MAKALAH PBL LAB ANALISIS FARMASI II

ANALISIS DIETILEN GLIKOL PADA PASTA

GIGI MENGGUNAKAN HPTLC DAN GC-MS
Dosen pembimbing : Henny Sri Wahyuni S.Farm., M.Si., Apt
NIP : 198509222018032001

Disusun oleh :
Kelompok 2 kelas 3B Analisis Farmasi I

GRECIA MAISYA LUMBANTOBING 221501070

MARIA JESICA LINDSEN SIMANJUNTAK 221501071
OLIVIA ERLYNA ROSE SIANTURI 221501072
JENNIFER SARAH HUTABARAT 221501073
MEIVIONA ZUHRINA 221501074
ARFIAN ADRI HARTOPO 221501075
FAVIAN RIZALDI MATONDAANG 221501076
ANGELICA GLORYA SIHALOHO 221501078
WINDA SARI TIURMA IDA SINAMBELA 221501101

LABORATORIUM ANALISIS FARMASI

FAKULTAS FARMASI
UNIVERSITAS SUMATERA UTARA
MEDAN
2023
 LEMBAR PENGESAHAN
ANALISIS DIETILEN GLIKOL PADA PASTA GIGI MENGGUNAKAN
HPTLC DAN GC-MS

Disusun oleh :
Kelompok 2 kelas 3B Analisis Farmasi II

GRECIA MAISYA LUMBANTOBING 221501070

MARIA JESICA LINDSEN 221501071
OLIVIA ERLYNA ROSE SIANTURI 221501072
JENNIFER SARAH HUTABARAT 221501073
MEIVIONA ZUHRINA 221501074
ARFIAN ADRI HARTOPO 221501075
FAVIAN RIZALDI MATONDAANG 221501076
ANGELICA GLORYA SIHALOHO 221501078
WINDA SARI TIURMA IDA SINAMBELA 221501101

Disetujui oleh :
Pembimbing

Henny Sri Wahyuni S.Farm., M.Si., Apt

NIP : 198509222018032001

i
 KATA PENGANTAR
Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Tuhan Yang Maha Esa karena
berkat hikmat-Nya kami dapat menyelesaikan makalah yang berjudul “ANALISIS
DIETILEN GLIKOL PADA PASTA GIGI MENGGUNAKAN HPTLC DAN GC-
MS” ini dengan tepat waktu dan teratur sehingga dapat dijadikan sebagai bahan untuk
praktikum.

Pada makalah penelitian ini disajikan berbagai macam informasi tentang

dietilen glikol, bahaya dietilen glikol, serta analisis dietilen glikol secara kualitatif
dengan HPTLC dan analisis kadar dietilen glikol dengan menggunakan GC-MS.
Penyusunan makalah penelitian ini tentu tidak lepas dari bantuan dan dorongan dari
berbagai pihak, baik berupa dukungan moril maupun materil, sehingga terima kasih
diucapkan kepada Ibu Henny Sri Wahyuni S.Farm., M.Si., Apt, selaku pembimbing
serta teman-teman selaku tim satu kelompok dalam penyelesaian tugas ini karena
berkat kerja samanya makalah ini dapat diselesaikan.

Makalah ini merupakan salah satu tugas wajib yang telah ditetapkan dari
pihak kampus Universitas Sumatera Utara yang menjadi syarat kelulusan untuk
praktikum Analisis Farmasi II pada semester ini. Kami penulis menyadari
sepenuhnya bahwa masih ada kekurangan baik dari segi susunan kalimat maupun tata
bahasanya. Kami selaku mahasiswa yang masih dalam tahap belajar, mohon maaf
apabila ada ketidaksesuaian atau kekeliruan pada pembuatan makalah ini. Maka dari
itu, perlu kritik dan saran yang membangun dari para pembaca agar makalah ini dapat
lebih baik lagi kedepannya. Semoga makalah penelitian ini dapat bermanfaat bagi
semua orang. Terima kasih.

