LEMBAR PENGESAHAN

KARAKTERISASI Trichoderma spp. PADA TANAH TANAMAN

PERKEBUNAN DI BALAI BESAR PERBENIHAN DAN PROTEKSI
TANAMAN PERKEBUNAN (BBPPTP) SURABAYA

Oleh :
Nama Mahasiswa : Khansa Amara
NPM : 1625010095
Program Studi : Agroteknologi

Diterima dan Disetujui

Program Studi Agroteknologi Fakultas Pertanian
Universitas Pembangunan Nasional “Veteran” Jawa Timur

Menyetujui,

Dosen Pembimbing

Dr. Ir. Herry Nirwanto, MS.

NIP. 19620625 199103 1002

Mengetahui,

Dekan Fakultas Pertanian Koordinator Program Studi

Agroteknologi

Dr. Ir. R.A. Nora Augustien K.MP Dr. Ir. Bakti Wisnu W, MP
NIP. 19590824 198703 2001 NIP. 19631005 198703 2001
 KATA PENGANTAR

Puji dan syukur penulis panjatkan kehadirat Allah SWT, atas berkah rahmat,
taufiq, hidayah, dan karunia-Nya penulis mendapatkan kesempatan menyelesaikan
laporan Kuliah Kerja Profesi (KKP) yang berjudul “Karakterisasi Trichoderma spp.
pada Tanah Tanaman Perkebunan di Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman
Perkebunan (BBPPTP) Surabaya”.
Laporan ini dibuat setelah menyelesaikan serangkaian kegiatan KKP di
BBPPTP Surabaya pada 26 Desember 2018 sampai dengan 25 Januari 2019.
Kegiatan Kuliah Kerja Profesi ini dimaksudkan untuk memenuhi kurikulum
program studi Agroteknologi dan pengembangan ilmu yang telah didapatkan dalam
perkuliahan.
Penulis menyampaikan terimakasih kepada berbagai pihak yang turut
membantu dalam penyusunan laporan Kuliah Kerja Profesi (KKP) :
1. Dr. Ir. Nora Agustien K., MP. selaku Dekan Fakultas Pertanian Universitas
Pembangunan Nasional “Veteran” Jawa Timur.
2. Dr. Ir. Bakti Wisnu Widjajani. MT. selaku Koordinator Program Studi
Agroteknologi Fakultas Pertanian Universitas Pembangunan Nasional
“Veteran” Jawa Timur.
3. Dr. Ir. Herry Nirwanto, MP. selaku Dosen Pembimbing KKP Fakultas
Pertanian Universitas Pembangunan Nasional “Veteran” Jawa Timur.
4. Ardi Praptono, SP.,MP. selaku Kepala Balai Besar Perbenihan dan Proteksi
Tanaman Perkebunan (BBPPTP) Surabaya.
5. Wahyu Irianto, SP. selaku Kepala Bidang Proteksi Balai Besar Perbenihan dan
Proteksi Tanaman Perkebunan (BBPPTP) Surabaya.
6. Umiati, SP. selaku pembimbing lapang kegiatan KKP di laboratorium
Mikologi Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan
(BBPPTP) Surabaya.
7. Bapak Muhajir dan Ibu Frisfilia selaku orang tua yang selalu mendukung dan
mendo’akan demi kelancaran dalam melakukan kegiatan KKP di Balai Besar
Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan (BBPPTP) Surabaya.

i
8. Hanik Atul Mufida, Eilinda Kurnia Putri, Silvia Reza Luckyta, Diah Ayu
Wulandari, sahabat “Boss Farmer Girl” dan rekan-rekan dari Universitas
Negeri Surabaya, Universitas Soedirman serta Universitas Trunojoyo Madura
yang telah ikut serta membantu dalam menyelesaikan kegiatan yang
berlangsung selama KKP.
9. Semua pihak yang membantu dalam kelancaran kegiatan KKP yang tidak dapat
saya sebutkan satu persatu.
Penulis mengharapkan kritik dan saran yang bersifat membangun sebagai
penyempurnaan laporan Kuliah Kerja Profesi (KKP) kedepannya. Semoga laporan
ini dapat bermanfaat bagi semua pihak.

