LAPORAN AKHIR

PRAKTIKUM METODE PEMISAHAN

CABAI (Capsicum frutescens)

Kelas:

Kelompok:

1. Amalia Venturini (1513015085)

2.Arief Risky Nugroho (1513015097)

3. Asri Dwi Endah Dewi Pramesthi (1513015105)

4. Gina Ardian Putri Oktafiani (1513015063)

 LABORATORIUM KIMIA FARMASI

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS MULAWARMAN

SAMARINDA

2016

LEMBAR PENGESAHAN

Sampel : Cabai
Praktikum : Metode Pemisahan Kimia
Asisten : 1. Dina Sofia
2. WulanMaulida
DosenPengampu : 1. Akhmad Jaizzur Rija’i, S.Farm.,M.Si
2. M. Arifuddin, M.Si., Apt.
3. Viriyanata Wijaya, S.Farm., M.Farm., Apt.
Praktikan
a. Amalia Venturini (1513015085)
b. Arief Risky Nugroho (1513015097)
c. Asri Dwi Endah Dewi Pramesthi (1513015105)
d. Gina ArdianPutri Oktafiani (1513015063)

Samarinda, 2016

Diperiksa Oleh Ketua

(Dina Sofia) (Asri Dwi Endah Dewi Pramesthi)

Mengetahui

(Akhmad Jaizzur Rija’i, S.Farm.,M.Si.)

 DAFTAR ISI

DAFTAR ISI.................................................................................................................1

Bab I Pendahuluan.......................................................................................................2

Bab II Tinjauan Pustaka.............................................................................................3

II. 1 Uraian Tumbuhan...........................................................................................3

II. 2 Ekstraksi...........................................................................................................4

II. 3 Fraksinasi..........................................................................................................4

II. 4 Metoda Pemisahan...........................................................................................4

II. 4. 1 Kromatografi Lapis Tipis............................................................................4

II. 4. 4 Kromatografi Lapis Tipis Preparatif.........................................................5

II. 4. 5 Kromatografi Lapis Tipis Sentrifugal (KROMATOTRON)...................5

II. 4. 6 Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi..........................................................5

Bab III Metodologi.......................................................................................................6

Bab IV Alat dan Bahan...............................................................................................7

IV. 1 Alat...................................................................................................................7

IV. 2 Bahan...............................................................................................................7

Bab V Prosedur Percobaan.........................................................................................8

V. 1 Ekstraksi...........................................................................................................8

V. 2 Fraksinasi..........................................................................................................8

V. 3 Kromatografi Lapis Tipis................................................................................8

V. 4 Kromatografi Konvensional............................................................................9

V. 5 Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi..............................................................9

Bab VI Pembahasan.....................................................................................................9

VI. 1 Ekstraksi..........................................................................................................9

VI. 2 Fraksinasi........................................................................................................9

1
 VI. 3 Kromatografi Lapis Tipis..............................................................................9

VI. 4 Kromatografi Konvensional........................................................................10

VI. 5 Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi..........................................................10

Bab VII Kesimpulan dan Saran...............................................................................10

VII. Kesimpulan.....................................................................................................10

VII. Saran...............................................................................................................10

Daftar Pustaka............................................................................................................11

Bab I Pendahuluan

Cabai merupakan salah satu komoditas sayuran penting dan bernilai ekonomi
tinggi di Indonesia. Tanaman ini dikembangkan baik di dataran rendah maupun
dataran tinggi. Menurut Badan Pusat Statistik (2009), produktivitas cabai nasional
Indonesia tahun 2008 adalah 6.44 ton ha-1. Angka tersebut masih sangat rendah jika
dibandingkan dengan potensi produksinya. Menurut Purwati et al. (2000) potensi
produktivitas cabai nasional dapat mencapai 12 ton ha-1 (Syukur, 2010).

