Subscribe to DeepL Pro to translate larger documents. Visit for more information.
BAB 2
Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler:
ISI BAB
Perspektif Historis Neurotoksikologi
Titik Akhir Neurotoksik, Biomarker, dan Sistem Model
Neurotoksikologi Seluler
PERSPEKTIF HISTORIS NEUROTOKSIKOLOGI produk sampingan, dll.) juga menunjukkan bahwa area
Telah lama diketahui bahwa berbagai senyawa dapat
menjadi racun bagi sistem saraf pusat (SSP). Hanya
dalam 20 hingga 25 tahun terakhir ini, studi tentang
neurotoksikologi semakin intensif dan memusatkan
perhatian pada agen dan penyakit tertentu. Indikator
yang baik dari pertumbuhan neurotoksikologi adalah
pemeriksaan jumlah kumpulan dan jurnal yang
dikhususkan sepenuhnya atau sebagian untuk subjek
tersebut (Tabel 1).
Selain perkumpulan dan jurnal, lebih dari 150 buku
telah diterbitkan sejak akhir tahun 1970-an yang
membahas beberapa aspek neurotoksikologi. Seiring
dengan semakin sadarnya kita akan lingkungan sekitar
kita, semakin jelaslah bahwa banyak agen, obat-obatan,
bahan kimia, logam, dan produk alami yang dapat
menimbulkan efek toksik pada sistem saraf pusat.
Diperkirakan 80.000 hingga 100.000 bahan kimia
digunakan di seluruh dunia, yang sebagian besar telah
menerima sedikit pengujian toksisitas terhadap SSP. Ada
ribuan obat-obatan potensial dan suplemen produk
alami, yang mungkin memiliki pengujian toksisitas yang
baik, tetapi pengujian neurotoksisitasnya lemah atau
kurang. Banyaknya ratusan ribu senyawa yang dapat
ditemukan di lingkungan (logam berat, pestisida, radiasi
pengion, dll.) dan di tempat kerja ( polusi industri,
pembakaran
Prinsip Dasar
David R. Wallace
7
Neurotoksikologi Molekuler 12
8
Ringkasan dan Pertimbangan Klinis 13
9
neurotoksikologi yang luas akan terus berkembang.
Sumber lain dari racun yang bekerja pada sistem saraf
pusat adalah melalui bakteri dan virus. Protein dari
human immunodeficiency virus (HIV) telah terbukti
memiliki sifat neurotoksik.1,2 Laboratorium kami, dan
juga laboratorium lainnya, telah menunjukkan bahwa
neurotoksisitas terkait HIV memengaruhi sistem
dopaminergik, yang dapat mendasari gejala psikosis dan
gejala mirip Parkinson pada sindrom defisiensi imun
yang didapat pada tahap akhir (AIDS).1 Salah satu
bidang terbaru yang menjadi perhatian neurotoksikologi
adalah penggunaan senjata biologis atau senjata
pemusnah massal. Pemahaman yang lebih baik tentang
agen yang digunakan untuk perangkat ini juga akan
memberikan wawasan tentang tindakan agen
neurotoksik lainnya. Masalah lain yang rumit dalam
bidang neurotoksikologi adalah bahwa beberapa agen
pada konsentrasi "normal" tidak berbahaya dan tidak
menimbulkan gejala neurologis yang nyata. Pada orang
dewasa yang sehat, sebagian besar agen eksogen
dimetabolisme menjadi senyawa yang tidak aktif,
dieliminasi, atau keduanya. Namun, dalam beberapa
kasus, agen dapat terakumulasi dari waktu ke waktu atau
dosis ke tingkat yang bersifat toksik, yang dapat
disebabkan oleh paparan kronis atau metabolisme atau
eliminasi yang tidak memadai. Selain itu, paparan
singkat dapat memicu perubahan yang tidak teramati
dengan jelas pada awal paparan tetapi dapat muncul di
kemudian hari. Penelitian kami telah menunjukkan
bahwa konsentrasi logam berat seperti merkuri atau
timbal, yang berada di bawah konsentrasi yang biasanya
dianggap beracun, dapat mengubah fungsi dopaminergik
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

Tabel 1: Perkumpulan dan Jurnal dengan Penekanan Untuk menentukan apakah suatu senyawa bersifat
Neurotoksikologi pada tahun 2008 neurotoksik, titik akhir untuk menilai neurotoksisitas harus
ditentukan dan diterima. Pada tahun 1998, B a d a n
Masyarakat Jurnal
Lingkungan Hidup AS
Masyarakat Toksikologi Perilaku Penelitian
Neurotoksisitas
Asosiasi Neurotoksikologi Neurotoksikologi
Internasional

Masyarakat Teratologi Neurotoksikologi

Neurobehavioral dan Teratologi

Masyarakat Neurotoksisitas

Bagian Khusus
Neurotoksikologi dari
Perhimpunan Toksikologi

Komite Ilmiah
Neurotoksikologi dan
Psikofisiologi Komisi
Internasional untuk
Kesehatan Kerja

Dalam kondisi ini, seseorang mungkin sama sekali tidak

menunjukkan gejala tetapi dapat cenderung mengalami
degenerasi neuron dopaminergik di kemudian hari atau
dapat menunjukkan peningkatan kepekaan terhadap
racun lain. Efek ini dapat mengganggu diagnosis yang
tepat untuk penyakit eksposur versus penyakit
neurodegeneratif yang menunjukkan gejala neurologis
yang serupa. Sebagai sebuah populasi, kita terus
memperpanjang masa hidup kita, yang meningkatkan
paparan kita terhadap racun yang dapat memberikan
efek neurologis. Dengan populasi yang terus
berkembang dan meningkatnya industrialisasi di negara-
negara lain, jumlah dan jumlah polutan yang merupakan
racun akan terus meningkat. Dalam situasi ini, kita
memasuki lingkaran setan yang kompleks dan mungkin
bisa menjadi lingkaran setan yang berpotensi membatasi
diri. Untuk memutus siklus ini, kita perlu meneliti lebih
lanjut tentang mekanisme kerja, diagnosis, dan
pengobatan potensial setelah terpapar oleh agen-agen
ini. Oleh karena itu, kebutuhan untuk meneliti dan
memahami agen-agen neurotoksik sangat penting.
Seiring dengan meningkatnya pemahaman kita tentang
agen-agen ini, kemampuan kita untuk mengembangkan
dan menyediakan farmakoterapi yang potensial pun
meningkat.

