PENENTUAN KADAR SULFAMETOKSAZOL DAN TRIMETOPRIM DALAM

TABLET SECARA MULTIKOMPONEN DAN MATRIKS DENGAN METODE

SPEKTROFOTOMETRI ULTRA VIOLET (UV)

Siti Fatmala

Fakultas Farmasi Universitas Sumatera Utara Medan Jalan Dr.T.Mansyur No. 9 Kampus
USU Padang Bulan Medan 20155

ABSTRAK

Kotrimoksazol merupakan kombinasi dari sulfametoksazol dan trimetoprim dengan

perbandingan 5:1, bersifat bakterisid dengan spektrum kerja lebih lebar dibandingkan dengan
sulfonamida. Trimetoprim dan sulfametoksazol menghambat reaksi enzimatik obligat pada
dua tahap yang berurutan pada bakteri sehingga kombinasi kedua obat memberikan efek
sinergistik. pengujian ini bertujuan untuk menetapkan kadar sulfametoksazol dan trimetoprim
dalam sediaan tablet menggunakan spektrofotometri ultra violet. Persyaratan kadar tablet
kotrimoksazol menurut Farmakope Indonesia Edisi IV tahun 1995 baik untuk
sulfametoksazol maupun trimetoprim mengandung tidak kurang dari 93,0% dan tidak lebih
dari 107,0% dari jumlah yang tertera pada etiket. Hasil pengujian menunjukkan bahawa kadar
tablet kotrimoksazol yang di uji tersebut tidak memenuhi persyaratan, yaitu untuk kadar
sulfametoksazol sebesar 66,6285% - 86,1455% dan kadar trimetoprim sebesar 27,5212% -
176,098%.
Kata kunci : Spektrofotometri, Sulfametoksazol, Trimetoprim, Tablet

