Machine Translated by Google

molekul
Artikel

Ufosom yang Dimuat Klotrimazol untuk Pengiriman Topikal:

Pengembangan Formulasi dan Studi In-Vitro
1 1 1 1
Pradeep Kumar Bolla , Carlos A.Meraz , Victor A. Rodriguez , Isaac Deaguero ,
2
Mahima Singh , Venkata Kashyap Yellepeddi 3,4 dan Jwala Renukuntla 5,*
1
Departemen Teknik Biomedis, Sekolah Tinggi Teknik, Universitas Texas di El Paso,
500 W University Ave, El Paso, TX 79968, AS
2
Departemen Ilmu Farmasi, Universitas Sains di Philadelphia,
Philadelphia, PA 19104, AS
3
Divisi Farmakologi Klinis, Departemen Pediatri, Universitas Utah,
Kota Salt Lake, UT 84112, AS
4
Departemen Farmasi dan Kimia Farmasi, Sekolah Tinggi Farmasi, Universitas Utah,
Kota Salt Lake, UT 84112, AS
5
Departemen Ilmu Farmasi Dasar, Sekolah Farmasi Fred Wilson, High Point University,
Titik Tinggi, NC 27240, AS
* Korespondensi: jrenukun@highpoint.edu

Diterima: 9 Agustus 2019; Diterima: 28 Agustus 2019; Diterbitkan: 29 Agustus 2019

Abstrak: Insiden global infeksi jamur superfisial yang disebabkan oleh dermatofita tinggi dan
mempengaruhi sekitar 40 juta orang. Ini adalah penyebab infeksi paling umum keempat. Klotrimazol,
agen antijamur imidazol spektrum luas banyak digunakan untuk mengobati infeksi jamur. Konvensional
formulasi topikal klotrimazol dimaksudkan untuk mengobati infeksi melalui penetrasi obat yang efektif
ke dalam stratum korneum. Namun, kelemahannya seperti bioavailabilitas dermal yang buruk, penetrasi yang buruk,
dan tingkat obat yang bervariasi membatasi efisiensi. Penelitian ini bertujuan untuk memasukkan klotrimazol ke dalam
ufosom dan mengevaluasi bioavailabilitas topikalnya. Ufosom yang mengandung klotrimazol dibuat menggunakan
kolesterol dan natrium oleat dengan teknik hidrasi film tipis dan dievaluasi ukuran, polidispersitasnya
indeks, dan efisiensi penjerapan untuk mendapatkan formulasi yang optimal. Formulasi yang dioptimalkan adalah
dikarakterisasi menggunakan pemindaian mikroskop elektron (SEM), difraksi sinar-X (XRD), dan diferensial
pemindaian kalorimetri (DSC). Studi difusi kulit dan pengupasan pita dilakukan dengan menggunakan manusia
kulit untuk menentukan jumlah klotrimazol yang terakumulasi di berbagai lapisan kulit. Hasil
menunjukkan bahwa formulasi yang dioptimalkan memiliki ukuran vesikel <250 nm dengan efisiensi penjeratan ~84%.
XRD dan DSC mengkonfirmasi jebakan klotrimazol ke dalam ufosom. Tidak ada perembesan
diamati melalui kulit hingga 24 jam setelah studi permeasi. Pengupasan pita perekat mengungkapkan hal itu
ufosom menyebabkan akumulasi lebih banyak klotrimazol di kulit dibandingkan dengan formulasi yang dipasarkan
(Perrigo). Secara keseluruhan, hasil menunjukkan kemampuan ufosom dalam meningkatkan bioavailabilitas kulit
dari klotrimazol.

Kata Kunci: ufosom; klotrimazol; topikal; kolesterol; pengupasan pita perekat; aliran permegear
sel difusi; natrium oleat

1. Perkenalan
Insiden global infeksi jamur telah meningkat secara signifikan sejak tahun 1980an
sekitar satu miliar orang dan merupakan penyebab utama kematian pada satu juta pasien setiap tahunnya [1].
Mayoritas infeksi jamur adalah infeksi oportunistik atau sekunder pada orang dengan sistem imun lemah
pasien dengan penyakit parah seperti sindrom defisiensi imun didapat (AIDS), tuberkulosis,
kanker, dan penyakit paru obstruktif kronik. Lonjakan angka kejadian infeksi jamur di

Molekul 2019, 24, 3139; doi:10.3390/molekul24173139 www.mdpi.com/journal/molecules

Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 2 dari 15

belakangan ini disebabkan oleh meningkatnya penggunaan prosedur bedah dan invasif, imunosupresan,
dan antibiotik [2]. Infeksi jamur yang paling sering dilaporkan bersifat dangkal dan menyerang kulit,
rambut, kuku, dan mukosa, namun infeksi jamur sistemik juga dilaporkan [1,3]. Infeksi jamur superfisial
yang disebabkan oleh dermatofita mempengaruhi sekitar 40 juta orang di negara maju dan terbelakang
dan merupakan penyebab infeksi paling umum keempat [3,4]. Patogen jamur umum yang bertanggung
jawab atas infeksi jamur termasuk Candida, Aspergillus, Cryptococcus, Scedosporium, Zygomycetes,
dan spesies lainnya [1,3]. Berbagai agen antijamur digunakan untuk pengobatan infeksi jamur yang
meliputi azol (triazol dan imidazol), allylamines, antibiotik poliena, echinocandins, griseofulvin, dan lain-
lain [2,3].
Kandidiasis, juga disebut sebagai infeksi jamur, adalah infeksi jamur superfisial paling umum yang
disebabkan oleh spesies Candida. Candida albicans adalah patogen jamur yang bertanggung jawab atas
50% infeksi Candida dan biasanya berkoloni di kulit, vagina, mulut, dan saluran usus [2,5,6]. Patogen
kandida lainnya termasuk Candida krusei, Candida glabrata, Candida lusitaniae, Candida tropicalis, dan
Candida Parapsilosis [7]. Formulasi topikal dimaksudkan untuk mengobati infeksi lokal pada lapisan paling
atas kulit dengan secara efektif menembus obat ke dalam stratum korneum, sehingga menghancurkan
jamur atau organisme penyebab. Keuntungan yang terkait dengan formulasi topikal termasuk terbatasnya
ketersediaan hayati obat secara sistemik, yang mengurangi efek samping sistemik, potensi pengobatan
sendiri, peningkatan kepatuhan pasien, dan terapi yang ditargetkan atau terlokalisasi. Namun, sediaan
topikal memiliki kelemahan seperti bioavailabilitas kulit atau ungual yang buruk, penetrasi yang buruk ke
dalam stratum korneum, kadar obat yang bervariasi di lokasi infeksi, salep dan krim yang berminyak atau
lengket, iritasi kulit, reaksi alergi, dan penguapan obat yang tidak terkontrol. persiapan [3,8–11].
Oleh karena itu, diperlukan formulasi topikal baru untuk mengatasi permasalahan yang terkait dengan
formulasi yang ada saat ini. Baru-baru ini, para ilmuwan formulasi telah mengeksplorasi sistem
penghantaran obat berbasis nanopartikel untuk meningkatkan formulasi topikal. Hal ini dilakukan dengan
memberikan obat aktif secara tepat ke lokasi infeksi sekaligus meningkatkan penetrasi kulit, mengurangi
iritasi, dan meningkatkan efek berkelanjutan [12]. Beberapa sistem penghantaran obat baru telah
diformulasikan untuk merangkum agen antijamur dan meningkatkan kemanjurannya. Beberapa di
antaranya adalah mikroemulsi, nanoemulsi, niosom, dendrimer, nanopartikel lipid padat, liposom, etosom,
nanopartikel lipid, dan nanopartikel polimer [3].
Klotrimazol, agen antijamur imidazol spektrum luas yang kurang toksik, banyak digunakan untuk
mengobati Kandidiasis. Kerjanya dengan menghambat enzim sitokrom 14ÿ-demetilase sel jamur yang
bertanggung jawab untuk sintesis dinding sel [13]. Secara kimia, klotrimazol adalah 1-((2-klorofenil)
difenilmetil)-1H-imidazol, tidak larut dalam air (0,49 mg/L) dengan Log P 6,1 dan pKa 6,7 [3,14,15] . Ini
adalah azole oral pertama yang disetujui untuk infeksi jamur; namun, obat ini tidak digunakan sebagai obat
oral karena penyerapan oralnya yang terbatas dan toksisitas sistemik. Saat ini, klotrimazol tersedia dalam
formulasi topikal konvensional seperti krim (Lotrimin AF dan Gyne-Lotrimin), larutan (Lotrimin AF), dan lotion (Lotrimin AF) [3].
Bioavailabilitas topikal klotrimazol sangat rendah berkisar antara 0,5% hingga 10% karena kelarutannya
yang buruk dalam air [ 14]. Oleh karena itu, klotrimazol harus dimasukkan ke dalam sistem penghantaran
obat yang sesuai untuk meningkatkan bioavailabilitas topikal di lokasi infeksi. Dilaporkan dalam literatur
bahwa klotrimazol telah dimasukkan ke dalam berbagai sistem penghantaran obat baru seperti nanogel,
mikroemulsi, nanopartikel lipid padat, nanokapsul, etosom, vesikel hibrid berstruktur tiga dimensi, dan
liposom [5,6,13,16,17 ]. Di sisi lain, sistem penghantaran obat vesikular menjadi lebih populer akhir-akhir ini
karena kelebihannya seperti pelepasan obat yang berkepanjangan, peningkatan penetrasi obat, penghantaran
obat yang tepat sasaran ke tempat infeksi, dan peningkatan stabilitas fisik. Baru-baru ini, Csongradi et al.,
melaporkan penggunaan ufosom sebagai sarana penghantaran obat topikal yang potensial. Mereka
memasukkan roxithromycin, antibiotik yang sulit larut dalam air ke dalam ufosom dan mengevaluasi
pelepasan dan distribusi kulit. Hasil penelitian menunjukkan bahwa sejumlah besar roxithromycin
terakumulasi pada lapisan epidermis-dermis kulit tanpa adanya permeasi melintasi lapisan kulit [18]. Ufosom
adalah sistem penghantaran obat vesikuler berbasis lipid atau disebut liposom asam lemak tak jenuh.
Mereka adalah suspensi koloid dari asam lemak dan sabun terionisasi yang dapat membentuk lapisan ganda lipid dan menjeba
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 3 dari 15

klotrimazol ke dalam ufosom dapat meningkatkan penetrasi kulit karena sifat lipofilik dari vesikel . Ufosom
menjadi vesikel asam lemak, dapat berinteraksi dengan stratum korneum dan meningkatkan bioavailabilitas
topikal klotrimazol [18,19]. Selain itu, pembuatan ufosom bersifat ekonomis karena asam lemaknya tidak
mahal dibandingkan dengan lipid lainnya [19]. Oleh karena itu, penelitian ini bertujuan untuk menyiapkan
dan mengkarakterisasi ufosom yang mengandung klotrimazol menggunakan kolesterol dan natrium oleat.
Ufosom klotrimazol dibuat dengan teknik hidrasi film tipis. Pengaruh rasio obat terhadap eksipien terhadap
ukuran dan efisiensi penjerapan dipelajari untuk mengoptimalkan formulasi. Selanjutnya, formulasi
dikarakterisasi , dan studi difusi kulit dilakukan dengan menggunakan kulit manusia untuk menentukan
jumlah klotrimazol yang terakumulasi di berbagai lapisan kulit.

