ATPase

ATP sintase atau ATPase merupakan suatu enzim yang dapat mensintesis adenosin trifosfat ( ATP) dari adenosin difosfat (ADP) dan anorganik fosfat (P1) dengan Gradien proton H+. Beberapa enzim tersebut adalah protein membran integral (berlabuh dalam membran biologis), dan zat terlarut bergerak melintasi membran, biasanya melawan gradien konsentrasi (ATPase transmembran). ATP sintase terdapat pada membran mitokondria. Strukturnya dari terdiri subkompleks Fo (cakram subunit-subunit protein C) dan komplek F1 (subunit , 3 subunit dan 3 subunit ). Fo membentuk kanal ion. F1 berisi pusat katalitik, dan bertanggung jawab atas pengangkutan ion hidrogen. Fungsi Na + / K + ATPase ATPase transmembran mengimpor banyak metabolit yang diperlukan untuk metabolisme sel dan racun ekspor, limbah, dan zat terlarut yang dapat menghambat proses seluler. Sebuah contoh penting adalah exchanger natrium-kalium (atau Na + / K + ATPase), yang menetapkan

keseimbangan konsentrasi ionik yang mempertahankan potensial sel. Contoh lain adalah kalium ATPase hidrogen (H + / K + ATPase atau lambung pompa proton). Selain penukar, kategori lain dari ATPase transmembran termasuk co-transporter dan pompa (namun, beberapa exchanger juga Mekanisme kerjanya : Daya gerak proton menghasilkan ATP sintase di membran yang jika terdapat Pi + ADP akan membentu ATP, ATP sintesa terbenam di membran dalam, bersama dengan kompleks rantai respiratorik. Beberapa subunit protein ini memiliki bentuk seperti bola yang tersusun mengitari sebuah sumbu yang dikenal sebagai F1, yang menonjol kedalam matriks dan berperan dalam mekanisme fosforilasi. F1 melekat pada suatu kompleks protein membran yang dikenal sebagai F0 yang juga terdiri dari beberapa subunit protein. F0 menembus membran mitokondria dan membentuk suatu kanal proton. Aliran proton melalui F0 menyebabkan F0 berputar dan memicu produksi ATP dikomplek F1. Hal ini diperkirakan terjadi melalui suatu binding change mechanism dengan perubahan konformasi subunit di F1 berubah suatu sumbuh berputar dari konformasi yang mengikat ATP secara erat ke konformasi yang membebaskan ATP dan mengikat ADP dan P1 sehingga dapat dibentuk ATP berikutnya. Menurut perkiraan untuk setiap NADH yang teroksidasi, kompleks I dan III masing masing memindahkan empat proton dan kompleks IV memindahkan dua proton. pompa).

ATPase transmembran memanfaatkan energi potensial kimia ATP, karena mereka melakukan kerja mekanik: zat terlarut transportasi mereka ke arah yang berlawanan dengan arah termodinamika atau melawan gradien konsentrasi yaitu, dari sisi membran mana mereka berada dalam konsentrasi rendah ke sisi di mana mereka berada dalam konsentrasi tinggi. Proses ini dianggap transpor aktif. Ada berbagai jenis ATPase (berdasarkan fungsi dan struktur): 1. F-ATPase (F1FO-ATPase) di mitokondria, kloroplas dan membran plasma bakteri adalah penghasil utama ATP, dengan menggunakan gradien proton yang dihasilkan oleh fosforilasi oksidatif (mitokondria) atau fotosintesis (kloroplas). 2. V-ATPase (V1VO-ATPase) terutama ditemukan dalam vakuola eukariotik, catalysing hidrolisis ATP untuk mengangkut zat terlarut dan pH lebih rendah pada organel seperti pompa proton dari lisosom. 3. A-ATPase (A1AO-ATPase) ditemukan dalam Archaea dan fungsi seperti F-ATPase 4. P-ATPase (E1E2-ATPase) ditemukan pada bakteri, jamur dan di membran plasma eukariotik dan organel, dan fungsi untuk mengangkut berbagai ion yang berbeda di seluruh membran. 5. E-ATPase adalah sel-permukaan enzim yang menghidrolisis berbagai NTP, termasuk ATP ekstraseluler. P-ATPase (kadang dikenal sebagai E1-E2 ATPase) ditemukan pada bakteri dan di beberapa membran plasma eukariotik dan organel. Namanya adalah karena keterikatan waktu singkat fosfat anorganik pada residu aspartat pada saat activation. P-ATPase berfungsi untuk

