UNIVERSITAS HASANUDDIN
FAKULTAS KEDOKTERAN
Registrasi
Judul Penelitian
Tipe Proposal
Proyek Lanjutan
Proyek Perubahan
Apabila Proposal perubahan dan lanjutan, sebutkan No. SP3
sebelumnya :
Penelitian:
bukan kerjasama
kerjasama nasional
kerjasama internasional
(lampirkan persetujuan etik dari negara tersebut)
5
6
Institusi Pelaksana
Sumber Dana
7
8
Waktu penelitian
Rp 11.500.000
Laboratorium Farmakologi Fakultas Farmasi Universitas Muslim
Indonesia Makassar.
Mulai: Juni 2014 hingga selesai
Satu rangkap Proposal Asli yang sudah disetujui oleh pembimbing atau kepala instansi
(dilampirkan: persetujuan atasan yang berwenang)
Lima rangkap Ringkasan Proposal Penelitian dengan lampirannya dibawah ini:
Lampiran 6. Alat dan Bahan yang Dipakai pada Penelitian, lengkap dengan spesifikasi
Lampiran 7. Surat Perjanjian Kerjasama antara Peneliti, Sponsor dan Institusi Penelitian
(untuk penelitian kerjasama)
Lampiran 8.Investigators brochure (Bila diperlukan)
Lampiran 9. Rincian anggaran
Lampiran 10. Lain-lain
2.
Ya
Tidak
Bila ya, apakah ada rekomendasi KPPH tentang protokol penelitian yang diajukan
Ya
3.
Tidak
Jumlah :
30 ekor
Umur:
2-3 bulan
Berat badan:
150 g
4.
a. Tujuan Proyek
untuk menentukan efek ekstrak etanol daun salam, daun katuk dan kombinasinya
berdasarkan parameter kolesterol total dan trigliserida terhadap tikus wistar jantan
hiperlipidemia.
b. Alasan memanfaatkan hewan dalam kajian penelitian ini (silahkan kemukakan dengan review
literatur).
Penelitian ini merupakan penelitian eksperimental secara in vivo merupakan uji praklinik, sehingga
terlebih dahulu pengujian dilakukan dengan hewan uji.
c. Prosedur yang akan dilakukan (termasuk pre, post, dan selama pelaksanaan)
Pre Penelitian :
Hewan uji yang digunakan adalah tikus (Rattus norvegicus)wistar jantan dengan berat badan 150200 gram sebanyak 30 ekor. Sebelum hewan uji digunakan, maka hewan uji diadaptasikan selama
2 minggu dengan pemberian diet standar untuk meminimalisasi variasi biologis dan sumber
keseragaman hewan uji yang dapat mempengaruhi hasil penelitian.
Penelitian :
Untuk melihat efek pemberian ekstrak uji terhadap penurunan kadar kolesterol total dan trigliserida
hewan uji maka hewan uji sebanyak 30 ekor dibagi menjadi 6 kelompok terdiri dari 5 ekor tikus
yaitu kelompok I control negatif diberi suspensi Na.CMC, kelompok II kontrol positif diberi
suspensi simvastatin, kelompok III diberi ekstrak etanol daun salam konsentrasi 5%b/v, kelompok
IV di beri ekstrak etanol daun katuk konsentrasi 5%b/v ,kelompok V diberi kombinasi ekstrak
etanol konsentrasi kecil 10%b/v (ekstrak daun salam 5%b/v + ekstrak daun katuk 5%b/v) dan
kelompok VI diberi kombinasi ekstrak etanol konsentrasi besar 15%b/v (ekstrak daun salam
7,5%b/v + ekstrak daun katuk 7,5%b/v). Sebelum di beri perlakuan, hewan uji yang telah
diadaptasikan selama 2 minggu terlebih dahulu dipuasakan selama 12-16 jam, setelah itu dilakukan
pengambilan darah melalui ekor tikus putih sebanyak 1 ml kedalam tabung eppendorf kemudian
disentrifuge. Serum diambil dan dicampur kedalam reagen kolesterol dan reagen trigliserida,
setelah itu dilakukan pengukuran dengan menggunakan alat human analyzer microlab 300 sebagai
kadar kolesterol dan trigliserida awal. Selanjutnya hewan uji diinduksi dengan diet tinggi kolesterol
(lemak kambing, lemak sapi, hati ayam, kuning telur bebek dan diet standar) dan propiltiourasil
secara oral menggunakan sonde oral selama 4 minggu. Setelah itu dilakukan pengambilan darah
dan diukur sebagai kadar kolesterol dan trigliserida induksi. Kemudian hewan uji diberikan
suspensi Na.CMC, suspensi simvastatin, ekstrak uji secara oral selama 14
hari, setelah itu dilakukan pengambilan darah dan pengukuran kadar
Post Penelitian : Hewan tidak dimusnahkan dan tetap dipelihara
5.