TITIK AKHIR NEUROTOKSIK, BIOMARKER, DAN SISTEM MODEL

8
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

Badan Perlindungan Lingkungan (EPA) menerbitkan untuk mempelajari interaksi

Pedoman Penilaian Risiko Neurotoksisitas, yang
menguraikan beberapa titik akhir yang umum untuk
efek neurotoksisitas senyawa eksogen (Tabel 2).
Mengenai penelitian pada manusia, sulit untuk
menentukan neurotoksisitas secara akurat kecuali
setelah pemeriksaan postmortem. Kemajuan terbaru
dalam pencitraan resonansi magnetik resonansi
fungsional (fMRI) dan pencitraan tomografi emisi
positron (PET) telah meningkatkan kemampuan
klinis untuk mencegah kerusakan neurologis, tetapi
kebutuhan akan biomarker yang relatif non-invasif
dan akurat tetap ada. Korelasi antara pencitraan otak
dan analisis sekunder lainnya telah dicoba dengan
paparan mangan.4,5 Temuan mereka menunjukkan
bahwa individu dengan sinyal MRI yang kuat,
bersamaan dengan peningkatan kandungan mangan
dalam sel darah merah, dapat menjadi prediktor
kerusakan neurologis di masa depan yang terkait
dengan paparan mangan.4 Masalah lain yang
mengganggu penelitian neurotoksikologi adalah
penggunaan sistem model hewan atau non-hewani
yang sesuai dan sebanding.6 Karena kompleksitas
SSP manusia, sulit untuk menemukan sistem model
yang tepat di mana modifikasi dapat secara langsung
dikorelasikan dengan efek pada SSP manusia.
Hewan pengerat relatif tidak terlalu rumit, banyak
digunakan, dan dikarakterisasi dengan baik, tetapi
pemahaman kita tentang SSP hewan pengerat telah
membawa kita pada kesimpulan bahwa ini mungkin
bukan sistem model terbaik untuk semua studi
perbandingan. Beberapa faktor dan masalah yang
perlu dipertimbangkan ketika memilih model hewan
adalah penerapan pada SSP manusia, kesamaan
dengan SSP manusia, jalur yang sama, dan sistem
saraf dibandingkan dengan SSP manusia. Namun,
dalam beberapa kasus, hewan pengerat digunakan
untuk m e n g e s a m p i n g k a n sistem lain,
bahkan ketika dipahami bahwa penggunaannya
bukanlah model terbaik untuk sistem yang
dimaksud.7 Metode pengujian alternatif telah
menjadi topik diskusi selama 2 dekade terakhir.
Secara perlahan, dogma lama berkembang dan ada
pemahaman bahwa spesies lain dapat memberikan
informasi yang sama banyaknya, bahkan lebih
banyak, dibandingkan dengan spesies mamalia dan
vertebrata. Upaya menemukan model pengujian
alternatif ini didukung oleh badan-badan federal
yang bertanggung jawab atas masalah regulasi dan
pendanaan.8,9 Penelitian terhadap spesies lain
(Drosophila, Caenorhabditis elegans, dan ikan
zebra) telah menjelaskan sistem saraf spesies
tersebut secara lebih lengkap, dan telah terbukti bagi
komunitas neurotoksikologi bahwa spesies-spesies
tersebut dapat memberikan sistem model yang kuat

9
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

spesifik dari agen-agen toksik di dalam sistem

saraf pusat (SSP). Sistem ini secara signifikan
lebih sederhana daripada SSP manusia,
primata, atau hewan pengerat, namun
memiliki kompleksitas yang cukup untuk
memeriksa efek toksik dan interaksi saraf pada
tingkat yang lebih terfokus. Proyek genom
manusia telah mengungkapkan bahwa banyak
gen manusia yang mirip, jika tidak persis,
dengan nenek moyang kita.

10
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

Tabel 2: Titik Akhir Terukur untuk Penentuan Efek Neurotoksik

Kategori Hasil Terukur

Struktural atau neuropatologis • Perubahan morfologi secara kasar, termasuk berat otak
• Perubahan histologis pada neuron atau glia (neuronopati, aksonopati, mielinopati)

Neurokimia • Perubahan dalam sintesis, pelepasan, penyerapan, degradasi neurotransmiter

• Perubahan dalam transduksi sinyal terkait pembawa pesan kedua
• Perubahan pada enzim yang terikat pada membran yang mengatur aktivitas saraf
• Penghambatan dan penuaan enzim neuropati
• Peningkatan protein asam fibriler glial pada orang dewasa

Neurofisiologis • Perubahan kecepatan, amplitudo, atau periode refraktori konduksi saraf

• Perubahan latensi atau amplitudo potensi yang ditimbulkan oleh sensorik
• Perubahan pola elektroensefalografi

Perilaku dan neurologis • Peningkatan atau penurunan aktivitas motorik

• Perubahan sensasi sentuhan, penglihatan, suara, rasa, atau bau
• Perubahan koordinasi motorik, kelemahan, kelumpuhan, gerakan atau postur tubuh yang
tidak normal, tremor, atau kinerja yang sedang berlangsung
• Tidak adanya atau berkurangnya kemunculan, besaran, atau latensi refleks sensorimotor
• Perubahan besaran pengukuran neurologis, termasuk kekuatan cengkeraman dan
bentangan tungkai belakang
• Kejang
• Perubahan tingkat atau pola temporal dari perilaku yang dikendalikan oleh jadwal
• Perubahan dalam pembelajaran, memori, dan perhatian

Perkembangan • Perubahan yang diinduksi secara kimiawi pada saat munculnya perilaku
selama perkembangan
• Perubahan yang diinduksi secara kimiawi dalam pertumbuhan atau organisasi elemen
struktural atau neurokimiawi

terjadi setelah terpapar agen eksogen yang dapat

Oleh karena itu, banyak spesies yang sebelumnya memberikan perlindungan dan lingkungan molekuler dan
dianggap terlalu "primitif" sekarang diketahui seluler yang
mengekspresikan gen yang diminati dalam pengujian
neurotoksisitas. Ballatori dan Villalobos6 memberikan
ulasan yang sangat baik mengenai spesies alternatif yang
digunakan dalam pengujian neurotoksisitas.
Kekhawatiran lain dalam mengekstrapolasi pekerjaan
in vitro ke pekerjaan in vivo adalah kondisi di mana
pekerjaan in vitro dilakukan. Kehati-hatian harus
dilakukan ketika menginterpretasikan konsentrasi in
vitro terhadap efek in vivo, penggunaan garis sel yang
dimatikan pada kultur neuron primer,10 dan penggunaan
teknik yang baru dikembangkan tanpa sepenuhnya
memahami hubungan antara studi in vitro dan in vivo.
Dalam banyak kasus, studi in vitro dan in vivo yang
paralel adalah yang paling menguntungkan.11 T u j u a n
dari bab ini adalah untuk memberikan pandangan
tentang neurotoksikologi karena bidang ini berhubungan
dengan seluler dan molekuler. Pemeriksaan terhadap
topik-topik ini dengan jelas menunjukkan bahwa aspek-
aspek molekuler dan seluler (serta genetik) dari
neurotoksikologi tidak saling terpisah, tetapi saling
terkait erat. Perubahan molekuler dan seluler yang

11
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

dapat memfasilitasi neurotoksisitas dibahas. Efek

genetik dari agen toksik juga dibahas secara singkat dari
perspektif perubahan genetik setelah paparan dan
perubahan genetik atau cacat yang ada sebelum paparan
yang dapat membuat seseorang menjadi rentan terhadap
gangguan toksik setelah paparan.