Tanaman Cabai (Capsicum frutescens) yang merupakan tanaman perdu

dengan rasa buah pedas ini sangat familiar di kehidupan kita. Mayoritas penduduk
Indonesia merupakan penggemar dari tanaman tersebut. Tanaman ini kerap
dibudidayakan di pekarangan rumah sebagai tanaman sayur atau tumbuh liar pada

2
tanah kosong. Tumbuhan ini berasal dari Amerika Tropik, menyukai daerah kering,
dan ditemukan pada ketinggian 0,5-1250 mdpl. Perdu setahun dengan banyak
percabangan dan tinggi sekitar 50-100 cm ini, memiliki batang yang berbuku-buku
dengan bagian atas bersudut. Daun tunggal bulat telur, ujung meruncing, pangkal
menyempit, tepi rata, dan berwarna hijau, bertangkai dan tidak berselingan.

(Dalimartha, 2000).

Cabai dengan rasa pedas, dengan sifat panas, digunakan untuk dapat
meningkatkan nafsu makan, menyembuhkan batuk berdahak, migraine, serta
melegakan rasa hidung tersumbat pada sinusitis. Memiliki kandungan kimia pada
buahnya berupa kapsaisin, karotenoid, alkaloid, resin, vitamin khususnya A dan C.
Kapsaisin terkandung pada buah cabai yang memberikan rasa pedas, dapat berkhasiat
untuk melancarkan aliran darah serta pematirasa kulit. Sedangkan pada biji cabai
mengandung solanine, solamargine, solasodine, solasomine, dan steroid saponin atau
kapsisidin yang dapat berkhasiat sebagai antibiotik (Dalimartha, 2000).

3
 Bab II TinjauanPustaka

II. 1 UraianTumbuhan

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 2 Ekstraksi

(…………………………………………………………………………………………
…………………..

4
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 3 Fraksinasi

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 4 MetodaPemisahan

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..

5
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 4. 1 Kromatografi Lapis Tipis

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 4. 2 Kromatografi Cair Vakum

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 4. 3 Kromatografi Konvensional

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

6
II. 4. 4 Kromatografi Lapis Tipis Preparatif

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 4. 5 Kromatografi Lapis Tipis Sentrifugal (KROMATOTRON)

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

II. 4. 6 Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi

(…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..
…………………………………………………………………………………………
…………………..……………………………)

7
 Bab III Metodologi

Ekstraksi dengan metode maserasi diawali dengan preparasi sampel cabai

terlebih dahulu. Sampel cabai yang telah didapatkan kemudian dicuci hingga bersih
dan dipotong-potong menjadi 2-4 kali lebih kecil kemudian dihaluskan dengan
bantuan blender dan dikeringkan. Proses pengeringan diawali dengan mengangin-
anginkan sampel, kemudian sampel di oven dengan menggunakan suhu 50 oC hingga
kering. Sampel yang telah dikeringkan kemudian ditampung ke dalam toples serta
ditambahkan pelarut berupa methanol. Proses maserasi berlangsung selama 3 hari,

8
atau hingga pelarut telah jenuh. Dilakukan pengulangan atau re-maserasi hingga 3
kali, bertujuan agar senyawa yang terkandung pada sampel dapat terekstrak sempurna.
Hasil maserasi kemudian disaring menggunakan corong buchner dan kertas saring,
lalu diuapkan pelarut yang terkandung pada larutan hasil maserasi dengan
menggunakan bantuan alat rotary evaporator. Hasil ekstraksi atau ekstrak cair yang di
dapat kemudian ditampung di dalam mangkuk untuk diuapkan menjadi ekstrak semi
solid.