Penulis

Kelompok 2

ii
 DAFTAR ISI
KATA PENGANTAR...................................................................................................ii
DAFTAR ISI................................................................................................................iii
BAB I PENDAHULUAN.............................................................................................1
1.1 Latar Belakang.........................................................................................................1
1.2 Tujuan Percobaan....................................................................................................2
1.3 Manfaat Percobaan..................................................................................................2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA...................................................................................3
2.1 Uraian Bahan...........................................................................................................3
2.1 1,3 Propanediol........................................................................................................3
2.1.2 Akuades................................................................................................................3
2.1.3 Amonium Hidroksida...........................................................................................4
2.1.4 Aseton...................................................................................................................4
2.1.5 Asetonitril.............................................................................................................5
2.1.6 Dietilen Glikol......................................................................................................5
2.1.7 Etanol....................................................................................................................5
2.1.8 Kalium Permanganat............................................................................................6
2.1.9 Metanol.................................................................................................................6
2.1.10 Natrium Sulfat Anhidrat.....................................................................................7
2.1.11 Toluena...............................................................................................................7
2.2 Uraian Umum..........................................................................................................8
2.2.1 Analisis Kualitatif dengan Metode HPTLC.........................................................8
2.2.2 Analisis Kuantitatif dengan Metode GC-MS.......................................................8
2.3. Prinsip Alat.............................................................................................................9
2.3.1 Prinsip Alat HPTLC.............................................................................................9
2.3.2 Prinsip Alat GC-MS...........................................................................................10
2.4 Dietilen Glikol.......................................................................................................11
2.4.1 Definisi Dietilen Glikol......................................................................................11
2.4.2 Fungsi Dietilen Glikol........................................................................................11
2.4.3 Efek Samping Dietilen Glikol............................................................................11
BAB III METODE PENELITIAN..............................................................................13
3.1 Alat Percobaan.......................................................................................................13
3.2 Bahan Percobaan...................................................................................................13

iii
3.3 Prosedur Percobaan...............................................................................................13
3.3.1 Persiapan Sampel Pasta Gigi..............................................................................13
3.3.2 Persiapan Larutan Standar Dietilen Glikol 0,1%...............................................14
3.3.3 Analisis Kualitatif Pasta Gigi.............................................................................14
3.3.4 Analisis Kuantitatif Pasta Gigi...........................................................................14
DAFTAR PUSTAKA..................................................................................................16

iv
 BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Pasta gigi digunakan untuk membersihkan dan melindungi gigi dari kerusakan
dengan bahan aktif seperti natrium fluorida (anticavity) dan triclosan (agen
antibakteri) serta bahan tidak aktif seperti gliserin, perasa, permen karetselulosa,
natrium lauril sulfat, sorbitol, mika, natrium hidroksida, air dan titanium dioksida
yang memberikan rasa manis, bahan pengikat dan tekstur (humektan) pada pasta gigi
(Baffi dkk., 2000).
Gliserin merupakan gula alkohol yang memiliki rasa manis dan toksisitas
rendah yang banyak digunakan dalam formulasi farmasi. Gliserin digunakan untuk
meningkatkan kehalusan, memberikan rasa manis, dan digunakan untuk pelumasan
dan sebagai humektan. Hal ini ditemukan dalam berbagai produk seperti sirup obat
batuk dan ekspektoran, pasta gigi, dan sediaan lainnya (Kenyon dkk., 1998).
Dietilen glikol (DEG) secara ilegal digunakan sebagai gliserin palsu dan
dijual sebagai komponen pasta gigi. Gliserin dan dietilen glikol memiliki kemiripan
dalam penampilan, bau dan rasa. Gliserin harganya sekitar tiga kali lipat harga
dietilen glikol. Karena toksisitasnya, dietilen glikol tidak diperbolehkan digunakan
dalam makanan dan obat-obatan. Dietilen glikol bersifat racun/beracun bagi manusia
dan hewan, dan kematian dapat terjadi karena gagal ginjal. Jika tertelan, DEG dapat
menyebabkan mual, sakit perut, masalah saluran kemih, gagal ginjal, masalah
pernafasan, lesu, kejang, pusing, koma, hingga kematian. Menelan atau menggunakan
produk yang terkontaminasi dietilen glikol seperti pasta gigi dan sirup obat, dapat
menyebabkan keracunan alkohol sistemik, asidosis, dan kegagalan multiorgan yang
menyebabkan ratusan kematian (Schep dkk., 2009).
Perkembangan ekonomi yang pesat dan tantangan ekonomi di berbagai negara
serta meningkatnya jumlah produk palsu. Pemalsuan produk yang mengandung
gliserin dengan dietilen glikol yang lebih murah dan sangat beracun telah dilaporkan
di beberapa negara seperti Selandia Baru, Panama dan Irak (O'brien dkk. 1998). Salah

1
satunya adalah cemaran dietilen glikol pada sediaan pasta gigi di Dar es Salaam,
Tanzania.
Maka dari itu, mengetahui keberadaan dan kadar dietilen glikol dalam pasta
gigi yang umum serta untuk menilai variasi kadar dietilen glikol di antara berbagai
merek pasta gigi Dar es Salaam, Tanzania, akan digunakan kombinasi metode
kromatografi lapis tipis kinerja tinggi (HPTLC) untuk pengujian kualitatif dan
metode GC-MS untuk penentuan kuantitatif. Metode GC-MS dapat digunakan untuk
mengukur kandungan dietilen glikol dalam sampel pasta gigi. GC menyediakan
pemisahan kromtografi dari masing-masing komponen volatil yang kemudian dikirim
ke pemindaian penuh MS untuk dideteksi. Kemampuan unik dari detektor MS
memungkinkan setiap komponen diidentifikasi dan dapat diketahui (Fu dkk., 2011).

