Anda di halaman 1dari 51

MEKANISME PRODUKSI EMBRIO SECARA IN VIVO DAN

APLIKASI TRANSFER EMBRIO DI BALAI EMBRIO


TERNAK CIPELANG BOGOR

Laporan Pelaksanaan Praktek Kerja Lapang

Oleh:

Pranaya Arya Satya NIM. 155050101111186


Nur Ma’idah NIM. 155050100111005
Mifrotul Komariyah NIM. 155050100111034
Febrina Eka Rahayu NIM. 155050100111071
Ivan Geovani NIM. 155050101111190

PROGRAM STUDI PETERNAKAN


FAKULTAS PETERNAKAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2018

1
MEKANISME PRODUKSI EMBRIO SECARA IN VIVO DAN
APLIKASI TRANSFER EMBRIO DI BALAI EMBRIO
TERNAK CIPELANG BOGOR

Laporan Pelaksanaan Praktek Kerja Lapang

Oleh:

Pranaya Arya Satya 155050101111186


Nur Ma’idah 155050100111005
Mifrotul Komariyah 155050100111034
Febrina Eka Rahayu 155050100111071
Ivan Geovani 155050101111190

Praktek Kerja Lapang ini merupakan salah satu


syarat untuk memperoleh gelar Sarjana
Peternakan pada Fakultas Peternakan
Universitas Brawijaya

PROGRAM STUDI PETERNAKAN


FAKULTAS PETERNAKAN
UNIVERSITAS BRAWIJAYA
MALANG
2018

2
MEKANISME PRODUKSI EMBRIO SECARA IN VIVO DAN APLIKASI
TRANSFER EMBRIO DI BALAI EMBRIO TERNAK CIPELANG BOGOR

Laporan Pelaksanaan Praktek Kerja Lapang

Oleh:

Pranaya Arya Satya 155050101111186


Nur Ma’idah 155050100111005
Mifrotul Komariyah 155050100111034
Febrina Eka Rahayu 155050100111071
Ivan Geovani 155050101111190

Menyetujui:
Dosen Pembimbing Dosen Penguji,

(Dr.Ir.Sri Wahjuningsih, M.Si) (____________________)


NIP. 196401101988022001 NIP.....................................
Tanggal ................................. Tanggal .............................

Mengetahui:
Universitas Brawijaya Fakultas Peternakan Balai Embrio Ternak Cipelang
Program Studi Peternakan
Ketua,

(Dr. Agus Susilo, S.Pt., MP) (Yanyan S., S.Pt.,MP.)


NIP. 19730820 199802 1 001 NIP. ...................................
Tanggal ................................. Tanggal 26 Agustus 2018

Mengetahui,
Universitas Brawijaya
Dekan

(Prof.Dr.Sc.Agr.Ir. Suyadi, MS.)


NIP. 19620403 198701 1 001
Tanggal .............................

3
THE MECHANISM OF EMBRYO PRODUCTION ON IN VIVO AND
APPLICATION OF EMBRYO TRANSFER IN BALAI EMBRIO TERNAK
CIPELANG BOGOR
Pranaya Arya Satya1, Nur Ma’idah2, Mifrotul Komariyah3, Febrina Eka Rahayu4,
Ivan Geovani5, Sri Wahjuningsih6
1,2,3,4,5)
Student of Animal Science Faculty Brawijaya University
6)
Lecturer of Animal Science Faculty Brawijaya University
Email: pranayaarya@ymail.com
ABSTRACT
The general objective of the activities of the field work practice is acquires
knowledge and skills in the field about embryo production mechanism and
application of embryo transfer in Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang Bogor.
Primary data collection was conducted based on data recording the observations
and discussions while the secondary data collection was conducted based on data
that already exists and processed by certain parties who are published in the form
of a journal or a book. The production of embryos in BET done for in vivo use in
cattle donors who have already been selected before. Embryo production program
consists of several stages, namely synchronization of lust, superovulasi, artificial
insemination and flushing. Subsequently be evaluated prior to embryo transfer
embryo.
Keywords: Cattle Resipien, Cattle Donor, Embryo Evaluation, Embryo Production,
Embryo Transfer.

4
MEKANISME PRODUKSI EMBRIO SECARA IN VIVO DAN APLIKASI
TRANSFER EMBRIO DI BALAI EMBRIO TERNAK CIPELANG BOGOR
Pranaya Arya Satya1, Nur Ma’idah2, Mifrotul Komariyah3, Febrina Eka Rahayu4,
Ivan Geovani5, Sri Wahjuningsih6
1,2,3,4,5)
Student of Animal Science Faculty Brawijaya University
6)
Lecturer of Animal Science Faculty Brawijaya University
Email: pranayaarya@ymail.com
RINGKASAN
Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang merupakan salah satu unit pelaksana teknis
dibawah Direktorat Jendral Peternakan dan Kesehatan Hewan, Departemen
Pertanian Republik Indonesia yang bergerak dalam produksi dan penerapan
bioteknologi Transfer Embrio (TE). Praktik Kerja Lapang (PKL) telah
dilaksanakan selama satu bulan dari 2 Juli hingga 30 Juli 2018 di Bogor, Jawa Barat.
Tujuan umum dari dilakukan kegiatan Praktik Kerja Lapang (PKL) yakni untuk
memperoleh pengetahuan dan keterampilan dibidang mekanisme produksi embrio
dan penerapan transfer embrio (TE) di BET Cipelang Bogor. Produksi embrio di
BET dilakukan secrara in vivo dengan menggunakan ternak donor yang telah
diseleksi sebelumnya. Progam ini terdiri dari beberapa tahapan yakni singkronisasi
estrus, superovulasi, inseminasi buatan (IB) dan flushing, serta evaluasi embrio
sebelum dilakukan transfer embrio (TE).

5
KATA PENGANTAR

Puji syukur penulis panjatkan kepada Allah Yang Maha Kuasa, sehingga
dapat menyelesaikan penulisan laporan PKL ini dengan baik. Oleh karena itu,
dalam kesempatan penulis juga sangat berterima kasih kepada yang terhormat:
1. Kedua orang tua yang telah memberikan semangat dan motivasi selama
proses pembelajaran.
2. Dr. Ir. Sri Wahjuningsih, M.Si. selaku Pembimbing Utama atas saran dan
bimbingannya.
3. Prof. Dr. Sc.Agr. Ir. Suyadi, MS., selaku Dekan Fakultas Peternakan
Universitas Brawijaya.
4. Dr. Agus Susilo, S.Pt., MP., selaku Ketua Program Studi Ilmu Peternakan
yang telah banyak membina kelancaran proses studi.
5. Penulis juga menyampaikan terima kasih kepada Bapak Yanyan Setiawan,
S.Pt., MP., Ibu Yuni Siswanti S.Pt., M.Si. dan seluruh stakeholder yang
telah memberikan kesempatan praktek kerja lapang di Balai Embrio Ternak.

Malang, 27 Agustus 2018

Penulis

6
DAFTAR ISI

Isi Halaman
HALAMAN SAMPUL ................................................................................ i
HALAMAN JUDUL .................................................................................... ii
HALAMAN PENGESAHAN ...................................................................... iii
ABSTRACT .................................................................................................. iv
RINGKASAN ............................................................................................... v
KATA PENGANTAR .................................................................................. vi
DAFTAR ISI ................................................................................................. vii
DAFTAR TABEL ........................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................... ix
BAB I PENDAHULUAN
1.1 Analisa Situasi ................................................................................ 1
1.2 Rumusan Masalah........................................................................... 2
1.3 Tujuan ............................................................................................. 2
1.4 Keguanaan ...................................................................................... 2
BAB II TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Teknologi Reproduksi Ternak ........................................................ 3
2.1.1 Inseminasi Buatan........................................................................
2.1.2 Transfer Embrio ...........................................................................
2.1.2.1 Seleksi Donor dan Resipien ......................................................
2.1.2.2 Sinkronisasi dan Superovulasi ..................................................
2.1.2.3 Panen Embrio dan Evaluasi ......................................................
BAB III METODE KEGIATAN
3.1 Lokasi dan Waktu Kegiatan............................................................ 9
3.2 Khalayak Sasaran............................................................................ 9
3.3 Metode Kegiatan............................................................................. 9
3.4 Analisis Hasil Kegiatan .................................................................. 9
3.5 Batasan Istilah................................................................................. 9
BAB IV HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1 Produksi Embrio (In Vivo) melalui Ternak Donor......................... 11
4.1.1 Pemeliharaan Sapi Donor ............................................................
4.1.2 Seleksi Donor...............................................................................
4.1.3 Sinkronisasi Estrus Donor ...........................................................
4.1.4 Superovulasi Donor .....................................................................
4.1.5 Inseminasi Buatan........................................................................
4.1.6 Flushing .......................................................................................
4.2 Persiapan Ternak Resipien ............................................................. 15
4.2.1 Pemeliharaan Sapi Resipien ........................................................
4.2.2 Seleksi Resipien ...........................................................................

7
4.2.3 Sinkronisasi Estrus Resipien .......................................................
4.3 Evaluasi Embrio.............................................................................. 18
4.3.1 Teknik Evaluasi Embrio ..............................................................
4.3.2 Klasifikasi Embrio .......................................................................
4.4 Pengemasan Embrio (Loading) ...................................................... 21
4.5 Pembekuan dan Penyimpanan Embrio ........................................... 23
4.5.1 Pembekuan Embrio......................................................................
4.5.2 Penyimpanan Embrio ..................................................................
4.6 Transfer Embrio .............................................................................. 24
4.6.1 Persiapan Transfer Embrio ..........................................................
4.6.2 Pelaksanaan Transfer Embrio ......................................................

BAB V PENUTUP
5.1 Kesimpulan ..................................................................................... 26
5.2 Saran ............................................................................................... 26
DAFTAR PUSTAKA ................................................................................... 27
LAMPIRAN .................................................................................................. 28

8
DAFTAR TABEL

Isi Halaman
Tabel 1. Protokol Berdasarkan Birahi ...........................................................
Tabel 2. Protokol berdasarkan sinkronisasi birahi menggunakan progesterone
device ...............................................................................................
Tabel 3. Protokol berdasarkan pengembangan teknis superovulasi menggunakan
suntik epidural..................................................................................
Tabel 4. Protokol berdasarkan pengembangan teknis superovulasi dengan interval
waktu produksi 25-30 hari ...............................................................
Tabel 5. Rangkaian proses transfer embrio di BET Cipelang .......................
Tabel 6. Protokol berdasarkan sinkronisasi birahi menggunakan progesteron devise
Tabel 7. Protokol berdasarkan adanya corpus luteum menggunakan single dosis
Tabel 8. Protokol berdasarkan tidak adanya corpus luteum menggunakan double
dosis
Tabel 9. Fase Embrio.....................................................................................
Tabel 10. Kriteria Kualitas Embrio ..............................................................
Tabel 11. Data Produksi Embrio di Balai Embrio Ternak Cipelang Bogor pada
Bulan Juli 2018 ................................................................................
Tabel 12. Data TE di BET pada Bulan Mei-Juli ...........................................

9
DAFTAR GAMBAR

Isi Halaman
Gambar 1. Flushing Embrio ……. ......................................................
Gambar 2. Evaluasi Embrio..........................................................................
Gambar 3. Pemberian Pakan Hijauan dan Pemberian Air Minum...............
Gambar 4. Konsetrat Ternak Donor .............................................................
Gambar 5. Skema Sinkronisasi Birahi..........................................................
Gambar 6. Progesteron Device ....................................................................
Gambar 7. Pemeriksaan Estrus dan Persiapan IB.........................................
Gambar 8. Proses Flushing...........................................................................
Gambar 9. Ternak Resipien ..........................................................................
Gambar 10. Pemberian Pakan Hijauan dan Pemotongan Kuku ...................
Gambar 11. Konformasi Tubuh Sapi Resipien.............................................
Gambar 12. Filtrasi Embrio ..........................................................................
Gambar 13. Fase – Fase Embrio...................................................................
Gambar 14. Loading Embrio ........................................................................
Gambar 15. Proses Seeding ..........................................................................
Gambar 16. Proses Thawing Embrio............................................................

