POLIPLOIDISASI IKAN MAS (Cyprinus carpio L.

)
Polyploidyzation of Common Carp (Cyprinus carpio L.)

Akhmad Taufiq Mukti1, Rustidja2, Sutiman Bambang Sumitro3 dan

Mohammad Sasmito Djati3

ABSTRAK

Penelitian dilaksanakan di Balai Benih Ikan Sentral Umbulan Pasuruan pada bulan Juli sampai
Desember 2000. Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui dan menguji pengaruh kejutan suhu panas
terhadap laju penetasan, kelangsungan hidup, kecepatan pertumbuhan relatif, laju pertumbuhan spesifik,
perkembangan gonad dan keberhasilan poliploidisasi pada ikan mas.
Metode yang dipergunakan adalah eksperimen dengan Rancangan Acak Lengkap. Perlakuan yang
dipergunakan adalah kejutan suhu panas 40°C selama 1,5 menit; A: diploid (kontrol), B: triploid (3 menit
setelah fertilisasi) dan C: tetraploid (29 menit setelah fertilisasi). Masing-masing perlakuan diulang 10 kali.
Parameter uji adalah laju penetasan, kelangsungan hidup, kecepatan pertumbuhan relatif (panjang tubuh),
laju pertumbuhan spesifik (berat tubuh), perkembangan gonad dan analisis ploidisasi dengan menghitung
nukleolus. Analisis data dilakukan secara statistik dengan Uji F (ANOVA) dan deskriptif.
Hasil penelitian menunjukkan bahwa perlakuan kejutan suhu panas berpengaruh nyata terhadap laju
penetasan. Laju penetasan ikan mas diploid berbeda sangat nyata (P<0,01) dengan tetraploid, tetapi tidak
berbeda nyata dengan triploid (P>0,05). Kelangsungan hidup ikan mas triploid dan tetraploid lebih rendah
dibandingkan diploid. Ikan mas tetraploid memiliki kecepatan pertumbuhan relatif dan laju pertumbuhan
spesifik lebih tinggi dibandingkan ikan mas diploid dan triploid.
Ikan mas triploid tidak mengalami perkembangan gonad (steril), sedangkan ikan mas diploid dan
tetraploid perkembangan gonadnya normal. Induksi ikan mas triploidi dan tetraploidi, masing-masing
sebesar 70 persen dan 60 persen.

ABSTRACT

Research was conducted in Balai Benih Ikan Sentral Umbulan, Pasuruan on July to December
2000. The aim of this study were to show and determine the effects heat shock on hatching rate, survival
rate, relative growth rate, specific growth rate, gonad development and successful polyploidyzation of
common carp.
The method that used in this research was experiment with Complete Randomize Design.
Treatments that used were heat shock 40°C during 1,5 minutes; A: diploid (control), B: triploid (3 minutes
after fertilization) and C: tetraploid (29 minutes after fertilization). Ten replicates were carried out for each
treatment. Parameters test were hatching rate, survival rate, relative growth rate (body length), specific
growth rate (body weigth), gonad development and ploidyzation analysis with counting of nucleolus. Data
analysis that used were statistic with F Test (ANOVA) and descriptive.
The result of this study indicated that heat shock treatment significantly influenced on hatching
rate. Hatching rate of diploid common carp was different significantly (P<0,01) with tetraploid, but non
significant with triploid (P>0,05). Survival rate of triploid and tetraploid common carp were lower than
diploid. Tetraploid common carp have relative growth rate and specific growth rate higher than diploid
and triploid common carp.

