LAPORAN PRAKTIKUM

PEMERIKSAAN LABORATORIUM INFEKSI JAMUR

PEMERIKSAAN KULTUR JAMUR METODE SLIDE

DISUSUN OLEH :

1. DEVI OKTAVIA 1911304118

2. NAZWA ELSA PUTRI 1911304119
3. MYRANI NUR HIDAYAH 1911304120
4. DESLIANA MEYTA 1911304121
5. PUTRI ADELIA 1911304122
6. CAMYLIA MAMONTO 1911304123
7. KHARISMA DEWI 1911304125
8. VITRIA AISYAH 1911304126
9. NAFIKA CAHYA 1911304127
10. ASHADI RAMDAN 1911304128
11. WENY ASINDRY 1911304129
12. FITRI POLIMENGO 1911304130

LABORATORIUM PL. JAMUR

PRODI D4 TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS
FAKULTAS ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS ‘AISYIYIAH YOGYAKARTA
YOGYAKARTA
2021
 BAB I
PENDAHULUAN

A. LATAR BELAKANG
Fungi atau jamur merupakan kelompok organisme tersusun dari beberapa sel atau
multiseluler yang memiliki membran inti sel atau eukariotik. Fungi berbeda dengan
mikroorganisme lainnya berdasarkan cara makan, stuktur tubuh, pertumbuhan, dan
reproduksinya (Fardiaz 1993). Dalam klasifikasi tumbuhan, kingdom Fungi dibagi ke dalam
empat filum. Filumdari kingdom Fungi yaitu: Chytridiomycota,Ascomycota, Zygomycota, dan
Basidiomycota(Ulloa 2001).
Fungi dapat diklasifikasi dengan mengidentifikasikan jamur atau fungi dari morfologi
secara makroskopik ataupun mikroskopis. Morfologi makroskopik digunakan untuk
mengidentifikasi jamur yang membentuk koloni seperti warna permukaan koloni yang
mencangkup miselium vegetatif dan konidia, pigmentasi miselium, waktu pertumbuhan dan
diameter koloni, bentuk tepi koloni, tekstur permukaan, dan bentuk koloni.
Mengidentifikasikan fungi secara mikroskopik berdasarkan anatomi dan morfologi individu
fungi tersebut (Wuezkowski 2007).
Identifikasi isolat fungi dilakukan melalui dua tahap. Tahap pertama yaitu, pengamatan
fungi secara makroskopis yang meliputi pengamatan terhadap warna dan bentuk koloni. Tahap
kedua yaitu, pengamatan secara mikroskopis yang dilakukan dengan membuat slide kutur yang
meliputi pengamatan terhadap bentuk hifa, bentuk, dan ukuran konidia. Dan pada praktikum
ini yang digunakan adalah Jamur Rhizopus oligosporus yang merupakan spesies jamur yang
dapat menghasilkan produk pangan. Spesies fungi memiliki bentuk struktur spora dan miselium
yang berbeda, sehingga dapat ditumbuhkan dan diamati melalui metode Slide culture atau
Microculture (Sunatmo 2009).

B. TUJUAN
- Mahasiswa dapat memahami teknik kultur jamur metode slide
- Mahasiswa dapat mengetahui pemeriksaan kultur jamur metode slide
- Mahasiswa dapat menjelaskan pemeriksaan kultur jamur metode slide

C. MANFAAT
- Agar Mahasiswa dapat memahami teknik kultur jamur metode slide
- Agar dapat mengetahui pemeriksaan kultur jamur metode slide
- Agar Mahasiswa dapat menjelaskan pemeriksaan kultur jamur metode slide
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA

