A.

Sejarah bakteri Clostridium botulinum

Pada kasus intoksikasi melalui makanan, tidak ada kasus yang lebih berbahaya
dibandingkan dengan botulisme. Penyebabnya adalah Clostridium botulinum. Botulisme ini
sudah menyebar hampir ke seluruh dunia. Bakteri ini menghasilkan racun yang sangat
berbahaya; 1 ons racun yang dihasilkan mampu mebunuh semua penduduk Amerika Serikat.
Botulisme biasa terjadi karena mengonsumsi makanan yang sudah terkontaminasi
Clostridium botulinum. Botulisme dapat dihindari dengan memanaskan makanan sebelum
dikonsumsi. Kasus – kasus yang terjadi selalu berkaitan dengan mengonsumsi makanan dingin.
Contohnya, kasus terbesar di Michigan, Amerika Serikat pada tahun 1977 ketika 58
orang menderita botulisme setelah memakan makanan kaleng di sebuah restoran. Pada tahun
1982, seorang pria Belgia meninggal karena botulisme setelah makan makanan yang terbuat dari
daging salmon kaleng yang telah terkontaminasi Clostridium botulinum.
Botulisme juga dapat terjadi pada bayi tapi, hal ini jarang terjadi. Hal ini tejadi sejak
masa kehamilan enam bulan pertama. Selain itu, terdapat pula botulisme pada luka yang
merupakan analog dari tetanus. Namun, botulisme pada luka ini sangat langka.

B. Klasifikasi bakteri Clostridium botulinum

Klasifikasi ilmiah
Domain : Bacteria
Divisi : Firmicutes
Kelas : Clostridia
Ordo : Clostridiales
Famili : Clostridiaceae
Genus : Clostridium
Spesies : Clostridium botulinum

C. Struktur dan fungsi sel bakteri Clostridium botulinum

Struktur dan fungsi dasar pada sel bakteri meliputi dinding sel, membran plasma,
sitoplasma, ribosom, DNA, dan granula penyimpanan.

1. Dinding sel
 Dinding sel berfungsi sebagai pelindung dan pemberi bentuk bakteri. Dinding sel bakteri
tersusun dari peptidoglikan, yaitu gabungan protein dan polisakarida. Berdasarkan perbedaan
ketebalan lapisan peptidoglikan dinding sel, bakteri dapat dibedakan atas bakteri Gram positif
dan bakteri Gram negatif.
Bakteri Clostridium botulium adalah gram positif. Bakteri Gram positif adalah bakteri
yang memiliki dinding sel dengan lapisan peptidoglikan yang tebal. Bakteri ini akan berwarna
ungu jika diwarnai dengan pewarnaan Gram.

2. Membran plasma
Membran plasma adalah membran yang menyelubungi sitoplasma. Membran plasma
tersusun dari lapisan fosfolipid dan protein. Membran plasma bersifat selektif permeabel dan
berfungsi untuk mengatur pertukaran zat antara sel dengan lingkungannya.

3. Sitoplasma
Sitoplasma adalah cairan sel. Sitoplasma bakteri tidak mengandung banyak organel
seperti pada sel eukariotik. Sitoplasma bakteri antara lain mengandung ribosom, DNA, dan
granula penyimpanan.

4. Ribosom
Ribosom adalah organel yang berukuran sangat kecil dan merupakan tempat terjadinya
sintesis protein yang dibantu oleh RNA (ribonucleic acid: asam ribonukleat).

5. DNA
DNA (deoxyribonucleic acid: asam deosiribonukleat) adalah materi pembawa informasi
genetik. DNA bakteri berupa rantai tunggal berbentuk melingkar (nukleoid). Beberapa bakteri
memiliki tambahan DNA melingkar yang lain yang lebih kecil yang disebut plasmid. DNA
bakteri tidak mengandung protein histon dan dengan demikian disebut dengan DNA telanjang.

