1 5

Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

I. Tujuan
I.1. Untuk memberikan suatu prosedur tetap penetapan kadar tablet asam
mefenamat secara kuantitatif dengan Kromatografi Cair Kinerja Tinggi.

II. Tanggung Jawab

II.1. Manager QC
Manajer QC bertanggung jawab untuk memastikan bahwa seluruh prosedur
penetapan kadar asam mefenamat telah dilaksanakan dengan benar.

II.2. Supervisor QC
Supervisor QC bertanggung jawab untuk :
II.2.a. Mengecek dan menyetujui prosedur tertulis mengenai penetapan kadar
asam mefenamat.
II.2.b. Menjamin bahwa prosedur tersebut dapat diimplementasikan.
II.2.c. Menjamin bahwa prosedur tersebut dipahami oleh analis.
II.2.d. Menjamin bahwa prosedur tersebut dilaksanakan oleh analis sesuai
ketentuan.

II.3. Analis 2

Analis bertanggung jawab untuk :

II.3.a. Menyusun prosedur tertulis mengenai penetapan kadar asam
mefenamat
II.3.b. Melaksanakan prosedur sesuai ketentuan yang berlaku.

III. Ruang Lingkup

1 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

 Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari 5

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

Metode ini menguraikan prosedur kerja untuk menetapkan kadar asam mefenamat
yang terdapat pada tablet asam mefenamat.

IV. Acuan
Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. (2014). Farmakope Indonesia, Edisi
V. Jakarta: Kementrian Kesehatan Republik Indonesia. Hal: 151.

IV. Prinsip
Asam mefenamat ditetapkan kadarnya secara Kromatografi cair kinerja tinggi.

V. Teori
Asam Mefenamat BPFI
Baku pembanding diperlukan secara khusus di dalam beberapa penetapan kadar
dan pengujian dalam Farmakope dan dimaksudkan hanya untuk keperluan tersebut.
Baku pembanding hanya digunakan untuk pengujian mikrobiologi, kromatografi,
spektrofotometri, yang pengukrannya harus dibandingkan dengan Baku Pembanding
hingga diperoleh hasil yang teliti dan tepat.
Hasil penetapan dan pengujian ditentukan atas dasar membandingkan zat yang
diperiksa terhadap Baku Pembanding yang telah dibebaskan atau dikoreksi tehadap
adanya bahan yan mudah menguap atau kandungan air seperti telah ditentukan pada
etiket atau dtentukan pada masing-masing monografi. Apabila ada perbedaan petunjuk
pada etiket dan pada monografi, maka yang diikuti adalah petunjuk pada etiket dari
Baku Pembanding yang bersangkutan.
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi
Kromatografi cair kinerja tinggi merupakan suatu sistem pemisahan dengan
kecepatan dan efesiensi yang tinggi. Teknologi kolom yang digunakan didasarkan atas
penggunaan kolom berlubang kecil (diameter dalam antara 2 mm hingga 5 mm) dan

2 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

 Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari 5

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

isi kolom berupa partikel kecil (3µm hingga 50 µm), yang memungkinkan tercapainya
keseimbangan secara cepat antara fase gerak dan fase diam. Teknologi kolom partikel
kecil ini memerlukan sistem pompa yang mampu mengalirkan fase gerak pada tekanan
tinggi sampai 300 atmosfer, agar tercapai laju aliran beberapa mL per menit. Dalam
metode ini sering digunakan jumlah zat uji yang kecil (umumnya lebih kecil dari 20
µm) untuk isi kolom tersebut di atas, sehingga diperlukan detektor yang sensitif. Asam
mefenamat dalam sediaan tablet asam mefenamat dapat ditetapkan kadarnya secara
kromatografi cair kinerja tinggi fase terbalik dengan menggunakan detektor UV
karena asam mefenamat memiliki gugus kromofor dan memberikan serapan pada
panjang gelombang 254 nm.

VI. Alat dan Bahan

1. Alat :
a. Detektor 254 nm
b. kolom 4,6 mm x 25 cm berisi bahan pengisi L1
c. Labu Ukur
2. Bahan
a. Larutan uji Timbang saksama lebih kurang 100 mg zat, masukkan ke
dalam labu tentukur 500-ml, larutkan dan encerkan dengan Fase gerak
sampai tanda.
b. Fase Gerak : Asetonitril P-Dapar- tetrahidrofuran P (23:20:7)
c. Dapar : larutan amonium fosfat monobasa 50 mM, atur pH hingga 5,0
dengan penambahan amonium hidroksida 3 M.
d. Larutan baku Timbang saksama sejumlah Asam Mefenamat BPFI,
larutkan dalam Fase gerak jika perlu encerkan secara kuantitatif dan
bertahap dengan Fase gerak hingga kadar lebih kurang 0,2 mg per ml.