1 Mahasiswa Program Pasca Sarjana Universitas Brawijaya Malang

2 Fakultas Perikanan Universitas Brawijaya Malang
3 Fakultas MIPA Biologi Universitas Brawijaya Malang
 BIOSAIN, VOL. 1 NO. 1, April 2001
Triploid common carp haven’t developed of gonad (sterile), however diploid and tetraploid
common carp have showed normally development of gonad. Induction of triploidy and tetraploidy
common carp were 70 and 60 percentages, respectively.
(Key words: heat shock, fertilization, polyploidyzation)
PENDAHULUAN
Pengelolaan budidaya ikan (khususnya
ikan mas) perlu memperhatikan efisiensi dan
produktivitas usaha serta kualitas ikan. Hal ini
harus diimbangi dengan upaya perbaikan dan
peningkatan kualitas induk maupun benih ikan
mas. Saat ini disinyalir telah terjadi penurunan
kualitas induk maupun benih ikan mas yang
dipelihara oleh petani ikan. Beberapa usaha
maupun penelitian telah dilakukan dalam upaya
peningkatan produktivitas (produksi) dan
perbaikan serta peningkatan kualitas genetik ikan
mas seperti program seleksi, manipulasi jenis
kelamin melalui perlakuan hormonal maupun
manipulasi kromosom.
Teknik-teknik manipulasi kromosom
telah diterangkan oleh para peneliti sejak tahun
1970-an dan teknik ini potensial untuk sex control
dan manipulasi genome (Thorgaard, 1983).
Manipulasi kromosom mungkin dilakukan
selama siklus nukleus dalam pembelahan sel,
dasarnya adalah penambahan atau pengurangan
set haploid atau diploid. Pada ikan dan hewan
lainnya dengan fertilisasi eksternal, proses-
proses buatan (artificial) dapat dilakukan untuk
salah satu gamet sebelum fertilisasi atau telur
terfertilisasi pada beberapa periode selama
formasi pada zigot (Purdom, 1983).
Poliploidisasi merupakan salah satu
metode manipulasi kromosom untuk perbaikan
dan peningkatan kualitas genetik ikan guna
menghasilkan benih-benih ikan yang mempunyai
keunggulan, antara lain: pertumbuhan cepat,
toleransi terhadap lingkungan dan resisten
terhadap penyakit. Induksi poliploid dalam
budidaya ikan sangat menarik perhatian
masyarakat petani ikan maupun para peneliti di
bidang perikanan. Poliploidisasi pada ikan dapat
dilakukan melalui perlakuan secara fisik seperti
melakukan kejutan (shocking) suhu baik panas
maupun dingin, pressure (hydrostatic pressure) dan
atau secara kimiawi untuk mencegah peloncatan
polar body II atau pembelahan sel pertama pada
telur terfertilisasi (Thorgaard, 1983; Yamazaki,
112
1983; Carman et al., 1992; Shepperd dan
Bromage, 1996).
Thorgaard (1983) menjelaskan,
pendekatan praktis untuk induksi poliploidi
melalui kejutan panas merupakan perlakuan
aplikatif sesaat setelah fertilisasi (untuk induksi
triploidi) atau sesaat setelah pembelahan
pertama (untuk induksi tetraploidi) pada suhu
lethal. Kejutan suhu selain murah dan mudah
juga efisien dapat dilakukan dalam jumlah
banyak (Rustidja, 1991). Kejutan panas
merupakan teknik perlakuan fisik yang paling
umum digunakan untuk menghasilkan poliploidi
pada ikan (Don dan Avtalion, 1986).
Beberapa penelitian menunjukkan bahwa
perlakuan untuk menghasilkan poliploidisasi
pada ikan juga mempengaruhi laju penetasan,
abnormalitas, kelangsungan hidup dan laju
pertumbuhan ikan. Tiga hal yang perlu
diperhatikan dalam perlakuan kejutan suhu pada
telur, yaitu waktu awal kejutan, suhu kejutan dan
lama kejutan (jelas sangat rendah daya hidupnya,
tetapi Don dan Avtalion, 1986). Nilai parameter
tersebut berbeda untuk setiap spesies (Pandian
dan Varadaraj, 1988).
Tave (1993) melaporkan, triploidisasi
akan menyebabkan peningkatan pertumbuhan
dan sterilitas. Ukuran sel ikan triploid lebih besar
dibandingkan dengan diploid, nukleus berisi 33
persen lebih allel untuk pertumbuhan dan energi
untuk pertumbuhan produksi gamet berkurang
atau terhambat. Ikan triploid mempunyai
gonadosomatic index yang lebih rendah bila
dibandingkan dengan diploid (Mair, 1993).
Keuntungan triploid adalah dapat mengontrol
overpopulate, membuat populasi monosex, memacu
pertumbuhan dan kelulushidupan serta memiliki
pertumbuhan lebih cepat dari diploid, karena
energi yang dipergunakan untuk perkembangan
gonad pada diploid dipergunakan untuk
pertumbuhan somatik pada triploid (Thorgaard,
1983).
Tetraploid terlihat dapat dibesarkan
untuk kematangan kelamin dan dipergunakan
dalam memproduksi ikan triploid melalui
persilangan dengan diploid normal dan
androgenetik pada telur-telur yang diradiasi
 Akhmad Taufiq Mukti, Poliploidisasi Ikan Mas
dengan sinar-γ (Purdom, 1993 dan Santiago et
al., 1993). Valenti (1975) dalam Thorgaard (1983)
menemukan beberapa kemungkinan tetraploid
di antara telur Tilapia aurea yang diperlakukan
dengan kejutan dingin. Ikan-ikan tersebut lebih
besar dari kontrol dan triploid pada umur 14
minggu.
Studi kromosom dan nukleoli pada ikan
penting dilakukan, selain dapat dipergunakan
dalam uji poliploidisasi juga banyak bermanfaat
dalam sitotaksonomi untuk menduga hubungan
filogenetik beberapa spesies ikan (Miyaki et al.,
1997 dalam Carman dkk., 1997). Metode
penghitungan jumlah nukleolus merupakan
metode yang mudah dan relatif murah serta
mempunyai peluang yang besar untuk
diterapkan pada berbagai spesies ikan. Metode
ini hanya memerlukan sedikit jaringan dan
semua sumber jaringan dapat dipergunakan
(Philips et al., 1986). Penentuan ploidi beberapa
sampel ikan dapat dibuat hanya dalam waktu
singkat dan sampel dapat diamati tanpa
membunuh ikan (Carman, 1992).
Tujuan dari penelitian ini adalah untuk
mengetahui dan menguji pengaruh kejutan suhu
panas terhadap laju penetasan, kelangsungan
hidup, kecepatan pertumbuhan relatif dan laju
pertumbuhan spesifik, perkembangan gonad
serta keberhasilan poliploidisasi pada ikan mas.
Hasil penelitian ini diharapkan dapat bermanfaat
untuk memberikan tambahan informasi dan
aplikasi lapang program poliploidisasi ikan mas
terutama untuk peningkatan kualitas serta
produksi induk maupun benih ikan mas.
MATERI DAN METODE
Penelitian ini dilaksanakan di Balai Benih
Ikan Sentral Umbulan, Pasuruan pada bulan Juli
sampai Desember 2000. Alat-alat penelitian
terdiri dari: kolam pemeliharaan dan pemijahan
induk, jaring, bak inkubasi, saringan, akuarium,
bak pemeliharaan larva, pipet tetes, mikroskop
cahaya, timbangan analitik, kamera foto, gelas
obyek, petridish, refrigerator, sectio set, hot plate,
oxymeter, pH pen dan termometer. Bahan-bahan
yang dipergunakan dalam penelitian ini antara
lain: induk ikan mas jantan dan betina matang
kelamin ± 1,0 - 3,0 kg, air media, NaCl Fisiologis
0,9 %, urea dan garam, larutan Ringer’s,
methylen blue, Artemia sp., pakan pellet (CP
Prima), cacing Tubifex sp., sarung tangan, tissu,
larva ikan mas umur ± 15 hari setelah penetasan,
KCl 0,075 M (Merck, Germany), AgNO3
(Merck, Germany), gelatin dan gliserin (Merck
Germany), asam format, methanol (Merck,
Germany), asam asetat glasial (Merck,
Germany), aquadest dan minyak immersi.
Metode yang dipergunakan dalam
penelitian ini adalah metode eksperimen dengan
Rancangan Acak Lengkap (RAL). Sebagai
perlakuan adalah kejutan suhu panas 40°C
selama 1,5 menit yang diperlakukan pada telur
terfertilisasi dan dibagi menjadi 3 kelompok
perlakuan, yaitu :
A.Kelompok ikan normal diploid (2 N), tanpa
perlakuan kejutan suhu panas.
B. Kelompok ikan triploid (3 N), kejutan suhu
panas pada telur 3 menit setelah fertilisasi.
C. Kelompok ikan tetraploid (4 N), kejutan suhu
panas pada telur 29 menit setelah fertilisasi.
Masing-masing perlakuan dilakukan ulangan 10
kali.
Pemijahan danstripping induk ikan mas
Pemijahan ikan dilakukan dengan cara
memasangkan induk ikan mas jantan dan betina
di dalam kolam pemijahan ikan dengan
perbandingan jantan dan betina adalah 3:1.
Selanjutnya ikan mas akan melakukan
perkawinan secara alami dan biasanya baru
berlangsung pada malam hari (tengah malam)
dengan selang waktu 11-18 jam setelah
dipasangkan.
Setelah nampak tanda-tanda ikan mulai
memijah, induk betina dan jantan ikan mas
ditangkap dan dilakukan pengurutan (stripping)
untuk mendapatkan telur dan sperma ikan mas.
Telur-telur yang diperoleh ditampung dalam
petridish dan sperma ditampung dalam tabung
reaksi yang berisi larutan NaCl Fisiologis dengan
pengenceran 10 kali. Kemudian larutan sperma
disimpan sementara dalam refrigerator suhu
4°C.
Perlakuan poliploidisasi
Perlakuan poliploidisasi dilakukan melalui
tahapan-tahapannya sebagai berikut: telur ikan
mas dalam petridish hasil stripping diambil
mempergunakan spatula dan diletakkan dalam
petridish bersih dan kering. Selanjutnya, larutan
sperma diteteskan pada telur sebanyak 2-3 tetes
dan dilakukan pengadukan (dicampur) secara
perlahan mempergunakan bulu ayam.
Kemudian, campuran larutan sperma dan
telur ditambahkan air bersih sebanyak 3-4 tetes
untuk melangsungkan proses fertilisasi telur dan
secara perlahan-lahan diaduk mempergunakan
113
 BIOSAIN, VOL. 1 NO. 1, April 2001
bulu ayam. Setelah satu menit, telur yang telah
terfertilisasi dibagi menjadi 3 kelompok
perlakuan dan disebar pada masing-masing
saringan yang telah ditempatkan dalam wadah
berisi larutan urea dan garam 3:4 untuk 1 liter
air. Tahap selanjutnya, telur-telur kontrol tanpa
perlakuan kejutan suhu (diploid) langsung
dimasukkan bak penetasan (inkubasi) telur.
Telur-telur terfertilisasi yang termasuk
dalam kelompok triploidisasi, 3 menit setelah
fertilisasi dilakukan perlakuan kejutan suhu
panas 40°C selama 1,5 menit. Selanjutnya telur
tersebut dimasukkan dalam bak inkubasi. Telur-
telur terfertilisasi dalam kelompok
tetraploidisasi, 29 menit setelah fertilisasi
dilakukan perlakuan kejutan suhu panas 40°C
selama 1,5 menit dan kemudian dimasukkan bak
penetasan (inkubasi) telur.
Penetasan dan pemeliharaan larva
Penetasan telur dilakukan dengan cara
meletakkan telur-telur terfertilisasi dalam
saringan yang telah diperlakukan triploidisasi
dan tetraploidisasi serta kontrol dalam bak
penetasan yang telah diberikan methylen blue.
Suhu air diatur 28°C. Lebih kurang 8-10 jam
setelah fertilisasi, dilakukan penghitungan telur
terfertilisasi dan tidak terfertilisasi. Laju
penetasan dan larva cacat (secara morfologis)
dihitung pada saat telur-telur menetas 2-3 hari
setelah fertilisasi.
Setelah seminggu lamanya, larva ikan
dipindahkan ke dalam akuarium. Selama
pemeliharaan, pakan yang diberikan adalah
pakan alami Artemia sp., cacing Tubifex sp. dan
pakan pellet yang diberikan secara bertahap.
Larva ikan mas dipelihara ± 1 bulan dan
dihitung kelangsungan hidupnya. Kecepatan dan
laju pertumbuhan ikan dihitung melalui
pengukuran panjang tubuh dan berat tubuh
masing-masing perlakuan yang dilakukan tiap 10
hari sekali.
Analisis ploidisasi
Analisis ploidisasi dilakukan melalui
penghitungan jumlah nukleolus ikan mas hasil
perlakuan poliploidisasi yang mempergunakan
pewarnaan perak nitrat. Jaringan yang
dipergunakan adalah jaringan insang, sirip pectoral
dan sirip ekor ikan mas hasil perlakuan
poliploidisasi dengan tahapan sebagai berikut:
sebagian jaringan diambil dan dikeringkan di atas
tissu. Kemudian jaringan dimasukkan dalam
petridish berisi larutan hipotonik (KCl 0,075 M)
dingin selama 90-100 menit. Selanjutnya jaringan
114
direndam dalam larutan fiksatif segar dan dingin
selama 60 menit. Tiap 30 menit sekali larutan
fiksatif diganti dengan yang baru (segar).
Jaringan diletakkan pada gelas obyek
cekung dan ditambahkan larutan asam asetat 50
% serta dicacah sampai terbentuk suspensi sel.
Suspensi sel ini selanjutnya bisa diteteskan
mempergunakan mikropippet ke atas gelas
obyek yang telah direndam dalam alkohol 70 %
dingin selama minimal 2 jam dan dipanaskan
pada suhu 45-50°C. Pewarnaan preparat
nukleolus dilakukan dengan pembercakan perak
nitrat di atas preparat sel, yaitu 2 tetes larutan A
(10 gram AgNO3 + 20 ml aquadest) dan 1 tetes
larutan B (2 gram gelatin + 50 ml aquadest
hangat + 50 ml gliserin). Kedua larutan
dicampur dan disebarkan secara merata di atas
preparat mempergunakan tusuk gigi. Kemudian,
preparat dimasukkan dalam box staining yang
suhunya diatur 45-50°C dan dibiarkan selama
20-30 menit atau sampai warna berubah kuning
kecoklatan.
Tahap akhir, preparat diambil dan dibilas
dengan air bersih serta dikeringanginkan
beberapa menit. Preparat dapat langsung diamati
jumlah nukleolusnya di bawah mikroskop
cahaya, pembesaran 25 x sampai 100 x.
Pengamatan perkembangan gonad
Pengamatan perkembangan gonad ikan
mas perlakuan poliploidisasi dilakukan dengan
cara melakukan pembedahan bagian tubuh ikan
mas yang telah berumur lebih kurang 4 bulan.
Kemudian, dilakukan pengamatan gonad ikan
secara visual (morfologi) dan difoto.
Parameter uji dan analisis data
Parameter uji adalah laju penetasan (HR),
kelangsungan hidup (SR), kecepatan
pertumbuhan relatif (h) dari pengukuran
panjang tubuh ikan mas, laju pertumbuhan
spesifik (SGR) dari pengukuran berat tubuh ikan
mas, perkembangan gonad dan analisis ploidisasi
dengan menghitung jumlah nukleolus (induksi
ploidi). Analisis data dilakukan secara statistik
dan deskriptif. Analisis statistik mempergunakan
analisis keragaman dengan uji F (ANOVA) dan
uji Beda Nyata Terkecil untuk mengetahui
perlakuan terbaik.
a
HR = x 100%
a+ b+ c
a : jumlah telur menetas normal (larva normal)
b : jumlah telur menetas cacat (larva cacat)
c : jumlah telur tidak menetas
 Akhmad Taufiq Mukti, Poliploidisasi Ikan Mas

