BAKU PEMBANDING

Oleh
Athina Mardatillah
Dept. Of Pharmaceutical Analysis
• Baku pembanding adalah senyawa kimia atau senyawa obat yang memiliki
kemurnian tertentu.

• Baku pembanding tidak digunakan sebagai obat.

• Baku pembanding merupakan hal vital dalam proses pemastian mutu obat
baik dalam evaluasi mutu produk dan keamanan produk.
• Baku pembanding (reference material) adalah suatu bahan dengan
kemurnian tertentu yang digunakan sebagai pembanding untuk
mendapatkan kadar suatu analit sampel.
Baku pembanding berdasarkan pembuatnya
• Baku pembanding yang dibuat sebagai penyerta monografi pada
Farmakope, misalnya USP, FI, dll.
• Working standard atau baku kerja: merupakan baku pembanding
yang ditetapkan berdasarkan baku pembanding utama.
• Baku pembanding dengan komposisi matriks tertentu: misalnya CRM
(certified Reference Material atau SRM (standard Reference Material),
bahan ini dibuat oleh badan yang diberi tugas khusus yaitu NIST. Baku
pembanding ini dibuat dengan matriks seperti keadaan sampel pada
umumnya, misalnya kecap yang mengandung natrium benzoat 1%
dan kalium sorbat 1%.
 SUMBER BAKU PEMBANDING

Sumber Primer Sumber Sekunder

Bahan Baku Farmakope Indonesia Custom Manufactures

(BPFI)
Contract Manufacturers
United States Pharmacopeia(USP)
Chemical Suppliers
National Institute for Standards and
Testing (NIST)
European Pharmacopoeia (EP)
Japanese Pharmacopoeia (JP)

5
Definition As per
USP-NF

Baku pembanding USP adalah

Organisasi lain yang juga
spesimen fisik yang digunakan
memiliki standar untuk baku
untuk memastikan identitas,
pembanding, seperti Japanese
kekuatan, kualitas, dan kemurnian
& European pharmacopeias,
obat (obat, senyawa biologis, dan
WHO, Reference Materials
eksipien), suplemen makanan, dan
Committee of ISO (REMCO),
bahan makanan.
etc.

6
Other Definitions:

FDA: Secara khusus suatu bets zat obat

dan bahan otentik yang memiliki
kemurnian tertinggi digunakan untuk
penentuan struktural dan sebagai acuan
untuk standar kerja.

ICH (Q6A): Sebuah baku pembanding

untuk uji suatu zat obat baru,
ketidakmurnian yang ada harus
diidentifikasi dan / atau dikendalikan dan
kemurnian harus diukur dengan prosedur
secara kuantitatif.
Dept. Of Pharmaceutical Analysis 7
BPFI adalah senyawa yang telah dikarakterisasi,
seperti obat tertentu (senyawa obat, produk
biologik, eksipien, cemaran, hasil urai, pereaksi
dan juga termasuk baku pembanding untuk
verifikasi kinerja).
Penggunaan baku pembanding
• Sebagai analit dalam pengembangan dan validasi metode analisis.
• Sebagai analit dalam verifikasi metode analisis.
• Sebagai analit dalam kalibrasi.
• Sebagai analit dalam uji kolaborasi.
• Sebagai analit dalam program penjaminan mutu.
• Membantu dalam analisa kualitatif dan kuatitatif pada analisa dengan
menggunakan metode komparatif.
Contd…

Qualitative analysis of materials by comparison of RS & chemical substance in aspects

• IR- Functional Group Conformation
• Melting point & HPLC- Purity identification
• U.V.- identification, etc,

Quantitative analysis
• HPLC
• Limit tests

Specific Uses
• Method validation
• Calibration of Instruments

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 10

 Qualitative &
Quantitative Analysis

Includes following aspects,

1) Identification
2) Purity analysis
3) Assay of sample.

Hasil analisis dibandingkan dengan baku pembanding dan sampel harus memenuhi persyaratan standar
baku pembanding.
Metode analisis yang digunakan salah satu nya adalah spectroscopic & chromatographic.

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 11

 Kalibrasi Instrumen

Ketika suatu instrumen memberikan hasil yang tidak relevan maka dapat dikalibrasi
dengan menggunakan Baku pembanding. Jika hasil nya dekat dengan kriteria
penerimaan dapat disimpulkan bahwa instrumen bekerja dengan benar.

Instrument Baku pembanding yang digunakan untuk kalibrasi

UV-Vis Spectrophotometer Potassium dichromate
IR Spectrophotometer Poly Styrene film
Karl Fischer Titrimeter Di Sodium Tartrate
Flame Photometer Potassium dichromate
Gas Chromatography 1.0% v/v Toluene solution in n-Hexane

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 12

 KLASIFIKASI

Analytical Reference
Standards (ARS)/ Primary Working / Secondary
Standard Standard (WS)

Authentic Materials (AM)

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 13

 Analytical Reference Standards
(ARS)

Definisi: Baku pembanding ini mempunyai kemurnian tinggi, tanpa matriks

tertentu, dan dalam keadaan tunggal.

USES:
 Mainly for Research & Drug development purpose
 To characterize WS

14
 Working Standard
(WS)

Definition:
Merupakan baku pembanding yang ditetapkan berdasarkan baku pembanding
utama.

USES:
 Mainly for Laboratory purpose.