Pendahuluan ini mempunyai gugus kromofor sehingga

Banyaknya sediaan obat
antibakteri yang beredar dengan
menggunakan kombinasi bahan aktif
Sulfametoksazol dan Trimetoprim (5:l),
Kombinasi obat ini mempunyai
keuntungan yaitu sinergi atau potensiasi
bila dibandingkan dengan masing masing
penyusunnya. Sulfametoksazol
mempunyai sifat kompetitif antagonis
terhadap asam p-amino benzoate yaitu
dengan menutup perubahan asam p-amino
benzoate menjadi asam dihidrofolat yang
merupakan bentuk tereduksi asam folat,
sedang Trimetoprim adalah penghambat
enzim dihidrofolat reduktase yang
mempengaruhi metabolisme nucleoprotein
mikroorganisme dengan mengganggu
system asam folat-folinatt. Kedua senyawa
memberikan serapan dalam pelarut yang
sama dalam pelarut NaOH 0,1 N pada
panjang gelombang maksimum yang
berdekatan dan bila dilakukan pengukuran
pada daerah UV akan didapatkan
penjumlahan dari masing-masing serapan.
Spektra ultraviolet kedua senyawa
menunjukkan puncak berbeda, , yaitu 256-
287 nm dalam larutan NaOH 0.1N,
sehingga dimungkinkan untuk dilakukan
penetapan kadar kedua senyawa tersebut.
Dengan dasar perbedaan di atas
diharapkan kombinasi kotrimoksazol dapat
ditetapkan kadarnya dengan
spektrofotometer ultraviolet.
Metode spektrofotometri dapat
digunakan untuk kualitatif maupun
kuantitatif. Penggunaan metode untuk
analisa kuantitaif didasarkan atas hukum
Lambert-
Beer, yaitu :
A = abc
dimana A : absorpi atau serapan
a : absorptivitas, karakteristik untuk
meolekul atau ion penyerap dalam larutan
tertentu dan panjang gelombang tertentu
b : ketebalan media yang dilewati
c : kadar larutan
Bila sistem mengandung lebih dari
satu komponen penyerap, ternyata bahwa
senyawa-senyawa tersebut berkelakuan
tidak tergantung satu terhadap lain dan
absorbansinya adalah aditif. Oleh karena
itu, penetapan kadar lebih dari satu
komponen
menggunakan persamaan multikomponen,
yaitu menggunakan persamaan :
ASulfametoksazol = AS + AT
= αs . b . cs + αT . b .
cT ………………………………….. (1)
ATrimetoprim = AS
- AT
= αs . b . cs
- αT . b .
cT ………………………………….. (2)
Spektrofotometri UV-Vis adalah
anggota teknik analisa spektroskopi
memakai sumber radiasi elektromagnetik
ultraviolet dan sinar tampak dengan
memakai instrument spektrofotometer
(Mulya, & Suharman 1995: 26).
Spektrofotometri UV-Vis melibatkan
energi elektronik yang cukup besar pada
molekul yang dianalisa, sehingga dapat
digunakan untuk analisa kuantitatif
maupun kualitatif. Pada penelitian ini akan
dilakukan penetapan kadar
sulfametoksazol dan trimetoprim pada
sediaan tablet dengan menggunakan
NaOH 0,1 N sebagai pelarut yang
digunakan untuk keperluan analisis
Sulfametoksazol dan Trimetoprim dengan
metode Spektrofotometri UV.
Metode Penelitian
Alat dan Bahan
Alat yang digunakan adalah
Spektrofotometer UV-Vis Merk Shimadzu
1240, Neraca analitik, alat-alat gelas,
mortar dan stamper. Bahan yang
digunakan: Sulfametoksazol
baku,trimetoprim baku, tablet
kotrimoksazol, dan NaOH 0,1 N.
Prosedur Penelitian
Pembuatan larutan induk baku
Sulfametoksazol konsentrasi 1000 dan 100
ppm
Sebanyak 50 mg Sulfametoksazol
BPFI, dimasukkan dalam labu takar 50 ml,
tambahkan 15 ml etanol, kocok sampai
larut, encerkan dengan NaOH 0,1 N
sampai volumenya tepat 50 ml sehingga
akan diperoleh konsentrasi 1000 μg/mL
(1000,0 ppm). Dari larutan baku
konsentrasi 1000,0 ppm diambil 5 ml
Masukkan dalam labu takar 50 ml,
cukupkan dengan NaOH 0,1 N sampai
tanda sehingga
diperoleh konsentrasi 100,0 ppm, yang
akan digunakan untuk pembuatan seri
konsentrasi.
Penentuan panjang gelombang maksimum
