Laboratorium Farmasi Klinik

Fakultas Farmasi

Universitas Hasanuddin

LEMBAR KERJA PRAKTIKUM BIOKIMIA

UJI IDENTIFIKASI PROTEIN

OLEH :

MUH. TAUFIK HIDAYAT (N011211135)

KELOMPOK 2

GOLONGAN KAMIS PAGI (B)

NAMA ASISTEN

HAMDAYANI DWI PUTRI

MAKASSAR

2022
III.6 MODUL 6: UJI IDENTIFIKASI PROTEIN

a) Urgensi Praktikum

Dalam praktikum ini, mahasiswa mendemonstrasikan mengenai cara mendeteksi protein yang terdapat dalam sampel

menggunakan reagen tertentu serta faktor-faktor yang dapat mengubah struktur protein sehingga menghasilkan pengendapan protein.

Praktikum ini akan memperdalam pemahaman mahasiswa mengenai sifat dan stabilitas protein, dengan mempraktekkan secara

langsung faktor-faktor denaturasi protein yang diajarkan dalam kuliah pokok bahasan Asam amino dan Protein.

b) Deskripsi singkat praktikum

Pada umumnya protein sangat peka terhadap pengaruh-pengaruh fisik dan zat kimia sehingga mudah mengalami perubahan

bentuk (denaturasi). Hal-hal yang dapat menyebabkan terjadinya denaturasi antara lain : panas, pH, tekanan, aliran listrik dan adanya

bahan kimia seperti urea, alkohol, atau sabun. Protein yang mengalami denaturasi akan menurunkan aktivitas biologinya dan berkurang

kelarutannya sehingga mudah mengendap. Tujuan praktikum “Uji Identifikasi Protein” adalah untuk mendemonstrasikan faktor-faktor

yang dapat menyebabkan pengendapan protein, baik secara fisika maupun secara kimia.

c) Sasaran pembelajaran praktikum

Mahasiswa mampu memahami sifat dan stabilitas protein dan faktor yang dapat menyebabkan pengendapan protein

d) Alokasi waktu praktikum

Praktikum dilaksanakan selama 170 menit

e) Tempat praktikum

Demo Video Praktikum bertempat di Laboratorium Farmasi Klinik Farmasi Unhas

f) Teori dan Prinsip Dasar

Protein adalah molekul organik yang terbanyak di dalam sel. Lebih dari 50% berat kering sel terdiri atas protein. Secara kimia,

protein adalah heteropolimer dari asam-asam amino yang terikat satu sama lain dengan ikatan peptida dan memiliki berat molekul

berkisar 10.000 hingga lebih dari satu juta. Molekul protein melalui ikatan hidrogen berinteraksi dengan molekul air yang karena

molekulnya besar sehingga dalam air, protein membentuk larutan koloid. Adanya sejumlah elektrolit dengan konsentrasi encer akan

meningkatkan kelarutan suatu protein. Sifat ini dapat dimanfaatkan untuk pemisahan protein. Monomer dari protein adalah asam amino,

sifat-sifat dari protein dipengaruhi oleh karakteristik sekuen asam amino yang membentuknya.

Beberapa fungsi penting protein adalah berperan mempertahankan bentuk sel dan integritas fisiknya, kontraksi otot (actin dan

miosin), transport oksigen (hemoglobin), katalisis reaksi biokimia (enzim) dan masih banyak lagi fungsi protein. Asam amino merupakan

komponen penyusun protein, terdiri atas gugus amin, gugus karboksil, alkil (-R) dan atom hidrogen yang berikatan pada atom karbon (C

khiral kecuali pada glisin). Asam amino membentuk molekul protein dengan ikatan peptida, yaitu ikatan antara gugus amin dengan

karboksil dari masing-masing asam amino. Protein dapat diperoleh dari kacang-kacangan, bayam, kentang jamur (protein nabati) serta

daging, susu, telur, ikan (protein hewani). Terdapat kurang lebih 300 jenis asam amino yang ditemukan pada hewan, tanaman dan

mikroba tetapi hanya 20 jenis asam amino yang dikode oleh DNA ke dalam protein. Sifat asam amino ditentukan oleh gugus alkil yang

membedakan struktur dan fungsi protein yang dibentuknya.

