LAPORAN PRAKTIKUM (NAMA MATA KULIAH)

JUDUL ACARA PRAKTIKUM

NAMA LENGKAP PRAKTIKAN DAN NAMA LENGKAP ASISTEN

TUJUAN
Mahasiswa mampu memahami prinsip kerja, metode penggunaan, serta bagian-bagian
dari alat spektrofotometer.

HASIL DAN PEMBAHASAN

Pertanyaan
1. Sebutkan prinsip kerja, fungsi alat, dan mekanisme uji dari Spektrofotometer UV-Vis!
Jawab:
Prinsip kerja dari spektroskopi UV-Vis adalah Ketika ada sumber sinar berupa cahaya
uv-vis (monokromatik) diteruskan melalui suatu media (larutan bewarna) yang merupakan
suatu sampel, maka Sebagian cahaya tersebut ada yang diserap, dipantulkan dan ada yang
diteruskan. Fungsi dari uji dari Spektrofotometer UV-Vis

2. Mengapa menggunakan Methylene blue sebagai sampel larutan uji dan bagaimana cara
melarutkan Methylene blue yang benar? Sertakan alasannya!
Jawab:
Methylene blue digunakan dalam uji kemampuan fotokatalis karena bersifat mudah
terjadi fotodegradasi. Methylene blue berbentuk kristal dengan warna hijau tua, bersifat stabil
dan mudah larut dalam air, kloroform, atau alkohol yang akan menghasilkan warna biru tua.
Methylene blue digunakan karena bersifat stabil dan mudah larut dalam air juga akan
mempermudah dilakukannya proses pencampuran larutan sehingga pengamatan dapat
dilakukan dengan lebih baik. Sebelum digunakan, Methylene blue harus dilarutkan dengan
benar. Praktikan harus menggunakan sarung tangan latex, menggunakan jas lab, serta
melapisi meja praktikum menggunakan koran karena sifat Methylene blue yang sulit hilang
apabila terkena kulit atau barang lainnya. Methylene blue terlebih dahulu ditimbang sebesar
0,016 gram dengan menggunakan timbangan analitik. Methylene blue yang telah ditimbang
dimasukkan ke dalam labu ukur dan ditambahkan aquades sebanyak 100 ml, larutan
 dihomogenkan dengan cara menutup kemudian mengocok labu ukur. Larutan Methylene blue
dan ditambahkan aquades hingga 25 ml, kemudian larutan dihomogenkan.

3. Apa kelebihan dan kekurangan Spektrofotometer UV-Vis?

Jawab:
Spektrofotometer UV-Visible ini memiliki keunggulan, yaitu alat ini memiliki
kemampuan menganalisis larutan dengan konsentrasi yang sangat rendah dengan tingkat
presisi yang cukup tinggi dengan kesalahan relatif rendah hanya sekitar 1% hingga 3%,
menjadikan hasil pengujian yang diperoleh lebih akurat, dan dapat diperoleh secara akurat.
Nilai numerik yang diperoleh direkam langsung dari detektor dan dapat dicetak dalam bentuk
numerik grafis atau digital. Spektrofotometer UV-Visible ini juga dapat digunakan untuk
analisis organik dan anorganik. Pada alat ini juga memiliki beberapa kekurangan yaitu,pada
alat ini hanya dapat menggunakan gugus fungsi yang mengandung elektron valensi dengan
energi eksitasi rendah. Senyawa yang akan dianalisis dengan spektrofotometer UV-Visible
harus merupakan senyawa dengan gugus kromogenik dan hanya dapat dianalisis dengan
sensitivitas ultra-tinggi. Violet Range Violet dengan panjang gelombang di atas 185 nm,
penggunaan alat ini dipengaruhi oleh banyak faktor.Dan hanya sampel yang mengandung
kromoform atau zat pembawa warna yang dapat diuji

