Jurnal Farmasetis Volume 3 No 1, Hal 6 - 10 , Mei 2014

Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal

ISSN : Cetak 2252-9721

ANALISA KUANTITATIF SEDIAAN TABLET SIANOKOBALAMIN (VITAMIN B 12)

DARI 2 PRODUSEN X DAN Y SECARA SPEKTROFOTOMETRI UV-VIS
Febriyan Danu P1, Ariyanti2
PT. Sampharindo Semarang1, Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal2
Email: ririeariyanti@yahoo.com

ABSTRAK
Pendahuluan: Vitamin adalah zat-zat organik kompleks yang dibutuhkan dalam jumlah yang sangat
kecil. Vitamin yang terdapat di bumi sangatlah banyak dan tubuh kita juga memerlukan berbagai
vitamin tersebut. Penguna vitamin larut lemak dalam dosis tinggi (vitamin A dan E) yang di sarankan
sebagai antioksidan haruslah berhati-hati karena dapat menurunkan respons sistem imun .
Sianokobalamin (vitamin B12) memiliki kandungan cobalt dengan aktivitas biologis vitamin
B12(CNCbI). Vitamin B12 merupakan kristal berwarna merah dengan klarutannya yang baik dalam air
(1g/80 mL pada 25ºC). Dalam bentuk amorfnya, vitamin ini bersifat higroskopik dan menyerap kurang
lebih 12% air (b/b). Vitamin ini larut dalam alkohol, fenol dan pelarut polar lainnya yang mempunyai
gugus hidroksi. Asupan cukup akan vitamin B12 merupakan kunci untuk mempertahankan
keseimbangan tubuh . Metode: Metode yang digunakan yaitu spektrofotometri UV-Vis dengan
lamda 278 nm. Validasi metode analisis kuantitatif sianokobalamin dengan cara spektrofotometri UV-
Vis karena pada spektrofotometri UV-Vis pengunaannya luas, dapat digunakan untuk senyawa
organik , anorganik dan biokimia. Kedua, selektivitasnya sedang sampai tinggi sehingga apabila
panjang gelombang ditemukan dimana analit mengabsorbsi sendiri sehingga persiapan pemisahan
menjadi tidak perlu. Dan yang terakhir mudah, spektrofotometer mengukur dengan mudah dan
kinerjanya cepat dengan instrumen modern, daerah pembacaannya otomatis. Dari penjelasan diatas
peneliti tertarik untuk penelitian yang terkait vitamin B12 dengan metode spektrofotometri UV-Vis,
yaitu: “Analisis Kuantitatif Tablet Sianokobalamin (vitamin B 12) Sediaan Generik dan Paten Secara
Spektrofotometri UV-Vis. Hasil: Perbandingan kadar tablet vitamin B12 sediaan generik dan paten
tidak menunjukkan perbedaan yang bermakna.

Kata kunci : Sianokobalamin, Kadar, Spektrofotometri UV-Vis

ABSTRAC
Introdaction: Vitamins are complex organic substances that are needed in very small amounts. The
vitamins contained in the earth are numerous and our bodies also need these vitamins. The users of
high-dose fat-soluble vitamins (vitamins A and E) recommended as antioxidants should be careful
because they can decrease the immune system response. Cyanocobalamin (vitamin B12) has a cobalt
content with the biological activity of vitamin B12 (CNCbI). Vitamin B12 is a red crystalline with
good clarity in water (1g / 80 mL at 25ºC). In its amorphous form, this vitamin is hygroscopic and
absorbs about 12% water (w / w). This vitamin is soluble in alcohols, phenols and other polar solvents
having hydroxy groups. (Sudjadi and Rohman, 2008) Adequate intake of vitamin B12 is key to
maintaining body balance. Methode: The method used for quantitative analysis of vitamin B12 level
determination is UV-Vis spectrofotometry method by using quantitative aspect, that is by UV-Vis
spectrophotometry with 278 nm lamda Validation of the cyanocobalamin quantitative analysis method
by UV-Vis spectrophotometry because of wide UV-Vis spectrophotometry, it can be used for
inorganic, inorganic and biochemical compounds absorbed in ultra violet or visible regions. Second,
the slacktivity is moderate to high so that when the wavelength is found where the analyte absorbs
itself so that the preparation of the separation becomes unnecessary. And the latter is easy, the
spectrophotometer measures easily and its performance is fast with modern instruments, its automatic
reading area.From the above explanation researchers interested in research related to vitamin B12
with UV-Vis spectrophotometry method, namely: "Quantitative Analysis of Cyanocobalamin Tablets
(vitamin B12) Generic and Patent Spectrophotometric UV-Vis. Result: the comparison of vitamin B12
tablet content of generic and patent preparations did not show any significant difference.