15
Dept. Of Pharmaceutical Analysis
Authentic Material
• Baku pembanding dengan komposisi matriks tertentu: Baku
pembanding ini dibuat dengan matriks seperti keadaan sampel pada
umumnya, misalnya kecap yang mengandung natrium benzoat 1%
dan kalium sorbat 1%. Manfaat baku pembanding ini adalah untuk
menguji akurasi (kecermatan) metode. Metode hasil pengembangan
dicobakan pada baku ini, hasil yang diperoleh dikurangai hasil yang
tertera disertifikat merupakan ukuran bias metode
 Comparison Among ARS, WS & AM
CATEGORY ARS WS AM
Synonym Primary (1˚) / Gold standard Secondary(2˚) standard Authentic Visual Reference
Purity NLT 99.5% NLT 95% NLT 80%
Quality Highly Characterized Not so as ARS Not so as WS
Characterization Acceptable without comparison Requires comparison with 1˚
standard
Purpose For industrial purpose in As visual images to
 Drug development process compare certain test articles
 R&D  For Laboratory purpose & in to meet requirements
 Calibration of apparatus, QC
methods and materials
 Calibration of 2˚ standard
Not Used As drug or cosmetic for For research purpose Not for chemical analysis
consumption
Availability Synthesized independently & Procures from Bulk Available in small quantity
available in very less quantity. manufacturer or prepared in
laboratory itself
Cost Very expensive Low cost Low cost 17
Dept. Of Pharmaceutical Analysis
 Classification According To ISO & USP
Certified Reference
Material (CRM)
• Baku pembanding yang telah
memiliki sertifikasi secara
teknis sesuai dengan prosedur
yang valid yang telah
didokumentasikan oleh badan
sertifiaksi.
Dept. Of Pharmaceutical Analysis
Reference Material
(RM)
• Merupakan Baku
pembanding kerja yang
digunakan untuk kalibrasi
alat, penilaian metode
pengukuran.
18
 WS Preparation
Bulk material should satisfy following tests
• Evidence of chemical structure
• Assay
• Purity
• Accelerated stability testing, etc.

Then material can referred as Working standard

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 19

 Characterization Of Reference
Standards

Qualification of RSs is a critical parameter in which a thorough characterization

is necessary in aspects of
1) Identity
2) Strength
3) Quality
4) Purity

20
Dept. Of Pharmaceutical Analysis
 Basic Requirements For Qualification
 Should understand Physico chemical Profile of RS
 ARS should have good chemical stability on wide range of storage
 Requirements for characterization should be cross-checked to avoid Analytical errors.
 The validity (i.e., accuracy, precision, sensitivity, specificity) of the analytical methods used
for purity determination should be demonstrated
 Highly pure (i.e., ≥99.5%)
 In total the degradation and by-products should not be more then 0.5%
 The levels of all impurities found (including those not chemically identified, isolated, and
characterized) should be provided as a summary tabulation
 Content of enantiomer in case of chiral compound is not taken into account as by- products
and degradation products by normalized area percent

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 21

 Langkah-langkah Karakterisasi BP

• Visual inspection • Elemental analysis

Proof of structure
Physical Description

• U.V. spectroscopy
• Optical microscopy
• I.R. Spectroscopy
• Mass Spectroscopy
• NMR Spectroscopy
• Raman Spectroscopy
Dept. Of Pharmaceutical Analysis 22
 Contd…

Purity
• Loss On Drying (LOD)
• Karl Fisher Titration
• Thermo Gravimetric Analysis (TGA)
• Differential Scanning Calorimetry (DSC)
• Residue On Ignition (ROI)
• Thin Layer Chromatography (TLC)
• High Performance Liquid Chromatography (HPLC)
• Gas Chromatography (GC)

Assay
• Titration
• Phase - Solubility Analysis
Dept. Of Pharmaceutical Analysis 23
 Proof Of Structure:

Mass spectroscopy

Elemental analysis by ICP

(inductively-coupled plasma)
detects up to 24 metals, measuring
less than 5μ in size

IR spectroscopy NMR spectroscopy

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 24
 Stability, Expiry & Retest
Expiration and Retest Date:

• Reference standard may have a maximum 5 years expiry period

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 25

 Certificate Of Analysis
Information needed for COA:
• Name and unique batch number
• Manufacturer
• Manufacturing date
• Retest date
• Expiry date
• Transport instructions
• Storage condition
• Content of reference substance
• Note on calculation of the contents
• Special remark on handling requirement if any
• All the required tests with their specifications and results
Dept. Of Pharmaceutical Analysis 26
 Usage and Maintenance
Handling during analysis:

Use and maintenance:

• Must be equilibrated to room temperature for 30 minutes before use
• Protect from light and very tight packaging
• For NCEs packaging recommended in amber color bottle with tight sealed cap
• Moisture sensitive and hygroscopic reference substance are packed into once use
packaging material only and discarded after the use if any remaining quantity
available

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 28

 ..HANDLING

• Hands should be thoroughly washed before handling.

• Transfer should be done with clean stainless steel spatula. The spatula used should
be cleaned after use.

• While weighing clean spatula has to be used.

• Containers should be immediately closed as soon as the sample is taken out.

• Containers has to be labelled.

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 29
 STORAGE
Qualified Reference standard should be stored in Sealed Ampoules of Single or multiple
dose at proper storage conditions.

Should be protected from

Light
Moisture
Heat
Type of Container Used for
Moisture resistant Hygroscopic Drugs
Amber colored Light Sensitive Drugs
Heat proof Thermo Labile Drugs

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 30

 Records
• Only authorized personnel of the laboratory should have an access to reference standards.

• Codes should be given to reference standards for easy identification and handling.

• A log book should be maintained in order to keep the record of the reference drugs used.

• The personnel handling reference standards should take utmost care while maintaining these
records.

• The log book should have compulsorily have the details like date, name of standard taken,
purpose for which it is issued, amount issued, amount remaining, signature.

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 31

 Conclusion

RS is an Important Analytical Tool in industry & in QC labs. Result of any

analytical procedure or any instrument and drug safety depends on RS.

Dept. Of Pharmaceutical Analysis 32