Uji Biuret

Biuret Test
Maya Farinda
Mayafarinda.bio20@fkip.unsyiah.ac.id
Abstrak
Uji biuret adalah uji kimia yang digunakan untuk mendeteksi keberadaan ikatan peptida dan
ikatan peptida akan membentuk kompleks berwarna dalam larutan basa. Biuret akan memberikan
warna ungu bila direaksikan dengan larutan basa kuat dan diteteskan sedikit larutan tembaga sulfat
encer. Warna ungu disebabkan karena albumin megandung protein, tersusun asam amino akan
membentuk ikatan peptida. Biuret juga merupakan reagen campuran antara NaOH dan CuSO 4 yang
digunakan untuk menguji adanya kandungan protein. Pratikum ini bertujuan untuk menentukan
kandungan larutan protein, juga untuk mengetahui adanya ikatan peptida pada sampel dengan
metode yang digunakan dengan cara observasi dan pengamatan secara langsung. Hasil yang
diperoleh reaksi berupa warna ungu pada larutan yang menunjukkan adanya protein.
Kata kunci: uji biuret, protein, asam amino
Abstract
The biuret test is a chemical test used to detect of peptide bonds and peptide bons will form
colored complexes in alkaline solutions. Biuret will give a purple color when reacted with a strong
alkaline solution and drop a little dilute copper sulfate solution. The purple color is due the fact
that albumin contains protein, which is composed of amino acids to form peptide bonds. Biuret is
also a mixed reagent between NaOH and CuSO 4 which is used to the presence of protein content.
The practicum aims to determine the content of the protein solution, as well as to determine the
presence of peptide bonds in the sample by the method used by direct observation.
Keywords: biuret, protein, amino acid test

1
Maya Farinda : Uji Benedict
Pendahuluan
Protein merupakan sumber asam amino
yang mengandung unsur-unsur C, H, O, N
yang tidak dimiliki oleh lemak dan
karbohidrat. Protein merupakan komponen
yang banyak terdapat pada sel tanaman dan
hewan. Protein merupakan sumber gizi yang
utama yaitu sebagai sumber amino, disamping
berperan sebagai sumber gizi protein dari
sumber yang berbeda memliki sifat fungsional
yang berpengaruh pada karakteristik produk
pangan (Qalsum, 2015, p.171).
Protein merupakan komponen makro
molekul utama yang dibutuhkan makhluk
hidup. Fungsi protein lebih di utamakan untuk
sintesis protein-protein baru sesuai kebutuhan
tubuh. Asam amino dan peptida yang
terbentuk dari pencernaan protein alami akan
di absorbs dan dianbolisme di berbagai
jaringan dan organ sebagai protein tubuh
(Susanti, 2016, p.99).
Uji Biuret digunakan untuk uji protein,
karena uji dapat mendeteksi adanya ikatan
peptide yang diperoleh hasil reaksi berupa
warna ungu pada larutan yang menunjukkan
adanya protein. Hal ini terjadi karena ion Cu 2+
(dari pereaksi biuret) dalam suasana basa
bereaksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan
pepetida yang menyusun protein
memebentuk senyawa kompleks berwarna
ungu (Ariza, 2016, p.93).
Protein adalah zat makanan yang
mengandung nitrogen yang merupakan factor
prnting untuk fungsi tubuh. Protein
merupakan komponen terbesar setelah air,
diperkirakan sekitar 50% berat kering sel
dalam jaringan hati dan daging berupa
protein. Fungsi utama mengkonsumsi protein
adalah untuk memenuhi kebutuhan nitrogen
dan asam amino, untuk sisntesis protein tubuh
dan substansi lain yang mengandung nitrogen
(Dwi, 2016, p.143-144).
Suatu protein bila dihidrolisis dengan
asam atau basa kuat, maka asam amino unit
2
penyusunnya akan dibebaskan dari ikatan
kovalen yang menghubungkan molukel-
molekul ini menjadi rantai. Ssmua asam
amino (20 buah) yang ditemukan pada protein
mempunyai ciri sama, gugus karboksil dan
gugus amino diikat pada atom karbon yang
sama. Asam amino digolongkan menjadi 4
golongan: 1. Golongan asam amino dengan
gugus R nonpolar atau hidrofobik 2. Golongan
asam amino dengan gugus R polar tetapi tidak
bermuatan 3. Golongna asam amino dengan
gugus R bermuatan negatif 4. Golongan
asam amino dengan gugus R bermuatan
positif (Khothibul, 2017, p.8-10).
Uji Biuret digunakan untuk uji protein,
karena uji dapat mendeteksi adanya ikatan
peptide yang diperoleh hasil reaksi berupa
warna ungu pada larutan yang menunjukkan
adanya protein. Hal ini terjadi karena ion
Cu2+ (dari pereaksi biuret) dalam suasana
basa bereaksi dengan polipeptida atau ikatan-
ikatan pepetida yang menyusun protein
memebentuk
senyawa kompleks berwarna ungu.