6. Granula penyimpanan
Granula penyimpanan berfungsi untuk menyimpan cadangan makanan. Umumnya
bakteri menyimpan cadangan makanan yang dibutuhkannya. Struktur dan fungsi tambahan pada
sel bakteri meliputi bagian kapsul, flagellum, pilus, dan fimbria, klorosom, vakuola gas, serta
endospora.
 Endospora adalah bentuk istirahat (laten) dari beberapa jenis bakteri Gram positif.
Endospora terbentuk di dalam sel bakteri jika kondisi lingkungan tidak menguntungkan bagi
kehidupan bakteri. Dengan demikian, endospora berfungsi sebagai pertahanan diri. Endospora
mengandung sedikit sitoplasma, materi genetik, dan ribosom.
Dinding endospora tebal dan tersusun dari protein. Tebalnya dinding endospora
menyebabkan endospora tahan terhadap kekeringan, radiasi cahaya, suhu tinggi, dan zat kimia.
Jika kondisi lingkungan menguntungkan, endospora tumbuh menjadi sel baru.

D. Karakteristik bakteri Clostridium botulinum

1. Bentuk bakteri Clostridium botulium

Clostridium botulinum merupakan bakteri berbentuk bacill (batang), anaerobik (tidak
dapat tumbuh di lingkungan yang mengandung oksigen bebas), Gram-positif, dapat
membentuk spora, dan dapat memproduksi racun syaraf yang kuat. Sporanya tahan panas dan
dapat bertahan hidup dalam makanan dengan pemrosesan yang kurang sesuai atau tidak
benar.
Ada tujuh tipe botulisme (A, B, C, D, E, F dan G) yang dikenal, berdasarkan ciri khas
antigen dari racun yang diproduksi oleh setiap strain. Tipe A, B, E, dan F dapat
menyebabkan botulisme pada manusia. Tipe C dan D menyebabkan sebagian besar botulisme
pada hewan. Hewan yang paling sering terinfeksi adalah unggas liar dan unggas ternak, sapi,
kuda, dan beberapa jenis ikan. Walaupun tipe G telah diisolasi dari tanah di Argentina, belum
ada kasus yang diketahui disebabkan oleh strain ini. Ikan sangat sensitif terhadap toksin tipe
E.

Clostridium botulinum pengamatan di bawah Mikroskop elektron

2. Morfologi
Sel vegetatif C. botulinum berbentuk batang dan berukuran cukup besar untuk ukuran
bakteri. Panjangnya antara 3 μm hingga 7 – 8 μm. Lebarnya antara 0,4 μm hingga 1,2 μm.
Pada pengecatan Gram, C. botulinum yang mengandung spora bersifat Gram positif,
sedangkan C. botulinum yang tidak mengandung spora bersifat Gram negatif. Namun, C.
botulinum termasuk bakteri Gram positif. Spora yang dihasilkan oleh sel Clostridium secara
struktural sangat berbeda dengan sel pada spesies itu sendiri, tapi yang terkenal adalah spora
pada Clostridia yang bersifat patogen. Lapisan paling luar spora disebut dengan exosporium.
Exosporium ini bervariasi antara masing – masing species, terkenal pada species yang
bersifat patogen, termasuk C. botulinum.
Lapisan di bawah exosporium disebut dengan membran spora, terdiri atas protein yang
strukturnya tidak biasa. Bagian tengah spora mengandung DNA spora, ribosom, enzim, dan
kation. Kandungan logam pada spora C. botulinum berbeda dari kandungan metal pada
Bacillus. Strain proteolitik C. Botulinum dapat menghasilkan spora yang sangat resisten
dengan pemanasan tinggi.C. botulinum merupakan bakteri anaerob yang tidak dapat tumbuh
di lingkungan anaerob.
Hasil uji pertumbuhan pada media agar aerob adalah negatif. C. botulinum bersifat motil
atau dapat bergerak dengan flagel yang berbentuk peritirik. Motilitas C. botulinum ini
umumnya sulit ditunjukkan, terutama pada strain yang sudah cukup lama ditanam. C.
botulinum merupakan bakteri Gram positif yang memiliki kandungan peptidoglikan antara 80
– 90% dari komponen dinding sel. C. botulinum tidak dapat membentuk kapsula maupun
plasmid. Bakteriofag pada genus Clostridium dapat diasosiasikan dengan neurotoksisitas dari
C. botulinum tipe C dan D.
http://www.biologiedukasi.com/2014/11/mengenal-lebih-dekat-clostridium.html