Surabaya, April 2019

PENULIS

ii
 DAFTAR ISI

Halaman
KATA PENGANTAR ...................................................................................................... i
DAFTAR ISI ..................................................................................................................... ii
DAFTAR TABEL .......................................................................................................... vii
DAFTAR GAMBAR .................................................................................................... viii
I. PENDAHULUAN ............................................................................................... 1
1.1. Latar Belakang ............................................................................................. 1
1.2. Tujuan ............................................................................................................ 2
1.3. Manfaat.......................................................................................................... 3
II. TINJAUAN PUSTAKA ..................................................................................... 4
2.1. Tanaman Perkebunan .................................................................................. 4
2.1.1. Tanaman Kakao (Theobroma cacao L.) ........................................ 4
2.1.2. Tanaman Kopi (Coffea sp.) ............................................................. 5
2.1.3. Tanaman Cengkeh (Eugenia aromatica L.) .................................. 6
2.2. Trichoderma spp. ......................................................................................... 6
2.2.1. Klasifikasi Trichoderma spp. .......................................................... 7
2.2.2. Trichoderma spp. sebagai Agens Pengendali Hayati (APH) ...... 8
2.2.3. Potensi Trichoderma spp. sebagai Entomopatogen ..................... 9
2.3. Fusarium oxysporum ................................................................................... 9
2.3.1. Klasifikasi Fusarium sp. ................................................................ 10
2.3.2. Gejala Penyakit ............................................................................... 11
III. GAMBARAN UMUM LOKASI KULIAH KERJA PROFESI ................. 13
3.1. Sejarah dan Profil Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman
Perkebunan (BBPPTP) Surabaya ............................................................ 13
3.2. Keadaan Sekitar Wilayah BBPPTP Surabaya........................................ 13
3.3. Wilayah Kerja BBPPTP Surabaya .......................................................... 14
3.4. Visi, Misi, Motto dan Jargon BBPPTP Surabaya .................................. 14
3.4.1.Visi ..................................................................................................... 14

iii
 3.4.2. Misi ................................................................................................... 15
3.4.3. Motto ................................................................................................ 15
3.4.4. Jargon ............................................................................................... 15
3.5. Struktur Organisasi BBPPTP Surabaya .................................................. 16
3.6. Pelayanan Publik ........................................................................................ 17
3.6.1. Sub Bagian Tata Usaha .................................................................. 18
3.6.2. Bidang Perbenihan .......................................................................... 18
3.6.3. Bidang Proteksi ............................................................................... 18
3.7. Tugas Pokok dan Fungsi BBPPTP Surabaya ......................................... 18
3.7.1. Tugas pokok..................................................................................... 19
3.7.2. Fungsi ............................................................................................... 19
3.8. Sarana dan Prasarana ................................................................................. 20
3.8.1. Laboratorium ................................................................................... 20
3.8.2. Rumah Kaca (Green House) .......................................................... 21
3.8.3. Perpustakaan .................................................................................... 21
3.8.4. Gedung Serba Guna ........................................................................ 21
3.8.5. Asrama.............................................................................................. 21
3.8.6. Koperasi ........................................................................................... 22
3.8.7. Kantin ............................................................................................... 22
3.8.8. Mushola ............................................................................................ 22
3.8.9. Tempat Parkir Kendaraan .............................................................. 22
IV. METODE PELAKSANAAN KULIAH KERJA PROFESI ....................... 23
4.1. Waktu dan Tempat ..................................................................................... 23
4.2. Metode Pengumpulan Data....................................................................... 23
4.2.1. Pengenalan lokasi Kuliah Kerja Profesi (KKP) .......................... 23
4.2.2. Praktik langsung di lapangan......................................................... 23
4.2.3. Diskusi .............................................................................................. 24
4.2.4. Pengumpulan data ........................................................................... 24
4.2.5. Studi pustaka.................................................................................... 24
4.2.6. Penyusunan laporan Kuliah Kerja Profesi (KKP) ...................... 24
4.3.Metode Analisis Data ................................................................................. 24