Nt SGR 110 hari (%) 7,40 7,90 8,57

SR = x 100% ± 0,00 ± 0,00 ± 0,00
No
Nt : jumlah larva akhir pemeliharaan (ekor) Induksi ploidi (%) 100 70 60
No : jumlah larva awal pemeliharaan (ekor) ± 0,00 ± 7,07 ± 7,07
lt - lo Hasil ploidi (%) 100 61,07 25,67
h =
lo ± 0,00 ± 6,17 ± 3,03
lt : panjang tubuh ikan pada waktu tertentu (cm)
lo : panjang tubuh ikan pada waktu t=0 (cm) Laju penetasan
ln Wt - ln Wo Laju penetasan ikan mas kontrol (diploid)
SGR = x 100% (% Bw/hari) sebesar 25,94 ± 6,76 %, sedangkan triploid dan
hari
Wt : berat tubuh ikan pada waktu tertentu (gram) tetraploid masing-masing sebesar 22,63 ± 8,36
Wo : berat tubuh ikan pada waktu t=0 (gram) % dan 11,10 ± 8,60 %. Laju penetasan ikan mas
jumlah ikan poliploidi diploid berbeda sangat nyata dengan ikan mas
IP = x 100% triploid maupun tetraploid.
jumlah ikan sampel Hasil analisis statistik melalui uji Beda
I P : Induksi Ploidisasi Nyata Terkecil menunjukkan bahwa ikan mas
induksi ploidi x RHR diploid memiliki laju penetasan tertinggi dan
HP =
100 berbeda sangat nyata (P<0,01) dengan
H P : Hasil Ploidisasi tetraploid, sedangkan laju penetasan ikan mas
RHR : Laju Penetasan Relatif triploid tidak berbeda nyata dengan diploid
(P>0,05), seperti terlihat pada Gambar 1. Tetapi,
persentase larva cacat antara diploid dan triploid
menunjukkan perbedaan sangat nyata (P<0,01)
HASIL PENELITIAN (lihat Tabel 1).