Ya
Tidak
b.
c.
Dosis : -
6.
7.
Dosis : -
(*)
A : Penelitian yang dilakukan pada hewan invertabrata, atau tumbuhan, bakteri, amuba (binatang bersel
satu)
B : Penelitian pada hewan vertebrata yang sedikit sekali atau sama sekali tidak menimbulkan rasa
ketidaknyamanan
C : Penelitian pada hwan vertebrata yang sedikit menimbulkan stres atau rasa sakit tetapi pendek
D : Penelitian yang dilakukan pada hewan vertebrata dimana stress dan rasa sakit tidak bisa dihindarkan
E : Prosedur yang menimbulkan rasa sakit diatas toleransi sakit pada hewan tanpa dianestesi
Lokasi dimana hewan akan ditempatkan :
Ruangan Khusus Hewan Percobaan, Laboratorium Praklinik Farmakologi, Fakultas Farmasi, Universitas
Muslim Indonesia.
Tikus ditempatkan dikandang dalam ruangan pada kondisi bebas patogen diberi makanan biasa dan diberi
siklus penerangan 12 jam gelap dan 1 jam terang.
RINGKASAN POPOSAL
Judul Penelitian
Peneliti Utama
Penghubung
No. telpon
08991302284
Lokasi
Bagian
Penelitian/
Jenis Penelitian
:
:
Riset
Pengajaran
Lain-lain
Juni 2014
Lama Penelitian
5 bulan
1.
Pembimbing
: Aulia Wati Rusli S.Farm.,M.Si.,Apt
Anggota Peneliti : Alfiana Pramitha Gonibala
: Andi Cassia Siamae
: Nurfadillah Pikri
Apakah anda mencari sponsor dari luar?
Ya
Tidak
Jelaskan dengan singkat tetapi lengkap tentang tujuan, hipotesis, manfaat yang
jelas dari penelitian ini:
Lihat deskripsi penelitian
4.
Jelaskan dengan singkat tetapi lengkap tentang latar belakang ilmiah dari
penelitian ini dan rencana penelitiannya. scientific background to the project and
project plan.
Lihat deskripsi penelitian
5.
Apakah metode yang digunakan pada penelitian ini bisa dilakukan dengan
simulasi komputer atau dilakukan pada binatang percobaan?
Ya
Tidak
6.
Jelaskan dengan ringkas semua prosedur yang anda gunakan pada subyek
penelitian:
Jenis penelitian yang digunakan adalah metode eksperimental
laboratorium yang diujikan pada hewan uji dengan tahapan
penelitian yaitu pengumpulan dan pengolahan sampel,
pembuatan simplisia, pembuatan ekstrak, hingga pada pengujian
ekstrak daun salam (Eugenia polyantha), daun katuk (Sauropus androgynus L. Merr)
dan terhadap mencit jantan berdasarkan parameter Kolesterol
total dan Trigliserid.
7.
Jelaskan kemungkinan bahaya, risiko atau efek samping pada subyek akibat
prosedur yang anda gunakan, serta kewaspadaan yang anda lakukan untuk
mencegah atau meminimalkan hal tersebut.
Kemungkinan resiko yang timbul adalah digigit oleh hewan uji pada saat
pemberian makanan dan sampel uji. Kemungkinan tersebut dapat dihindari dengan
kehati-hatian pada pemberian makanan dan sampel uji
8.
Jelaskan hal-hal yang tidak enak atau yang mengganggu subyek tapi harus
dilakukan oleh subyek sehubungan dengan prosedur penelitian ini.
Penyesuaian dengan kondisi laboratorium, persaingan dalam satu kandang,
pencekokan dan penyuntikan dan paling miris adalah pembunuhan terhadap
6
Tuliskan jumlah, jenis dan batasan usia subyek termasuk kontrol bila ada.
