PRA ANALITIK

PEMBEKALAN PKL
SITOHISTOTEKNOLOGI
STIKES KARSA HUSADA GARUT
Yadi Apriyadi , S.Si
Pelayanan Patologi Anatomi
Histo
patologi &
Sitologi
Biologi
Moleku
Potong
ler beku

Imuno
Histo
fluore
kimia
scens
Imuno
histo
kimia
 KELENGKAPAN
IDENTITAS: NAMA, IDENTITAS & KETERANGAN
UMUR, JENIS KELAMIN, KLINIK
P ALAMAT, SUKU, AGAMA,
PEKERJAAN; NO CM
R JANGAN LUPA
A 1.ADMINISTRASI
-
KETERANGAN KLINIK
A
• LOKASI DAN UKURAN LESI KETERANGAN HASIL
N
• DURASI DAN PROGRESIFITAS PEMERIKSAAN KLINIK
A
• KELUHAN YANG BERHUBUNGAN •DIAGNOSIS KLINIS
L
• HASIL PATOLOGI TERDAHULU •PEMERIKSAAN
I BILA ADA PENUNJANG
T • PENYAKIT LAIN YANG MENULAR (LABORATORIUM DAN
RADIOLOGIS)
I (AIDS, DLL)
• RIWAYAT PENYAKIT LAIN STATUS EKONOMI
K
•ASURANSI
•KELAS RAWAT
 LOKASI KETERANGAN  PEMERIKSAAN
RADIKALITAS
P BAHAN/ORGAN KHUSUS
OPERASI
SAMPLING
R BATAS SAYATAN
A
-
A
BENTUK
N
BENJOLAN
A KONDISI LESI
UKURAN
L KONSISTENSI
I MOBILITAS
T WARNA
I TAMPILAN SAAT
K OPERASI
Cara Penulisan Formulir PA
P  Identitas Pasien
R
 Identitas Dokter Operator
A
 Lokasi dan Teknik Operasi
-
A  Diagnosa Klinis

N  Keterangan klinis
A  Pemeriksaan Penunjang ( Lampirkan )
L  PA sebelumnya
I  Tanggal Operasi dan TTD Operator
T  Nama Residen dan No HP
I
K
 FIKSASI

P Cairan fiksasi  disiapkan  botol bermulut lebar/

R yang beretiket :
A Nama Pasien
- Tanggal Lahir / Usia
A No. Medrek
N Keterangan lokasi (jika lebih dari 1 lokasi)
A
L Jenis Larutan Fiksasi

I • Aldehida (formalin)
T • Merkurial Cairan Fiksasi Yg ideal
• Alkohol (sitologi)
I • Agen oksidasi
digunakan  Larutan BNF 10%.
•
K Asam pikrat
 Jaringan dapat menciut hingga 33%
 Kerusakan akibat fiksasi yg tidak baik = permanen!
 FIKSASI JARINGAN YANG STANDAR
KAPAN DILAKUKAN?

Secepat mungkin dimasukkan larutan fiksasi (<30 Menit)

P  
R CARA MEMBUAT LARUTAN
A FIKSASI BNF 10%
VOLUME KONSENTRASI
JARINGAN
- MIN 20 X
MEMPENGARUHI
INFILTRASI

A
FO 0 %

SODIUM
4
R 1

N
M 00

T DIHIDROGEN
AL C

ES FOSFAT
D C

D
EH

UA C MONOHIDRAT
0C
ID

A AQ
90 4g

L Disodium
hidrogen fosfat

I anhidrat 6,5 g

T  Jaringan besar : dibuat sayatan sejajar

I TUJUAN :
• MENCEGAH AUTOLISIS DAN KERUSAKAN JARINGAN
K • MEMPERTAHANKAN BENTUK DAN ISI JARINGAN
• MENJAGA PROSES JARINGAN SELANJUTNYA BAIK
•
MEMPERTAHANKAN KOMPONEN JARINGAN/SEL UTUH
• MEMADATKAN CDAN MENGERASKAN JARINGAN  MUDAH
DIPOTONG
dengan pisau tajam berjarak 0,5-1cm agar
fiksatif merata pada seluruh bagian jaringan,
luar dan dalam

Jaringan terfiksasi sempurna : keras
konsistensinya , berwarna putih atau coklat

 
FIKSASI TERSTANDAR KUNCI PROSES JARINGAN SELANJUTNYA BERJALAN LANCAR
 P
R
A
-
Kurang fiksir Terfiksasi A
N
A
L
I
T
I
Jaringan segar Nekrosis K
 P
R
A
-
A
N
A
L
I
T
I
K
Terfiksasi Kurang Fiksir
https://www.auanet.org/education/auauniversity/education-products-and-resources/pathology-
for-urologists/prostate/non-neoplastic-lesions/benign-prostatic-hyperplasia
 P
R
A
-
A
N
A
L
I
T
I
K

