LAPORAN PRAKTIKUM EKOTOKSIKOLOGI

UJI PENDAHULUAN DAN UJI TOKSISITAS INSEKTISIDA

KLORPIRIFOS DAN SIPERMETRIN
TERHADAP IKAN NILA (Oreochromis niloticus)
Disusun guna Memenuhi Tugas Mata Kuliah Praktikum Ekotoksikologi
Dosen Pengampu : Rizka Apriani Putri, S. Si., M. Sc.

Disusun oleh:
Heny Widyawati
17308141010

JURUSAN PENDIDIKAN BIOLOGI

FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM

UNIVERSITAS NEGERI YOGYAKARTA

2017
 KATA PENGANTAR

Segala puji dan syukur kita panjatkan kepada Allah SWT yang telah
memberikan rahmat, nikmat dan anugrah-Nya sehingga dapat menyelesaikan Laporan
Praktikum Ekotoksikologi yang berjudul Uji Pendahuluan Dan Uji Toksisistas Ikan
Nila (Oreochromis niloticus). Pada Larutan Sipermetrin Dan Klorpirifos. Tujuan dari
penulisan laporan praktikum ini yaitu mengetahui batas kadar aman larutan sipermetrin
dan klorpirifos yang terpapar pada lingkungan menggunakan hewan uji ikan Nila
(Oreochromis niloticus).
Laporan praktikum ini diharapkan dapat membantu kami dalam memperdalam
mata kuliah ekotoksikologi dan dapat membantu pembaca untuk memahami
toksikologi berupa uji kadar aman dengan uji pendahuluan dilanjutkan uji definitive
untuk mengetahui kadar aman larutan toksik sipermetrin dan klorpirifos yang terpapar
pada ikan nila (Oreochromis niloticus).
Kami mengucapkan terimakasih kepada semua pihak yang telah membantu dan
terlibat dalam proses pembuatan laporan ini, terkhusus kepada:
1. Kepada Ibu Rizka Apriani Putri, S. Si., M. Sc., selaku dosen pengampu mata
kuliah Praktikum Ekotoksikologi
2. Kepada segenap asisten praktikum ekotoksikologi yang senantiasa sabar dan
mengarahkan jalannya praktikum
3. Kepada seluruh teman-teman yang telah bekerjasama dengan baik
menyelesaikan praktikum ekotoksikologi
Demikianlah praktikum ekotoksikologi ini kami buat. Semoga laporan ini
bermanfaat bagi penulis dan pembaca. Tidak lupa kritik dan saran yang membangun
agar laporan ini dapat menjadi lebih baik lagi. Terimakasih
Magelang, 30 Oktober 2019
Penulis,

Heny Widyawati
NIM 17308141010

i
 DAFTAR ISI

KATA PENGANTAR ..........................................................................................................i

DAFTAR ISI ....................................................................................................................... ii

DAFTAR TABEL .............................................................................................................. iii

DAFTAR GAMBAR ..........................................................................................................iv

DAFTAR LAMPIRAN ........................................................................................................v

BAB I PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang ...............................................................................................................1

1.2 Rumusan Masalah ..........................................................................................................1

1.3 Tujuan ............................................................................................................................2

BAB II TINJAUAN PUSTAKA DAN HIPOTESIS

2.1 Tinjauan Pustaka ............................................................................................................3

2.2. Hipotesis ........................................................................................................................7

BAB III METODE PENELITIAN

3.1. Waktu dan Tempat ........................................................................................................8

3.2. Alat ................................................................................................................................8

3.2. Bahan.............................................................................................................................8

3.3. Cara kerja ......................................................................................................................9

BAB IV HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian ............................................................................................................12

4.2 Pembahasan ..................................................................................................................15

BAB V PENUTUP

5.1. Kesimpulan .................................................................................................................20

5.2. Saran............................................................................................................................20

DAFTAR PUSTAKA ........................................................................................................21

LAMPIRAN DOKUMENTASI.........................................................................................22

LAMPIRAN PERHITUNGAN .........................................................................................26

A. Uji Toksisitas dengan Klorpirifos .................................................................................26

B. Uji Toksisistas dengan Sipermetrin ...............................................................................29

LAMPIRAN DATA MENTAH .........................................................................................34

ii
 DAFTAR TABEL
Tabel 1. Penilaian untuk Toksisitas Perairan Akut...............................................5
Tabel 2. Kematian Ikan Nila (48 jam) pada Uji Pendahuluan ............................12
Tabel 3. Kematian Ikan Nila (96 jam) pada Uji Toksisita...................................13
Tabel 4. Data Anova Insektisida Klorpirifos.......................................................14
Tabel 5. Data Anova Insektisida Sipermetrin......................................................14
Tabel 6. Perhitungan jumlah mortalitas ikan nila dengan klorpirifos...............14
Tabel 7. Perhitungan jumlah mortalitas ikan nila dengan sipermetrin..............15

iii
 DAFTAR GAMBAR
Gambar 1. Ikan Nila (Oreochromis niloticus).........................................................6
Gambar 2. Persentase Kematian Ikan Nila pada Uji Pendahuluan........................12
Gambar 3. Persentase Kematian Ikan Nila (96 jam) pada Uji Toksisitas..............13
Gambar 4. Analisis Regresi kematian ikan nila dengan pestisida klorpirifos.......14
Gambar 5. Analisis Regresi kematian ikan nila dengan pestisida sipermetrin......15

iv
 DAFTAR LAMPIRAN
Lampiran 1. Uji Pendahuluan Neoban Plus (6,5 jam)......................................22

Lampiran 2. Uji Pendahuluan Neoban Plus (2,8 jam)......................................23

Lampiran 3. Uji Definitif Neoban Plus (0 jam)................................................24

Lampiran 4. Perhitungan..................................................................................26
Lampiran 5. Data Mentah.................................................................................34

v
 BAB I

PENDAHULUAN

1.1 Latar Belakang

Aktivitas manusia sehari-hari tidak dapat dipisahkan dari penggunaan

bahan-bahan kimia. Salah satu bahan kimia yang banyak dijumpai adalah
pestisida. Pestisida merupakan salah satu bahan kimia yang digunakan dalam
kegiatan pertanian yang berfungsi untuk mengendalikan, menolak, atau
membasmi organisme pengganggu (hama) dalam kegiatan pertanian (Raini,
2007). Penggunaan pestisida selain bermanfaat, juga menghasilkan dampak bagi
lingkungan. Pestisida dapat menjangkau tempat lain selain tempat target,
termasuk perairan. Pestisida dapat menjangkau perairan ketika disemprot secara
aerial (Nugroho, 2006 dalam Siregar, 2013).
Penggunaan pestisida dalam pertanian banyak menyebabkan keracunan
pada manusia. Pestisida banyak digunakan oleh petani dalam mengendalikan
hama serangga penganggu tanaman. Contoh bahan aktif dalam insektisida yang
sering digunakan oleh petani adalah Klorporifos dan Sipermetrin. Keracunan
tersebut paling banyak disebabkan oleh pestisida golongan organofosfat (Raini,
2007).
Ikan nila merupakan ikan yang sering dibudidayakan di Indonesia. Ikan
nila mampu beradaptasi pada kondisi lingkungan dengan kisaran salinitas yang
luas. Selain itu ikan nila juga toleran terhadap fluktuasi suhu. Faktor penting
dalam budidaya perikanan adalah pengelolaan kualitas air. Kualitas air ini
dipengaruhi oleh mutu sumber air, kondisi dasar media, sirkulasi air dan lain –
lain.
1.2 Rumusan Masalah
Rumusan masalah pada penelitian ini adalah :
1. Bagaimana batas ambang atas (LC100-24 jam) dan ambang bawah (LC0-48 jam)
ikan nila (Oreochromis niloticus) pada larutan insektisida sipermetrin dan
klopirifos?
2. Bagaimana nilai LC50-96 jam insektisida sipermetrin dan klorpirifos terhadap
mortalitas ikan nila (Oreochromis niloticus)?