2. Hasil dan Pembahasan

2.1. Optimalisasi Ufosom Bermuatan Klotrimazol

Studi optimasi bertujuan untuk mendapatkan ufosom berukuran lebih kecil dengan efisiensi penjebakan yang tinggi.
Untuk ini, rasio klotrimazol, kolesterol dan natrium oleat yang berbeda disaring untuk mengetahui ukuran
vesikel dan efisiensi penjeratan. Karena sebagian besar formulasi topikal klotrimazol yang tersedia secara
komersial adalah 1%, konsentrasi klotrimazol dalam semua formulasi adalah konstan pada 1% b/v di
semua formulasi . Rasio asam lemak tak terionisasi dan asam lemak terionisasi menentukan stabilitas
ufosom [19]. Oleh karena itu, pengaruh enam rasio kolesterol dan natrium oleat yang berbeda terhadap
ukuran vesikel, indeks polidispersitas, potensi zeta, dan efisiensi penjeratan dipelajari untuk mendapatkan
formulasi yang optimal. Kolesterol (asam lemak netral) dan natrium oleat (asam lemak terionisasi) dipilih
untuk formulasi ufosom karena keduanya banyak digunakan dalam formulasi topikal berbasis lipid. Selain
itu, bahan-bahan tersebut disetujui oleh Administrasi Makanan dan Obat Amerika Serikat (USFDA) sebagai bahan tidak aktif [2
Kolesterol, steroid tak jenuh yang tersedia secara alami, mampu membentuk lapisan ganda fosfolipid yang
menjebak obat hidrofobik. Selain itu, kolesterol meningkatkan stabilitas dan permeabilitas vesikel [21,22].
Telah digunakan dalam pembuatan berbagai formulasi yang meliputi liposom, ufosom, salep dan krim
topikal, transfersom, niosom, sekosom, dan nanopartikel lipid padat [18,23-27]. Natrium oleat adalah garam
dari asam lemak tak jenuh (asam oleat), digunakan sebagai penambah permeasi dalam formulasi topikal
dan merupakan bahan kimia yang umumnya diakui aman (GRAS) [18,28,29]. Karena ufosom terbentuk
dalam kisaran pH sempit 7–9, saline buffer fosfat (PBS) 7,4 digunakan untuk hidrasi. Perbedaan pH media
hidrasi akan menyebabkan terbentuknya tetesan atau endapan minyak (pH <7) atau misel terlarut (pH > 9)
dalam formulasi [30].

2.1.1. Penentuan Ukuran, Indeks Polidispersitas, dan Potensi Zeta

Tabel 1 merangkum ukuran, indeks polidispersitas, dan potensi zeta ufosom yang dibuat menggunakan rasio
kolesterol, natrium oleat, dan klotrimazol yang berbeda. Hasil penelitian menunjukkan bahwa peningkatan konsentrasi
natrium oleat dan kolesterol menyebabkan terbentuknya ufosom dengan ukuran vesikel yang lebih kecil. Ufosom dengan
ukuran partikel <300 nm diperoleh dengan Ufo_6 (rasio 1:2:2) (clotrimazole (50 mg), natrium oleat (100 mg) dan
kolesterol (100 mg)). Namun, semua formulasi bersifat polidispersi dengan indeks polidispersitas berkisar antara 0,4
hingga 0,7. Analisis distribusi ukuran seluruh formulasi disajikan pada Tabel 2. Formulasi Ufo_6 menunjukkan distribusi
ukuran trimodal yang menunjukkan adanya vesikel dengan ukuran berbeda. Analisis kurva distribusi ukuran menunjukkan
bahwa ukuran vesikel adalah <200 nm untuk sebagian besar vesikel (Gambar 1). Penurunan ukuran vesikel dengan
peningkatan kolesterol dapat dikaitkan dengan kepadatan pengepakan yang lebih tinggi dan stabilitas vesikel dengan
peningkatan konsentrasi kolesterol [27]. Temuan serupa diperoleh ketika diklofenak dimasukkan ke dalam vesikel
kolesterol (diklosom) [31]. Seperti yang dilaporkan dalam literatur, nilai ZP untuk semua ufosom tinggi berkisar antara
ÿ73,7 hingga ÿ101 mV yang menunjukkan stabilitas tinggi. Peningkatan konsentrasi natrium oleat (sabun asam lemak
terionisasi) mengakibatkan pergeseran ZP ke nilai negatif yang lebih tinggi.
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, x UNTUK TINJAUAN PEER 4 dari 15

Molekul 2019, 24, 3139 4 dari 15

Tabel 1. Ringkasan diameter vesikel, indeks polidispersitas dan zeta hasil potensial ufosom.
Data disajikan sebagai mean ± SD (n = 3).
Tabel 1. Ringkasan diameter vesikel, indeks polidispersitas dan zeta hasil potensial ufosom.
Zeta
Klotrimazol:Kolesterol:S
Data disajikan sebagai mean ± SD (n = 3). Gelembung
Formulasi Indeks Polidispersitas Potensi
odium Oleate Clotrimazole: Diameter (nm)
Kolesterol: Diameter Vesikel Polidispersitas Potensi Zeta (mV)
Perumusan
Natrium Oleat Indeks
UFO_1 1:0.5:1 1177(nm)
± 156 0,414 ± 0,164 (mV) ÿ74 ± 3
1:0.5:1 1177 ± 156 0,414 ± 0,164 ÿ74 ± 3
UFO_2 UFO_1 1:1:0.5 848 ± 239 0,638 ± 0,166 ÿ74 ± 3
UFO_2 1:1:0.5 848 ± 0,638 ± 0,166 ÿ74 ± 3
UFO_3 UFO_3 1: 1:1
1:1:1 239
140432
432± 0,583
0,583 ± 0,069
± 0,069 ÿ74 ± 5ÿ74 ± 5
UFO_4 UFO_4 1:2:11:2:1 ± ±140
67 374 0,589
0,589
± 0,064
± 0,064 ÿ75 ± 7ÿ75 ± 7
1:1:2 ± 67 752 0,702 ± 0,067 ÿ101 ± 5ÿ101
UFO_5 UFO_5 1 :1:2 ± 179 752 0,70 2 ± 0,067 ±5
UFO_6 1:2:2 ± 179 0,581 ± 0,132 ÿ98 ± 3
UFO_6 1:2:2 234 ± 59 234 ± 59 0,581 ± 0,132 ÿ98 ± 3

Tabel 2. Ringkasan analisis distribusi ukuran ufosom.

Tabel 2. Ringkasan analisis distribusi ukuran ufosom.

Formulasi Rata-rata Vesikel Distribusi Ukuran (nm)

Formulasi Rata-rata Diameter Vesikel (nm) Distribusi Ukuran (nm) (rata-rata ± SD) Intensitas (%)(%)
Intensitas
Diameter (nm) (Rata-rata ±
SD) 1207 ± 342 93,7 1207 ± 342 128 ± 27
UFO_1 1282 1285560
± 27 93.7 5.2
UFO_1 1282 5560±947 5.2 1.1
191 1.1 82.7
947 ± 191
UFO_2 894 96 ± 17 96 82.7
UFO_2 894 ± 17 17.3
396 ± 17.3
80 396 ± 72,5
UFO_3 493 80 68 ± 72.5
UFO_3 493 12 68 ± 27,5
12 54 6 27.5
±140546± 65
UFO_4 367 140 86 ± 65
UFO_4 367 35
2121 86 ±
808 35
± 167 808
± 167 59.6 59.6
UFO_5 UFO_5 720 720 123±28
123±28 40.4 40.4
144 ± 50
144 ± 50 71.6 71.6
UFO_6 UFO_6 207 207 782782194
± ± 194 19.4 19.4
42 42
± 9± 9 9 9

Gambar 1. Kurva distribusi ukuran Ufo_6.

