BAB I

PENDAHULUAN

A. Tujuan Percobaan
1. Mahasiswa mampu menangani binatang percobaan
2. Mahasiswa mampu menghitung dosis pemberian pada binatang percobaan dan
membuat stok obat
3. Untuk mengetahui karakteristik hewan-hewan yang lazim dipergunakan dalam
percobaan
4. Untuk mengetahui berbagai teknik pemberian obat
5. Mengetahui faktor-faktor yang dapat mempengaruhi hasil percobaan
B. Latar Belakang
Kebutuhan hewan coba pada dunia medis sangat erat, maka dibutuhkan adanya
perkembangan mencit putih dengan jumlah yang banyak. Adapun faktor pendukung yang
tempat hidupnya harus dibuat senyaman mungkin hingga menyerupai habitat aslinya. Selain
itu, hewan coba yang digunakan sebagai objek penelitian harus dalam keadaan sehat dan
mendapatkan nutrisi yang cukup. Oleh karena itu, pemberian imunisasi dan vitamin juga
harus diberikan pada mencit, pemberian dapat dilakukan dengan metode injeksi (Malole,
1989).
Praktikum kali ini akan dilakukan dan dikenalkan cara pemberian dosis dan cara injeksi pada
mencit putih sehingga dapat di praktikum kan dan dapat mengetahui mengenai teknik
perawatan hewan coba (kusumawati, 2004).
Binatang percobaan adalah binatang yang dapat digunakan untuk tujuan penelitian.
Binatang percobaan meliputi binatang laboratorium (khusus dipelihara di laboratorium)
hingga hewan ternak. Tiga hal penting perlu diperhatikan dalam pemanfaatan binatang
percobaan : (1) kesehatan binatang percobaan (bebas dari penyakit) agar tidak
mengacaukan hasil percobaan atau penelitian, (2) pemilihan binatang percobaan
disesuaikan dengan tujuan penelitian, perlukan pengetahuan mengenai anatomi, biologi,
reproduksi, nutrisi, genetik, penyakit serta prosedur bedah yang bervariasi antar spesies, (3)
kebutuhan makanan tiap binatang percobaan yang bervariasi, tergantung pada perbedaan
anatomi, fisiologi serta behaviournya. Selain itu, masa pertumbuhan, reproduksi dan laktasi
turut menentukan variasi bahan makanan yang dibutuhkan (kusumawati, 2004).
C. Tinjauan Pustaka
1. Dasar teori
Hewan percobaan yang digunakan di laboratorium tidak Ternilai jasanya dalam
penilaian efek, toksisitas dan efek samping serta keamanan dan senyawa bioaktif.
Hewan percobaan merupakan kunci di dalam pengembangan senyawa bioaktif dan
usaha-usaha kesehatan (malole, 1989).
Penanganan hewan percobaan hendaklah dilakukan dengan penuh rasa kasih sayang
dan berprimanusiaan. Di dalam menilai efek farmakologis suatu senyawa bioaktif
dengan hewan percobaan dapat dipengaruhi oleh berbagai faktor, yaitu:
1. Faktor internal pada hewan percobaan sendiri adalah umur, jenis kelamin, bobot
badan, keadaan kesehatan, nutrisi dan sifat genetik.
2. Faktor-faktor lain yaitu faktor lingkungan, keadaan kandang, suasana kandang,
populasi dalam kandang, keadaan ruang tempat pemeliharaan, pengalaman hewan
percobaan sebelumnya, suplai oksigen dalam ruang pemeliharaan dan cara
pemeliharaan. Keadaan faktor-faktor ini dapat merubah atau mempengaruhi respon
hewan percobaan terhadap senyawa bioaktif yang diujikan. Penanganan yang tidak
 wajar terhadap hewan percobaan dapat mempengaruhi hasil percobaan,
memberikan penyimpangan hasil. Disamping itu, cara pemberian senyawa bioaktif
terhadap hewan percobaan tentu mempengaruhi respon hewan terhadap senyawa
bioaktif yang bersangkutan terutama segi kemunculan efeknya. Cara pemberian
yang digunakan tentu tergantung pada kepala bahan atau bentuk sediaan yang akan
digunakan serta hewan percobaan yang akan digunakan. Sebelum senyawa bioaktif
dapat mencapai tempat kerjanya, senyawa bioaktif harus melalui proses absorpsi
terlebih dahulu kemudian sifat fisiologi yang berpengaruh.
a. Distribusi
b. Absorpsi suatu senyawa bioaktif di samping ditentukan oleh sifat senyawa bioaktif
nya sendiri untuk ditentukan oleh sifat/ keadaan daerah kontak mula oleh senyawa
bioaktif dengan tubuh. Sifat sifat fisiologis seperti jumlah suplai darah dan keadaan
biokimia daerah kontak mula senyawa bioaktif tubuh menentukan proses absorpsi
bioaktif yang bersangkutan. Jumlah senyawa bioaktif yang akan mencapai sasaran
kerjanya dalam jangka waktu tertentu akan berbeda.
c. Atau rute pemberian senyawa bioaktif menentukan daerah kontak mula senyawa
bioaktif dengan tubuh dan ini merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi efek
senyawa bioaktif. Penanganan umum beberapa hewan coba berbeda dengan bahan
kimia yang merupakan bahan mati, percobaan dengan hewan percobaan yang hidup
memerlukan perhatian dan penanganan atau perlakuan yang khusus (malole, 1989).
2. Cara penanganan hewan coba
Mencit (Mus Musculus) adalah hewan percobaan yang sering dan banyak digunakan
di dalam laboratorium farmakologi dalam berbagai bentuk percobaan. Hewan ini
mudah ditangani dan bersifat penakut, foto fobik, cenderung berkumpul sesamanya
dan bersembunyi. Aktivitasnya di malam hari lebih aktif. Kehadiran manusia akan
mengurangi aktivitasnya (malole, 1989).
1) Cara memegang mencit
Umumnya, mencit dan tikus selalu berusaha menggigit bila di kendalikan
sehingga perlu didekati dengan sangat hati-hati, ditangkap pada ekornya lalu
ditempatkan pada bahan yang kasar atau tengkuk hewan di tangkap dengan
ibu jari dan telunjuk sehingga ekornya ditarik. Selanjutnya mencet diangkat
agar terlepas dari handuk dan ekornya dipegang oleh jari ketiga dan
keempat (pada setengah bagian ekornya) (Kusumawati, 2004).
2) Bobot badan hewan coba yang digunakan
Di dalam penggunaan, hewan percobaan yang digunakan dapat berdasarkan
kriteria bobot badannya disamping usianya. Farmakope Indonesia edisi III -
1979 mengemukakan kriteria bobot beberapa hewan percobaan yang
digunakan dalam uji hayati.
Mencit : 17-25 gr
Kelinci : 15-20 kg
Tikus : 150-200 gr
Kucing : tidak <5 kg
Marmut :300-500 gram
Merpati : 100-200 gram
3) Metode penandaan pada binatang percobaan dapat bersifat sementara
(temporer) atau permanen. Penandaan yang bersifat sementara antara lain :
 (1) Penggunaan pewarna (pena, crayon dan pewarna lainnya) pada
bagian tubuh binatang percobaan yang mudah hilang karena tercuci
atau rusak karena aktivitas binatang percobaan di dalam kandang
(2) Mencukur bulu (Pekow and Baumans, 2003)

