UJI PATI/IODIN NUR HERLINA NASIR, M.Pharm.Sci., Apt.

BIOKIMIA-Ke 4 1
 Tanaman menyimpan glukosa sebagai pati
polisakarida; sereal biji-bijian (gandum, beras,
jagung, gandum) serta umbi-umbian seperti
kentang juga kaya akan pati. Pati dapat
dipisahkan menjadi dua fraksi - amilosa dan
amilopektin. Pati alami adalah campuran
amilosa (10-20%) dan amilopektin (80-90%).
Amilosa membentuk dispersi koloid dalam air
panas sedangkan amilopektin tidak larut dalam
air. Struktur amilosa terdiri dari rantai polimer
panjang unit glukosa yang dihubungkan oleh
alpha acetal. Pati - Amilosa menunjukkan bagian
yang sangat kecil dari rantai amilosa. Semua unit
monomer adalah alpha-D-glukosa, dan semua Amilosa
link alfa asetal menghubungkan C#1 dari satu
glukosa dan C#4 glukosa berikutnya. Sebagai
akibat dari ikatan sudut dalam hubungan α
acetal, amilosa sebenarnya membentuk spiral
seperti pegas melingkar.

Amilopektin

BIOKIMIA-Ke 4 2
 UJI KIMIA UNTUK PATI/IODINE
Merupakan prosedur uji iodin untuk pati

Amilosa dalam pati berperan untuk pembentukan warna biru ketika ada iodin. Molekul iodin
terselip di dalam koil amilosa. Reagent Iodin - KI: Iodin tidak terlalu larut dalam air, oleh karena itu
reagen iodin dibuat dengan melarutkan iodin dalam air yang mengandung kalium iodida. Hal ini
membuat kompleks ion tri-iodida linear yang larut dan terselip ke dalam kumparan/koil pati
sehingga menyebabkan warna biru-hitam yang intens.

Prinsip atau dasar perubahan warna dalam uji iodin pada pati
Kompleks pati-iodida terbentuk sebagai partikel bermuatan yang ditransfer antara ion pati dan
iodida yang disebut tri-iodida atau pentaiodida.
Transfer muatan antara pati dan ion iodida mengubah jarak antara tingkat energi / orbital.
Perubahan ini menyebabkan absorpsi cahaya kompleks pati-iodida terjadi pada panjang
gelombang yang berbeda sehingga menghasilkan warna biru kehitaman.

BIOKIMIA-Ke 4 3
 Uji pati: Tambahkan pereaksi Iodine-KI ke suatu
larutan atau langsung pada kentang atau
bahan lain seperti roti, biskuit, atau tepung.
Hasilnya akan berwarna biru-hitam jika ada pati.
Jika amilosa pati tidak ada, maka warnanya
akan tetap oranye atau kuning. Pati
amilopektin, selulosa, dan disakarida seperti
sukrosa dalam gula tidak memberikan warna.

Uji iodin: Ketika mengikuti perubahan dalam

beberapa reaksi reduksi oksidasi anorganik, iodin
dapat digunakan sebagai indikator untuk
perubahan ion iodida dan elemen iodin. Larutan
pati ditambahkan. Hanya unsur iodin yang akan
memberikan warna biru kehitaman yang khas.

BIOKIMIA-Ke 4 4
 PROSEDUR UJI IODIN
Sampel padatan
Kupas kulit sayuran apa pun misalnya kentang dan buah-buahan. Hindari
kontaminasi silang dengan makanan lain. Tambahkan beberapa (2-3) tetes
larutan kalium iodin ke sepotong sampel tersebut menggunakan background
putih. Lakukan pengamatan.
Sampel cair
Masukkan 10 cm3 sampel makanan cair ke dalam tabung uji yang bersih dan
kering. Tambahkan sekitar 5 tetes larutan iodin ke tabung reaksi. Perhatikan
perubahan warna apa pun.

Pengamatan Interpretasi
Tidak ada perubahan Tidak ada pati
(Iodin tetap cokelat)
Perubahan warna biru Ada pati
kehitaman
BIOKIMIA-Ke 4 5
 UJI BENEDICT
BIOKIMIA-Ke 4 6
 Uji Benedict digunakan untuk menguji karbohidrat sederhana. Tes Benedict
mengidentifikasi gula pereduksi (monosakarida dan beberapa disakarida), yang
memiliki gugus fungsi keton atau aldehida bebas. Larutan Benedict dapat
digunakan untuk menguji keberadaan glukosa dalam urin.
Beberapa gula seperti glukosa disebut gula pereduksi karena mereka mampu
mentransfer hidrogen (elektron) ke senyawa lain, suatu proses yang disebut reduksi.
Ketika gula pereduksi dicampur dengan reagen Benedict dan dipanaskan, reaksi
reduksi menyebabkan reagen Benedict berubah warna. Warnanya bervariasi dari
hijau ke merah gelap (bata) atau coklat-berkarat, tergantung pada jumlah dan
jenis gula.