30
Tabel 1. Data rerata hasil pengamatan ikan
mas (Cyprinus carpio L.) diploid, 25
triploid dan tetraploid.
20
HR (%)

15
Perlakuan Poliploidisasi
10
Parameter 2N 3N 4N 5

FR (%) 99,31 99,60 99,25 0

Diploid Triploid Tetraploid
± 0,83 ± 0,68 ± 1,09
Perlakuan Poliploidisasi
HR (%) 25,94 22,63 11,10
± 6,76 ± 8,36 ± 8,60 Gambar 1. Rerata laju penetasan telur ikan
mas (Cyprinus carpio L.) diploid,
Persentase cacat (%) 6,83 13,81 24,86 triploid dan tetraploid.
± 2,06 ± 4,67 ± 8,37
Kelangsungan hidup
SR (%) 75,52 52,64 55,04
± 7,97 ± 8,46 ± 8,15
Kelangsungan hidup ikan mas diploid
sebesar 75,52 ± 7,97 %, triploid sebesar
h 30 hari 3,51 4,42 5,38 52,64 ± 8,46 % dan tetraploid sebesar
± 0,08 ± 0,39 ± 0,12 55,04 ± 8,15 %. Hasil analisis statistik uji BNT
memperlihatkan, ikan mas diploid memiliki
h 110 hari 12,83 14,11 19,12 kelangsungan hidup tertinggi dan berbeda sangat
± 0,00 ± 0,00 ± 0,00
nyata (P<0,01) bila dibandingkan dengan
triploid dan tetraploid. Kelangsungan hidup ikan
SGR 30 hari (%) 15,98 18,53 19,87
± 0,17 ± 0,23 ± 0,10
mas triploid tidak berbeda nyata (P>0,05)
dengan ikan mas tetraploid.
115
 BIOSAIN, VOL. 1 NO. 1, April 2001

selama 30 dan 110 hari.

80
5
70
4.5
60
4
50 3.5
SR (%)
40 3
30 2.5
2
20
1.5 D iploid
10
1 Triploid
0 Tetraploid
0.5
D iploid Triploid Tetraploid
0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
Perlakuan Poliploidisasi
Hari ke-
Gambar 2. Rerata kelangsungan hidup ikan Gambar 4. Kecepatan pertumbuhan relatif
mas (Cyprinus carpio L.) diploid, ikan mas (Cyprinus carpio L.)
triploid dan tetraploid. diploid, triploid dan tetraploid
selama 110 hari.
Pertumbuhan
Ikan mas tetraploid memiliki kecepatan
pertumbuhan relatif dan laju pertumbuhan 20
spesifik lebih baik (tinggi), masing-masing 18
sebesar 5,38 dan 44,57 %, sedangkan ikan mas 16
triploid sebesar 4,42 dan 43,05 % dan diploid 14
sebesar 3,51 dan 39,97 %. Hal ini dapat dilihat SGR (%) 12
pada Gambar 3 dan 5. 10
Hasil analisis statistik menunjukkan 8
6
bahwa kecepatan pertumbuhan relatif dan laju
4
pertumbuhan spesifik ikan mas tetraploid 2
berbeda sangat nyata (P<0,01) dengan ikan mas 0 30 hari
diploid maupun triploid. Pada Gambar 4 dan 6 Diploid Triploid Tetraploid 110 hari
terlihat, kecepatan pertumbuhan relatif dan laju
pertumbuhan spesifik harian ikan mas tetraploid Perlakuan Poliploidisasi
juga cenderung lebih tinggi bila dibandingkan
dengan ikan mas diploid maupun triploid. Gambar 5. Laju pertumbuhan spesifik ikan
mas (Cyprinus carpio L.) diploid,
triploid dan tetraploid selama 30
dan 110 hari.
20 30 hari
Kecepatan pertumbuhan relatif

18 110 hari
16 100

14 90

12 80

10 70

8 60
SGR (%)

6 50

4 40

2 30 Diploid
0 20 Triploid
D iploid Triploid Tetraploid 10 Tetraploid

0
Perlakuan Poliploidisasi 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110

Hari ke-
Gambar 3. Kecepatan pertumbuhan relatif
ikan mas (Cyprinus carpio L.) Gambar 6. Laju pertumbuhan spesifik ikan
diploid, triploid dan tetraploid mas (Cyprinus carpio L.) diploid,
triploid dan tetraploid selama
116
 Akhmad Taufiq Mukti, Poliploidisasi Ikan Mas

110 hari. berkembang dengan baik atau dapat dikatakan

Analisis ploidisasi steril.
Analisis ploidisasi dari perlakuan kontrol
(diploid) menghasilkan induksi ploidi dan hasil PEMBAHASAN
ploidi masing-masing sebesar 100 % dan 100 %,
Perlakuan kejutan suhu panas pada telur 3 menit Laju penetasan
setelah fertilisasi telah menghasilkan induksi Laju penetasan telur ikan mas yang
triploid sebesar 70 % dengan hasil ploidi sebesar dipergunakan dalam penelitian ini sangat rendah,
61,07 %, sedangkan perlakuan kejutan suhu meskipun derajat pembuahannya (FR) cukup
panas pada telur 29 menit setelah fertilisasi tinggi (lihat Tabel 1). Umumnya persentase
menghasilkan induksi tetraploid sebesar 60 % penetasan ikan berkisar antara 50-80 % (Richter
dengan hasil ploidi sebesar 25,67 %. dan Rustidja, 1985). Rendahnya laju penetasan
Hasil analisis ploidisasi mempergunakan telur ikan mas ini dapat disebabkan oleh
metode penghitungan jumlah nukleolus dalam beberapa faktor, antara lain: kualitas telur dan
penelitian ini dapat dilihat pada Tabel 2. Level kualitas air media inkubasi (penetasan).
ploidisasi ditentukan berdasarkan jumlah Tipe telur ikan mas yang bersifat melekat
maksimum nukleoli yang ditemukan. Jumlah (adhesif) memungkinkan sebagai satu faktor
sampel ikan yang dipergunakan untuk kualitas telur yang menyebabkan rendahnya laju
masing-masing perlakuan adalah 50 ekor. Pada penetasan pada telur ikan mas. Sifat telur ikan
ikan diploid ditemukan 646 sel dengan rata-rata mas yang melekat, membutuhkan tempat
129 sel yang teramati. Ikan triploid ditemukan pelekatan atau substrat yang baik. Biasanya
584 sel dengan rata-rata 117 sel yang teramati, untuk ikan mas pelekatan telur yang baik dapat
sedangkan tetraploid ditemukan 559 sel dengan dilakukan di rerumputan dan akar-akar tanaman
rata-rata 112 sel yang teramati. air ataupun substrat buatan seperti kakaban
(ijuk). Blaxter (1969) menyatakan bahwa
Tabel 2. Distribusi jumlah dan frekuensi perbedaan substrat sebagai inkubasi dapat
nukleolus, induksi dan hasil ploidi berpengaruh terhadap perkembangan pertama
ikan mas ( Cyprinus carpio L. ) dan fisiologis keturunan. Telur ikan mas yang
diploid, triploid dan tetraploid. bersifat adhesif yaitu melekat pada substrat atau
antara telur yang satu dengan telur yang lain,
Perl Distribusi jumlah/frekuensi Induc Hasil
sering mengakibatkan telur-telur tersebut tidak
nukleolus Ploidi Ploidi dapat menetas karena difusi oksigen menjadi
(%) (%) berkurang (Sumantadinata, 1991). Kekurangan
(%) oksigen merupakan salah satu penyebab adanya
kematian pada telur atau embrio yang sedang
1n 2n 3n 4n
berkembang (Woynarovich dan Horvath, 1980).
Homogenitas perkembangan telur adalah
2N 42 87 - - 100 100
32,62 67,38 salah satu faktor kualitas telur yang merupakan
aspek tersendiri dalam menunjang keberhasilan
3N 41 44 35 - 70 61,07 penetasan pada telur ikan mas. Gustiano dkk.
35,05 35,49 29,46
(1987) melaporkan bahwa adanya variasi nilai
4N 32 49 2 27 60 25,67 laju penetasan disebabkan oleh perkembangan
29,31 44,10 2,52 24,07
telur yang tidak seragam kematangan gonadnya.
Fase gastrula merupakan fase yang rawan pada
perkembangan telur, sehingga kematian tertinggi
Perkembangan gonad akan terjadi pada fase ini. Blaxter (1969)
Perkembangan gonad ikan mas diploid menyatakan, pengaruh penting pada
tidak jauh berbeda dengan perkembangan gonad kelangsungan hidup keturunan pada tingkat
ikan mas tetraploid. Ikan mas diploid dan individu dan spesies adalah kondisi inkubasi,
tetraploid sama-sama mengalami perkembangan fekunditas dan ukuran telur.
gonad secara normal. Hal ini berbeda dengan Pembelahan sel memerlukan suasana
ikan mas triploid yang menunjukkan bahwa lingkungan yang optimum. Banyak faktor yang
jaringan gonad di dalam rongga tubuhnya tidak mempengaruhi pembelahan, tetapi yang penting
adalah suhu dan pH medium (Yatim, 1990 dan