Gambar 1. Kurva distribusi ukuran Ufo_6.
2.1.2. Penentuan Efisiensi Penjebakan
2.1.2. Penentuan Efisiensi Penjebakan
Secara keseluruhan, semua formulasi menunjukkan jebakan klotrimazol yang tinggi dengan efisiensi jebakan
berkisar
Secaraantara ~76% hingga
keseluruhan, ~87%
semua menunjukkan
formulasi ufosom
menunjukkan sebagai
jebakan pembawayang
klotrimazol idealtinggi
untukdengan
menjebak obat lipofilik
efisiensi
jebakan
berkisar (Gambar
antara ~76% 2). Ufosom
hingga ~87%mengandung
menunjukkanasam
ufosomlemak yang
sebagai berorientasi
pembawa dalampenjeratan
ideal untuk bentuk bilayer dengan hidrofobik
obat lipofilik
(Gambar 2). Ufosom mengandung asam lemak yang berorientasi dalam bentuk bilayer dengan efisiensi tergolong tinggi
mengarah ke bagian dalam sehingga menghasilkan penjebakan obat yang lebih besar [19]. Formulasi UFO_6
penjeratan
ekor hidrofobik
ke arah interior ~99% untuk satu
mengakibatkan sampel
jebakan obatdiyang
antara rangkap
lebih tiga yang
besar [19]. dianalisis
Formulasi Ufo_6(deviasi standar
memiliki tingkattinggi).
efisiensi penjebakan ~99% untuk satu sampel di antara rangkap tiga yang dianalisis (standar tinggi diamati besar
yang tinggi Meskipun tidak ada perbedaan yang signifikan antara formulasi tersebut, tren jebakannya lebih
denganMeskipun,
deviasi). peningkatan rasio
tidak adalipid obat. Hal
perbedaan ini dapat
yang dikaitkan
signifikan antaradengan kekakuan
formulasi, yang lebihmembran
kecenderungan tinggi dari obat tersebut
ufosomal
yang lebih
jebakan besar
diamati menyebabkan
dengan retensi
peningkatan obat
rasio lipidyang
obat.lebih
Hal besar [22].disebabkan
ini dapat Selain itu, efisiensi penjebakan
karena rasio yang tinggi di
obat terhadap
lipid yang membran
kekakuan lebih tinggi ufosomal
dan lebih rendah dapat dikaitkan
menyebabkan retensidengan
obatadanya
yang lebihlipid yang
besarcukup
[22].untuk terperangkap
Selain itu,
klotrimazol tinggi [32].
Machine Translated by Google
efisiensi penjeratan pada rasio obat terhadap lipid yang lebih rendah dapat dikaitkan dengan adanya lipid yang
cukup 2019,
Molekul untuk24,penjeratan klotrimazol
x UNTUK TINJAUAN PEER[32]. 5 dari 15

Berdasarkan hasil hamburan cahaya dinamis (DLS) dan efisiensi penjeratan, efisiensi penjeratan Ufo_6 pada rasio obat
terhadap lipid tinggi.
yang lebih rendah dapat dikaitkan dengan adanyayang
formulasi 5 dari 15
jebakan
untuk penelitian
yang lebih lanjut karena ukuran vesikel dan Molekul kecil .yang
, 24, cukup dipilih
3139 lipid sebagai
untuk formulasi
jebakan yang [32].
klotrimazol dioptimalkan
efisiensi

Berdasarkan hasil hamburan cahaya dinamis (DLS) dan efisiensi penjeratan, formulasi Ufo_6 dipilih sebagai
formulasi yang dioptimalkan untuk penelitian lebih lanjut karena ukuran vesikel yang kecil UFO_1
dan efisiensi penjeratan
yang tinggi. UFO_2
UFO_3
83,3 ± 13,7
100 85,8 ± 11,3 86,5 ± 5,7 UFO_1
UFO_4
84,9 ± 4,1
76,7 ± 2.376,6 ± 2,7 UFO_2
UFO_5
80
UFO_3
UFO_6
83,3 ± 13,7
100 85,8 ± 11,3 86,5 ± 5,7 UFO_4
60 84,9 ± 4,1
76,7 ± 2.376,6 ± 2,7 UFO_5
80
Efisiensi

40 UFO_6

60
Efisiensi 20
40
0
Formulasi Ufosome
20

Gambar 2. Ringkasan0hasil efisiensi penjebakan ufosom. Data disajikan sebagai mean ± SD

Gambar
(n = 3). 2. Ringkasan hasil efisiensi Formulasi
penjebakan ufosom. Data disajikan sebagai mean ± SD (n
Ufosome
= 3).
Berdasarkan hasil hamburan cahaya dinamis (DLS) dan efisiensi penjebakan, formulasi Ufo_6
2.2. Morfologi
dipilih sebagai2.Permukaan
Gambar formulasi
Ringkasanyang
hasildioptimalkan untuk penelitian
efisiensi penjebakan lebih
ufosom. Data lanjutsebagai
disajikan karena mean
ukuran vesikel
± SD (n yang kecil dan tinggi
efisiensi
= 3). jebakan.
Scanning electron microscopy (SEM) adalah salah satu teknik yang paling banyak digunakan untuk
mempelajari
ke 2.2. morfologi
Morfologi permukaan nano dan mikropartikel. Teknik ini menggunakan berkas elektron sebagai probe
Permukaan
2.2. Morfologi Permukaan
memperoleh gambar partikel beresolusi tinggi, sedangkan DLS memberikan radius hidrodinamik dari Mikroskop
elektronpartikel.
mempelajari pemindaian
Pemindaian (SEM)
mikroskop
Gambar SEM adalah
elektron
dari salah
(SEM)
ufosom satu
adalah teknik yang
salah satu
disediakan paling
teknik
pada banyak
yang
Gambar digunakan
3.paling
Gambarbanyak untuk mempelajari
digunakan
tersebut untuk
mengungkapkan
morfologi
morfologi
yang permukaan
permukaan
berbentuk nano dan
nano
bulat kasar dan mikropartikel.
mikropartikel.
dengan permukaan Teknik
Teknik iniUkuran
halus.ini menggunakan
menggunakan berkas
berkas
vesikel yang elektron
elektron
diamati sebagai
sebagai
dengan probe
SEMprobe
lebih untuk
besarufosom
memperoleh gambar
memperoleh
dibandingkan gambar
denganpartikel
ukuranberesolusi
partikel tinggi,
beresolusi sedangkan
tinggi,
yang diperoleh DLS
sedangkan
dari DLS. memberikan radiusdapat
DLS memberikan
Perbedaan ukuran hidrodinamik
radius sebesar
hidrodinamik
disebabkan oleh
hilangnya
partikel. partikel.
Gambar
selama proses Gambar SEM
SEM dari ufosom
pengeringan dari ufosom disediakan
disediakan padakeruntuhan
udara mengakibatkan pada
Gambar 3.dan Gambar
Gambar 3.
tersebut
peleburan Gambar tersebut
mengungkapkan bahwa
vesikel. mengungkapkan
air bahwa
ufosom berbentuk
ufosom berbentuk bulat
bulat kasar
kasar dengan
dengan permukaan
permukaan halus.
halus. Ukuran
Ukuran vesikel
vesikel yang
yang diamati
diamati dengan
dengan SEM
SEM lebih
lebih besar
besar
dibandingkan dengan ukuran yang diperoleh dari DLS. Perbedaan ukuran dapat disebabkan oleh hilangnya
dibandingkan dengan ukuran yang diperoleh dari DLS. Perbedaan ukuran ini dapat disebabkan oleh hilangnya air
selama proses
air selama pengeringan
proses udara
pengeringan yang
udara mengakibatkan
mengakibatkan keruntuhan
keruntuhan dan
dan peleburan
peleburan vesikel.
vesikel.

(A) (B)

(A) (B)
Gambar 3. Gambar pemindaian mikroskop elektron (SEM) dari ufosom yang mengandung klotrimazol (Ufo_6).
Gambar 3. Gambar pemindaian mikroskop elektron (SEM) dari ufosom yang mengandung klotrimazol (Ufo_6).

2.3. Difraksi Sinar-X

Gambar 3. Gambar pemindaian mikroskop elektron (SEM) dari ufosom yang mengandung klotrimazol (Ufo_6).
Studi difraksi sinar-X (XRD) dilakukan untuk mempelajari perubahan polimorfik senyawa
digunakan dalam formulasi ufosom. Sifat kristal dari senyawa mempengaruhi sifat-sifat penting
Machine Translated by Google
Molekul 2019, 24, x UNTUK TINJAUAN PEER 6 dari 15

2.3. Molekul Difraksi

Sinar-X 2019, 24, 6 dari 15
3139 Studi difraksi sinar-X (XRD) dilakukan untuk mempelajari perubahan polimorfik senyawa yang
digunakan dalam formulasi ufosom. Sifat kristal dari senyawa berpengaruh seperti stabilitas, kelarutan, dan
sifat penting seperti
bioavailabilitas. stabilitas,
Bentuk molekul kelarutan,
obat yangdan bioavailabilitas.
amorf Bentuk molekul obat amorf ditandai dengan
dikarakterisasi
kelarutan yang
peningkatan lebih tinggi dan
bioavailabilitas peningkatan
[33,34]. bioavailabilitas
Difraktogram XRD untuk[33,34]. XRD dengan kelarutan lebih tinggi dan
klotrimazol,
difraktogram
ufosom untuk ufosomkolesterol,
yang mengandung yang memuat klotrimazol,
natrium oleat dan kolesterol,
klotrimazol natrium oleat,
disediakan padadanGambar
klotrimazol disajikan
4. Hasil pada
menunjukkan
Gambar 4. Hasil
karakteristik 10,8ÿ , 13.2ÿ
padamenunjukkan puncak karakteristik
(intensitas pada
tinggi), , 20.3ÿ
10,8°,
19.4ÿ , 21.5ÿ
13,2° , 24.0ÿ ,tinggi),
(intensitas 25.3ÿ , 19,4°, 20,3°,konfirmasi
dan 26.2ÿ puncak
21,5°,
sifat 24,0°,
kristal 25,3°, dan(Gambar
klotrimazol 26,2° mengkonfirmasi sifat
4D). Selain itu, kristalkarakteristik
puncak klotrimazol (Gambar
dicatat 4D). Selain itu,
kolesterol
puncak karakteristik
(15,3ÿ ,15,8ÿ , dan 30ÿ
tercatat untuk kolesterol
) (Gambar (15,3°,
4A) dan 15,8°,
natrium dan(30.3ÿ
oleat 30°) (Gambar
) (Gambar4A) 4C).dan natrium
Namun, XRD
oleatufosom
Hasil (30,3°)yang
(Gambar 4C). Namun,
mengandung klotrimazolhasil XRD daritidak
menunjukkan ufosom
adanyayang mengandung
puncak klotrimazol
karakteristik klotrimazol
menunjukkan
jebakan (Gambartidak adanya
4B). puncak
Hal ini karakteristik
menegaskan klotrimazol
jebakan (Gambar
klotrimazol 4B).ufosom
ke dalam Hal ini dan
menegaskan
transisi klotrimazol
klotrimazol
dari menjadi
bentuk kristal ufosom
menjadi dan transisi
amorf. klotrimazol
Hasil serupa dari
diamati bentuk
dalam kristallain
laporan ke yang
bentuk amorf.
mempelajari
HasilPenjebakan
lipid. serupa diamati dalam
molekul laporan
obat lain yang
ke dalam sistemmempelajari penjebakan
penghantaran molekul
obat berbasis obat
lipid ke dalam penjebakan
[2,32,35,36].
sistem pengiriman obat berbasis [2,32,35,36].

