Praktikum Fisiologi dan Perkembangan Tumbuhan BA-2104

Hidroponik 2: Analisis Kandungan Klorofil, Amonium, Nitrat dan

Pati pada Tanaman Ipomea reptans

Bima Fitra Aulia | 11418018

Asisten
Ricky Selamet Rahayu | 11417029

Jl. Let. Jend. Purn. Dr. (HC) Mashudi No.1 / Jalan Raya Jatinangor KM 20.75, Desa Sayang,
Kecamatan Jatinangor, Kabupaten Sumedang, Jawa Barat – Indonesia, 45363.

ABSTRAK
Klorofil adalah sebuah pigmen yang berperan dalam tumbuhan dan mempengaruhi
proses fotosintesis. Proses fotosintesis dilakukan dalam tumbuhan di kloroplas. Klorofil akan
menyerap cahaya dan mengubahnya menjadi energi kimia. Klorofil terbagi menjadi 2 yaitu
klorofil a dan b. Menentukan kadar klorofil dapat dilakukan dangen menggunakan metode
kromatografi dan penentuan kadar klorofil, satuan dari klorofil adalah mg/L. Amonium dan
nitrat merupakan dua senyawa penghasil unsur Nitrogen yang tinggi. Unsur N sangat
diperlukan oleh tanaman untuk dapat tumbuh dan berkembang karena unsur N berperan
dalam fotosintesis dan metabolisme pada daun. Percobaan menentukan kadar amonium dan
nitrat dapat dilakukan dengan menggunakan beberapa peraksi lalu dispketrofotometer. Pati
merupakan sumber energi cadangan bagi tanaman. Pati dapat diperoleh dari nutrisi yang
didapatkan tanaman dan dapat diuji dengan menggunakan pereagen Brussin.
Kata Kunci: Klorofil, Nitrogen, Pati.

PENDAHULUAN menyerap panjang cahaya yang berbeda.