1
 3. Bagaimana pengaruh tingkat toksisitas LC50-96 jam berbagai konsentrasi
insektisida klorpirifos dan sipermetrin?
1.3 Tujuan
1. Mengetahui ambang atas (LC100-24 jam) dan ambang bawah (LC0-48 jam) ikan
nila (Oreochromis niloticus) larutan sipermetrin dan klopirifos.
2. Mengetahui nilai LC50-96 jam insektisida sipermetrin dan klorpirifos terhadap
mortalitas ikan nila (Oreochromis niloticus).
3. Mengetahui pengaruh tingkat toksisitas LC50-96 jam berbagai konsentrasi
insektisida klorpirifos dan sipermetrin.

2
 BAB II

TINJAUAN PUSTAKA DAN HIPOTESIS

2.1 Tinjauan Pustaka

2.1.1. Ekotoksikologi

Banyak sekali peran toksikologi dalam kehidupan sehari-hari tetapi bila

dikaitkan dengan lingkungan dikenal dengan toksikologi lingkungan dan
ekotoksikologi. Toksikologi adalah ilmu yang menetapkan batas aman dari bahan
kimia, kerusakan/cedera pada organisme (hewan, tumbuhan, manusia) yang
diakibatkan oleh suatu materi energi. Mempelajari racun, tidak saja efeknya, tetapi
juga mekanisme terjadinya efek tersebut pada organisme dan mempelajari kerja
kimia yang merugikan terhadap organisme (Casarett and Doulls, 1995).

Toksikologi lingkungan adalah ilmu yang mempelajari racun kimia dan

fisik yang dihasilkan dari suatu kegiatan dan menimbulkan pencemaran
lingkungan (Cassaret, 2000). Ekotoksikologi adalah ilmu yang mempelajari racun
kimia dan fisik pada mahluk hidup, khususnya populasi dan komunitas termasuk
ekosistem, termasuk jalan masuknya agen dan interaksi dengan lingkungan
(Butler, 1978). Dengan demikian ekotoksikologi merupakan bagian dari
toksikologi lingkungan.

Apabila zat toksik ini masuk ke dalam tubuh, dan menimbulkan efek, maka
hal ini yang dikatakan sebagai keracunan. Efek keracunan yang terjadi dapat
bersifat akut, sub-akut, khronis, delayed. Hal ini ditentukan oleh waktu, lokasi
organ (lokal/sistemik). Kemampuan racun untuk menimbulkan kerusakan apabila
masuk ke dalam tubuh dan lokasi organ yang rentan disebut toksisitas (Probosunu,
2010).
Toksisitas dapat ditentukan dari beberapa faktor yaitu :
1. Spesies (jenis mahluk hidup: hewan, manusia, tumbuhan)
2. Portal of entry, cara masuknya zat racun tersebut: kulit, pernafasan dan mulut
3. Bentuk/ sifat kimia – fisik
Di dalam lingkungan dikenal zat xenobiotik yaitu zat yang asing bagi tubuh,
dapat diperoleh dari luar tubuh (eksogen) maupun dari dalam tubuh (endogen).
Xenobiotik yang dari luar tubuh dapat dihasilkan dari suatu kegiatan atau aktivitas

3
 manusia dan masuk ke dalam lingkungan. Bila organisme terpajan oleh zat
xenobiotik maka zat ini akan masuk ke dalam organisme dan dapat menimbulkan
efek biologis (Probosunu, 2010).
2.1.2. Uji Toksisitas
Pada dasarnya pengujian toksisitas bertujuan untuk menilai efek racun
terhadap organisme, menganalisis secara obyektif resiko yang dihadapi akibat
adanya racun di lingkungan. Toksisitas akut terjadi pada dosis tinggi, waktu
pemaparan pendek dengan efek parah dan mendadak, dimana organ absorpsi dan
eksresi yang terkena. Sedangkan toksisitas khronis terjadi pada dosis tidak tinggi
pemaparan menahun, gejala tidak mendadak atau gradual, intensitas efek dapat
parah/ tidak. Jenis uji yang digunakan tergantung pada penggunaan zat kimia dan
manusia yang terpapar (Probosunu, 2010).
Proses toksisitas terbagi atas beberapa fase yaitu fase awal (kinetik) dan
fase dinamik. Fase kinetik meliputi proses biologi yang mempengaruhi absorbsi,
penyebaran dan metabolisme zat. Fase dinamik meliputi interaksi antara zat toksik
dengan target dan tanggapan fisiologis serta perilaku organisme (Connel dan
Miller, 2006)..
Lethal Concentration 50 (LC50) adalah konsentrasi yang diturunkan secara
statistik yang dapat diduga menyebabkan kematian 50% dari populasi organisme
dalam serangkaian kondisi percobaan yang telah ditentukan. LC50 sering
ditunjukkan dalam ukuran mg per volume dari organisme uji. Suatu bahan kimia
dikatakan sangat beracun apabila memiliki nilai LC 50 kecil dan sebaliknya (Argo,
2001).
Pengukuran toksisitas (daya racun) dari suatu jenis bahan pencemar dapat
dilakukan dengan menetapkan nilai LC50 dari bahan pencemar tersebut terhadap
hewan percobaan dengan melakukan analisa probit (Buikema, 1982).
Analisa probit adalah suatu metode pengujian yang umum dipergunakan
untuk menilai toksisitas dari suatu bahan pencemar, yang diukur dari lethal
concentration, yang diartikan sebagai berapa miligram bahan pencemar untuk
setiap kilogram hewan uji yang dapat mengakibatkan kematian sebanyak 50 %
dari populasinya. Meskipun analisa probit merupakan teknik parametrik yang
biasa dipakai untuk menangani data toksisitas, simpangan nyata dari model log
probit dapat terjadi, sebagai contoh, pada saat data tidak tersebar normal
(Buikema, 1982).

4
 Uji toksisitas biasanya dilakukan dengan menggunakan hewan uji seperti
mencit, tikus, kelinci, monyet, anjing dan lain-lain. Pemilihan hewan uji
tergantung pada jenis toksikannya dan ketersediaan dana (Argo, 2001).

Adapun kriteria nilai toksisitas akut LC50 pada lingkungan perairan adalah
sebagai berikut :

Tabel 1. Penilaian untuk Toksisitas Perairan Akut, Revisi GESAMP

Tingkat Deskripsi LC/LL50 EC/EL50 IC/IL50 (mg/L)

0 Non-toxic >1000
1 Practically non-toxic >100 - ≤1000
2 Slightly toxic >10 - ≤100
3 Moderately toxic >1 - ≤10
4 Highly toxic >0.1 - ≤1
5 Very highly toxic >0.01 - ≤0.1
6 Extremely toxic ≤0.01

2.1.3. Ikan Nila (Oreochromis niloticus)

Ikan yang digunakan ujikan yaitu Ikan Nila (Orechromis sp.). Ikan nila
merupakan spesies ikan tropis yang lebih suka hidup di air dangkal. Morfologi
ikan nila memiliki bentuk pipih, sisik besar dan kasar, kepala relatif kecil, garis
linea lateralis terputus dan terbagi dua, yaitu bagian atas dan bawah, memiliki lima
buah sirip. Toleransi ikan ini terhadap perbedaan lingkungan sangat tinggi, dapat
hidup pada salinitas 0-29 permil, pada suhu 14-38°C, dan pH 5-11. Ikan ini dapat
melakukan pemijahan sepanjang tahun dan mulai memijah pada umur 6-8 bulan
(Rochdianto, 2009).
Kualitas air untuk hidup ikan nila harus bersih dan tidak tercemar bahan
berbahaya. Apabila dalam budidaya terkandung zat – zat kimia berbahaya
dikhawatirkan akan menghambat pertumbuhan ikan dan menyebabkan ikan dapat
terserang penyakit bahkan kematian (Rochdianto, 2009).