30 tikus galur wistar umur 2-3 bulan
10.
11.
12.
13.
Ya
14.
Tidak
Ya
Tidak
(b). Apakah pada penelitian ini digunakan teknik DNA, toksin, mutagen, tetragon,
atau karsinogenik?
Ya
15.
Tidak
Apakah proposal ini dimintakan persetujuan etik dari lain-lain komite etik??
Ya
Tidak
Bila Ya, ke komite etik mana saja:
Ya
Tidak
Isu etik apakah yang mungkin terjadi pada pelaksanaan prosedur penelitian ini?
Isu etik yang bisa muncul menyangkut : pemeliharaan tikus (tikus dipelihara
selama penelitian dikandang hewan, dipelihara dan diadaptasikan sesuai kondisi
laboratorium)
PERNYATAAN
Saya yang bertanda tangan di bawah ini,
LAMPIRAN 1
SUSUNAN TIM PENELITI
NO
.
NAMA
KEDUDUKAN
DALAM
PENELITIAN
Peneliti utama
KEAHLIAN
1.
Arini Arianti
Dewi Kartika
2.
Pembimbing
Dosen Bidang
Farmakologi
3.
Alfiana Pramitha
Gonibala
Anggota
Peneliti
Bidang
Farmakologi
4.
Andi
Siamae
Anggota
Peneliti
Bidang
Farmakologi
Anggota
Peneliti
Bidang
Farmakologi
5.
Cassia
Nurfadillah Pikri
Bidang
Farmakologi
10
LAMPIRAN 2
BIODATA PENELITI UTAMA
I.
Data Pribadi
Nama
Tempat/tgl.lahir
Jenis kelamin
Agama
Alamat
Status
II.
Riwayat Pendidikan :
NO
STRATA
INSTITUSI
.
SDN Inpres Puri
1.
SD
Taman Sari
SMP /
2.
SMPN 33 Makassar
Sederajat
3.
SMA
SMAN 11 Makassar
Fakultas Farmasi,
4.
S1
Universitas Muslim
Indonesia
TEMPAT
TAHUN
LULUS
Makassar
2003
Makassar
2006
Makassar
2009
Makassar
2014
11
LAMPIRAN 3
SURAT PERSETUJUAN PEMBIMBING
Yang bertanda tangan dibawah ini:
Nama
: Rachmat Kosman, S.Si, M.Kes, Apt
Jabatan
:Dekan Fak. Farmasi
Menerangkan,
Bahwa yang bersagkutan dibawah ini:
Nama
: Arini Arianti Dewi Kartika
NIM
: 150 2010 276
Program : S1 Ilmu Farmasi Universitas Muslim Indonesia
Judul
12
LAMPIRAN 4
Makassar, 19 Mei
2014
Penanggung jawab Hewan Percobaan
Ketua
13
LAMPIRAN 5
DESKRIPSI PENELITIAN
UJI EKSTRAK DAUN SALAM (Eugenia polyantha), DAUN KATUK(Sauropus
androgynus L. Merr) DAN KOMBINASINYA BERDASARKAN PARAMETER
KOLESTEROL TOTAL DAN TRIGLISERIDA TERHADAP
TIKUS GALUR WISTAR JANTAN HIPERLIPIDEMIA
LATAR BELAKANG
.Di Indonesia, berdasarkan data dari Departemen Kesehatan (2004)prevalensi
hiperkolesterolemia sebesar 9,3% pada usia 25 34 tahun dan meningkat
hingga 15,5% pada usia 55 65 tahun. Hiperlipidemia adalah peningkatan
salah satu atau lebih kolestrol, kolestrol ester, fosfolipid, atau trigliserida.
Dimana penyakit ini dapat terjadi secara primer atau sekunder akibat diet,
penyakit, atau pemberian obat. (Sukmania S. dkk, 2008)
Pedoman ATP III merekomendasikan pendekatan pengurangan resiko
hiperlipidemia adalah dengan perubahan gaya hidup yaitu diet rendah
kolesterol, penurunan berat badan dan aktivitas fisik secara teratur serta
ditunjang dengan penggunaan obat-obat sintetik. Adapun untuk penggunaan
obat sintetik kendalanya terletak pada harga obat dan efek samping sehingga
sebagian besar pengobatan lebih mengarah ke penggunaan tanaman
tradisional. Dimana penggunaan obat tradisional akhir-akhir ini lebih
dikembangkan karena relatif murah, tersedia, aman dan tidak ada efek
samping (Sulchan M dkk,2007; Asaolu MF, 2010; Fogari R;2004)
Daun salam dan daun katuk merupakan tanaman yang biasa
digunakan oleh masyarakat secara empiris dalam penurunan kadar kolestrol.