D. Sumber Kontaminasi
Clostridium botulinum banyak terdapat di alam yang sering ditemukan di tanah dan
lingkungan laut di seluruh dunia dan dapat ditemukan juga di dalam usus hewan termasuk
ikan. Frekuensi isolasi dan variasi jenis bervariasi dengan wilayah geografis. Tipe A
mendominasi di AS Barat, Amerika Selatan dan Cina. Tipe B di AS Timur dan Eropa dan
tipe E di daerah utara dan dalam lingkungan perairan beriklim sedang.
 1. Pertumbuhan dan Kelangsungan Hidup dalam makanan
Clostrium Botulinum merupapakm anaerob obligat (hanya tumbuh tanpa oksigen),
sehingga risiko dari patogen ini dapat ada pada produk yang dikemas tanpa oksigen antara
lain makanan kaleng, botol atau produk kemasan yang modified atmosphere. Kondisi dalam
produk yang dikemas dalam udara dapat anaerobic akan menjadi lingkungan pertumbuhan
yang cocok untuk patogen. Dalam hal lain, grup I (proteolitik) dan grup II (nonproteolitik)
berbeda secara signifikan dalam pertumbuhan dan karakteristik kelangsungan hidupnya.

Grup I Grup II

Suhu Pertumbuhan
- Minimum 10°C 3°C
- Optimum 35 – 40 °C 18 - 25°C
- Maksimal 45 – 50 °C 40 - 45°C
pH minimal u/ tumbuh 4.6 5
Maksimum Kons. Garam 10% 3.5%
untuk menghambat
Maksimum Aw untuk 0.94 0.97
menghambat
Suhu minimum untuk pertumbuhan Cl.butyricum dan Cl.baratii adalah 7-8°C dan
Cl.butyricum memproduksi toksin pada 10-11°C. Spesies Clostridium mempunyai pH
minimum untuk memproduksi racun botulinum pada pH 4.1 dan Cl.butyricum; Cl.baratii
dapat tumbuh pada aktivitas air minimum 0.95

2. Bahan Pangan yang sering terkontaminasi

Clostrium Botulinum ada pada berbagai macam makanan namun pada tingkat yang rendah.
Pada survey yang dilakukan di ikan, daging dan madu ditemukan Clostrium Botulinum tipe E
pada ikan salmon pasifik dan Baltic herring. Tipe A dan B yang dapat diisolasi ada pada jumlah
yang rendah pada daging babi, bacon dan sosis hati termasuk jamur. Clostrium Botulinum yang
diisolasi pada madu ada pada tingkat rendah. Namun, jika ditemukan sebanyak 60 CFU/g harus
dilaporkan karena 80 spora/g dari tipe A dan B ditemukan pada sampel madu terkait dengan
 kasus botulisme pada bayi. Makanan yang disimpan pada asam rendah (pH > 4,6) memungkinan
pertumbuhan Clostrium Botulinum yang berpotensi menyebabkan botulisme kecuali pada
pengolahan termal yang cukup untuk menonaktifkan spora.

