memisahkan
pengotor yang mungkin terbawa pada saat panen. Setelah itu dilakukan
pencucian menggunakan air mengalir dan tiriskan. Selanjutnya, dilakukan
perajangan kemudian dilakukan pengeringan dengan cara dijemur dibawah
matahari dilapisi dengan kain berwarna hitam sampai kering. Setelah
kering, simplisia kembali dilakukan menggunakan sortasi kering yang
45
7. Uji Antikolesterol
H0-H7 hewan uji diadaptasikan dengan lingkungan agar terbiasa dengan
lingkungan baru dan tidak mengalami stress. Hewan uji diberi diet lemak
tinggi sampai H14 dan dikontrol bobotnya setiap 3 hari sekali untuk
49
mendapatkan kadar kolesterol yang tinggi >200 dan kadar yang tinggi
itulah yang dipilih. Kemudian dipuasakan selama 12 jam dan diukur kadar
kolesterol yang diambil di bagian ekor setelah di induksi diet lemak tinggi.
Hewan uji dibagi secara acak menjadi 5 kelompok perlakuan yang terdiri
dari 4 ekor pada masing-masing kelompok.
Pengelompokkan hewan uji sebagai berikut :
Kelompok I merupakan kelompok kontrol negatif hiperkolesterolemia,
diberikan CMC 0,5%
Kelompok II merupakan kelompok kontrol positif hiperkolesterolemia
diberikan suspensi simvastatin dengan dosis 0,18 mg/200 g BB
Kelompok III merupakan kelompok perlakuan I, diberikan infusa daun
binahong (Anredera cordifolia) dosis 100 mg/200 g BB
Kelompok IV merupakan kelompok perlakuan II, diberikan infusa daun
binahong (Anredera cordifolia) dosis 200 mg/200 g BB
Kelompk V merupakan kelompok perlakuan III, diberikan infusa daun
binahong (Anredera cordifolia) dosis 300 mg/200 g BB
Setelah perlakuan diatas, dilakukan pemeriksaan menggunakan alat GCU
untuk mengetahui kadar kolesterol
Prosedur Pemeriksaan
Panjang gelombang : 546 nm
Kuvet : diameter dalam 1 cm
Suhu inkubasi : 20-25oC atau 37oC
Larutan Blanko Standar Sampel
Standar - 10 μL -
Sampel - - 10 μL
Aqua bidestilata 10 μL - -
Reagen Kolesterol 1000 μL 1000 μL 1000 μL
Campur dan inkubasikan selama 10 menit pada suhu 20-25oC atau selama 5
menit pada suhu 37oC kemudian baca asborbansi sampel (A sampel) terhadap
blanko dalam waktu 1 jam
Kalkulasi
G. Analisis Data
Untuk mengetahui adanya perbedaan pada masing-masing kelompok
perlakuan digunakan analisis statistik untuk mengetahui apakah data
berdistribusi normal atau tidak yaitu dengan menggunakan uji Shapiro Wilk
Test. Jika data berdistribusi normal dilanjutkan dengan Uji Analysis of
Variance (ANOVA) 95% untuk mengetahui perbedaan nilai signifikan (p-
value) yang bermakna > 0,05. (57)
50
Jadwal Penelitian
Kegiatan Bulan Ke
8 9 1 1 12 1 2 3 4 5 6 7
0 1
Studi Pustaka
Penyusunan
proposal penelitian
Seminar Proposal
Persiapan
Penelitian
Pelaksanaan
Penelitian
Pengolahan dan
Analisis Data
Penyusunan Skripsi
Seminar Hasil
Perbaikan Skripsi
Ujian Sidang
Skripsi
51
DAFTAR PUSTAKA
14. Berawi KN, Agverianti T. Efek Aktivitas Fisik pada Proses Pembentukan
Radikal Bebas sebagai Faktor Risiko Aterosklerosis Physical Activity
Effects on Free Radicals Development as Risk Factor of Atherosclerosis.
Majority. 2017;6(2):85–90.
18. Sari DK. Tanda gejala dan bahaya hiperkolesterolemia. Tanda gejala dan
bahaya hiperkolesterolemia. 2014;Vol.3(1988):1–8.
19. Dr. Ir. Sri Wahyuni. MK. Dislipidemia Menyebabkan Stress Oksidatif
Ditandai Oleh Meningkatnya Malondialdehid. In Bali: Udayana University
Press; 2015.
20. Mulyani NS, Al Rahmad AH, Jannah R. Faktor resiko kadar kolesterol
darah pada pasien rawat jalan penderita jantung koroner di RSUD
Meuraxa. AcTion Aceh Nutr J. 2018;3(2):132.
53
21. Dr. Yekti Mumpuni W. Cara Jitu Mengatasi Kolesterol. Cara Mengatasi
dan Mengendalikan Kolesterol. In Yogyakarta: Rapha Publishing; 2011.