Metode/Cara Kerja
Waktu dan Tempat
Praktikum dilakukan pada tanggal 19
April 2021 di Laboratorium Program Studi
Pendidikan Biologi Fakultas Keguruan dan
Ilmu Pendidikan Universitas Syiah Kuala
Darussalam Banda Aceh.
Target/Objek/Populasi/Sampel
Pratikum ini memiliki target yaitu dapat
mengetahui adanya ikatan peptida pada
sampel. Objek yang diamati adalah uji
kualitatif protein dan asam amino. Sampel
yang digunakan dalam pratikum ini ialah
NaOH 10%, CuSO4 0,1%, kristal urea, dan
larutan albumin telur 2%.
Prosedur
Cara kerja yang dilakukan pertama
pada praktikum kali ini adalah di siapkan 1
Maya Farinda : Uji Benedict
buah tabung reaksi yang pada tabung
dimasukkan 2 mL larutan protein (larutan
albumin 2%) lalu ditambahkan 2 mL larutan
NaOH 10%, dan 5-20 tetes larutan CuSO 4
0,1% dicampurkan dan amati warna pada
larutan. Selanjutnya panaskan sedikit urea
didalam tabung reaksi diatas api kecil hingga
cair dan mendidih lalu larutkan isi tabung
tersebut dengan 1 mL air.
Data, Instrumen, dan Teknik Pengumpulan
Data
Data yang diperoleh adalah data
kuantitatif berupa perubahan warna yang
terdapat didalam larutan albumin yang telah
ditambahkan larutan NaOH dan CuSO 4.
Teknik pengumpulan data yang dilakukan
adalah dengan melakukan proses pengamatan
secara langsung.
Teknik Analisis Data
Teknik analisis data yang digunakan
adalah dengan memakai metode observasi
serta data yang ditampilkan berupa data
kualitatif dengan menggunakan tabel.
Hasil dan Pembahasan
Protein merupakan polipeptida alami
yang memiliki berat molekul lebih dari 5.000.
makromolekul ini sangat berbeda-beda sifat
fisiknya, mulai dari enzim yang larut dalam
air sampai keratin yang tak larut.protein
memiliki fungsi biologis yang berbeda-beda
pula, yaitu katalis enzim, transport dan
penyimpanan, fungsi mekanik, pergerakan,
pelindung, dan proses informasi (Ngili, 2015).
Asam amino dibagi menjadi 2
golongan, yaitu asam amino essensial dan
asam amino non essensial. Asam amino
essensial adalah asam amino yang tidak dapat
disintesa oleh tubuh. Asam amino non
esenssial adalah asam amino yang dapat
disediakan oleh tubuh organisme melalui
proses biosintesa yang rumit dari senyawa
nitrogen yang terdapat dalam makanan (Elfita,
2014).
3
Reagen Biuret mengandung CuSO4,
biuret dibentuk dengan pemanasan urea dan
mempunyai struktur mirip dengan struktur
peptida dari protein. Prinsip reaksi biuret
adalah reaksi antara tembaga sulfat dalam
alkali dengan senyawa yang berisi dua atau
lebih ikatan peptide seperti protein yang
memeberikana warna ungu biru yang khas.
Fungsi reagen biuret adalah untuk
memebentuk kompleks sehingga yang
dikandung dapat diidentifikasi. Reaksi biuret
ini bersifat spesifik, artinya hanya senyawa
yang mengandung ikatan peptida saja yang
akan bereaksi dengan pereaksi biuret
(Bintang, 2010).
Uji Biuret digunakan untuk
menunjukkan adanya ikatan peptida dalam
suatu zat yang akan diuji. Adanya ikatan
peptida mengindifikasikan adanya protein.
Karena asam amino berikatan dengan asam
amino yang lain melalui ikatan peptida
membentuk protein. Ikatan peptida merupakan
ikatan yang terbentuk ketika atom karbon dari
gugus karboksil suatu molekul berikatan
dengan atom nitrogen dari gugus amino
molekul lain (Della, 2017).
Gambar 1. 2 mL Larutan Protein dan Larutan
Campuran dari 2 mL Larutan Protein, NaOH
10%, CuSO4 0,1%
Prinsip yang digunakan ialah uji ini
umum bagi proteindan positif untuk semua
senyawa yang mengandung dua atau lebih
ikatan peptida. Sedangkan dipeptida, urea dan
asam amino (kecuali serin dan threonin) akan
memberi reaksi negatif. Biuret akan
Maya Farinda : Uji Benedict
memberikan warna ungu bila direaksikan
dengan larutan basa kuat dan diteteskan
sedikit larutan tembaga sulfat encer. Hal ini
terjadi karena pada biuret terdapat ikatan yang
sama dengan ikatan peptida pada protein.
Warna ungu disebabkan terbentuknya
senyawa kompleks, tembaga, natrium, biuret.
Bila penambahan tembaga sulfat terlalu
banyak
warna ungu ini dapat menjadi kebiruan.