Klorofil adalah sebuah pigmen
yang berperan dalam tumbuhan dan
mempengaruhi proses fotosintesis. Proses
fotosintesis dilakukan dalam tumbuhan di
kloroplas. Klorofil akan menyerap cahaya
dan mengubahnya menjadi energi kimia.
Klorofil memiliki fungsi sebagai sumber
penyerapan energi matahari, memicu
fiksasi CO2, dan proses anabolisme
karbohidrat. Terdapat dua jenis klorofil
yaitu klorofil a dan b, kedua klorofil ini
Klorofil b bewarna hijau muda dan
klorofil b berwarna hijau muda. Pigmen
lain dalam tanaman adalah karotenoid.
Karotenoid menyerap panjang gelombang
yang berbeda dibandingkan dengan
klorofil a dan b, karotenoid berperan
dalam membantu klorofil a dalam
fotosintesis karena energi yang diserap
karotenoid akan diteruskan ke klorofil a
untuk fotosintesis (Neil, et al., 2015)
 Kadar dari klorofil dapat
ditentukan dengan menggunakan metode,
salah satu metode yang digunakan adalah
Winterman de Mots. Metode Winterman
de mots dilakukan dengan cara
mengekstrak klorofil dari daun dengan
menggunakan pelarut etanol dan
kemudian diukur absorbansinya pada
panjang gelombang 649 nm dan 665 nm.
Winterman de Mots menyatakan bahwa
klorifl a dan b merupakan nilai selisih
antara nilai absorbansi pada panjang
gelombang 649 nm dan 665 nm dikali
dengan faktor pengali tertentu sementara
klorofil total adalah jumlah dari klorofil a
dan b (Gibson et al., 2017)
Spektrofotometer adalah sebuah
alat yang menilai nilai absorbansi dari
suatu larutan. Prinsip kerja
spektrofotometer adalah dengan
menembakan cahaya melalui
monokromator. Monokromator
menguraikan sinar yang masuk dari
sumber cahaya tersebut menjadi pita-pita
panjang gelombang yang diinginkan untuk
pengukuran suatu zat tertentu. Cahaya
yang ditembakan akan ada yang
diteruskan dan akan ada yang diserap oleh
suatu larutan yang diperiksa dengan kuvet.
Cahaya yang diserap akan menghasilkan
signal elektrik pada detektor, besarnya
signal elektrik akan di alirkan ke pencatat
dan dapat dilihat sebagai angka, ini biasa
disebut juga sebagai nilai absorbansi
(Triyatti, 2016)
Pemisahan pigmen klorofil dapat
dilakukan dengan cara kromatografi.
Kromatografi adalah metode pemisahan
molekul dengan menggunakan fase gerak
dan fase diam untuk pemisahaannya.
Molekul yang memiliki fase gerak akan
melewati kolom fase diam. Metode ini
dapat memisahkan segala macam molekul
menurut pergerakan pada kolom
(Kantasubrata, Loyniwati, Jamilah, &
Karossi, 2003)
Klorofil memiliki peranan yang
esensial dalam proses fotosintesis. Proses
fotosintesis merupakan reaksi berantai
yang amat panjang dan kompleks. Proses
ini tidak dapat dilakukan secara in-vitro
dengan menggunakan larutan klorofil
ataupun dengan menggunakan kloroplas
yang telah diisolir dari sel. Klorofil
membantu fotosintesis dalam menyerap
cahaya matahari dengan panjang
gelombang tertentu yang dapat
mengesitasi elektron pada fotosistem I dan
II (Riyono, 2007). Pati merupakan polimer
berantai panjang yang tersusun dari
struktur bercabang. Pati merupakan
karbohidrat cadangan bagi tanaman yang
biasanya terdapat dalam batang dan biji
suatu tanaman. Ketika tanaman tidak
mendapatkan asupan energi utama maka
tanaman akan menggunakan pati (Sakinah
& Kurniawansyah, 2018). Amonium dan
Nitrat memiliki peran esensial pada
tanaman. Amonium dan nitrat merupakan
pendonor unsur N yang paling mudah
ditangkap oleh akar tanaman, sehingga
semakin tinggi kadar amonium dan nitrat
dari larutan media maka semakin tinggi
kadar unsur N dalam media (Aziz & Nani,
2015)
Peran percobaan kali ini dalam
bidang Rekayasa Pertanian adalah kita
diharapkan mampu untuk merekayasa
suatu larutan hoagland untuk
pembudidaya sistem hidroponik sehingga
mendapatkan hasil yang kita inginkan
secara cepat. Tanaman akan sangat mudah
untuk menyerap nutrisi dengan proses
budidaya hidroponik dan dengan rekayasa