5
 Gambar 1. Ikan Nila (Oreochromis niloticus)

Menurut Saanin (1984), ikan nila (Oreochromis niloticus)

mempunyai klasifikasi sebagai berikut:
Filum : Chordata
Subfilum : Vertebrata
Kelas : Osteichtyes
Subkelas : Acanthopterygii
Ordo : Percomorphi
Subordo : Percoidea
Famili : Cichlidae
Genus : Oreochromis
Spesies : Oreochromis niloticus
2.1.4. Pestisida
Pada uji toksisitas ini digunakan pestisida jenis insektisida dalam
mengetahui tingkat toksik yang ingin diamati. Insektisida ialah salah satu
komponen kimia yang berfungsi untuk membasmi hama tanaman. Adapun
beberapa pencemaran lingkungan yang ditimbulkan oleh insektisida yaitu
pencemaran tanah dan air, mengganggu kandungan unsur hara sehingga dapat
merusak tanaman, dalam suatu lingkungan perairan dapat mempengaruhi ikan
melalui run off atau pembilasan residu insektisida oleh air hujan yang pada
akhirnya sampai pada perairan tempat hidupnya ikan (Raini, 2007).
Klorpirifos merupakan salah satu senyawa aktif pada organofosfat yang
memiliki sifat mudah menguap namun memiliki potensi toksik terhadap
lingkungan. Klorpirifos banyak digunakan untuk mengendalikan hama serangga
pada tanaman cabai, kentang, jagung, bawang dan sayur – sayuran. Klorpirifos ini
berbentuk kristal putih dan memiliki bau menyengat. Biasanya penggunaan
klorpirifos adalah dengan penyemprotan karena lebih optimal membunuh hama.
Namun apabila klorpirifos masuk ke perairan maka akan membunuh biota air.
Insektisida ini bersifat non sistematik artinya ia bekerja ketika terjadi kontak

6
 dengan kulit, termakan ataupun terhirup (Stenersen, 2004). Klorpirifos
merupakan insektisida yang dapat masuk melalui perut dan dinding badan
serangga, sehingga serangga yang terkena juga dapat dengan cepat mengalami
kematian Sedangkan sipermetrin merupakan insektisida golongan piretroid yang
merupakan racun saraf paralisis yang sifatnya sementara (Tarumingkeng, 1992).

Sedangkan sipermetrin adalah jenis bahan aktif pada kelompok pyrethoid.

Insektisida sipermetrin dikenal dengan synthetic pyretroid yang bekerja
menganggu sistem syaraf dan menganggu impuls ke organ (Kementerian
Kesehatan RI, 2012). Dalam air sipermetrin memiliki kelarutan yang rendah.
Sipermetrin banyak digunakan karena harganya yang murah. Insektisida ini
efektif dalam pembasmian hama pada daun dan buah. Penggunaan insektisida
berlebih akan merusak lingkungan hidup dan apabila masuk ke badan air akan
mengancam kehidupan biota air (WHO, 2006).

2.2. Hipotesis

Semakin tinggi konsetrasi semakin tinggi pula ikan yang mati pada tiap bak.

7
 BAB III

METODE PENELITIAN

3.1. Waktu dan Tempat

Praktikum Ekotoksikologi dilaksanakan pada tanggal 30 September - 11
Oktober 2019, di Kebon Biologi, Jurusan Pendidikan Biologi, Fakultas
Matematika dan Ilmu Pengetahuan Alam, Universitas Negeri Yogyakarta.
3.2. Alat
Pada praktikum uji pendahuluan dan uji definitif alat yang digunakan
adalah bak plastik ukuran 30 x 20cm (15 buah), gelas ukur 5cc, 10cc, dan
100cc, beker gelas 100cc (3 buah), pipet ukur 1cc, ember, gayung air dan
erlenmeyer.
3.2. Bahan
Pada praktikum uji pendahuluan dan uji definitif bahan yang digunakan
adalah bibit ikan nila ikan nila (Oreochromis niloticus) ukuran 2-3 cm (300
ekor) 0,8-1 gram/1lt air, insektisida sipermetrin dan klorpirifos 100cc,
insektisida klorpirifos 100 cc, air sumur (150 liter), kertas label dan alat tulis.
3.3. Cara kerja
3.3.1. Uji Pendahuluan
Untuk uji pendahuluan pertama-tama yang dilakukan yaitu bibit ikan
untuk uji pendahuluan, diaklimasi di laboratorium selama 7-10 hari sebelum
digunakan. Sehari (24 jam) sebelum perlakuan, bibit ikan dipuasakan (tidak
diberi makan). Bak perlakuan disiapkan, masing-masing 3 bak untuk setiap
perlakuan dan ditempeli label sesuai dengan perlakuannya (kadar 10 -2, 10-2,
10-3, 100, 10+1, 10+2). Larutan stok insektisida sipermetrin 0,1% dibuat dengan
mencampur 1cc sipermetrin kedalam 999cc air. Larutan uji dengan kadar
berbasis angka 10 (10-2, 10-2, 10-3, 100, 10+1, 10+2) dibuat dari insektisida
sipermetrin 1% masing-masing kadar sebanyak 3 bak @10 liter. Setiap bak
untuk masing-masing kadar dibuat sebagai berikut
Kadar 10+2 = 10cc sipermetrin + 9.990cc air
Kadar 10+1 = 100cc sipermetrin + 9.900cc air
Kadar 100 = 10cc sipermetrin + 9.990cc air
Kadar 10-1 = 1cc sipermetrin + 9.999cc air
Kadar 10-2 = 0,1cc sipermetrin + 9.999,9cc air (1cc kadar 10-1 + 9.990cc air)

8
 10 ekor ikan uji dimasukkan kedalam setiap bak, waktu saat memasukkan
ikan uji dicatat. Data respon kematian ikan dan setiap perlakuan pada jam
ke-24 dan 48 dicatat dan dimasukkan kedalam tabel data kematian. Angka
(kadar) yang diperoleh dari uji pendahuluan, digunakan untuk menentukan
kisaran kadar pada uji toksisitas.

Bibit ikan nila diaklimasi di kolam biologi selama 7-10 hari sebelum digunakan
untuk uji pendahuluan

Bibit ikan nila dipuasakan (tidak diberi makan) sebelum perlakuan

Bak perlakuan disiapkan sebanyak 3 buah untuk masing-masing perlakuan (10-2,

10-2, 10-1, 100, 10+1, 10+2)

Larutan stok insektisida sipermetrin 0.1 % dibuat debgan cara mencampur 1 cc

sipermetrin dengan 999 cc air

Larutan uji kadar berbasis angka 10 (10-2, 10-1, 100, 10+1, 10+2) dibuat dari
insektisida sipermetrin / klorpirifos 1 %, masing-masing kadar sebanyak 3 bak
dengan volume 10 liter

Stok setiap bak dibuat untuk masing-masing kadar dengan cara

Kadar 10+2 = 10 cc sipermetrin + 9.990 cc air
Kadar 10+1 = 100 cc larutan stok + 9.900 cc air
Kadar 100 = 10 cc larutan stok + 9.990 cc air
Kadar 10-1 = 1 cc larutan stok + 9.999 cc air
Kadar 10-2 = 0.1 cc larutan stok + 9.999,9 cc air

10 ekor ikan nila dimasukkan ke dalam setiap bak dan catat waktu saat ikan
dimasukkan

Data respon kematian ikan dicatat dari setiap perlakuan pada jam ke-24 dan 48
jam (data dimasukkan dalam tabel)

Kisaran kadar ambang atas (LC100-24 jam) dan ambang bawah (LC0-48 jam)
ditentukan untuk uji toksisitas sesungguhnya atau uji definitive
9
3.3.2. Uji Toksisitas
Uji toksisitas atau uji definif yang pertama dilakukan yaitu bibit ikan
untuk uji toksisitas, diaklimasi selama 7-10 hari sebelum digunakan. Sehari
sebelum perlakuan, bibit ikan dipuasakan (tidak diberi makan). Bak
perlakuan disiapkan, masing-masing 3 bak untuk 5 macam perlakuan,
ditempeli label sesuai dengan perlakuannya. Penentuan kadar perlakuan
mengacu pada skala logaritmik dari Komisi Pestisida DEPTAN 1983, dengan
rumus : Log N/n = K ( Log a/n). Larutan stok insektisida sipermetrin dibuat
dengan kadar 10x dari kadar LC100-24jam. Larutan uji dibuat dengan kadar
yang sudah dihitung mengacu pada skala logaritmik. Masing-masing kadar
sebanyak 3 bak @10 liter (kadar perlakuan antara LC 100-24jam dan
LC0-48jam. 10 ekor ikan uji dimasukkan kedalam setiap bak,dicatat saat
memasukkan ikan. Mencatat data respon kematian ikan dari setiap perlakuan
pada jam ke-24, ke-48, ke-72 dan ke-96, data dimasukkan kedalam tabel.
Data dianalisis menggunakan analisis prolat dari progam SPSS untuk
mencari kadar LC50-48jam dan LC50-96jam. Angka (kadar) yang diperoleh
dari LC50-48jam digunakan untuk menentukan kadar pada uji kadar aman.
Uji kadar aman (10% LC50-48jam). kadar uji dari LC50-96jam digunakan
untuk menentukan tingkat toksisitas (daya racun) dari insektisida sipermetrin
dengan mengacu pada skala Loomis.