1.2 Tujuan Percobaan

 Untuk mengetahui sifat sifat dari dietilen glikol
 Untuk mengetahui cara identifikasi dietilen glikol secara kualitatif
dengan HPLC
 Untuk mengetahui cara identifikasi dietilen glikol secara kuantitatif dengan
GC-MS
 Untuk mengetahui apakah sampel yang diuji mengandung cemaran
dietilen glikol

1.3 Manfaat Percobaan

 Agar mengetahui mengetahui sifat sifat dari dietilen glikol
 Agar mengetahui cara identifikasi dietilen glikol secara kualitatif dengan HPLC
 Agar mengetahui cara identifikasi dietilen glikol secara kuantitatif dengan
GC- MS
 Agar mengetahui apakah sampel yang diuji mengandung cemaran dietilen
glikol

2
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Uraian Bahan

2.1 1,3 Propanediol
Nama resmi : 1,3 Propanediol
Sinonim : 1,3-Dihydroxypropane; Trimethyleneglycol; propane-1,3-
diol; 1,3-Propandiol; beta-propyleneglycol; beta-Propylene
glycol; 2-Deoxyglycerol; 2-(Hydroxymethyl)ethanol; 1,3-
Propylenediol
Rumus molekul : C3H8O2

Struktur molekul :

Berat molekul : 76,09 g/mol

Kelarutan : Dapat bercampur dengan air, sangat larut dalam etil eter;
sedikit larut dalam benzena, dapat bercampur dengan alkohol
Pemerian : Cairan kental, tidak berwarna, yang hampir tidak
berbau tetapi memiliki rasa yang agak manis
(Kemenkes RI, 2020).
2.1.2 Akuades
Nama resmi : Aqua destillata
Sinonim : Air suling, air murni
Rumus molekul : H2O
Struktur molekul :

Berat molekul : 18,02 g/mol

Kelarutan : Larut dalam segala jenis pelarut
Pemerian : Cairan jernih, tidak berwarna, tidak berbau.

3
 (Kemenkes RI, 2020).
2.1.3 Amonium Hidroksida
Nama resmi : Ammonium Hydroxide
Sinonim : Air amonia
Rumus molekul : NH4OH
Struktur molekul :

Berat molekul : 35,04 g/mol

Kelarutan : Dapat bercampur dengan air
Pemerian : Cairan jernih, tidak berwarna, bau khas,menusuk kuat
(Kemenkes RI, 2020).
2.1.4 Aseton
Nama resmi : Acetonum
Sinonim : Dimetil keton, 2-propanon, propan-2-on.
Rumus molekul : C3H6O
Struktur molekul :

Berat molekul : 58,08 g/mol

Kelarutan : Dapat bercampur dengan air, etanol, eter, kloroform,
hampir semua minyak dan minyak mudah menguap.
Pemerian : Cairan transparan; tidak berwarna; mudah menguap; bau
khas. Larutan (1 dalam 2) netral terhadap kertas lakmus.
(Kemenkes RI, 2020).

4
2.1.5 Asetonitril
Nama resmi : Acetonitrile
Sinonim : Metil sianida; sianometana
Rumus molekul : CH3CN
Struktur molekul :

Berat molekul : 41,05 g/mol

Kelarutan : Dapat bercampur dengan air
Pemerian : Cairan jernih dan tidak berwarna

(Kemenkes RI, 2020).

2.1.6 Dietilen Glikol
Nama resmi : Diethylene glycol
Sinonim : 2-(2-hydroxyethoxy)ethanol
Rumus molekul : C4H10O3

Struktur molekul :

Berat molekul : 106,12 g/mol

Kelarutan : Dapat bercampur dalam air, alkohol, eter, aseton, dan etilena
glikol
Pemerian : Cairan yang tidak berwarna, p raktis tidak berbau,
beracun dan higroskopis dengan rasa yang manis
(Kemenkes RI, 2020).
2.1.7 Etanol
Nama resmi : Aethanolum
Sinonim : Etil alkohol
Rumus molekul : C2H5OH