Bidang neurotoksikologi seluler dapat melibatkan NEUROTOKSIKOLOGI SELULER

proses seluler tunggal atau beberapa proses bertingkat.
Dengan kompleksitas otak manusia, banyak aksi toksin
yang melibatkan banyak proses dan bekerja pada
banyak sistem neurotransmitter. Proses yang
terpengaruh dapat melibatkan hal-hal berikut ini:

1. Homeostasis energi-produksi atau pemanfaatan

adenosin trifosfat
2. Homeostasis elektrolit-perubahan pada kation-
kation utama; Na+, K+, Ca++, dan anion; Cl-

12

3. Perubahan pensinyalan intraseluler pada cou- pling
protein G, pergantian fosfoinositol, perancah protein
intraseluler
4. Neurotransmiter-perubahan dalam pelepasan,
penyerapan, penyimpanan neurotransmiter
Karena racun dapat mengganggu fungsi seluler pada
berbagai tingkatan, pengembangan biomarker untuk
neurotoksin berjalan lambat. Menurut definisi, penanda
biologis diperoleh melalui analisis jaringan dan/atau
cairan tubuh untuk mencari bahan kimia, metabolit
bahan kimia, enzim, dan zat biokimia lainnya sebagai
hasil interaksi biologis-kimiawi. Respons yang diukur
dapat berupa respons fungsional dan fisiologis, biokimia
pada tingkat sel, atau interaksi molekuler. Biomarker
dapat digunakan untuk menilai paparan (jumlah yang
diserap atau dosis internal) dan efek bahan kimia serta
kerentanan individu, dan mereka dapat diterapkan
apakah paparan berasal dari sumber makanan,
lingkungan, atau pekerjaan. Secara umum, ada hubungan
yang kompleks antara faktor-faktor yang terlibat dengan
paparan, inang, dan hasil yang dapat diukur (Tabel 3).
Biomarker dapat digunakan untuk menjelaskan
hubungan sebab-akibat dan dosis-akibat dalam penilaian
risiko kesehatan, dalam diagnosis klinis, dan untuk
tujuan pemantauan.
Idealnya, biomarker yang diinginkan adalah
biomarker yang dapat dengan mudah diukur pada subjek
yang hidup dan secara akurat mewakili paparan racun.
Meskipun penanda tunggal mungkin tidak ada,
kombinasi penanda, yang diperiksa bersama-sama,
mungkin memberikan penilaian yang lebih akurat
tentang paparan racun. Lebih lanjut memperumit
masalah
Tabel 3: Faktor-faktor yang Dapat Mempengaruhi Interaksi Antara Senyawa Paparan, Inang, dan Hasil Terukur64
Sumber→ →
Bahan kimia
DISTRIBUSI PROPERTI
• Udara
• Air
• Tanah
• Makanan
Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik
Interpretasi efek toksikan-SSS adalah berbagai
klasifikasi biomarker. Ada biomarker paparan, efek, dan
kerentanan.12 Menemukan biomarker yang tepat untuk
racun tertentu merupakan tugas yang berat. Penelitian
terbaru telah meneliti paparan subkronis terhadap
akrilamida dan metilmerkuri, diikuti dengan
pengambilan sampel darah dan urin. Dengan
menggunakan desorpsi laser yang disempurnakan
permukaan / ionisasi time-of-flight mass spec- trometry
(SELDI-TOF MS), protein spesifik ditemukan dalam
serum dan urin dengan rasio massa-ke-muatan (m / z)
yang dengan tepat mengklasifikasikan masing-masing
kelompok perlakuan dan kontrol.13 Sebuah metode baru
melibatkan penggunaan metabolomik, yang merupakan
metode in vitro yang menggunakan "sidik jari"
metabolik atau biokimia dari sel untuk menentukan
apakah suatu toksin telah mengubah tindakan metabolik
sel sebelum kerusakan atau gejala yang terlihat.14
Sebagai perluasan dari penelitian sebelumnya, yang
meneliti protein asam fibriler glial sebagai penanda
toksisitas trimetiltin (TMT), produksi autoantibodi telah
diteliti sebagai cara yang berpotensi baru dan kurang
invasif untuk menentukan eksposur TMT.15 Secara
kolektif, ketiga metode ini memajukan apa yang
sebelumnya telah dipahami dan diterima sebagai
biomarker kimiawi baru.
Sistem saraf pusat mengalami banyak fase
perkembangan sebelum dewasa. Selama setiap fase,
penanda biologis tertentu akan menjadi penting untuk
satu fase tetapi tidak untuk fase lainnya.16
Neurotoksikologi perkembangan merupakan salah satu
disiplin ilmu yang lebih sulit untuk menilai paparan
racun. Pada awalnya, ada perkembangan janin, ketika
SSP paling rentan terhadap racun yang melintasi batas
plasenta. Perkembangan pascakelahiran juga merupakan
periode yang rentan,
Rute Pemaparan → Tuan rumah → Tanggapan
RUTE
• Udara • Usia • Segera
• Lisan • Ras • Tertunda
• Derma • Jenis Kelamin
• Orang tua • Status kesehatan
PEMAPARA
N
13
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

• Dosis
• Konsentrasi
• Jumlah
• Nilai
• Bahan kimia
tunggal atau
ganda
• Penyerapan

14
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

meskipun jauh lebih sedikit dibandingkan dengan untuk alkohol.12,21 Meskipun biomarker ini dapat
perkembangan janin. Terakhir, periode perkembangan digunakan untuk memeriksa paparan racun di SSP,
praremaja dan remaja juga merupakan titik waktu namun sulit untuk dilakukan.
temporal yang perlu dipantau dan diselidiki. Variasi-
variasi ini telah dibuktikan dengan efek toksik
amfetamin pada otak yang sedang berkembang. 16 Barone
dkk.17 meninjau biomarker dan metode yang digunakan
untuk menilai paparan pestisida selama periode-periode
perkembangan ini. Kesulitan yang membutuhkan
perhatian adalah penggunaan sistem model yang tepat
dan interpretasi basis data pada tahap perkembangan
yang tepat.17 Penggunaan oligodendrosit, atau
oligodendroglia, telah menarik perhatian karena
pengaruh beberapa racun lingkungan seperti timbal yang
memengaruhi mielinisasi neuron.18 Perubahan
mielinisasi mengubah kecepatan konduksi neuron
bermielin dan dengan demikian memengaruhi fungsi
neuron. Oligoden-drosit memiliki berbagai saluran ion
yang berpagar ligan dan tegangan serta reseptor
neurotransmitter. Neurotransmiter yang paling baik
dikarakterisasi yang membantu membentuk populasi
oligodendrosit yang sedang berkembang adalah
glutamat.19,20 Kelas reseptor utama yang diekspresikan
dalam oligodendrosit adalah reseptor glutamat
ionotropik (α-amino-3-hidroksi-5-metil-4-
isoksazolepropionat dan kainat). Selain reseptor
glutamat, asam γ-aminobutirat, serotonin, glisin,
dopamin, nikotinat, β-adrenergik, substansi P,
somatostatin, dan reseptor opioid juga diekspresikan.
Saluran kalsium, natrium, dan kalium juga telah
diidentifikasi dalam oligodendrosit (lihat Deng dan
Poretz18
dan referensi yang dikutip di dalamnya). Selain
itu, penggunaan oligodendrosit dapat memberikan sistem
model yang berguna untuk mempelajari aksi SSP toksik.
Biomarker paparan meliputi kombinasi (biomarker-
toksin) sebagai berikut12,21:
• Mercapturates-styrene
• Hemoglobin-karbon disulfida
• Porfirin-logam
• Asetilkolinesterase-organofosfat
• Monoamina oksidase B-stirena dan mangan
• Dopamin-β-hidroksilase-mangan dan stirena
• Kalsium-merkuri
Keuntungan dari kombinasi biomarker-racun ini
adalah bahwa mereka dapat dideteksi dan diukur sesaat
setelah paparan dan sebelum terjadi kerusakan atau lesi
neuroanatomi yang nyata. Pengukuran aktivitas
asetilkolinesterase dapat dilakukan melalui pengambilan
sampel darah, meskipun metode yang lebih tidak invasif
telah diuji.22 Intervensi pada titik ini, sesaat setelah
paparan, dapat mencegah atau mengurangi kerusakan
lebih lanjut p a d a individu.23
Penanda kerentanan termasuk d-aminolevulinic acid
dehydratase untuk timbal dan aldehyde dehydrogenase