Gambar 2. Larutan NaOH 10%, dan albumin
2%
Fungsi pereaksi NaOH adalah untuk
membuat suasana larutan menjadi basa dan
untuk menghasilkan senyawa kompleks
berwarna ungu.
Gambar 3. Hasil Uji Biuret
Perubahan warna pada larutan protein
terjadi karena ion Cu2+ (dari pereaksi biuret)
dalam suasana basa bereaksi dengan
polipeptida atau ikatan-ikatan peptida yang
menyusun protein membentuk senyawa
kompleks berwarna ungu. Yang menandakan
adanya protein yaitu terdapat ikatan peptide
4
yang lebih banyak, hal itu terbukti saat
pemambahan CuSO4 dan dikocok larutan
tetap berwarna ungu yang menandakan bahwa
ikatan peptidanya kuat. Fungsi pereaksi
NaOH dan CuSO4 adalah untuk membuat
suasana larutan menjadi basa dan untuk
menghasilkan senyawa kompleks berwarna
ungu. Warna urea sendiri tidak berubah
dikarenakan uji biuret akan menunjukkan
hasil negative pada asam amino bebas karena
tidak memiliki ikatan peptida. Dipeptida, urea,
dan asam amino (kecuali serin dan threonine)
akan memberi reaksi yang negative oleh sebab
itu urea tidak berubah warna seperti halnya
pada larutan protein.
Secara kolorimetri, protein dapat
ditetapkan kadarnya dengan metode biuret.
Prinsipnya adalah bahwa ikatan peptide dapat
membentuk senyawa senyawa kompleks
berwarna ungu dengan penambahan kupri
dalam suasana basa. Pereaksi biuret terdiri
dari campuran protein dengan sodium
hidroksida dan tembaga sulfat. Warna violet
adalah hasil dari reaksi ini. Reaksi ini positif
untuk 2 atau
lebih ikatan peptide (Maria, 2014).
Simpulan dan Saran
Simpulan
Uji Biuret digunakan untuk uji protein,
karena uji dapat mendeteksi adanya ikatan
peptide yang diperoleh hasil reaksi berupa
warna ungu pada larutan yang menunjukkan
adanya protein. Hal ini terjadi karena ion Cu 2+
(dari pereaksi Biuret) dalam suasana basa
bereaksi dengan polipeptida atau ikatan-ikatan
pepetida yang menyusun protein memebentuk
senyawa kompleks berwarna ungu.
Saran
Ada baiknya saat melakukan oercobaan
yang alatnya menggunakan glass lebih
berhati-hati agar tidak terjadi kerusakan pada
alat dan untuk saat pengujian agar pratikkan
lebih fokus dan teliti dalam melakukan uji
Maya Farinda : Uji Benedict
percobaan agar nantinya hasil akhir yang
dihasilakan tidak terjadi kesalahan, dan juga
pada saat proses pemanasan gunakan dengan
api yang kecil agar
nantinya tabung tidak mengarang.
Daftar Pustaka
Bintang, Maria, (2010). Biokimia Teknik
Penelitian. Jakarta: Erlangga.
Della, Damayanti, dkk. (2017). Komposisi
Protein dan Uji Biuret. Jurnal Kimia
Biologi, 4:3, 20-32.
Dwi, Rudi, dkk. (2016). Penetapan Kadar
Protein dalam Telur Unggas Melalui
Analisis Nitrogen Menggunakan Metode
Kjeldahl. Jurnal Farmasi Higea, 8:2,
143-150.
Elfita, Lina. (2014). Analisis Profil Protein
Dan Asam Amino Sarang Burung Walet
(Collocalia fuchiphaga) Asal Painan.
Jurnal Sains Farmasi Dan Klinis, 1:1,
27-37.
Goretti, Maria, dkk. (2014). Perbandingan
Analisa Kadar Protein Terlarut dengan
Berbagai Metode Spektroskopi UV-
Visible. Jurnal Ilmiah Sains Dan
Teknologi, 7:2, 64-71.
Putri, Ariza, dkk. (2016). Analisis Kadar
Albumin Ikan Sidat (Anguilla
marmorata dan Anguilla bicolor) dan
Uji Aktivitas Penyembuhan Luka
Terbuka pada Kelinci (Oryctolagus
cuniculus). Jurnal Farmasi, 2:2, 90-95.
Qalsum, Umi. (2015). Analisis Kadar
Karbohidrat, Lemak dan Protein dari
Tepung Biji Mangga (Mangifera Indica
L) Jenis Gadung. Jurnal Akad Kimia,
4:4): 168-174.
Ngili, Y. (2015). Biokimia: Aliran Informasi
Genetika. Yogyakarta: Innosain.
Susanti, Hidayat. (2016). Profil Protein Susu
Dan Produk Olahanya. Jurnal MIPA,
39:2, 98-106.
Umam, Khothibul. (2017). Protein Pangan
Hasil Ternak dan Aplikasinya, Malang:
UB Press.