Gambar
Gambar4.4.Difraktogram
Difraktogramdifraksi
difraksisinar-X
sinar-X(XRD) dari
(XRD) (A)
dari kolesterol,
(A) (B)(B)
kolesterol, ufosom yang
ufosom mengandung
yang klotrimazol,
mengandung
klotrimazol, (C) natrium oleat, dan (D)
(C) natrium oleat, dan (D) klotrimazol. klotrimazol.

2.4. Kalorimetri Pemindaian Diferensial

2.4. Kalorimetri Pemindaian Diferensial
Kalorimetri pemindaian diferensial (DSC) adalah teknik yang banyak digunakan untuk memahami pencairan
Kalorimetri pemindaian diferensial (DSC) adalah teknik yang banyak digunakan untuk memahami perilaku
peleburan dan rekristalisasi molekul obat. Ini adalah teknik termo-analisis yang menentukan
dan perilaku rekristalisasi molekul obat. Ini adalah teknik termoanalitik yang menentukan sifat termodinamika
bahan dengan memberikan informasi tentang perubahan polimorfik
sifat termodinamika bahan dengan memberikan informasi tentang perubahan polimorfik ketika
terkena fluks panas yang terkendali [37,38]. Perilaku termal klotrimazol, kolesterol, natrium
ketika terkena fluks panas terkontrol [37,38]. Perilaku termal ufosom yang memuat klotrimazol,
kolesterol, oleat, dan klotrimazol disajikan pada Gambar 5. Termogram DSC klotrimazol
natrium oleat, dan ufosom yang mengandung klotrimazol disajikan pada Gambar 5. Termogram DSC
menunjukkan puncak endotermik yang khas pada 143,98 ÿC. Selain itu, kolesterol memiliki titik leleh
klotrimazol menunjukkan puncak endotermik yang khas pada 143,98 °C. Selain itu, kolesterol memiliki nilai
rata-rata sebesar 147,63 ÿC. Tidak ada perilaku termal spesifik yang diamati untuk natrium oleat dan klotrimazol
titik leleh 147,63 °C. Tidak ada perilaku termal spesifik yang diamati untuk natrium oleat dan ufosom. Hilangnya
karakteristik puncak endotermik klotrimazol pada ufosom terliofilisasi
ufosom yang mengandung klotrimazol. Hilangnya karakteristik puncak endotermik klotrimazol mengkonfirmasi
jebakan dan transformasi dari bentuk kristal menjadi amorf. Termogram DSC
ufosom terliofilisasi mengkonfirmasi jebakan dan transformasi dari kristal menjadi amorf juga mengkonfirmasi
susunan internal obat dalam vesikel [39]. Klotrimazol terperangkap di dalamnya
membentuk. Termogram DSC juga mengkonfirmasi susunan internal obat dalam vesikel [39]. bilayer kolesterol
dan gugus karboksilat natrium oleat berada pada permukaan vesikel. Secara keseluruhan, DSC
Klotrimazol terperangkap dalam lapisan ganda kolesterol dan gugus karboksilat natrium oleat pada hasil
melengkapi hasil XRD.
permukaan vesikel. Secara keseluruhan, hasil DSC melengkapi hasil XRD.
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 7 dari 15

Molekul 2019, 24, x UNTUK TINJAUAN PEER 7 dari 15

Gambar 5. Gambar 5. Kalorimetri pemindaian diferensial (DSC) Termogram (A) natrium oleat, (B)
Kalorimetri pemindaian diferensial (DSC) Termogram (A) natrium oleat, (B) klotrimazol,
klotrimazol, (C) kolesterol, dan (D) ufosom yang mengandung klotrimazol. Puncak endotermik yang
tajam pada (C) kolesterol, dan (D) klotrimazol memuat ufosom. Puncak endotermik yang tajam dalam termogram
termogram (B) dan (C) menunjukkan titik leleh klotrimazol dan kolesterol masing-masing
pada 147,63 °C dan (B,C)
masing-masing 143,98 menunjukkan titik
°C. Tidak ada puncak leleh
terkait klotrimazol
obat dan
yang ditemukan kolesterol
pada ufosom yangpada 147,63
mengandung ÿC dan(D).143,98 ÿC.
klotrimazol
Tidak ada puncak terkait obat yang ditemukan pada ufosom yang mengandung klotrimazol (D).
2.5. Studi Permeasi In-Vitro
2.5. Studi Permeasi In-Vitro
2.5.1. Studi Difusi Kulit
2.5.1. Studi Difusi Kulit penelitian dan pengembangan formulasi, studi permeasi in vitro dilakukan untuk
Dalam
memprediksi permeasi kulit dari formulasi topikal dan transdermal [40,41]. Kami menggunakan sel
aliran untuk penelitian dan pengembangan formulasi, studi permeasi in vitro dilakukan untuk memprediksi kulit
aliran cairan reseptor yang terus menerus untuk menjaga kondisi wastafel. Selain itu, sistem jenis
ini lebih banyak
cocok menyerap formulasi topikalkondisi
untuk mensimulasikan dan transdermal [40,41].
in-vivo dan Kami menggunakan
lebih disukai sel flow-through
untuk beberapa untuk kontinyu
molekul obat
[42]. Untukpercobaan,
aliran cairan reseptor
studi permeasikita24menjaga kondisipada
jam dilakukan wastafel. Apalagi sistem
kulit manusia jenis ini lebih
untuk suspensi ufosomcocok
dan
ufosom dalam gel hidroksi propil metil selulosa (HPMC) (1% dan 2%) dengan blanko sebagai
kontrol. Untuk mensimulasikan kondisi in-vivo dan lebih disukai untuk beberapa molekul obat [42]. Untuk percobaan kami,
SebagaiStudi
yang dipasarkan. perbandingan,
permeasi 24 studi
jampermeasi
dilakukanjugapada dilakukan untuk untuk
kulit manusia krim Clotrimazole
suspensi ufosom1% (Perrigo)
dan ufosom dalam
terdiri dari benzil alkohol, setostearil alkohol, lilin setil ester, oktildodekanol, polisorbat 60,
gel hidroksi propil metil selulosa (HPMC) (1% dan 2%) dengan blanko sebagai kontrol. Untuk perbandingan,
dan sorbitan monostearat. Interval pengambilan sampel adalah 1, 2, 3, 4, 5, 6, 7, 8, 12, 16,
20, dan 24menunjukkan
jam. Studi permeasi hasil juga dilakukan
bahwa klotrimazol untuk melalui
tidak meresap krim Clotrimazole
kulit hingga1%24yang dipasarkan
jam setelah (Perrigo).
permeasi
studisetostearil
benzil alkohol, dari semuaalkohol,
formulasi
lilinyang diuji. Hasil
setil ester, serupa diamati
oktildodekanol, dalam60,
polisorbat laporan yang diterbitkan
dan sorbitan
dalam pengambilan
dimensi. Interval literatur dengan mikroemulsi
sampel adalah 1,klotrimazol
2, 3, 4, 5,[43],
6, 7,klotrimazol memuat
8, 12, 16, 20, dan 24monostearat tiga
jam. Hasil menunjukkan
vesikel hibrida terstruktur [17], dan ufosom roxithromycin [18]. Karena sebagian besar infeksi
jamur , klotrimazol tidak meresap melalui kulit hingga 24 jam setelah studi permeasi
terlokalisasi di permukaan kulit, bioavailabilitas klotrimazol sistemik tidak diperlukan. dari
semua formulasi yang diuji.
Oleh karena Hasil serupa
itu, ufosom diamatipembawa
dapat menjadi dalam laporan yanguntuk
potensial diterbitkan dalam literatur
pemberian
klotrimazol secara topikal. dengan mikroemulsi klotrimazol [43], klotrimazol memuat hibrida terstruktur tiga dimensi
vesikel [17], dan ufosom roxithromycin [18]. Karena sebagian besar infeksi jamur terlokalisasi di
permukaan kulit, bioavailabilitas klotrimazol sistemik tidak diperlukan. Oleh karena itu, ufosom bisa
menjadi pembawa potensial untuk pemberian klotrimazol topikal.

2.5.2. Studi Retensi Kulit (Pengupasan Pita Perekat)

Eksperimen pengupasan pita dilakukan untuk menentukan penetrasi klotrimazol ke dalam

stratum korneum, epidermis, dan dermis kulit. Hasil menunjukkan bahwa akumulasi klotrimazol
pada lapisan stratum korneum-epidermis dan epidermis-dermis secara signifikan lebih tinggi pada ufosom
suspensi dibandingkan dengan gel ufosom dan krim yang dipasarkan (p <0,05). Gel ufosom menunjukkan hasil yang lebih tinggi
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, x UNTUK TINJAUAN PEER 8 dari 15