5
Struktur molekul :

Berat molekul : 46,07 g/mol

Kelarutan : Sangat mudah larut dalam air, dalam kloroform P, dan dalam
eter P
Pemerian : Cairan tidak berwarna,jernih,mudah menguap dan mudah
bergerak ,bau khas,rasa panas mudah terbakar dengan
memberikan nyala biru tidak berasap.
(Kemenkes RI, 2020).
2.1.8 Kalium Permanganat
Nama resmi : Kalii permanganas
Sinonim : Potassium permanganate
Rumus molekul : KMnO4

Struktur molekul :

Berat molekul : 158,03 g/mol

Kelarutan : Larut dalam air; mudah larut dalam air mendidih.
Pemerian : Hablur; ungu tua, hampir tidak tembus oleh cahaya yang
diteruskan dan berwarna biru metalik mengkilap oleh cahaya
yang dipantulkan, kadang kadang disertai warna merah
tembaga tua; stabil di udara
(Kemenkes RI, 2020).
2.1.9 Metanol
Nama resmi : Methanol
Sinonim : Metil alkohol
Rumus molekul : CH3OH
Struktur molekul :

6
Berat molekul : 32,04 g/mol
Kelarutan : Dapat bercampur dengan air, membentuk cairan jernih dan
tidak berwarna
Pemerian : Cairan tidak bewarna,jernih, bau khas
(Kemenkes RI, 2020).

2.1.10 Natrium Sulfat Anhidrat

Nama resmi : Natrium sulfat anhidrat
Sinonim : Sodium sulfat, dinatrium sulfat
Rumus molekul : Na2SO4
Struktur molekul :

Berat molekul : 142,04 g/mol

Kelarutan : Larut dalam 6 bagian air; praktis tidak larut dalam etanol
(95%) P
Pemerian : Serbuk hablur atau butiran; putih, higroskopik.
(Kemenkes RI, 2020).
2.1.11 Toluena
Nama resmi : Toluena
Sinonim : Toluen, metilbenzena, fenilmetana
Rumus molekul : C6H5CH3
Struktur molekul :

Berat molekul : 92,14 g/mol

7
Kelarutan : Praktis tidak larut dalam air, dapat campur dengan
etanol mutlak P
Pemerian : Cairan jernih, tidak bewarna, mudah terbakar
(Kemenkes RI, 2020).
2.2 Uraian Umum
2.2.1 Analisis Kualitatif dengan Metode HPTLC
High Performance Thin Layer Chromatography (HPTLC) adalah metode
pemisahan kromatografi datar yang mana fase diam mempunyai peran penting
pada analisis baik kuantitaif maupun kualitatif. Keseragaman dan ukuran partikel
adsorben sangat menentukan keberulangan data analisis kuantitatif. Karakteristik
kromatografi ditentukan terutama oleh parameter fisika. Oleh sebab itu lempeng TLC
dengan ukuran partikel kecil dan keseragaman ukuran partikel baik, diperlukan untuk
mendapatkan hasil analisis yang baik (Hussain dkk., 2019).
HPTLC (High Performance Thin Layer Chromatography) adalah teknik
analitik yang didasarkan pada KLT, tetapi dengan peningkatan yang dimaksudkan
untuk meningkatkan resolusi senyawa yang akan dipisahkan dan untuk
memungkinkan analisis kuantitatif senyawa. Beberapa peningkatan seperti
penggunaan pelat KLT berkualitas lebih tinggi dengan ukuran partikel yang lebih
halus dalam fase diam yang memungkinkan resolusi yang lebih baik. Ini adalah jenis
kromatografi planar yang menggunakan fase diam datar (planar) untuk pemisahan
tidak seperti kromatografi kolom (Hussain dkk., 2019).
2.2.2 Analisis Kuantitatif dengan Metode GC-MS
Analisis spektrometri massa kromatografi gas (GC-MS) merupakan alat
pengujian dan pemecahan masalah yang efektif untuk mengidentifikasi dan
mengkuantifikasi bahan kimia dalam campuran yang kompleks (Al-Rubaye et al.,
2017). Beberapa bidang teknis yang menggunakan analisis GC-MS adalah industri
parfum, makanan (Chiu & Kuo, 2020; Vene et al., 2013), penelitian bahan bakar
hidrokarbon, penelitian farmasi, forensik (Bridge et al, 2018), dan terkadang menjadi
lebih kuat untuk mendeteksi agen perang kimia (Li et al., 2020). GC dan MS
memberikan hasil yang berbeda namun saling melengkapi; sementara GC
memisahkan
8
komponen-komponen campuran, MS dapat menganalisis dan mengidentifikasi
komponen-komponen tersebut. Metode-metode ini pertama kali digunakan bersama-
sama pada tahun 1950-an, dan masih diterapkan secara luas di klinik dan
laboratorium di seluruh dunia (Nugraha dan Nandiyanto, 2021).