10
BAB I
PENDAHULUAN

1.1 Analisis Situasi


Peternakan merupakan salah satu sektor yang saat ini sedang berkembang di
Indonesia. Salah satu sektor peternakan yang menjadi fokus pemerintah saat ini
adalah peternakan sapi potong. Untuk mencukupi kebutuhan daging setiap
tahunnya, selain pasokan daging sapi dalam negeri, pemerintah juga melakukan
impor daging sapi dari negara-negara tertentu. Upaya yang dilakukan oleh
pemerintah untuk meminimalisir jumlah impor daging sapi adalah mengharuskan
industri peternakan skala besar selain melakukan impor sapi bakalan juga
diwajibkan untuk melakukan kegiatan breeding atau budidaya pembibitan sapi
potong untuk mengurangi jumlah impor sapi bakalan setiap tahunnya. Kegiatan
breeding memerlukan bibit unggul untuk menghasilkan produk yang berkualitas.
Cara lain yang dapat dilakukan adalah dengan meningkatkan mutu genetik sapi-
sapi yang ada di Indonesia. Menurut Sutarno (2016) peningkatan mutu genetik
dilakukan dengan memanfaatkan bioteknologi yang dapat meningkatkan produksi
peternakan. Penerapan bioteknologi dalam peternakan antara lain: kloning,
inseminasi buatan, transfer embrio, dan rekayasa genetik pada ternak.
Seiring dengan perkembangan Ilmu Pengetahuan dan Teknoogi (IPTEK)
maka berbagai upaya telah dilakukan untuk menghasilkan bibit sapi unggul. Salah
satu teknologi yang saat ini sedang diterapkan adalah teknologi transfer embrio.
Menurut Adifa, Astuti dan Widiyati (2010) bahwa Transfer Embrio (TE)
merupakan teknik untuk mempercepat proses reproduksi dengan mutu genetik yang
unggul. Dalam prosesnya, embrio akan dipindahkan dari seekor ternak betina yang
bertindak sebagai donor pada waktu embrio tersebut belum mengalami implantasi,
kepada seekor ternak betina yang bertindak sebagai penerima sehingga resipien
tersebut menjadi bunting. Pedet hasil TE memiliki mutu genetik yang sama dengan
induknya (100% murni). Di Indonesia terdapat satu unit instansi pemerintah yang
bergerak dibidang produksi embrio.
Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang Bogor merupakan salah satu Unit
Pelaksanaan Teknis yang berada dibawah Direktorat Jendral Peternakan dan
Kesehatan Hewan, Kementerian Pertaian Republik Indonesia yang bergerak di
bidang bioteknologi produksi dan aplikasi transfer embrio. Terdapat 3 bidang
kegiatan yang dilakukan di BET antara lain bidang kegiatan pemeliharaan ternak,
produksi dan aplikasi, informasi dan penyebaran hasil. Pemeliharaan ternak
meliputi pemeliharaan sapi donor dan resipien dari berbagai bangsa, kebersihan dan
sanitasi kandang, recording, manajemen pemberian pakan dan minum, manajemen
kesehatan dan perawatan ternak, uji performan serta perkandangan. Kegiatan
produksi dan aplikasi dimulai dari seleksi donor, superovulasi, inseminasi buatan
(IB), pemanenan embrio (flushing), evaluasi kualitas embrio, pengemasan dan
penyimpanan embrio serta TE. Bidang informasi dan penyebaran hasil bertugas

11
untuk mendistribusikan embrio yang telah diproduksi serta penyebaran hasil
melalui media informasi dan komunikasi. Tenak yang dihasilkan melalui teknologi
transfer embrio (TE) diharapakan dapat menjadi ternak bibit yang unggul sehingga
mampu meningkatkan kualitas dan mutu genetik sapi-sapi yang ada di Indonesia.
Adanya Balai Embrio Ternak diharapkan menjadi salah satu balai yang
menghasilkan benih dan bibit sapi unggul di Indonesia. Pemeliharaan sapi donor
dan resipien dilakukan untuk meningkatkan populasi ternak unggul dan
meningkatkan ternak hasil TE sebagai penyediaan benih dan bibit sapi unggul.
Embrio yang dihasilkan akan didistribusikan ke seluruh Indonesia sehingga dapat
meningkatkan populasi ternak unggul sebagai upaya pemerintah untuk mencapai
swasembada daging. Pejantan dari hasil TE akan digunakan sebagian oleh
BBIB/BIB untuk produksi semen beku.

1.2 Rumusan Masalah


Rumusan masalah dari Kegiatan Praktik Kerja Lapang (PKL) ini adalah
sebagai berikut :
1. Bagaimana mekanisme produksi embrio di Balai Embrio Ternak (BET)
Cipelang Bogor?
2. Bagaimana aplikasi teknologi transfer embrio (TE) di Balai Embrio Ternak
(BET) Cipelang Bogor?

1.3 Tujuan
Tujuan umum dari kegiatan Praktik Kerja Lapang (PKL) ini adalah sebagai
berikut :
1. Memperoleh ilmu dan pengetahuan tentang mekanisme produksi dan aplikasi
transfer embrio di Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang Bogor.
2. Mendapatkan pengalaman manajerial dan melatih softskill serta hardskill
dalam bidang embrio transfer selama di Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang
Bogor.

1.4 Kegunaan
Kegiatan Praktik Kerja Lapang (PKL) ini bermanfaat bagi berbagai pihak,
diantaranya :
a. Bagi Mahasiswa
 Meningkatkan ilmu pengetahuan dan keterampilan dalam dunia kerja
 Mengasah dan melatih kemampuan dalam aspek manajerial yang siap
untuk menghadapi permasalahan dalam suatu perusahaan
 Melatih mahasiswa untuk menjadi seorang problem solver
 Memberikan bekal bagi mahasiswa sebelum memasuki dunia kerja.
b. Bagi Perguruan Tinggi
 Meningkatkan dan mempererat kerjasama antara Perguruan Tinggi
sebagai pusat ilmu dan teknologi dengan Instansi Pemerintah dan swasta

12
 Mencetak mahasiswa yang unggul dibidang pengetahuan dan
implementasi lapang.
c. Bagi Instansi
 Menjalin hubungan kerjasama dengan Perguruan Tinggi
 Menciptakan tenaga kerja yanga berkompeten dibidangnya
 Sebagai salah satu fasilitator dalam menunjang kegiatan pendidikan
melalui Praktik Kerja Lapang

13
BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

2.1 Teknologi Reproduksi Ternak


2.1.1 Inseminasi Buatan
Inseminasi buatan (IB) atau kawin suntik adalah upaya memasukkan semen
segar, cair maupun beku ke dalam saluran reproduksi hewan betina yang sedang
birahi dengan bantuan inseminator agar hewan bunting. Keahlian dan keterampilan
inseminator dalam akurasi pengenalan birahi, sanitasi alat, penanganan (handling)
semen beku, pencairan kembali (thawing) yang benar, serta kemampuan melakukan
IB akan menentukan keberhasilan.Indikator yang paling mudah untuk menilai
keterampilan inseminator adalah dengan melihat persentase atau angka tingkat
kebuntingan (conception rate, CR) ketika melakukan IB dalam kurun waktu dan
pada jumlah ternak tertentu (Herawati, Anggraeni, Praharani, Utami, dan Argiris.,
2017).
Keberhasilan IB dipengaruhi oleh kualitas straw, ketepatan IB,
keterampilan inseminator serta kondisi induk dan pakan yang baik. Kualitas semen
segar yang dapat dipakai untuk IB adalah minimum mengandung 500 juta sel/ml
ejakulat dan 50% spermatozoa hidup dan aktif. Semakin baik kualitas sperma, maka
semakin besar keberhasilan IB (Suteky, Sutriyono, Dwatmadji, dan Sholihin.,
2017). IB dilakukan tiga kali (pagi, sore, dan pagi esoknya) untuk mengoptimalkan
fertilisasi (Setiawan, Dihansih, dan Zamanti., 2017). Untuk betina yang akan di IB
harus diperiksa terlebih dahulu. Pemeriksaan yang dilakukan meliputi palpasi
rektal, ultrasound dan vaginoscopy yang dapat dilengkapi dengan laparoskopi dan
biopsi. Pada palpasi rektal dan ultrasonografi diperiksa ukuran, konsistensi dan
kontraksi dari rahim, tanduk uterus dan simetri. Dalam ovarium diamati bentuk dan
ukuran folikel yang konsisten, kista dan korpus luteum persisten (Mohammed,
2018).

2.1.2 Transfer Embrio


Teknik TE umumnya merupakan suatu manipulasi fungsi alat reproduksi
dengan perlakuan berbagai hormon gonadotropin pada betina donor yang akan
menyebabkan pertumbuhan, pematangan, dan ovulasi sel telur dalam jumlah lebih
besar. Sel telur hasil superovulasi, setelah dibuahi oleh spermatozoa pejantan
unggul dikoleksi dari donor, dievaluasi, kemudian ditransfer ke induk resipien yang
selanjutnya akan terjadi kebuntingan dan kelahiran (Waluyo, 2014).
Transfer embrio segar maupun beku ke resipien dilakukan pada hari siklus
birahi yang sama dengan umur embrio (karena embrio dipanen pada umur 7 hari)
maka siklus birahi resipien yang dapat dipakai adalah 7 ± 1 hari setelah birahi atau
birahi hewan donor dan resipien minimal dalam 24 jam. Transfer dilakukan
langsusng ke kornua uteri kurang lebih 5-10 cm dari bifurkasio uteri. Resipien yang
tidak menunjukkan gejala birahi setelah 3 siklus birahi yang diharapkan dapat

14
dilakukan pemeriksaan kebuntingan per rectal untuk menentukan berhasil tidaknya
program transfer. Pemeliharaan resipien yang telah bunting sama seperti
pemeliharaan-pemeliharaan pada hewan bunting pada umumnya. (Campbell,
Fishel, Bowman, Duffy, Sedler, and Thorton., 2013).

2.1.2.1 Seleksi Resipien dan Donor


Kriteria seleksi donor pada program TE, yaitu melihat nilai genetik baik dan
mampu memproduksi embrio layak transfer, nilai jual anak yang tinggi dan kondisi
kesehatan yang baik. Kondisi kesehatan donor harus dipelihara dengan tepat
melalui karantina, tes darah dan vaksinasi. Resipien yang ideal adalah sapi betina
muda dan bebas penyakit, memperlihatkan fertilitas yang tinggi serta mampu
melahirkan dan memelihara anak. Sapi resipien harus diuji kesehatan dan keadaan
reproduksinya meliputi keabnormalan pada sistem reproduksi, kebuntingan awal
dan adanya penyakit. Selain itu harus dikarantina sehingga mudah mengamati
kesehatannya, temperatur tubuh tubuh, dan beberapa infeksi yang berpengaruh
besar terhadap infertilitas dan abortus (Sophian dan fifi., 2016).
Sapi donor yang digunakan untuk program superovulasi diseleksi terlebih
dahulu yaitu dengan cara memeriksa keadaan alat reproduksi (servik, uterus dan
ovarium). Cara penyeleksian dilakukan dengan palpasi rektal pada organ
reproduksi calon ternak donor, memastikan bahwa ternak tidak dalam keadaan
bunting dan mengecek keadaan ovarium kanan dan kiri dengan mengetahui
kondisi folikel dan corpus luteum (Setiawan, dkk., 2017).

2.1.2.2 Sinkronisasi dan Superovulasi


Sapi merupakan ternak uniparous atau ternak yang hanya menghasilkan satu
keturunan dalam satu masa kebuntingan, sehingga hanya satu sel telur yang
terovulasi pada setiap siklus birahi (Sophian dan Fifi, 2016). Sehingga perlu adanya
superovulasi untuk menghasilkan banyak sel telur. Untuk pelaksanaan superovulasi
secara konvensional dilakukan dengan penyuntikan Follicle Stimulating Hormone
(FSH) sebanyak dua kali sehari. Perlakuan superovulasi bertujuan menginduksi
banyak folikel berovulasi untuk menghasilkan banyak oosit sehingga setelah
difertilisasi akan dihasilkan banyak embrio layak transfer dan memberikan tingkat
kebuntingan yang diharapkan. Pelaksanaan superovulasi secara tradisional
dilakukan dengan penyuntikan hormon FSH pada pagi dan sore selama 3–4 hari
dengan dosis menurun untuk menstimulasi perkembangan folikel (Imron,
Supriatna, Amrozi, dan Agus., 2016). Selain hormon FSH ada alternatif hormon
lain yang dapat dijadikan superovulasi, yaitu PMSG. PMSG atau Pregnant mare’s
serum gonadotropin merupakan glikoprotein komplek yang mempunyai aktivitas
biologi seperti FSH dan LH, dimana aktivitas FSHnya lebih besar (Campbell, et.al.,
2013).

15
2.1.2.3 Panen Embrio dan Evaluasi
Koleksi embrio merupakan kegiatan pemanenan embrio pada ternak yang
dapat dilakukan dengan cara operasi (surgical) maupun tanpa operasi (non
surgical). Koleksi embrio dengan cara pembedahan (surgical) biasanya dilakukan
untuk ternak yang sudah mati (ovari dari RPH) sedangkan koleksi embrio tanpa
pembedahan (non surgical) dilakukan pada ternak hidup biasanya dengan
menggunakan metode flushing. Flushing embrio merupakan proses pemanenan
embrio hasil program superovulasi. Flushing dilakukan dengan memasukkan folley
kateter ke dalam uterus kanan dan kiri (Waluyo, 2014). Flushing dilakukan pada
hari ke-7 setelah birahi atau IB pertama. Medium yang digunakan untuk flushing
adalah NaCl fisiologis yang ditempatkan dalam botol dan telah terhubung dengan
pipa penyalur. NaCl fisiologis akan dialirkan menuju uteri dengan menggunakan
saluran folley kateter. Hasil dari flushing yang berisi medium dan embrio akan
ditampung dalam botol untuk dilakukan evaluasi embrio.