117
 BIOSAIN, VOL. 1 NO. 1, April 2001
Effendie, 1997). Suhu untuk penetasan telur
ikan mas yang ideal adalah berkisar antara
20-25°C (Landau, 1992), sedangkan Blaxter
(1969) menyatakan, suhu 14-20°C dan pH
7,9-9,6 merupakan kondisi optimum untuk
penetasan telur.
Suhu air inkubasi mempengaruhi reaksi
enzimatis di dalam telur yang berperanan dalam
melemahkan lapisan chorion telur ikan. Lemah
dan pecahnya chorion akan mengakibatkan telur
menetas dan embrio keluar dari cangkangnya
menjadi larva. Jika embrio dalam chorion (zona
radiata dan selaput jelly) mulai menetas, suatu
enzim dihasilkan di dalam daerah kepala ventral.
Enzim penetasan ini dilepaskan di dalam ruang
perivitelline dan melemahkan chorion sampai
akhirnya lapisan chorion ini pecah (Richter dan
Rustidja, 1985).
Laju penetasan telur ikan mas triploid
maupun tetraploid jauh lebih rendah
dibandingkan dengan ikan mas diploid. Hal ini
dimungkinkan akibat pengaruh perlakuan
kejutan suhu panas yang diberikan pada telur
dalam proses poliploidisasi. Tave (1993)
mengemukakan bahwa mortalitas yang terjadi
kemungkinan disebabkan oleh beberapa macam
efek merugikan dari perlakuan kejutan pada
sitoplasma telur. Perlakuan kejutan suhu dapat
mengakibatkan kerusakan pada benang-benang
spindel yang terbentuk saat proses pembelahan
sel dalam telur. Kejutan suhu dan tekanan
mengakibatkan rusaknya mikrotubulus yang
membentuk spindel selama pembelahan (Dustin,
1977 dalam Gervai et al., 1980).
Rieder dan Bajer (1978) dalam Bidwell et
al. (1985) berpendapat bahwa kejutan panas
menyebabkan depolimerisasi pada polimer
tubulin dalam mikrotubulus yang essensial
dalam pembentukan spindel. Pandian dan
Varadaraj (1990) menyatakan, beberapa telur
yang diberi kejutan panas mati sebelum atau
sesaat setelah menetas. Percobaan triploidisasi
pada ikan salmon salar memperlihatkan
kematian selama percobaan yang terjadi pada
saat penetasan telur dan pemeliharaan
(Johnstone, 1985).
Rendahnya laju penetasan pada ikan mas
triploid dan tetraploid ini juga disebabkan
tingginya larva cacat yang dihasilkan setelah
proses penetasan (lihat Tabel 1). Rieder dan
Bajer (1978) dalam Bidwell et al. (1985)
mengemukakan bahwa larva cacat dapat
disebabkan oleh lapisan terluar dari telur
(chorion) yang mengalami pengerasan, sehingga
118
embrio akan sulit untuk keluar. Setelah chorion
dapat dipecahkan, maka embrio akan lahir
dengan keadaan tubuh yang cacat. Pengerasan
chorion ini akibat terganggunya aktivitas enzim
penetasan yang disebabkan oleh suhu air media
inkubasi terlalu tinggi.
Pemberian kejutan panas pada telur dapat
pula menyebabkan individu-individu yang
dihasilkan memperlihatkan bentuk tubuh yang
abnormal seperti ekor yang pendek, tidak
berekor atau memiliki ekor yang bengkok (Solar
et al., 1984) dan berkromosom haploid (Gervai et
al., 1980). Embrio haploid akan mati selama
penetasan dan hanya sebagian kecil saja yaitu
0,15-0,2 % yang dapat bertahan hidup (Purdom,
1983).
Larva cacat kemungkinan disebabkan
karena adanya gangguan pada saat pembelahan
mitosis pertama yang mengakibatkan hilangnya
beberapa kromosom dan mereduksi
penggandaan kromosom dalam siklus sel
berikutnya. Hal ini mengakibatkan terjadinya
ketidakseimbangan jumlah kromosom di dalam
tubuh dan juga hilangnya beberapa informasi
genetik dalam kromosom yang hilang ataupun
tereduksi tersebut (Alridge et al., 1989).
Kelangsungan hidup
Kelangsungan hidup ikan mas triploid
dan tetraploid lebih rendah apabila
dibandingkan dengan ikan mas diploid. Hal ini
kemungkinan besar akibat rendahnya
kemampuan ikan-ikan poliploid seperti triploid
dan tetraploid dalam menangkap oksigen
terlarut dalam air. Kemampuan banding oxygen
atau pengikatan oksigen terlarut ikan-ikan
triploid dan tetraploid sangat rendah bila
dibandingkan dengan ikan normal (Rustidja,
komunikasi personal).
Ikan-ikan poliploid seperti triploid dan
tetraploid memiliki ukuran sel yang besar dan
jumlah sel yang jauh lebih banyak bila
dibandingkan dengan ikan diploid, dikarenakan
pembelahan sel yang terjadi di dalam tubuh ikan
poliploid sangat tinggi dan hal ini diduga
menyebabkan proses metabolisme di dalam
tubuh ikan juga akan berjalan lebih cepat,
sehingga sangat diperlukan jumlah atau kadar
oksigen terlarut yang cukup besar. Padahal,
apabila kemampuan banding oxygen ikan terlalu
rendah, maka jumlah/kadar oksigen yang
diserap jauh tidak seimbang dengan
jumlah/kadar oksigen terlarut yang dibutuhkan
untuk memperlancar proses metabolisme
 Akhmad Taufiq Mukti, Poliploidisasi Ikan Mas
tubuhnya. Ditambah lagi dengan adanya
persaingan antar individu untuk mengkonsumsi
oksigen terlarut dalam air media pemeliharaan
yang menyebabkan terbatasnya ketersediaan
oksigen terlarut. Akibatnya, kemampuan
ikan-ikan poliploid (triploid dan tetraploid)
untuk bertahan hidup sangat rendah.
Kelangsungan hidup ikan poliploid pada
fase larva pertama kali makan umumnya berbeda
dengan diploid, yaitu lebih rendah bila
dibandingkan dengan diploid (Thorgaard, 1992;
Purdom, 1993; Santiago et al., 1993). Thorgaard
(1983) melaporkan bahwa zebrafish tetraploid
terlihat sedikit dan tidak ada yang tahan hidup
melebihi larva fase kuning telur. Induksi
tetraploid pada perch (Perca flavescens)
menghasilkan mortalitas yang sangat tinggi
ketika larva berumur 7 hari (Cassani et al., 1990
dan Malison et al., 1993).
Penelitian pada rainbow trout hybrid
tetraploid yang dilakukan oleh Chourrout et al.
(1988) dan hybrid triploid oleh Chourrout dan
Nakayama (1987) memperlihatkan bahwa
generasi kedua rainbow trout tetraploid yang
diproduksi dari persilangan induk tetraploid
memiliki kelangsungan hidup yang tinggi.
Triploid yang dihasilkan dari persilangan betina
tetraploid dan jantan diploid menghasilkan juga
kelangsungan hidup larva yang lebih baik bila
dibandingkan dengan triploid yang dihasilkan
dari perlakuan penahanan peloncatan polar body
II (Thorgaard, 1992).
Pertumbuhan
Hasil penelitian ini memperlihatkan
bahwa ikan mas tetraploid memiliki
pertumbuhan lebih tinggi dibandingkan dengan
ikan mas triploid terutama diploid (selama 30
dan 110 hari). Hal ini diduga karena ikan
tetraploid memiliki ukuran dan isi nukleus serta
sel jauh lebih besar bila dibandingkan dengan
diploid atau triploid. Triploid sendiri mempunyai
ukuran nukleus dan sel yang lebih besar
dibandingkan diploid, sehingga laju
pertumbuhannya lebih tinggi (Fankhauser, 1945
dalam Gold, 1979; Ger et al., 1993; Tave, 1993).
Tave (1993) menyatakan bahwa ukuran
sel ikan triploid lebih besar dibandingkan
dengan diploid. Nukleus berisi 33 persen lebih
allel untuk pertumbuhan dan energi yang
dipergunakan untuk pertumbuhan produksi
gamet berkurang atau terhambat. Oleh karena
itu, diduga pula bahwa ikan mas tetraploid juga
memiliki ukuran dan isi nukleus serta sel lebih
besar bila dibandingkan dengan triploid, terlebih
lagi dengan diploid. Semakin banyak jumlah sel
menyebabkan volume sel dalam tubuh
meningkat, sehingga ukuran tubuh atau