Seperti halnya untuk semua teknik kromatografi, GC memisahkan campuran

dengan mengeksploitasi perbedaan distribusi komponen antara dua fase; fase diam
dan fase bergerak atau lebih sering disebut, fase bergerak gas pembawa. Alikuot
campuran sampel yang akan dipisahkan dimasukkan ke dalam fase gas yang
bergerak, tepat sebelum bertemu dengan fase diam. Pemisahan komponen sampel
ditentukan oleh perbedaan kesetimbangan antara kedua fase. Komponen dengan
afinitas rendah untuk fase diam menghabiskan lebih banyak waktu dalam fase gas
pembawa yang bergerak dan keluar dari kolom lebih cepat (yaitu, memiliki waktu
retensi yang lebih pendek) (Gould dkk., 2023).
2.3. Prinsip Alat
2.3.1 Prinsip Alat HPTLC
Prinsip HPTLC sama dengan TLC tradisional, tetapi melibatkan penggunaan
peralatan khusus, termasuk pompa bertekanan tinggi, ruang yang dikontrol suhu, dan
pemindai atau detektor, untuk mencapai resolusi dan sensitivitas yang lebih tinggi.
Sampel ditotolkan pada lapisan tipis fase diam, yang biasanya dilapisi pada pelat kaca
atau aluminium, dan pelat tersebut kemudian ditempatkan di ruang pengembangan
yang berisi fase gerak. Fase gerak bergerak melalui fase diam melalui aksi kapiler,
memisahkan komponen sampel berdasarkan afinitasnya terhadap fase diam dan fase
gerak. Komponen yang terpisah dapat divisualisasikan dengan berbagai metode
deteksi, seperti penyerapan UV, fluoresensi, atau chemiluminescence (Aslam, 2023).
Salah satu keunggulan utama HPTLC adalah resolusinya yang tinggi, yang
memungkinkan pemisahan senyawa yang terkait erat yang tidak dapat diselesaikan
dengan KLT tradisional. HPTLC juga menawarkan sensitivitas yang lebih baik,
karena dapat mendeteksi sejumlah kecil senyawa dengan batas deteksi hingga
nanogram. Selain itu, HPTLC merupakan teknik yang cepat dan efisien, karena dapat
memisahkan

9
dan mengidentifikasi beberapa komponen sampel dalam satu kali proses, sehingga
mengurangi waktu dan biaya analisis. HPTLC juga merupakan teknik yang fleksibel,
karena dapat digunakan untuk analisis kualitatif dan kuantitatif dari berbagai macam
senyawa, termasuk senyawa polar dan non-polar, dan dapat disesuaikan dengan
metode deteksi dan jenis sampel yang berbeda (Aslam, 2023).
2.3.2 Prinsip Alat GC-MS
GC-MS adalah metode yang digunakan untuk pemisahan dan digunakan
untuk mengidentifikasi suatu komponen dalam suatu campuran sampel yang
umumnya berupa senyawa-senyawa yang mudah menguap. GC-MS terdiri dari dua
buah alat yaitu kromatografi gas dan spektrometri massa sebagai detektor. GC-MS
bertujuan sebagai alat pemisah berbagai komponen pada suatu sampel yang
pemisahannya tergantung dari titik didih senyawa yang ada pada suatu sampel yang
dianalisis dan interaksi antara analit dengan fase diam maupun gerak. Prinsip kerja
dari alat kromatografi gas ini adalah sampel cairan diinjeksikan ke dalam injektor
yang nantinya akan diuapkan. Sampel yang sudah diuapkan tersebut kemudian
dibawa oleh gas pembawa menuju kolomtempat terjadinya pemisahan. Senyawa
dengan titik didih yang tinggi memiliki waktu retensi yang lama dibandingkan
dengan senyawa yang memiliki titik didih lebih rendah. Prinsip kerja spektrometri
massa adalah menembak bahan yang sedang dianalisis dengan berkas elektron dan
secara kuantitatif mencatat hasilnya sebagai suatu spektrum fragmen ion positif.
Fragmen ion positif tersebut nantinya akan berkelompok sesuai dengan massanya
sehingga nantinya diperoleh berat molekul dari senyawa yang terkandung (Margareta
dan Wonorahardjo, 2023).
GC-MS dapat dilakukan untuk analisa kualitatif dengan membandingkan
waktu retensi dengan standar yang tersedia di buku dan analisa kuantitatif dengan
cara perhitungan relatif dan tinggi atau luas puncak kromatogram dengan larutan
baku yang dianalisis. Pengujian menggunakan GC-MS dipengaruhi oleh beberapa hal
salah satunya mengenai temperatur, seperti temperatur injeksi, temperatur kolom, dan
temperatur ion source. Temperatur injeksi umumnya diatur 50°C diatas suhu senyawa
yang akan dianalisis. Apabila suhu injeksi terlalu rendah akan menyebabkan
hilangnya keefisienan akibat penginjeksian namun bila suhu injeksi terlalu tinggi
10
maka akan