Ekstrak yang berupa semisolid kemudian di fraksinasi menggunakan 3 jenis

pelarut dengan tingkat kepolaran yang berbeda, dari non polar-polar, diantaranya n-
heksan, etil asetat, dan etanol. Fraksinasi yang dilakukan menggunakan metode
ekstrasi cair-padat (ECP) dengan bantuan magnetic stirrer. Metode tersebut
digunakan karena disaat ekstrak basah dilarutkan ke dalam air, ekstrak basah tersebut
tidak dapat terlarut sempurna. Ekstrak semisolid yang didapat kemudian ditimbang
sebanyak 10 gram dan diletakkan ke dalam erlenmeyer, ditambahkan pelarut pertama
yaitu n-heksan dan dimasukkan bola magnet untuk membantu proses pengadukan.
Setelah dilakukannya proses pengadukan, ditunggu beberapa saat hingga terdapat
endapan. Bagian yang terlarut ditampung pada botol selai, sedangkan bagian yang
mengendap dilarutkan kembali dengan n-heksana hingga hasil pengadukan
menunjukkan warna pelarut yang tidak lagi keruh, hal tersebut menandakan jika
ekstrak tidak dapat lagi terlarut dalam n-heksana melainkan harus dilarutkan
menggunakan pelarut dengan tingkat kepolaran yang lebih tinggi. Dilakukan hal yang
sama dengan menggunakan pelarut lainnya seperti etil asetat dan etanol. Hasil fraksi
yang didapat kemudian ditampung di dalam botol selai dan diangin-anginkan.

Hasil fraksi yang didapatkan kemudian diuji kandungan senyawa metabolit

yang terkandung di dalamnya menggunakan metode Kromatografi Lapis Tipis (KLT).
Plat KLT yang akan digunakan mula-mula diaktifkan dengan cara di oven selama 15
menit dengan suhu 150 oC. Setelah plat KLT siap, kemudian dipotong-potong dengan
ukuran 7 cm. Plat KLT yang telah dipotong, diberi batas atas dan bawah dengan
ukuran 1 cm pada bagian bawah dan 0,5 cm pada bagian atas. Kemudian disiapkan
hasil fraksi n-heksana, etil asetat, dan etanol yang akan di totol pada plat KLT,
diencerkan sedikit fraksi dengan pelarut yang dapat melarutkan di dalam botol vial.
Ditotol fraksi dengan menggunakan pipa kapiler pada batas bawah plat KLT. Setelah
itu, dimasukkan plat KLT pada chamber (gelas) yang berisi eluen n-heksana dan etil

9
asetat dengan perbandingan dimulai dari yang non-polar hingga polar. Digunakan
eluen berupa n-heksan:etil asetat (9:1), (8:2), (7:3), dan (5:5). Setelah eluen terelusi
hingga batas atas plat KLT, plat KLT disinari dengan UV portable pada panjang
gelombang 254 nm dan 366 nm. Hasil noda dengan perbandingan eluen terbaik akan
dilanjutkan pada kromatografi kolom konvensional.

Proses pemisahan dengan menggunakan metode Kromatografi Kolom

Konvensional (KKK), diawali dengan mempersiapkan alat dan bahan yang akan
digunakan. Kolom dengan diameter 2 cm disiapkan, dijepit pada statif dan klem, dan
dibersihkan bagian dalamnya dengan dialiri dengan etanol. Dimasukkan sedikit kapas
yang telah dibentuk bulat kecil ke dalam kolom, untuk dapat menahan silika gel yang
akan dimasukkan. Ditimbang silika gel sebanyak 10 g, dilarutkan dengan eluen
berupa n-heksana:etil asetat (9:1), kemudian dimasukkan ke dalam kolom, dirapatkan
dan jangan sampai terbentuk celah atau retakan. Disiapkan imprek, dengan
menimbang 2 g fraksi n-heksana dan digerus bersamaan dengan silika gel hingga
berbentuk serbuk. Imprek yang telah disiapkan dimasukkan ke dalam kolom secara
perlahan dan jangan sampai membuat keretakan pada silika gel yang telah
dimasukkan sebelumnya. Kemudian ditambahkan eluen n-heksana:etil asetat (9:1) ke
dalam kolom secukupnya, dibuka keran kolom secara perlahan, dan ditampung cairan
hasil partisi menggunakan botol vial. Botol vial yang mengandung kromatogram
kemudian diuapkan pelarutnya hingga kering.