Penandaan yang bersifat permanen antara lain :

(1) Tato, biasanya digunakan untuk roden (telinga,ekor), kelinci (telinga), dan
babi (telinga)
(2) Melubangi daun telinga (mencit, tikus, hamster) (Kusumawati,2004).
3. Mengurangi variasi biologis binatang percobaan
Binatang percobaan biasanya memberikan hasil dengan deviasi yang lebih besar
dibanding dengan percobaan in Vitro, karena adanya variasi biologis. Maka untuk
meminimalkan variasi tersebut, binatang percobaan harus mempunyai spesies,
strain, usia, jenis kelamin, berat badan serta dipelihara pada kondisi yang sama pula
(sesuai dengan tabel animal housing) (widyarini, 2008).
Area animal housing
Tabel
4. Luka gigitan binatang percobaan
Imunisasi tetanus disarankan bagi yang bekerja dengan binatang percobaan. Luka
yang bersifat abrasif atau luka yang agak dalam karena gigitan binatang ataupun
karena alat-alat yang telah digunakan untuk percobaan binatang, harus diobati
secepatnya menurut cara-cara pertolongan pertama pada kecelakaan. Apabila
korban gigitan belum pernah mendapat Kekebalan terhadap tetanus, iya harus
mendapatkan imunisasi profilaksis.
5. Pemberian obat pada binatang percobaan
1) Tabung dan jarum suntik harus steril jika digunakan pada kelinci,
marmut dan anjing. Untuk tikus, mencit tidak perlu steril
melainkan sangat bersih
2) Setelah penyuntikan, cari tabung dan jarum suntik tersebut
semprotkan cairan ke dalam gelas beker ulangi 3 kali
3) Volume yang diberikan harus diperhitungkan volume maksimalnya