Gambar 1. Flushing Embrio


Panen embrio dilakukan dengan cara metode pembilasan pada uterus,
pembilasan uterus dilakukan dengan membuka klem pemasukan dan menutup klem
pengeluaran. Media pembilas dibiarkan mengalir sebanyak 20-50 ml. Untuk
pembilasan pertama hanya 20-30 ml, dalam keadaan klem pemasukan tertutup
dilakukan pemijatan dan manipulasi uterus dimana kornua uteri diluruskan
beberapa menit untuk menghindari adanya embrio yang tersekap dalam apeks uteri
yang melengkung, kemudian klem pengeluaran dibuka untuk mengeluarkan media
pembilas. Cara pembilasan ini diulang lagi 8 – 10 kali, sehingga untuk satu kornua
uteri dibutuhkan 400 - 500 ml media pembilas. Setelah pembilasan pada satu kornua
selesaikemudian dilanjutkan dengan kornua yang lainnya. Pemindahan kateter
dilakukan dengan pengempesan balon terlebih dahulu. Setelah pembilasan selesai
uterus dibersihkan dengan cairan iodine povidone 2% sebanyak 50 ml yang
dimasukan secara intra vagina untuk mencegah infeksi. Setelah itu sapi disuntik
dengan PGF2α, untuk mencegah terjadinya kebuntingan dan mempercepat masa
pemulihan reproduksi (Jodiansyah, Imron, dan Sumantri., 2013).
Evaluasi embrio dilakukan didalam labortorium. Evaluasi embrio dilakukan
dibawah mikroskop stereo. Tujuan dari evaluasi embrio adalah untuk menentukan

16
kualitas dari embrio. Menurut Pranatasari, Kustono dan Widayati (2016) klasifikasi
kualitas embrio berdasarkan morfologi dibedakan menjadi 5 meliputi kualitas
embrio A (excelent), kualitas embrio B (good), kualitas embrio C (fair), kualitas
embrio D (poor) dan kualitas embrio E (very poor). Embrio yang layak untuk
diproses lebih lanjut (dibekukan) adalah embrio yang memiliki kualitas baik.

Gambar 2. Evaluasi Embrio


Kriopreservasi merupakan salah satu teknik yang digunakan untuk
menyimpan sel dalam bentuk beku dengan cara mempertahankan kelangsungan
hidup sel sehingga dapat digunakan dalam jangka waktu yang lama. Metode
kriopreservasi terdiri dari metode konvensional (slow freezing) dan metode
vitrifikasi (rapid freezing). Selama proses kriopreservasi memerlukan suatu zat
yang bertindak sebagai krioprotektan. Krioprotektan terdiri dari krioprotektan
ekstra seluler dan krioprotektan intra seluler. Krioprotektan ekstraseluler akan
melindundungi sel dari luar sedangkan krioprotektan intraseluler akan melindungi
sel dari dalam. Krioprotektan diperlukan dalam proses pembekuan untuk mencegah
terjadinya kerusakan sel selama proses pembekuan. Embrio yang telah dikemas
dalam mini straw selanjutnya dimasukkan dalam kontainer yang berisi nitrogen cair
untuk dilakukan penyimpanan (Wahjuningsih, Hardjopranjoto dan Sumitro, 2010).
Embrio layak transfer adalah embrio yang sudah berkembang minimal
mencapai fase 4 (morula) dengan kualitas 1 (excellent) dan 2 (fair). Embrio
degenerasi/jelek adalah embrio yang mengalami kerusakan lebih dari 75% pada sel-
sel blastomerenya dan memiliki bentuk yang tidak beraturan (kualitas 3 dan 4).
Oosit terfertilisasi adalah embrio yang minimal memiliki dua sel blastomer. Oosit
dianggap tidak mengalami fertilisasi jika tidak teramati tanda-tanda pembelahan sel
blastomer (Imron, dkk., 2016).

17
18
BAB III
METODE KEGIATAN

3.1 Lokasi dan Waktu Kegiatan


Praktek Kerja Lapang (PKL) ini dilaksanakan selama satu bulan, yaitu pada
tanggal 02 Juli – 31 Juli 2018, di Balai Embrio Ternak Cipelang Bogor, Jawa Barat.
Lokasi Balai Embrio Ternak Cipelang Bogor terletak di lereng Gunung Salak di
desa Cipelang Kecamatan Cijeruk Kabupaten Bogor Provinsi Jawa Barat (17 km
dari Gerbang Tol Bogor). Secara administratif Desa Cipelang berbatasan dengan
Desa Tanjungsari (Utara), Desa Cibalung (Timur), Desa Cijeruk (Selatan),
Kabupaten Sukabumi (Barat).

3.2 Khalayak Sasaran


Sasaran dari kegiatan Praktek Kerja Lapang ini adalah semua pihak yang
terlibat aktif dalam kegiatan di Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang-Bogor, Jawa
Barat. BET berperan sebagai salah satu Unit Pelaksana Teknis (UPT) penyedia bibit
ternak sapi unggul nasional. BET Cipelang mempunyai 3 divisi/seksi, yaitu Seksi
Pelaksanaan Teknis Produksi dan Aplikasi Transfer Embrio, Seksi Informasi dan
Penyebaran Hasil, dan Seksi Pelayanan Teknis Pemeliharaan Ternak.

3.3 Metode Kegiatan


Metode yang digunakan dalam kegiatan Praktek Kerja Lapang ini adalah:
a. Magang kerja melalui kegiatan observasi dan partisipasi aktif dalam seluruh
kegiatan yang berkaitan dengan produksi dan transfer embrio di BET Cipelang-
Bogor.
b. Analisa data melalui pengumpulan data yang selanjutnya akan dipelajari untuk
mendapatkan sebuah kesimpulan yang berhubungan dengan produksi embrio,
evaluasi embrio, dan transfer embrio pada waktu pelaksanaan PKL.

3.4 Analisis Hasil Kegiatan


Hasil yang diperoleh akan dianalisis secara deskriptif yaitu dengan
menggambarkan atau menjelaskan situasi obyek pengamatan dari data-data yang
diperoleh dalam kegiatan Praktek Kerja Lapang, kemudian dibandingkan dengan
landasan teori menggunakan metode studi literatur, sehingga didapatkan
perbandingan antara kajian teori dan kenyataan di lapangan hingga akhirnya akan
diperoleh pemecahan terhadap permasalahan yang ada.

3.5 Batasan Istilah


Beberapa istilah yang kerap muncul dalam topik pembahasan mengenai
produksi dan aplikasi transfer embrio antara lain :
Embrio : Eukariota diploid multisel hasil fertilisasi oosit dengan
spermatozoa (Gunawan,Fahrudin dan Boediono 2014)

19
Transfer embrio : Teknik untuk mempercepat proses reproduksi dengan
mutu genetik yang unggul melalui pemindahan embrio
dari ternak donor ke resipien (Adifa,dkk, 2010)
Produksi embrio secara : Teknologi Multiple Ovulation Embrio Transfer (MOET).
in vivo Tujuan dari teknologi ini adalah untuk menghasilkan
embrio yang banyak dalam satu kali siklus (Situmorang
dan Triwulaningsih, 2004). Commented [A1]: Situmorang, P. dan Triwulaningsih, E. 2004.
Aplikasi dan Inovasi Teknologi Transfer Embrio (TE) untuk
Ternak donor : Ternak yang mendapat perlakuan superovulasi hingga Pengembangan Sapi Potong. Lokakarya Nasional Sapi Potong.
flushing sebagai penghasil embrio (Jodiansyah, Imron,
dan Sumantri 2017)
Ternak resipien : Ternak yang dipelihara dengan tujuan sebagai tempat
penerimaan embrio (Situmorang dan Triwulaningsih,
2004). Commented [A2]: Situmorang, P. dan Triwulaningsih, E. 2004.
Aplikasi dan Inovasi Teknologi Transfer Embrio (TE) untuk
Evaluasi embrio : Kegiatan yang dilakukan untuk mengklasifikasi embrio Pengembangan Sapi Potong. Lokakarya Nasional Sapi Potong.
berdasarkan morfologinya yaitu normal dan abnormal
(Jodiansyah, dkk. 2017).

20
BAB IV
HASIL DAN EVALUASI KEGIATAN

4.1 Produksi Embrio (In Vivo) melalui Ternak Donor


4.1.1 Pemeliharaan Sapi Donor
Sapi donor merupakan sapi yang digunakan sebagai sumber embrio
sehingga diperlukan manajemen khusus dalam pemeliharaannya. Standar
Operasional Prosedur (SOP) pemeliharaan sapi donor meliputi sanitasi kandang,
sanitasi ternak, pemberian hijauan pakan ternak dan konsentrat, pemberian air
minum, dan pemeriksaan kesehatan.
Berdasarkan hasil pengamatan di lapangan, sapi donor ditempatkan pada
kandang utama (kandang A, B, C, D, I, dan H) dan kandang rearing 2 (R2).
Kegiatan-kegiatan yang dilakukan dalam pemeliharaan sapi donor meliputi
pemeliharaan ternak, sanitasi kandang dan peralatannya, serta pemberian pakan.
Setiap hari kandang dibersihkan menggunakan air mengalir bersamaan dengan
memandikan ternak. Pembersihan kandang dan ternak dilakukan sekitar pukul
07.00 – 08.00 WIB. Kebersihan kandang dan tubuh ternak perlu diperhatikan agar
ternak tetap sehat dan bersih sehingga parasit luar tidak mudah menginfeksi.
Pemberian pakan dilakukan setelah kandang dibersihkan.
Jenis pakan yang diberikan kepada ternak donor yaitu pakan hijauan dan
pakan konsentrat. Air minum diberikan secara ad-libitum. Pemberian pakan
hijauan dilakukan 2 kali dalam sehari. Pemberian pagi pukul 08.00 – 08.30 WIB
dan siang hari pukul 13.30 – 14.00 WIB. Pemberian pakan hijauan untuk sapi
donor dan resepien sebanyak 10 % dari bobot badan atau di sesuaikan dengan
kondisi fisiologinya, sehingga masing-masing sapi donor diberi pakan hijauan
sebanyak 25-35 kg yang terdiri dari rumput gajah, rumput odot, dan stargrass.
Rumput gajah dichopping terlebih dahulu sebelum diberikan ke ternak, sedangkan
rumput odot dan stargrass tidak perlu dichopping sebelum diberikan ke ternak.
Pada saat terjadi kekurangan HPT maka pakan hijauan akan ditambahkan silase
tidak lebih dari 20% hijauan. Commented [a3]: Setauku waktu aku tanya bet gak pernah
pakek silase. Kalian ada yg tanya gak pernah ngasih pakan silase?
Trus cara buat silase di bet gimana? Dan knpa gak boleh >20%

(a) (b)
Gambar 3. (a) pemberian pakan hijauan, (b) pemberian air minum
Pemberian pakan konsentrat diberikan satu kali dalam sehari yaitu setelah
pemberian hijauan (pukul 09.00-09.30 WIB). Pemberian konsentrat untuk sapi

21
donor dan resepien yaitu sebanyak 1 % dari bobot badan atau disesuaikan dengan
kondisi fisiologisnya. Pakan konsentrat yang diberikan untuk sapi donor Commented [a4]: Iki 16 atau minim 16? Kalau setahuku itu
donor 18% resipien 16%. Kalau diberi berkisar antara berarti 19%
mempunyai kandungan protein kasar minimal 16% atau berkisar antara 15-20%. boleh dong? Padahal 19% itu proteinnya laktasi. Padahal dibawah
Pencampuran konsentrat dilakukan setiap hari dengan bahan pakan CGF, pollard, gambar 3
ada ketrangan yang menyebutkan protein berpengaruh thdp kadar
onggok, dedak, kopra, bungkil kelapa sawit, bungkil kedelai, molasses dan protein dlm darah. Walaupun hanya 1%
mineral.

Gambar 4. Konsentrat ternak donor


Perbedaan proporsi kandungan protein pada pemberian konsentrat untuk
ternak donor di BET Cipelang didasarkan pada faktor epigenetik ternak. Protein
dalam pakan akan memberikan pengaruh langsung terhadap kadar protein dalam
darah, karena protein dalam pakan akan dicerna dan diubah menjadi protein yang
beredar di dalam darah. Hardiyanto, Sumantri, dan Zamanti (2016) menjelaskan
bahwa faktor epigenetik memberikan peranan yang penting dalam perkembangan
awal embrio, seperti ion, substrat energi, asam amino, vitamin, faktor
pertumbuhan, sitokin, dan hormon. Selain itu, syarat sapi donor yang baik antara
lain memiliki saluran reproduksi yang normal, sejarah post partum yang baik,
memiliki siklus estrus normal, tidak memiliki cacat genetik maupun cacat tubuh
serta selalu mendapat kecukupan nutrisi pakan. Manajemen pemberian pakan
berperan penting untuk produksi embrio karena, sapi dengan asupan energi
berkurang memiliki folikel dominan berukuran lebih kecil dan siklus lebih dari 3
gelombang, dibandingkan dengan sapi dengan asupan pakan berkadar protein
lebih tinggi, sehingga pengaruh nutrisi terhadap efisiensi reproduksi adalah pada
tingkat produksi embrio. Commented [a5]: Iki seng bener energi apa protein yg tinggi
dan kurang?