mengangkut berbagai senyawa yang berbeda, termasuk ion dan fosfolipid, melintasi membran menggunakan hidrolisis ATP untuk energi. Ada kelas yang berbeda dari P-

ATPase, yang masing-masing mengangkut jenis tertentu ion: H +, Na +, K +, Mg2 +, Ca2 +, Ag + dan Ag2 +, Zn2 +, Co2 +, Pb2 +, Ni2 +, Cd2 +, Cu + dan Cu2 +. P-ATPase dapat terdiri dari satu atau dua polipeptida, dan biasanya dapat mengasumsikan dua konformasi utama yang disebut E1 dan E2.

Na+/K+ ATPase pump

Pompa 2 K + masuk ke dalam dan 3 Na + keluar - Penting bagi banyak fungsi seluler (keseimbangan osmotik sel) - 3 Na + keluar untuk setiap 2 K + ion keluar - Menggunakan ATP sebagai sumber energi

- Pengikatan fosfat dari ATP mengakibatkan perubahan konformasi yang memungkinkan ion untuk diangkut - Residu asparate menjadi terfosforilasi dan transfer energi mengubah bentuk konformasi protein - Situs binding Na + menghubungkan dari afinitas tinggi di dalam ke afinitas rendah di luar untuk memungkinkan pengikatan Na + di dalam dan pelepasan Na + ion di luar. - Situs binding K + menghubungkan dari afinitas tinggi di luar ke rendah afinitas di dalam untuk alasan yang sama seperti Na+ - Dapat diblokir dengan digitalis - Pompa diblokir tidak dapat mengangkut ion melintasi membran dan gradien kimia untuk Na dan K perlahan-lahan menghilang berangsur-angsur, resting potensial berubah. - Potensi dibangun dalam ion Na + akan digunakan oleh banyak proses yaitu cotransporters yang berbeda, sinyal saraf dll

Ca+2 ATPase pump

Pompa 2 Ca +2 ion keluar untuk setiap 1 ATP molekul yang digunakan - Menggunakan ATP untuk mendorong Ca +2 melawan gradien konsentrasi yang sangat besar - Internal binding sites Ca++ memiliki afinitas yang sangat tinggi (untuk mengatasi rendahnya konsentrasi Ca +2 di dalam sel) - Transfer energi dari ATP ke aspartat dari Ca + ATPase menyebabkan perubahan konformasi protein dan Ca +2 diangkut melintasi membran - Ca +2 binding sites di luar memiliki afinitas rendah sehingga Ca +2 dilepaskan

- Transfer energi dari ATP untuk pompa memicu perubahan konformasi yang bergerak protein dan memungkinkan translokasi Ca +2 melintasi membran. Pada saat yang sama +2 situs mengikat Ca berubah dari tinggi ke afinitas rendah. - Dalam sel otot Ca +2 ATPase adalah protein utama yang ditemukan dalam membran retikulum sacrcoplasmic (SR). Seperti yang akan kita lihat SR adalah sebuah situs penyimpanan untuk Ca +2 yang rilis untuk mendorong kontraksi otot. Ca+2 ATPase akan menghilangkan kelebihan Ca +2 dari sitoplasma dan memompa ke dalam lumen SR. 80% dari protein di SR adalah Ca +2 ATPase.