Volume maksimal cairan yang diberikan pada binatang coba

Tabel

 Didistribusikan ke daerah yang lebih luas

6. Pengambilan sampel biologis dari binatang percobaan
Pengambilan sampel biologis (darah dan non darah) dari binatang percobaan harus
dilakukan dengan berbagai pertimbangan. Hal ini disebabkan stres pada binatang
percobaan saat pengambilan sampel biologis akan berpengaruh terhadap data yang
didapatkan. Selain itu, personil yang terlatih memegang peranan yang penting dalam
proses pengambilan sampel biologis dengan meminimalkan kerusakan jaringan dan
memelihara kesejahteraan binatang percobaan.
Volume darah total dan volume pengambilan sampel darah binatang percobaan
perberat badan rata-rata
Tabel
Data waktu recovery
Tabel
1) Sampel biologis non darah
Sampel biologis non darah diambil dari rongga mulut, kulit, kandung kemih, saluran
pencernaan, vagina dan medula spinalis. pengambilan sampel dilakukan dengan cara
apus atau smear dan pengumpulan sampel langsung dari organ tersebut
(berupa:kulit, rambut, urin, feses, cairan cerebrospinal). Sampel biologis non darah
digunakan untuk pemeriksaan patologis di organ yang bersangkutan.
2) Heparinasi
(1) Heparinasi (mencegah darah menggumpal) : 10U heparin atau 1 ml darah.
(2) Penggumpalan darah dicegah dengan sebelum dipakai tabung dan jarum
suntik dicuci dengan larutan jenuh Na oksalat steril.
7. Memusnahkan binatang percobaan
Pada akhir percobaan (penelitian biomedis) binatang coba akan dikorbankan (di
euthanasi) yang pelaksanaannya harus manusiawi. Euthanasia harus dilakukan
apabila kondisi binatang coba sudah sangat parah (meskipun percobaan belum
berakhir). Teknik euthanasia harus dapat menyebabkan binatang tidak sadar dengan
cepat, diikuti dengan berhentinya kerja jantung dan sistem pernapasan dan
hilangnya fungsi otak.
Indikator setelah Etanasi :
1) Hilangnya detak jantung
2) Hilangnya pernapasan
3) Rigor mortis
4) Hilangnya refleks pupil
BAB II