Molekul 2019, 24, 3139 8 dari 15

2.5.2. Studi Retensi Kulit (Pengupasan Pita Perekat)

Eksperimen pengupasan pita dilakukan untuk mengetahui penetrasi klotrimazol ke dalam kadar
klotrimazol di kulit, namun tidak lebih tinggi secara signifikan dibandingkan dengan yang dipasarkan.
stratum korneum, epidermis, dan dermis kulit. Hasil penelitian menunjukkan adanya akumulasi klotrimazol
krim (p > 0,05).
padaTemuan
lapisan ini konsisten
stratum dengan penelitian
korneum-epidermis danlain di mana obat-obatan
epidermis-dermis secaramasuk ke dalam
signifikan perangkap
lebih tinggi dengan vesikel
lipid ufosomsuspensi
meningkatkan bioavailabilitas
dibandingkan denganobat topikal. dan
gel ufosom Peningkatan
krim yangbioavailabilitas
dipasarkan (p topikal
<0,05). Gel ufosom menunjukkan
kadar klotrimazol
dengan gel ufosom yang dapat yang lebih tinggi
dikaitkan denganpada kulit, namun
mekanisme tidak lebih
simultan tinggi
seperti secara signifikan
(i) peningkatan dibandingkan
kelarutan akibat transformasi
krim yang dipasarkan (p > 0,05). Temuan ini konsisten dengan penelitian lain dimana penjebakan klotrimazol
dari bentuk kristal menjadi amorf, (ii) penetrasi meningkatkan sifat kolesterol
obat ke dalam vesikel lipid meningkatkan bioavailabilitas obat topikal. Peningkatan topikal dan natrium oleat,
dan (iii) interaksi lipid yang tinggi
bioavailabilitas dapat
dapat mengubah
dikaitkan strukturmekanisme
dengan stratum korneum
simultan seperti (i) peningkatan kelarutan
dan (iv) peningkatan aktivitasklotrimazol
untuk transformasi termodinamika [18,44].kristal
dari bentuk Jumlah klotrimazol
menjadi amorf,terakumulasi dalam
(ii) peningkatan stratum
penetrasi
lapisan korneum-epidermis dan epidermis-dermis
sifat kolesterol dan natrium masing-masing
oleat, dan (iii) interaksi lipid yang tinggidiberikan pada Gambar
dapat memodifikasi struktur6stratum
dan 7. Dibandingkan
terdapat ~16korneum
kali, ~2,3dan (iv)
kali, meningkatkan
~1,5 aktivitas
kali peningkatan termodinamika
penetrasi produk [18,44]. Jumlah dengan formulasi yang dipasarkan,
klotrimazol yang terakumulasi di lapisan stratum korneum-epidermis dan epidermis-dermis disediakan dalam
klotrimazol ke dalam stratum korneum dengan suspensi ufosom, gel ufosom 1%, dan gel ufosom 2%,
Gambar 6 dan 7, masing-masing. Dibandingkan dengan formulasi yang dipasarkan, masing-
masing terdapat ~16 kali, ~2,3 kali (Gambar 6). Padahal, jumlah klotrimazol terakumulasi pada epidermis-dermis
~1,5 kali peningkatan penetrasi klotrimazol ke dalam stratum korneum dengan suspensi ufosom, lapisan ~6
gelkali
kali lipat, ~3,3 ufosom 1%,~3,2
lipat, dan dankali
gellipat
ufosom
lebih 2%
tinggi(Gambar 6). Sedangkan,
dengan suspensi jumlah
ufosom, gel klotrimazol
ufosom 1%, dan yang terakumulasi
gel ufosompada lapisan epidermis-dermis
2%, dibandingkan ~6 kaliyang
dengan formulasi lipat,dipasarkan
~3,3 kali lipat, dan ~3,2
(Gambar kali lipatkeseluruhan,
7). Secara lebih tinggi dengan
studi difusi topikal
suspensi ufosom, gel ufosom 1%, dan gel ufosom 2%, dibandingkan dengan formulasi yang dipasarkan
menunjukkan peningkatan penetrasi dan penghantaran klotrimazol yang ditargetkan hanya ke lapisan superior dari klotrimazol.
(Gambar 7). Secara keseluruhan, studi difusi topikal menunjukkan peningkatan penetrasi dan penyampaian
yang ditargetkan pada kulit. Hal ini membuktikan bahwa ufosom bisa efektif dalam meningkatkan konsentrasi obat yang dibutuhkan
klotrimazol hanya pada lapisan atas kulit. Hal ini membuktikan bahwa ufosom bisa efektif pada jaringan kulit
target. meningkatkan konsentrasi obat yang dibutuhkan pada jaringan kulit target.

Krim yang Dipasarkan

Gel Ufosom 2%.
Gel Ufosom 1%.
1200 947,8 ± 166,1 Suspensi Ufosom

900

Klotrimazol

600

141,1 ± 56,8
300
60,8 ± 15,8 94,7 ± 19,7

0
Perumusan

Gambar 6. Jumlah klotrimazol yang terakumulasi pada lapisan stratum korneum-epidermis kulit. Data adalah
MolekulGambar
2019, 24,
6. xJumlah
UNTUK TINJAUAN
klotrimazol terakumulasi pada lapisan stratum korneum-epidermis kulit. Data direpresentasikan sebagai mean ±9 dari 15
PEER
yang
SEM (n = 3).
direpresentasikan sebagai mean ± SEM (n = 3).

500 387,5 ± 54,4

Krim yang Dipasarkan

400 Gel Ufosom 2%.

Gel Ufosom 1%.
214,1 ± 63,8
300 210,8 ± 28,1 Suspensi Ufosom
Klotrimazol

200
64,4 ± 22,3
100

0
Perumusan

Gambar 7. Jumlah
Gambar klotrimazol
7. Jumlah yang
klotrimazol yang terakumulasi
terakumulasi pada lapisanpada lapisankulit.
epidermis-dermis epidermis-dermis kulit.
Data adalah mean ± SEM (n = 3).Data terwakili
direpresentasikan sebagai mean ± SEM (n = 3).

3. Bahan dan Metode

3.1. Bahan

Klotrimazol dan kolesterol dibeli dari Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA). Natrium oleat dibeli dari TCI
America (Portland, OR, USA). Metanol (tingkat ACS), metanol (tingkat HPLC), PBS (pH 7,4), dan kloroform
diperoleh dari Fisher Chemicals (Fair Lawn, NJ, USA). Hidroksi propil metil selulosa (HPMC) (MW: 86.000,
viskositas 4000 cP pada larutan 2%) adalah
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 9 dari 15

3. Bahan dan Metode

3.1. Bahan

Klotrimazol dan kolesterol dibeli dari Alfa Aesar (Ward Hill, MA, USA). Natrium oleat dibeli dari TCI America
(Portland, OR, USA). Metanol (tingkat ACS), metanol (tingkat HPLC ), PBS (pH 7,4), dan kloroform diperoleh dari
Fisher Chemicals (Fair Lawn, NJ, USA).
Hidroksi propil metil selulosa (HPMC) (MW: 86.000, viskositas 4000 cP pada larutan 2%)
diperoleh dari Acros Organics (Fair Lawn, NJ, USA). Kulit mayat untuk studi permeasi dan
difusi kulit diperoleh dari Zen-Bio Inc., (Research Triangle Park, NC, USA). Krim Clotrimazole
1% yang dipasarkan (Perrigo) dibeli dari toko farmasi lokal di El Paso, TX, AS. Air deionisasi
(resistivitas 18,2 Mÿ) yang digunakan untuk semua percobaan diperoleh dari Sistem Air Ultra
Murni Milli-Q® IQ 7000 (EMD Millipore, Bedford, MA, USA).

3.2. Metode

3.2.1. Persiapan Ufosom

Ufosom yang mengandung klotrimazol dibuat menggunakan metode hidrasi film tipis yang
dilaporkan dalam literatur dengan sedikit modifikasi [18,19,45]. Secara singkat, semua komponen vesikel
(klotrimazol, natrium oleat dan kolesterol) dilarutkan dalam 10 mL larutan kloroform-metanol (1:2).
Larutan bening yang diperoleh dipindahkan ke gelas kimia dan disimpan dalam pengaduk magnet agar
pelarut menguap sempurna sampai terbentuk lapisan tipis. Film tipis kemudian dihidrasi dengan 5 mL
PBS (pH 7,4) selama 2 jam. Dispersi vesikuler yang terbentuk disonikasi selama 5 menit hingga
diperoleh ufosom dengan ukuran seragam. Optimasi formulasi dilakukan dengan menyaring enam rasio
klotrimazol, natrium oleat dan kolesterol yang berbeda untuk ukuran vesikel dan efisiensi penjeratan.
Gel ufosomal untuk studi permeasi dibuat dengan menambahkan 100 mg (2% b/v) dan 50 mg (1% b/v)
HPMC ke dispersi vesikuler yang dioptimalkan.

3.2.2. Penentuan Ukuran Vesikel, Indeks Polidispersitas, dan Potensi Zeta

Teknik hamburan cahaya dinamis (DLS) yang menerapkan spektroskopi korelasi foton digunakan
untuk mengukur ukuran vesikel dan indeks polidispersitas. Potensi zeta ditentukan dengan mengukur
mobilitas elektroforesis. Sampel dispersi ufosomal (100 µL) diencerkan dalam 10 mL air deionisasi
suling ganda dan pengukuran dilakukan dengan menggunakan Malvern Zetasizer (Nano ZS90, Malvern,
Worcestershire, UK) pada suhu 25 ÿC. Semua percobaan dilakukan dalam rangkap tiga.

3.2.3. Kuantifikasi Klotrimazol dengan HPLC

Konsentrasi klotrimazol dalam semua sampel yang diperoleh selama analisis ditentukan menggunakan
HPLC Waters Alliance e2695 dengan detektor susunan fotodioda 2998 dan perangkat lunak Empower 3.0.
Pemisahan klotrimazol dilakukan pada kolom fase terbalik-C18 (Phenomenex®; 250 × 4,6 mm; ukuran
partikel 5 µm) pada suhu 25 ÿC dalam kondisi isokratik. Fase geraknya adalah metanol-air (90:10 v/v)
dengan laju aliran 1 mL/menit. Sampel 20 ÿL disuntikkan dan analit dipantau pada 229 nm selama 10 menit.
Waktu retensi klotrimazol adalah 5,5 menit. Semua sampel standar disiapkan dengan metanol dan disaring
melalui filter 0,45 µm sebelum injeksi [13].

3.2.4. Penentuan Efisiensi Penjebakan

Efisiensi penjeratan formulasi ditentukan dengan menggunakan metode ultra-sentrifugasi [30].