larutan hoagland yang digunakan maka
kita dapat membuat tanaman menjadi
seperti apa yang kita inginkan.
METODOLOGI
Alat-alat yang digunakan dalam
percobaan ini adalah batang pengaduk,
corong, gelas kimia 350 ml dan 500 ml,
gelas ukur 10 ml dan 25 ml, hot plate,
koin, kuvet spektrofotmeter, labu ukur 100
ml, mikropipet, mortar dan alu, neraca,
penggrasi, pipet volumetri, pipet tetes,
sentrifuge, spektrofotometer, tabung
falcon, vortex.
Bahan-bahan yang digunakan
dalam percobaan ini adalah aquades, asam
sulfat, etanol 96% dan 80%, kertas saring
kasar, NaCl, reagen Bendedict sulfat,
reagen I2KI, reagen Nisster, reagen
Seignt, tanaman Ipomea reptans.
Percobaan ini akan menentukan
kadar klorofil dari dain tanaman Ipomea
reptans dengan perlakuan nutrisi kontrol.
Menentukan jenis pigmen klorofil pada
daun Ipomea reptans dengan perlakuan
nutrisi kontrol. Menentukan kadar
amonium pada medium Ipomea reptans
dengan perlakuan nutrisi kontrol.
Menentukan kadar nitrat pada medium
Ipomea reptans dengan perlakuan nutrisi
kontrol. Menentukan kadar pati pada akar
Ipomea reptans dengan perlakuan nutrisi
kontrol.
Percobaan kuantifikasi kadar
klorofil dilakukan dengan cara pertama
ditimbang 1 g daun kangkung dan
dihaluskan dalam mortar dan alu, sampel
kemudian diberi etanol 96% sebanyak 50
ml dan disaring dengan kertas saring.
Kedua dimasukan kedalam labu ukur 100
ml dan ditambahkan alkohol sampai
volume 100 ml. Kemudian dibaca
absorbansinya pada 649 nm dan 665 nm
Percobaan pemisahaan pigmen
klorofil metode biasa memiliki cara kerja
pertama ekstrak daun kangkung diletakan
ke dalam kontainere. Kedua diletakan
kertas kromatografi dengan ujung segitiga.
Ketiga dicelupkan ke dalam larutan
sampai batas segitiga dan kemudian
dibiarkan dengan tegak lurus sampai
terjadi perubahan warna dan sudah tidak
naik lagi.
Percobaan pemisahan klorofil
daun metode koin memiliki cara kerja
pertama daun diletakan diatas kertas
kromatografi dengan ujung segitiga dan
batas segitiga 0,5 cm. Kemudian daun
digerus perlahan dengan koin hingga daun
terluka sedikit. Ketiga kertas kromatografi
direndam dalam larutan etanol 96% tegak
lurus hingga ujung segitiga terendam dan
dibiarkan hingga tidak naik lagi.
Percobaan kuantifikasi nitrat
dengan metode Brussin memiliki cara
kerja pertama diambil 10 ml sampel
medium hoagland dan ditambahkan
dengan 2 ml NaCl, 10 ml H2SO4, 0,5
reagen Brussin sulfat. Kedua diaduk dan
dipanaskan pada oenangas air suhu didih
selama 20 menit. Ketiga diambil larutan
ke kuvet dan diukur absorbansinya pada
507 nm.
Percobaan kuantifikasi amonium
dengan reagen Nessler memiliki cara kerja
pertama diambil 10 ml medium hoagland
lalu ditambahkan 2 tetes larutan Seignette.
Kedua ditambahkanreagen Neissler
sebanyak 200 mikroL, didiamkan selama
10 menit dan dibaca absorbansinya pada
420 nm.
Metode perhitungan pati memiliki
cara kerja pertama diambil 1g dan
ditambahkan dengan nitrogen cair sampel
akar kangkung dan dihaluskan. Kedua
ditambahkan etanol 80% 10 ml dan
dimasuka kedalam tabung falcon. Ketiga
diinkubasi di penangas air 90 deracat
celcius selama 10 menit dan disentrifuge
1500 g (2500 rpm) 25 derajat celcius
selama 8 menit. Keempat dibuang
supernatannya hingga didapatkan
peletnya, diamkan selama 15 menit dan
ditambahkan dengan aquades 20 ml dan
dipindahkan ke tabung falcon dan
dihomogenkan. Terakhir dimasukan ke
kuvet dan dibaca absorbansinya pada 620
nm.
HASIL DAN PEMBAHASAN
Pecobaan ini menggunakan reagen
Etanol karena klorofil memiliki sifat kimia
yang hanya larut pada pelarut organik
yang lebih polar, contohnya etanol dan
klorofom (Ai & Banyo, 2011). I2KI
digunakan karena I2KI merupakan
pendeteksi polisakarida, dimana pati
merupakan salah satu polisakarida (Ratna
& Yulistiani, 2015). Larutan Nessler
terdiri dari larutan basa merkuri (II) iodida