iv
V. PELAKSANAAN KARAKTERISASI Trichoderma spp. PADA TANAH
TANAMAN PERKEBUNAN DI BALAI BESAR PERBENIHAN DAN
PROTEKSI TANAMAN PERKEBUNAN (BBPPTP) SURABAYA....... 26
5.1. Eksplorasi Trichoderma spp. pada tanah komoditas perkebunan ....... 26
5.1.1. Pengambilan sampel tanah............................................................. 26
5.2. Persiapan media PDA sebagai media tumbuh Trichoderma spp. ....... 26
5.2.1. Pembuatan media PDA .................................................................. 26
5.2.2. Plating media PDA ......................................................................... 27
5.3. Sterilisasi alat.............................................................................................. 28
5.3.1. Persiapan sterilisasi alat ................................................................. 28
5.3.2. Sterilisasi alat dan bahan menggunakan autoklaf hyrayama tipe
HVE-50 .......................................................................................... 29
5.4. Isolasi tanah ................................................................................................ 30
5.4.1. Pengenceran sampel tanah ............................................................. 30
5.4.2. Isolasi tanah ..................................................................................... 31
5.5. Identifikasi Trichoderma spp. hasil isolasi tanah .................................. 32
5.6. Pemurnian Trichoderma spp. dan Peremajaan Fusarium sp. untuk Uji
Antagonis .................................................................................................... 34
5.6.1. Pemurnian Trichoderma spp. hasil isolasi tanah ........................ 34
5.6.2. Peremajaan Fusarium oxysporum ................................................. 34
5.7. Pelaksanaan uji antagonis antara Trichoderma spp. dan Fusarium
oxysporum ................................................................................................... 36
5.8. Perhitungan kerapatan spora Trichoderma spp. dan Fusarium
oxysporum ................................................................................................... 39
5.9. Perhitungan Viabilitas Trichoderma spp. ............................................... 42
5.10. Hasil ........................................................................................................... 43
5.10.1. Karakterisasi Trichoderma spp. berdasarkan kerapatan spora
Trichoderma spp. .......................................................................... 43
5.10.2. Karakterisasi Trichoderma spp. berdasarkan viabilitas spora
Trichoderma spp. .......................................................................... 44

v
 5.10.3. Karakterisasi Trichoderma spp. berdasarkan antagonismenya
terhadap Fusarium oxysporum .................................................... 45
VI. PEMBAHASAN ................................................................................................ 46
5.3. Sterilisasi ..................................................................................................... 46
5.4. Pembuatan media PDA ............................................................................. 47
5.5. Pengenceran bertingkat ............................................................................. 48
5.6. Isolasi ........................................................................................................... 48
5.7. Pemurnian Trichoderma spp. dan Peremajaan Fusarium oxysporum 49
5.8. Karakterisasi Trichoderma spp. ............................................................... 50
5.8.1. Uji kualitas spora ............................................................................ 50
5.8.2. Uji antagonisme atau uji daya hambat Trichoderma spp. dan
Fusarium oxysporum .................................................................... 51
VI. KESIMPULAN DAN SARAN ....................................................................... 54
7.1. Kesimpulan ................................................................................................. 54
7.2.Saran ............................................................................................................. 54
DAFTAR PUSTAKA .................................................................................................... 55
LAMPIRAN .................................................................................................................... 59

vi
 DAFTAR TABEL

No Halaman
Teks
5.1 Kerapatan Spora Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman
Perkebunan .................................................................................................. 43
5.2. Viabilitas Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman
Perkebunan ................................................................................................... 44
5.3. Antagonisme Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman
Perkebunan ................................................................................................... 45

Lampiran
L.1. Perhitungan Kerapatan Spora Trichoderma spp. pada Tiga Tanah
Tanaman Perkebunan dengan Pengulangan ................................................ 59
L.2. Perhitungan Viabilitas spora Trichoderma spp. pada Tiga Tanah
Tanaman Perkebunan dengan Pengulangan ................................................ 59
L.3. Perhitungan Uji Daya Hambat Trichoderma spp. pada Tiga Tanah
Tanaman Perkebunan dengan Pengulangan ................................................ 60

vii
 DAFTAR GAMBAR

No Halaman
Teks
2.1. Konidia pada Fusarium oxysporum (a) Mikrokonidium
(b) Makrokonidium (Fourie et al., 2011) .................................................... 11
3.1. Kantor Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman
Perkebunan (BBPPTP) Surabaya (a) Tampak Atas (b) Tampak Depan ..... 14
3.2. Struktur Organisasi BBPPTP Surabaya ....................................................... 16
5.1. Pembuatan media PDA (a) Menimbang media PDA
dengan menggunakan neraca analitik sebanyak 39 gram (b)
Menuangkan media kedalam gelas beaker yang berisi aquadest................. 27
5.2. Sterilisasi LAF (a) Menyemprotkan alkohol 70% pada LAF
(b) Mengeringkan LAF menggunakan tisu (c) Plating media PDA ............ 28
5.3. Membungkus cawan petri menggunakan kertas dengan halaman
berwarna putih ............................................................................................. 29
5.4. Sterilisasi alat dan bahan menggunakan autoklaf dengan menggunakan
autoklaf hyrayama tipe HVE-50 .................................................................. 30
5.5. Sampel tanah tanaman (kiri ke kanan) kakao asal Wonosalam, cengkeh
asal Nganjuk, dan kopi asal Probolinggo .................................................... 31
5.6. Pengenceran tanah (a) Menghaluskan tanah menggunakan mortar (b)
Menghomogenkan tanah yang telah dihaluskan dengan aquadest steril
(c) Melakukan pengenceran bertingkat hingga 10-3 .................................... 31
5.7. Isolasi suspensi hasil pengenceran 10-2 dan 10-3 menggunakan spet ........... 32
5.8. Hasil isolasi tanah pada 7 HSI (hari setelah inkubasi) (a) Tanah cengkeh
hasil pengenceran 10-2 (b) Tanah kopi hasil pengenceran 10-2 (c) Tanah
kakao hasil pengenceran 10-2 (d) Tanah cengkeh hasil pengenceran
10-3 (e) Tanah kopi hasil pengenceran 10-3 (f) Tanah kakao hasil
pengenceran 10-3 .......................................................................................... 33
5.9. Morfologi Trichoderma spp. secara mikroskopis pada perbesaran 10x100...33