Mekanisme Pompa Kalsium

Kalsium merupakan second messenger yang sangat banyak digunakan pada berbagai fungsi sel. Konsentrasi kalsium dalam sitosol sangat kecil (10-20 nM), di ekstrasel sebesar 1-2 mM. Di dalam sel, kalsium tersimpan di dalam retikulum ndoplasma (pada sel saraf) atau di retikulum sarcoplasma (pada sel otot). kalsium di RE dilepaskan jika terjadi ikatan antara IP3 denganIP3-gated kalsium channel. Fungsi ion Ca++ antara lain: 1. Kontraksi otot 2. Pelepasan neurotransmitter pada sel saraf 3. Eksositosis pada secretory cells, contoh: histamine Konsentrasi ion Kalsium pada CES normalnya sekitar 2,4 mEq/L. Bila konsetrasi ion kalsium turun melewati batas normal (hipokalsemia), maka akan timbul rangsangan pada sel-sel saraf dan otot yang meningkat dengan nyata dan pada beberapa keadaan yang ekstrem dapat menyebabkan tetani hipokalsemik yang ditandai dengan kekekuan otot. Sedangkan pada keadaan dimana konsentrasi ion Kalsium melebihi nilai normalnya (hiperkalsemia), yang menekan ambang rangsang pada neuromuskular yang berakibat aritmia jantung. Ion kalsium secara aktif diabsorbsi ke dalam darah terutama dari duodenum dan jumlah absorbsi ion kalsium dikontrol sangat tepat untuk memenuhi kebutuhan harian tubuh akan kalsium. Faktor penting yang mengontrol absorbsi kalsium adalah PTH yang disekresikan oleh kelenjar paratiroid, dan vitamin D. Mekanisme Pompa kalsium

Peristiwa sinyal sering melibatkan masuknya kalsium melintasi membran plasma, atau pelepasan kalsium dari sarcoplasmic atau retikulum endoplasma, di mana peningkatan kalsium cytosolic dapat memulai atau mengubah proses seluler. Semua proses selular diatur oleh konsentrasi kalsium cytosolic, mulai dari transkripsi DNS dan kelangsungan hidup sel untuk melepaskan neurotransmiter dan fungsi otot. Untuk menggunakan kalsium sebagai sinyal molekul, sel harus menciptakan gradien melintasi membran kalsium. Untuk mendapatkan konsentrasi gradien, ion kalsium harus aktif melintasi membran dipompa melawan konsentrasi gradien. Sel menggunakan pompa kalsium untuk mengarahkan aliran ion kalsium melalui membran plasma atau membran organel, dan gradien yang dihasilkan digunakan dalam berbagai sistem sinyal menggunakan gated kanal ion. Pompa kalsium ATPase yang mengangkut ion melintasi membran menggunakan energi yang diperoleh dari hidrolisis ATP. Kalsium ATPase merupakan bagian dari pompa ion, yang bertanggung jawab atas ATPdependent transpor aktif ion-ion di berbagai membran selular. ATPase tersebar luas di seluruh filogenetik, dan termasuk transporter seperti pompa natrium / kalium dan pompa lambung hidrogen / kalium, yang sangat penting dalam membangun berbagai gradien ion dalam sel. ATPase berasal dari mekanisme, yang melibatkan P hosphorylation dari residu aspartat (Asp351) menggunakan fosfat pada ATP, yang mengakibatkan perubahan pembentukan, baik dalam sitoplasma mengikat ATP-domain dan kalsium - mengikat transmembran domain, sehingga ion melintasi membran. Selanjutnya dari ion kalsium menyebabkan hidrolisis aspartyl dari gugus fosfat, kembali ke pembentukan pompa semula. Mekanisme pompa kalsium dalam kontraksi dan relaksasi Stimulasi elektrik miosit menyebabkan kalsium melalui saluran kalsium pada tubulus T. Tubulus T adalah invaginasi membran sel yang berhubungan dengan tiap sarkomer dan influks kalsium yang menyebabkan pelepasan lebih lanjut kalsium intraseluler dari retikulum endoplasma. Peningkatan kalsium intraselular menyebabkan kepala miosin bergerak disepanjang sarkomer sehingga menghasilkan kontraksi miokard, koversi ATP menjadi ADP memberikan energi yang dibutuhkan. Peningkatan konsentarasi kalsium intraselular mengaktivasi pompa kalsium/ ATP-ase, mengembalikan kalsium ke retikulum endoplasma dan juga mengaktifkan saluran pertukaran kalsium, tergantung natrium yang mengeluarkan kalsium ke ruang ekstraselular. Penurunan kalsium intraselular menyebabkan relaksasi miokard. Miosit memiliki