Keywords: cyanocobalami, levels, spectrophotometry UV-Vis.

6
Jurnal Farmasetis Volume 3 No 1, Hal 6 - 10, Mei 2017
PENDAHULUAN
Vitamin adalah zat-zat organik kompleks yang
dibutuhkan dalam jumlah yang sangat kecil.
Vitamin yang terdapat di bumi sangatlah
banyak dan tubuh kita juga memerlukan
berbagai vitamin tersebut. Kadangkala tubuh
memerlukan vitamin dalam jumlah yang
sedikit, namun tidak jarang pula tubuh
memerlukan vitamin dalam jumlah banyak
karena apabila kekuranagan vitamin dapat
terkena penyakit. Macam vitamin yang
terdapat di bumi kelarutannya dibagi menjadi 2
yaitu vitamin yang larut dalam lemak seperti
vitamin A, D, E, K dan vitamin yang larut air
seperti vitamin B1, B2, B6, B12 dan vitamin C.
Vitamin larut air tidak disimpan oleh tubuh
sehingga perlu dipasok terus dari makanan
atau suplemen, sedangkan vitamin larut lemak
disimpan oleh tubuh tetapi apabila kelebihan
dapat meninmbulkan efek samping keracunan
vitamin. Karena itu, penguna vitamin larut
lemak dalam dosis tinggi (vitamin A dan E)
yang di sarankan sebagai antioksidan haruslah
berhati-hati karena dapat menurunkan respons
sistem imun (Sudjadi dan Rohman, 2008).
Bermacam-macam jenis dan kegunaan dari
vitamin, di antarannya jenis vitamin yang
beredar di pasaran seperti dalam bentuk
provitamin atau calon vitamin (precursor)
yang dapat diubah dalam tubuh menjadi suatu
vitamin yang aktif setelah vitamin diabsorbsi
oleh tubuh, provitamin mengalamin perubahan
kimia sehingga menjadi satu atau lebih bentuk
yang aktiv (Winarno, 2004). Vitamin berfungsi
sebagai zat sangat penting bagi tubuh manusia
dan hewan untuk perkembangan dan
pertumbuhan seperti vitamin A, B, C, D dan
sebagainya. Vitamin sangat dibutuhkan oleh
tubuh walaupun dalam jumlah sedikit. Vitamin
dapat memberikan energi dan tidak dapat
dihilangkan karena sangat dibutuhkan agar
fungsi tubuh tetap normal. Maka dari itu,
makanan yang kita konsumsi harus
mengandung vitamin. Jika makanan tidak
mengandung vitamin, maka akan
mengakibatkan penyakit avitaminosis
termasuk penyakit defesiensi (penyakit karena
kekurangan vitamin dan makanan). (Sutomo
dan Ibrahim, 2008).
Sianokobalamin (vitamin B12) memiliki
kandungan cobalt dengan aktivitas biologis
vitamin B12(CNCbI). Vitamin B12 merupakan
kristal berwarna merah dengan klarutannya
yang baik dalam air (1g/80 mL pada 25ºC).
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal
Dalam bentuk amorfnya, vitamin ini bersifat
higroskopik dan menyerap kurang lebih 12%
air (b/b). Vitamin ini larut dalam alkohol, fenol
dan pelarut polar lainnya yang mempunyai
gugus hidroksi. Vitamin B12 tidak larut dalam
pelarut organik seperti aseton, eter dan benzen.
Kristalnya tidak meleleh akan tetapi
mengalami peruraian pada suhu di atas 200°C.
(Sudjadi dan Rohman, 2008) Asupan cukup
akan vitamin B12 merupakan kunci untuk
mempertahankan keseimbangan tubuh .
METODE
Metode yang digunakan untuk analisis
kuantitatif penetapan kadar vitamin B12 adalah
metode spektrofotometri UV-Vis dengan
mengunakan aspek kuantitatif, yaitu dengan
cara spektrofotometri UV-Vis dengan lamda
278 nm (Sudjadi dan Rohman, 2008). Validasi
metode analisis kuantitatif sianokobalamin