Hasil partisi kemudian diuji kemurniannya dengan menggunakan

Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi (KLT 2D). Disiapkan plat KLT berukuran 5x5
cm, diberi batas bawah pada 2 sisinya secara berurutan, dan batas atas pada 2 sisi
lainnya. Digunakan 2 macam eluen yang berbeda tingkat kepolarannya atau 2 sistem
untuk melihat apakah masih terdapat zat pengotor di bawah maupun di atas nilai Rf
yang didapat. Digunakan eluen pertama berupa n-heksana:etil asetat (7:3) dan
kloroform:etil asetat (7:3). Di elusi menggunakan eluen pertama hingga batas atas,
kemudian di elusi lagi menggunakan eluen ke dua hingga batas atas pula. Hasil elusi
dengan 2 sistem eluen kemudian disinari dengan sinar UV 254 nm dan 366 nm.

10
 Bab IV Alat dan Bahan

IV. 1 Alat

Peralatan yang digunakan dalam praktikum ini adalah Toples, batang pengaduk,
timbangan analitik, rotary evaporator, mangkok, waterbath, blender, oven, corong
pisah, gelas kimia, magnetic stirrer, statif dan klem, gelasukur, pipetukur 1mL,
pipetukur 5mL, propipet, botol semprot, lampu UV 254nm dan UV 366 nm, pipa
kapiler, cutter, chamber, penggaris, penutup chamber, pinset, hotplate, pipet tetes,
kolom kromatografi, cawan porselen, mortir stamper, spatel.

IV. 2 Bahan

Bahan yang digunakan dalam praktikum ini adalah serbuk cabai rawit, ekstrak
cabai rawit, methanol, plastic wrap, n-heksan, etilasetat, n-butanol, aquades, kertas
saring, etanol, plat KLT, kloroform, H 2SO4, silica gel GF 60 254, FeCl3 1%,
Aluminium foil, Pereaksi Dragendroff, Pereaksi Lieberman Burchard.

11
 Bab V Prosedur Percobaan

V. 1Ekstraksi (Maserasi)

Disiapkan alat dan bahan, rendam serbuk cabai dalam larutan methanol,
tunggu rendaman tersebut selama 3 hari hingga jenuh, kemudian ekstrak tersebut
disaring menggunakan kertas saring dan corong, setelah itu, ekstrak diuapkan
menggunakan rotary evaporator, Ekstraksi dilakukan sebanyak 3 kali, dan Hitung
rendemen ekstrak.

V. 2 Fraksinasi

Ditimbang ekstrak kering sampel 3-5 gram, dimasukkan kedalam Erlenmeyer,

kemudian ditambahkan dengan pelarut dimulai dari pelarut non polar yaitu n-heksan,
setelah itu diaduk menggunakan magnetic stirrer, yang larut n-heksan dipisahkan,
kemudian yang larut n-heksan dipisahkan dengan endapannya, kemudian larutan n-
heksan diuapkan hingga diperoleh fraksi etanol. Dilanjutkan dengan langkah yang
sama dengan pelarut etil asetat dan etanol. Fraksi ekstrak yang diperoleh dari
beberapa pelarut dihitung rendemennya.

12
V. 3 Kromatografi Lapis Tipis

Dibuat eluen, Di cari perbandingan eluen yang sesuai dengan sifat dari
ekstrak, dan eluen yang di dapat dengan perbandingan n-heksan:etilasetat (9:1).
Dimasukkan kedalam chamber. Setelah didapat perbandingan eluen yang tepat,
ekstrak hasil fraksi diencerkan, kemudian setelah diencerkan ditotolkan ekstrak di plat
KLT menggunakan pipa kapiler, kemudian plat tersebut di masukkan kedalam
chamber, lihat noda yang terdapat di plat, jika tidak terlihat secara visual, gunakan
pereaksi H2SO4 10%, dan sinar UV 254 nm dan 366 nm. Setelah didapat hitung nilai
Rf.