viii
5.10. Pemurnian Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman Perkebunan
..................................................................................................................... 35
5.11. Peremajaan Isolat Fusarium oxysporum milik BBPPTP Surabaya ............ 35
5.12. Hasil Pemurnian Trichoderma spp. pada isolasi tanah tanaman
perkebunan (a) kakao (b) cengkeh (c) kopi (d) Hasil peremajaan
Fusarium oxysporum milik BBPPTP Surabaya .......................................... 36
5.13. Persiapan uji antagonis antara Trichoderma spp. dan Fusarium
oxysporum (a) Memberi garis 2 cm dari tepi kanan dan kiri untuk uji
antagonis dengan metode dual culture (b) Menginokulasikan
Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum ............................................... 38
5.14. Hasil uji antagonisme antara Trichoderma spp. dan Fusarium
oxysporum pada tanaman (a) Kakao (b) Kopi (c) Cengkeh ........................ 38
5.15. Teknik Perhitungan kerapatan spora menggunakan alat
haemocytometer. (a) cara menyuntikan suspensi pada haemocytometer
tipe neubauer chamber, (b) teknik diagonal sampling yang digunakan
dalam acuan pengamatan ............................................................................. 40
5.16. Pemanenan Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum untuk
perhitungan kerapatan spora dan viabilitas spora ........................................ 41
5.17. Perhitungan kerapatan spora menggunakan haemocytometer (a)
Mencari bidang hitung pada haemocytomer (b) Bidang hitung yang
digunakan yaitu a, b, c, d, dan e (c) Spora Fusarium oxysporum (d)
Spora Trichoderma spp. ............................................................................... 41
5.18. Uji viabilitas spora Trichoderma spp. (a) Menginkubasikan petri untuk
perhitungan viabilitas spora selama 18 jam (b) Pengamatan dan
perhitungan viabilitas spora secara mikroskopis ......................................... 42
5.19. Viabilitas spora Trichoderma spp. pada tanah tanaman (a) Kakao (b)
Kopi (c) Cengkeh dengan perbesaran 10x40 ............................................... 43
5.20. Viabilitas spora Fusarium oxysporum dengan perbesaran 10x40................ 43
5.21. Grafik Kerapatan Spora Trichoderma spp. pada Tanah Tanaman
Perkebunan .................................................................................................. 44

ix
5.22. Grafik Viabilitas spora Trichoderma spp. pada sampel tanah tanaman
perkebunan ............................................................................................................ 44
5.23. Grafik Uji Antagonis Trichoderma spp. pada Fusarium oxysporum .......... 45

Lampiran

L.4. Surat keterangan selesai Kuliah Kerja Profesi (KKP) ................................... 62

L.5. Kartu bimbingan Kuliah Kerja Profesi (KKP) .............................................. 63
L.6. Kartu Monitoring dan Evaluasi Keaktifan Kuliah Kerja Profesi (KKP) ....... 64