4. Apa saja komponen atau bagian-bagian dari Spektrofotometer UV-Vis? Sebutkan dan
jelaskan fungsi dari bagian-bagian tersebut!
Jawab:
Spektrofotometer UV-Vis terdiri dari:
• Sumber cahaya/radiasi
Sumber cahaya lampu atau source merupakan alat yang dapat memancarkan radiasi
Spektrofotometer UV-Visible yang dan diukur, serta memancarkan cahaya dalam rentang
panjang gelombang yang digunakan. Sumber radiasi UV biasanya lampu hidrogen atau
deuterium. Sumber sinar ini berasal dari spektrofotometer dengan beberapa jenis lampu.
Diantaranya ada lampu hidrogen, lampu deuterium yang memiliki panjang gelombang 180-
350 nm, lampu xenon, dan lampu pijar tungsten yang memiliki panjang gelombang 350-2500
nm.
 • Monokromator
Monokromator adalah alat yang digunakan untuk memisahkan radiasi ke dalam
komponen panjang gelombangnya sehingga bagian spektrum yang diinginkan dapat
dipisahkan dari sisa spektrum untuk mendapatkan panjang gelombang yang diinginkan bagian
monokromator yang terdapat pada spektrofotometer ini berfungsi untuk memecah sumber
cahaya radiasi menjadi radiasi dengan pita energi yang lebih sempit (monokromatis).
Monokromator juga dapat menghasilkan sinar radiasi dengan lebar pita efektif sebesar 35 –
0,1 nm.

• Sampel kompartemen
Digunakan untuk menempatkan kuvet yang sudah berisi sampel yang akan dianalisis. Kuvet
adalah wadah kaca atau plastic. wadah sampel atau kuvet. Kuvet ini berfungsi untuk menaruh
sampel larutan yang akan diuji. Kuvet memliki bentuk persegi panjang kecil dengan ketebalan
yang berbeda-beda, dari 1-10 cm. Wadah sampel atau kuvet ini terbuat dari bahan silika. Pada
spektrofotometer , kuvet ini ditaruh di dalam spektro yang dalam pengujiannya nanti akan
ditutup.

• Detektor
Detektor pada alat spektrofotometer ini berfungsi untuk menangkap cahaya. Cahaya tersebut
nantinya akan diteruskan dari sampel dan mengubahnya menjadi arus listrik. Sinyal listrik ini
sebanding dengan cahaya yang diserap dan sinyal ini dikirim ke meter dan diteruskan untuk
menampilkan numerik pada layar spektrofotometer UV-Visible. Syarat detektor
spektrofotometer adalah harus memiliki sensitifitas yang tinggi. Hal ini dikarenakan daya
radiasi yang kecil dapat terdeteksi, hingga akan memiliki hasil yang stabil nantinya,

5. Mengapa panjang gelombang pada Spektrofotometer UV-Vis harus diatur, mengapa

Methylene blue memiliki panjang gelombang pada rentan 663 – 667 nm, sedangkan aquades
memiliki panjang gelombang 0 nm, dan mengapa nilai absorbansi tidak boleh melebihi 1?
Jelaskan alasannya!
Jawab:
 Alasan mengapa menthylen blue digunakan sebagai sampel analisis adalah karena salah satu
pewarna biru yang memiliki struktur senyawa aromatik heterosiklik. Biru metilen memiliki
panjang gelombang antara 663 - 667 nm. Karena mengandung warna biru komplementer dalam
rentang spektrum cahaya tertentu. Pada percobaan uji warna diperoleh kurva absorbansi yang
meningkat dari panjang gelombang 600nm, sedangkan absorbansi maksimum metilen biru
terdapat pada panjang gelombang 665nm, dengan panjang gelombang 663-667nm merupakan
rentang absorbansi optimal untuk metilen biru. Methylen blue adalah molekul terkonjugasi,
energi dibagi antara tingkat dasar dan tingkat tereksitasi. Oleh karena itu, sistem biru metilen
dapat menangkap gelombang yang lebih panjang.
Aquades memiliki warna yang lebih jernih dibandingkan methylene blue. Aquades memiliki
panjang gelombang 0 nm, hal tersebut karena warna yang diserap bersifat linear tidak ada warna
yang dihasilkan dan warna pada aquades berwarna jernih. Sebelum melakukan pengukuran nilai
absorbansi diketahui panjang gelombang terlebih dahulu, dimana nilai maksimum panjang
gelombang akan menghasilkan nilai absorbansi yang tinggi. Maka dari itu nilai absorbansi tidak
boleh melebihi 1 karena mengikuti hukum Lambert-Beer yang menyatakan perubahan absorbani
yang terbesar akan terjadi pada panjang gelombang yang maksimal serta kurva tersebut akan
memenuhi hukum tersebut. Konsentrasi pada sebuah larutan semakin tinggi maka akan
menghasilkan nilai absorbansi yang tinggi.