4.1.2 Seleksi Donor


Standar Operasional Prosedur (SOP) seleksi sapi donor dilakukan dengan
melakukan pemeriksaan kesehatan dan kondisi organ reproduksi terhadap sapi
donor yang akan diprogram superovulasi melalui palpasi rektal, serta pemeriksaan
kondisi ovarium untuk menentukan status reproduksi (fase folikuler atau fase
luteal) sapi donor. Sapi donor yaitu sapi betina yang memenuhi kriteria/syarat-
syarat sebagai berikut :

22
a. Memiliki keunggulan secara genetik (genetic superiority).
b. Mempunyai catatan data individu/silsilah keturunan donor yaitu dua
generasi ke atas
c. Mempunyai catatan reproduksi (siklus berahi) normal.
d. Ternak bebas penyakit. Ternak yang diseleksi sebagai donor harus bebas
dari penyakit terutama penyakit reproduksi seperti endometritis, prolapsus
uteri, retensio secundinarum, pyometra, brucellosis, maupun kelainan
siklus reproduksi seperti corpus luteum persisten, cystic ovary, silent heat,
dan hipofungsi ovarium.
e. Memiliki sejarah reproduksi yang baik yaitu beranak teratur dan tidak
pernah mengalami kesulitan melahirkan.
f. Umur tidak terlalu tua.
Pemrograman sapi donor dilakukan setiap 2-4 bulan sekali, sehingga
dalam 1 (satu) tahun dapat dilakukan 3-5 kali flushing / panen embrio atau
tergantung dari protocol produksi embrio yang diadopsi. Sapi donor akan
diistirahatkan setelah 3-4 kali flushing atau 1 (satu) tahun diproduksi. Mekanisme
pengistirahatan sapi donor dilakukan dengan membuntingkan sapi donor tersebut
atau dengan tidak dilakukan produksi embrio selama minimal 1 tahun. Seidel dan
Elsden (1985) dalam Prasetyo (2012) mendefinisikan donor sebagai hewan
sumber embrio dipanen. Berdasarkan pengamatan saat PKL, diketahui bahwa sapi Commented [a6]: Cari jurnal aslinya jangan dalam dalam
donor sebelumnya telah disiapkan oleh Seksi Pemeliharaan Ternak sesuai dengan
menajemen pemeliharaan sapi donor. Pelaksanaan seleksi donor dapat dilakukan
untuk kontrol kondisi reproduksi ternak. Grimes (2008) menyatakan bahwa sapi
yang digunakan sebagai ternak donor harus mempunyai kriteria : memiliki genetik
unggul (genetic superiority), memiliki kemampuan reproduksi (reproductive
ability) dan memiliki keturunan yang marketable atau memiliki nilai ekonomi
yang tinggi.

4.1.3 Sinkronisasi Estrus


Penyerentakan birahi (sinkronisasi estrus) merupakan upaya yang
dilakukan untuk merangsang estrus ternak donor secara bersamaan. Terdapat 4
(empat) protokol sinkronisasi estrus di BET Cipelang.
Tabel 1. Protokol berdasarkan birahi alam
Hari ke- Perlakuan donor Keterangan
0 Birahi alam
7 Seleksi donor cek CL Ada CL lanjut
diprogram
9 Suntik FSH IM @4 ml pagi dan sore 400 mg dilarutkan
dalam 20 ml
10 Suntik FSH IM @3ml pagi dan sore
11 Suntik FSH IM @2ml pagi dan sore
Suntik PGF2α @1 dosis pagi dan sore

23
12 Suntik FSH IM @1 ml pagi dan sore

Tabel 2. Protokol berdasarkan sinkronisasi birahi menggunakan progesterone


device
Hari ke- Perlakuan donor Keterangan
0 Pasang progesterone device
9 Suntik FSH IM @4 ml pagi dan sore 400 mg dilarutkan
dalam 20 ml

10 Suntik FSH IM @3ml pagi dan sore


11 Suntik FSH IM @2ml pagi dan sore
Suntik PGF2α @1 dosis pagi dan sore
Cabut progesterone device sore
12 Suntik FSH IM @1 ml pagi dan sore

Tabel 3. Protokol berdasarkan pengembangan teknis superovulasi menggunakan


suntik epidural
Hari ke- Perlakuan donor Keterangan
0 Pasang progesterone device
7 Suntik FSH 200 mg epidural 400 mg dilarutkan
dalam 20 ml
Suntik FSH 200 mg IM
9 Suntik PGF2α IM @1 dosis pagi dan
sore
Cabut progesterone device pagi

Tabel 4. Protokol berdasarkan pengembangan teknis superovulasi dengan


interval waktu produksi 25-30 hari
Hari ke- Perlakuan donor Keterangan
0 Pasang progesterone device + suntik 5
mg estrogen + 100 mg progesteron
4 Suntik FSH IM @4 ml pagi dan sore 400 mg dilarutkan
dalam 20 ml
5 Suntik FSH IM @3ml pagi dan sore
6 Suntik FSH IM @2ml pagi dan sore
Suntik PGF2α @1 dosis pagi dan sore
Cabut progesterone device sore
7 Suntik FSH IM @1 ml pagi dan sore

Berdasarkan pengamatan di lapang selama bulan Juli 2018, diperoleh hasil


pengamatan sinkronisasi estrus menggunakan protokol dengan pemasangan

24
progesterone device yang berlangsung selama 9 (Sembilan) hari pada sapi donor
yang telah diseleksi. Superovulasi dengan protokol ini, disamping dilakukan
pemasangan progesterone device juga dilakukan penyuntikan hormone FSH dua
kali sehari dengan dosis menurun pada hari ke 9, 10, 11, dan 12. Progesterone
device dicabut pada hari ke 11.

Pagi Pasang FSH FSH FSH 2 ml + FSH IB IB Flushing dan


Cue-mate 3 ml 3 ml PGF2α 1 ml evaluasi embrio

Hari ke 0 9 10 11 12 13 14 20

FSH FSH FSH 2 ml + FSH IB


Sore
4 ml 3 ml PGF2α + cabut 1 ml
Cue-mate
Gambar 5. Skema sinkronisasi birahi menggunakan progesterone device
dan penyuntikan FSH dosis menurun

Gambar 6. Progesteron device (Cue-mate)


Estrus atau birahi merupakan fase dimana ternak betina bersedia menerima
pejantan untuk kopulasi. Fase estrus terbagi dalam 4 (empat) fase yaitu estrus,
metestrus, diestrus, dan proestrus. Sinkronisasi estrus merupakan usaha yang
bertujuan untuk menyerentakkan kondisi reproduksi ternak sapi donor dan
resipien menggunakan hormon prostaglandin (PGF2α) atau kombinasi hormon
progestron dan PGF2α. Preparat Prostaglandin F2α (PGF2α) dikenal sebagai agen
luteolitik yang dapat menyamakan siklus estrus dalam waktu yang bersamaan,
sedangkan hCG dapat menginduksi ovulasi, sehingga pemberian hCG pada
pertengahan estrus dapat merangsang pelepasan ovum dalam waktu yang lebih
seragam, maka perkembangan folikel dapat diamati sehingga dapat ditentukan
waktu inseminasi yang lebih tepat (Arifiantini, dkk., 2010).

25
4.1.4 Superovulasi pada Sapi Donor
Superstimulasi/superovulasi dilakukan dengan cara menyuntikan hormon-
hormon Gonadotropin, hormon yang digunakan yaitu FSH, PMSG, GnRH,
PGF2α, Progesteron, hCG. Penggunaan hormon-hormon tersebut disesuaikan
dengan prosedur protokol yang digunakan ataupun sesuai dengan anjuran produk
untuk program superstimulasi atau superovulasi. Pelaksanaan superstimulasi/
superovulasi dilakukan pada hari 4-9 setelah birahi alam atau pemasangan
preparat progesteron (sesuai protokol yang digunakan).
Upaya untuk merangsang ovulasi ganda (multiple ovulation) dalam
program TE, maka diberikan hormon superovulasi sehingga diperoleh 12-15 sel
telur dalam satu kali ovulasi (Prasetyo, 2012). Superovulasi dapat diinduksi secara
buatan melalui pemberian hormon gonadotropin eksogen (berasal dari luar tubuh),
misalnya FSH dan PMSG. Pemberian hormon tersebut dengan dosis tertentu akan
menstimulasi proses pertumbuhan, perkembangan, pematangan dan ovulasi dari
sejumlah besar folikel pada ternak sapi. Penyuntikan FSH pada sapi donor
dilakukan secara berulang pagi dan sore selama 3-4 hari dengan dosis menurun.
Hal ini dilakukan karena FSH mempunyai paruh waktu dalam darah yang cukup
singkat. Keberhasilan superovulasi dapat dilihat menggunakan alat
ultrasonography (USG) ataupun juga dapat dilakukan dengan palpasi rektal yaitu
dengan melihat atau meraba corpus luteum (CL) yang terdapat di ovarium.
Subchan, Handarini, dan Siswanti (2016), menyatakan bahwa keberhasilan dari
perlakuan superovulasi dapat dilihat dari respon ovarium yang diukur dari
banyaknya CL yang terbentuk akibat proses ovulasi dari folikel yang matang (de
Graaf). Semakin banyak CL yang terbentuk dapat dikatakan semakin tinggi pula
respon dari program superovulasi.

4.1.5 Inseminasi Buatan (IB)


Inseminasi Buatan (IB) dilaksanakan pada saat sapi donor menunjukkan
tanda-tanda estrus (berahi) atau mengikuti prosedur program superstimulasi/
superovulasi yang digunakan. Pada program superstimulasi/superovulasi
dilakukan lebih dari satu kali sesuai prosedur yang digunakan. Adapun tatalaksana
inseminasi buatan di BET Cipelang adalah sebagai berikut :
1. Persiapan alat dan bahan. Peralatan penunjang yang digunakan yaitu gun IB,
plastik sheath, gloves, gunting straw, pinset, thermometer, straw semen sapi,
kapas alkohol, tisu, dan air hangat.
2. Siapkan straw/semen bangsa donor.
3. Thawing semen yaitu straw dikeluarkan dari nitrogen cari (kurang dari 3
detik) dan dimasukkan ke dalam air hangat 37°C selama 10-15 detik. Tiriskan
dengan tissue.
4. Masukkan straw ke dalam gun IB dan dipasang plastik sheath. Sapi donor
siap diinseminasi.
5. Lakukan palpasi rektal pada sapi donor. Feses dibersihkan. Posisi tangan
memegang serviks, dan vulva dibersihkan dari kotoran.
6. Gun IB dimasukkan ke dalam serviks sampai posisi 4 (pangkal korpus uteri).

26
7. Suntikkan semen dan catat kode straw yang digunakan.

Gambar 7. Pemeriksaan estrus dan persiapan IB

Setelah berhasil memilih hewan donor berkualitas tinggi, kunci


keberhasilan dari transfer embrio selanjutnya terletak pada inseminasi dengan
semen yang berasal dari sapi jantan bibit unggul. Setelah perlakuan superovulasi,
perlu dilakukan pengamatan terhadap tanda-tanda estrus pada sapi donor sehingga
dapat dijadikan acuan untuk menentukan waktu inseminasi yang tepat dan IB
dilakukan 6 - 24 jam setelah estrus. Inseminasi harus segera dilakukan pada saat
sel telur diovulasikan karena daya hidup sperma yang singkat (20-30 jam)
(Prasetyo, 2012). Kualitas semen yang baik dan petugas mempunyai banyak
pengalaman dengan program TE, maka cukup dilakukan sekali inseminasi saja.
Jika hanya satu inseminasi yang dilakukan, penting untuk memeriksa berahi dan
inseminasi 10 sampai 20 jam setelah awal berahi (inseminasi dilakukan ketika
sejumlah besar telur dilepaskan dari ovarium, ovulasi dapat terjadi selama 24 jam
atau lebih). Pada saat telur terakhir dilepaskan dari ovarium mungkin tidak ada
cukup sperma untuk membuahi.
Tabel 5. Rangkaian proses transfer embrio di BET Cipelang
Hari ke: Waktu Perlakuan Keterangan
0 Pagi Pasang Cue-Mate

9 Pagi Inject 4 ml FSH


Sore Inject 4 ml FSH

10 Pagi Inject 3 ml FSH


Sore Inject 3 ml FSH

11 Pagi Inject 2 ml FSH dan PGF 2α


Sore Inject 2 ml FSH, Inject PGF 2α dan
Cabut Cue-Mate

27
12 Pagi Inject 1 ml FSH
Sore Inject 1 ml FSH

13 Pagi IB
Sore IB

14 Pagi IB

20 Pagi Flushing dan inject PGF 2α

4.1.6 Flushing (Panen Embrio)


Flushing dilakukan pada hari ke-enam sampai ke-delapan setelah IB
pertama. Standar Operasional Prosedur (SOP) flushing yaitu :
1. Cek kondisi ovarium sapi donor.
2. Petugas melakukan palpasi rectal.
3. Lakukan anastesi epidural dan pasang peralatan flushing.
4. Flushing/panen embrio.
5. Treatment pasca flushing (spool, injeksi PGF2α, dan injeksi multivitamin).
6. Lakukan pencatatan.
Peralatan penunjang yang digunakan untuk flushing yaitu media flushing
(ringer laktat/ PBS + FBS 1% + antibiotic pem-strep 0,4%), folley catheter, inner
stylet, infuse set, Y-connector, sillicontube, cervix expander, botol steril, syringer,
needle 18G, gloves, lidocaine HCl 2%, iodine poridone, PGF2α, gun spool, dan
gunting.