Bibit ikan nila diaklimasi di kolam biologi selama 7-10 hari sebelum digunakan
untuk uji toksisitas

Bibit ikan nila dipuaskan selama sehari (24 jam) sebelum perlakuan

Bak perlakuan disiapkan sebanyak 3 buah untuk masing-masing perlakuan (5

macam perlakuan) dan ditempel dengan label

Setiap bak diisi dengan 10 liter air sumur

Kadar perlakuan ditentukan dengan mengacu pada skala logaritmik dari komisi
pestisida DEPTAN 1983 atau mengacu pada skala duodoroff
10
Larutan stok insektisida sipermetrin / klorpirifos dibuat (10 x dari kadar LC100-24
jam)

Larutan uji sesuai kadar dibuat masing-masing sebanyak 3 bak dengan volume
10 liter (kadar perlakuan diantara LC100-24 jam dan LC0-48 jam) dan dimasukkan
kedalam masing-masing bak perlakuan

10 ekor ikan uji (ikan nila) dimasukkan kedalam setiap bak dan mencatat waktu
saat memasukkan ikan uji

Data respon kematian ikan dari setiap perlakuan pada jam 24 dan ke 48 dicatat,
dimasukkan data kedalam tabel pengamatan

Angka (kadar) yang diperoleh dari uji pendahuluan digunakan untuk

menentukan kisaran kadar pada uji toksisitas/ definitive

11
 BAB IV

HASIL PENELITIAN DAN PEMBAHASAN

4.1 Hasil Penelitian
4.1.1 Uji Pendahuluan
Perhitungan jumlah mortalitas atau kematian ikan nila pada uji pendahuluan
insektisida sipermetrin dan klorpirifos dalam persen (%) adalah sebagai berikut

Rata-rata Kematian Jumlah dalam (%)

Konsentrasi
Sipermetrin Klorpirifos Sipermetrin Klorpirifos
10-2 5 12 16.7 % 40%

10-1 12 28 40 % 93.3 %

10-0 30 30 100 % 100 %

10+1 30 30 100 % 100 %

10+2 30 30 100 % 100 %

Tabel 2. Kematian Ikan Nila (48 jam) pada Uji Pendahuluan

Grafik persentase (%) mortalitas ikan nila (48 jam) pada uji pendahuluan
adalah sebagai berikut :

Grafik Persentase Kematian Ikan Nila pada Uji Pendahuluan

120.00%
persentase mortalitas (%)

100.00% 100% 100% 100%

93.30%
80.00%
60.00%
40.00% 40% 40%
20.00% 16.70%
0.00%
10^-2 10^-1 10^0 10^+1 10^+2
kadar insektisida

Sipermetrin Klorpirifos

Gambar 2. Persentase Kematian Ikan Nila pada Uji Pendahuluan

12
4.2.1 Uji Toksisitas / Definitif
Tabel perhitungan jumlah mortalitas atau kematian ikan nila pada uji definitif
atau toksisitas insektisida sipermetrin dan klorpirifos dalam persen (%) adalah
sebagai berikut :

Konsentrasi Rata-rata mortalitas Jumlah dalam (%)

(ppm) Sipermetrin Klorpirifos Sipermetrin Klorpirifos
0.025 7 15 35 % 50%

0.0625 7 30 35 % 100 %

0.15625 20 30 100 % 100 %

0,390625 20 30 100 % 100 %

0,9765 20 30 100 % 100 %

Tabel 3. Kematian Ikan Nila (96 jam) pada Uji Toksisitas

Grafik persentase (%) mortalitas ikan nila (96 jam) pada uji toksisitas adalah
sebagai berikut :

Grafik Persentase Kematian Ikan Nila Pada Uji Definitif

persentase mortalitas (%)

120%
100% 100% 100% 100% 100%
80%
60%
50%
40% 35%
20% 35%
0%
0.025 ppm 0.0625 ppm 0.15625 ppm 0,390625 ppm 0,9765 ppm
kadar insektisida

Sipermetrin Klorpirifos

Gambar 3. Persentase Kematian Ikan Nila (96 jam) pada Uji Toksisitas

13
4.3.1 Data Anova

4.1.3.1 Tabel Anova Insektisida Klorpirifos

Berikut adalah tabel Anova yang diperoleh dari insektisida klorpirifos :

Standard Lower Lower Upper

Coefficient T Stat P-value Upper 95%
Error 95% 95,0% 95,0%
0.8815468 5.9185552 11.529506 5.9185552 11.52950
Intercept 8.72403068 9.89628 0.00219
14 79 08 79 608
X Variabel 0.8966300 -1.3004464 4.4065073 -1.300446 4.406507
1.55303045 1.73208 0.18169
1 22 5 48 45 348
Tabel 4. Data Anova Insektisida Klorpirifos
4.1.3.2 Tabel Anova, mortalitas dan analisis regresi Insektisida Sipermetrin
Berikut adalah tabel Anova yang diperoleh dari insektisida sipermetrin

Standard Lower Upper

Coefficient T Stat P-value Lower 95% Upper 95%
Error 95,0% 95,0%

11.13
Intercept 8.22894 0.9133 9.01009 0.00289 5.32241 11.1355 5.32241
55
5,214
X Variabel 1 2.25831 0.92877 2.43151 0.0932 -0.6974 5,21407 -0.6974
07

Tabel 5. Data Anova Insektisida Sipermetrin

Tabel perhitungan jumlah mortalitas atau kematian ikan nila dengan
pestisida klorpirifos adalah sebagai berikut :

Dosis ppm log (ppm) Probit % kematian Mortalitas Total

A 0,025 -1,602 5 50% 5 10
B 0,0625 -1,204 8,09 100% 10 10
C 0,156 -0,807 8,09 100% 10 10
D 0,39 -0,409 8,09 100% 10 10
E 0,978 -0,010 8,09 100% 10 10
Tabel 6. perhitungan jumlah mortalitas atau kematian ikan nila dengan pestisida klorpirifos
Analisis regresi (coefficients

Intercept b 8,72

Log(ppm) a 1,55
Gambar 4. Analisis Regresi kematian ikan nila dengan pestisida
Persamaan y = ax + b
klorpirifos
5 =1,55x + 8,72

X = -2,4

LC50 96 jam + antilog (x)= 10-2,4

= 0,004 ppm (Extremly toxic)

14
4.1.3.3 Tabel Anova, mortalitas dan analisis regresi Insektisida Sipermetrin
Tabel perhitungan jumlah mortalitas atau kematian ikan nila dengan
pestisida sipermetrin adalah sebagai berikut :

Dosis ppm log (ppm) Probit % kematian Mortalitas Total

A 0,025 -1,602 4,61 35% 3,5 10
B 0,0625 -1,204 4,61 35% 3,5 10
C 0,156 -0,807 8,09 100% 10 10
D 0,39 -0,409 6,64 95% 9,5 10
E 0,978 -0,010 8,09 100% 10 10
Tabel 7. perhitungan jumlah mortalitas atau kematian ikan nila dengan pestisida sipermetrin

Analisis regresi (coefficients

Intercept b 8,229

Log(ppm) a 2,258

Persamaany = ax + b Gambar 5. Analisis Regresi kematian ikan

nila dengan pestisida sipermetrin
5 = 2,258x + 8,229

X = -1,4298

LC50 96 jam + antilog (x) = 0,0372 ppm (Very highly toxic)

4.2 Pembahasan
Pada praktikum ekotoksikologi dilakukan Uji pendahuluan dan Uji Definitif
untuk mengetahui cara menentukan ambang atas (LC100 – 24 jam) dan
ambang bawah (LC50 – 48 jam) toksisitas larutan klorpirifos dan sipermetrin
terhadap ikan nila (Orheochromis niloticus) melalui Uji Pendahuluan dan untuk
mengetahui konsentrasi Klorpirifos dan Sipermetrin yang dapat menyebabkan
kematian 50% ikan nila (Orheochromis niloticus) selama 96 jam (LC50 – 96 am)
perlakuan.
Uji pendahuluan selama 48 jam untuk menentukan nilai ambang batas atas
dan nilai ambang batas bawah sehingga diperoleh nilai konsentrasi yang digunakan
pada uji definitif. Hal tersebut seusai dengan teori bahwa uji pendahuluan digunakan
untuk mencari kisaran konsentrasi (range finding test) yang menyebabkan 100%
kematian pada hewan uji, setelah didapatkan kisaran konsentrasi yang tepat, maka
dilakukan uji toksisitas akut.
Pada uji pendahuluan berdasarkan (grafik 2) pada hasil diketahui bahwa
semakin tinggi konsentrasi insektisida klorpirifos dan Sipermetrin maka semakin