dengan cara spektrofotometri UV-Vis karena
pada spektrofotometri UV-Vis pengunaannya
luas, dapat digunakan untuk senyawa organik ,
anorganik dan biokimia yang diabsorbsi di
daerah ultra lembayung atau daerah tampak .
Kedua, slektivitasnya sedang sampai tinggi
sehingga apabila panjang gelombang
ditemukan dimana analit mengabsorbsi sendiri
sehingga persiapan pemisahan menjadi tidak
perlu. Dan yang terakhir mudah ,
spektrofotometer mengukur dengan mudah dan
kinerjanya cepat dengan instrumen modern,
daerah pembacaannya otomatis. Dari
penjelasan diatas peneliti tertarik untuk
penelitian yang terkait vitamin B12 dengan
metode spektrofotometri UV-Vis, yaitu:
“Analisis Kuantitatif Tablet Sianokobalamin
(vitamin B12) Sediaan Generik dan Paten
Secara Spektrofotometri UV-Vis. Peralatan
yang digunakan pada penelitian ini, antara lain
Spektrofotometer UV-Vis (cary 60), Cuvet
(quart cell), Labu Takar 100 ml (Pyrex), Labu
Takar 50 ml (Pyrex), Pipet Volum 1, 2, 3, 4, 5
ml (Pyrex), Timbangan Elektrik , tabung reaksi
(Pyrex), Beaker Glass 250 ml dan 500 ml
(Pyrex), Kertas Saring , Mortir dan Stamper,
dan peralatan lain yang diperlukan. Vitamin
B12 yang di ambil dari 2 produsen X dan Y,
Aquadest, Etanol. Sampel tablet vitamin B12
yang di ambil dari 2 produsen X dan Y.
Cara kerja pengujian sampel
a. Penetapan panjang gelombang maksimum
sianokobalamin dalam aquadest, ditimbang
setara 6 mg sianokobalamin secara seksama
kemudian dilarutkan dalam aquadest hingga
7
Jurnal Farmasetis Volume 3 No 1, Hal 6 - 10, Mei 2017
100 ml,di amati menggunakan
spektrofotometri UV- Vis dengan panjang
gelombang 361 nm.
b. Pembuatan deret baku
Dibuat larutan baku Vitamin B12 dalam
aquadest lalu dibuat seri larutan baku Vitamin
B12, setara 6 mg vitamin B12 dilarutkan 100
ml dalam aquadest kemudian dibaca
serapannya pada spektrofotometri UV-Vis
pada panjang gelombang 361 nm.
c. Preparasi sampel
Ditimbang sejumlah sampel Vitamin B12 dari
produsen X setara 6 mg secara seksama
kemudian dilarutkan dalam aquadest sebanyak
100 ml kemudian diukur absorbannya dengan
panjang gelombang 361 nm dilakukan
pengukuran sebanyak 7 kali dengan
pengenceran 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 30 ppm,
40 ppm, 50 ppm, 60 ppm
Buat konsentrasi baku induk sianokobalamin
(Vitamin B12) dari produsen X 6 ppm dalam
100 ml aquadest
Ppm = mg/L
60 = mg/0,1 L
= 6 mg
Preparasi sampel
Ditimbang sejumlah sampel Vitamin B12 dari
produsen Y setara 6 mg kemudian dilarutkan
dalam aqudest sebanyak 100 ml diukur
absorbannya dengan panjang gelombang 361
nm dilakukan pengukuran sebanyak 7 kali
dengan pengenceran 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm,
30 ppm, 40 ppm, 50 ppm, 60 ppm.
Membuat konsentrasi baku induk
Sianokobalamin (Vitamin B12) dari produsen Y
60 ppm dalam 100 ml aqudest
Ppm = mg/L
60 = mg/0,1 L
= 6 mg
Pembutan sampel
Ditimbang masing-masing tablet
sianokobalamin dari 2 produsen X dan Y
setara 6 mg, di encerkan dengan aqudest
sebanyak 100 ml. Sejumlah larutan tersebut di
encerkan dengan aquadest sampai diperoleh
konsentrasi berturut- turut 5 ppm, 10 ppm, 20
ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm, 60 ppm
