Nama : Hafidz Ar Rashif Habibi

NPM : 230110200159

Kelas : Perikanan C 2020

Matakuliah : Bioteknologi Perikanan

Review Jurnal

Characterization and Identification of Allergen Protein in Shrimp Before and After Heated with SDS-PAGE
Method

1. Abstrak
Alergi makanan adalah salah satu alergi yang paling umum di masyarakat Indonesia.
Umumnya saat anak usia 5-6 tahun alergi makanan akan hilang, kecuali alergi kacang tanah dan
alergi makanan laut, seperti ikan, kerang dan krustasea. Penelitian ini bertujuan untuk
mengetahui pola pemisahan protein alergen pada udang menggunakan metode anion exchange
column chromatography dan mengidentifikasi protein alergen pada udang menggunakan
metode sodium dodecyl sulfate-polyacrylamide gel electrophoresis (SDS-PAGE). Ekstraksi
protein dari udang menggunakan Phosphate buffer saline (PBS) pH 7,2 dan disentrifugasi pada
10.000 rpm selama 10 menit pada suhu 4°C. Pemisahan protein dilakukan dengan metode
kromatografi kolom penukar anion, dan fraksi yang diperoleh diukur pada panjang gelombang
280nm. Hasil tertinggi pada absorbansi diidentifikasi dengan menggunakan SDS-PAGE.
Elektroforesis gel poliakrilamida digunakan untuk mengetahui profil protein dan berat molekul
ekstrak udang. Pewarnaan pita protein menggunakan pewarnaan perak. Data dianalisis secara
deskriptif berdasarkan nilai migrasi pita protein sampel dibandingkan dengan pita protein
penanda (Rf). Hasil analisis profil alergen protein pada udang menggunakan SDS-PAGE
menunjukkan bahwa udang mengandung pita protein dengan berat molekul 37,77 kDa untuk
udang masak dan 37,03 kDa untuk udang segar.

2. Bahan dan metode

Sampel udang yang digunakan adalah udang segar 150 gram dan udang 150 gram yang
diperoleh dari pasar ikan disubang, Jawa Barat. Kemudan dilakukan proses ekstraksi dengan
menghancurkan dan menghomogenkan udang menggunakan blender dengan phosphate
buffered saline (PBS) pH 7,2 sampai homongen. Homogenisasi dilakukan dengan alat centrifuge
selama 10 menit pada suhu 4°C pada 10.000 rpm. Pemisahan protein alergen dari ekstrak kasar
yang telah diperoleh dengan cara homogenisasi dengan ion exchange chromatography. Pada
fase diam menggunakan Sephadex DEAE-25 anion exchange kemudian pada fase gerak
menggunakan PBS pH 7,2 dan gradien garam. Fraksi yang disimpan masing masing sebanyak 2
ml kemudian diukur absorbansinya pada panjang gelombang 280nm.
Elektroforesis dilakukan dengan menempatkan sampel yang telah disiapkan dan spidol
kedalam wadah SDS-PAGE