26. Listiyana AD, Mardiana M, Prameswari GN. Obesitas sentral dan kadar
kolesterol darah total. J Kesehat Masy. 2013;9(1):37–43.
27. Ir. Lukas Adi Tresno. Tanaman Obat dan Jus Untuk Mengatasi Penyakit
Jantung, Hipertensi, Kolesterol dan Stroke. In Jakarta Selatan:
PT.Agromedia Pustaka; 2008.
29. Adiwijono & Ahmad H. Dislipidemia pada Diabetes Mellitus Tipe II:
Patofisiologi dan Pendekatan Terapi. Vol. XXV, Berkala Ilmu Kedokteran.
1993. p. 189–201.
30. Ridayani N, Santri NF, Naim R. Gambaran Hasil Pemeriksaan Kadar High
Density Lipoprotein(HDL) dan Low Density Lipoprotein(LDL) pada
Penderita Obesitas di Rumah Sakit Umum Daerah Syekh Yusuf Kabupaten
Gowa. J Media Laboran
32. Putri SR, A DI. Obesitas sebagai Faktor Resiko Peningkatan Kadar
Trigliserida. J Major. 2015;4(9):78–82.
33. Doloksaribu LG. Asupan Lemak Kaitannya dengan Kadar High Density
Lipoproteint (HDL) dan Kadar Low Density Lipoproteint (LDL) Pada Ibu
54
42. Badaring DR, Sari SPM, Nurhabiba S, Wulan W, Lembang SAR. Uji
Ekstrak Daun Maja (Aegle marmelos L.) terhadap Pertumbuhan Bakteri
Escherichia coli dan Staphylococcus aureus. Indones J Fundam Sci.
2020;6(1):16.
44. Departemen Kesehatan RI. 18. Parameter Standar Umum Ekstrak Tanaman
Obat. Vol. 1, Departemen Kesehatan RI. 2000. p. 10–1.
45. Voight. Buku Pelajaran Teknologi Farmasi. In: Edisi 5. Yogyakarta: Gajah
Mada University Press; 1994.
48. Khafidhoh Zakiyatul DSS dan IA. Efektivitas Infusa Kulit Jeruk (Citrus
hystrix DC.) Terhadap Pertumbuhan Candida albicans Penyebab Sariawan
Secara i vitro. Univ Res Coloquium. 2015;31–7.
51. Gusnadi D, Taufiq R, Baharta E. Uji Organoleptik dan Daya Terima pada
Produk Mousse Berbasis Tapai Singkong sebagai Komoditi UMKM di
Kabupaten Bandung. J Inov Penelit. 2021;1(12):2883–8.
52. Najoan JJ, Runtuwene MJR, Wewengkang DS. Uji Fitokimia Dan
Aktivitas Antioksidan Ekstrak Etanol Daun Tiga (Allophylus Cobbe L.).
Pharmacon. 2016;5(1):266–74.
53. Suada IK, Purnama DID, Agustina KK. Infusa Daun Salam
Mempertahankan Kualitas Dan Daya Tahan Daging Sapi Bali. Bul Vet
Udayana. 2018;10(1):100.
57. Dewi AC, Wiryanthini IAD, Surudarma IW. Pengaruh Konsumsi Loloh
Cemcem Terhadap Kadar Kolesterol Total Pada Mencit ( Mus Musculus
L .). J Medica Udayana. 2022;11(2):98–102.
57
LAMPIRAN
58
Alur Penelitian
Determinasi Tanaman
Pembuatan Simplisia
Ekstrak
Uji Antikolesterol
Analisis Data
59
Pembuatan Simplisia
Sortasi Basah
Pencucian
Perajangan
Sortasi kering
Ditimbang
Penyimpanan
Infusa
Uji Fitokimia
1. Flavonoid
2. Alkaloid
3. Saponin
4. Steroid
5. Fenol
Kelompok Kelompok
Kelompok Kelompok Kelompok V diberi
II diberi
I diberi III diberi IV diberi infusa daun
suspensi
larutan infusa daun infusa daun binahong
simvastatin
CMC 0,5% binahong binahong (Anredera
0,18mg/gr
sebagai (Anredera (Anredera cordifolia)
BB sebagai
kontrol cordifolia) cordifolia) 30%
kontrol
negatif 10% 20%
positif
20g
200g
400g
1,5kg
2kg
4kg
12kg
70kg
63
Keterangan:
i.v =intravena
i.m =intra=intramuskular
i.p =intraperitorial
=subcu subcutan
p.o =per oral
Perhitungan Bahan
1. Perhitungan CMC Na 0,5%
0,5 gram
CMC-Na 0,5 % ¿ x 100 ml
100
= 0,5 gram = 500 mg
VAO =
Dosis( KgBB
mg
) x BB ( kg )
Konsentrasi (
ml )
mg
0,18 mg
x 200 gramBB
VAO = 200 gramBB
0,18 mg /ml
0,18 mg
VAO = mg
0,18
ml
VAO = 1 ml