A. DASAR TEORI
Jamur merupakan organisme yang mempunyai sangat banyak spesies. Berdasarkan
jenisnya dibedakan menjadi Jamur dengan miselium, jamur berbentuk yeast/ragi, dan jamur
dimorfik. Fungi (jamur) memiliki banyak kepentingan di bidang mikrobiologi karena
menyangkut kehidupan banyak makhluk hidup. Disamping beberapa keuntungan yang dapat
dimanfaatkan oleh manusia, fungi juga menyebabkan kerugian apabila menginfeksi makhluk
hidup. Beberapa hal yang penting karena infeksi yang ditimbulkan baik infeksi mikosis
superficial sampai infeksi dengan tingkat morbiditas dan mortalitas yang tinggi.
Slide Culture (Kultur Slide) merupakan teknik yang sangat penting dalam identifikasi
fungi. Slide culture adalah teknik menumbuhkan fungi pada slide dengan perlakuan tertentu.
Perlakuan yang dimaksud diantaranya adalah fungi ditumbuhkan pada sepotong agar dan di
letakkan di atas kaca benda, peletakan tusuk gigi atau batang U (U-shaped glass rod) agar kaca
benda tidak bersentuhan langsung dengan kertas tisu, dan pemberian aquades pada kertas tisu
untuk menjaga kelembapan udara di dalam cawan Petri slide culture. Tujuan slide culture
adalah melihat morfologi mikroskopis fungi, yang terdiri dari bentuk hifa, sporangium, konidia,
dll.
Identifikasi isolat fungi dilakukan melalui dua tahap. Tahap pertama yaitu pengamatan
fungi secara makroskopis yang meliputi pengamatan terhadap warna dan bentuk koloni. Tahap
kedua yaitu, pengamatan secara mikroskopis yang dilakukan dengan membuat slide kutur yang
meliputi pengamatan terhadap bentuk hifa, bentuk, dan ukuran konidia. Tahap pembuatan slide
kultur dapat dilihat pada gambar berikut :
Gambar 2.1 Tahap pembuatan slide kultur : (A) Potongan agar yang diambil dari medium PDA.
(B) Cawan Petri berisi batang penahan dan gelas objek. (C) Inokulasi fungi pada agar yang
disimpan di atas gelas objek. (D) Agar yang telah diinokulasi ditutup dengan kaca penutup.

Disiapkan sebuah cawan Petri steril yang di dalamnya diberi kertas saring steril yang
dipotong bundar dan telah dilembabkan dengan menggunakan akuades steril untuk menjaga
kelembaban kultur dalam cawan Petri. Pada cawan Petri tersebut disimpan batang penahan
berbentuk segitiga, dan di atas batang penahan tersebut diletakkan sebuah objek gelas steril
beserta penutupnya seperti terlihat pada Gambar 2.1. Blok Agar steril kira-kira berikiran satu
sentimeter kuadrat dipotong dari medium PDA dalam cawan Petri steril lain (Gambar 2.1 A)
dan diletakkan di atas gela objek dengan menggunakan pisau atau alat pemotong steril.
Kemudian, fungi diinkubasi pada keempat blok agar (Gambar 2.1 C) dan ditutup oleh gelas
penutup steril (Gambar 2.1 D). Setelah beberapa hari diinkubasi dalam suhu kamar, sllide dapat
diamati dengan menggunakan mikroskop pada perbesaran rendah sampai tinggi, lalu
diidentifikasi.
 BAB III

ISI

A. METODE
1. ALAT

- Cawan petri - Object glass

- Logam penyangga - Beaker glass
- Pipet volume - Skapel
- Jarum ose - Bunsen
- Cuter/pemotong steril

2. BAHAN
- Aquadest steril - Alkohol
- Media PDA atau SDA - Biakan murni Aspergillus sp.
- Biakan murni Pennicillium sp - Biakan murni Trichoderma sp.
3. PROSEDUR PEMBUATAN MEDIA
- Bungkus cawan petri, pipet steril, objek glass, dan logam penyangga, sterilkan
dengan autoclave suhu 120ºC selama 20 menit

- Masukkan 100ml aquadest ke dalam botol serum, tutup mulut botol dengan
kapas dan alumunium foil lalu sterilkan