Terfiksasi Kurang fiksir

 DECALSIFIKASI
Merupakan proses pengurangan garam mineral atau
P penghilangan garam kalsium dalam jaringan.
R Prinsif
A Penghilangan garam kation kalsium melaui mekanisme
- Anion. (Anion berasal dari larutan dekalsifikasi yang
A biasanya berasal dari larutan asam)
N Lar. Dekalsifikasi yg baik harus dapat menghilangkan
A Semua kalsium tanpa menimbulkan efek buruk pada
L sel atau jaringan
I Sebelum di dekalsifikasi , jaringan sebaiknya di fiksasi
T Terlebuh dulu
I
K
 DECALSIFIKASI

Macam macam Lar. Decalsifikasi :

P 1, Asam mineral Kuat ( Asam Nitrit 5 %, Parenyi’s, Asam Klorida 5 – 10% ,
Lar. Von Ebner’s.)
R
Jika penggunaan dekalsifikasi berlebih akan menyebabkan
A hilangnya pewarnaan inti dan jaringan menjadi lebih basah
- sehingga sulit untuk pematangan sel.
A 2, Asam Organik Lemah ( Asam Format 10 %, Evans Krajian ,Kristensen )
N 3, Larutan Chelating ( EDTA )
A
Setelah dilakukan proses dekalsifikasi akan menyebabkan
L Tersimpanya sisa larutan dekalsifikasi pada jaringan. Untuk meng-
I hilangkan diperlukan metode menetralkan sisa asam.
T Metode yg sering digunakan yaitu menggunakan air keran
I mengalir atau pemberiaan larutan basa.
Apabila tidak dilakukan akan menyebabkan pewarnaan menjadi
K
tidak merata dan terdapat bercak hitam dalam jaringan sebagai
Sisa kalsium.
 FIKSASI
P Faktor yg mempengaruhi Fiksasi
R 1. Suhu
A 2, Penetrasi larutan
- • Waktu penetrasi
A • Tingkat penetrasi
N 3. Dimesi Spesimen
A 4, Rasio Volume
L 5, pH ( Keasaman )
I pH sel 6,8-7,2 ( Normal)
T
I
K
 Macam cairan fiksasi
P A, SITOLOGI
R Methanol Alkohol 95%
A
KERING

-  Pewarnaan giemsa  Pewarnaan papanicolaou

A  Pemeriksaan AJH  Papsmear metode apus
N
A
L Alkohol 50 % 1:1 Alkohol 70 %
I
T
BASAH

 Cairan ascites  Sputum

I  Cairan pleura
K
SITOLOGI

TUJUAN FIKSASI SITOLOGI

Memprenetasi sel dengan cepat

Minimal menjaga sel dari kerusakan atau kehilangan komponen

sel layaknya ketika masih hidup

Menghentikan proses metabolisme autolisis

Menghentikan proses pertumbuhan selular dan mikroorganisme

 17

P
R
A
-
A
N
A
L
I
T
I
K
Terfiksasi Kurang Fiksir
Catatan:
Cairan tanpa fixasi  transportasi ke lab < 1-2 jam
P Bila tidak dapat dikirim saat itu juga ke lab  ditaruh di kulkas (tidak
R dibekukan)

A
-
A Urin & cairan cerebrospinal tidak difixasi  transport segera

N
A
L Kirim segera apusan yg telah difixasi  hindari air drying artifacts / kirim
I slide apusan dengan terendam cairan fixasi

T
I
K Dalam transportasi perhatikan kemungkinan kontaminasi apusan dengan
debu / abrasi permukaan

18
Lanjutan..
Pengumpulan endapan, bekuan darah, potongan jaringan yg terlihat pada
B. Cell Block sediaan sitologi menjadi blok parafin

P
R
A
-
A
N
A
L
I
T
I
K
19
Michael, C. and B. Davidson. “Pre-analytical issues in effusion cytology.” Pleura and Peritoneum 1 (2016): 45 - 56; Shidham, Vinod B. “CellBlockistry: Chemistry and art of
cell-block making - A detailed review of various historical options with recent advances.” CytoJournal vol. 16 12. 28 Jun. 2019, doi:10.4103/cytojournal.cytojournal_20_19
Lanjutan..

C. Histopatologi, Histokimia, Imunohistokimia

• Formalin Buffer 10%  tidak denaturasi protein
• Infiltrasi jaringan 0.5 - 1 mm/jam (tidak dipengaruhi konsentrasi formalin)
P • PH netral (7)
R • Isotonis
A
-
A D. Imunofluorescens
N • Formalin Buffer 4%
A
L
I
E. Pemeriksaan Molekuler
• Formalin merusak DNA  gunakan formalin buffer
T (PH netral), suhu dingin (4 0C), durasi fiksasi maksimal
I 24 jam
K
https://www.cellsignal.com/learn-and-support/protocols/protocol-if; Maraschin, Bruna Jalfim, et al.
20
"Optimizing Fixation Protocols to Improve Molecular Analysis from FFPE Tissues." Brazilian dental journal 28.1
(2017): 82-84.
TERIMA KASIH