x
 I. PENDAHULUAN

1.1. Latar Belakang

Tanaman perkebunan merupakan salah satu komoditas yang dibudidayakan

di Indonesia. Namun dalam kegiatan budidayanya mengalami berbagai hambatan
salah satunya adalah hama penyakit tanaman. Pengendalian yang dilakukan oleh
petani masih didominasi dengan penggunaan pestisida secara berkala, hal ini dapat
meningkatkan akumulasi residu pestisida di areal pertanaman. Residu pestisida
dapat berdampak negatif baik bagi petani maupun lingkungan, karena dapat
mematikan organisme non target, meningkatkan resistensi hama maupun patogen,
serta pencemaran lingkungan (Ameriana, 2008). Salah satu alternatif pengendalian
untuk meminimalisir dampak negatif pemakaian pestisida sintetik adalah
pengendalian tanaman secara biologi.
Pengendalian tanaman secara biologi merupakan pengendalian tanaman
dengan memanfaatkan agens hayati, musuh alami, maupun bagian tanaman yang
berpotensi untuk mengendalikan hama penyakit tanaman. Agens pengendali hayati
(APH) yang sering dimanfaatkan untuk pengendalian penyakit tanaman adalah
Trichoderma spp. Pengendalian biologi dipilih karena lebih aman bagi petani
maupun lingkungan. Selain itu, dengan meningkatnya kesadaran masyarakat
terhadap gaya hidup sehat melalui back to nature membuat konsumen menghendaki
produk pertanian organik, salah satunya dicirikan dengan produk pertanian bebas
residu kimia.
Trichoderma spp. merupakan salah satu jamur antagonis yang memiliki
spektrum luas dalam mengendalikan beberapa patogen tanaman, salah satunya
Fusarium oxysporum penyebab layu fusarium. Jamur antagonis berperan sebagai
penyeimbang ekosistem di alam, karena dapat menekan populasi patogen melalui
mekanisme antagonis. Mekanisme antagonis yang dimiliki Trichoderma spp. dalam
menekan populasi Fusarium oxysporum adalah antibiosis, kompetisi ruang dan
nutrisi, serta mikoparasit (Juliana et al., 2017). Adanya keseimbangan ekosistem
di alam telah dijelaskan oleh Tuhan semesta alam pada salah satu firmanNya, yaitu
QS. Adz-Dzaariyat (51) : 49 bahwa “Dan segala sesuatu Kami ciptakan berpasang-

1
 2

pasangan supaya kamu mengingat kebesaran Allah” (Al-Sheikh, 2004). Melalui

eksplorasi APH, tim laboratorium proteksi tanaman BBPPTP Surabaya telah
menjalankan fungsi manusia sebagai makhluk Tuhan agar selalu mengingat
kebesaran Sang Pencipta dan mencegah diri dari perbuatan yang dapat merusak
ekosistem lingkungan.
Eksplorasi APH merupakan kegiatan mencari agens hayati yang tersedia di
alam dengan cara mengambil bagian tubuh tumbuhan maupun tanah disekitar
perakaran (rhizosfer). APH yang diperoleh dari hasil isolasi tanah dapat dijadikan
isolat murni untuk menekan populasi patogen. APH hasil eksplorasi memiliki
potensi yang berbeda-beda dalam menekan populasi patogen, hal tersebut tidak
terlepas dari kondisi lingkungan sebagai faktor eksternal yang mendukung
pertumbuhan APH. Sehingga perlu dilakukan kegiatan karakterisasi APH untuk
mengetahui potensinya dalam rangka menekan populasi patogen.
Kegiatan KKP bertema karakterisasi Trichoderma spp. sebagai APH
dilakukan untuk mengetahui metode yang dilakukan tim proteksi BBPPTP
Surabaya dalam menguji potensi Trichoderma spp. sebagai APH. Karakterisasi
Trichoderma spp. sebagai APH ditinjau berdasarkan dua aspek, yaitu kualitas spora
(kerapatan dan viabilitas spora) dan antagonismenya dalam menekan populasi
patogen Fusarium oxysporum. Selain sebagai parameter karakterisasi APH,
kualitas spora dan antagonisme merupakan parameter uji mutu APH yang
dilakukan oleh BBPPTP Surabaya sebelum memproduksi APH untuk dijual kepada
konsumen, seperti perusahaan swasta maupun negeri, instansi swasta maupun
pemerintahan, hingga kebutuhan untuk penelitian. Oleh karena itu, penulis
bertujuan untuk mengetahui metode karakterisasi Trichoderma spp. pada tanah
tanaman kakao, cengkeh, dan kopi hasil eksplorasi yang dilakukan oleh tim
laboratorium proteksi tanaman BBPPTP Surabaya.

1.2. Tujuan

Tujuan dilaksanakannya kegiatan KKP karakterisasi Trichoderma spp. pada

tanah tanaman perkebunan diantaranya sebagai berikut :
 3

1. Mengetahui metode karakterisasi Trichoderma spp. pada tanah tanaman kakao

cengkeh, dan kopi berdasarkan perhitungan kualitas spora (kerapatan dan
viabilitas spora) dan daya hambat Trichoderma spp. terhadap patogen Fusarium
oxysporum.
2. Mengetahui metode pengujian efektivitas Trichoderma spp. sebagai agens
pengendali hayati (APH) yang dilakukan BBPPTP Surabaya.