Sulfametoksazol
Pipet 3 ml dari larutan induk baku
sulfametoksazol 100,0 ppm, masukkan
kedalam labu tentukur 50 ml, encerkan
dengan NaOH 0,1 N sampai garis tanda
sehingga diperoleh konsentrasi 6 ppm.
Larutan baku dengan konsentrasi 6,0 ppm
tersebut dikocok hingga homogen dan
dimasukkan ke dalam kuvet kemudian
dibaca absorbansinya pada panjang
gelombang 200-400 nm.
Pembuatan larutan induk baku
Trimetoprim konsentrasi 1000 dan 100
ppm
Sebanyak 50 mg Trimetoprim
BPFI, dimasukkan dalam labu takar 50 ml,
tambahkan 15 ml etanol, kocok sampai
larut, encerkan dengan NaOH 0,1 N
sampai volumenya tepat 50 ml sehingga
akan diperoleh konsentrasi 1000 μg/mL
(1000,0 ppm). Dari larutan baku
konsentrasi 1000,0 ppm diambil 5 ml,
masukkan dalam labu takar 50 ml,
cukupkan dengan NaOH 0,1 N sampai
tanda sehingga
diperoleh konsentrasi 100,0 ppm, yang
akan digunakan untuk pembuatan seri
konsentrasi.
Penentuan panjang gelombang maksimum
Trimetoprim
Pipet 8,5 ml dari larutan induk
baku trimetoprim 100,0 ppm, masukkan
kedalam labu tentukur 50 ml, encerkan
dengan NaOH 0,1 N sampai garis tanda
sehingga diperoleh konsentrasi 17 ppm.
Larutan baku dengan konsentrasi 17,0 ppm
tersebut dikocok hingga homogen dan
dimasukkan ke dalam kuvet kemudian
dibaca absorbansinya pada panjang
gelombang 200-400 nm.
Penentuan Absorptivitas (α)
Sulfametoksazol
Pipet 5 ml dari Larutan Induk Baku
sulfametoksazol 100,0 ppm , masukkan
dalam labu tentukur 50 ml, cukupkan
dengan NaOH 0,1 N sampai garis tanda
sehingga diperoleh konsentrasi 10,0 ppm.
Larutan baku dengan konsentrasi 10,0 ppm
tersebut dikocok hingga homogen dan
dimasukkan ke dalam kuvet kemudian
dibaca absorbansinya pada panjang
gelombang sulfametoksazol dan
trimetoprim.
Penentuan Absorptivitas (α) Trimetoprim
Pipet 1 ml dari Larutan Induk Baku
Trimetoprim 100,0 ppm , masukkan dalam
labu tentukur 50 ml, cukupkan dengan
NaOH 0,1 N sampai garis tanda sehingga
diperoleh konsentrasi 2,0 ppm. Larutan
baku dengan konsentrasi 2,0 ppm tersebut
dikocok hingga homogen dan dimasukkan
ke dalam kuvet kemudian dibaca
absorbansinya pada panjang gelombang
sulfametoksazol dan trimetoprim.
Pembuatan Kurva Overlapping dari
sulfametoksazol dan trimetoprim
Larutan baku sulfametoksazol
dengan konsentrasi 10,0 ppm dan larutan
baku trimetoprim dengan konsentrasi 2,0
ppm, masing-masing diukur pada rentang
panjang gelombang 200 – 400 nm.
Kemudian dibuat kurva overlapping.
Penetapan Kadar Sampel
Dua puluh tablet yang telah
memenuhi keseragaman bobot kemudian
digerus hingga halus dan homogen.
Sampel serbuk ditimbang setara dengan 25
mg Sulfametoksazol, masukkan kedalam
labu tentukur 50 ml, tambahkan 15 ml
etanol, kocok dan cukupkan dengan NaOH
0,1 N sampai garis tanda sehingga
diperoleh konsentrasi sulfametoksazol
500,0 ppm dan trimetoprim 100,0 ppm.
Saring dengan kertas saring, buang 10 ml
filtrat pertama.
Pipet 1,0 ml filtrat masukkan
kedalam labu tentukur 50 ml, encerkan
dengan NaOH 0,1 N sampai garis tanda
sehingga diperoleh konsentrasi
sulfametoksazol 10,0 ppm dan trimetoprim
2,0 ppm. Kemudian ukur serapan pada
panjang gelombang maksimum
sulfametoksazol dan trimetoprim.
Hasil dan Pembahasan
Penentuan Panjang Gelombang
Maksimum
 Panjang gelombang maksimum Sulfanmetoksazo
0,861 0,0861
(λmaks) merupakan panjang gelombang l (256 nm)
dimana terjadi eksitasi elektronik yang Trimetoprim
0,225 0,0225
memberikan absorbansi maksimum. (287 nm)
Alasan dilakukan pengukuran pada
panjang gelombang maksimum adalah Tabel 2 Perhitungan Absorptivitas (α)