- Buatlah media PDA, timbang 40gr masukkan ke dalam beaker glass, tambahkan
aquadest 100 ml, panaskan diatas kompor listrik sambil diaduk sempurna hingga
agar larut, masukkan dalam botol serum, tutup dengan kapas dan alumunium foil
lalu sterilkan

- Setelah sterilisasi selesai, buka bungkusan cawan petri di ruang steril, masukkan
10 ml aquadest steril dengan pipet steril, teteskan larutan media PDA diatas
object glass 1 tetes, tutup penutup cawan, biarkan agar membeku

- Cara menanam biakan kapang pada slide kultur, gunakan jarum ose steril/
dipanaskan pada api bunsen hingga pijar, ambil satu ose biakan murni kapang
kemudian letakkan satu titik jarum ose diatas agar slide kultur, tutup cawan petri,
beri label, inkubasi kapang selama 7 hari

- Untuk pengamatan makroskopis/morfologi, tuangkan 15 ml PDA ke dalam

cawan petri, biarkan membeku, tanamkan 1 iris biakan murni kapang di tengah
cawan, tutup rapat dengan isolasi di sekeliling cawan, inkubasi selama 7 hari
PROSEDUR PEMERIKSAAN SLIDE CULTURE JAMUR

- Potong media pada petri dengan pemotong steril sesuai dengan ukuran object glass,
Kemudian letakkan potongan media di atas object glass steril

- Letakkan object glass pada petri disk yang telah dialasi dengan tissue atau kertas saring.

- Alasi object glass dengan batang/ tongkat kecil agar tidak menempel pada dasar petri,
lalu Ambil isolate jamur dengan ose jarum

- Tusukkan ose pada keempat sisi media dan Lakukan secara aseptis

- Tutup media dengan deck glass kemudian Basahi petri dengan meneteskan aquades
steril ke atas tissue/ kertas saring lalu Tutup kembali petri kemudian inkubasi pada suhu
optimal

- Fungi akan tumbuh pada keempat sisi blok media. Dan Jamur akan menempel pada
deck glass

- Ambil cover glass/deck glass dengan pinset kemudian taruh pada object glass bersih
yang telah ditetesi LPCB

- Lalu Amati pada mikroskop

METODE PENGEMBANGAN DARI SLIDE CULTURE YAITU METODE

HEINRICLIS
- Siapkan objek glass steril
- Teteskan paraffin cair di kedua sisi objek glass beri jarak antar keduanya sekitar 2 inch
- Letakkan deck glass di atas lilin paraffin cair. pastikan ada ruang kosong sekitar 1 cm
diantara kedua deck glass
- Ambil media pertumbuhan jamur yang masih cair menggunakan wire loop atau ose.
Kemudian teteskan pada ruang diantara kedua deck glass.
- Ambil inoculum jamur, dan tanam pada media cair ditengah
- Tutup media dengan deck glass menggunakan forceps
- Untuk pemeriksaan mikroskopis dapat dilakukan dengan mengambil deck glass yang
sudah ditumbuhi jamur menggunakan forceps kemudian letakan pada objek glass steril
yang sudah ditetesi zat pewarna LPCB. Setelah itu, amati pada mikroskop.
B. HASIL