15
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

untuk mengukur secara langsung. Oleh karena itu, ada aksi pestisida organofosfat dan mekanisme kerjanya
kebutuhan untuk membuat biomarker yang dapat mungkin yang paling baik dijelaskan.29-31 Nilai
dengan mudah diukur di perifer dan yang mirip dengan
target zat beracun di SSP.24 Parameter yang dapat
diukur di perifer meliputi reseptor (muskarinik, β-
adrenergik, benzodiazepin, α1- dan α2-
adrenergik), enzim (asetilkolinesterase, monoamin
oksidase B), sistem transduksi sinyal (kalsium, adenil
siklase, metabolisme fosfoinositida), dan sistem
pengambilan (serotonin), yang dapat ditemukan di sel
darah manusia.21,24 Jenis sel darah yang paling umum
yang telah dipelajari hingga saat ini adalah limfosit,
trombosit, dan eritrosit. Penanda konvensional fungsi
dopaminergik adalah penilaian enzim dopaminergik
seperti aktivitas dopamin-β-hidroksilase, aktivitas
monoamina oksidase, dan fungsi transpor dopamin.
Meskipun aktivitas dopamin-β-hidroksilase dan
monoamine oksidase telah terbukti menjadi penanda
yang dapat diandalkan untuk paparan mangan,
pengukuran kadar prolaktin plasma telah dilaporkan
sama akuratnya ketika menilai paparan awal mangan. 25
Penggunaan biomarker perifer memiliki banyak
manfaat selain yang sudah jelas, yaitu menghilangkan
kebutuhan untuk melakukan biopsi jaringan otak dari
individu yang masih hidup. Keuntungan ini termasuk
analisis perjalanan waktu, menghilangkan masalah
etika, prosedur yang tidak terlalu invasif, dan
kemudahan kinerja dibandingkan dengan biopsi SSP.
Jika biomarker yang tepat ditemukan untuk paparan
toksin tertentu, maka dimungkinkan untuk mendeteksi
paparan toksin sebelum gejala klinis yang jelas muncul.
Namun, beberapa kendala signifikan harus diatasi agar
biomarker perifer dapat merefleksikan representasi yang
akurat dari efek SSP26-28:
• Penanda SSP dan perifer harus menunjukkan
karakteristik farmakologis dan biokimia yang sama
dalam situasi terkendali dan setelah paparan racun.
• Profil respons waktu harus dilakukan untuk
menentukan apakah jaringan perifer merespons
dengan cara yang sama seperti jaringan SSP.
• Kompleksitas SSP memungkinkan adaptasi yang
mungkin tidak ada di daerah pinggiran. Sistem saraf
atau neurotransmiter lain dapat beradaptasi atau
mengimbangi perubahan SSP yang berhubungan
dengan racun setelah terpapar.
• Yang melekat pada banyak penelitian pada manusia
adalah variabilitas antar dan intra-kelompok yang
mungkin dalam beberapa kasus cukup besar.
Faktor-faktor ini harus dipertimbangkan ketika
mencoba untuk secara akurat menentukan apakah
biomarker potensial telah berubah. Dalam banyak
kasus, pencarian ulang berdasarkan hipotesis lebih
disukai, namun penelitian mekanistik masih memiliki
tempat di bidang neurotoksikologi. Penelitian tentang

16
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

Tujuan utama dari studi mekanistik dalam poliklorinasi dan logam berat (timbal, merkuri, mangan)
neurotoksikologi adalah untuk memfasilitasi juga telah dilaporkan meningkatkan pelepasan
pengembangan biomarker untuk digunakan di masa
neurotransmitter presinaptik melalui mekanisme y a n g
depan dalam mendeteksi paparan toksin.31 Ketika kita
bergantung pada kalsium dan tidak bergantung pada
mempertimbangkan ribuan toksin dan ribuan toksin
kalsium.34 Kemampuan racun untuk menimbulkan efek
potensial lainnya yang mungkin terpapar oleh seseorang
langsung dan tidak langsung memperumit
seumur hidupnya, sangat mengejutkan bahwa hanya ada
segelintir biomarker yang dapat diandalkan. Peningkatan
penggunaan studi mekanistik, dengan cara yang serupa
dengan apa yang telah dicapai dengan paparan
organofosfat, akan semakin memajukan pemahaman kita
tentang efek toksin dan dapat mengarah pada deteksi
lebih awal terhadap eksposur.27,31 Penggunaan data yang
ada untuk memformulasikan studi non-manusia yang
mengkarakterisasi tindakan toksin juga akan sangat
berharga. Menggunakan informasi yang ada tentang
eksposur asam domoat, agonis glutamat, pada populasi
di mana toksisitas terhadap toksin endogen ini
dilaporkan digunakan secara kuantitatif dan mampu
menghasilkan model dosis-respons yang akurat untuk
toksisitas asam domoat yang didasarkan pada
biologis.32,33 Menggunakan metode ini akan
memungkinkan penggunaan unit eksperimen bukan
manusia dan memberikan informasi yang sebanding
dengan penelitian pada manusia yang komprehensif.32
Perluasan seluler dari interaksi protein-protein
melibatkan pelepasan neurotransmiter. Adalah mungkin
untuk mengukur pelepasan neurotransmitter secara in
vitro menggunakan metodologi sinapsis, irisan otak, dan
kultur. Dalam metode-metode ini, otak harus
dikeluarkan dari subjek sebelum eksperimen, yang
terbukti menjadi kelemahan dalam studi nonterminal.
Dengan menggunakan mikroelektroda karbon dan
amperometri, penyewaan ulang neurotransmiter secara
real-time dapat diukur.34 Penggunaan amperometri
berfokus pada efek presinaptik racun dan perubahan
pelepasan neurotransmiter. Banyak interaksi protein-
protein (docking, eksositosis) harus terjadi untuk
pelepasan neurotransmiter yang tepat setelah stimulasi
(lihat Burgoyne dan Morgan35 untuk tinjauan). Protein yang
terlibat dalam proses stimulasi-eksositosis dapat berupa
reseptor protein fusi sensitif N-etilmaleimida yang dapat
larut (SNARE). Protein SNARE dapat diklasifikasikan
lebih lanjut sebagai protein yang berhubungan dengan
vesikel (synaptobrevins) atau membran plasma (syntaxin
dan synaptosomal-associated protein-25). Gangguan
pada aktivitas salah satu protein ini dapat mengakibatkan
perubahan yang kuat dalam pelepasan pemancar.
Banyak kelas obat, dan psikostimulan yang
disalahgunakan seperti amfetamin dan metamfetamin,
telah terbukti meningkatkan pelepasan dopamin dan
menimbulkan toksisitas sebagian melalui mekanisme
presinaptik. Pelarut organik toluena juga telah
dilaporkan meningkatkan pelepasan dopamin presinaptik
dengan cara yang bergantung pada kalsium.34 Bifenil