Jalannya percobaan

A. Alat dan bahan

1. Masker
2. APD
3. Sarung tangan
4. Antiseptik tangan
5. Alkohol
6. Kapas
7. Spidol permanen
8. Kertas koran
9. Injeksi
10. Larutan
B. Cara kerja (skematis)
1. Cara memegang mencit
Mencit dapat dipegang dengan memegang
ujung ekornya dengan tangan kanan,
biarkan menjangkau atau mencengkram
alas yang kasar (kawat kandang). kemudian
tangan kiri dengan ibu jari dan jari telunjuk
menjepit kulit tengkuknya seerat atau
tegang mungkin. ekor dipindahkan dari
tangan kanan, dijepit antara jari kelingking
dan jari manis tangan kiri. dengan demikian,
mencit telah terpegang oleh tangan kiri dan
siap untuk diberi perlakuan (memole, 1989).
2. Tata cara pemberian obat
a. Pemberian secara peroral (p.o)
1) Kelinci, marmut
Cairan diberikan dengan
pertolongan kateter yang
menggunakan Mounth
block dipasang ketika
binatang Dalam posisi
duduk. Mount block adalah
pipa kayu yang berbentuk
silinder (panjang sekitar 12
cm Diameter luar 3 cm
Diameter lubang 7 mm).
Sewaktu memasang
mounth block tekan rahang
binatang dengan ibu jari
dan telunjuk.
Celupkan kateter karet ke
dalam parafin cair lalu
masukkan kateter ke dalam
esofagus melalui lubang
 mounth block. Kateter
harus dimasukkan sekitar
(20 - 25 cm) ditandai kateter
pada 25 cm. Untuk
memeriksa Apakah kate
termasuk esofagus dan
bukan trakea, celupkan
ujung luar kateter ke dalam
air. jika timbul gelembung-
gelembung udara, berarti
kateter tersebut tidak
masuk esofagus.
Bentuk obat padat (tablet,
puyer atau kapsul) diberikan
pada binatang dengan
posisi duduk dengan
pertolongan pipa plastik
dan alat pendorong. pipa
tersebut dimasukkan ke
dalam pharynk, dan obat
didorong masuk.
2) Tikus, mencit
Pemberian obat-obat dalam
bentuk suspensi, larutan
atau emulsi Pada tikus dan
mencit dilakukan dengan
jarum suntik ujung tumpul
(bentuk bola). Pegang
hewan uji seperti lazimnya,
masukkan kateter
polietilena (panjang 2-3
cm) dengan jarum tumpul
ukuran 18 G atau dengan
jarum tuberkulin dengan
ujung tumpul yang berisi
larutan, suspensi atau
emulsi melalui mulut
dengan cara menelusuri
searah tepi langit-langit ke
arah belakang sampai
esofagus. semprotkan
senyawa uji pelan-pelan.
setelah selesai tarik
perlahan-lahan alat
tersebut (anonim, 2007).
b. Pemberian secara intravena (i.v)
1) Kelinci
 Bulu-bulu telinga di sekitar
pembuluh darah vena
marginalis dicabut, lalu
digosok dengan kapas yang
dibasahi xilol, atau dipanasi
sedikit dengan api. Tekan
pembuluh darah tersebut di
Pangkal telinga (dekat
kepala). jarum suntik
berikut obatnya dimasukkan
pelan-pelan searah dengan
aliran darah vena dengan
bevel menghadap ke atas.
tas untuk memastikan
bahwa jarum telah
terinserasi ke dalam Vena
dengan benar lakukan
aspirasi perlahan-lahan.
kemudian putar jarum
pelan-pelan sehingga
bevelle menghadap ke
bawah. gunakan jarum yang
panjangnya 0,5 inci dengan
ukuran 26 G. setelah
penyuntikan, bekas
suntikan ditekan dengan
kapas bersih.
2) Tikus, mencit
Pemberian intravena dapat
dilakukan sebagai berikut,
masukan hewan Uji ke
dalam holder masukan ekor
ke dalam air hangat (dilatasi
Vena lateralis). setelah Vena
melebar, pegang ekor
mencit dengan kuat dengan
posisi Vena berada di
sebelah atas. tusukan jarum
suntik ukuran 24 G sejajar
dengan Vena kurang lebih 1
cm. semprotkan larutan uji
perlahan-lahan, setelah itu
tarik pelan-pelan dan tekan
tempat suntikan dengan
kapas beralkohol (Ernest
Mutschler, 1986).
c. Pemberian secara intraperitonial
(i.p)
1) Kelinci
Pegang tengkuk kelinci
dengan kuat, dorong pelan-
pelan ditekan sehingga
kepala mendongak ke
belakang. teman sekerja
menginjeksi obat ke
belakang ¼ kiri bawah
daerah abdominal dengan
jarum yang membentuk
sudut 45°. gunakan jarum
ukuran 22 gauge panjang 1
inci.
2) Tikus dan mencit
Pegang tikus atau mencit
pada ekornya dengan
tangan kanan biarkan kaki
depan mencengkram
anyaman kawat. dengan
tangan kiri jepitlah tengkuk
tikus atau mencit di antara
jari telunjuk dan jari tengah
(bisa juga dengan jari
telunjuk dan ibu jari).
pindahkan ekor tikus dan
tangan kanan ke jari
kelingking tangan kiri.
pegang tikus atau mencet
tersebut dengan kulit
punggung dijepit, sehingga
daerah perut terasa tegang
basahi daerah perut dengan
kapas beralkohol, tusukan
jarum suntik Nomor 18
sejajar dengan salah satu
kaki pada daerah kurang
lebih 1 cm di atas kelamin.
semprotkan larutan uji
pelan-pelan pada
abdominal area, setelah
selesai tarik jarum suntik
dan tekan tempat suntikan
dengan kapas beralkohol.
yang diperhatikan adalah
penyuntikan jangan sampai
kena hati kandung kencing
atau usus. rongga perut
terletak di antara kandung
 kencing dan hati (Munaf,
1994).
d. Pemberian intramuskular (i.m)
Dilakukan dengan cara memegang
mencit, usap daerah otot paha
posterior dengan kapas beralkohol.
suntikan larutan uji, setelah selesai
cabut pelan-pelan alat tersebut dan
tekan tempat suntikan dengan
kapas beralkohol (Munaf, 1994).
e. Pemberian subkutan (s.c)
Dikerjakan dengan cara memegang
mencit melalui sela-sela jepitan
pada tengkuk, suntikan cairan ke
bawah kulit. suntikan subkutan
hanya bisa dilakukan untuk obat-
obat yang tidak menyebabkan iritasi
terhadap jaringan Karena akan
menyebabkan rasa sakit hebat,
bnekrosis dan pengelupasan kulit.
absorbsi melalui subkutan ini dapat
pula bervariasi sesuai dengan yang
diingatkan. Keuntungannya obat
dapat diberikan dalam kondisi sadar
atau tidak sadar sedangkan
kerugiannya dalam pemberian obat
perlu prosedur steril, sakit, dapat
terjadi iritasi lokal di tempat injeksi
(anonim, 2007).
BAB III