HASIL SLIDE CULTURE JAMUR

C. PEMBAHASAN

Pada praktikum kali ini bertujuan untuk menumbuhkan biakan murni kapang di
atas obyek glass dan untuk melakukan pengamatan mikroskopis dan mengidentifikasi
biakan murni kapang yang terdapat pada slide kultur.
Untuk membuat slide kultur pertama-tama melakukan sterilisasi alat-alat yang
akan digunakan seperti cawan petri, obyek glass, cover glass, logam penyangga bentuk
U, pipet volume, scapel, pinset, dan beaker glass. Selanjutnya pembuatan dan sterilisasi
media PDA. Media yang telah dingin di tuang sebagian ke dalam 2 cawan petri steril,
satu cawan untuk pengamatan makroskopis dan satu lagi untuk stock media padat yang
akan dipotong kecil bentuk dadu. Setelah media memadat, panaskan jarum ose hingga
merah berpendar kemudian ambil biakan murni kapang pada agar miring (NA) di tabung
kemudian menanamnya ke dalam cawan petri untuk pengamatan makroskopis. Media
pada cawan petri yang lain jika sudah memadat dipotong menggunakan scapel steril
hingga berukuran dadu, kecil sekitar 0,3-0,5 mm. Ambil cawan petri steril yang
didalamnya sudah berisi logam penyangga, obyek glass dan cover glass. Pasang
sedemikian rupa dengan pinset steril hingga obyek glass berada di atas logam
penyangga. Mengambil media PDA yang masih cair dan dingin dengan pipet volume
steril, meneteskan sebanyak satu tetes ke atas obyek glass. Kemudian didiamkan hingga
memadat. Selanjutnya media yang telah dipotong kecil berukuran dadu diletakkan di
obyek glass yang sama. Jika media yang ada pada obyek glass sudah memadat
selanjutnya biakan murni kapang ditanam. Setelah itu, tuang sedikit aquades steril ke
dalam cawan petri namun permukaan air tidak sampai menyentuh obyek glass.
Selanjutnya inkubasi selama 7 hari dalam suhu kamar.
Setelah masa inkubasi melakukan pengamatan ketiga spesies kapang yaitu
Aspergillus sp. ; Penicillium sp. ; dan Trichoderma sp. Pengamatan makroskopis
dilakukan secara langsung dengan mengamati koloni yang tumbuh pada cawan petri
sedangkan pengamatan mikroskopis dilakukan dengan mengambil slide kultur yang ada
dalam cawan petri kemudian diamati di bawah mikroskop.
 Pada pengamatan makroskopis nampak koloni Aspergillus sp. memiliki tekstur
granular, warna koloni hitam pada top-side dan tak berwarna pada bagian reverse-side,
tidak ada tetes eksudat, radial furrow dan zonasi. Sedangkan pada Penicillium sp.
memiliki tekstur beludru, warna koloni hijau keabu-abuan pada top-side dan kuning
atau coklat kekuningan pada bagian reverse-side, tidak ada tetes eksudat, radial furrow
dan zonasi. Trichoderma sp. memiliki tekstur beludru, warna koloni hijau tua pada
top- side dan tak berwarna pada bagian reverse-side, tidak muncul radial furrow, ada
tetes eksudat dan zonasi.
Pada pengamatan mikroskopis struktur tubuh Aspergillus sp. biseriat (terdapat
struktur metula) sedangkan Penicillium sp. dan Trichoderma sp. uniseriat (tidak ada
struktur metula, pada konidiofor langsung muncul fialid). Hifa ketiga spesies kapang
berseptat dan bercabang. Struktur vesikel hanya ada pada Aspergillus sp. dan konidiofor
tidak bercabang sedangkan pada Penicillium sp. dan Trichoderma sp. konidiofor
bercabang-cabang langsung muncul fialid. Konidiofor pada Aspergillus sp. berwarna
coklat atau hialin sedangkan pada Penicillium sp. dan Trichoderma sp. hialin.
Hasil slide culture jamur kedua yaitu batang-batang dari jamur tersebut masih
terlihat utuh tidak ada yang terpotong-potong, pada jamur tersebut jika dia septa maka
akan bersepta , jika asepta maka asepta pula, spora-spora masih pada utuh, terdapat juga
jamur aspergillus, ditemukan jamur spesies Mucor Sp dll.
Keuntungan metode slide culture yaitu cost-effective dan metode rapid untuk
indentifikasi morfologis fungi dan Karena fungi langsung tumbuh pada slide, maka tidak perlu
memotong bagian tubuh jamur dari petri disc baru kemudian dipindah pada slide untuk diamati.
Hal ini mengurangi kemungkinan rusaknya struktur jamur yang rapuh .
Kerugian metode slide culture jamur yaitu Media yang digunakan hanya sedikit dan
mengandung nutrisi yang terbatas. Hal ini menyebabkan metode ini hanya bisa digunakan
dalam periode yang singkat. Terlalu lama inkubasi akan menyebabkan jamur kehabisan nutrisi
yang diperlukan untuk tumbuh. Sehingga metode ini tidak cocok digunakan pada identifikasi
jamur yang memerlukan masa hidup lama. Tidak disarankan digunakan dalam identifikasi
dimorphic pathogen yang memerlukan waktu tumbuh relative lama seperti : Haemophilis
capsulatum, B. dermititidis, C. immitis, P. brasiliensis.
Media yang bisa digunakan pada slide culture jamur yaitu:
- Sabouraud Dextrose Agar (SDA)