Pada umumnya protein sangat peka terhadap pengaruh-pengaruh fisik dan zat kimia sehingga mudah mengalami perubahan
bentuk (denaturasi). Hal-hal yang dapat menyebabkan terjadinya denaturasi antara lain: panas, pH, tekanan, aliran listrik dan adanya

bahan kimia seperti urea, alkohol, atau sabun. Protein yang mengalami denaturasi akan menurunkan aktivitas biologinya dan berkurang

kelarutannya sehingga mudah mengendap.

g) Peralatan

1. Beaker 5. Gegep

2. Tabung reaksi dan Rak tabung 6. Water Bath

3. Pipet tetes 7. Aluminium foil

4. Gelas ukur 8. Cawan Porselen

h) Bahan

1. Sampel 9. Larutan AgNO3 2%

2. Aquadest 10. Pereaksi Ninhidrin

3. Na2CO3 11. Larutan FeCl3

4. Larutan NaOH 10% 12. Larutan HNO3

5. Larutan CuSO4 1 % 13. Larutan HCl encer

6. Etanol absolut 14. Larutan NaCl

7. Larutan Pb(NO3) 2%

i) Cara Kerja

1. Penentuan Ikatan Peptida dengan Uji Biuret

a. Ambil 1 mL larutan sampel

b. Tambahkan 1 mL NaOH 10% ke dalam tabung reaksi

c. Tetesi 3 tetes CuSO4 1% dan amati hasil yang terbentuk.

d. Dikatakan positif bila terbentuk wama violet/ungu

2. Uji Ninhidrin

a. Ambil 1 mL larutan sampel

b. Panaskan larutan

c. Tambahkan 0,5 mL Ninhidrin dan amati hasil yang terbentuk.

d. Dikatakan positif bila terbentuk wama kompleks biru-ungu

3. Pengendapan protein dengan Alkohol

a. Ambil 1 mL larutan sampel ke dalam 2 tabung reaksi berbeda

b. Pada tabung pertama ditambahkan 2 mL HCl encer

c. Pada tabung kedua ditambahkan 2 mL NaOH 10%

d. Masing-masing tabung ditambahkan 1 ml Etanol 95%

e. Amati hasil yang terbentuk. Dikatakan positif bila terbentuk endapan

4. Pengendapan protein
 a. Ambil larutan sampel sebanyak 1 mL

b. Tambahkan 1 mL HNO3

c. Panaskan larutan

d. Amati hasil yang terbentuk. Dikatakan positif terbentuk endapan

5. Pengendapan protein dengan logam berat

a. Ambil larutan sampel sebanyak 1 mL ke dalam 5 tabung reaksi berbeda

b. Tambahkan masing- masing 3 mL AgNO3, CuSO4, NaCl, FeCl3, Pb(NO3)2 ke dalam 5 tabung reaksi tersebut

c. Amati hasil yang terbentuk. Dikatakan positif bila terbentuk endapan

6. Uji Kelarutan Protein

a. Ambil larutan sampel sebanyak 1 mL ke dalam 4 tabung reaksi berbeda

b. Tambahkan masing- masing 3 mL Aquadest, NaOH, Na2CO3, HCl ke dalam 4 tabung reaksi tersebut

c. Amati hasil yang terbentuk. Dikatakan positif bila protein larut dan tidak terbentuk endapan

Hasil

Hasil pengujian

Sampel Pengendapan protein Pengendapan protein

Uji Biuret Uji Ninhidrin Pengendapan protein Kelarutan Protein
dengan alkohol dengan logam berat

Reaksi

Pembahasan
…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

Kesimpulan

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

………………………………………………………………………………………………………………………………………………………………

………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...
……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

Daftar Pustaka

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………
……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

…………………………………………………………………………………………...

……………………………………………………………………………………………

……………………………………………………………………………………………

Mengetahui,
Nilai Laporan:

Asisten Kelompok

(HAMDAYANI DWI PUTRI )