WIZARD GENOMIC DNA PURIFICATION KIT

Dalam percobaan kali ini digunakan kit isolasi DNA yaitu Wizard Genomic DNA Purification Kit. Wizard Genomic DNA Purification Kit dirancang untuk isolasi DNA dari sel darah putih, jaringan sel kultur, jaringan hewan, jaringan tanaman, ragi, serta bakteri gram positif dan negatif. Dalam satu set kit Wizard ini terdapat beberapa reagen yang digunakan dalam isolasi DNA yaitu : 1. Cell Lysis Solution 2. Nuclei Lysis Solution 3. Protein Precipitation Solution 4. DNA Rehydration Solution 5. Rnase Solution 500 ml 250 ml 125 ml 100 ml 1,25 ml

Kit tersebut cukup untuk melakukan isolasi DNA 500 kali dari sampel darah sebanyak 300 L. Tiap kit tersebut digunakan tiap tahap isolasi DNA. Wizard Genomic DNA Purification Kit ini bekerja berdasarkan proses 4 langkah yaitu: 1. Lisis sel dan inti sel. Dalam isolasi DNA dari sampel darah, langkah ini meliputi lisis sel darah merah dengan cell lysis solution diikuti dengan lisis sel darah putih dan inti selnya dengan nuclei lysis solution. 2. Digesti DNA dengan RNAse solution. Langkah ini adalah langkah optional untuk beberapa aplikasi. 3. Protein seluler dipisahkan dengan presipitasi garam yang akan mempresipitasi protein tetapi membiarkan DNA genomik dengan berat molekul lebih besar. 4. Langkah terakhir adalah pengkonsentrasian DNA dan rehidrasi dengan isopropanol.

Sumber : Genomic DNA Purification. Diunduh dari :

http://www.qiagen.com/literature/brochure/gen_DNA_pur/1019469_bros_dhyti_p10_p13.pdf Austin dan Donald Bell. DNA Extraction Lab. Diunduh dari :

http://education.sdsc.edu/teachestech/downloads/studentlab.pdf

Promega Corp. 2009. Technical Manual : Wizard Genomic DNA Purification Kit. Madison : Promega corporation. Diunduh dari : http://www.promega.com/tbs/tm090.pdf