dalam kalium iodida (K2HgI4). Reagen
Neissler akan bereaksi dengan amonia dan
akan membentuk dispersi koloid berwarna
kuning coklat sehingga intensitas warna
tersebut memudahkan pengukuran nilai
absorbansi (Suparno, 2019). Penambahan
larutan Seignette berfungsi untuk
membentuk garam kompleks dalam
amonia serta menstabilkan amonia
(Suparno, 2019). Larutan yang
mengandung nitrat apabila direaksikan
dengan Brusin dalam larutan Asam Suldat
akan membentuk warna kuning yang khas,
sehingga absorbansi bisa terukur pada
spektrofotometer (Nasir et al., 2009).
Menurut Rosang (2016) nilai Rf
dari suatu larutan berklorofil dapat
ditentukan dengan mengukur panjang
hasil tambatnya. Klorofil b akan bewarna
hijau muda dan pada jarak 2,7 dan
memiliki nilai Rf 0,33. Klorofil a hijau tua
pada jarak 3 cm dan Rf 0,37. Karotenoid
bewarna kuning pada jarak 3,3 cm dan Rf
0,41. Percobaan dengan metode biasa ini
mendapatkan hasil pada jarak 3 cm hijau
muda dengan Rf 0,54, 3,4 cm hijau tua Rf
0,072 dan pada 3,7 cm kuning Rf 0,054.
Pada percobaan dengan metode koin pada
jarak 1,4 cm Rf 0,378, 1,9 cm Rf 0,135
dan 2,8 cm kuning Rf 0,243. Percobaan
dengan menggunakan metode koin
memiliki nilai Rf yang lebih besar karena
klorofil berada langsung dalam kertas
kromatografi sehingga pemisahan pigmen
lebih banyak dan cepat.
Kandungan klorofil dapat
ditentukan sebagai salah satu kadar
dengan satuan mg/L. Menurut Setiari dan
Nurcahyati (2009) kandungan klorofil
pada tanaman kangkung segar adalah
16,7667 mg/L. Percobaan menentukan
kadar klorofil dengan perlakuan kontrol
dengan rumus
klorofil a :[13,7 x ( A . 665 ) ]−[5,67 x ( A .649 ) ]
klorofil b : [ 25,8 x ( A .6 49 ) ] −[7,70 x( A .665)]
klorofil total : klorofila+ klorofilb
Dengan memasukan semua parameter
yang diketahui, daun Ipomea reptanns
memiliki kadar klorofil total 16,80275
mg/L, hal ini menunjukkan bahwa
perlakuan kontrol optimum dalam
memberikan asupan klorofil yang cukup
untuk tanaman karena media perlakuan
kontrol kaya akan unsur N dan P yang
mendukung terjadinya fotosintesis di
daun.
Percobaan menentukan kadar
amonium dalam larutan media hoagland
mendapatkan nilai absorbansi y=2,29,
dengan menggunakan persamaan
−3
y=−0,0705+3,7373 x 10 dan dengan
aljabar sederhana didapat kadar amonium
larutan hoagland adalah 631,5719 ppm.
Percobaan menentukan kadar nitrat dalam
larutan media hoagland mendapatkan nilai
absorbansi larutan 1,3693, dengan
menggunakan persamaan
−3 −4
y=9,6 x 10 +3 , 2437 x 10 dengan
menggunakan aljabar sederhana
didapatkan nilai kadar nitrat 41919,8179
ppm. Menurut Pramitasari (2016) kadar
amonium dan nitrat merupakan salah satu
sumber utaman unsur N untuk tanaman. Kadar nitrat medium tanaman
Kedua senyawa tersebut merupakan Ipomea reptans dengan perlakuan kontrol
senyawa yang biasa diserap oleh tanaman adlaah 4191,82 ppm.
untuk pertumbuhan daun dan metabolisme Kadar pati dari akar tanaman
fotosintesis. Percobaan menunjukkan Ipomea reptans dengan perlakuan kontrol
bahwa kadar amonium dan nitrat dalam adalah 3504,7285 pp.
larutan hoagland cukup tinggi
menandakan bahwa larutan bisa
mencukupi kebutuhan nutrisi yang
dibutuhkan tanaman.
Percobaan menentukan kadar pati
pada akar tanaman Ipomea reptans
mendapatkan nilai absorbansi y=1,776
dengan persamaan
−3 −4
y=−9,6592 x 10 +5,094 x 10 dan
dengan aljabar sederhana mendapatkan
nilai kadar kandungan pati 3504,7285
ppm. Menurut Riyono (2007) kandungan
pati dalam suatu tanaman cendering
berada di batang dan akar yang merupakan
cadangan karbohidrat bagi tanaman.
Semakin tinggi nilai kadar pati yang ada
maka semakin banyak energi cadangan
tanaman tersebut. Larutan dengan
perlakuan kontrol memiliki banyak
kandungan pati karean nutrisi yang
dibutuhkan tanaman sudah tersedia semua
sehingga tanaman memiliki banyak
cadangan energi.