17
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

interpretasi perubahan biomarker. Sebagai contoh, keterbatasan proteomik, atau hasil protein dari genom.
dengan menggunakan amperometri, hanya pelepasan Ekspresi genetik mengarah pada sintesis dan degradasi
katekolamin dan indolamin yang dapat diukur34; protein yang secara integral terlibat dalam fungsi saraf
namun, aksi racun di tempat lain pada gilirannya normal. Agen yang mengganggu proses protein ini dapat
dapat mengubah pelepasan katekolamin atau menyebabkan kerusakan saraf, kematian, atau
indolamin yang sedang diukur melalui mekanisme kecenderungan untuk mengalami gangguan lebih lanjut.
tidak langsung. Singkatnya, biomarker yang luar Modifikasi oksidatif atau kovalen
biasa dalam neurotoksikologi seluler masih belum
diidentifikasi, terutama mengingat ribuan racun
potensial yang diketahui ada. Baru-baru ini,
kemajuan dalam "omics," seperti proteomik,
genomik, dan metabolomik, telah memberi kita alat
untuk mempelajari interaksi protein-protein. Dengan
memeriksa efek toksin potensial pada interaksi
protein-protein pada tingkat intraseluler, kita dapat
mulai menggambarkan perubahan seluler yang
terjadi setelah paparan toksin yang tidak memiliki
gejala klinis yang jelas. Jelas bahwa pekerjaan
tambahan diperlukan, tetapi metodologi penelitian
tersedia untuk memperluas literatur mekanistik saat
ini dan mengembangkan biomarker yang berharga
dan dapat diandalkan untuk racun tertentu.

Penelitian terdahulu di bidang neurotoksikologi telah

NEUROTOKSIKOLOGI MOLEKULER
menekankan pada hasil yang terjadi setelah terpapar
oleh zat beracun. Penekanan ini sebagian karena
keterbatasan teknologi yang tersedia pada saat itu.
Sebagian besar penelitian dikategorikan ke dalam
tiga kelompok: mekanistik molekuler, korelatif, dan
"kotak hitam. "36 Sifat dangkal dari penelitian ini
menimbulkan pertanyaan dan keprihatinan dari
bidang ilmu saraf yang lebih mapan. Tren ini
perlahan-lahan berevolusi dan berubah dengan
diterimanya sifat interdisipliner dari bidang
neurotoksikologi. Bidang neurofisiologi, neuro-
kimia, neurosains, dan biologi molekuler telah
menunjukkan bidang-bidang yang tumpang tindih
yang telah membantu memperdalam pemahaman
kita tentang neurotoksikologi. Kemajuan lebih lanjut
dalam neurotoksikologi akan datang dari penelitian
molekuler tambahan dan peningkatan pemahaman
tentang cedera SSP dari agen endogen dan
eksogen.37 Baru-baru ini, telah terjadi perluasan
substansial dan diversifikasi dalam teknologi yang
telah memfasilitasi studi neurotoksikologi pada
tingkat molekuler dan seluler. Penelitian sebelumnya
dalam "biologi molekuler" telah menekankan pada
studi tentang RNA pembawa pesan dan ekspresi gen.
Salah satu bidang studi yang telah mendapatkan
perhatian yang signifikan dalam beberapa tahun
terakhir adalah bidang proteomik. Lubec et al.38
memberikan tinjauan tentang potensi dan

18
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

protein dapat menyebabkan perubahan struktur tersier studi "pull-down" menggunakan imunopresipitasi protein
dan hilangnya fungsi protein. Keuntungan proteomik yang, pada gilirannya, mengendapkan protein yang
dibandingkan dengan kimia protein "klasik" adalah terkait atau saling berinteraksi. Secara kolektif, setiap
bahwa proteomik mengeksplorasi berbagai langkah metode (posttranslational
dalam siklus sintesis, fungsi, dan degradasi protein,
sedangkan kimia protein berfokus pada urutan asam
amino yang membentuk protein. Oleh karena itu,
proteomik berfokus pada pandangan yang lebih
komprehensif tentang protein seluler dan memberikan
lebih banyak informasi tentang efek racun pada S S P . 39
Efek dari agen toksik yang mungkin dapat dideteksi
pada tingkat pascatranslasi setelah pemaparan.40,41
Penggunaan yang paling dapat diterapkan untuk
proteomik dalam menilai efek racun yang mungkin
terjadi adalah pemetaan modifikasi pascatranslasi
protein.39 Pemrosesan pascatranslasi melibatkan banyak
proses, termasuk fosforilasi protein, glikosilasi, struktur
tersier, fungsi, dan pergantian. Modifikasi protein
mempengaruhi perdagangan protein, yang dapat
memiliki dampak signifikan pada pergerakan dan
penyisipan protein seperti reseptor neurotransmitter dan
transporter. Selain perubahan dalam proses
pascatranslasi, banyak agen toksik potensial yang
bersifat elektrofilik dan berikatan kovalen dengan gugus
pada protein, seperti gugus tiol, sehingga mengubah
struktur, fungsi, dan degradasi serta eliminasi
selanjutnya.42,43 Oksidasi protein diyakini terlibat dalam
banyak penghinaan toksik dan penyakit degeneratif pada
SSP.44,45 Pengukuran protein teroksidasi, atau karbonil,
adalah metode y a n g diterima untuk penentuan protein
teroksidasi di jaringan otak.46 Selain modifikasi pasca-
translasi, pembuatan profil ekspresi protein dan
pemetaan protein-jaringan dapat digunakan. Metode
profil ekspresi protein telah digunakan untuk menilai
perubahan protein pada trauma kepala, dan hipoksia
serta selama proses penuaan.47-49 Keterbatasan
penggunaan profil ekspresi protein adalah jumlah
protein yang diukur. Sejumlah besar protein perlu
diperoleh, dan dalam banyak kasus, ekstraksi dari darah
tidak akan menghasilkan protein yang cukup untuk
diprofilkan. Oleh karena itu, prosedur yang lebih invasif
perlu dilakukan. Perbaikan pada metode ini
menggunakan deteksi kromatografi cair-spektrometri
massa (LC-MS) untuk mendeteksi protein berlabel
isotop.50 Pemetaan jaringan protein adalah alat yang
sangat ampuh untuk mengidentifikasi perubahan pada
kompleks multiprotein yang disebabkan oleh paparan
kemungkinan toksin. Ada dua pendekatan untuk
mengukur pemetaan jaringan protein. Pertama, sistem
"dua hibrida" menggunakan gen pelapor untuk
mendeteksi interaksi pasangan protein di dalam inti sel
ragi. Sistem dua hibrida dapat digunakan untuk
menyaring agen toksik potensial yang mengganggu
interaksi protein-protein tertentu. Metode ini bukannya
tanpa keterbatasan dalam hal interpretasi data. Kedua,