Gambar 8. Proses flushing


Panen atau koleksi embrio pada sapi donor dilakukan pada hari ke-6
sampai hari ke-8 setelah berahi (biasanya hari ke-7) saat sebagian besar embrio
sudah memasuki ujung cornua uteri pada masa itu. Embrio akan berkembang
sekitar satu minggu, kemudian embrio dipanen pada tahap morula sampai

28
blastocyst (Subchan, dkk 2016). Pemanenan embrio tidak dilakukan lebih awal
karena dapat menurunkan efisiensi koleksi embrio dengan metode non bedah.
Sebelum hari ke-4, hampir semua embrio terletak di dalam oviduk yang
dipisahkan dari uterus oleh utero-tubal junction. Struktur ini berfungsi sebagai
katup (valve) yang dapat mengatur masuknya sperma dari uterus menuju oviduk
sehingga fertilisasi terjadi tepat waktu dan mengatur transpor embrio ke arah
sebaliknya. Embrio akan ditranspor menuju uterus pada hari ke-4 sampai hari ke-
5 setelah estrus, melalui kontraksi ritmik pada dinding oviduk dan relaksasi dari
otot pada dinding utero-tubal junction sehingga tingkat keberhasilan koleksi
embrio akan lebih tinggi pada hari ke-6 dan seterusnya daripada hari ke-4.
Kadang-kadang beberapa embrio masih ditemukan dalam oviduk pada sapi yang
disuperovulasi sampai hari ke-10 (Prasetyo, 2012).

4.2 Persiapan Ternak Resipien


4.2.1 Pemeliharaan Sapi Resipien
Berdasarkan hasil pengamatan yang dilakukan pada saat Praktik Kerja
Lapang di BET Cipelang Bogor diperoleh sapi resipien dipelihara pada kandang
sukhoi (sukhoi 1, 2 dan 3). Kegiatan-kegiatan yang dilakukan dalam pemeliharaan
sapi resipien sama dengan sapi donor yang meliputi pemeliharaan badan sapi,
sanitasi kandang dan peralatannya, dan pemberian pakan.

Gambar 9. Ternak sapi resipien dikandang Sukhoi

Secara umum kegiatan harian perawatan sapi resipien menurut SOP,


meliputi: pembersihan kandang dan lingkungannya, pembersihan tempat pakan
dan minum, memandikan sapi, perawatan/pemotongan kuku dan bulu, serta
melakukan pelepasan sapi untuk kegiatan exercise. Pembersihan atau sanitasi
kandang dan peralatannya dilakukan sekitar pukul 07.00 – 08.00 WIB. Kegiatan
pembersihan kandang meliputi pembersihan kotoran ternak (feses) yang langsung
dialirkan melalui saluran pembuangan menuju kebun rumput, pembersihan area
kandang, dan tempat minum.
Sanitasi ternak juga dilaksanakan bersamaan dengan proses sanitasi
kandang dan peralatannya. Kegiatan yang dilakukan meliputi pembersihan sisa
feces yang menempel pada tubuh ternak dengan cara menyemprot dan menyikat

29
tubuh ternak mulai dari badan hingga kaki/kuku ternak. Tujuannya yaitu agar
performance dan kondisi ternak selalu dalam keadaan bersih dan terawat.
Sedangkan untuk pemotongan kuku dilakukan rutin 6 bulan sekali.
Pemberian pakan hijauan dilakukan setelah pekerjaan sanitasi kandang
dan ternak telah selesai dilakukan. Pemberian pakan hijauan dilakukan 2 kali
dalam sehari. Pemberian pagi hari dilakukan jam 08.00 - 08.30 WIB dan
pemberian sore hari dilakukan jam 13.30 - 14.00 WIB. Pemberian pakan hijauan
untuk sapi resipien sebanyak 10% dari bobot badan atau disesuaikan dengan
kondisi fisiologisnya, yaitu sekitar 25-30 kg/ekor. Jenis pakan hijauan yang
tersedia adalah rumput gajah, rumput odot dan Star Grass. Rumput dichopping
terlebih dahulu sebelum diberikan ke ternak untuk jenis rumput gajah, sedangkan
rumput odot dan star grass tidak perlu dichopping. Pada saat kekurangan HPT
maka pakan sapi resipien ditambahkan silasi tidak melebihi dari 20% hijauan.

(a) (b)
Gambar 10. (a) Pemberian pakan hijauan, (b) Pemotongan kuku

Pemberian pakan konsentrat diberikan satu kali dalam sehari setelah


pemberian pakan hijauan yaitu pada sekitar jam 09.00 – 09.30 WIB. Pemberian
konsentrat untuk resipien yaitu sebanyak 1% dari bobot badan atau disesuaikan
dengan kondisi fisiologisnya. Pakan konsentrat yang diberikan untuk sapi resipien
memiliki kandungan PK 16%. Konsentrat diperoleh dari pengolahan konsentrat
milik BET Cipelang Bogor bagian Hijauan Pakan Ternak (HPT). Bahan-bahan
yang digunakan sebagai penyusun konsentrat adalah CGF, pollard, onggok,
dedak, kopra, bungkil kelapa sawit, bungkil kedelai, dan molasses.

4.2.2 Seleksi Resipien


Sapi resipien adalah sapi yang memenuhi kriteria organ reproduksi yang
baik, bebas dari penyakit yang menular, fertilitas baik, mothering abillity tinggi,
performa tubuh baik dan mempunyai rekording yang baik. Adapun kriteria ternak
yang dapat dijadikan resipien:

30
a. Ternak resipien adalah dara atau induk dalam kondisi tidak bunting, memiliki
organ reproduksi baik dan memiliki catatan reproduksi / siklus berahi normal;
b. Performa tubuh baik dan sehat dengan Body Condition Score (BCS) score
sekitar 3 – 3,5;
c. Sehat, tidak menunjukkan gejala klinis penyakit hewan menular strategis;
d. Terseleksi setelah palpasi rektal, pada salah satu ovarium memiliki corpus
luteum (CL) fungsional.
e. Tidak pernah mengalami gagal bunting lebih dari 2 kali.

Gambar 11. Konformasi tubuh dari sapi resipien


Seleksi induk sapi yang dijadikan sebagai ternak resipien dilakukan
dengan memeriksa keadaan reproduksinya. Sapi dengan kondisi organ reproduksi
yang memenuhi syarat digunakan sebagai ternak resipien yang meliputi tingkat
fertilitas yang tinggi, sehat dan terbebas dari penyakit menular (Kain, Said, dan
Tappa, 2008).

4.2.3 Sinkronisasi Estrus Ternak Resipien


Sinkronisasi birahi (sinkronisasi estrus) merupakan suatu teknik
menyeragamkan program perkawinan dalam kurun waktu tertentu dan dapat
diramalkan pada sekelompok hewan (Ratnawati, Adinata, dan Lutfi., 2015).
Penggunaan teknik sinkronisasi birahi mampu meningkatkan efisiensi produksi
dan reproduksi kelompok ternak, serta mengoptimalkan pelaksanaan inseminasi
buatan dan transfer embrio. Manfaat sinkronisasi birahi diantaranya adalah
optimalisasi dan efisiensi pelaksanaan IB, mempercepat birahi kembali,
mengatasi permasalahan silent heat, memperpendek days open (DO), dan sebagai
manajemen reproduksi resipien pada kegiatan transfer embrio (Fauzi, Suyadi, dan
Susilawati., 2017).
Teknik penyerentakan estrus (sinkronisasi birahi) pada ternak sapi dapat
dilakukan dengan menggunakan preparat hormon yang mengandung
prostaglandin (PGF 2α). Hormon ini akan bekerja dengan melisiskan korpus
luteum sebagai tempat produksi hormon progesteron yang menghalangi
munculnya estrus pada ternak sapi (Saili, Baa, Sani, Rahadi, Sura, dan Lopulalan.,

31
2016). Secara normal estrus akan muncul pada jam ke 64 atau hari ke 3 setelah
penyuntikan hormon prostaglandin (Saili, Bain, Aku, Rusdin, dan Aka, 2011).
Pada hari yang bersamaan munculnya estrus, kegiatan transfer embrio pada sapi
resipien dapat dilakukan untuk mendapatkan kebuntingan pada ternak sapi. Jenis
protokol sinkronisasi estrus pada sapi resipien di BET Cipelang Bogor dapat
dilihat pada Tabel 6, 7, 8.

Tabel 6. Protokol berdasarkan sinkronisasi birahi menggunakan progesteron devise


Hari ke- Perlakuan resipien
0 Pasang progesteron device dan suntik estradiol sebanyak 2mg
7 Cabut progesteron device dan suntik PGF2α sebanyak 25mg
8 Suntik estradiol sebanyak 1mg
9 – 11 Pengamatan estrus

Tabel 7. Protokol berdasarkan adanya corpus luteum menggunakan single dosis


Hari ke- Perlakuan resipien
0 Suntik PGF2α
13 - 14 Pengamatan estrus

Tabel 8. Protokol berdasarkan tidak adanya corpus luteum menggunakan double


dosis
Hari ke- Perlakuan resipien
0 Suntik PGF2α
11 Suntik PGF2α
13 – 14 Pengamatan estrus

Berdasarkan pengamatan yang dilakukan selama Praktik Kerja Lapang,


diperoleh hasil pengamatan sinkronisasi birahi (sinkronisasi estrus) menggunakan
protokol pemasangan progesteron device. Pada protokol ini dilakukan
pemasangan progesteron device agar mampu merangsang hormon progesteron
dan penyuntikan estradiol yang berfungsi untuk menimbulkan estrus atau birahi
pada hewan betina. Setelah hari ke 7 dilakukan pencabutan progesteron device
dan penyuntikan PGF2α untuk melisiskan progesteron. Fauzi, dkk (2017)
mendukung bahwa hormon PGF2α berperan dalam meregresi korpus luteum
untuk memperpendek siklus birahi dan mengembalikan siklus birahi pada fase
folikuler. Regresinya corpus luteum yang disertai dengan turunnya jumlah
hormon progesteron akan memberikan respon terhadap hipotalamus yang
nantinya akan merangsang terjadinya proses pensekresian hormon-hormon birahi
yaitu Gn-RH, FSH, estrogen dan LH. Kemudian disuntik kembali dengan
estradiol pada hari ke 8 dan dilakukan pengamatan pada hari ke 9 sampai 11.

32
Ada beberapa upaya yang dilakukan untuk percepatan estrus antara lain
pemberian penambahan CIDR (Controlled Internal Drug Release) pada perlakuan
sinkronisasi birahi dengan menggunakan hormon progesteron. Penggunaan CIDR
ini adalah sebagai sumber progesteron yang akan diserap secara perlahan
(Mardiansah, Yuliani, dan Prasetyo., 2016).
Hormon progesteron merupakan hormon steroid yang disekresikan oleh
sel korpus luteum, placenta dan kelenjar andrenal. Sekresi hormon progesteron
sangat tergantung dari siklus estrus, kadar tertinggi hormon progesteron berada
pada fase luteal karena korpus luteum merupakan sumber utama dari hormon
progesteron dan kadar terendah adalah fase folikel (Pemayun, 2010).

4.3 Evaluasi Embrio


4.3.1 Teknik Evaluasi Embrio
Evaluasi embrio merupakan penilaian kualitas terhadap kualitas embrio
yang diperoleh disesuaikan dengan standar yang berlaku. Berdasarkan Standar
Operasional Prosedur (SOP), perlakuan selanjutnya adalah :
1. Hasil flushing disaring dengan filter embrio dan dipindahkan kedalam cawan
petri bergaris untuk memudahkan pencarian embrio dibawah mikroskop
stereo.
2. Setelah embrio diperoleh, selanjutnya dikoleksi dalam cawan petri yang
berukuran lebih kecil (cawan petri ukuran 30x10 mm) yang berisi media
handling embrio dengan menggunakan perangkat pipet pasteur.
3. Klasifikasi embrio; Embrio yang dikoleksi diamati di bawah mikroskop
stereo dengan perbesaran 50-60 kali untuk dievaluasi fase dan kualitasnya
yang ditentukan berdasarkan standar yang berlaku.
Teknik evaluasi embrio yang diterapkan di BET Cipelang pada saat
dilakukan PKL adalah sebagai berikut :
1. Hasil flushing yang telah diperoleh dari proses pemanenan embrio di lapang,
apabila terdapat lendir maka lendir diambil dengan menggunakan kanula,
2. Penyaringan embrio dilakukan dengan menggunakan filter,
3. Sisa dari penyaringan tersebut, dituangkan kedalam petridisk 100x100
4. Apabila terdapat gelembung udara, dilakukan fiksasi dengan menggunakan
korek api agar tidak mengganggu penglihatan saat dilakukan pengamatan
embrio,
5. Pengamatan embrio dilakukan dengan menggunakan mikroskop stereo
perbesaran 50-60 kali,
6. Kualitas embrio dinilai berdasarkan standar yang telah ditetapkan oleh
IETS.