pertumbuhan ikan mas tetraploid semakin
tinggi. Hal ini mengacu pada pendapat
Needham, 1964 dalam Hoar dan Randall (1969),
bahwa pertumbuhan organisme juga merupakan
proses perbanyakan jumlah sel dan peningkatan
volume sel.
Suryo (1990) menjelaskan bahwa individu
tetraploid merupakan individu yang fertil dan
mempunyai laju pertumbuhan yang lebih baik
bila dibandingkan dengan spesies diploid.
Individu tetraploid mempunyai kemampuan di
dalam pembelahan sel yang jauh lebih tinggi bila
dibandingkan dengan ikan normal diploid,
sehingga ikan tetraploid akan mempunyai jumlah
sel yang lebih banyak jika dibandingkan dengan
ikan normal.
Ikan mas triploid belum menampakkan
pertumbuhan yang maksimal. Ikan triploid akan
mengalami pertumbuhan yang tinggi terutama
pada saat periode perkembangan dan atau
kematangan gonad maupun masa pemijahan,
karena energi yang diperlukan untuk
metabolisme perkembangan gonad ketika
musim pemijahan dipergunakan untuk
pertumbuhan somatik atau tubuh. Efek
konsumsi energi dalam proses reproduksi akan
menentukan perbedaan laju pertumbuhan antara
triploid dan diploid (Jiang et al., 1993).
Perkembangan gonad
Gonad ikan terletak di bagian atas rongga
tubuh, memanjang pada vertebrae rongga tubuh
hingga berakhir pada lubang genital. Tidak
berkembangnya gonad ikan mas triploid
dikarenakan kromosom yang berjumlah 3 set
(ganjil), selama pembelahan meiosis tidak dapat
melakukan perpasangan dengan kromosom
homolognya. Pada akhirnya gonad tidak
berkembang lebih lanjut dan ikan triploid akan
menjadi (Thorgaard, 1983; Chingjiang et al.,
1986; Goodenough, 1988; Rustidja, 1991).
Kegagalan perkembangan gonad kemungkinan
pada gilirannya mencegah munculnya efek-efek
sampingan yang tidak diinginkan pada
kematangan kelamin, seperti kualitas daging
yang rendah, pertumbuhan lambat dan kematian
tinggi (Thorgaard, 1983).
119
 BIOSAIN, VOL. 1 NO. 1, April 2001
Poliploidisasi
Ploidisasi melalui penghitungan jumlah
nukleolus dengan perlakuan kejutan suhu 40°C
selama 1,5 menit yang menghasilkan triploid
sebesar 70 % dan tetraploid sebesar 60 %
menunjukkan bahwa perlakuan telah efektif
untuk menghasilkan poliploidisasi pada ikan
mas, akan tetapi masih belum optimal.
Keberhasilan poliploidisasi sangat dipengaruhi
oleh suhu kejutan, waktu kejutan dan lama
kejutan, seperti disampaikan oleh Don dan
Avtalion (1986) dan tergantung juga pada umur
dan kualitas (kematangan) telur (Pandian dan
Varadaraj, 1990).
Proses triploidisasi pada ikan prinsipnya
adalah mencegah atau menahan terjadinya
peloncatan polar body II dari telur atau
pembelahan meiosis II, sedangkan tetraploidisasi
adalah perlakuan kejutan untuk mencegah
pembelahan pertama (first cleavage) atau sebelum
pembelahan mitosis I. Kejutan sebaiknya
dipergunakan setelah kromosom bereplikasi dan
nukleus zigot kira-kira terbagi menjadi dua.
(Bidwell et al., 1985; Johnstone, 1993; Tave,
1993; Shepperd dan Bromage, 1996). Periode
dengan sensitif tinggi untuk menghasilkan ikan
tetraploid menggunakan perlakuan kejutan
panas dicapai pada waktu menutupnya konjugasi
pronuklei betina dan jantan serta lysisnya
membran nuklear yang mencapai metafase
mitosis I (Minrong et al., 1993).
Peloncatan polar body II pada beberapa
spesies ikan terjadi antara 3-7 menit setelah
fertilisasi (Carman et al., 1991). Komen (1990)
mengatakan bahwa peloncatan polar body II
terjadi pada 5 menit setelah fertilisasi, sedangkan
proses mitosis terjadi pada 30 menit setelah
fertilisasi.
Nukleolus
Hasil pengamatan nukleolus
menunjukkan perbedaan pewarnaan antara
nukleoli (anak inti) dengan nukleus (inti).
Nukleus akan tampak berwarna kekuningan atau
kecoklatan, sedangkan nukleoli berwarna hitam.
Pewarnaan perak nitrat akan memperlihatkan
nukleolus berwarna hitam dalam nukleus yang
berwarna kuning (Phillips et al., 1986).
Perbedaan warna ini merupakan ciri khas dari
pewarna perak nitrat (AgNO3), sehingga banyak
peneliti yang menyatakan bahwa penentuan level
ploidi mempergunakan pewarnaan perak nitrat
(silver staining) sangat mudah, sederhana, cepat
120
dan dapat dipergunakan sebagai standar untuk
beberapa spesies ikan.
Hasil analisis ploidisasi ikan mas
perlakuan poliploidisasi pada penelitian ini
memperlihatkan adanya variasi jumlah
(frekuensi) nukleoli per sel yang ada dalam
masing-masing perlakuan (Tabel 2). Variasi
jumlah nukleoli yang ditemukan ada
hubungannya dengan kemampuan pewarna
AgNO3 yang hanya mewarnai nukleoli (dalam
hal ini NORs, nucleoli organizer regions) yang
sedang aktif melakukan sintesis ribosom dan
atau protein sesaat sebelum dilakukan fiksasi
(Gold, 1984 dan Hubbel, 1985 dalam Carman
dkk., 1997).
Carman et al. (1992) mengatakan bahwa
variasi yang terjadi pada jumlah maksimum
kemungkinan disebabkan fusi dan fisi dari
bentuk nukleoli tunggal atau tiga, karena
beberapa proses fisiologis yang terjadi selama
siklus sel. Variasi ini adalah merupakan faktor
sulit pada interpretasi level ploidi pada
pengamatan individu-individu yang digunakan.
Variasi jumlah maksimum nukleoli per sel pada
common carp (Cyprinus carpio) diploid dan
triploid berhubungan dengan umurnya.
Hasil yang diperoleh memperlihatkan
bahwa ikan diploid memiliki 1 dan atau 2
nukleoli dalam setiap selnya, triploid memiliki 1,
2 dan atau 3 nukleoli dan tetraploid memiliki 1,
2, 3 dan atau 4 nukleoli. Phillips et al. (1986)
mengemukakan, individu haploid mempunyai 1
nukleolus per sel, diploid mempunyai 1 atau 2
nukleoli per sel dan triploid mempunyai 1, 2 atau
3 nukleoli per sel.
Setiap satu set kromosom haploid
mengandung satu kromosom dengan satu NOR,
sedangkan inti diploid normal mengandung dua
nucleoli (Fankhauser dan Humphrey, 1943)
dalam Thorgaard, 1983; Oshiro dan Carman,
1991). Carman dkk. (1997) menunjukkan hasil
melalui preparasi NORs mempergunakan perak
nitrat, ditemukan 1, 2, 3 atau 4 kromosom yang
mempunyai NOR, NORs bearing chromosome (data
tidak dipublikasikan). NOR merupakan daerah
dimana terdapat gen-gen yang mengatur rRNA
dan memberikan bentuk pada nukleolus. Daerah
ini terletak pada daerah penyempitan kedua
(secondary contriction) yang mengandung gen kode
18 S dan 28 S rRNA (Zwarzacher dan Wachtler,
1983 dan Kimball, 1994).
 Akhmad Taufiq Mukti, Poliploidisasi Ikan Mas
KESIMPULAN DAN SARAN
Kesimpulan
Hasil penelitian ini dapat disimpulkan:
1. Perlakuan kejutan suhu panas berpengaruh
secara nyata terhadap laju penetasan telur ikan
mas hasil poliploidisasi.
2. Perlakuan kejutan suhu panas berpengaruh
secara nyata terhadap kelangsungan hidup
ikan mas hasil poliploidisasi.
3. Ikan mas perlakuan kejutan suhu panas
memiliki kecepatan pertumbuhan relatif dan
laju pertumbuhan spesifik yang lebih
baik/tinggi dibandingkan ikan mas normal
(diploid). Ikan mas tetraploid memiliki
pertumbuhan jauh lebih tinggi dibandingkan
ikan mas diploid dan triploid.
4. Perlakuan kejutan suhu panas berpengaruh
secara nyata terhadap perkembangan gonad
ikan mas. Ikan mas triploid tidak