sangat banyak mitoondria dan pelepasan energi dari jalur metabolik meregenerasi ATP dari ADP dan Fosfat.

Konsentrasi kalsium intraseluler di jantung dan sel otot polos pembuluh darah pada kisaran 10-7 sampai 10-5 M. konsentrasi kalsium ekstraseluler adalah sekitar 2 10-3 M (2 mM). Oleh karena itu, ada gradien kimia untuk kalsium untuk berdifusi ke dalam sel. Karena sel-sel memiliki resting membrane potential negatif (sekitar -90 mV dalam miosit jantung), ada juga kekuatan pendorong kalsium listrik ke dalam sel. Namun, kecuali selama potensial aksi ketika permeabilitas membran sel untuk kalsium meningkat, ada sedikit kebocoran kalsium ke dalam sel. Kalsium yang masuk sel selama potensial aksi (misalnya, selama depolarisasi pacemaker dan non-pacemaker jantung) harus dikeluarkan dari sel lain merupakan akumulasi kalsium akan menyebabkan disfungsi seluler. Kalsium akan digerakkan dari sel oleh dua mekanisme dasar. Mekanisme pertama melibatkan ATP-dependent Ca + + pompa yang secara aktif menghilangkan kalsium dari sel. Mekanisme kedua adalah exchanger natrium-kalsium. Mekanisme yang tepat dimana pertukaran ini belum diketahui dengan jelas. Hal ini diketahui bahwa kalsium dan natrium dapat bergerak di kedua arah di sarcolemma tersebut. Selanjutnya, tiga ion natrium dipertukarkan untuk setiap kalsium, sehingga potensi electrogenic kecil (beberapa millivolt) yang dihasilkan oleh exchanger ini. Arah gerakan ion-ion ini (baik dalam atau ke luar) tergantung pada potensial membran dan gradien kimia untuk ion. Ketika potensial membran negatif (misalnya, dalam sel beristirahat), exchanger mengangkut Ca + + keluar sebagai Na + memasuki sel. Ketika sel tidak terpolarisasi dan memiliki potensial membran positif, exchanger bekerja dalam arah yang berlawanan (yaitu, Na + keluar dan Ca + + memasuki sel). Oleh karena itu, selama sistol ventrikel ketika miosit

depolarisasi, Ca + + memasuki sel melalui exchanger ini. Sebaliknya, selama diastol ventrikel ketika sel berada repolarisasi, Ca + + meninggalkan sel melalui exchanger ini. Kita juga tahu bahwa peningkatan konsentrasi natrium intraseluler menyebabkan peningkatan konsentrasi kalsium intraseluler melalui pertukaran ini. Hal ini memiliki implikasi fisiologis yang penting. Salah satu contoh kejadian ini adalah ketika aktivitas Na + / K +-ATPase pompa menurun. Pada kondisi yang membutuhkan energy ini, pompa ATP-dependent mengangkut sodium keluar dari sel dan kalium ke dalam sel. Ketika aktivitas pompa ini berkurang, misalnya, oleh hipoksia seluler (yang menyebabkan tingkat ATP menurun) atau dengan inhibitor kimia pompa ini seperti digitalis, maka konsentrasi intraseluler Na + meningkat.