33
Gambar 12. Filtrasi Embrio (Sumber: Dokumentasi Pribadi).
Embrio yang telah diperoleh dari proses flushing sesegera mungkin harus
dibawa ke laboratorium untuk dilakukan evaluasi dan grading embrio. Evaluasi
sangat penting dilakukan untuk menentukan kualitas dari embrio yang layak untuk
diproses lebih lanjut maupun untuk dilakukan transfer segar. Hasil dari evaluasi
embrio yang dilakukan juga digunakan untuk melakukan penilaian terhadap
produktivitas embrio dari ternak tersebut. Banyak sedikitnya embrio yang
dihasilkan tergantung pada bangsa dan individu ternak. Menurut Jodiansyah,
(2013) bahwa faktor yang mempengaruhi tinggi dan rendahnya embrio layak
transfer meliputi faktor fisiologis saat pemanenan embrio, faktor genetik, pakan
dan kesehatan organ reproduksi. Ternak donor yang mengalami penurunan
produksi embrio yang cukup drastis akan dilakukan evaluasi dan pemeriksaan.
Penurunan produksi embrio dapat dikarenakan berbagai faktor diantaranya
fisiologis ternak, umur, pakan, dan adanya gangguan organ reproduksi.

4.3.2 Klasifikasi Embrio


SOP dar penilaian kualitas embrio di Balai Embrio Ternak (BET) Cipelang
berdasarkan kriteria zona pellucida yang rata warnanya, kekompakan sel,
persentase sel yang mengalami degenerasi, permukaan trophoblast yang rata,
warna khas, kekompakan sel, dan ukuran banyaknya vesicles. Kualitas embrio
dinilai berdasarkan fase perkembangan (stage) dan kualitas (quality) embrio.
Dengan mengacu pada standar penilaian yang ditetapkan oleh International
Embryo Transfer Society (IETS). Adapun daftar kode fase untuk penilaian
perkembangan embrio dapat dilihat pada Tabel 9. Sedangkan untuk kriteria
kualitas embrio diuraikan pada Tabel 10.

Tabel 9. Fase embrio


Fase Keterangan
Fase 1 Unfertilized

34
Fase 2 Embrio dengan 2 s/d 12 sel
Fase 3 Early Morulla
Fase 4 Morulla
Fase 5 Early Blastocysts
Fase 6 Blastocysts
Fase 7 Expanded Blastocysts
Fase 8 Hatched Blastocysts
Fase 9 Expanded Hatched Blastocysts

Tabel 10. Kriteria kualitas embrio


Fase Keterangan
Kualitas 1 :  Bentuk embrio simetris dan bulat (spherical) dengan
Excellent or Good blastomere yang seragam baik pada ukuran, warna
maupun kepadatannya
 Embrio harus memiliki bentuk yang konsisten
dengan perkiraan fase perkembangan embrio itu
sendiri. Bentuk irregular relative minor
 Memiliki minimal 85% material selular dalam
keadaan intact dan massa embrio hidup
 Zona pelusida harus bulat, mulus, tidak menempel
pada cawan petri atau pipet
Kualitas 2 : Fair  Secara umum memiliki bentuk yang tidak teratur
(irregular) dalam kategori sedang dalam hal massa
embrio, ukuran, warna dan kepadatan sel-sel
individual.
 Memiliki sel intact dan massa embrio hidup minimal
sebanyak 50%
Kualitas 3 : Poor  Embrio didominasi bentuk yang tidak teratur pada
bentuk massa embrio, ukuran, warna, dan kepadatan
individu sel
 Memiliki sel intact dan massa embrio hidup minimal
sebanyak 25%
Kualitas 4 : Dead  Embrio degenerasi
or Degenerating  Oosit
 Embrio 1 sel : tidak hidup/mati

Embrio yang layak transfer dan dapat dibekukan lebih lanjut adalah
embrio yang mencapai perkembangan fase 4 (morulla) sampai dengan fase 8
(hatched blastocyst) dan memiliki kualitas 1 dan 2. Embrio dengan fase 9 (expand
hatched blastocyst) dapat digunakan sebagai embrio yang akan dilakukan proses
transfer segar. Embrio dengan kualitas 3 dapat ditransfer segar atau dilakukan

35
kultur. Embrio dengan fase 3 (early morulla) dilakukan kultur untuk
perkembangan lebih lanjut.

A b c

D e f
Gambar 13. Fase-Fase Embrio a) unfertil; b) morula; c) blastocyst; d) expanded
blastocyst; e) expanded hatched blastocyst; f) degeneratif (Sumber: Laboratorium
Balai Embrio Ternak).
Klasifikasi embrio di BET dikategorikan berdasarkan kualitas yang
dikelompokkan menjadi 4 kategori yaitu kualitas 1) Excellent or Good, kualitas
2) Fair, kualitas 3) Poor, kualitas 4) Dead or degenerating. Penentuan kualitas
embrio berdasarkan atas pemeriksaan secara morfologi. Menurut Waluyo (2014)
menyatakan bahwa kriteria yang digunakan untuk evaluasi dan klasifikasi embrio
yakni :
1. Kekompakan antara sel,
2. Kesimetrisan bentuk embrio,
3. Variasi dalam ukuran,
4. Warna dan susunan sitoplasma,
5. Ada tidaknya vesikel,
6. Adanya sel-sel yang keluar dari ikatan sel,
7. Diameter,
8. Keteraturan zona pelusida,
9. Adanya debrisel seperti reruntuhan sel dan granulasi, umur dan stadia
perkembangan embrio.
Berdasarkan hasil evaluasi yang dilakukan di Laboratorium BET
Cipelang, embrio yang memiliki kualitas 1 dan kualitas 2 merupakan kriteria
embrio yang layak untuk diproses lebih lanjut. Secara komersial, embrio yang
dipilih untuk kriopservasi adalah embrio yang berkualitas baik mulai dari stage 4
(morula) hingga stage 7 (expanded blastocyst) (Hasler, 2014). Embrio yang

36
memiliki kualitas 1 dan kualitas 2 merupakan jenis embrio yang baik karena
embrio berkembang secara normal serta memiliki massa hidup antara 50-85%.
Embrio dengan kualitas 3 tidak akan dilakukan proses lebih lanjut, akan tetapi
embrio tersebut akan langsung dilakukan transfer secara segar jika ada ternak
resipien yang siap untuk TE (transfer embrio segar). Hal tersebut dikarenakan
embrio dengan kualitas 3 memiliki sel intact dan massa embrio yang rendah.
Menurut Wydooghe, Heras, Dewuli, Piepers, Abbeel, Sutter, Vandaele and Soom
(2013) bahwa pada sapi donor sering terdapat sedikit oosit yang tidak dibuahi.
Metode yang dapat digunakan untuk mengatasi embrio tersebut adalah dengan
kultur embrio secara in vitro. Evaluasi embrio hasil flushing yang dilakukan akan
menghasilkan embrio dengan jumlah dan kualitas yang berbeda-beda.

Tabel 11. Data Produksi Embrio di Balai Embrio Ternak Cipelang Bogor pada
Bulan Juli 2018 (Sumber: PPID BET Cipelang).
TANGGAL KUALITAS EMBRIO
NO DONOR
FLUSHING LT DG UF TOTAL
1 2-Jul-18 SIMMENTAL 0 0 0 0
2 5-Jul-18 LIMOUSIN 4 0 1 5
3 5-Jul-18 SIMMENTAL 1 0 0 1
4 9-Jul-18 SIMMENTAL 1 5 4 10
5 11-Jul-18 BRAHMAN 0 0 0 0
6 25-Jul-18 LIMOUSIN 9 2 4 15
7 25-Jul-18 LIMOUSIN 2 0 2 4
Keterangan: LT (layak transfer); DG (Degeneratif); UF (Unfertil).
Keterampilan petugas dalam melakukan penilaian dan grading terhadap
embrio menjadi salah satu faktor yang paling penting pada tahapan ini. Perbedaan
kualitas embrio tersebut dikarenakan tingkat kematangan oosit pada saat sapi
donor disuperovulasikan berbeda-beda. Berbagai faktor yang dapat
mempengaruhi kualitas dari embrio yang dihasilkan diantaranya adalah faktor
genetik, umur, kesehatan organ reproduksi, karakteristik fisiologis dan pakan.
Manajemen pemberian pakan berperan penting untuk produksi embrio, sapi
dengan protein pakan yang kurang memiliki folikel dominan berukuran lebih kecil
dan siklus lebih dari 3 gelombang dibandingkan sapi dengan asupan pakan
dengan protein lebih tinggi (Hardiyanto, dkk 2016)

4.4 Pengemasan Embrio (Loading)


Standar Operasional Prosedur (SOP) yang digunakan oleh Balai Embrio
Ternak (BET) adalah sebagai berikut :
A. Kemasan Embrio

37
 Straw transparan dengan ukuran 0.25 ml,
 Kondisi kemasan harus tertutup,
 Setiap straw berisi satu embrio,
 Kemasan harus dilengkapi dengan identitas.
B. Pengemasan
 Media yang digunakan untuk pembekuan embrio disesuaikan dengan metode
pembekuan yang digunakan,
 Straw yang digunakan untuk kemasan embrio berwarna transparan,
 Saat memasukkan embrio ke dalam straw (loading), posisikan media, rongga
udara serta embrio dalam posisi bergantian sesuai dengan metode pembekuan
yang digunakan,
 Embrio yang layak transfer dan dibekukan dimasukkan dalam straw dengan
jumlah masing-masing straw 1 (satu) embrio.
C. Identitas Embrio, tercantum dalam kode embrio, susunan identitas embrio
memuat:
 Baris pertama memuat informasi kode produsen, nomor betina dan nomor
urut embrio,
 Baris kedua memuat informasi kode semen/pejantan dan tanggal pembekuan

Baris 1.

Kode Produsen Nomor Betina Nomor Urut Embrio

Baris 2.

Nomor Pejantan Tanggal Produksi

Contoh Pengkodean Embrio :

BET 80744 1.6.1


Kode Produsen Nomor Betina Nomor Urut
BET 80744 1.6.1
Embrio
200LM0309 130114
200LM0309 130114
Nomor Pejantan Tanggal Produksi

Pengemasan embrio (loading) perlu dilakukan untuk mempermudahkan


dalam penyimpanan maupun transfer embrio. Praktik pengemasan embrio selama
PKL dilakukan dengan langkah-langkah sebagai berikut :
1. Apabila telah menemukan embrio dengan kualitas yang telah ditentukan, maka
akan dilakukan pencucian dengan menggunakan NaCl fisiologis. Pengambilan

38
embrio dilakukan dengan menggunakan pipet pasteur dan diletakkan dalam petri
disk berukuran 30x10 mm,
2. Embrio dipindahkan kedalam petri disk kedua yang berisi media,
3. Straw diisi embrio, media dan udara secara berseling dengan menggunakan
disposable syiringe dengan susunan sebagai berikut :

Keterangan : : Sumbat laboratorium/PVA

: Media

: Udara

: Embrio

: Sumbat pabrik
4. Straw ditutup dengan menggunakan straw powder (PVA),
5. Label straw ditempelkan pada bagian cutton plug,

Gambar 14. Loading Embrio (Sumber: Dokumentasi Pribadi).

Pengemasan embrio di BET Cipelang dilakukan dengan menggunakan mini


straw dengan ukuran 0,25 ml. Satu straw berisi satu embrio. Straw yang digunakan
hanya terdiri dari satu warna, biasanya menggunakan straw dengan warna
trasparan. Media yang digunakan sebagai media kriopreservasi embrio terdiri dari
PBS dan etilen glikol. Embrio yang telah dikoleksi, selanjutnya akan diletakkan
dalam medium Phosphate Buffered Salline (PBS) (Febretrisiana, Setiadi dan Karja,
2015). Pengemasan embrio ke dalam straw memerlukan udara untuk menjaga agar
embrio tetap berada pada bagian tengah straw. Pelabelan straw dilakukan secara
manual. Pembuatan label sesuai dengan ketentuan yang telah ditetapkan oleh BET.
Pemasangan label dilakukan setelah proses pengemasan embrio pada straw

39
(Loading). Label straw yang telah dibuat selanjutnya akan ditempelkan straw pada
bagian cutton plug dengan menggunakan perekat.

4.5 Pembekuan dan Penyimpanan Embrio


Embrio yang telah dilakukan seleksi dan grading selanjutnya dilakukan
penyimpanan dan pembekuan. Berikut merupakan tahapan dalam pembekuan dan
penyimpanan embrio yang dilakukan di BET Cipelang :
4.5.1 Pembekuan Embrio
SOP dari pembekuan embrio disesuaikan dengan prosedur pembekuan
embrio yang digunakan. Pembekuan dilakukan dengan cara sebagai berikut :
1. Nitrogen cair dari dalam container diambil dan dituangkan kedalam cryobath,
2. Cryochamber dimasukkan kedalam cryobath yang telah berisi nitrogen cair
dan ditunggu hingga suhu menurun,
3. Straw yang telah berisi embrio dimasukkan dalam cryobath, ditunggu hingga
suhu -60C,
4. Lakukan seeding dengan cara :
a. Letakkan pinset pada nitrogen cair selama ± 1 menit,
b. Angkat straw dari cryobath,
c. Jepit bagian media dibawah label, pastikan terbentuk kristal es di dalam
straw,
d. Masukkan straw dan tutup cryochamber dan tunggu hingga suhu -300C,
5. Pindahkan straw yang telah dilakukan seeding kedalam container.

Gambar 15. Proses Seeding (Sumber: Dokumentasi Pribadi).