E. Gejala dan Penyakit

Toksin yang dihasilkan oleh botulinum adalah neurotoksin yang dapat menyebabkan
kelumpuhan otot. Botulisme adalah bentuk paling berbahaya dari keracunan makanan dan bila
tidak diobati segera, akan mengakibatkan kematian yang tinggi
(35-40%) dan bila pengobatannya tepat dapat mengurangi tingkat kematian sampai di bawah
10%.
Akibat Clostridium botulinum, biasanya akan timbulnya gejala dalam waktu 12-36 jam,
dan masa sakit dapat berlangsung selama 4 jam hingga 8 hari. Gejala awal mungkin termasuk
distensi perut, diare ringan dan muntah, sebelum gejala berkembang menjadi lebih parah seperti
penglihatan yang kabur atau berganda, kekeringan pada mulut, kelesuan, kesulitan dalam
berbicara, menelan dan bernapas. Kematian biasanya merupakan hasil dari kesulitan bernapas.
Pada bayi di bawah satu tahun, gejala yang tibul antara lain sembelit, tidak nafsu makan, lesu,
dan menangis tidak biasa serta adanya kehilangan kendali pada bagian kepala.
F. Pencegahan
Cara pencegahan dan penanggulangan kontaminasi oleh Clostridium botulinum dengan
melihat efek yang diakibatkan, harus ada asumsi bahwa spora dapat terkandung pada semua
makanan mentah, cara pencegahan untuk perkembangan spora dan produksi toksin dalam makan
dapat diterapkan dengan cara proses thermal efektif dan dengan formulasi produk yang tepat,
dimana setiap perubahan yang terjadi pada suatu proses dan formulasi produk harus teliti dan
dibuat dengan menerapkan metode HACCP, dengan tujuan dapat mengontrol dan
menghancurkan keberadaan Clostridium botulinum.
Penggunaan pengawet untuk mengendalikan pertumbuhan Clostridium botulinum efektif
digunakan pada makanan. Contoh pengawet-pengawet yang digunakan sorbates, paraben,
polyphosphates, fenolik antioksida, askorbat, EDTA, metabisulfit, n-monoalkil maleat dan
fumarates. Cara pencegahan kontaminasi Clostridium botulinum juga dapat diterapkan selama
proses penyimpanan, seperti pemilihan kemasan untuk produk makanan yang baik untuk
mengurangi resiko dari botulisme dan memasak makanan yang dikalengkan secara benar dan
 menghindari makanan kaleng jika kemasan kaleng sudah menggembung. Cara pencegahan
kontaminasi yang lainnya dapat dilakukan proses sterilisasi secara kuat, dan pemberian pH asam
ataupun konsentrasi garam karena Clostridium botulinum ini sangat resisten terhadap panas,
tahan pada suhu 100oC selama 3-5 jam, tetapi daya tahan ini akan berkurang pada pH asam atau
konsentrasi garam.
Bagi industri yang memproduksi produk pangan yang kerat kaitannya dengan bakteri ini
dapat melakukan sterilisasi dan penggunaan panas serta nitrit pada daging yang dipasteurisasi
dan akan dikalengkan. Sedangkan bagi rumah tangga atau pusat penjualan makanan yaitu dengan
melakukan pengolahan produk pangan yang dikalengkan tersebut dengan cara direbus. Bakteri
ini dapat menyerang produk pangan yang tidak disimpan dengan baik, oleh sebab itu harus
dilakukan cara menyimpan produk pangan tersebut dengan baik seperti misalnya disimpan di
dalam lemari pendingin. Hindari pula mengkonsumsi pangan kaleng yang kemasannnya telah
menggembung.
http://lovefoodsafety.blogspot.co.id/2013/09/clostridium-botulinum-kelompok-4_27.html

G. Pathogenesis

Botulisme adalah suatu keracunan akibat memakan makanan dimana Clostridium

botulinum tumbuh dan menghasilkan toksin. Spora Clostridium botulinum tumbuh dalam
keadaan anaerob, bentuk vegetative tumbuh dan menghasilkan toksin. Ada beberapa cara bakteri
Clostridium botulinum masuk kedalam tubuh antara lain adalah sebagai berikut :

1. Menelan makanan yang mengandung toksin Clostridium botulinum. Toksin botulinum dapat
ditemukan dalam makanan yang belum ditangani dengan benar atau kaleng dan sering hadir
dalam sayuran kaleng, daging, dan produk makanan laut. Penyebab paling sering adalah
makanan kaleng yang bersifat basa, dikemas kedap udara, diasap, diberi rempah-rempah, yang
dimakan tanpa dimasak lagi.
2. Botulisme pada bayi terjadi ketika bayi menelan C. Botulinum spora yang berkecambah dan
memproduksi toksin dalam intestine.
3. Clostridium botulinum menginfeksi luka dan menghasilkan racun. Toksin dapat dibawa ke
seluruh tubuh melalui aliran darah.
4. Toksemia usus dewasa / kolonisasi terjadi dengan cara yang sama dengan botulisme pada bayi.
5. Botulisme iatrogenik adalah kecelakaan overdosis racun, yang telah disebabkan oleh inhalasi
disengaja oleh pekerja laboratorium