Pereaksi kuantitatif Benedict mengandung potasium tiosianat dan digunakan

untuk menentukan berapa banyak gula pereduksi yang ada dalam sampel.
Larutan ini membentuk endapan tembaga tiosianat putih dan dapat digunakan
dalam titrasi.

BIOKIMIA-Ke 4 7
 Prinsip Uji Benedict

Ketika larutan Benedict dan karbohidrat sederhana dipanaskan, larutannya berubah

menjadi merah oranye/bata merah. Reaksi ini disebabkan oleh sifat pereduksi karbohidrat
sederhana. Ion tembaga(II) dalam larutan Benedict direduksi menjadi ion Tembaga(I), yang
menyebabkan perubahan warna.
Tembaga merah(I) oksida yang terbentuk tidak larut dalam air dan diendapkan keluar dari
larutan. Hal ini menjelaskan endapan yang terbentuk. Ketika konsentrasi gula pereduksi
meningkat, semakin dekat warna akhir menjadi merah bata dan semakin besar endapan
yang terbentuk. Endapan batu bata merah padat, oksida tembaga, mengendap keluar
dari larutan dan mengumpul di bagian bawah tabung reaksi.
Natrium karbonat menyediakan kondisi basa yang diperlukan untuk reaksi redoks. Natrium
sitrat mengalami kompleks dengan ion tembaga(II) sehingga tidak terdegradasi menjadi ion
tembaga(I) selama penyimpanan.
Karbohidrat kompleks seperti pati TIDAK bereaksi positif dengan tes Benedict kecuali rusak
melalui pemanasan atau pencernaan. Disakarida adalah bukan gula pereduksi dan juga
tidak bereaksi dengan yodium atau dengan Reagen Benedict.

BIOKIMIA-Ke 4 8
 Komposisi dan Persiapan Larutan Benedict

Larutan Benedict adalah larutan alkalin berwarna biru gelap yang digunakan untuk
menguji keberadaan gugus fungsi aldehida, - CHO.
 Natrium karbonat anhidrat = 100 gm
 Natrium sitrat = 173 gram
 Tembaga(II) sulfat pentahidrat = 17,3 gram
Satu liter larutan Benediktus dapat dibuat dari 100 g natrium karbonat anhidrat, 173 g
natrium sitrat dan 17,3 g tembaga(II) sulfat pentahidrat.

Prosedur Uji Benedict

Sekitar 1 ml sampel ditempatkan ke dalam tabung reaksi bersih. 2 ml (10 tetes)
reagen Benedict (CuSO4) ditempatkan dalam tabung reaksi. Larutan kemudian
dipanaskan dalam water bath mendidih selama 3-5 menit. Amati perubahan warna
larutan atau terbentuknya endapan dalam tabung uji.

BIOKIMIA-Ke 4 9
 Hasil Interpretasi Uji Benedict
Jika warna pada perebusan berubah menjadi hijau, maka akan ada 0,1 hingga
0,5% gula dalam larutan.
Jika berubah warna menjadi kuning, maka 0,5 hingga 1% gula ada dalam larutan.
Jika berubah menjadi oranye, maka itu berarti ada 1 hingga 1,5% gula.
Jika warna berubah menjadi merah, maka ada gula 1,5 hingga 2,0%.
Dan jika warna berubah menjadi merah bata, itu berarti bahwa lebih dari 2% gula
ada dalam larutan.

Uji Positif Benedict: Pembentukan endapan

kemerahan dalam waktu tiga menit. Terdapat gula
pereduksi. Contoh: Glukosa

Tes Benedict Negatif: Tidak ada perubahan warna

(Tetap Biru). Tidak ada gula pereduksi. Contoh:
Sukrosa.

BIOKIMIA-Ke 4 10
 SUMBER
https://chem.libretexts.org/Textbook_Maps/Biological_Chemistry/Carbohydrates/C
ase_Studies/Starch_and_Iodine
http://brilliantbiologystudent.weebly.com/iodine-test-for-starch.html
https://microbiologyinfo.com/benedicts-test-principle-composition-preparation-
procedure-and-result-interpretation/

BIOKIMIA-Ke 4 11
 TERIMA KASIH E-mail : nuur.herlina@gmail.com

BIOKIMIA-Ke 4 12