3 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

 Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari 5

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

V. Cara Kerja
a. Persiapan larutan standar asam mefenamat
1. Timbang saksama lebih kurang 50 mg Asam Mefenamat BPFI.
2. Encerkan dengan fase gerak sampai kadar lebih kurang 0,2 mg per ml.

b. Persiapan baku pembanding

1. Asam Mefenamat BPFI, tidak boleh dilakukan pengeringan. Simpan dalam
wadah tertutup rapat, terlindung cahaya.

c. Pembuatan fase gerak

1. Buat campuran asetonitril P-Dapar-tetrahidrofuran P (23:20:7), saring dan
awaudarakan
2. Jika perlu lakukan penyesuaian sistem.

d. Penyiapan larutan uji asam mefenamat

1. Timbang dan serbukkan tidak kurang dari 20 tablet asam mefenamat uji.
4
2. Timbang seksama sejumlah serbuk tablet setara dengan lebih kurang 100 mg
asam mefenamat, masukkan kedalam labu ukur 500 ml.
3. Tambahkan 10,0 ml fase gerak dan sonikasi lebih kurang 5 menit dengan
sekali-sekali diaduk.
4. Encerkan dengan fase gerak hingga batas, homogenkan dan saring.

e. Sistem Kromatografi
Kolom : kolom 4,6 mm x 25 cm berisi bahan pengisi
oktadesilsilana (C18) terikat secara kimiawi pada

4 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

 Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari 5

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

partikel mikrosilika berpori atau partikel

mikrokeramik, dengan diameter 5 μm
Laju alir : 1 ml per menit
Volume penyuntikan : 10 μl
Detektor : UV pada panjang gelombang 254 nm

f. Penetapan kadar asam mefenamat

1. Suntikkan secara terpisah masing-masing lebih kurang 10 μL larutan standar
asam mefenamat dan larutan uji asam mefenamat ke dalam kromatografi cair
kinerja tinggi dengan kondisi sebagai berikut:
2. Penyuntikan dilakukan untuk masing-masing larutan sebanyak 5 kali.
3. Ukur respons puncak utama. Hitung jumlah dalam mg, C15H15NO2 dengan
rumus:

4. Hitung simpangan baku relatif pada penyuntikan ulang dengan rumus :

Definisi :

adalah simpangan baku relatif dalam persen.

adalah harga rata-rata dari frekuensi pengukuran merupakan pengukuran

individual.
Xi adalah perbandingan respons puncak masing-masing pengukuran

5 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

 2
Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari 5

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

C adalah kadar Asam Mefenamat BPFI dalam mg per ml larutan standar asam
mefenamat

adalah respons puncak larutan uji asam mefenamat

adalah respons puncak larutan standar asam mefenamat

g. Uji Kesesuaian Sistem

1. Digunakan sampel berupa larutan standar dan larutan kesesuaian sistem.
2. Sampel kemudian disuntikkan ke sistem kromatografi
3. Sistem dikatakan sesuai jika parameter :
a. Faktor ikutan : < 1,6 untuk puncak asam mefenamat, larutan
standar
b. Simpangan baku relatif : < 1,0 % digunakan larutan standar
c. Efisiensi kolom : > 8200 lempeng teoritis dari puncak asam
mefenamat, larutan standar.
VI. Kriteria keberterimaan
Tablet asam mefenamat mengandung asam mefenamat, C15H15NO2, tidak kurang
dari 95,0% dan tidak lebih dari 105,0% dari jumlah yang tertera pada etiket.

VII. Formulir

6 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia

 Penetapan Kadar Tablet Asam Mefenamat Halaman : x dari 5

secara Kromatografi Cair Kinerja Tinggi Dokumen : 01

Departemen : Quality Control Seksi : Kuantitatif Revisi : 00
Tanggal : 10 / 04 / 2015 Tanggal : 14 / 04 / 2015 Tanggal : 15 / 04 / 2015 Tanggal revisi : 20 / 04 / 2015
Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan : Tanda tangan :

Disusun oleh : Analis Dicek oleh : Supervisor QC Disetujui oleh : Manajer QC Mengganti dokumen : 01.00

7 Laboratorium Kimia Analisis, Fakultas Farmasi Universitas Indonesia