memperlihatkan perkembangan gonad yang
baik (steril) bila dibandingkan dengan ikan
mas diploid dan tetraploid.
5. Perlakuan kajutan suhu panas menghasilkan
induksi triploid dan tetraploid masing-masing
sebesar 70 % dan 60 %.
Saran
Perlakuan kejutan suhu panas dapat
dimanfaatkan secara luas untuk poliploidisasi
ikan mas dengan perlakuan kejutan suhu 40°C
selama 1,5 menit.
UCAPAN TERIMA KASIH
Penulis haturkan terima kasih dengan
tulus kepada kedua orang tua dan keluarga, Dr.
Ir. Rustidja, MS., Prof. Drs. Sutiman Bambang
Sumitro, SU., DSc., Dr. Ir. Mohammad Sasmito
Djati, MS., Pimpinan Proyek Beasiswa Unggulan
URGE Batch V 1998/1999, Ir. Kartojo
Ardiwinoto beserta keluarga dan semua pihak
yang telah membantu penulis dalam
menyelesaikan penelitian dan laporan tesis.
DAFTAR PUSTAKA
Alridge, F. J., Marston, R. Q. dan Shireman, J.
V. (1989) Induced Triploids and
Tetraploids in Bighead Carp,
Hypophthalmichthys nobilis. Verified by
Multi-Embryo Cytofluorometric
Analysis. Aquaculture, 87: 121-131.
Bidwell, C. A., Chrisman, C. L. dan Libey, G. S.
(1986) Polyploidy Induced by Heat
Shock in Channel Catfish. Aquaculture, 57:
362.
Blaxter, J. H. S. (1969) Development: Eggs and
Larvae. In Fish Physiology. Volume III
(Eds. W. S. Hoar dan J. H. Randall).
Academic Press Inc., New York, USA.
Carman, O. (1992) Chromosome Set Manipulation in
Some Warmwater Fish. Doctoral Thesis,
Tokyo University of Fisheries. 131 p.
Carman, O., Alimuddin, Sastrawibawa, S. dan
Arfah, H. (1997) Determinasi Kromosom
dan Nukleoli Kelamin pada Ikan Nila
Merah (Oreochromis sp.). Zuriat, Volume 8,
Nomor 2. Hal: 83-89.
Carman, O., Oshiro, T. dan Takashima, F.
(1991) Estimation of Effective Condition
for Induction of Triploidy in Goldfish,
Carassius auratus Linnaeus. Journal of The
Tokyo University of Fisheries, Volume 78,
Nomor 2. pp. 127-135.
Carman, O., Oshiro, T. dan Takashima, F.
(1992) Variation in The Maximum
Number of Nucleoli in Diploid and
Triploid Common Carp. Nippon Suisan
Gakkaishi, 58 (12) Formerly Bull. Japan. Soc.
Sci. Fish. pp. 2303-2309.
Cassani, J. R., Maloney, D. R., Allaire, H. P. dan
Kerby, J. H. (1990) Problems Associated
with Tetraploid Induction and Survival in
Grass Carp, Ctenopharyngodon idella.
Aquaculture, 88: 273-284.
Chingjiang, W., Yuzhen, Y. dan Rongde, C.
(1986) Genome Manipulation in Carp
(Cyprinus carpio L.). Aquaculture, 54: 57-61.
Don, J. dan. Avtalion, R. R. (1986) The
Induction of Triploidy in Oreochromis
aureus by Heat Shock. Theor. Appl. Genet.,
72: 186-192.
Effendie, M. I. (1997) Biologi Perikanan. Yayasan
Pustaka Nusatama, Yogyakarta. 163 hal.
Ger, G. C., Zan, Y. L., Sun, S. S. dan Ju, B. S.
(1993) Inducing Polyploidy in Loach.
Aquaculture, 111: 316.
Gervei, J., Marian, T., Krasznai, Z., Nagy, A.
dan Csanyi, V. (1980) Occurrence of
Aneuploidy in Radiation Gynogenesis of Carp,
Cyprinus carpio Linn. Laboratory of
Behaviour Genetics, Eutuos University,
Hungary.
121
 BIOSAIN, VOL. 1 NO. 1, April 2001
Gold, J. R. (1979) Cytogenetics. In Fish
Physiology, Volume VIII (Eds. W. S. Hoar,
D. J. Randall dan J. R. Brett), pp. 353-
405. Academic Press Inc., New York,
USA.
Goodenough, U (1988) Genetika. Erlangga,
Jakarta. 144 hal.
Gustiano, R., Hardjamulia, A. dan Subagyo
(1987) Lama Waktu Radiasi Sinar Ultra
Violet Pada Sperma Ikan Mas (Cyprinus
carpio L.). Bulletin Penelitian Perikanan
Darat, Volume 6, Nomor 2. Hal. 38-41.
Hoar, W. S., Randall, D. J. dan Brett, J. R. (1979)
Fish Physiology, Volume VIII. Academic
Press Inc., New York, USA. 477 p.
Jiang, W., Li, G., Xu, G., Lin, Y. dan Qing, N.
(1993) Growth of The Induced Triploid
Pearl Oyster, Pinctada martensii D.
Aquaculture, 111: 245-253.
Johnstone, R. (1985) Induction of Triploidy in
Atlantic Salmon by Heat Shock.
Aquaculture, 49: 133-139.
Johnstone, R. (1993) Optimisation of Ploidy
Manipulation Procedures. In Genetics in
Aquaculture and Fisheries Management (Eds.
D. Penman, N. Roongratri dan B.
McAndrew), 164 p. AADCP Workshop
Proceedings, University of Stirling,
Scotland.
Kimball, J. (1994) Biologi. Terjemahan S. S.
Tjitrosomo dan N. Sugiri, Edisi V, Jilid I.
Penerbit Erlangga, Jakarta. 333 hal.
Komen, J. (1990) Clones of Common Carp (Cyprinus
carpio L.). New Perspectives in Fish Research.
PhD Thesis, Agricultural University
Wageningen, Netherlands. pp. 1-44.
Landau, M. (1992) Introduction to Aquaculture.
John Wiley & Sons, New York, USA. pp.
210-226.
Mair, G. C. (1993) Chromosome-Set
Manipulation in Tilapia-Techniques,
Problems and Prospects. Aquaculture, 111:
227-244.
Malison, J. A., Kayes, T. B., Held, J. A., Barry, T.
P. dan Amundson, C. H. (1993)
Manipulation of Ploidy in Yellow Perch
(Perca flavescens) by Heat Shock,
Hydrostatic Pressure Shock and
Spermatozoa Inactivation. Aquaculture,
110: 229-242.
Minrong, C., Xinqi, Y., Xiaomu, Y., Hanqin, L.,
Yonglan, Y., Kang, Y., Peilin, L. dan
Hongxi, C. (1993) Heterogenetic
122
Tetraploids from A Cross of Japanese
Phytophagous Crucian Carp Females
(Carassius auratus cuvieri) and Red
Crucian Carp Males (Carassius auratus red
var.). Aquaculture, 111: 317-318.
Oshiro, T. dan Carman, O. (1991) Effect of
Triploidization on The Number of Nucleolar
Organizer Region and Nucleoli in Carp.
Improvement of Inland Aquaculture. Nodai
Centre for International Programs,
Tokyo University of Aquaculture. pp. 83-
84.
Pandian, T. J. dan Varadaraj, K. (1988)
Techniques for Producing All Male and
All Triploid Oreochromis mossambicus. In
The Second International Symposium on Tilapia
in Aquaculture (Eds. R. S. V. Pullin, T.
Bhukaswan, K. Tongthai dan J. Maclean),
pp. 243-249. ICLARM, Conference
Proceedings, 15: 623 p. Departement of
Fisheries, Bangkok, Thailand and
International Center for Living Aquatic
Resources Management, Manila,
Philippines.
Pandian, T. J. dan Varadaraj, K. (1990)
Techniques to Produce 100 % Male
Tilapia. NAGA, The ICLARM Quarterly,
Volume 13, Nomor 34. pp. 3-5.
Phillips, R. B., Zajicek, K. D., Ihssen, P. E. dan
Johnson, O. (1986) Application of Silver
Staining to The Identification of Triploid
Fish Cells. Aquaculture, 54: 313-319.
Purdom, C. E. (1983) Genetic Engineering by
The Manipulation of Chromosomes.
Aquaculture, 33: 287-300.
Purdom, C. E. (1993) Genetics and Fish Breeding.
Chapman & Hall, London. 277 p.
Richter, C. J. J. dan Rustidja (1985) Pengantar
Ilmu Reproduksi Ikan. Nuffic/
Unibraw/Luw/Fish, Malang. 83 hal.
Rustidja (1991) Aplikasi Manipulasi Kromosom
pada Program Pembenihan Ikan. Makalah
dalam Konggres Ilmu Pengetahuan
Nasional V, Jakarta. 23 hal.
Santiago, L. P., Penman, D. J., Myers, J., Powell,
S., Roongratri, N., Suwannarak, C. dan
Johnstone, R. (1993) Triploidy Induction
in Tilapia (Oreochromis niloticus L.) Using
Nitrous Oxide. In Genetics in Aquaculture
and Fisheries Management (Eds. D. Penman,
N. Roongratri dan B. McAndrew), 164 p.
AADCP Workshop Proceedings,
University of Stirling, Scotland.
 Akhmad Taufiq Mukti, Poliploidisasi Ikan Mas