dihitung absorbansinya pada spektrofotometri
UV- Vis dengan panjang gelombang 361 nm.
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal
Uji Linieritas
Hubungan yang linier antara respon analisis
dan konsentrasi analit dalam rentang
penggunaan metode analis.
a. Pembuatan larutan untuk pemeriksaan
linieritas
Larutan sampel dengan konsentrasi 70%,
80%, 90%, 100% diukur absorbanya.
b. Persyaratan linieritas
Garis regresi koefisien korelasi ≥ 0,98%.
Uji presisi
Ukuran yang menunjukkan derajat kesesuaian
antara hasil uji individual, diukur melalui
penyebaran hasil individual dari rata-rata jika
prosedur diterapkan secara berulang pada
sampel-sampel yang diambil dari campuran
yang homogen.
a. Pembuatan larutan untuk pemeriksaan
presisi
Larutan sampel dan larutan standart
dengan konsentrasi 100% diukur absorbannya
sebanyak 7 x.
b. Persyaratan presisi : RSD ≤ 2,0%
Uji akurasi
Kedekatan antara nilai yang dapat diterima
baik sebagai nilai konvensional / nilai
pembanding yang dapat diterima dengan nilai
yang diperoleh yaitu hasil analisis. Akurasi
metode analis dinyatakan dengan Recovery
hasil analisis.
Pembuatan larutan untuk pemeriksaan akurasi
Diperiksa larutan sampel dan larutan standart
dengan konsentrasi 80%, 100%, 120% masing-
masing 7x, lalu dibaca absorbannya.
Persyaratan akurasi
Recovery 90,0% – 110,0% RSD ≤ 2,0%
HASIL
Spektrofotometri adalah merupakan suatu
metode analisa yang berdasarkan pada
pengukuran serapan sinar monokromatis oleh
suatu lajur larutan berwarna pada panjang
gelombang yang spesifik. Pada penelitian uji
analisa pada vitamin B12 (Sianokobalamin)
sediaan generik dan paten dilakukan analisis
kuantitatif secara spektrofotometri ultraviolet
visibel (UV-vis.), yang dilakukan dengan cara
pertama, dengan membuat terlebih dahulu
larutan baku induk 60 ppm sebanyak 100 ml
dalam labu takar 100 ml. Dengan cara
8
Jurnal Farmasetis Volume 3 No 1, Hal 6 - 10, Mei 2017
melakukan penimbangan terlebih dahulu
kemudian dihitung kadar nya setelah dianalisa
pada spektrofotometri UV-vis dengan panjang
gelombang 361 nm.
Dari larutan baku induk tersebut kemudian
dibuat deret baku dengan pengukuran
sebanyak 7 kali, pengenceran 5 ppm, 10 ppm,
20 ppm, 30 ppm,40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm.
Kemudian di larutkan dengan menggunakan
aquadest hingga tanda batas, homogenkan.
Kemudian baca serapannya pada
sprektofotometer Uv-vis pada panjang
gelombang 361 nm. Dari percobaan tersebut
didapat hasil absorbansi dari kadar 5 ppm, 10
ppm, 20 ppm, 30 ppm, 40 ppm, 50 ppm, 60
ppm secara berturut-turut adalah 0.0988,
0.1860, 0.3645, 0.5514, 0.6554, 0.9119,
1.0856, dengan konsentrasi 5.0, 10.0, 20.0,
30.0, 40.0, 50.0, 60.0. Kemudian dilakukan
preparasi sampel paten dan generik dengan
pengukuran sebanyak 7 kali dengan
pengenceran 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 30
ppm,40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm, kemudian
di larutkan dengan mengunakan aquadest
hingga tanda batas, kemudian dihomogenkan.
Kemudian dilakukan pembacaan serapan pada
sprektofotometer Uv-vis dengan panjang
gelombang 361 nm. Dari percobaan tersebut