6. Apa saja faktor-faktor yang mempengaruhi hasil panjang gelombang cahaya dalam
Spektrofotometer UV-Vis?
Jawab:
Hasil Panjang gelombang cahaya dalam spektrofotometer dipengaruhi oleh beberapa faktor,
termasuk penyerapan pelarut yang dapat mempengaruhi hasil panjang gelombang pada alat
Spektrofotometer diantaranya adalah sel absorpsi yang digunakan, kualitas data absorbans
sangat dipengaruhi oleh cara pemakaian dan pemeliharaan sel Ini karena penggunaan blanko
dan mungkin warnanya berbeda. Kuvet merupakan salah satu faktor yang mempengaruhi
apakah kuvet yang tepat untuk digunakan adalah kuvet berbahan dasar kuarsa yang
menghasilkan panjang gelombang yang lebih baik. Fotometri normal mempengaruhi hasil
panjang gelombang dan dapat mengukur nilai absorbansi yang sangat rendah atau sangat
tinggi, yang dapat diatur dengan mengatur konsentrasi.
7. Sebutkan dan jelaskan salah satu contoh bahan atau produk pangan yang dapat dianalisis
menggunakan Spektrofotometer UV-Vis! (jawaban ini didukung dengan jurnal, kemudian
sebutkan tujuan penelitian dalam jurnal tersebut, sampel yang digunakan, hasil pengujian,
dan screenshot kurva serapan panjang gelombang) *lampirkan 1 halaman jurnal depannya di
lampiran 1.
Jawab:
 Tujuan:
Tujuan dilakukannya penelitian ini yaitu untuk mengetahui apakah dalam daging
olahan yang beredar dipasar tradisional Kota Medan tersebut mengandung
formaldehida dan berapa besar kandungan formaldehid dalam daging olahan tersebut.
 Sampel yang digunakan:
Nugget yang diambil dari beberapa pedagang di pasar tradisional Sp.Limun yang ada
di Kota Medan.
 Hasil pengujian:
Panjang gelombang maksimum yang didapat adalah 585,5 nm dan absorbansinya
0,525 dengan larutan yang berwarna ungu. dalam hal ini kemungkinan panjang
gelombang ini mengalami pergeseran batokromik yaitu pergeseran ke arah lebih
panjang disebabkan oleh pH, pengaruh suhu, dan pelarut,
Hasil penelitian menunjukkan bahwa reaksi warna schiff dapat digunakan untuk
penentuan kadar formalin dan stabil dalam waktu menit ke-29 hingga ke-30.
Diperoleh larutan stabil pada menit ke 29 sampai 30, Maka dapat diketahui bahwa
pada menit tersebut merupakan waktu kerja yang baik untuk dilakukannya
pengukuran menentukan kadar formalin pada berbagai kosentrasi.
 Screenshot kurva serapan panjang gelombang (CONTOH)
KESIMPULAN
(Menjawab tujuan praktikum, mengelaborasikan tabel hasil praktikum yang diberikan,
menginterpretasikan hasil yang sudah diberikan)
Lampiran 1. Jurnal. *jurnal dilarang sama dengan contoh di bawah ini! Tiap-tiap orang
dalam satu kloter harus menggunakan jurnal yang berbeda.