Terdapat 2 jenis metode pembekuan yakni metode pembekuan secara


cepat (vitrifikasi) dan metode pembekuan secara lambat (konvensional).
Pembekuan embrio di BET Cipelang dilakukan dengan menggunakan metode
slow freezing atau biasanya dikenal dengan metode konvensional. Prinsip dari
metode ini yakni melakukan pembekuan secara bertahap (step by step freezing)
pada suhu yang berbeda. Pada metode ini dilakukan seeding pada suhu -60C
selama ± 1-2 menit untuk membentuk kristal-kristal es. Ditunggu hingga suhu
turun menjadi -300C. Tujuan dari dilakukan seeding yakni untuk meminimalisir
kerusakan yang ditimbulkan akibat cold shock sebelum dilakukan penyimpanan

40
pada suhu -1960C. Pembekuan yang dilakukan pada suhu yang tinggi dapat
menyebabkan embrio rentan mengalami kerusakan, sehingga diperlukan
kriprotektan untuk melindungi embrio dari kerusakan. Oosit dengan masa yang
besar dan bentuk sel yang bulat memerlukan penggunaan krioprotektan yang
permeabel dengan toksisitas rendah diantaranya etilen glikol (Pamungkas, 2010).
Etilen glikol digunakan sebagai krioprotektan intraseluler yang akan melindungi
embrio dari dalam karena mampu menembus membran sel.

4.5.2 Penyimpanan Embrio


Penyimpanan embrio di Balai Embrio Ternak (BET) dilakukan dengan
cara sebagai berikut :
a. Straw embrio disimpan dengan menggunakan goblet dalam canister, embrio
harus selalu terendam penuh dalam Nitrogen Cair (LN2) dengan suhu -1960C
pada container kriogenik (cryogenic) dengan tujuan untuk menjaga kualitas
embrio.
b. Setiap kontainer kriogenik dilengkapi dengan kartu petunjuk yang
menerangkan isi kontainer.
Penyimpanan embrio hanya dilakukan untuk embrio yang telah lolos
grading sesuai dengan standar kualitas yang telah ditetapkan oleh BET. Embrio
yang akan di transfer segar ke ternak resipien tidak memerlukan proses
penyimpanan dan pembekuan sebelumnya. Sebelum dilakukan penyimpanan
embrio, pastikan terdapat nitrogen cair (LN2) didalam container. Embrio yang
telah melalui proses seeding, diambil straw dari cryochamber kemudian
diletakkan pada goblet dan ditutup container. Suhu yang digunakan dalam
penyimpanan embrio adalah -1960C. Pengecekan ketersediaan nitrogen cair dalam
container perlu dilakukan secara kontinyu untuk memastikan ketersediaan
nitrogen dalam container. Embrio yang telah disimpan dalam kontainer (embrio
beku) dapat digunakan untuk TE dalam jangka waktu yang lama.

4.6 Transfer Embrio


Transfer embrio (TE) dilakukan untuk mendapatkan keturunan murni yang
memiliki genetik mirip seperti induknya. Adapaun langkah-langkah yang harus
dipersiapkan adalah persiapan transfer embrio dan pelaksanaan transfer embrio.
4.6.1 Persiapan Transfer Embrio
Berdasarkan pengamatan saat kegiatan TE di Balai Embrio Ternak
dilakukan apabila ternak, khususnya ternak resipien, telah memenuhi beberapa
persyaratan. Salah satunya yaitu ditemukannnya korpus luteum dengan kondisi
baik (diameter CL minimal 2,5 cm). Keberadaannya dapat diketahui setelah
dilakukan kegiatan palpasi rektal dan dengan bantuan alat ultrasonography
(USG). Selain itu performa tubuh resipien tidak terlalu gemuk maupun kurus
dengan perkiraan BCS (Body Condition Score) antara 2,5-3.0 dan tidak memiliki
kelainan reproduksi. Hal ini sesuai dengan Lestari, Ismudiono, Sardjito, Srianto

41
(2016) bahwa respon keberhasilan sinkronisasi dipengaruhi oleh pemberian pakan
pada ternak dengan nutrisi yang cukup, BCS berkisar 2,8-3,5, tidak terdapat cacat
reproduksi, ovarium dan corpus luteum normal.
Selanjutnya tersedianya embrio yang siap untuk ditransfer. Adapun
peralatan untuk kegiatan transfer embrio terdiri dari Gun TE, spuit 5 ml, jarum
suntik 18 G, sheat TE dan outer sheat, sarung tangan plastik, gunting straw,
pinset, termometer, form seleksi resipien, form aplikasi transfer embrio. Bahan-
bahan yang diperlukan antara lain embrio, preparat anastesi, kapas alkohol, tisu.
Beberapa hal di atas telah sesuai dengan Standar Operasional (SOP) yang
diterapkan di BET.

4.6.2 Pelaksanaan Transfer Embrio


Berdasarkan pengamatan yang telah dilakukan pada tanggal 27 Juli 2018
kegiatan TE yang dilakukan dengan menggunakan metode TE beku. Transfer
embrio dilakukan pada hari ketujuh setelah ternak resipien mengalami birahi.
Pada saat pengamatan telah ditemukan corpus luteum sehingga dapat dilakukan
TE saat hari itu juga. Tahapan pelaksanaan TE pada saat pengamatan telah
disesuaikan dengan Standar Operasional (SOP) yang diterapkan di Balai Embrio
Ternak Cipelang:
1. Persiapan ternak resipien yang telah diseleksi terlebih dahulu.
2. Persiapan alat dan bahan untuk TE.
3. Anastesi dilakukan pada bagian pangkal ekor ternak yang bertujuan untuk
merilekskan tubuh bagian belakang termasuk organ reproduksi dan
menghilangkan rasa sakit saat dimasuki benda asing.
4. Thawing dengan mengambil straw yang berisi embrio pada kontainer
menggunakan penjepit, diangin-anginkan selama ±10-15 detik, dimasukkan ke
dalam air hangat suhu sekitar 38,50C selama 10-15 detik. Namun terdapat
rentang suhu thawing yang diperkirakan berkisar 36-38oC.
5. Straw dikeringkan dengan tisu, dimasukkan dalam gun TE, dipotong ujung
straw, ditutup dengan sheat TE dan dibungkus dengan outer sheat TE.
6. Dilakukan TE ke ternak resipien.
7. Dilakukan pencatatan pada form TE oleh petugas meliputi tanggal
pelaksanaan, kode resipien, kode embrio.
Berdasarkan pengamatan dan penjelasan petugas TE bahwa embrio
ditempatkan di bagian cornua uteri. Selanjutnya dilakukan pengecekan untuk
mengetahui keberhasilan sekitar 2-3 bulan setelah pelaksanaan TE. Hal ini sesuai
dengan Campbell et al. (2013) transfer dilakukan langsung ke kornua uteri kurang Commented [a7]: Ditulis lengkap nama-namanya

lebih 5-10 cm dari bifurkasio uteri. Resipien yang tidak menunjukkan gejala birahi
setelah 3 siklus birahi yang diharapkan dapat dilakukan pemeriksaan kebuntingan
per rektal untuk menentukan berhasil tidaknya program transfer. Pemeliharaan
resipien yang telah bunting sama seperti pemeliharaan-pemeliharaan pada hewan
bunting pada umumnya.

42
Gambar 16. Proses thawing embrio
Berdasarkan informasi yang didapatkan bahwa keberhasilan program TE
dipengaruhi oleh beberapa faktor salah satunya keterampilan petugas, kualitas
embrio, dan kondisi ternak resipien. Lestari, et al. (2016) mengungkapkan bahwa
faktor-faktor keberhasilan TE antara lain:
1. Kualitas embrio yang ditransfer; seperti umur fase, jenis embrio (beku/segar),
metode pembekuan dan adanya kontaminasi atau infeksi pada embrio tersebut.
2. Keahlian operator dalam melakukan TE meliputi kapabilitas dalam
menempatkan embrio ke apex cornua uteri, melakukan transfer dengan cepat
dalam waktu yang tepat, tidak terjadi luka pada uterus sehingga ternak merasa
tenang dan tidak stres.
3. Kondisi ternak resipien yang memenuhi persayaratan (BCS, pemberian pakan
bernutrisi cukup dan organ reproduksi normal).
Adapun data pelaksanaan TE di BET periode Mei-Juli dapat dilihat pada
Tabel 12.
Tabel 12. Data TE di BET pada Bulan Mei-Juli.
Jenis Asal Jumlah Posisi
No Tgl TE Resipien Lokasi Metode
Embrio Embrio Embrio Ka Ki
02- Belgian BET
1 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
07- Belgian BET
2 Belgia 1 Limousin √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
11- Belgian BET
3 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
11- Belgian BET
4 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang

43
13- Belgian BET
5 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
13- Belgian BET
6 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
13- Belgian BET
7 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
13- Belgian BET
8 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
16- Belgian BET
9 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
16- Belgian BET
10 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
16- Belgian BET
11 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
12 Belgia 1 Limousin √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
13 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
14 Belgia 1 FH - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
15 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
16 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
17 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
18 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
19 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
18- Belgian BET
20 Belgia 1 FH √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
22- Belgian BET
21 Belgia 1 Simmental - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
22- Belgian BET
22 Belgia 1 Limousin √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
22- Belgian BET
23 Belgia 1 Limousin √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
22- Belgian BET
24 Belgia 1 Limousin √ - Direct
May-18 Blue Cipelang
23- Belgian BET
25 Belgia 1 Limousin - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
24- Belgian BET
26 Belgia 1 Limousin - √ Direct
May-18 Blue Cipelang
Belgian
26-Jun- BET BET
27 Blue 1 Limousin √ - Segar
18 Cipelang Cipelang
BET

44
05-Jul- Belgian BET
28 Belgia 1 FH √ - Direct
18 Blue Cipelang
10-Jul- Belgian BET
29 Belgia 1 FH √ - Direct
18 Blue Cipelang
Sumber: PPID BET Cipelang.
Kegiatan TE terbanyak dilaksanakan pada Bulan Mei 2018 sebanyak 26
kali dengan 18 diantaranya menggunakan resipien sapi FH. Alasan digunakannya
sapi FH sebagai resipien yaitu memiliki serviks yang lebih besar dibanding jenis
sapi lain sehingga dapat menjadi tempat berkembang yang ideal bagi embrio sapi
berbobot badan besar dan produksi susu tergolong tinggi. Adapun embrio yang
digunakan sebagian besar dari jenis Belgian Blue dan berasal dari Belgia. Hal ini
dikarenakan sapi jenis tersebut memiliki keunggulan genetik, pertumbuhan bobot
badan cepat, dan menjadi target pengembangan oleh pemerintah untuk mencapai
swasembada protein.

BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN

5.1 Kesimpulan
Berdasarkan kegiatan yang dilakukan selama masa praktek kerja lapang
(PKL) di Balai Embrio Ternak bahwa produksi embrio dilakukan secara in vivo
menggunakan ternak donor yang telah diseleksi sebelumnya. Program produksi
embrio terdiri dari beberapa tahap yaitu sinkronisasi birahi, superovulasi,
inseminasi buatan dan flushing. Selanjutnya dilakukan evaluasi embrio untuk
menilai kualitas embrio yang telah dipanen berdasarkan kriteria yang telah
ditetapkan oleh IETS. Embrio yang telah dievaluasi kemudian dimasukkan ke
dalam straw dan disimpan pada suhu beku (-196oC). Proses transfer embrio (TE)
dilakukan apabila ditemukan corpus luteum pada salah satu ovary ternak resipien
sehingga kegiatan transfer embrio dapat dilakukan pada hari tersebut. Ternak
resipien yang digunakan memiliki performa tubuh yang ideal dan tidak mengalami
gangguan reproduksi. Pelaksanaan TE terdiri dari anastesi, thawing, memasukkan
straw ke dalam gun TE, transfer embrio, dan diperiksa kembali pasca dua sampai
tiga bulan untuk menilai keberhasilan program TE.

5.2 Saran
Adapun saran yang dapat menjadi pertimbangan untuk lebih diperbaiki
pembagian jadwal kegiatan praktek di laboratorium maupun kandang yang
menyesuaikan dengan program produksi dan transfer embrio terutama untuk
mengantisipasi banyaknya peserta magang.