didapatkan hasil absorbansi dari sampel
generik pada pengenceran 5 ppm, 10 ppm, 20
ppm, 30 ppm,40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm
berturut-turut adalah 0.0193, 0.0251, 0.0636,
0.0741, 0.0805, 0.1139, 0.1220 dengan
konsentrasi 1.1, 1.4, 3.6, 4.1, 4.5, 6.4, dan 6.8.
Kemudian untuk preparasi sampel paten dari
pengenceran 5 ppm, 10 ppm, 20 ppm, 30
ppm,40 ppm, 50 ppm dan 60 ppm berturut-
SIMPULAN
1. Kadar dari masing-masing tablet vitamin
B12 pada sediaan generik dan paten adalah
didapatkan untuk sedian generik pada
sampel 1 sampai 7 adalah 0.85, 1.11, 2.82,
3.29, 3.57, 5.05, 5.41 dan untuk sedian
paten pada sampel 1 sampai 7 adalah 0.74,
1.59, 2.92, 2.45, 3.03, 3.85, 7.05
2. Perbandingan kadar tablet vitamin B12
sediaan generik dan paten tidak
menunjukkan perbedaan yang bermakna.
3. Validitas penetapan kadar tablet vitamin
B12 yang digunakan menggunakan
spektrofotometri Uv-Vis sudah valid.
Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal
turut adalah 0.0167, 0.0359, 0.0658, 0.0553,
0.0684, 0.0869, 0.1588, dengan konsentrasi
0.9, 2.0, 3.7, 3.1, 3.8, 4.9, 8.9.
PEMBAHASAN
Dalam penelitian ini terdapat nilai absorban
yang tidak maksimal pada preparasi sampel
paten dengan pengenceran 30 ppm dimana
hasil absorban lebih rendah yaitu 0,0553, hal
ini dikarenakan pada saat pengenceran yang
kurang tepat pada saat pemipetan sehingga
didapat nilai absorban yang kurang tepat.
Untuk hasil kadar pada sediaan generik dan
paten secara berturut didapatkan untuk sedian
generik padaa sampel 1 sampai 7 adalah 0.85,
1.11, 2.82, 3.29, 3.57, 5.05, 5.41 dan untuk
sedian paten pada sampel 1 sampai 7 adalah
0.74, 1.59, 2.92, 2.45, 3.03, 3.85, 7.05.
Sedangkan pada sampel paten kadar 30 ppm
mengalami penurunan kadar dimana kadar
lebih rendah dikarenakan kemungkinan karena
pada saat pengeceran terjadi kesalahan.
Validasi metode Vitamin B12 secara
spektrofotometri Uv-Vis meliputi pertama, uji
linieritas dimana secara teoritis r nya harus
memenuhi persyaratan linieritas jika r ≥ 0.998.
Pada penelitian ini didapatkan hasil r nya
adalah 0.999. Kedua, uji presisi yang secara
teoritis harus menghasilkan presisi RSD ≤ 2%,
nilai RSD ≤ 2, 0%, sedangkan pada penelitian
ini hasil RSD adalah 2,0%. Sehingga untuk
hasil linieritas dan presisi memenuhi
persyaratan. Ketiga, uji recovery, dimana hasil
recovery secara teoritis harus berada pada
range 90 – 110% dan pada penelitian ini
didapatkan hasil untuk sedian generik adalah
95,3 % dan untuk sediaan paten adalah
100,4%.
DAFTAR PUSTAKA
F.G.Winarno. 2004. Kimia Pangan dan Gizi.
PT Gramedia Pustaka Utama. Jakarta.
Sudjadi dan Rohman. 2008. Analisis
Kuantitatif Obat. Gadjah Mada
University Press. Yogyakarta.
Ganjdar dan Rohman. 2007. Kimia Farmasi
Analisis. Pustaka Pelajar. Yogyakarta.
Ganjdar dan Rohman. 2012. Analisis Obat.
Pustaka Pelajar. Yogyakarta.
9
Jurnal Farmasetis Volume 3 No 1, Hal 6 - 10, Mei 2014 Sekolah Tinggi Ilmu Kesehatan Kendal

Anonim. 1979. Farmakope indonesia. Edisi R.A. Day, JR. Dan A.L. Underwood. 2002.
III. Jakarta : Departemen Kesehatan Analisis Kimia Kuantitatif Edisi
Republik Indonesia. Keenam. Erlangga. Jakarta

10