KESIMPULAN
Kadar klorofil total daun tanaman
Ipomea reptans adalah 16,80275 mg/L
Jenis pigmen dan nilai Rf pada
daun tanaman Ipomea reptans adalah
klorofil a dan b, karotenoid. Nilai Rf pada
metode biasa untuk klorofil a 0,072,
klorofil b 0,54 dan karotenoid 0,054.
Metode koin klorofil a 0,135,klorofil b
0,378 dan karotenoid 0,243.
Kadar amonium medium tanaman
Ipomea reptans dengan perlakuan kontrol
adalah 631,5719 ppm.
DAFTAR PUSTAKA
Ai, N. S., & Banyo, Y. (2011).
"Konsentrasi Klorofil Daun Sebagai
Indikator Kekurangan Air pada
Tanaman". Jurnal Ilmiah Sains,
11(2): 166–173.

Aragno, M., & Michael, J. (2005).The Living Soil. New Jersey: Science Publishers.

Aziz, A. A., & Nani, K. (2015). "KANDUNGAN AMONIUM DAN NITRAT TANAH PADA
BUDIDAYA BAYAM PUTIH DENGAN MENGGUNAKAN URIN MANUSIA". Jurnal
Bionature, 16(2): 86-90.

Djukri. (2005). "Pertumbuhan clan Produksi Ka'1gkung pada Berbagal Dosls Hara Malao clan
Mikro". Enviro, 5(1): 34-37.

Duaja, M. D. (2012). "PENGARUH BAHAN DAN DOSIS KOMPOS CAIR TERHADAP

PERTUMBUHAN SELADA (Lactuca sativa sp.)". Jurnal Pertanian Universitas Jambi,
1(1): 10-18.

Fikri, S. M., Indradewa, D., & Putra, E. T. (2015). "PENGARUH PEMBERIAN KOMPOS LIMBAH
MEDIA TANAM JAMUR PADA PERTUMBUHAN DAN HASIL KANGKUNG DARAT"
(Ipomoea reptans Poir.). Vegetalika, 4(2): 79-89.

Gibson, M., Kasman, & Iqbal. (2017). "Analisis Kualitas Daun Jeruk Kepyar Sebagai Bahan
Pewarna Pada Dye Sensitized Solar Cell". Jurnal Universitas Tadulako, 16(2): 31-40.

Halim, J. (2016). 6 Teknik Hidroponik. Jakarta: Penebar Swadaya.

Haryoto. (2009). Bertanam Kangkung Raksasa di Pekarang Rumah. Yogyakarta: Kanisius.

Havlin, L. J., Beaton, J. D., Tisdale, S. L., & Nelson, W. L. (2005). Soil Fertility and Fertilizers.
An introduction to nutrient management. Seventh Edition. New Jersey: Pearson
Education.

Herwibowo, K., & S., B. N. (2014). Hidroponik Sayuran. Jakarta: Penebar Swadaya.
Kantasubrata, J., Loyniwati, Jamilah, & Karossi, A. T. (2003). "KROMATOGRAFI LAPISAN TIPIS
(KLT) DAN KROMATOGRAFI CAIRAN KINERJA TINGGI (KCKT) DARI SOLASODIN, AD
DAN ADD". JKTI, 3(2): 61-68.

Lincoln, T., Eduardo, Z., Moller, I. M., & Murphy, A. (2015). Plant Physiology and
Development. Massachusetts: Sinauer Associates.

Nasir, S., K.A, W. W., & Apriani, R. (2009). "The Equivalency of Quality of Water in
Filtration Process and UF Membrane Process". Jurnal Teknik Kimia, 16(1): 46–54.

Neil, A. C., Reece, J. B., Urry, L. A., Cain, M. L., Wasserman, S. A., Minorsky, P. V., & Jackson,
R. B. (2015). Biology. United States: Pearson Education.

Pramitasari, H. E., Wardiyati, T., & Nawawi, M. (2016). "PENGARUH DOSIS PUPUK NITROGEN
DAN TINGKAT KEPADATAN TANAMAN TERHADAP PERTUMBUHAN DAN HASIL
TANAMAN KAILAN (Brassica oleraceae L.)". Jurnal Produksi Tanaman, 4(1): 49-56.