V. 4 Kromatografi Konvensional

Persiapkan kolom, gerus silica gel den gan ekstrak cabai hingga terbentuk
serbuk, kemudian dibuat bubur silica gel sebagai fase diam, masukkan bubur silica
tersebut kedalam kolom, dan dilanjutkan dengan memasukkan serbuk cabai, danbuat
eluen yang sesuai dengan perbandingan sebelumnya n- heksan:etilasetat (9:1). Dan
masukkan kedalam kolom. Kemudian buka kran kolom untuk menghasilkan isolat
yang ditampung dalam botol vial dan hitung berapa vial yang didapat.

V. 5 Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi

Dibuat 2 sistem dengan eluen berbeda, yang pertama eluen non polar dengan
perbandingan n-heksan:etilasetat (7:3) dan yang kedua eluen polar
kloroform:etilasetat (7:3). Setelah itu dimasukkan ke chamber masing- masing. Hasil
isolat dari KKK yang berbentuk Kristal diencerkan menggunakan pelarut non polar,
kemudian totolkan larutan disatu spot tersebut diatas plat KLT dengan ukuran 5cm x
5cm, masukkan plat tersebut dalam chamber disistem pertama dan lihat noda yang
terlihat, keluarkan plat tersebut dan diangin-anginkan plat. Dan masukkan kembali
plat dengan arah yang berbeda kedalam sistem kedua dan lihat noda. Lihat noda
dengan sinar UV 254 nm dan UV 366 nm. Hitung nilai Rf.

13
14
15
 Bab VI Pembahasan

VI. 1 Ekstraksi

Ekstraksi adalah teknik pemisahan suatu senyawa berdasarkan perbedaan

distribusi zat terlarut diantara dua pelarut yang saling bercampur. Metode ekstraksi
yang dilakukan pada percobaan kali ini adalah menggunakan metode maserasi.
Digunakannya metode maserasi dikarenakan proses ekstraksi dengan metode maserasi
sudah mampu mengekstrak sample dengan sempurna. Pada ekstraksi dengan metode
maserasi ini menggunakan pelarut metanol hal ini dikarenakan metanol sifatnya yang
diketahui adalah sebagai pelarut semipolar sehingga diharapkan dapat menarik semua
senyawa metabolit sekunder yang ada dalam simplisia(Agoes, 2007).

Setiap 1x24 jam pelarut diganti dengan yang baru hingga pelarut sudah terlihat
bening atau tidak pekat lagi. Pergantian pelarut bertujuan untuk menarik senyawa
yang belum tertarik dengan pelarut yang sebelumnya. Selanjutnya ekstrak dipekatkan
dengan alat rotary evaporator tujuan dari pemekatan adalah memekatkan konsentrasi
larutan sehingga didapatkan larutan dengan konsentrasi yang lebih tinggi.
Rendemen merupakan perbandingan antara ekstrak yang diperoleh dengan
simplisia awal. Perhitungan rendemen dilakukan bertujuan untuk mengetahui metode
ekstraksi apa yang paling baik untuk simplisia tersebut dan untuk mengetahui baik
atau tidak cara pengerjaan ekstraksi yang dilakukan. Hasil rendemen untuk sampel
buah cabai adalah 6,85 % yang berarti bahwa jumlah bahan dan jumlah pelarut yang
digunakan dalam proses ekstraksi dapat mempengaruhi rendemen ekstrak yang
dihasilkan. Semakin tinggi jumlah pelarut yang digunakan, maka kemampuan pelarut
untuk mengekstrak suatu bahan semakin tinggi karena kontak antara bahan dengan
pelarut semakin besar.