▪ Contains 2% dextrose, antibiotics (gentamicin,

chloramphenicol) and cycloheximide
- Selective media

▪ Corn meal agar (CMA) – sporulation, chlamydospore formation

▪ Bird seed agar – cryptococcus, forms brown colonies

▪ Brain Heart Infusion (BHI) agar – dimorphic & other fastidious fungi

Jamur pada umumnya adalah organisme yang berbentuk benang, multiseluler, serta
tidak beklorofil. Jamur berkembang baik secara vegetatif dan generatif dengan berbagai
macam spora. Macam spora yang terjadi dengan tiada perkawinan ialah:
- Spora biasa yang terjadi karena protoplasma dalam suatu sel tertentu. Berkelompok kecil-
kecil, masing masing mempunyai membran inti sendiri.
- Konidiospora yaitu spora yang terjadi karena ujung suatu hifa berbelah-belah seperti tasbih
- Pada beberapa spesies, bagian bagian miselium dapat membesar serta berbanding tebal;
bagian itu merupakan alat pembiak yang disebut klamidiospora
- Jika bagian miselium miselium itu tidak menjadi lebih besar daripada aslinya, maka bagian
bagian itu disebut artospora
Identifikasi isolat fungi dilakukan melalui dua tahap. Tahap pertama yaitu, pengamatan
fungi secara makroskopis yang meliputi pengamatan terhadap warna dan bentuk koloni. Tahap
kedua yaitu, pengamatan secara mikroskopis yang dilakukan dengan membuat slide culture
yang meliputi pengamatan terhadap bentuk hifa dan ukuran konidia.
 BAB IV
PENUTUP

A. KESIMPULAN

Berdasarkan hasil pengamtan dapat disimpulkan bahwa:

1. Slide kultur merupakan metode khusus untuk menumbuhkan kapang, dan digunakan
untuk pengamatan kapang secara mikroskopis. Metode ini menggunakan obyek
glass, logam penyangga, cover glass steril, aquades steril, dan media PDA yang
diteteskan pada obyek glass juga potongan dadu media.

2. Pengamatan makroskopis mencakup warna koloni, tekstur koloni, zonasi, radial

furrow dan tetes eksudat sedangkan pengamatan mikroskopis mencakup struktur
hifa, konidiofor, vesikel, metula, fialid, konidia, dan konidiospora atau konidial
head.
 DAFTAR PUSTAKA

- Bibiana. 1994. Analisis mikrobiologi di laboratorium. Jakarta: PT. Raya Grafindo

Persada
- Dwijiseputro, 1978. Pengantar Mikologi. Bandung: Penerbit Alumni.
- Gandjar, Indrawati, dkk, 2000. Pengenalan Kapang Tropik Umum.
Jakarta: IKAPI DKI.
- Irianto, K. 2006. Mikrobiologi. Bandung: Yrama Widya.
- Natrsir, dkk. 2003. Mikrobiologi farmasi dasar. Makassar: Universitas
Hassanudin
- Peleczer. 2001. Dasar Dasar Mikrobiologi. Jakarta: Universitas Indonesia