1.3. Manfaat

Manfaat yang dapat diperoleh dari kegiatan KKP KKP karakterisasi

Trichoderma spp. pada tanah tanaman perkebunan diantaranya sebagai berikut:

1. Meningkatkan hubungan kerjasama yang baik antara perguruan tinggi dengan

instansi
2. Memperoleh pengetahuan dan metode dalam menentukan karakter Trichoderma
spp. hasil eksplorasi tanah tanaman cengkeh, kopi, kakao yang dilakukan oleh
tim laboratorium proteksi BBPPTP Surabaya.
3. Memperoleh pengetahuan dan metode tentang pengujian efektivitas
Trichoderma spp. sebagai APH untuk produksi massal oleh tim laboratorium
proteksi BBPPTP Surabaya.
 II. TINJAUAN PUSTAKA

2.1. Tanaman Perkebunan

Perkebunan merupakan usaha pemanfaatan lahan kering dengan menanam

komoditi tertentu. Berdasarkan jenis tanamannya, perkebunan dapat dibedakan
menjadi perkebunan dengan tanaman semusim, seperti perkebunan tembakau dan
tebu, serta perkebunan tanaman tahunan, seperti perkebunan kelapa sawit, karet,
kakao, kopi, cengkeh, dan pala. Tanah tanaman perkebunan yang digunakan dalam
kegiatan karakterisasi Trichoderma spp. adalah kakao, kopi, dan cengkeh.

2.1.1. Tanaman Kakao (Theobroma cacao L.)

Tanaman kakao termasuk marga Theobroma, suku Sterculiaceae yang banyak

diusahakan oleh para petani, perkebunan swasta dan perkebunan negara. Menurut
(Tjitrosoepomo, 1988 dalam Kiptantiyawati, 2016) tanaman kakao memiliki
klasifikasi Kerajaan : Plantae; Divisi : Spermatophyte; Anak Divisi :
Angiospermae; Kelas : Dicotyledoneae; Anak Kelas : Dialypetalae; Bangsa :
Malvales; Suku : Sterculiaceae; Marga : Theobroma; Jenis : Theobroma cacao L.

Kakao (Theobroma cacao L.) dikenal juga dengan nama cokelat. Kakao yang
sering diproduksi adalah jenis criollo, forastero, dan trinitario yang merupakan
persilangan antara jenis criollo dan forastero. Kakao lindak (Amelonado/Forastero)
atau dikenal dengan nama kakao curah/ bulk cacao. Morfologi kakao lindak adalah
hasil panen tinggi, tahan hama dan penyakit, cita rasa terbaik, kulit halus, tipis, dan
keras. Indonesia sendiri merupakan negara penghasil kakao terbesar nomor tiga di
dunia setelah Pantai Gading dan Ghana (Rahmani et al., 2018).

Faktor iklim yang penting bagi pertumbuhan kakao meliputi curah hujan,
suhu, kelembaban udara dan sinar matahari. Curah hujan merupakan unsur iklim
terpenting. Tanaman sangat sensitif terhadap kadar air. Curah hujan yang
dibutuhkan harus tinggi dan terdistribusi dengan baik sepanjang tahun. Tingkat
curah hujan yang baik berkisar antara 1500 – 2500 mm per tahun. Curah hujan saat
musim kemarau sebaiknya lebih dari 100 mm/bulan dan tidak lebih dari tiga

4
 5

bulan. Pada umumnya kakao diusahakan pada ketinggian kurang dari 300 meter
dari permukaan air laut. Suhu maksimal untuk kakao sekitar 30-32 oC sedangkan
suhu minimum sekitar 18-21 oC. Suhu yang terlalu tinggi menyebabkan hilangnya
dominansi apikal sedangkan suhu yang terlalu rendah menyebabkan daun seperti
terbakar dan bunga mengering. Daerah penghasil kakao memiliki kelembaban
udara relatif maksimal 100% pada malam hari dan 70-80% pada siang hari.
Lingkungan hidup alami tanaman kakao adalah hutan tropis yang di dalam
pertumbuhannya membutuhkan naungan untuk mengurangi pencahayaan penuh.
Tekstur tanah 50% pasir, 10-20% debu dan 30-40% lempung berpasir dengan pH
4,0 – 8,5 (Ikhsan, 2013).