Rahayu, W. S., Mukarlina, & Linda, R. (2018). "Pertumbuhan Tanaman Selada (Lactuca sativa
L. var. New Grand Rapids) menggunakan Teknologi Hidroponik Sistem Terapung
(THST) Tanpa Sirkulasi dengan Penambahan Giberelin (GA3)". Protobiont, 7(3): 62-
67.

Ratna, A., & Yulistiani, F. (2015). "Pembuatan Gula Cair dari Pati Singkong Dengan
Menggunakan Hidrolisis Enzimatis". Jurnal Fluida, 11(2): 9–14.

Riyono, S. H. (2007)." BEBERAPA SIFAT UMUM DARI KLOROFIL FITOPLANKTON". Oseana:

32(1), 23-31.

Rosang, C. I., & Wagey, B. T. (2016). "PENENTUAN KANDUNGAN PIGMEN KLOROFIL PADA
LAMUN JENIS Halophila ovalis DI PERAIRAN MALALAYANG". Jurnal Pesisir Laut
Tropis, 1(1): 15-19.

Sakinah, A. R., & Kurniawansyah, I. S. (2018). "ISOLASI, KARAKTERISASI SIFAT FISIKOKIMIA,

DAN APLIKASI PATI JAGUNG DALAM BIDANG FARMASETIK". Farmaka, 16(2): 430-
442.

Satria, N., Wardati, & Khoril, M. A. (2015). "PENGARUH PEMBERIAN KOMPOS TANDAN
KOSONG KELAPA SAWIT DAN PUPUK NPK TERHADAP PERTUMBUHAN BIBIT
TANAMAN GAHARU (Aquilaria malaccencis)". JOM Faperta, 2(1): 1-13.

Sembodo, S. A., N., E. E., & W., K. P. (2018). "Respon Tanaman Selada Merah (Lactusa sativa
sar. Lollorosa) terhadap Media Tanam dan Konsentrasi Nutrisi pada Hidroponik
Sistem Sumbu". Jurnal Produksi Tanaman, 6(9): 2391-2397.

Setiari, N., & Nurcahyati, Y. (2009). "Eksplorasi Kandungan Klorofil pada beberapa Sayuran
Hijau sebagai Alternatif Bahan Dasar Makanan Tambahan". BIOMA, 11(1): 6-10.
Siregar, J., Triyono, S., & Suhandy, D. (2015). "PENGUJIAN BEBERAPA NUTRISI HIDROPONIK
PADA SELADA (Lactuca sativa L.) DENGAN TEKNOLOGI HIDROPONIK SISTEM
TERAPUNG (THST) TERMODIFIKASI". Jurnal Teknik Pertanian Lmapung, 4(1): 65-72.

Subandi. (2013). "PERAN DAN PENGELOLAAN HARA KALIUM UNTUK PRODUKSI PANGAN
INDONESIA". Pengembangan Inovasi Pertanian, 6(1): 1-10.

Suparno. (2019). Penentuan Kadar Amonia di Perairan Teluk Lampung dengan

Spektrofotometer UV-Vis. Universitas Lampung.

Suryaningsih, Said, I., & Rahman, N. (2018). "ANALISIS KADAR KALSIUM (Ca) DAN BESI (Fe)
DALAM KANGKUNG AIR (Ipomeae Aquatica Forsk) DAN KANGKUNG DARAT
(Ipomeae Reptan Forsk) ASAL PALU". Jurnal Akademika Kimia, 7(3): 135-135.

Triyatti, E. (2016). "SPEKTROFOTOMETER ULTRA-VIOLET DAN SINAR TAMPAK SERTA

APLIKASINYA DALAM OSEANOLOGI". Oseana, 10(1): 39-47.

Wibowo, Y. H., & Sitawati. (2017). :RESPON TANAMAN KANGKUNG DARA (Ipomea reptans)
DENGAN INTERVAL PENYIRAMAN PADA PIPA VERTIKAL:". Plantropica Journal of
Agricultural Science , 2(2): 148-154.

Zuhaida, L., Ambawari, E., & Sulistyaningsih, E. (2010). "PERTUMBUHAN DAN HASIL SELADA
(Lactuca sativa L.) HIDROPONIK DIPERKAYA Fe". Jurnal Alumni Gajah Mada, 2(1): 1-
10.