11
menyebabkan peruraian sampel karena panas. Temperatur atau suhu injeksi sampel
dalam pemisahan dengan GC-MS mempengaruhi volatilitas sampel. Sampel dengan
volatilitas tinggi dapat dilakukan analisis dengan suhu rendah, namun bila sampel
tersebut dilakukan analisis dengan suhu tinggi maka akan menyebabkan beberapa
komponen dalam sampel tersebut terurai (Margareta dan Wonorahardjo, 2023).
2.4 Dietilen Glikol
2.4.1 Definisi Dietilen Glikol
Dietilen glikol adalah pelarut organik yang memiliki banyak kegunaan
industri. DEG diklasifikasikan sebagai bahan beracun, dapat menyebabkan berbagai
gangguan sistemik hingga terjadinya gagal ginjal akut dan kematian. Dietilen glikol
memiliki sifat fisika dan kimia yang mendekati sifat gliserin dan propilen glikol,
dimana harganya lebih murah dibandingkan gliserin dan propilen glikol, sehingga
memaksa beberapa produsen dan penjual untuk menipu mereka dengan DEG
(Ghanem dkk., 2012).
2.4.2 Fungsi Dietilen Glikol
Dietilen glikol digunakan dalam pembuatan resin, pemlastis, morfolin, dll.
Sebagai pelarut dapat digunakan dalam sintesis nitroselulosa, senyawa organik, layar
kulit, deodoran dan lotion. Ini juga digunakan sebagai pendingin, pelumas, rem
cairan, kabut buatan, dan antibeku (Udagani dan Ramesh, 2015).
2.4.3 Efek Samping Dietilen Glikol
Dietilen glikol yang tertelan secara oral secara tidak sengaja atau disengaja
mudah diserap melalui saluran pencernaan dan didistribusikan dalam darah, saluran
pencernaan dan didistribusikan dalam aliran darah di seluruh tubuh dan konsentrasi
mencapai puncaknya dalam 2 jam. Dosis mematikan dari dietilen glikol diperkirakan
100 mL/kg. Hati hati akan dapat memetabolisme 80% dari dietilen yang diserap
glikol dan dipecah menjadi asam oksalat sebagai produk akhir menggunakan enzim
alkohol dehidrogenase. Asam oksalat kemudian akan bereaksi dengan kandungan
kalsium dalam darah untuk membentuk kalsium oksalat yang akan disimpan di
jaringan dan ginjal dan otak sehingga menghambat rantai transpor elektron rantai
transpor elektron. Dietilen glikol juga meningkatkan osmolaritas serum dengan
celah osmolar,
12
konsentrasi kreatinin serum, oliguria, hipertensi, disritmia jantung, hiperkalemia,
hiponatremia, kelesuan progresif, kelumpuhan wajah, disfonia, dan koma yang
menyebabkan menuju kematian. Ada efek lain seperti CNS, manifestasi SSP, paresis
okular, mioklonus, kejang, mengantuk, disorientasi, agitasi, euforia (Udagani dan
Ramesh, 2015).

13
 BAB III
METODE PENELITIAN
3.1 Alat Percobaan

CAMAG TLC Scanner, Centrifuge Eppendorf 5810R , High Performance Thin

Layer Chromatography (HPLTC), Kuvet, Labu ukur 5mL, 10mL, dan 100mL, Plat
HPLTC, Sistem kromatografi gas 5890 dengan detektor 5972MS, sistem
kromatografi gas 6890 dengan detektor selektif 5973MS ditambah 6890, Suhu
injektor dan Tabung Sentrifugasi 15-mL polypropylene dari VWR (West Chester,
PA, USA).
3.2 Bahan Percobaan
1,3-propanediol (99%, Ward Hill, MA, USA), Aseton, Asetonitril (Analytical
grade, kemurnian 99,5%, Merck, Jerman), Amonium Hidroksida (25%, Analytical
grade), Air suling, serbuk butiran natrium sulfat anhidrat (Na2JADI4), Dietilen glikol
(99%), Etil Alkohol Anhidrat, manik-manik kaca berukuran 710-1180 mikron,
Metanol, Natrium Sulfat Anhidrat, Pasta gigi (Whitedent triple action, whitedent gel,
whitedent herbal, colgate, aloe, glister, sensodyne, smokers and angola), Propilena,
Purelab Ultra Analytic, Tabung sentrifugasi VWR, dan Toluen (Analytical grade,
kemurnian 99,8 %, Scharlau, EU) dan standar dietilen glikol (DEG) (tingkat GC,
kemurnian 99%).
3.3 Prosedur Percobaan
3.3.1 Persiapan Sampel Pasta Gigi
1. Ditimbang 1 g pasta gigi (setara dengan satu kali penggunaan pada sikat gigi)
lalu dimasukkan ke dalam tabung centrifuge
2. Ditambahkan 5 ml air suling dan diaduk rata
3. Ditambahkan 5 ml asetonitril untuk mengurangi busa yang muncul, kemudian
dilakukan sentrifugasi selama 10 menit
4. Dipindahkan supernatan ekstrak yang dihasilkan ke tabung reaksi.
5. Diencerkan 1 ml ekstrak supernatan dari tabung reaksi dengan 2 ml metanol
ke dalam labu takar 5 ml diikuti dengan pengocokan menyeluruh