2.1.2. Tanaman Kopi (Coffea sp.)

Klasifikasi tanaman kopi (Coffea sp.) (Tjitrosoepomo, 1988 dalam

Kiptantiyawati, 2016) adalah Kingdom : Plantae; Subkigdom : Tracheobionta;
Super Divisi : Spermatophyta; Divisi : Magnoliophyta; Kelas : Magnoliopsida; Sub
Kelas : Asteridae; Ordo : Rubiales; Famili : Rubiaceae; Genus : Coffea; Spesies :
Coffea sp. (Cofffea arabica L., Coffea canephora, Coffea liberica, Coffea excelsa).

Tanaman kopi merupakan tanaman perkebunan yang berasal dari Benua

Afrika, tepatnya dari negara Ethiopia pada abad ke-9. Terdapat tiga jenis kopi yang
dikenal di Indonesia yaitu arabika, robusta, dan liberika. Kopi arabika merupakan
jenis yang memiliki aroma dan tekstur bubuk kopi yang paling baik, namun mudah
terserang hama dan penyakit serta tidak dapat ditanam pada ketinggian kurang dari
1000 mdpl (Putra, 2015).

Suhu udara rata‐rata untuk pertumbuhan tanaman kopi 24‐30 °C. Pada
umumnya kopi tidak menyukai sinar matahari langsung dalam jumlah banyak,
tetapi menghendaki sinar matahari teratur. Angin berpengaruh besar terhadap jenis
kopi yang bersifat self-steril, hal ini membantu penyerbukan klon yang berbeda.
Tanaman kopi menghendaki tanah yang gembur dan kaya bahan organik. Tingkat
keasaman tanah (pH) yang ideal untuk tanaman ini 5,5-6,5 dan tanaman kopi tidak
menghendaki tanah bersifat basa. Curah hujan untuk pertanaman kopi adalah 1500
– 2500 mm per tahun, dengan rata-rata bulan kering 1-3 bulan dan suhu rata-rata
 6

15-25 ºC dengan lahan kelas S1 atau S2 Puslitkoka (2006) dalam (Prastowo et al.,
2012).

2.1.3. Tanaman Cengkeh (Eugenia aromatica L.)

Klasifikasi tanaman cengkeh adalah Kingdom : Plantae; Divisi :

Spermatophyta; Sub divisi: Angiospermae; Kelas : Dicotyledoneae; Subkelas :
Choripetalae; Ordo : Myrtales; Famili : Myrtaceae: Genus : Eaugenia; Spesies :
Eugenia aromatica L. (Tjitrosoepomo, 1988 dalam Kiptantiyawati, 2016).
Cengkeh merupakan salah satu komoditas pertanian yang tinggi nilai ekonomisnya
serta merupakan komoditas utama untuk pembuatan rokok kretek, selain itu juga
digunakan dalam bidang farmasi dan sebagai rempah-rempah (Hasanah, 2012).

Tanaman cengkeh tumbuh baik pada daerah antara 200o LU-200o LS. Suhu
udara yang cocok untuk tanaman cengkeh adalah 21-35 oC dengan kelembaban
antara 60-80% dan ketinggian ideal 200-300 mdpl. Tanaman cengkeh tumbuh dan
berproduksi pada dataran rendah, sedangkan pada dataran tinggi tanaman cengkeh
lambat. Cengkeh akan tumbuh dengan baik apabila cukup air dan mendapat sinar
matahari langsung. Lahan dengan kondisi kemiringan 20% lebih baik daripada
lahan datar, karena memiliki drainase yang baik. Derajat keasaman (pH) yang baik
adalah 5,5-5,6. Lahan Indonesia, cengkeh cocok ditanam di daerah dataran rendah
dekat pantai maupun di pegunungan pada ketinggian 900 meter di atas permukaan
laut (Utami, 2015).

2.2. Trichoderma spp.

Trichoderma spp. merupakan salah satu contoh APH yang berperan dalam
menghambat pertumbuhan berbagai jenis patogen pada tanaman. Saputri et al
(2015) menyatakan bahwa T. harzianum, T. koningii, T.viridae sangat efektif untuk
mengendalikan penyakit rebah kecambah Sclerotium rolfsii. Hal ini disebabkan
karena agens hayati seperti T. harzianum, T. koningii, T. viridae memiliki
mekanisme yang bersifat PGPF (Plant Growth Promoting Fungi) yaitu dapat
meningkatkan pertumbuhan tanaman, meningkatkan daya serap mineral aktif, dan
nutrisi lainnya dari dalam tanah. Peningkatan pertumbuhan tanaman yang dipicu
 7

dengan adanya pemberian agens hayati T. harzianum, T. koningii, T. viridae.