15
besar jumlah kematian ikan uji dan sebaliknya semakin kecil konsentrasi insektisida
klorpirifos maka semakin sedikit kematian pada ikan uji. Hal ini sesuai dengan
Rukmana (2016) yang menyatakan bahwa senyawa-senyawa toksik pada larutan uji
berpengaruh terhadap kematian hewan uji. Dilihat dari data kematian hewan uji
terdapat dua atau lebih konsentrasi yang mengalami kematian, sehingga nilai
LC50-96jam dapat ditentukan dengan Metode Probit.
Percobaan yang menggunakan larutan Klorpirifos, pada konsentrasi 10 -2
tidak ada ikan nila yang mati, sedangkan pada percobaan yang menggunakan larutan
Sipermetrin, pada konsentrasi 10-2 sudah ada yang mati bahkan pada jam ke 0.
Namun, dari kedua larutan tersebut memiliki kesamaan yaitu pada konsentrasi 10 0,
101, dan 102 pada 48 jam, semua ikan di bak mati dengan persentase kematian 100%.
Berdasarkan respon mortalitas selama pengamatan 48 jam dapat ditentukan
nilai konsentrasi ambang batas atas (N) dan ambang batas bawah (n) dari klorpirifos
dan sipermetrin adalah 0,01 ppm (ambang bawah) dan 1 ppm (ambang atas) dari
kedua nilai tersebut menunjukan ikan nila dapat mentoleransi kedua insektisida dalam
perairan lebih kecil dari 0,01 ppm klorpirifos. Komisi pestisida (1983) menyatakan
bahwa konsentrasi ambang atas adalah konsentrasi terendah dimana semua ikan uji
mati dalam waktu eksposure 24 jam, sedangkan konsentrasi ambang bawah adalah
konsentrasi tertinggi dimana semua ikan uji hidup dalam waktu paparan 48 jam.
Berdasarkan kedua data kematian ikan nila (Oreochormis niloticus) dengan
larutan klorpirifos dan sipermetrin tidak setara, karena waktu pengamatan yang
berbeda sehingga data yang dihasilkan tidak sama. Pada Uji Pendahuluan tersebut
pengamatan percobaan dengan menggunakan larutan klorpirifos dilakukan sebanyak 5
kali sampai 48 jam, sedangkan pada percobaan dengan larutan sipermetrin dilakukan
sebanyak 4 kali sampai 48 jam. Hal tersebut merupakan kekurangan dalam praktikum
ini, karena tidak bisa secara nyata dan detail membandingkan kematian ikan nila
(Oreochormis niloticus) pada larutan klorpirifos dan larutan sipermetrin.
Uji definitif bertujuan untuk mengetahui nilai LC50-96 jam insektisida
sipermetrin dan klopirifos terhadap mortalitas ikan nila (Oreochromis niloticus). Pada
Uji pendahuluan sebelumnya telah didapatkan nilai ambang batas atas dan bawah
dapat digunakan dalam penentuan konsentrasi dalam uji toksisitas. Berdasarkan
penentuan konsentrasi uji toksisitas didapatkan konsentrasi terkecil hingga terbesar
dalam uji toksisitas adalah 0,025 ppm, 0,0625 ppm, 0,15625 ppm, 0,390625 ppm, dan
0,9765.

16
 Mortalitas ikan mulai diamati 8 jam setelah aplikasi pada konsentrasi 0,025
ppm untuk klorpirifom dan 24 jam setelah aplikasi pada konsentrasi 0,025 ppm untuk
sipermetrin. Pada jam tersebut, terlihat sudah ada yang mati, pengamatan selanjutnya
menunjukan komulatif mortalitas yang semakin besar dengan waktu makin lama dan
konsentrasi perlakuan yang makin tinggi.
Berdasarkan analisis probit diperoleh data bahwa konsentrasi tertinggi
memiliki probit yang tinggi (Gambar 4 dan 5). Hal ini menunjukan bahwa toksisitas
klorpirifos dan sipermetrin terhadap ikan nila semakin tinggi dengan bertambahnya
konsentrasi larutan pestisida yang digunakan.
Nilai LC50-96 didapatkan nilai dengan rata-rata 9,3 kali klorpirifos lebih
rendah dibandingkan sipermetrin. Nilai LC50-96 jam akibat pemaparan insektisida
klorpirifos sebesar 0,004 ppm sedangkan insektisida sipermetrin didapatkan nilai
sebesar 0,0372 ppm. Hal ini menunjukkan bahwa 50% ikan nila akan mati bila
dipaparkan selama 96 jam dengan konsentrasi insektisida Klorpirifos sebesar 0,004
ppm dan 0,0372 ppm insektisida sipermetrin. Dari nilai LC50-96 yang didapatkan dapat
diketahui insektisida klorpirifos lebih bersifat toksik dibanding insektisida sipermetrin
terhadap biota uji ikan nila. Hal ini dapat terjadi karena insektisida klorpirifos
merupakan insektisida organofosfat. Insektisida ini merupakan ester asam fosfat atau
asam tiofosfat. Pestisida ini umumnya merupakan racun pembasmi serangga yang
paling toksik secara akut terhadap binatang bertulang belakang seperti ikan, burung,
cicak dan mamalia (Raini, 2007).
Mekanisme toksikokinetik dan toksikodinamik terlihat ketika insectisida
dimasukkan kedalam bak uji setelah beberapa saat. Timbul gejala pada ikan
diantaranya ikan mulai hiperaktif dengan melompat ke udara untuk keluar dari bak uji
dan perlahan ikan akan mulai kehilangan keseimbangan saat berenang, badan ikan
mulai terbalik mengapung dipermukaan air dan beberapa saat kemudian ikan akan
mati.
Mekanisme insektisida akan masuk dalam tubuh ikan nila terjadi ketika ikan
melakukan respirasi. Dimana ketika ikan membuka operculum insang, insektisida
yang terdapat dalam air akan masuk kedalam insang ikan dan tersebar kedalam tubuh
ikan nila. Rudiyanti dan Ekasari (2009) menyatakan bahwa pestisida yang masuk
dalam tubuh organisme akan mengalami proses yang sama dengan benda-benda
asing. Proses-proses tersebut yaitu absorpsi, distribusi, dan akumulasi. Pestisida
masuk dalam tubuh ikan dapat melalui saluran pencernaan, saluran pernafasan dan