45
46
DAFTAR PUSTAKA

Adifa, N. S., Astuti, P., dan Widayati, D. T. 2010. Pengaruh Penambahan Chrionic
Gonadotrophin pada Medium Maturasi Terhadap Kemampuan Maturasi,
Fertilisasi, dan Perkembangan Embrio secara In Vitro Kambing Peranakan
Ettawa. Buletin Peternakan. 34 (1): 8 – 15.
Arifiantini, R. I., Purwatara, B., Yusuf, T. L., Sajuthi, D., dan Amrozi. 2010. Angka
Konsepsi Hasil Inseminasi Semen Cair Versus Semen Beku pada Kuda yang
Disinkronisasi Estrus dan Ovulasi. Media Peternakan. 33 (1) : 1 – 5.
Campbell, A., Fishel S., Bowman N., Duffy S., Sedler M., and Thorton S. 2013.
Retrospective Analysis Of Outcomes After IVF Using An Aneuploidy Risk
Model Derived From Time-Lapse Imaging Without PGS. Reprod Biomed
Online. 27 (2) : 140-146. Commented [a8]: Ini apakah sudah sesuai? Kurang tau, bukan
jurnalku. Tp kelihatannya sesuai hehe
Fauzi, M. R., Suyadi, dan Susilawati, T. 2017. Pengaruh Pemberian Prostaglandin
F2 Alpha Terhadap Waktu Kemunculan Birahi dan Keberhasilan Inseminasi
Buatan Sapi Brahman Cross (Bx) Heifers. Jurnal Ilmu-Ilmu Peternakan. 27
Commented [u9R8]:
(3): 39 – 43.
Febretrisiana, A., Setiadi, M. A., dan Karja, N. W. K. 2015. Tingkat Fertilisasi
Oosit Domba dari Ovarium yang Disimpan pada Suhu dan Waktu yang
Berbeda Secara In Vitro. Jurnal Kedokteran Hewan. 9 (2): 109 - 113.
Gunawan, M., Fahrudin, M. dan Boediono, A. 2014. Perkembangan Embrio Sapi
Setelah Fertilisasi Menggunakan Metode Intracytoplasmic Sperm Injection
(ICSI) dan Aktivasi dengan Strontium. Jurnal Kedokteran Hewan. 8 (2): 154
- 157.
Hardiyanto, D., Sumantri, C., dan Zamantri, D. 2016. Kualitas Embrio pada Sapi
Simmental dan Limousin dengan Kadar Protein Pakan Berbeda. Jurnal Ilmu
Produksi dan Teknologi Hasil Peternakan. 4 (2): 319 - 324.
Hasler, J. F. 2014. Forty Years of Embryo Transfer in Cattle. Theriogenology. 81:
152 - 169.
Herawati, T., Anggraeni, A., Praharani, L., Utami, D., dan Argiris, A. 2017. Peran
Inseminator dalam Keberhasilan Inseminasi Buatan pada Sapi Perah.
Informatika Pertanian. 21 (2): 81 – 88.
Imron, M., Supriatna,I., Amrozi., dan Agus, M. S. 2016. Respons Superovulasi Sapi
Peranakan Ongole terhadap Penyuntikan Tunggal Follicle Stimulating
Hormone ke dalam Ruang Epidural. Jurnal Veteriner Maret. 17(1): 78-87.
Jodiansyah, S., Imron, M., dan Sumantri, C.2013.Tingkat Respon Superovulasi dan
Produksi Embrio In Vivo dengan Sinkronisasi CIDR (Controlled Internal
Drug Releasing) pada Sapi Donor Simmental. Jurnal Ilmu Produksi dan
Teknologi Hasil Peternakan. 1(3): 184 - 190.
Kain, E. M., Said, S., dan Tappa, B. 2008. Kelahiran Anak Sapi Hasil Fertilisasi
secara in Vitro dengan Sperma Hasil Pemisahan. Media Peternakan. 3 (1): 22
– 28.

47
Lestari, T.D., Ismudiono, Sardjito, T. and Srianto, P. 2016. The Success of Embryo
Transfer in Dairy Cattle Recipient Using Beef Cattle Embryos. Scientific
Papers - Animal Science Series. 65: 203 - 208.
Mardiansyah, Yuliani, E., dan Prasetyo, S. 2016. Respon Tingkah Laku Birahi,
Service Per Conception, Non Return Rate, Conception Rate pada Sapi Bali
Dara dan Induk yang Disinkronisasi Birahi dengan Hormon Progesteron.
Mohammed, Ahmed. 2018. Artificial Insemination and its Economical
Significancy in Dairy Cattle: Review. International Journal of Research
Studies in Microbiology and Biotechnology. 4 (1): 30 - 43.
Pamungkas, F. A. 2010. Pemanfaatan Metode Vitrifikasi untuk Kriopreservasi
Oosit Mamalia. Wartazoa. 20(3): 112 - 118.
Pemayun, T. G. O. 2010. Kadar Progesteron Akibat Pemberian PMSG dan GN-RH
pada Sapi Perah yang Mengalami Anestrus Postpartus. Buletin Veteriner
Udayana. 2 (2): 85 - 91.
Pranatasari, D., Kustono, Widayati, D. T. 2016. Suplementasi Hormon
Gonadotropin pada Medium Maturasi In Vitro untuk Meningkatkan
Perkembangan Embrio Stadium 4 Sel Kambing Bligon. Buletin Peternakan.
40(2): 83 - 91.
Prasetyo, D. 2012. Tingkat Superovulasi pada Beberapa Bangsa Sapi dengan
Sumber Follicle Stimulating Hormone (FSH) yang Berbeda. Departemen
Ilmu Produksi dan Teknologi Peternakan Institut Pertanian Bogor. 1 – 49.
Ratnawati, D., Adinata, Y., dan Lutfi, M. 2015. Respon Sinkronisasi Berahi pada
Induk Sapi Potong dengan Skor Kondisi Tubuh Berbeda pada Peternakan
Rakyat. Prosiding Seminar Nasional Teknologi Peternakan dan Veteriner.
74 – 80.
Saili, T., Baa, L. O., Sani, L. O. A., Rahadi, S., Sura, I. W, dan Lopulalan, F. 2016.
Sinkronisasi Estrus dan Inseminasi Buatan Menggunakan Semen Cair Hasil
Sexing pada Sapi Bali Induk yang Dipelihara dengan Sistem yang Berbeda.
Jurnal Ilmu Ternak. 16 (2): 49 – 55.
Saili, T., Bain, A., Aku, A. S., Rusdin, M., dan Aka, R. 2011. Sinkronisasi Estrus
Melalui Manipulasi Hormon Agen Luteolitik untuk Meningkatkan Efisiensi
Reproduksi Sapi Bali dan Peranakan Ongole di Sulawesi Tenggara.
Agripilus. 21 (1): 50 – 54.
Setiawan, A., Dihansih, E., dan Zamanti D. 2017.Penggunaan Preparat
Progesteron dan Hormon Gnrh dalam Penentuan Estrus pada Program
Superovulasi Sapi Limosin. Jurnal Pertanian Vol 8(1): 7 - 16.
Sophian, E., dan Fifi, A. 2016. Peranan Bioteknologi Reproduksi dalam
Peningkatan Kualitras Ternak. Bio Trends. 7(1): 42 - 47.
Subchan, F.A., Handarini, R., dan Siswanti, S.W. 2016. Perbedaan Waktu
Penyuntikan Hormon FSH Terhadap Respon Superovulasi Sapi Angus.
Jurnal Peternakan Nusantara. 2(2) : 159 – 166.

48
Sutarno. 2016. Rekayasa Genetik dan Perkembangan Bioteknologi di Bidang
Peternakan. Proceeding Biology Education Conference. 13 (1): 23 - 27.
Suteky, T., Sutriyono, Dwatmadji, dan Sholihin, M. I. 2017. Kualitas Semen
Produksi UPTD Bengkulu dan Tingkat Keberhasilan Inseminasi pada Sapi
Bali dan Peranakan Simental di Bengkulu. Jurnal Sain Peternakan Indonesia.
12(2) : 221 – 229.
Wahjuningsih, S., Hardjopranjoto, S., dan Sumitro, S. B. 2010. Pengaruh
Konsentrasi Etilen Glikol dalam Lama Paparan terhadap Tingkat Fertilitas In
Vitro Oosit Sapi. Jurnal Kedokteran Hewan. 4(2): 61 - 64.
Waluyo, S. T. 2014. Reproduksi Aplikasi pada Sapi. Bandung: PT. SEWU.
Wydooghe, E., Heras, S., Dewuli, J., Piepers, S., Abbeel, E. V. D., Sutter, P. D.,
Vandaele, L., and Soom, A. V. 2013. Replacing Serum in Culture Medium
with Albumin and Insulin, Transferrin and Selenium is the Key to Successful
Bovine Embryo Development in Individual Culture. Jurnal Compilation.

Adriani., Depison., Rosadi, B., Supriondo, Y., dan Isroli. 2007. Pengaruh
Superovulasi Terhadap Jumlah Corpus Luteum Pada Sapi Simbrah. Journal
Indonesia Tropical Animal Agriculture. 32 (3): 207-212.
Adriani, Rosadi, B. dan Depison. 2008. Jumlah dan Kualitas Embrio Sapi Brahman
Cross Setelah Pemberian Hormon FSH dan PMSG (The Quantity and
Quality of Brahman Cross Cattle Embryo After Injected FSH and PMSG).
Animal Production. 11 (2) 96‐102.
Anonymous. 2015. Teknologi Reproduksi. Artikel Ilmiah. pp. 1-20.
Badan Pusat Statistik. 2016. Jumlah Produksi Daging Sapi di Indonesia. Diakses
pada 27 Desember 2017 pukul 19.48 WIB.

Davis, R. L. 2004. Embryo transfer in beef cattle.


http://www.davisrairdan.com/embryo-transfer.htm.
Diwyanto, K. 2008. Pemanfaatan Sumber Daya Lokal Dan Inovasi Teknologi
Dalam Mendukung Pengembangan Sapi Potong di Indonesia. Pemanfaatan
Sumber Daya Lokal dan Inovasi Teknologi. 1 (3) : 173-188.

Gordon, I. 1994. Laboratory Production of Cattle Embryos. Cab International,


University Press, Cambridge

Grimes, J. F. 2008. Utilization of embryo transfer in beef cattle.


http://ohioline.osu.edu/anr-fact/pdf/ANR_17_08.pdf.

49
Hartantyo, Sri. 1987. Embrio Transfer Pada Kambing. Disertasi. Perpustakaan
Fakultas Kedokteran Hewan UGM Yogyakarta.
Herren, R. 2000. The Science of Animal Agriculture. 2nd ed. Delmar Thomson
Learning, Albany.
Kaiin, E, M Dan Tappa, B. 2006. Induksi Superovulasi Dengan Kombinasi Cidr,
Hormon Fsh Dan Hcg Pada Induk Sapi Potong. Media Peternakan. Vol 29(3):
141-146.
Kain, E. M., S. Said, dan B. Tappa. 2008. Kelahiran Anak Sapi Hasil Fertilisasi
secara in Vitro dengan Sperma Hasil Pemisahan. Media Peternakan. 3 (1):
22-28.
Lewis, I. 1996. Conventional Embryo Transfer. In: I. Lewis, J. Owens, S.
McClintoch dan M. Trevean (Eds.). Cattle Breeding Technology. Genetics
Australia, Australia.
Oguri N. and Y. Tsunami. 1974. Non surgical egg transfer mares. J. Repro. Fert.
41: 313-320.
Putro, P.P. 1993. Petunjuk Laboratorium Fertilisasi In Vitro. Pusat Antar
Universitas Bioteknologi UGM. Yogyakarta. pp.10-19.
Rusono, Nono. 2015. Peningkatan Produksi Daging Sapi untuk Mewujudkan
Kedaulatan Pangan Hewani. Prosiding Seminar Nasional Teknologi
Peternakan dan Veteriner. Hal.12-21.
Seidel, G. E. & R. P. Elsden. 1985. Procedures for Recovery, Bisection, Freezing
and Transfer of Bovine Embryos. Colorado State Univ, Colorado.
Seidel, G. E. & R. P. Elsden. 1989. Embryo Transfer in Dairy Cattle. WD Hoard &
Sons, Colorado.
Situmorang, P., A. Lubis dan E. Triwulaningsih. 1993. Pengaruh jenis hormon
terhadap tingkat ovulasi sapi perah yang sedang laktasi. Ilmu Peternakan
7:13.
Situmorang, P., E. Triwulaningsih, A. Lubis., T. Sugiarti., W. Caroline dan K.
Diwyanto. 1999. Pengaruh hormon hCG terhadap persentase kebuntingan
resipien yang mendapatkan transfer embrio hasil pembuahan secara in vitro.
Laporan penelitian 1999.
Susilawati, T., dan Lukman A. 2004. Tantangan dan Peluang Peningkatan
Produktivitas Sapi Potong Melalui Teknologi Reproduksi. Lokakarya
Nasional Sapi Potong. Hal.88-93.
Toelihere, M.R. 1981. Fisiologi Reproduksi Pada Ternak. Bandung : CV Angkasa.
Utama, Suzanita,. Imam, M., Tjuk, I. R., Sri, M., Tita, D. L.. 2017. Metode dan
Teknik Transfer Embrio. Universitas Airlangga: Surabaya.
Vicente, J.S. and Garcia-Ximenez. 1994. Osmotic and cryopreservative effects of a
mixture of DMSO and ethylene glycol on rabbit morula. Theriogenology 42:
1205-1215.
Wahjuningsih, S., D. Sasmito, E. T Riwulaningasih dan P.Situmorang. 2003.
Produksi embrio sapi potong secara murah dengan teknologi IVF dan
aplikasinya dalam transfer embrio untuk penyediaan bakalan. Laporan
PAATP Departemen Pertanian 2003.

50
https://www.google.co.id/url?sa=t&rct=j&q=&esrc=s&source=web&cd=3&cad=rja&uact
=8&ved=2ahUKEwjY0YfQ6ozdAhVYOisKHdy6A4kQFjACegQICBAC&url=http%3A%2F%2Fd
itjenpkh.pertanian.go.id%2Fuserfiles%2FFile%2FBuku_Statistik_2017_(ebook).pdf%3Fti
me%3D1505127443012&usg=AOvVaw0hvmy1vx56ca_XV_3f2uCn ditjennak

51

Anda mungkin juga menyukai