perubahan absorban untuk setiap satuan Trimetoprim
konsentrasi adalah paling besar pada Absorptivita
Panjang Serapa
panjang gelombang maksimum, sehingga s (α)
Gelombang n
akan diperoleh kepekaan analisis yang 𝐴
Maksimum (A) 𝛼=
maksimum. Dari hasil penelitian yang 𝑏 .𝑐
dilakukan panjang gelombang maksimum Sulfanmetoksazo
0,031 0,0155
yang diperoleh adalah 287 nm. l (256 nm)
Penentuan Absorptivitas (α) Trimetoprim
0,044 0,022
Sulfametoksazol dan Trimetoprim (287 nm)
Absorptivitas merupakan
karakteristik suatu zat yang Penetapan Kadar Sampel
menginformasikan berapa banyak cahaya Pada percobaan Penetapan Kadar
yang diserap oleh molekul zat tersebut Sulfametoksazol dan Trimetoprim dalam
pada panjang gelombang tertentu. Semakin tablet secara multikomponen dengan
besar nilai Absorptivitas suatu zat maka metode spektrofotometri UV diperoleh
semakin banyak cahaya yang diabsorbsi kadar sulfametoksazol sebesar 66,6285% -
olehnya, atau dengan kata lain nilai 86,1455% dan kadar trimetoprim sebesar
serapan (A) akan semakin besar. Dari hasil 27,5212% - 176,098%, sedangkan
penelitian yang dilakukan absorptivitas persyaratan kadar sulfametoksazol dan
sulfametoksazol yang diperoleh dapat trimetoprim menurut Farmakope Indonesia
dilihat pada tabel 1 dan absorptivitas edisi IV tahun 1995 adalah tidak kurang
trimetoprim yang diperoleh dapat dilihat dari 93,0% dan tidak lebih dari 107,0%
pada tabel 2. dari jumlah yang tertera pada etiket.
Sehingga hasil range kadar yang diperoleh
Tabel 1 Perhitungan Absorptivitas (α) tidak memenuhi persyaratan Farmakope
Sulfametoksazol Indonesia Edisi IV tahun 1995 untuk
Absorptivita sulfametoksazol dan trimetoprim. Hasil
Panjang Serapa
s (α) penetapan kadar kotrimoksazol dapat
Gelombang n
𝐴 dilihat pada tabel 3.
Maksimum (A) 𝛼=
𝑏 .𝑐
sazol 3%
Tabel 3. Penetapan Kadar 73,5
2 0,656 7,4375
Kotrimoksazol 8%
Konsent % 71,6
Absorb 3 0,664 7,3125
rasi etike 8%
ansi
(ppm) t 87,1
4 0,709 8,625
Sulfametok 1 0,607 6,875 68,3 4%
 81,8 Daftar Pustaka
5 0,712 7,8125
3%
Akbar, Arahman.2013. Penetapan Kadar
81,7
6 0,732 7,9375 Kotrimoksazol Dengan metode
4%
Kromatografi Cair Kinerja Tinggi (Kckt).
48,4
1 0,151 0,9742 Medan
1%
Susilo, Jatmiko.2006. Penetapan kadar
49,7
2 0,161 1,0065 co.trimoksazol yang dilakukan
8%
dengan Menggunakan
108,
spektrofotometer ultraviolet Secara
3 0,185 2,2193 77
simultan.klt
%
Rahayu, dkk.2009. Penetapan kadar tablet
Trimetopri 109,
ranitidin menggunakan metode
m 4 0,118 2,1685 54
Spektrofotometri uv-vis dengan
%
pelarut methanol
132,
Gunawan, gan sulistia.Farmakologi Dan
5 0,207 2,5383 95
Terapi Edisi 5. Departemen.
%
Farmakologi dan
161, Terapeutik FKUI.2007
6 0,218 3,1343 48 Ditjen POM .1995. Farmakope
% Indonesia. Edisi IV. Jakarta:
Departemen. Kesehatan R.I.
Ketidaksesuaian hasil range kadar yang Staf Laboratorium Kimia Farmasi
diperoleh dikarenakan ketidaktelitian dan Kuantitatif. Panduan Praktikum
ketidak akuratan praktikan pada Analisis Farmasi. Medan
pelaksanaan percobaan seperti pada saat
penimbangan bahan, pemipetan larutan,
pemindahan larutan, pelarutan sampel,
bersihan kertas saring, dan lain-lain.
Sehigga range kadar yang diperoleh jauh
dari persyaratan Farmakope Indonesia
Edisi IV tahun 1995.

Kesimpulan
Kadar sulfametoksazol yang diperoleh
66,6285% - 86,1455% dan kadar
trimetoprim yang diperoleh 27,5212% -
176,098%, sedangkan menurut farmakope
Indonesia edisi IV kadar sulfametoksazol
dan trimetoprim tidak boleh kurang dari
93,0% - 107,0% dari yang tertera pada
etiket. Sehingga data tidak memenuhi
persyaratan yang tertera pada etiket.