17
kulit. Pestisida masuk dalam tubuh ikan dapat melalui saluran pencernaan, saluran
pernafasan dan kulit. Pada saluran pencernaan, pestisida yang ada dalam usus akan
mengalami proses absorpsi dan distribusi, dengan adanya proses ini mengakibatkan
kerusakan pada jaringan ikan. Proses distribusi terjadi dimana pestisida yang ada di
usus dibawa oleh peredaran darah vena portal hepatis menuju ke hepar. Di hepar akan
terjadi detoksikasi dan akumulasi racun.
Klorpirifos merupakan insektisida yang dapat masuk melalui perut dan
dinding badan serangga, sehingga serangga yang terkena juga dapat dengan cepat
mengalami kematian Sedangkan sipermetrin merupakan insektisida golongan
piretroid yang merupakan racun saraf paralisis yang sifatnya sementara. Serangga
yang disemprot dengan sipermetrin akan menunjukkan gejala eksitasi, konvulsi dan
paralisis kemudian mengalami kematian (Tarumingkeng, 1992).
Sipermetrin merupakan pyretroid sintetik yaitu insektisida sintetik buatan
yang mempunyai bahan aktif menyerupai insektisida hasil alam yaitu pyrethrum.
Daya kerja piretroid terhadap ikan mirip dengan daya kerja DDT (organoklorin),
tetapi pengaruh piretroid kurang persisten jika dibandingkan dengan DDT.
Gejala-gejala keracunan piretroid menunjukkan khas terjadinya keracunan syaraf
yaitu eksitasi, konvulsi, paralisis dan kematian. Keracunan oleh piretroid buatan
diperkirakan disebabkan oleh akumulasi ”depolarizing subtance” yang belum
diketahui di dalam atau di luar membran dan keikutsertaan beberapa reaksi metabolik.
(Buikema, 1982).
Uji kadar aman bertujuan untuk mengetahui apakah kadar 10% LC 50-96
(kadar aman) yang diperoleh dari hasil Uji Toksisitas memang benar-benar aman
terhadap biota uji tertentu. Kadar aman yang dimaksud adalah seharusnya tidak
menimbulkan gangguan fisiologik maupun morfologik organ tubuh biota uji pada
sistem reproduksi, respirasi, digesti,ekskresi, skeleti, otot, maupun sistem syaraf.
Berdasarkan hasil Uji Toksisitas yang dilakukan, maka tidak dapat digunakan untuk
Uji Kadar Aman karena pada Uji Toksisitas terdapat biota uji yang mati pada
konsentrasi paling rendah yang artinya, konsentrasi yang digunakan masih tidak aman
atau bersifat toksik.
Pada saat melakukan praktikum terdapat beberapa keterbatasan yang dialami
oleh praktikan sehingga mempengaruhi hasil dari praktikum, baik terjadi kesalahan
dalam praktikum maupun data yang dihasilkan bias ataupu tidak sesuai dengan teori.
Beberapa keterbatasan yang dialami oleh praktikan seperti pemilihan ukuran ikan

18
yang kurang homogen karena terbatasnya jumlah ikan di kolam, ikan mengalami
stress sebelum dilakukan percobaan karena penangkapan yang menggunakan jaring
dan juga pemindahan ikan, selain itu interval pengamatan yang tidak terstruktur
dengan baik dikarenakan terbenturnya jadwal kuliah pada saat melakukan
pengamatan. Namun disamping itu, praktikum ini berhasil diselesaikan tepat pada
waktunya dan dapat digunakan sebagai acuan untuk menentukan toksisitas di akuatik.
Toksisitas akuatik ditentukan dengan menggunakan metode uji toksisitas
akut atau uji definitif pada praktikum ini memiliki beberapa kelebihan dan
kekurangan. Metode ini memiliki beberapa kelebihan , seperti efisiensi waktu karena
uji ini merupakan uji paparan jangka pendek (jam atau hari) dan menggunakan
kematian sebagai titik akhir, biasanya menimbulkan efek secara langsung sehingga
memudahkan dalam melakukan pengamatan. Namun disamping itu, metode ini juga
memiliki beberapa kekurangan, seperti pada uji toksisitas ini tidak valid jika
mortalitas sampel kontrol lebih besar dari 10% dan metode ini kurang
mempresentasikan ekosistem nyata karena umumnya dilakukan pada organisme
selama periode tertentu (hari atau jam) siklus hidup biota uji tersebut sehingga
dianggap sebagai tes siklus hidup parsial.

19
 BAB V

PENUTUP
5.1. Kesimpulan
Berdasarkan hasil percobaan mengenai uji toksisitas berupa uji
pendahuluan dan uji definitif yang telah dilakukan, dapat disimpulkan bahwa
:
1. Rata-rata ambang atas (LC100-24 jam) untuk sipermetrin 16.7% sedangkan
klorpirifos 40% dan ambang bawah (LC0-48jam) untuk sipermetrin dan
klorpirifos adalah 100%.
2. Nilai LC50-96 jam dari insektisida Klorpirifos dan sipermetrin keduanya
memiliki potensi menyebabkan kematian ikan nila dalam rata-rata persentase
yang besar.
3. Tingkat toksisitas dari insektisida Klorpirifos dan Sipermetrin berdasarkan
LC50-96 jam yaitu pada insektisida Klorpirifos diperoleh nilai 0,004 ppm
yang tergolong dalam kategori extremely toxic (taraf 6) dan pada insektisida
Sipermetrin diperoleh nilai 0,0372 ppm yang berarti tergolong kedalam
kategori very higly toxic (taraf 5).
5.2. Saran
Berdasarkan praktikum yang telah dilakukan disaran untuk praktikum
selanjutnya ikan yang di gunakan harus dalam keadaan baik, dan dalam
pengambilan ikan cukup menggunakan satu org yang ditugaskan saja,
sehingga menimalisir ikan yang stress, pelaksanaan praktikum ini
membutuhkan ketelitian yakni dengan menggunakan alat dengan tingkat
ketelitian yang tinggi karena bila tidak tepat akan berpengaruh pada hasil
yang di dapat.

20
 DAFTAR PUSTAKA
Argo D, Imono. (2001). Toksikologi Dasar. Yogyakarta : Laboratorium Farmakologi
Dan Toksikologi Fakultas Farmasi Universitas Gajah Mada

Buikema, Jr., A.L., Niederlehner, B.R., dan Cairns, Jr.,J. (1982). Biological
monitoring. Bagian IV - Toxicity testing. Water Res.
Connell,D.W. dan Miller,G.J. (2006). Kimia dan Ekotoksikologi Pencemaran. Jakarta
: UI-Press

Kemenkes RI. (2012). Survei Kesehatan Dasar Indonesia. Jakarta: Kementrian

Kesehatan Republik Indonesia

National Geographic Indonesia. Daya Dukung Lingkungan Turun Sebabkan Kasus

Alergi Merebak. 20 November 2013.
http://nationalgeographic.co.id/berita/2013/11/daya-dukung-lingkungan-turun-
sebabkan-kasus-alergi-merebak (Diakses pada 30 Oktober 2019)
Nugroho, A. (2006). Bioindikator Kualitas Air. Jakarta : Penerbit Universitas Trisakti
Probosunu. (2004). PenentuanToksisitas Suatu Bahan Pencemaran di Perairan.
Laboratorium Ekologi Perairan Yogyakarta : Jurusan Perikanan, Universitas
Gadjah Mada, Yogyakarta

Raini, M. (2007). Toksikologi Pestisida dan Penanganan Akibat Keracunan

Pestisida. Media Litbang Kesehatan Vol. XVII No. 3, 2007. Jakarta :
Departemen Kesehatan
Rochdianto, A. (2000) .Budidaya Ikan di Jaring Terapung. Jakarta : Penebar Swadaya

Rudiyanti, S. dan A. D. Ekasari. (2009). Pertumbuhan dan Survival Rate Ikan Mas
(Cyprinus Carpio L.) Pada Berbagai Konsentrasi Pestisida Regent 0,3. Jurnal
Saintek Perikanan. 5(1):39-47

Rukmana, Rahmat dan Herdi Yudirachman. (2016). Untung Selangit Dari Agribisnis
Kakao. Yogyakarta: Lily Publisher

Stenersen, J. (2004). Chemical Pesticides: Mode of Action and Toxicology. CRC

Press, Boca Raton. 276 p.

Tarumingkeng, R. C. (1992). Insektisida: Sifat, Mekanisme Kerja dan Dampak

Penggunaannya. Jakarta : Universitas Kristen Krida Wacana

WHO. (2006). Pesticides, and Their Aplication: for The Controll of Vector, and
Pests of Public Health Importance. WHOPES/GCDD/2006.l

21
 LAMPIRAN DOKUMENTASI
Lampiran 1. Uji Pendahuluan Neoban Plus (6,5 jam)

Uji Pendahuluan Neoban Plus (6,5 jam)

Waktu : 14.58 WIB - 30 September 2019
Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3

Konsentrasi 10+2

Konsentrasi 10+1

Konsentrasi 100

Konsentrasi 10-1

Konsentrasi 10-2

22
Lampiran 2. Uji Pendahuluan Neoban Plus (2,8 jam)

Uji Pendahuluan Neoban Plus (28 jam)

Waktu : 12.47 WIB - 01 Oktober 2019
Ulangan 1 Ulangan 2 Ulangan 3

Konsentrasi 10+2

Konsentrasi 10+1

Konsentrasi 100

Konsentrasi 10-1

Konsentrasi 10-2

23
Lampiran 3. Uji Definitif Neoban Plus (0 jam)

Uji Definitif Neoban Plus (0 jam)