Sampel Metode Berat simplisia Berat ekstrak Rendemen (%)

(g) (g)

Buah cabai Maserasi 278,57 19,1 6,85%

16
VI. 2 Fraksinasi

Metode fraksinasi pada kali ini adalah proses lanjutan dari proses ekstraksi.
Fraksinasi pada kali ini menggunakan metode cair-padat pada sampel buah cabai.
Penggunaan pelarut pada metode ini yang pertama digunakan dua pelarut yaitu air dan
n-hexan, hal ini bertujuan untuk menarik senyawa yang terkandung di dalam ekstrak
yang memiliki kepolaran yang tinggi dan senyawa yang memiliki kepolaran rendah
karena air merupakan pelarut yang sangat polar dan n-hexan pelarut yang sangat non
polar. Kemudian pelarut n-hexan diganti dengan pelarut yang lebih sedikit lebih polar
yaitu etil asetat yang kemudian diganti dengan pelarut yang lebih polar lagi yaitu
butanol. Pergantian secara bertahap bertujuan agar senyawa kimia dapat dipisahkan
terlebih dahulu antara polar dan non polar, kemudian secara bertahap senyawa yang
lebih polar dari n-hexan akan ditarik dengan pelarut-pelarut selanjutnya, hingga
senyawa tidak dapat lagi ditarik oleh (Rohman, 2009).

Hasil yang didapatkan dengan menggunakan sampel n-hexan pada buah cabai
sebanyak 6,6g menghasilkan rendemen 34,55%. Pada pelarut etil asetat pada sampel
buah cabai sebanyak 60,3g menghasilkan rendemen 1,57%. Pada pelarut butanol pada
sampel buah cabai sebanyak 0,3g menghasilkan rendemen 1,57%.

Sampel n-hexan (g) Etil asetat (g) Butanol (g)

Buah cabai 6,6 0,3 0,3

Rendemen 34,55% 1,57% 1,57%

VI. 3 Kromatografi Lapis Tipis

Pelaksanaan kromatografi lapis tipis menggunakan sebuah lapis tipis silica

atau alumina yang seragam pada sebuah lempeng gelas atau logam atau plastik yang

17
keras. Jel silika (atau alumina) merupakan fase diam. Fase diam untuk kromatografi
lapis tipis seringkali juga mengandung substansi yang mana dapat berpendar flour
dalam sinar ultra violet. Fase gerak merupakan pelarut atau campuran pelarut yang
sesuai. Percobaan ini menggunakan teknik kromatografi lapis tipis dengan suatu plat
tipis (aluminium) dan dalam KLT adsorbens yang digunakan berupa slika gel (SiO2)
yang tidak mengikat molekul air, sehingga noda yang tercipta lebih terfokus dan
tajam. Aluminium yang fungsinya untuk sebagai tempat berjalannya adsorbens.

(sudjadi, 1986).

Dalam percobaan ini menggunakan sampel fraksinasi N-Heksan sampel cabe, dengan
beberapa perbandingan eluen, namun dari sekian banyak eluen yang digunakan hanya
pada perbandingan N-heksan:Etilasetat (9:1) totolan pada KLT terlihat dengan
bantuan sinar UV 254 dan UV 366. Prinsip UV 254, lempeng akan berflouresensi
sedangkan sampel akan tampak berwarna gelap. Penampakan noda pada lampu UV
254 nm adalah karena adanya daya interaksi antara sinar UV dengan indikator
fluoresensi yang terdapat pada lempeng. Jika noda tetap tak terlihat dilakukan dengan
penyemprotan menggunakan H2SO4 10%, Prinsip H2SO4 10% berdasarkan
kemampuan asam sulfat yang bersifat reduktor dalam merusak gugus kromofor dari
zat aktif simplisia sehingga panjang gelombangnya akan bergeser ke arah yang lebih
panjang (UV menjadi VIS) sehingga noda menjadi tampak oleh mata. Kemudian
setelah ditotol, diukur jarak tempuh noda untuk melihat hasil nilai Rf.