Shepherd, C. J. dan Bromage, N. R. (1996)

Intensive Fish Farming. Great Britain by
Hartnolls Ltd. Bodman, Cornwall. 403 p.
Solar, I. I., Donaldson, E. M. dan Hunter, G. A.
(1984) Induction of Triploidy in Rainbow
Trout (Salmo Gairdneri Richardson) by
Heat Shock and Investigation of Early
Growth. Aquaculture, 42: 57-67.
Sumantadinata, K. (1991) Teknologi Produksi Benih
Unggul Ikan Mas (Cyprinus carpio L.).
Fenotip Generasi Pertama Beberapa Strain
Ikan Mas Hasil Pemurnian dengan Metode
Gynogenesis. Fakultas Perikanan, Institut
Pertanian Bogor, Bogor. 47 hal.
Suryo (1990) Sitogenetika. Gajah Mada University
Press, Yogyakarta. 442 hal.
Takai, A. dan Ojima, Y. (1982) The Assigment
of Nucleolar Organizer Region in The
Chromosome of The Carp The Funa and
Their Hybrids (Cyprinidae, Pisces).
Proceeding Japan Academic Series B., 58:
303-306.
Tave, D. (1993) Genetics for Fish Hatchery
Managers. Avi. Publ. Co. Inc., Wesport,
Connecticut. 368 p.
Thorgaard, G. H. (1983) Chromosome Set
Manipulation and Sex Control in Fish. In
Fish Physiology, Volume IX, Part B (Eds.
W. S. Hoar, D. J. Randall dan E. M.
Donaldson), pp. 405-434. Academic
Press Inc., New York, USA.
Thorgaard, G. H. (1992) Application of Genetic
Technologies to Rainbow Trout.
Aquaculture, 100: 85-97.
Woynarovich, E. dan Horvath, L. (1980) The
Artificial Propagation of Warmwater Finfishes.
A Manual for Extension, FAO. 185 p.
Yamazaki, F. (1983) Sex Control and
Manipulation in Fish. Aquaculture, 33:
329-354.
Yatim, W. (1990) Reproduksi dan Embryologi.
Penerbit Tarsito, Bandung. 330 hal.
Zchwarzacher, H. G. dan Wachtler (1983)
Nucleolar Organizer Region and
Nucleolus. Hum. Gen., 63: 87-89.

123