Waktu : 08.45 WIB - 07 Oktober 2019

Konsentrasi A Konsentrasi B

Konsentrasi C Konsentrasi D

Konsentrasi E

24
Lampiran 4. Uji Definitif Neoban Plus (96 jam)

Uji Definitif Neoban Plus (96 jam)

Waktu : 09.18 WIB - 11 Oktober 2019

Konsentrasi A Konsentrasi B

Konsentrasi C Konsentrasi D

Konsentrasi E

25
 LAMPIRAN PERHITUNGAN
Lampiran 5. Perhitungan
Diketahui :
- 1 g/L = 1.000 ppm
- Bahan aktif insektisida Klorpirifos = 540 g/L = 540.000 ppm
- Bahan aktif insektisida Sipermentrin = 113 g/L = 113.000 ppm

A. Uji Toksisitas dengan Klorpirifos

1. Uji Pendahuluan
a. Membuat Larutan Konsentrasi 102 (100 ppm)
Dilakukan perhitungan dengan rumus pengenceran
M 1 x V1 = M2 x V 2
540.000ppm x V1 = 100 x 10.000
540.000ppmV1 = 1.000.000
1.000.000
V1 = 540.000
V1 = 1,851 mL

b. Melakukan perhitungan volume insektisida dan volume air yang

digunakan untuk membuat larutan stok dengan rumus pengenceran
• Menghitung volume insektisida
M 1 x V1 = M2 x V 2
540.000 ppm x V1 = 1.000 ppm x 1.000 mL
540.000ppmV1 = 1.000.000
1.000.000
V1 = 540.000
V1 = 1,851 mL

• Sehingga, untuk menghitung volume air yang digunakan untuk

membuat larutan stok yaitu:
1000 mL volume larutan stok – 1,851 mL insektisida Klorpirifos =
998,149 mL air
c. Membuat larutan stok masing – masing sebanyak 1000 ml untuk larutan
konsentrasi 101, 100, 10-1, dan 10-2
• Larutan konsentrasi 101
M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 10ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 100.000
100.000
V1= 1.000
V1 = 100 mL

Maka, larutan konsentrasi 101 dibuat dengan cara mencampur 100 mL

larutan stok dengan 9.900 mL air dalam bak

26
 • Larutan konsentrasi 100
M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 1ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 10.000
10.000
V1 = 1.000
V1 = 10 mL

Maka, larutan konsentrasi 100 dibuat dengan cara mencampur 10

mL larutan stok dengan 9.990 mL air dalam bak

• Larutan konsentrasi 10-1

M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 0,1ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 1.000
1.000
V1 = 1.000
V1 = 1 mL
Maka, larutan konsentrasi 10-1 dibuat dengan cara mencampur 1
mL larutan stok dengan 9.999 mL air dalam bak
• Larutan konsentrasi 10-2
M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 0,01ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 100
100
V1 = 1.000
V1 = 0,1 mL

Maka, larutan konsentrasi 10-2 dibuat dengan cara mencampur

0,1 mL larutan stok dengan 9.999,9 mL air dalam bak

2. Uji Definitif
Diketahui :
LC100-24 jam (ambang atas kadar) = konsentrasi 100
LC50-24 jam (ambang bawah kadar) = konsentrasi 10 -2
Perhitungan dilakukan dengan rumus :
𝑁 𝑎
log = k ( log )
𝑛 𝑛

a. Mencari konsentrasi dan volume Klorpirifos untuk membuat larutan

konsentrasi a
100 𝑎
log = 5 (log )
10−2 10−2
log 100 – log 10-2 = 5 log a – 5 log 10-2
0 – (-2)= 5 log a – 5 (-2)
2 = 5 log a + 10

27
 2 – 10= 5 log a
-8 = 5 log a
10-8 = a5
a = 10 -8/5
a = 0,025 mL

Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume klorpirifos dengan rumus

pengenceran :
M 1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,025 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 250
V1 = 250/1.000
V1 = 0,25mL

b. Mencari volume Klorpirifos untuk membuat larutan konsentrasi b

𝑎 𝑏
b= =
𝑛 𝑎

0,025 𝑏
=
0,01 0,025
0,01 𝑏 = 0,000625
b = 0,0625 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume klorpirifos dengan rumus
pengenceran :
M 1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,0625 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 625
V1 = 625/1.000
V1 = 0,625mL

c. Mencari volume Klorpirifos untuk membuat larutan konsentrasi c

𝑏 𝑐
c= =
𝑎 𝑏

0,0625 𝑐
=
0,025 0,0625
0,025 𝑐 = 0,00390625
c = 0,15625 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume klorpirifos dengan rumus
pengenceran :
M 1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,15625 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 1.562,5
V1 = 1.562,5/1.000
V1 = 1,5625mL

d. Mencari volume Klorpirifos untuk membuat larutan konsentrasi d

28
 𝑐 𝑑
d= =
𝑏 𝑐

0,15625 𝑑
=
0,0625 0,15625
0,0625 𝑑 = 0,0244140625
d = 0,390625 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume klorpirifos dengan rumus
pengenceran :
M 1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,390625 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 3.906,25
V1 = 3.906,25/1.000
V1 = 3,90625mL

e. Mencari volume Klorpirifos untuk membuat larutan konsentrasi e

𝑑 𝑒
d= =
𝑐 𝑑

0,390625 𝑒
=
0,15625 0,390625
0,15625 𝑒 = 0,1525878906
e = 0,9765624998 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume klorpirifos dengan rumus
pengenceran :
M 1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,9765624998 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 9.765,624998
V1 =9.765,624998/1.000
V1 = 9,765624998mL

3. Analisis Probit
Y = ax + b
5 = 1,55 + 8,72
-3,72 = 1,55x
-2,4 = x

Antilog x = 10-2,4
= 0,0039810717
= 0,004

Sehingga diketahui kategorinya yaitu very highly toxic (level 6).

B. Uji Toksisistas dengan Sipermetrin

1. Uji Pendahuluan

29
a. Membuat Larutan Konsentrasi 102 (100 ppm)
Dilakukan perhitungan dengan rumus pengenceran
M 1 x V1 = M2 x V 2
113.000ppm x V1 = 100 x 10.000
113.000ppmV1 = 1.000.000
1.000.000
V1= 113.000
V1 = 8,85 mL

b. Melakukan perhitungan volume insektisida dan volume air yang

digunakan untuk membuat larutan stok dengan rumus pengenceran
• Menghitung volume insektisida
M1 x V1 = M2 x V 2
113.000 ppm x V1 = 1.000 ppm x 500 mL
113.000ppmV1 =
500.000
V1 = 113.000
V1 = 4.42 mL

• Sehingga, untuk menghitung volume air yang digunakan untuk

membuat larutan stok yaitu:
1000 mL volume larutan stok – 4,42 mL insektisida Sipermetrin =
995,58 mL air
c. Membuat larutan stok masing – masing sebanyak 1000 ml untuk larutan
konsentrasi 101, 100, 10-1, dan 10-2
• Larutan konsentrasi 101
M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 10ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 100.000
100.000
V1 = 1.000

V1 = 100 mL

Maka, larutan konsentrasi 101 dibuat dengan cara mencampur 100 mL

larutan stok dengan 9.900 mL air dalam bak

• Larutan konsentrasi 100

M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 1ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 10.000
10.000
V1 = 1.000
V1 = 10 mL
Maka, larutan konsentrasi 100 dibuat dengan cara mencampur 10 mL
larutan stok dengan 9.990 mL air dalam bak

30
 • Larutan konsentrasi 100
M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 0,1ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 1.000
1.000
V1 = 1.000
V1 = 1 mL
Maka, larutan konsentrasi 10-1 dibuat dengan cara mencampur 1 mL
larutan stok dengan 9.999 mL air dalam bak
• Larutan konsentrasi 10-2
M1 x V1 = M2 x V2
1000ppm x V1 = 0,01ppm x 10.000 mL
1.000ppmV1 = 100
100
V1 =
1.000
V1 = 0,1 mL