Jarak Jarak
Nama Nilai
Fraksi Eluen Tempuh Tempuh
Sampel Rf
Noda Eluen

N-Heksan :
Cabe N-Heksan 3cm 4,5cm 0,66
EtilAsetat (9:1)

Berdasarkan percobaan yang telah dilakukan maka nilai Rf yang didapat adalah 0,66.
NilaiRf yang baik yang menunjukkan pemisahan yang cukup baik adalah berkisar
antara 0,2-0,8.

(Sudjadi, 1986).

18
VI. 4 Kromatografi Konvensional

Hasil kromatogram yang didapat dengan menggunakan eluen N-hexsan (9:1)

agar meminimalkan kontaminasi kolom dari pelarut dan bahan-bahan lain yang dapat
mengganggu aktivitas dari pemisahan komponen. Hasil yang diperoleh dari
kormatografi konvensional yaitu untuk vial 1-10 berwarna bening yang
mengindikasikan pelarut saja yang berisi. Vial 11-24 berwarna kuning bening. Vial
25- 48 berwarna kuning agak pekat Vial 49-52 berwarna orange kekuningan. Vial 53-
62 berwarna orange kecoklatan. Dan vial 63-72 berwarna coklat karena digunakan
nya pelarut metanol. Perbedaan warna ini kemungkinan mmenunjukkan perbedaan
senyawa yang terkandung pada setiap vial. Panjang kolom adalah 10cm dengan fase
diam yang menyerap atau mengabsorbsi komponen kimia dari sampel fase yang tidak
larut dalam fase cair yaitu silica gel dan fase gerak nya adalah cairan (pelarut) yang
mengalir membawa komponen campuran sepanjang kolom.

VI. 5 Kromatografi Lapis Tipis 2 Dimensi

Pada kromatografi lapis tipis 2 dimensi dibuat 2 sistem dengan eluen berbeda,
yang pertama eluen non polar dengan perbandingan n-heksan:etil asetat (7:3) dan
yang kedua eluen polar kloroform:etilasetat (7:3).

Pelarut yang sesuai adalah pelarut kloroform:etil asetat (7:3) karena dapat menarik
dua noda pada dua arah yang berbeda dan menghasilkan noda yang tunggal yang
dapat dilihat menggunakan sinar UV 254 nm dan UV 366 nm. Plat yang digunakan
berupa aluminium. Perbandingan eluen pada profil KLT dimana akan memperpanjang
lintasan noda (Rf) dengan menunjukan senyawa tunggal pada sampel.

19
20
 Bab VII Kesimpulan dan Saran

VII. Kesimpulan

Berdasarkan hasil pengamatan yang di lakukan dapat disimpulkan bahwa:

a. Ekstrak cabai yang dihasilkan yaitu 19,1 gram.

b. Rendemen ekstrak cabai yaitu sebesar 6,85%.

c. Fraksi n-heksana yang didapat yaitu sebesar 6,6 gram dengan rendemen sebesar
34,55%, fraksi etil asetat sebesar 0,3 gram dengan rendemen sebesar 1,57%, dan
fraksi n-butanol sebanyak 0,3 gram dengan rendemen sebesar 1,57%.

d. Hasil kromatogram yang didapat yaitu untuk vial 1-10 berwarna bening yang
mengindikasikan pelarut saja yang berisi. Vial 11-24 berwarna kuning bening.
Vial 25- 48 berwarna kuning agak pekat. Vial 49-52 berwarna orange
kekuningan. Vial 53-62 berwarna orange kecoklatan. Dan vial 63-72 berwarna
orange kecoklatan.

e. Pelarut yang digunakan adalah kloroform:etilasetat (7:3) karena dapat menarik

dua noda pada dua arah yang berbeda dan menghasilkan noda yang tunggal
yang dapat dilihat menggunakan sinar UV 254 nm dan UV 366 nm

VII. Saran

Diharapkan pada praktikum pemisahan kimia selanjutnya dilakukan dengan

sungguh-sungguh hingga didapatkan senyawa murni dari suatu simplisia. Dan setiap
proses diperhatikan dengan baik dan dijaga dengan baik.