Singkatnya, dispersi vesikular dipindahkan ke tabung dan disentrifugasi pada 15.000 rpm selama 4 jam pada suhu
4 ÿC (Beckman Ultracentrifuge). Supernatan dibuang untuk menghilangkan obat yang tidak terperangkap dalam
formulasi. Endapan lipid yang diperoleh kemudian dicampur dengan metanol, rendaman disonikasi selama 30
menit, dan disimpan semalaman dalam penangas air gemetar (25 ÿC; 100 rpm) untuk ekstraksi lengkap klotrimazol
yang terperangkap. Larutan yang dihasilkan disentrifugasi pada 15.000 rpm selama 30 menit pada suhu 4 ÿC hingga
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 10 dari 15

pisahkan lapisan metanol dan lipid, jika ada. Setelah sentrifugasi, supernatan diencerkan dengan tepat
dan konsentrasi klotrimazol yang terperangkap ditentukan menggunakan HPLC. Efisiensi jebakan
dihitung menggunakan rumus berikut.

Efisiensi penjebakan (%EE) = (Jumlah klotrimazol yang tersisa dalam vesikel)/

(1)
(Jumlah awal klotrimazol) × 100.

3.2.5. Morfologi Permukaan

Mikroskop elektron pemindaian Quanta 600F dengan sumber emisi lapangan resolusi tinggi (ThermoFisher Scientific, Hillsboro,
OR) digunakan untuk mempelajari morfologi permukaan ufosom. Sebelum pencitraan, sampel didispersikan dalam metanol dan
campuran diteteskan ke sepotong wafer silikon (5 × 5 mm) dan difiksasi dengan pita konduktif dua sisi. Selanjutnya sampel
dikeringkan di udara dan dilapisi dengan emas menggunakan sputter emas (Gatan 682 Precision Etching and Coating System (PECS)

(Gatan, Inc., Pleasanton, CA, AS)). Gambar ufosom beresolusi tinggi divisualisasikan dalam kondisi
vakum tinggi pada tegangan akselerasi 20 keV.

3.2.6. Analisis XRD

Analisis XRD dilakukan dengan menggunakan Difraktometer Sinar-X Rigaku Miniflex (Rigaku Corporation, Tokyo, Jepang).
Pita perekat dua sisi diaplikasikan pada tempat sampel dan sampel bubuk (terliofilisasi) dituangkan ke tempat sampel menggunakan
spatula tipis. Intensitas berkas difraksi dianalisis dalam kisaran 2ÿ antara 10ÿ dan 70ÿ .
Semua sampel dianalisis menggunakan perangkat lunak JADE.

3.2.7. DSC

Analisis DSC dilakukan untuk ufosom terliofilisasi, klotrimazol, natrium oleat dan kolesterol menggunakan
instrumen DSC822e (Mettler Toledo). Sampel (5–10 mg) ditimbang dalam panci aluminium 40 ÿL dan
ditutup rapat menggunakan alat crimping. Panci aluminium kosong digunakan sebagai standar acuan di sisi
lain. Nitrogen digunakan sebagai gas pembersih selama analisis pada laju aliran 20 mL/menit. Sampel
ditahan pada suhu isoterm 0 ÿC selama 5 menit kemudian dipanaskan pada 10 ÿC/menit hingga 260 ÿC
(dari 0–260 ÿC, 260–0 ÿC, 0–260 ÿC, dan terakhir 260–0 ÿC ). Semua termogram dicatat dan dianalisis
menggunakan perangkat lunak STARe.

3.2.8. Studi Permeasi In-Vitro

Persiapan Kulit
Studi penetrasi kulit dilakukan dengan menggunakan kulit mayat manusia yang dihilangkan
lemaknya dari daerah perut laki-laki Kaukasia (ZenBio Inc., Research Triangle Park, NC, USA,
Lot#SKIN122117C). Kulit yang diperoleh dari bank kulit disimpan dalam freezer bersuhu ÿ20 ÿC
sampai dibutuhkan. Untuk studi permeasi, sampel kulit dicairkan pada suhu 4 ÿC selama 24 jam.
Pada hari studi permeasi, sampel kulit dikeluarkan dari suhu 4 ÿC dan dibiarkan seimbang pada suhu
kamar selama 15 menit. Setelah keseimbangan, kulit dicukur untuk menghilangkan rambut.
Selanjutnya, kulit direhidrasi dalam 150 mL PBS (pH 7,4) selama 30 menit pada suhu kamar [46,47].
,
Segera setelah rehidrasi, seluruh ketebalan kulit dipotong sesuai ukuran sel in-line PermeGear®, 1,77
cm2 dan dipasang di antara kompartemen donor dan reseptor untuk studi difusi kulit [48].

Aliran Otomatis melalui Sel Difusi

Studi permeasi in vitro dilakukan dengan menggunakan sistem otomatis PermeGear® ILC-07
(PermeGear, Riegelsville, PA, USA) yang digabungkan dengan tujuh sel difusi aliran in-line, yang
terbuat dari Kel-F. Sel difusi berisi ruang donor dan reseptor yang dijepit menggunakan batang berulir
dengan mur pengunci yang dapat disesuaikan. Port inlet dan outlet dari ruang reseptor ( volume ruang
reseptor 254 ÿL ) dihubungkan ke tabung Tygon yang memiliki fitting HPLC 1/4-28 dan semua sel ditempatkan di
Machine Translated by Google
Aliran Otomatis melalui Sel Difusi

Studi permeasi in vitro dilakukan dengan menggunakan sistem otomatis PermeGear® ILC-07
(PermeGear, Riegelsville, PA, USA) yang digabungkan dengan tujuh sel difusi aliran in-line, yang terbuat
dari Kel-F.
pengunci Sel difusi berisi ruang donor dan reseptor yang dijepit menggunakan batang berulir dengan
yang mur
11 dari 15
dapat disesuaikan Molekul 2019, 24, 3139 . Port masuk dan keluar dari ruang reseptor (volume ruang
reseptor 254 ÿL) dihubungkan ke tabung Tygon yang memiliki fitting HPLC 1/4-28 dan semua sel
penghangatdalam
ditempatkan sel yang terhubung
penghangat ke penangas
sel yang terhubungairkesirkulasi
penangas Julabo BC4 (Seelbach,
air sirkulasi Julabo BC4Jerman) untuk
( Seelbach, Jerman) untuk mempert
menjaga suhu
suhu pada pada
37°C. 37 ÿC.
Semua Semua sel dihubungkan
sel dihubungkan ke pompa
ke pompa peristaltik peristaltik multi-saluran®
multi-saluran® IPC (Ismatec,
IPC (Ismatec, Zurich, Swiss)
Zurich,
yang Swiss) yang
mengambil larutanmengambil larutan
reseptor dari reseptor
reservoir dari8).
(Gambar reservoir
Diameter(Gambar 8). Diameter area difusi
adalah 1 cm
luas difusi (total1area
adalah difusi:
cm (total 0,785
luas difusi:cm2 ). Kulit
0,785 cm2).dengan ketebalan
Kulit dengan penuh
ketebalan (menghadap
penuh (epidermisepidermis
menghadap
kompartemen
kompartemen)donor donor)
dipasang di dipasang
sel antaradiruang
sel antara
donorruang donor dan
dan reseptor danreseptor dan dijepit
dijepit menggunakan mur pengunci
yang dapat disesuaikan. Formulasi ditempatkan di ruang donor dan reseptor
mur pengunci yang dapat disesuaikan. Formulasi ditempatkan di ruang donor dan cairan reseptor ( cairan
pH 7,4)
PBS (PBSdipompa
pH 7.4) dengan
dipompalaju aliranlaju
dengan 4 mL/jam
aliran 4melalui
mL/jamsetiap
melaluisel. Cairan
setiap sel.reseptor dikumpulkan
Cairan reseptor dalam
dikumpulkan
botol
botolreseptor
reseptor berkapasitas
berkapasitas 20 mL pada
20 mL pada interval
interval waktu
waktuyang
yangtelah
telahditentukan
ditentukanhingga
hingga2424jam
jam [42,49].
[42,49]. Jumlah
Jumlah
klotrimazol
klotrimazolyang
yangmeresap
meresapmelalui
melaluikulit
kulitditentukan
ditentukandengan
denganmenganalisis
menganalisissampel
sampelmenggunakan
menggunakanHPLC
HPLC
metode
metodeyang
yangdijelaskan
dijelaskandidibagian
bagiansebelumnya.
sebelumnya.

Gambar
Gambar8.8.Aliran
Aliranotomatis
otomatismelalui
melaluisel.
sel.
Pengupasan Pita

Metode pengupasan pita yang dilaporkan dalam literatur digunakan untuk menentukan jumlah
klotrimazol terakumulasi pada lapisan stratum korneum-epidermis dan epidermis-dermis kulit.
Setelah studi permeasi kulit selesai, sampel kulit yang dipasang dikeluarkan dengan hati-hati
sel dan ditempatkan pada permukaan datar untuk melihat area difusi. Formulasi berlebih pada kulit
permukaannya dihilangkan dengan cara mengusap lembut kulit menggunakan tisu lembut. Stratum korneum dan beberapa bagiannya
lapisan epidermis dipisahkan menggunakan 3M Scotch® Magic tape™. Kaset yang sudah dipotong sebelumnya ditempelkan pada
kulit dengan ibu jari dan segera diangkat menggunakan tang untuk menghilangkan stratum-korneum (strip pertama
dibuang). Rata-rata diperlukan 10 strip untuk menghilangkan stratum korneum sepenuhnya. Itu
sisa lapisan epidermis-dermis kulit dipotong kecil-kecil dengan menggunakan gunting bedah yang bersih. Semua
strip (kecuali yang pertama) dan potongan kulit dipindahkan ke tabung berbentuk kerucut dengan 10 mL metanol
dan klotrimazol diekstraksi dengan sonikasi dalam penangas air ultrasonik selama 30 menit dan didiamkan
semalaman pada suhu 4 ÿC. Setelah ekstraksi, larutan yang dihasilkan disentrifugasi selama 30 menit pada 15.000 rpm dan
kandungan obat dalam supernatan dianalisis menggunakan HPLC [18,44,50,51].