Dimana kandungan kimianya dari daun salam yaitu flavonoid, selenium,
vitamin A, vitamin C, vitamin E yang berfungsi sebagai antioksidan. Selain
itu daun salam juga mengandung tanin, saponin, niasin, yang dapat
14
KRITERIA SAMPEL
Kriteria Inklusi:
1. Tikus jantan yang sehat
2. Umur 2-3 bulan
3. Bobot badan yang sama (150-200 gr)
Kriteria eksklusi: Termasuk kriteria untuk mengundurkan diri
1. Tikus yang mati sebelum 7 hari penelitian
2. Tikus yang sakit selama penelitian berlangsung
CARA KERJA
Untuk melihat efek pemberian ekstrak uji terhadap penurunan kadar kolesterol total
dan trigliserida hewan uji maka hewan uji sebanyak 30 ekor dibagi menjadi 6
kelompok terdiri dari 5 ekor tikus yaitu kelompok I control negatif diberi suspensi
Na.CMC, kelompok II kontrol positif diberi suspensi simvastatin, kelompok III diberi
ekstrak etanol daun salam konsentrasi 5%b/v, kelompok IV di beri ekstrak etanol daun
katuk konsentrasi 5%b/v ,kelompok V diberi kombinasi ekstrak etanol konsentrasi
kecil 10%b/v (ekstrak daun salam 5%b/v + ekstrak daun katuk 5%b/v) dan kelompok
VI diberi kombinasi ekstrak etanol konsentrasi besar 15%b/v (ekstrak daun salam
7,5%b/v + ekstrak daun katuk 7,5%b/v). Sebelum di beri perlakuan, hewan uji yang
telah diadaptasikan selama 2 minggu terlebih dahulu dipuasakan selama 12-16 jam,
setelah itu dilakukan pengambilan darah melalui ekor tikus putih sebanyak 1 ml
kedalam tabung eppendorf kemudian disentrifuge. Serum diambil dan dicampur
kedalam reagen kolesterol dan reagen trigliserida, setelah itu dilakukan pengukuran
dengan menggunakan alat human analyzer microlab 300 sebagai kadar kolesterol dan
trigliserida awal. Selanjutnya hewan uji diinduksi dengan diet tinggi kolesterol (lemak
kambing, lemak sapi, hati ayam, kuning telur bebek dan diet standar) dan
propiltiourasil secara oral menggunakan sonde oral selama 4 minggu. Setelah itu
dilakukan pengambilan darah dan diukur sebagai kadar kolesterol dan trigliserida
induksi. Kemudian hewan uji diberikan suspensi Na.CMC, suspensi simvastatin,
ekstrak uji secara oral selama 14 hari, setelah itu dilakukan pengambilan darah dan
pengukuran kadar kolesterol dan trigliserida.
16
ALUR PENELITIAN
Pembuatan Simplisia
Pembuatan ekstrak
Ekstrak etanol Ekstrak Etanol Daun Katuk (Sauropus androgynus
L. Merr) (Maserasi)
Uji Efek
Hiperlipidemia
Kelompok I Kontrol normal (CMC
kelompok IV di beri ekstrak etanol daun
katuk konsentrasi 5%b/v
1%)
kelompok II kontrol positif diberi
suspensi simvastatin
kelompok III diberi ekstrak etanol daun
salam konsentrasi 5%b/v
18
LAMPIRAN 6
ALAT DAN BAHAN DALAM PENELITIAN
No.