14
3.3.2 Persiapan Larutan Standar Dietilen Glikol 0,1%
1. Ditimbang 1 ml dietilen glikol 100%
2. Diencerkan dietilen glikol ke dalam 10 ml metanol dalam labu tentukur 10 ml
3. Dikocok hingga homogen. Didapatkan larutan standar dietilen glikol 0,1%.
3.3.3 Analisis Kualitatif Pasta Gigi
1. Disiapkan tiga pelat HPTLC dengan volume masing-masing 10 μL ukuran 5
cm × 10 cm yang dilapisi silika gel setebal 250 μm.
2. Diinjeksikan larutan standar dan dua sampel ke dalam masing-masing pelat
3. Diletakkan pelat HPTLC berisi larutan standar berada di tengah dan pelat
berisi larutan sampel berada di ujung pelat HPTLC.
4. Diatur fase gerak dengan memasukkan campuran aseton, amonium hidroksida
5 M dan toluena (17:2:1), hingga fase gerak mencapai tiga perempat pelat.
5. Visualisasi pelat kering dilakukan dengan pewarnaan dengan kalium
permanganat yang dilarutkan dalam pelarut berkembang atau uap yodium dan
pemindai digunakan pada panjang gelombang 325 nm (Kenyon dan Layloff
2008, Ghanem et al. 2012). Bintik- bintik kuning mulai muncul di piring 1
menit kemudian, sedangkan dietilen glikol membutuhkan waktu hingga 10
menit
3.3.4 Analisis Kuantitatif Pasta Gigi
3.3.4.1 Pembuatan Larutan Blanko, Standar, dan Stok Standar
1. Ditimbang sekitar 1,0 gram DEG standar
2. Dilarutkan ke dalam labu ukur 100 mL dengan asetonitril-air 50% atau pelarut
etanol-air 98%.
3. Serangkaian larutan standar dengan pengenceran 1:3 dari larutan standar
dibuat untuk evaluasi metode.
4. Diambil 10 mL larutan standar sebagai larutan blanko untuk memastikan tidak
ada kontaminasi dari reagen dan wadah

15
3.3.4.2 Pembuatan Larutan Internal Standar
1. Ditimbang sekitar 0,5 gram 1,3-propanediol
2. Dilarutkan ke dalam labu ukur 100 mL dengan pelarut asetonitril-air 50% atau
etanol-air 98%.
3. Dipipet 0,1 mL larutan ini dan ditambahkan ke dalam 1 mL setiap ekstrak
sampel atau larutan standar dalam botol autosampler sebelum analisis GC-
MS. Konsentrasi tetapnya adalah 0,05%. Larutan standar internal dengan
pelarut asetonitril-air 50% ditujukan untuk metode asli, dan standar internal
dengan pelarut etanol-air 98% ditujukan untuk metode baru yang
dikembangkan.
3.3.4.3 Persiapan Sampel QC dan Larutan Spiking Standar
1. Diatur sampel QC pada tingkat 0,5 mg/mL dan 0,1 mg/mL.
2. Dianalisis sampel QC pada 0,5 mg/mL DEG pada awal dan akhir set sampel
untuk memberikan dasar untuk evaluasi kuantitatif dan untuk memantau
jumlah penyimpangan selama analisis kumpulan sampel.
3. Dianalisis sampel QC pada 0,1 mg/mL DEG di tengah set sampel untuk
deteksi tingkat ambang batas DEG.
4. Dibuat Larutan spiking standar dari larutan stok standar dengan pengenceran
1:2, dan 0,2 mL larutan spiking standar ini langsung ditambahkan ke sampel
yang tidak terkontaminasi sebelum melanjutkan dengan prosedur persiapan
sampel.
3.3.4.4 Preparasi Sampel
1. Ditimbang sekitar 1,0 gram pasta gigi, dimasukan ke dalam tabung
sentrifugasi polipropilen 15 mL dan ditambahkan 5 mL air,
2. Diaduk rata seluruh sampel hingga homogen. Setelah sampel pasta gigi
tersuspensi seluruhnya, ditambahkan 5 mL asetonitril dalam dua porsi dengan
pencampuran menyeluruh di antara setiap penambahan.
3. Disentrifugasi selama 10 menit pada 5000 g. Supernatan disaring dengan alat
penyaring tanpa jarum suntik dengan membran PVDF 0,45 m, untuk analisis
GC-MS.