3.2.9. Analisis statistik

Analisis statistik dilakukan dengan menggunakan perangkat lunak GraphPad Prism® (versi 5.0, San Diego, CA,
AMERIKA SERIKAT). Data dinyatakan sebagai mean ± SD untuk hasil DLS dan efisiensi penjebakan, dan mean ± SEM
untuk hasil difusi kulit. ANOVA satu arah diikuti dengan posttest Bonferroni diterapkan
untuk menentukan signifikansi statistik. Nilai p <0,05 dianggap signifikan secara statistik.
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 12 dari 15

4. Kesimpulan

Terjebaknya obat hidrofobik ke dalam vesikel berbasis lipid dapat meningkatkan bioavailabilitas topikal.
Dalam penelitian ini, kami berhasil menyiapkan ufosom yang mengandung klotrimazol menggunakan
kolesterol dan natrium oleat. Formulasi yang dioptimalkan dengan ukuran vesikel <250 nm dan efisiensi
penjeratan yang tinggi diperoleh dengan rasio klotrimazol (50 mg), kolesterol (100 mg), dan natrium oleat (100 mg) 1:2:2.
Hasil DSC dan XRD mengkonfirmasi keberhasilan penjebakan klotrimazol ke dalam ufosom. Morfologi bola
ufosom dikonfirmasi oleh SEM. Studi permeasi in-vitro menggunakan kulit manusia menunjukkan bahwa
klotrimazol tidak meresap melalui kulit. Studi difusi topikal (pengupasan pita) menegaskan bahwa suspensi
ufosom secara signifikan meningkatkan akumulasi obat yang sangat lipofilik (clotrimazole) ke dalam
epidermis dan dermis dibandingkan dengan gel ufosom dan krim yang tersedia secara komersial. Dengan
demikian, penelitian ini membuktikan bahwa ufosom dapat menjadi pembawa potensial untuk meningkatkan
bioavailabilitas topikal dan pemberian obat yang ditargetkan. Namun, hasil dari penelitian ini masih bersifat
awal dan harus dikonfirmasi lebih lanjut dengan pengembangan formulasi yang mendalam, stabilitas, dan
studi praklinis sebelum penerapan klinis.

Kontribusi Penulis: Konseptualisasi, JR dan PKB; metodologi, PKB, CAM, VAR, ID, MS; analisis formal , PKB, JR, VKY; investigasi,
JR; penulisan—penyusunan draf asli, PKB, CAM; penulisan—review dan penyuntingan, JR, VKY; pengawasan, JR

Pendanaan: Penelitian ini tidak menerima pendanaan eksternal.

Ucapan Terima Kasih: Penulis berterima kasih kepada Stephanie Soto dan Julian Franco atas bantuannya selama analisis ukuran
dan studi jebakan.
Konflik Kepentingan: Penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi

1. Bongomin, F.; Gago, S.; Oladele, RO; Denning, WD Prevalensi Jamur Global dan Multi-Nasional
Penyakit—Perkirakan Presisi. J. Jamur 2017, 3, 57. [CrossRef] [PubMed]
2. AbouSamra, MM; Basa, M.; Awad, GEA; Mansy, SS Hidrogel nanokapsular nistatin yang menjanjikan sebagai pembawa polimer
antijamur untuk pengobatan kandidiasis topikal. J. Pengiriman Obat. Sains. Teknologi. 2019, 49, 365–374. [Referensi Silang]

3. Gupta, M.; Sharma, V.; Chauhan, NS Bab 11—Nanofarmasi Baru yang Menjanjikan untuk Meningkatkan Pengiriman Obat Antijamur
Topikal. Dalam Sistem Pengiriman Obat Skala Nano dan Mikro; Grumezescu, AM, Ed.; Elsevier: Amsterdam, Belanda, 2017;
hlm.197–228. [Referensi Silang]
4. Shivakumar, HN; Juluri, A.; Desai, BG; Murthy, SN Pemberian obat ungual dan transungual. Pengembang Obat.
Ind.Pharm. 2012, 38, 901–911. [Referensi Silang] [PubMed]
5. Alam, MA; Al-Janoobi, FI; Alzahrani, KA; Al-Agamy, MH; Abdelgalil, AA; Al-Mohizea, AM Khasiat in-vitro mikroemulsi topikal
klotrimazol dan ketokonazol; dan kinerja mikroemulsi klotrimazol secara in-vivo . J. Pengiriman Obat. Sains. Teknologi. 2017,
39, 408–416. [Referensi Silang]
6. Maheshwari, RGS; Tekade, RK; Sharma, PA; Darwhekar, G.; Tyagi, A.; Patel, RP; Jain, DK Ethosomes dan liposom ultradeformable
untuk pengiriman klotrimazol transdermal: Penilaian komparatif. Farmasi Saudi . J.2012 , 20, 161–170. [Referensi Silang]
[PubMed]
7. Nami, S.; Aghebati-Maleki, A.; Morovati, H.; Aghebati-Maleki, L. Obat antijamur saat ini dan pendekatan imunoterapi sebagai
strategi yang menjanjikan untuk pengobatan penyakit jamur. Bioma. Apoteker.
2019, 110, 857–868. [Referensi Silang]
8. Benar, EA; Nasr, M.; Sammour, O.; el Gawad, NAA Kemajuan terkini dalam formulasi topikal pembawa agen antijamur. J.
Dermatol India. Venereol. kusta. 2015, 81, 457–463. [Referensi Silang]
9. Gupta, PN; Mishra, V.; Rawat, A.; Dubey, P.; Mahor, S.; Jain, S.; Chatterji, DP; Vyas, SP Pemberian vaksin non-invasif pada
transfersom, niosom dan liposom: Studi perbandingan. Int. J.Pharm. 2005, 293, 73–82. [Referensi Silang]

10. Juluri, A.; Modepalli, N.; Jo, S.; Repka, MA; Shivakumar, HN; Murthy, NS Pengiriman besi-dekstran transdermal invasif minimal.
J.Pharm. Sains. 2013, 102, 987–993. [Referensi Silang]
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 13 dari 15

11. Juluri, SA; Murthy, N. Pengiriman iontoforetik transdermal dari obat lipofilik cair melalui kompleksasi dengan
siklodekstrin anionik. J.Kontrol. Rilis 2014, 189, 11–18. [Referensi Silang]
12. Rakyat, PV; Singh, KK Pengembangan dan evaluasi pembawa nanolipid termodifikasi koloid: Aplikasi untuk pemberian tacrolimus topikal. euro.
J.Pharm. Biofarmasi. 2011, 79, 82–94. [Referensi Silang] [PubMed]
13. Santos, SS; Lorenzoni, A.; Ferreira, LM; Mattiazzi, J.; Adams, AIH; Denardi, LB; Alves, SH; Schaffazick, SR;
Cruz, nanokapsul Eudragit® RS100 yang diisi L. Clotrimazole : Persiapan, karakterisasi dan evaluasi in
vitro aktivitas antijamur terhadap spesies Candida. Materi. Sains. bahasa Inggris Sejak 2013, 33, 1389–1394.
[Referensi Silang] [PubMed]

14. Waugh, CD Klotrimazol. Kompr.XPharm. Farmakol. Ref. 2007, 2011, 1–4. [Referensi Silang]
15. Rahwani, L.; Esposito, E.; Bories, C.; Moal, VL-L.; Loiseau, PM; Djabourov, M.; Cortesi, R.; Bouchemal, K.
Hidrogel pembawa lipid berstruktur nano yang memuat klotrimazol: Analisis termal dan studi in vitro . Int. J.
farmasi. 2013, 454, 695–702. [Referensi Silang] [PubMed]

16. Esposito, E.; Rahwani, L.; Contado, C.; Costenaro, A.; Drechsler, M.; Rossi, D.; Menegatti, E.; Grandini, A.; Cortesi, gel nanopartikel R. Clotrimazole
untuk pemberian mukosa. Materi. Sains. bahasa Inggris Sejak 2013, 33, 411–418.
[Referensi Silang] [PubMed]
17. Manca, ML; Usach, saya.; Peris, JE; Ibba, A.; Orru, G.; Valenti, D.; Escribano-Ferrer, E.; Gomez-Fernandez, JC; Aranda, FJ; Fadda, AM; dkk.

Optimalisasi Vesikel Hibrid Terstruktur Tiga Dimensi yang Inovatif untuk Meningkatkan Pengiriman Klotrimazol ke Kulit untuk Pengobatan
Kandidiasis Topikal. Farmasi 2019, 11, 263. [CrossRef] [PubMed]

18. Csongradi, C.; du Plessis, J.; Aucamp, AKU; Gerber, M. Pengiriman topikal bentuk padat roxithromycin yang terperangkap dalam vesikel. euro.
J.Pharm. Biofarmasi. 2017, 114, 96–107. [Referensi Silang] [PubMed]
19. Patel, DM; Patel, CN; Jani, R. Ufasomes: Pengiriman obat vesikular. sistem. Pdt. Farmasi. 2011, 2. [Referensi Silang]
20. Badan Pengawas Obat dan Makanan AS. Pencarian Bahan Tidak Aktif untuk Produk Obat yang Disetujui. Tersedia online: https://www.accessdata.
fda.gov/scripts/cder/iig/index.cfm (diakses pada 28 Juli 2019).
21. 10 Laporan Akhir Penilaian Keamanan Kolesterol. Selai. Kol. beracun. 1986, 5, 491–516. [Referensi Silang]
22. Doppalapudi, S.; Jain, A.; Chopra, DK; Khan, W. Psoralen memuat nanocarrier liposom untuk meningkatkan penetrasi kulit dan kemanjuran PUVA
topikal pada psoriasis. euro. J.Pharm. Sains. 2017, 96, 515–529. [Referensi Silang]
[PubMed]
23. Kavian, Z.; Alavizadeh, SH; Golmohamadzadeh, S.; Badiee, A.; Khamesipour, A.; Jaafari, MR Pengembangan liposom topikal yang mengandung
miltefosine untuk pengobatan infeksi utama Leishmania pada tikus BALB/c yang rentan. Akta Trop. 2019, 196, 142–149. [Referensi Silang]
[PubMed]
24. Md, S.; Haque, S.; Madheswaran, T.; Zeeshan, F.; Meka, VS; Radhakrishnan, AK; Kesharwani, sistem nanocarrier berbasis P. Lipid untuk
pengiriman fotosensitizer topikal. Penemuan Narkoba. Hari ini 2017, 22, 1274–1283.
[Referensi Silang] [PubMed]