PEMBAHASAN

Pada praktikum farmakologi kali ini telah dilakukan cara penanganan hewan uji cara pemberian
obat atau menyuntikkan larutan uji menggunakan dua cara, yaitu secara intravena (i.v) dan secara
intraperitoneal (i.p) hewan yang digunakan dalam praktikum ini adalah mencit sebanyak 1 ekor,
larutan yang kami gunakan adalah aquadest.

Pertama yang kami lakukan adalah pengenalan terhadap mencit, Bagaimana memperlakukan mencit
dengan benar yaitu dengan mengangkat ujung ekor mencit dengan tangan kanan dan meletakkan
mencit di tempat yang permukaannya kasar. kemudian menjinakkan dengan cara mengelus-ngelus
tengkuk mencit dengan jari telunjuk dan ibu jari tangan kiri, dan tangan kanan memegang ekornya
membalikkan tubuh mencit sehingga menghadap ke atas dan menjepit ekornya dengan Sela jari
kelingking dan jari manis.

Kedua adalah pemberian larutan uji pada mencit secara intraperitoneal (i.p). pertama-tama elus
mencit sampai jinak atau tenang, lalu jepit tengkuk mencit dengan ibu jari dan telunjuk jari, tahan
ekor dengan kuat lalu balikkan hewan atau mencet sehingga perut menghadap ke atas. suntikan
menggunakan spuit 0,1 ml. ambil larutan aquades lalu suntik di bagian otot mencit yang terdapat di
bagian perut di bawah sebelah kanan sejajar dengan kaki mencet kurang lebih 1 cm dari kelamin
(dikira-kira). sebelum menyuntik jangan lupa usap bagian yang ingin disuntik dengan kapas yang
diberi alkohol setelah selesai menyemprotkan cairan tarik spuit pelan-pelan lalu Usap dengan kapas
yang diberi alkohol. Intraperitoneal melalui ini adalah agar tanpa melalui saluran pencernaan dan
langsung ke pembuluh darah.