21
 DaftarPustaka

Agoes. Goeswin. 2007. Tenologi Bahan Alam. ITB Press;Bandung

Dalimartha, S. 2000. Atlas Tumbuhan Obat Indonesia Jilid II. Trubus Agriwidya;
Jakarta.

Sudjadi. 1986. Metode Pemisahan. Kanisius; Yogyakarta.

Syukur, M., dkk. 2010. Evaluasi Daya Hasil Cabai Hibrida dan Daya Adaptasinya di
Empat Lokasi dalam Dua Tahun. J. Agron. Indonesia 38 (1) : 43-51.

22
Catatan: Daftarpustakadiurutkanberdasarkanalfabed,
ikutipolapenulisandaftarpustaka.

Nama Penulis.(Tahun).Judul.Nama jurnal/ bukupenerbit.Volume/ wilayahpenerbit,

hal. ………

Contohmelampirkanpustakapadaparagraf:

 KLT dapatmenggunakanberbagaijenisfasediamantara lain: silika gel, alumina,

selulosa, kalsiumhidroksida, celite, poliamida, sephadex, polivinilpirolidon
(PVP) sertacampurandaribahan-bahantersebut. Hal inilah yang
menyebabkankeserbagunaannya. Selainitu, KLT juga membutuhkanwaktu
yang sedikitdalampengembangannyakarenaadsorbennya yang
lebihrapatdibandingkanKKtsehinggamerupakanpilihandalamisolasisenyawalab
il. Kepekaannya juga merupakankelebihan yang
pentingdalamisolasisenyawabahanalam yang
berjumlahsangatkecildalamtumbuhan (Harborne, 1987).
 Aktivitasantioksidanekstrakmetanoldanetanoldaribatangdandauncelekopterhad
apradikalbebas DPPH ditunjukkanolehnilai IC50berturut-turutyaitu, 99,1 ±
0,17; 50,0 ± 0,13; 17,25 ± 0,16; dan 9,76 ± 0,18 µg/mL (Batubara, dkk.,
2009).

23
LAMPIRAN

24
Contohtabel, dangambar

Contohtabel

Tabel V. 1HasilPenapisanFitokimia

Pemeriksaan Simplisia Ekstrak

Alkaloid - -

Flavonoid + +

Taningalat - -

Taninkatekat + +

Kuinon - -

Fenol + +

Saponin - -

Steroid/
Triterpenoid + +

Ket : + = terdeteksi

- = tidakterdeteksi

25
 Tabel V. 2RendemenEkstrakdanFraksiDaun Bodhi

Rendemen
Sampel
(% b/b)

EADB 18,61

FHDB 0,46

FEDB 3,91

FADB 84,44

Judultabel di atasdanpenamaantabelberdasarkan Bab dannomoruruttabel.

ContohGambar

26
 (a) (b) (c)

Gambar V. 1Kromatografi lapis tipis FADB; FEDB dan FHDB (darikirikekanan),

fasediamsilika gel 60 GF254, fasegerakkloroform-aseton (6:4)
dilihatdengan (a) sinar UV λ 254 nm (b) sinar UV λ 366 nm (c)
setelahdisemprotpenampakbercak H2SO4 10 % padasinartampak.

I
I

27
 (a) (b)

Gambar V. 2Kromatografi lapis tipis duadimensiSenyawa X, fasediamsilika gel 60

GF254, fasegerak (I) etilasetat-kloroform-aseton-metanol (7:5:3:3) (II)
aseton-etilasetat-asamasetatglasial (7:2:1)
setelahdisemprotpenampakbercak H2SO4 10% (a) dandibawahsinar UV
λ 366 nm setelahdisemprotpenampakbercak H2SO4 10%.

Nama fraksidapatdijadikansingkatanseperti FADB (Fraksi Air Daun Bodhi),

FEDB (FraksiEtoAcDaun Bodhi) dan lain
sebagainya.Judulgambardibawahdanpenamaangambarberdasarkan Bab
dannomorurutgambar.

28