Maka, larutan konsentrasi 10-2 dibuat dengan cara mencampur 0,1

mL larutan stok dengan 9.999,9 mL air dalam bak

4. Uji Definitif
Diketahui :
LC100-24 jam (ambang atas kadar) = konsentrasi 100
LC50-24 jam (ambang bawah kadar) = konsentrasi 10 -2
Perhitungan dilakukan dengan rumus :
𝑁 𝑎
log = k ( log )
𝑛 𝑛
a. Mencari volume Sipermetrin untuk membuat larutan konsentrasi a
100 𝑎
log = 5 (log )
10−2 10−2
log 100 – log 10-2 = 5 log a – 5 log 10-2
0 – (-2)
= 5 log a – 5 (-2)
2 = 5 log a + 10
2 – 10 = 5 log a
-8 = 5 log a
10-8 = a5
a = 10 -8/5
a = 0,025 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume sipermetrin dengan rumus
pengenceran :
M1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,025 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 250
V1 = 250/1.000
V1 = 0,25mL

31
b. Mencari volume Sipermetrin untuk membuat larutan konsentrasi b
𝑎 𝑏
b= =
𝑛 𝑎

0,025 𝑏
=
0,01 0,025
0,01 𝑏 = 0,000625
b = 0,0625 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume sipermetrin dengan rumus
pengenceran :
M1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,0625 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 625
V1 = 625/1.000
V1 = 0,625mL

c. Mencari volume Sipermetrin untuk membuat larutan konsentrasi c

𝑏 𝑐
c= =
𝑎 𝑏

0,0625 𝑐
=
0,025 0,0625
0,025 𝑐 = 0,00390625
c = 0,15625 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume sipermetrin dengan rumus
pengenceran :
M1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,15625 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 1.562,5
V1 = 1.562,5/1.000
V1 = 1,5625mL

d. Mencari volume Sipermetrin untuk membuat larutan konsentrasi d

𝑐 𝑑
d= 𝑏
= 𝑐

0,15625 𝑑
0,0625
= 0,15625
0,0625 𝑑 = 0,0244140625
d = 0,390625 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume sipermetrin dengan rumus
pengenceran :
M1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,390625 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 3.906,25
V1 = 3.906,25/1.000

32
 V1 = 3,90625mL
e. Mencari volume Sipermetrin untuk membuat larutan konsentrasi e
𝑑 𝑒
d= 𝑐 = 𝑑

0,390625 𝑒
=
0,15625 0,390625
0,15625 𝑒 = 0,1525878906
e = 0,9765624998 mL
Selanjutnya, dilakukan perhitungan volume sipermetrin dengan rumus
pengenceran :
M1 x V1 = M2 x V 2
1.000ppm x V1 = 0,9765624998 x 10.000mL
1.000ppmV1 = 9.765,624998
V1 =9.765,624998/1.000
V1 = 9,765624998mL

5. Analisis Probit
Y = ax + b
5 = 2,258x + 8,229
-3,229 = 2,258x
-1,4298 = x
-1,43 = x
Antilog x = 10-1,4 = 0,0372
Sehingga diketahui kategorinya yaitu very highly toxic (level 6).

33
 LAMPIRAN DATA MENTAH
Lampiran 6. Data Mentah
Uji Pendahuluan Insektisida Klorpirifos pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus)

Lama Perlakuan Kadar Perlakuan

10-2 10-1 100 10+1 10+1
1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x
0 Jam
Tgl : 30-09-19 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
Jam : 08.30
Jumlah 0 0 0 0 0
6,5 Jam
0,3 0,67
Tgl : 30-09-19 0 0 1 1 1 0 10 10 10 10 10 10 10 10 10
= = 10 10 10
Jam : 14.58
0 1
Jumlah 1 2 30 30 30
25 Jam
1,3 8,3
Tgl : 1-10-19 0 2 2 8 8 9 10 10 10 10 10 10 10 10 10
= = 10 10
Jam : 09.30
1 8
Jumlah 4 25 30 30 30
28 Jam 17’ 0 2 2 1,3 9 8 9 8,7 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Tgl : 1-10-19 = =
Jam : 12.47 1 9
Jumlah 4 30 30 30
48 Jam 48’ 5 3 4 4 10 8 10 9,3 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Tgl : 2-10-19 =
Jam : 09.18 9
Jumlah 12 30 30 30

34
Uji Toksisitas/Definitif Insektisida Klorpirifos pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus)

Lama Perlakuan Kadar Perlakuan

0,25 ml (A) 0,625 ml (B) 1,5625 ml (C) 3,90625 ml (D) 9,765 ml (E)
1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x
0 Jam
Tgl : 7 Okt 19 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0
0 0 0 0 0
Jam : 08.45
Jumlah 0 0 0 0 0
8 Jam 21’
0,3 9,67
Tgl : 7 Okt 19 0 0 1 7 5 6 9 10 10 10 10 10 10 10 10
= 6 = 10 10
Jam : 16.26
0 10
Jumlah 1 18 29 30 30
24 Jam 25’
0,67
Tgl : 8 Okt 19 0 0 2 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
= 10 10 10 10
Jam : 09.10
1
Jumlah 2 30 30 30 30
29 Jam
0,67
Tgl : 8 Okt 19 0 0 2 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
= 10 10 10 10
Jam : 14.00
1
Jumlah 2 30 30 30 30
48 Jam 18’
0,67
Tgl : 9 Okt 19 0 0 2 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
= 10 10 10 10
Jam : 09.18
1
Jumlah 2 30 30 30 30

35
 Lama Kadar Perlakuan
Perlakuan 0,25 ml (A) 0,625 ml (B) 1,5625 ml (C) 3,90625 ml (D) 9,765 ml (E)
1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x 1 2 3 x
53 Jam 0 0 3 1 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Tgl : 9 Okt 19
Jam : 14.12
Jumlah 3 30 30 30 30
72 Jam 1 4 3 2,67 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Tgl : 10-10-19 =
Jam : 09.12 3

Jumlah 8 30 30 30 30
77 Jam 1 7 3 3,67 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Tgl : 10-10-19 =
Jam : 14.54 4

Jumlah 11 30 30 30 30
96 Jam 3 8 4 5 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Tgl : 11-10-19
Jam : 09.14

Jumlah 15 30 30 30 30
Persentase 50 % 100 % 100 % 100 % 100
Kematian
(Setelah 96
jam)

36
Lampiran Uji Pendahuluan Insektisida Sipermetrin pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus)
Kadar Perlakuan
Lama Perlakuan 10-2 10-1 100 10+1 10+2
1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3 1 2 3
0 Jam
Tgl : 30 Sept
2019 1 2 0 0 4 3 2,3 10 10 10 10 10 10 10 10 10
1 10 10 10
Jam : 3≈ 2
13.55-14.20
Jumlah 3 7 30 30 30
24 Jam
Tgl : 1 Okt 2019
2 2 0 1,3 2 4 4 3,3 10 10 10 10 10 10 10 10 10
Jam : 10 10 10
≈1 ≈3
13.55-14.20
Jumlah 4 10 30 30 30
36 Jam
Tgl : 2 Oktober
2019 2 2 0 1,3 2 6 4 10 10 10 10 10 10 10 10 10
4 10 10 10
Jam : ≈1
13.55-14.20
Jumlah 4 12 30 30 30
48 Jam
Tgl : 3 Oktober
2019 2 2 0 1,3 2 6 4 10 10 10 10 10 10 10 10 10
4 10 10 10
Jam : ≈1
13.55-14.20
Jumlah 4 12 30 30 30

37
Uji Definitif / Toksisitas Insektisida Sipermetrin pada Ikan Nila (Oreochromis niloticus)
Kadar Perlakuan
Lama Perlakuan 0,025 ppm 0,0625 ppm 0,156 ppm 0,390 ppm 0,978 ppm
1 2 1 2 1 2 1 2 1 2
24 jam
Tgl : 7 Oktober
2 2 3 3 10 10 10 9 10 10
2019
Jam : 14.05-14.40
Jumlah 2 2 3 3 10 10 10 9 10 10
48 jam
Tgl : 8 Oktober
2 2 3 3 10 10 10 9 10 10
2019
Jam : 14.05-14.40
jumlah 2 2 3 3 10 10 10 9 10 10
72 jam
Tgl : 9 Oktober
4 3 3 4 10 10 10 9 10 10
2019
Jam : 14.05-14.40
Jumlah 4 3 3 4 10 10 10 9 10 10
96 jam
Tgl : 10 Oktober
4 3 3 4 10 10 10 9 10 10
2019
Jam : 14.05-14.40
Jumlah 4 3 3 4 10 10 10 9 10 10
Rata- rata 3,5 3,5 10 9,5 10

38