25. Roberts, MS; Muhammad, Y.; Pastore, MN; Namjoshi, S.; Yusuf, S.; Alinaghi, A.; Haridass, DI; Abd, E.; Leite-Silva, VR; Benson, HAE; dkk.
Pengiriman topikal dan kulit menggunakan sistem nano. J.Kontrol. Rilis 2017, 247, 86–105. [Referensi Silang] [PubMed]

26. Meng, S.; Matahari, L.; Wang, L.; Lin, Z.; Liu, Z.; Xi, L.; Wang, Z.; Zheng, Y. Memasukkan celastrol yang tidak larut dalam air ke dalam hidrogel
niosom untuk meningkatkan permeasi topikal dan aktivitas anti-psoriasis. Selancar Koloid. B Biointerface 2019, 182, 110352. [CrossRef]
[PubMed]

27. Kravchenko, I.; Boyko, Y.; Novikova, N.; Egorova, A.; Andronati, S. Pengaruh kolesterol dan esternya terhadap penetrasi kulit in vivo dan in vitro
pada tikus dan mencit. Ukraina Bioorg. Undang-undang 2011, 1, 17–21.
28. Witteveen, F. Komposisi Penyedap Topikal Terdiri dari Asam Oleat dan Natrium Oleat. Paten AS US20180042289A1, 15 Februari 2018. Tersedia
online: https://patentimages.storage.googleapis.com/36/03/ 66/a8e8457f053715/US20180042289A1.pdf (diakses pada 28 Agustus 2019).

29. Oliveira, MB; Calixto, G.; Graminha, M.; Cerecetto, H.; González, M.; Chorilli, M. Pengembangan, Karakterisasi, dan Kinerja Biologis In Vitro
Mikroemulsi Bermuatan Flukonazol untuk Pengobatan Topikal Leishmaniasis Kulit. BioMed Res. Int. 2015, 2015, 396894. [Referensi Silang]
[PubMed]
30. Salama, AH; Aburahma, MH Platform lyophilized berbasis nano-vesikel Ufasomes untuk pengiriman cinnarizine intranasal: Persiapan, optimasi,
penilaian keamanan histopatologis ex-vivo dan pencitraan confocal mukosa. farmasi. Dev. Teknologi. 2016, 21, 706–715. [Referensi Silang]
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 14 dari 15

31. Tavano, L.; Mazzotta, E.; Muzzalupo, R. Formulasi topikal inovatif dari natrium diklofenak digunakan sebagai obat surfadrug:
Kelahiran Diclosomes. Selancar Koloid. B Biointerface 2018, 164, 177–184. [Referensi Silang]
32. Das, S.; Ng, Minggu; Tan, RBH Apakah pembawa lipid berstrukturnano (NLC) lebih baik daripada nanopartikel lipid padat (SLN):
Pengembangan, karakterisasi, dan evaluasi komparatif SLN dan NLC yang mengandung klotrimazol ? euro. J.Pharm. Sains.
2012, 47, 139–151. [Referensi Silang]
33. Bolla, PK; Kalhapure, RS; Rodriguez, VA; Ramos, DV; Dahl, A.; Renukuntla, J. Persiapan nanopartikel lipid padat kompleks
furosemide-perak dan evaluasi aktivitas antibakteri. J. Pengiriman Obat. Sains. Teknologi.
2019. [Referensi Silang]

34. Renukuntla, J. FSE–Ag kompleks NS: Persiapan dan evaluasi aktivitas antibakteri. IET Nanobioteknologi.
2018, 1, 1–5. [Referensi Silang]

35. Jaiswal, MK; Pradhan, A.; Banerjee, R.; Bahadur, D. Nanohidrogel magnetik yang responsif terhadap rangsangan suhu dan pH
ganda untuk termo-kemoterapi. J.Nanosci. Nanoteknologi. 2014, 14, 4082–4089. [Referensi Silang] [PubMed]
36. Bose, S.; Michniak-Kohn, B. Persiapan dan karakterisasi sistem nano berbasis lipid untuk pengiriman topikal
dari kuersetin. euro. J.Pharm. Sains. 2013, 48, 442–452. [Referensi Silang] [PubMed]
37. Ribeiro, LNM; Franz-Montan, M.; Breitkreitz, MC; Alcântara, ACS; Castro, SR; Guilherme, VA; Barbosa, E.; de Paula, RM Pembawa
lipid berstrukturnano sebagai sistem yang kuat untuk pelepasan lidokain-prilokain topikal dalam kedokteran gigi. euro. J.Pharm.
Sains. 2016, 93, 192–202. [Referensi Silang] [PubMed]
38. Rodriguez, VA; Bolla, PK; Kalhapure, RS; Boddu, SHS; Neupane, R.; Franco, J.; Renukuntla, J. Persiapan dan Karakterisasi
Nanopartikel Kitosan Bermuatan Kompleks Furosemid-Perak. Proses 2019, 7, 206.
[Referensi Silang]

39. Buchiraju, R.; Sreekanth, DN; Bhargavi, S.; Rao, CH; Kommu, A.; Kishore, J.; Chebrolu, B.; Yedulapurapu, N.; Bosco, D. Sistem
Pengiriman Obat Vesikular -Pandangan Umum. Res. J.Pharm. biologi. kimia. Sains. 2013, 4, 462–474.
Tersedia online: https://www.researchgate.net/publication/255786699_Vesicular_Drug_Delivery_System_ -Gambaran (diakses
pada 28 Agustus 2019).
40. Ruela, ALM; Figueiredo, EC; Perissinato, AG; Lima, ACZ; AraÃ\textordmasculinejo, MB; Pereira, GR
Evaluasi in vitro sistem pengiriman nikotin transdermal tersedia secara komersial di Brasil, Brasil.
J.Pharm. Sains. 2013, 49, 579–588. Tersedia daring: http://www.scielo.br/scielo.php?script=sci_arttext&pid=
S1984-82502013000300020&nrm=iso (diakses pada 28 Agustus 2019).
41. Azarmi, S.; Roa, W.; Lobenberg, R. Perspektif terkini dalam pengujian disolusi konvensional dan novel
bentuk sediaan. Int. J.Pharm. 2007, 328, 12–21. [Referensi Silang]
42. Córdoba-Díaz, M.; Nova, M.; Elorza, B.; Córdoba-Díaz, D.; Penyanyi, JR; Córdoba-Borrego, M.
Protokol validasi peralatan difusi aliran in-line otomatis untuk studi permeasi in vitro . J.Kontrol.
Rilis 2000, 69, 357–367. [Referensi Silang]
43. Kaewbanjong, J.; Amnuaikit, T.; Selatan, EB; Boonme, P. Aktivitas Antidermatofit dan Retensi Kulit Mikroemulsi Klotrimazol dan
Gel Berbasis Mikroemulsi Dibandingkan dengan Krim Konvensional. Farmakol Kulit . Fisiol. 2018, 31, 292–297. [Referensi
Silang]
44. Dwivedi, A.; Mazumder, A.; Rubah, LT; Brummer, A.; Gerber, M.; du Preez, JL; Haynes, RK; du Plessis, J.
Penetrasi artemison pada kulit secara in vitro dan formulasi nano-vesikularnya. Int. J.Pharm. 2016, 503, 1–7.
[Referensi Silang] [PubMed]

45. Verma, S.; Bhardwaj, A.; Vij, M.; Bajpai, P.; Goutam, N.; Kumar, L. Vesikel asam oleat: Pendekatan baru untuk pemberian agen
antijamur topikal. Artif. Sel Nanomed. Bioteknologi. 2014, 42, 95–101. [Referensi Silang] [PubMed]
46. Barbero, SAYA; Frasch, HF Pengaruh Lama Penyimpanan Epidermis Manusia Beku dan Krioprotektan terhadap Fungsi Barrier
Menggunakan Dua Model Senyawa. Farmakol Kulit. Fisiol. 2016, 29, 31–40. [Referensi Silang]
[PubMed]
47. Pere, CPP; Ekonomidou, SN; Lall, G.; Ziraud, C.; Boateng, JS; Alexander, BD; Lamprou, DA; Douroumis, D. Jarum mikro cetak 3D
untuk pengiriman insulin ke kulit. Int. J.Pharm. 2018, 544, 425–432.
[Referensi Silang] [PubMed]

48. Hopf, NB; Berthet, A.; Vernez, D.; Langard, E.; Musim semi, P.; Gaudin, R. Permeasi kulit dan metabolisme di(2-ethylhexyl)
phthalate (DEHP). beracun. Biarkan. 2014, 224, 47–53. [Referensi Silang] [PubMed]
49. De Leon, AS; Molina, M.; Wedepohl, S.; Munoz-Bonilla, A.; Rodriguez-Hernandez, J.; Calderon, M.
Imobilisasi Nanogel Responsif Stimuli ke Permukaan Berpori Sarang Lebah dan Pelepasan Protein Terkendali. Langmuir 2016,
32, 1854–1862. [Referensi Silang] [PubMed]
Machine Translated by Google

Molekul 2019, 24, 3139 15 dari 15

50. Kahraman, E.; Ne¸seto ÿglu, N.; Güngör, S.; Unal, D.¸S.; Özsoy, Y. Kombinasi nanomicelles dengan terpen
untuk peningkatan pengiriman obat kulit. Int. J.Pharm. 2018, 551, 133–140. [Referensi Silang]
51. Pengikat, L.; Jatschka, J.; Kulovits, EM; Seeböck, S.; Kählig, H.; Valenta, C. Pemantauan penetrasi simultan komponen
minyak dan obat aktif dari nanoemulsi terfluorinasi. Int. J.Pharm. 2018, 552, 312–318. [Referensi Silang]

Ketersediaan Sampel: Tidak tersedia.

© 2019 oleh penulis. Pemegang Lisensi MDPI, Basel, Swiss. Artikel ini adalah artikel akses terbuka
yang didistribusikan berdasarkan syarat dan ketentuan Atribusi Creative Commons
(CC BY) lisensi (http://creativecommons.org/licenses/by/4.0/).