19
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

modifikasi protein, profil ekspresi protein, dan

pemetaan jaringan protein) dibangun di atas masing-
masing metode sebelumnya. Secara keseluruhan,
metode-metode ini memberikan gambaran yang lebih
RINGKASAN DAN PERTIMBANGAN KLINIS
lengkap dan kuat tentang modifikasi protein setelah
paparan racun potensial.
Peran genetika dan kerentanan neurotoksik hanya Bidang neurotoksikologi tidak hanya berkembang
dibahas secara singkat di sini karena berkaitan dengan dengan pesat tetapi juga berkembang dengan cepat.
perubahan produksi protein. Banyak sekali penelitian Seiring dengan bertambahnya jumlah obat dan agen
yang dapat diakses mengenai efek perifer penyebab lingkungan, bakteri, dan virus yang berpotensi
racun, polimorfisme genetik, dan kanker. 51-53 Publikasi-
publikasi ini telah menguraikan terjadinya kanker
payudara, paru-paru, dan kandung kemih, di antara
organ-organ lainnya. Enzim sitokrom P450 (CYPs)
ditemukan di seluruh tubuh dan menimbulkan banyak
polimorfisme. Polimorfisme telah diidentifikasi pada
CYP1A1, CYP1B1, CYP2C9, CYP2C18, CYP2D6,
dan
CYP3A4 pada manusia. Perubahan polimorfik pada
CYP3A4 atau pada glutation S-transferase dapat
meningkatkan atau menurunkan kerentanan seseorang
terhadap pestisida organofosfat54 dan dapat membuat
seseorang lebih rentan terhadap peningkatan risiko
penyakit jantung.55 Dogma yang berlaku selama ini
adalah bahwa setiap racun harus bersifat mutagenik,
genotoksik, atau keduanya agar gejalanya dapat
muncul, namun penelitian yang lebih baru
menunjukkan bahwa suatu racun dapat bersifat
epigenetik dan masih menimbulkan efek yang merusak. 56
Mirip dengan interaksi protein-protein, gangguan toksin
pada komunikasi ekstra, inter, atau intraseluler akan
merusak regulasi homeostatis sel dan mungkin menjadi
penyebab utama penyakit yang diinduksi oleh toksin. 56
Stres oksidatif juga merupakan bentuk peristiwa
epigenetik karena banyak senyawa yang diketahui
meningkatkan pembentukan spesies oksigen reaktif
tetapi tidak secara terang-terangan bersifat
genotoksik.56-59 Racun yang tidak bersifat genotoksik
tetapi menyebabkan peristiwa epigenetik dapat menjadi
sama pentingnya dalam bidang neurotoksikologi seperti
halnya agen-agen yang bersifat genotoksik atau
sitotoksik. Penggunaan teknologi sinar mikro telah
menunjukkan kegunaan yang sangat besar dalam studi
toksisitas.60 Penelitian terbaru telah meneliti efek
senyawa toksik pada ekspresi DNA di SSP.
Sekelompok gen yang dapat berkontribusi pada
toksisitas yang diinduksi metamfetamin di ventral
striatum tikus telah diidentifikasi.61,62 Selain itu,
penggunaan teknologi microarray telah menunjukkan
perubahan ekspresi gen pada hewan yang terpapar
toksin dopaminergik N-metil-4-fenil-1,2,3,6-
tetrahidropiridin dan yang mengalami kecanduan
alkohol kronis.60 Jelaslah bahwa teknologi microarray
adalah alat yang sangat ampuh, tetapi masih banyak
yang harus dilakukan untuk menyempurnakan metode
ini.
20
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

sifat neurotoksik telah berkembang, kebutuhan untuk Banyak agen yang menyebabkan respons epigenetik
pengujian tambahan telah meningkat. Baru-baru ini saja (perubahan seluler yang tidak bersifat mutagenik atau
teknologi telah berkembang ke tingkat di mana studi sitotoksik). Temuan ini menunjukkan bahwa banyak agen
neurotoksikologi dapat dilakukan tanpa menggunakan yang awalnya dianggap tidak beracun harus diperiksa ulang
kotak hitam. Setelah melakukan analisis komparatif untuk mengetahui potensi toksisitas "tidak langsung".
terhadap kondisi bidang ini hampir 15 tahun yang lalu Dengan
dengan kondisi saat ini, jelaslah bahwa masih banyak
yang harus dilakukan.63 Pemeriksaan terhadap efek agen
yang dicurigai sebagai racun dapat dilakukan pada
tingkat molekuler (protein-protein), seluler (biomarker,
fungsi neuron), atau keduanya. Proteomik tumbuh dan
berkembang dengan cepat sebagai alat yang dapat
digunakan dalam neurotoksikologi, namun dapat
dibatasi dengan keterbatasan seperti halnya subdisiplin
neurotoksikologi lainnya.38 Proteomik lebih komprehensif
daripada beberapa subdisiplin lainnya karena berfokus
pada pandangan yang lebih komprehensif tentang
protein seluler dan interaksinya, dan dengan demikian
akan memberikan informasi yang jauh lebih banyak
tentang efek racun pada SSP.39 Proteomik dapat
diklasifikasikan ke dalam tiga fokus:
1. Modifikasi pasca-penerjemahan
2. Profil ekspresi protein
3. Pemetaan jaringan protein
Secara kolektif, metode-metode ini menyajikan
gambaran yang lebih lengkap dan kuat tentang
modifikasi protein setelah paparan toksin potensial.
Neurotoksikologi seluler melibatkan perubahan dalam
homeostasis energi seluler, ho- meostasis ion, fungsi
pensinyalan intraseluler, dan pelepasan, penyerapan, dan
penyimpanan neu-transmitter. Dari perspektif klinis,
pengembangan biomarker yang dapat diandalkan, atau
serangkaian biomarker, masih sulit dipahami.
Kebutuhannya adalah mengembangkan biomarker yang
tepat yang dapat diandalkan, dapat direproduksi, dan
mudah diperoleh. Tiga kelas besar biomarker adalah
biomarker paparan, efek, dan kerentanan.12 Keuntungan
dari kombinasi biomarker-racun adalah bahwa
biomarker tersebut dapat dideteksi dan diukur sesaat
setelah paparan dan sebelum terjadi kerusakan atau lesi
neuroanatomi yang nyata. Intervensi pada titik ini,
segera setelah paparan, dapat mencegah atau setidaknya
mengurangi kerusakan lebih lanjut pada individu.23
Penggunaan penanda biologis perifer untuk menilai
kerusakan toksin di SSP memiliki banyak keuntungan:
1. Analisis perjalanan waktu dapat dilakukan.
2. Masalah etika dengan penggunaan subjek manusia
sebagian dapat dihindari.
3. Prosedur untuk memperoleh sampel tidak terlalu
invasif.
4. Studi perifer lebih mudah dilakukan.
Telah menjadi semakin jelas bahwa interaksi antara
racun dan DNA tidak sesederhana menimbulkan mutasi.