Ketiga adalah pemberian larutan uji ke pada mencit menggunakan cara intravena (i.v). pertama-
tama elus mencheat sampai tenang masukkan ke dalam gelas beker yang sudah disiapkan dan telah
diberi gabus yang telah diberi lubang ditengahnya, masukkan mencheat ke dalam beker glass
dengan ekor yang masih di luar. jika sesuai prosedur yang terdapat di modul hal yang dilakukan
pertama kali adalah masukkan mencit ke dalam folder lalu ekornya dicelupkan kedalam air panas
yang sudah menjadi hangat sampai venanya melebar, tetapi kami tadi melakukan dengan cara
ekornya mencheat diusap dengan kapas yang ada alkoholnya lalu sebelum larutan uji disemprotkan
darahnya jika mengeluarkan darah maka sudah betul itu pembuluh darah vena, suntikan secara
pelan-pelan. jika sudah tarik pelan-pelan jarum, lalu beri kapas berisi alkohol ke ekor mencit tadi
dalam penyuntikan mencit harus diberi jeda agar mencetnya tidak stres. Intravena pemberian obat
dengan efek sistemik sangat baik melalui rute ini, karena obat yang dimasukkan tidak akan
mengalami proses absorpsi dan akan langsung diedarkan ke seluruh tubuh dengan cepat melalui
sistem kardiovaskular.

Pada mencet yang lain kami juga menyuntikkan larutan uji menggunakan dua cara, yaitu secara
intramuskular (i.m) dan subkutan (s.c) larutan yang kami gunakan adalah aquadest.

Pertama yang kami lakukan adalah mengelus mencet hingga tenang, setelah tenang dilakukan
dengan cara memegang mencit. pemberian larutan uji pada mencit secara intramuskular (i.m),
pertama-tama usap daerah otot paha posterior dengan kapas beralkohol. suntikan larutan uji,
setelah selesai cabut pelan-pelan alat tersebut dan tekan tempat suntikan dengan kapas beralkohol.
Intramuskular memungkinkan absorbsi obat yang lebih cepat dari pada rute sc karena pembuluh
darah lebih banyak terhadap terdapat di otot.
Kedua adalah pemberian larutan uji kepada mencit secara subkutan (s.c). dikerjakan dengan
memegang mencit melalui sela-sela jepitan pada tengkuk, suntikan cairan ke bawah kulit. suntikan
subkutan hanya bisa dilakukan untuk obat-obat yang tidak menyebabkan iritasi terhadap jaringan
Karena akan menyebabkan rasa sakit dan pengelupasan kulit. Subkutan pada rute ini cenderung
cukup aman karena kulit mencheat bisa diangkat dengan hati-hati sehingga jauh dari organ dalam
mencit sehingga jarum suntik tidak melukai organ mencit.

Adapun keuntungan dan kerugian dari pemberian dari keempat cara pemberian obat tersebut, yaitu
intraperitonial keuntungannya penyerapan lebih cepat terjadi karena penyerapan langsung ke
pembuluh darah usus yang memiliki permukaan besar, sedangkan kerugiannya untuk resiko
kesalahan penyuntikan menyebabkan kesalahan organ. pemberian dengan cara intravena
keuntungannya adalah cepat langsung ke sistem sistemik dan efektif sedangkan kekurangannya
menyakitkan dan dapat meninggalkan bekas goresan hal yang harus diperhatikan saat pemberian
intraperitonial adalah jangan sampai terkena kandung kemih, hati dan usus pemberian dengan cara
intramuskular keuntungannya adalah dapat dipakai untuk pemberian obat larut dalam minyak dan
absorpsi cepat obat larut dalam air sedangkan kerugiannya tidak dapat dipakai pada gangguan
bekuan darah dan bioavailabilitas bervariasi. pemberian dengan cara subkutan keuntungannya
adalah diperlukan latihan sederhana dan mencegah kerusakan sekitar saluran cerna sedangkan
kerugiannya adalah rasa sakit dan kerusakan kulit, tidak dapat dipakai jika volume obat besar dan
bioavailabilitas bervariasi sesuai lokasi.
BAB IV

PENUTUP

A. Kesimpulan
1. Penanganan hewan percobaan hendaklah dilakukan dengan penuh rasa kasih sayang
dan berkeprimanusiaan
2. Pemberian obat pada hewan coba dapat diberikan secara subkutan, intravena,
intramuskular dan intraperitoneal
3. Terdapat faktor internal dan eksternal pada hewan percobaan yang dapat
mempengaruhi hasil percobaan
B. Saran
Untuk praktikum selanjutnya sebaiknya menggunakan mencit atau hewan percobaan yang
terstandar, yang kondisinya terbukti baik secara keseluruhan dan fisiologisnya. agar dalam
percobaan memberikan hasil yang baik serta mahasiswa dapat mentaati tata tertib yang
telah ditetapkan.
BAB V

DAFTAR PUSTAKA