16
 DAFTAR PUSTAKA

Al-Rubaye, A. F., Hameed, I. H., and Kadhim, M. J. (2017). A review: uses of gas
chromatography-mass spectrometry (GC-MS) technique for analysis of
bioactive natural compounds of some plants. International Journal of
Toxicological and Pharmacological Research. 9(1), 81-85.
Baffi P, Elneser S, Baffi M Melin, M.D. 2000. Quantitative Determination of
Diethylene Glycol Contamination in Pharmaceutical Products. J. AOAC Int.
83(4): 793.
Bridge, C., Maric, M., and Jones, K. (2018). GC×GC–MS for Forensic Analysis.
The Column. 14(12): 25.
Chiu, H. H., and Kuo, C. H. (2020). Gas chromatography-mass spectrometry-based
analytical strategies for fatty acid analysis in biological samples. Journal of
Food and Drug Analysis. 28(1): 60–73
Fu, L., Hao, Z., Parker, H., Knapp, M. 2011. A Greener Way to Screen Toothpaste
for Diethylene Glycol. American Journal of Analytical Chemistry. 2 (1):
938- 943.
Ghanem, H., Alkhayat, A., dan Almardini, A. 2012. Detection of Diethylene Glycol
in Glycerin and Propylene Glycol by using high performance thin layer
chromatography HPTLC. 1(1): 29.
Gould, O., Nguyen, N., Kevin, C., dan Honeychurch. 2023. New Applications of Gas
Chromatography and Gas Chromatography-Mass Spectrometry for Novel Sample
Matrices in the Forensic Sciences: A Literature Review. MDPI : Chemosensors.
11(257) : 1.
Hussain, S. Z., Maqbool, K., dan Naseer, B.2019. High Performance Thin Layer
Chromatography : Principle, Working and Applications. International
Journal of research in Pharmacy and Pharmaceuticals Sciences. 4 (3) : 83.
Kemenkes RI. 2020. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta: Kementerian
Kesehatan Republik Indonesia. Halaman 70, 182, 200, 222, 792.
Kenyon, A.S., Xioye, S., Yan, W. and Har, N.W. 1998. Simple at-site Detection of
Diethylene Glycerol/Ethylene Glycol Contamination of Glycerin and
Glycerin-based Raw Materials by Thin-Layer Chromatography. J. AOAC
Int. 81 (1): 44-50.
Li, B., Kong, J., Yang, L., Zhang, L., Zhang, Z., and Li, C. (2020). Direct detection
of chemical warfare agent simulants in soil by thermal desorption-low
temperature plasma-mass spectrometry. International Journal of Mass
Spectrometry. 451(2020) :1–9.
Mahugija, J.A.M. 2018. Determination of Toxic Diethylene glycol in Toothpastes
in Dar Es Salaam By High Performance Thin Layer Chromatography and
Colorimetric Methods. Tanzania Journal of Science. 44(2): 117-127.
Margareta, M. A. H., Wonorahardjo, S. 2023. Optimasi Metode Penetapan
Senyawa Eugenol dalam Minyak Cengkeh Menggunakan Gas
Chromatography – Mass Spectrum dengan Variasi Suhu Injeksi. Jurnal
Sains dan Edukasi Sains. 6(2): 96.
Nugraha, A., dan Nandiyanto, A. B. D. 2021. How to Read and Interpet GC/MS
16
Spectra. Indonesian Journal of Multidisciplinary Research. 1(2) : 172.

17
O'brien, K.L., dkk. 1998. Epidemic of Pediatric Deaths from Acute Renal Failure
Caused by Diethylene Glycol Poisoning. J.Am. Med. Assoc (JAMA).
279(15): 1175-1180.
Udagani, P., dan Ramesh, T. N. 2015. Detection and quantitative determination of
diethylene glycol in ethyl alcohol using gamma-ray spectroscopy. 52(8):
5311.
Vene, K., Seisonen, S., Koppel, K., Leitner, E., and Paalme, T. (2013). A method
for GColfactometry panel training. Chemosensory Perception. 6(4): 179–
189.

17