1
2
10
Uraian
Tikus
Serum
Kolesterol
Serum
Trigliserida
Tablet
simvastatin
Propiltiourasi
l
Aquadest
Etanol 95%
Alkohol 70%
Natrium
CMC
Spoit 5 ml
11
Spoit 3 ml
12
Kanula/sonde
oral
Tabung
sentrifuge
Tabung
3
4
5
6
7
8
9
13
14
justifikasi
Hewan coba
Reagen
Kuantitas
30 ekor
2 box
Reagen
2 box
Obat
pembanding
penginduksi
20 biji
pelarut
pelarut
antiseptik
Sebagai
kontrol
Alat
penginduksi
Alat
penginduksi
Alat
penginduksi
Wadah
sentrifuge
Wadah
1 botol
3 liter
6 liter
1 liter
10 gram
10 buah
20 buah
6 buah
10 buah
200 buah
19
15
effendorf
Diet standar
16
Diet tinggi
lemak
17
Tip kuning
(ujung
mikropipet)
Tip Biru
(ujung mikro
pipet)
Sekam
18
19
20
21
22
Sarung
tangan
Kandang
tikus
Masker
Pakan hewan
coba
Pakan untuk
meningkatka
n kadar
kolesterol
Alat untuk
mengambil
sampel
Alat untuk
mengambil
sampel
Pelapis
kandang
hewan coba
Pelindung
tangan
Tempat
menyimpan
hewan coba
Pelindung
mulut
15 bungkus
20 kg
200 buah
30 buah
1karung
1 box
6 kandang
1 box
LAMPIRAN 9
RINCIAN BIAYA PENELITIAN
N
Jenis Pengeluaran
o
1. Biaya Peralatan Penunjang
2. Biaya Bahan Habis Pakai
3. Biaya Perjalanan
4. Biaya Lain-Lain
Jumlah
Biaya (Rp)
Rp. 1.000.000,00
Rp. 8.990.000,00
Rp. 410.000,00
Rp. 1.100.000,00
Rp.11.5000.000,00
DAFTAR PUSTAKA
Asaolu MF, Asaolu SS, Oyeyemi AO, Aluko BT. 2010. Hypolipemic effects of
methanolic extract of Persea Americana seeds in hypercholesterolemic rats.
J.Med Sci 1(14)
BPOM RI. 2013. Dokumenentasi Ramuan Etnomedisin Obat Asli Indonesia, Jakarta
Depkes RI. (2008) : Farmakope Herbal Indonesia Edisi I, Jakarta
Dipiro JT, Talbert LR, et.al.2008. Pharmacoterapy A Pathophysiologic Approach,
Sevent Edition, The McGraw-Hill Companies United States.
Fogari R, Zoppi A. Effect of antihypertensive agents on quality of life in the elderly.
Drug Aging 21; 2004.
21
Diponegoro,
Fakultas
kedokteran,
Semarang.
(Online):
CW.,2011.
Profile
of
Eugenia
Polyantha.
(0nline):
Http://carlasabandar.files.wordpress.com/2011/07profile-of-eugeniapolyantha-wight.pdf.
Subekti.S, Piliang.GW, Manalu.W, dan Murdiyati BT.,2006.Penggunaan Tepung
Daun katup dan Ekstrak Daun Katuk (Sauropus androginus L.Merr) sebagai
substitusi ransum yang dapat menghasilkan produk puyuh Jepang rendah
kolestrol.JITFVol.11,No.4.
(Online)Http://bbalitvet.litbang.deptan.go.id/eng/attachments/247_34.pdf.
Sulchan M, Rukmi IMG., 2007. Effect Of Tempe Gembus On Cholesterol Profile In
Hyperlipidemic
Rats,
Med
Indones
Vol.16
No.4.
(Online):
Http://mji.ui.ac.id/journal/index.php/mji/article/.../279.pdf.
Sukmaniah S, Bardosono S, Oetoro S, Permadhi I, Lestarina L., 2008. The Effect of
Phytosterol In Low Fat Milk On Serum Lipid Levels Among Mild-Moderately
Hypercholesterolemic
Subjects,
Med
Indones,
Vol
17,
No.
1.
(Online):Http//mji.ui.ac.id/journal/index.php/mji/article//289.pdf.
22
Etika Penelitian
Hewan Uji mencit pada penelitian ini akan diterminasi
seminimal mungkin menimbulkan rasa sakit yaitu dengan cara
dislokasi leher.
Kegiatan
1
Bulan
3
Penelusuran Literatur
Pengambilan dan Pengolahan Sampel
Penyiapan ekstrak
Penyiapan Hewan Coba
Pengujian efek antihiperlipidemia
23
6
7
8
Analisis data
Penyusunan Laporan
Seminar dan Publikasi
24