21
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

Dengan kemajuan proyek genom manusia dan in vitro baru untuk pengujian neurotoksisitas, bukti prinsip
pengembangan peta genom manusia, efek racun untuk metil klorida dan kafein. Neurotoksikologi. 2008;29:1-12.
15. El-Fawal HAN, O'Callaghan JP. Autoantibodi terhadap protein
potensial pada satu atau beberapa gen dapat
neurotipik dan gliotipik sebagai biomarker neurotoksisitas:
diidentifikasi. Seiring dengan kemajuan teknologi penilaian neurotoksikologi trimetiltin (TMT). 2008;29:109-115.
dan metodologi yang terus berlanjut dan kerja sama
dengan disiplin ilmu lain seperti ilmu saraf,
biokimia, neurofisiologi, dan biologi molekuler,
mekanisme kerja racun akan semakin jelas. Dengan
peningkatan pemahaman ini, intervensi klinis yang
lebih baik untuk mencegah kerusakan saraf setelah
terpapar toksin dapat dikembangkan sebelum
timbulnya gejala.

1. Wallace DR, Dodson S, Nath A, dkk. Estrogen melemahkan

REFERENSI
stres oksidatif yang diinduksi gp120 dan TAT1–72 dan
mencegah hilangnya fungsi transporter dopamin. Sinaps.
2006;59:51-60.
2. Wallace DR, Dodson SL, Nath A, dkk. Agonis δ-Opioid
melemahkan stres oksidatif yang diinduksi TAT1–72 dalam sel SK-
N-SH.
Neurotoksikologi. 2006;27:101-107.
3. Hood AN, Wallace DR. Paparan bersama logam berat dan
psiko-stimulan mengubah kepadatan transporter dopamin
(DAT) tanpa perubahan fungsi DAT. Neurotoksikologi. 2009;
pengajuan yang direvisi.
4. Jiang Y, Zheng W, Long L, dkk. Pencitraan resonansi
magnetik otak dan konsentrasi mangan dalam sel darah
merah pekerja peleburan: mencari biomarker paparan
mangan. Neurotoksikologi. 2007;28:126-135.
5. Erikson KM, Dorman DC, Lash LH, dkk. Durasi paparan
mangan di udara pada monyet rhesus dikaitkan dengan
perubahan regional otak dalam biomarker neurotoksisitas.
Neurotoksikologi. 2008;29:377-385.
6. Ballatori N, Villalobos AR. Mendefinisikan dasar molekuler
dan seluler toksisitas menggunakan model komparatif.
Toksikol Appl Pharma- col. 2002;183:207-220.
7. Olson H, Betton G, Robinson D, dkk. Konkordansi
toksisitas obat-obatan pada manusia dan hewan. Reg
Toxicol Pharmacol. 2000;32:56-67.
8. Goss LB, Sabourin TD. Pemanfaatan spesies alternatif
untuk pengujian toksisitas: suatu tinjauan umum. J Appl
Toxicol. 1985;5:193-219.
9. Bonaventura C. Lokakarya NIEHS: model laut/air tawar
yang unik untuk penelitian kesehatan lingkungan. Perspektif
Kesehatan Lingkungan. 1999;107:89-92.
10. Stacey G, Viviani B. Model kultur sel untuk neurotoksikologi.
Cell Biol Toxicol. 2001;17:319-334.
11. Tiffany-Castiglioni E, Ehrich M, Dees L, dkk.
Menjembatani kesenjangan antara model in vitro dan in vivo
untuk neurotoksikologi. Ilmu Toksikologi. 1999; 51: 178-
183.
12. Costa LG, Manzo L. Penanda biokimiawi neurotoksisitas:
strategi penelitian dan aplikasi epidemiologi. Toxicol Lett.
1995;77(1–3):137–144.
13. Fang M, Boobis AR, Edwards RJ. Mencari biomarker baru
dari neurotoksik yang bekerja secara sentral dan perifer,
menggunakan spektrometri massa spektrometri massa
desorpsi / ionisasi yang disempurnakan dengan laser
(SELDI- TOF MS) Food Chem Toxicol. 2007;45:2126-2137.
14. Van Vliet E, Morath S, Eskes C, dkk. Pendekatan metabolomik

22
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik

16. Slikker W, Bowyer JF. Biomarker neurotoksisitas orang dalam neurotoksikologi. Neurotoksikologi. 2003;24:761-775.
dewasa dan perkembangan. Toxicol Appl Pharmacol.
2005;206:255-260.
17. Barone S Jr, Das KP, Lassiter TL, dkk. Proses perkembangan
sistem saraf yang rentan: tinjauan penanda dan metode.
Neurotoksikologi. 2000;21(1-2):15-36.
18. Deng W, Poretz RD. Oligodendroglia dalam perkembangan
dan neurotoksisitas. Neurotoksikologi. 2003;24:161-178.
19. Gallo V, Ghiani CA. Reseptor glutamat dalam glia: sel baru,
tempat baru, dan fungsi baru. Trends Pharmacol Sci. 2000; 21:
252-258.
20. Matute C, Alberdi E, Domercq M, dkk. Hubungan antara
kematian oligodendroglial eksitotoksik dan penyakit demielinasi.
Tren Neurosci. 2001;24:224-230.
21. Manzo L, Castoldi AF, Coccini T, dkk. Menilai efek polutan baru
yang bersifat racun dengan penanda biokimia. Environ Res Sect
A. 2001;85:31-36.
22. Henn SM, McMaster S, Padilla S. Mengukur aktivitas
kolinesterase dalam air liur manusia. J Toxicol Environ Health
A. 2006; 69: 1805-1818.
23. Manzo L, Castoldi AF, Coccini T, dkk. Mekanisme
toksisitas saraf: aplikasi untuk biomonitoring manusia.
Toxicol Lett. 1995;77:63-72.
24. Manzo L, Artigas F, Martinez M, dkk. Penanda biokimiawi
neurotoksisitas: masalah dasar dan tinjauan studi mekanistik.
Hum Exp Toxicol. 1996; 15 (Suppl 1): 20-35.
25. Smargiassi A, Mutti A. Biomarker perifer dan paparan
mangan. Neurotoksikologi. 1999;20(2–3):401–406.
26. Castoldi AF, Coccini T, Rossi AD, dkk. Biomarker dalam
kedokteran lingkungan: perubahan pensinyalan sel sebagai
indikator awal neurotoksisitas. Funct Neurol. 1994;9:101-109.
27. Costa LG. Penelitian biomarker dalam neurotoksikologi: peran
studi mekanistik untuk menjembatani kesenjangan antara
laboratorium dan investigasi epidemiologi. Perspektif
Kesehatan Lingkungan. 1996;104 (Suppl 1):55-67.
28. Duman RS, Heninger GR, Nestler EJ. Psikiatri molekuler:
adaptasi jalur transduksi sinyal yang digabungkan dengan
reseptor yang mendasari plastisitas saraf yang diinduksi oleh
stres dan obat. J Nerv Ment Dis. 1994;182:692-700.
29. Lotti M. Patogenesis polineuropati organofosfat.
Crit Rev Toxicol. 1992;21:465-488.
30. Costa LG. Toksikologi dasar pestisida. Occup Med State Art Rev.
1997;12:251-268.
31. Costa LG. Neurotoksikologi biokimia dan molekuler: relevansinya
dengan pengembangan biomarker, pengujian neurotoksisitas,
dan penilaian risiko. Toxicol Lett. 1998;102–103:417–421.
32. Slikker W Jr, Scallet AC, Gaylor DW. Model dosis-respons
berbasis biologis untuk penilaian risiko neurotoksisitas.
Toxicol Lett. 1998;102–103:429–433.
33. Scallet AC, Schmued LC, Johannessen JN. Biomarker
neurohistokimia dari neurotoksik laut, asam domoat.
Neurotoxicol Teratol. 2005;27:745-752.
34. Westerink RHS. Eksositosa: menggunakan amperometri
untuk mempelajari mekanisme presinaptik
neurotoksisitas. Neurotoksikologi. 2004;25:461-470.
35. Burgoyne RD, Morgan A. Eksositosis granula sekretori. Physiol
Rev. 2003; 83: 581-632.
36. Lotti M. Neurotoksikologi: Cinderella ilmu saraf.
Neurotoksikologi. 1996;17(2):313-321.
37. Verity MA. Pendahuluan: sebuah era baru untuk toksikologi
saraf molekuler. Patologi Otak. 2002;12:472-474.
38. Lubec G, Krapfenbauer K, Fountoulakis M. Proteomik dalam
penelitian otak: potensi dan keterbatasan. Prog Neurobiol.
2003;69:193-211.
39. LoPachin RM, Jones RC, Patterson TA, dkk. Penerapan
proteomik untuk mempelajari mekanisme molekuler

23
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar
40. Ficarro SB, McCleveland ML, Stukenburg PT, dkk. vitro dan in vivo yang digunakan untuk menguji paradigma
Analisis fosfo-protein dengan spektrometri massa dan tersebut. Mutat Res. 1997;373:245-249.
aplikasinya pada Saccharomyces cerevisiae. Nat 58. Martinez JD, Pennington ME, Craven MT, dkk. Radikal bebas
Biotechnol. 2002;20:301-305. yang dihasilkan oleh radiasi pengion menandakan translokasi
41. Goshe MB, Conrads TP, Panisko EA, dkk. Pendekatan nuklir p53. Cell Growth Diff. 1997;8:941-949.
tag afinitas berkode isotop fosfoprotein untuk mengisolasi
dan mengukur fosfopeptida dalam analisis seluruh
proteom. Anal Chem. 2001;73:2578-2586.
42. Harding JJ. Modifikasi protein pasca-translasi kovalen non-
enzimatik non-enzimatik in vivo. Dalam: Anfinsen CB,
Edsall JT, Richards FM, eds. Kemajuan dalam Kimia
Protein. New York, NY: Academic Press; 1985: 247-334.
43. Hinson JA, Roberts DW. Peran interaksi kovalen dan
non- kovalen dalam toksisitas sel: efek pada protein.
Ann Rev Pharmacol Toxicol. 1992;32:471-510.
44. Butterfield DA, Stadtman ER. Proses oksidasi protein pada
otak yang m e n u a . Adv Cell Aging
Gerontol. 1997;2:161-191.
45. Butterfield DA, Drake J, Pocernich C, dkk. Bukti
kerusakan oksidatif pada otak penyakit Alzheimer: peran
sentral amiloid β-peptida. Tren Mol Med. 2001;7:548-
554.
46. Castegna A, Aksenov M, Aksenov M, dkk. Identifikasi proteomik
protein yang dimodifikasi secara oksidatif dalam otak
penyakit Alzheimer:
I. Creatine kinase BB, glutamin sintase dan ubiquitin
karboksi terminal hidrolase L-1. Free Rad Biol Med.
2002;33:81-91.
47. Jenkins LW, Peters GW, Dixon CE, dkk. Proteomik
konvensional dan fungsi menggunakan elektroforesis gel
dua dimensi format besar 24 jam setelah dampak kortikal
terkontrol pada tikus hari 17 pascakelahiran. J
Neurotrauma. 2002;19:715-740.
48. Gozal E, Gozal D, Pierce WM, dkk. Analisis proteomik
daerah CA1 dan CA3 dari hippocampus tikus dan kerentanan
diferensial terhadap hipoksia intermiten. J Neurochem.
2002;83:331-345.
49. Fountoulakis M, Hardmaier R, Schuller E. Perbedaan tingkat
protein antara otak neonatal dan dewasa. Elektroforesis.
2000;21:673- 678.
50. Gygi SP, Rist B, Gerber SA, et al. Analisis
kuantitatif campuran protein kompleks
menggunakan tag afinitas berkode isotop. J
Neurochem. 1999;17:994-999.
51. Vineis P, Bartsch H, Caporaso N, dkk. Berbasis genetik
Polimorfisme metabolisme N-asetiltransferase dan paparan
lingkungan tingkat rendah terhadap karsinogen. Nature.
1994;369: 154-156.
52. Millikan RC, Pittman GS, Newman B, dkk. Merokok,
N- asetiltransferase 1 dan 2, dan risiko kanker payudara.
Cancer Epidemiol Biomarker Prev. 1998;7(5):371-378.
53. Portier CJ, Bell DA. Kerentanan genetik: signifikansi
dalam penilaian risiko. Toxicol Lett. 1998;102–
103:185–189.
54. Eaton DL. Polimorfisme enzim biotransformasi dan
kerentanan terhadap pestisida. Neurotoksikologi.
2000;21(1–2):101–111.
55. Furlong CE, Li WF, Richter RJ, dkk. Faktor penentu
genetik dan temporal sensitivitas pestisida: peran
paraoxonase (PON1). Neurotoksikologi. 2000;21(1-
2):91- 100.
56. Trosko JE, Chang CC, Upham B, dkk. Toksikologi
epigenetik sebagai perubahan yang diinduksi toksik
pada pensinyalan intraseluler yang mengarah pada
perubahan komunikasi antar sel yang berubah. Toxicol
Lett. 1998;102- 103:71-78.
57. Trosko JE. Tantangan terhadap paradigma sederhana
bahwa "karsinogen" adalah "mutagen" dan terhadap uji in

24
 Bagian 1 - Tinjauan Umum
Neurotoksik
59. Maniatis T. Katalisis oleh kompleks IjB kinase multiprotein.
Science. 1997;278:818-819.
60. Vrana KE, Freeman WM, Aschner M. Penggunaan
teknologi microarray dalam penelitian toksikologi.
Neurotoksikologi. 2003;24:321-332.

25
 Bab 2 - Neurotoksikologi Seluler dan Molekuler: Prinsip-prinsip Dasar

61. Barrett T, Xie T, Piao Y, dkk. Perpustakaan cDNA spesifik

63. Silbergeld EK. Pendekatan neurokimia untuk mengembangkan
neuron dopamin murine dopamin dan microarray: peningkatan
penanda biokimiawi neurotoksisitas: tinjauan status saat ini dan
ekspresi COX1 selama neurotoksisitas metamfetamin. Neurobiol
evaluasi prospek masa depan. Environ Res. 1993; 63: 274-286.
Dis. 2001;8:822-833.
64. Organisasi Kesehatan Dunia. Kriteria Kesehatan Lingkungan IPCS
62. Xie T, Tong L, Barrett T, dkk. Perubahan ekspresi gen yang
155. Biomarker dan Penilaian Risiko: Konsep dan Prinsip. Jenewa,
terkait dengan neurotoksisitas dopaminergik yang diinduksi
Swiss: WHO; 1993:57p.
metamfetamin. J Neurosci. 2002;22:274-283.

26