Darmawan (2016) mengatakan bahwa Trichoderma spp. mampu merangsang
tanaman untuk memroduksi hormon asam giberelin (GA3), asam indolasetat (IAA),
dan benzylaminopurin (BAP) dalam jumlah yang lebih besar, sehingga
pertumbuhan tanaman lebih optimum, subur, sehat, kokoh, dan pada akhirnya
berpengaruh pada ketahanan tanaman. Trichoderma spp. mampu memacu
ketahanan tanaman melalui aktivitas Induced Sistemic Resistance (ISR).
2.2.1. Klasifikasi Trichoderma spp.

Klasifikasi Trichoderma spp. menurut adalah Kingdom : Fungi; Filum :

Ascomycota: Class : Ascomycetes; Subclass : Hyporemycetidae; Ordo :
Hypocreales; Family: Hypcreaceae; Genus : Trichoderma; Spesies : Trichoderma
spp. (Semangun 2000 dalam Herliyana et al., 2013). Trichoderma spp. merupakan
fungi Ascomycota dengan konidiofor tegak, bercabang banyak, agak berbentuk
kerucut, dapat membentuk klamidospora pada kondisi lingkungan yang ekstrim
maupun kekurangan unsur hara. Pada umumnya koloni dalam biakan tumbuh
dengan cepat, berwarna putih sampai hijau (Cook dan Baker, 1989 dalam Herliyana
et al., 2013).
Spesies Trichoderma dibedakan berdasarkan warna dan bentuk konidia serta
penampilan koloni. Beberapa jenis Trichoderma spp. dapat mengurangi serangan
patogen tular tanah pada kondisi alamiah. Faktor seperti pH tanah, aerasi dan
sumber nutrisi merupakan faktor yang mempengaruhi perkembangan Trichoderma
spp. di lapangan. Pada pH rendah dan keadaan yang lembab, Trichoderma sp. akan
berkembang dengan baik.
Koloni Trichoderma spp. pada media biakan PDA tumbuh dengan cepat pada
suhu 25-30 ºC. Fungi Trichoderma spp. Memiliki karakteristik hifa bersepta,
bercabang, dinding licin, tidak berwarna, diameter 1.5-12 μm, percabangan hifa
membentuk sudut siku-siku pada cabang utama (Jamilah, 2011). Faktor eksternal
yang mempengaruhi Trichoderma sp. adalah suhu, pH, dan kelembaban.
Lingkungan yang optimum untuk pertumbuhan Trichoderma sp. pada suhu 25-
30oC ,pH 4-5, dan kelembaban 80-90%. Faktor internal yang mempengaruhi
pertumbuhan Trichoderma spp. adalah nutrisi (Sulistiyono, 2015).
 8

2.2.2. Trichoderma spp. sebagai Agens Pengendali Hayati (APH)

Trichoderma spp. banyak digunakan sebagai agens hayati untuk

mengendalikan patogen tular tanah Sclerotinia sp., Fusarium sp., Pythium sp.,
Rhizoctonia sp., Ganoderma sp. dan Rigidoporus microporus (Widyastuti et al.,
2001). Trichoderma spp. juga mampu berperan sebagai agens pengendali bakteri
Erwinia sp. pada Aloe vera (Taufik et al., 2014). Selain kemampuan sebagai agens
hayati, Trichoderma spp. juga banyak dimanfaatkan sebagai stimulator
pertumbuhan tanaman seperti yang diungkapkan oleh Afitin dan Darmanti (2009)
dalam HS et al. (2017) bahwa penggunaan Trichoderma spp. sebagai stimulator
untuk pengomposan bahan organik lebih efektif dalam meningkatkan produksi
jagung. Trichoderma spp. juga dapat berperan sebagai jamur pengurai, pupuk
hayati dan sebagai biokondisioner pada benih.

Pemanfaatan cendawan antagonis merupakan salah satu alternatif untuk

mengendalikan penyakit layu fusarium yang disebabkan oleh Fusarium oxysporum.
Trichoderma spp. adalah salah satu cendawan antagonis yang dapat menekan atau
menghambat perkembangan patogen tanaman. Mekanisme agens antagonis
cendawan termasuk Trichoderma spp. terhadap patogen adalah kompetisi, induksi
ketahanan tanaman, mikoparasit dan antibiosis (Hartanto dan Heni K., 2016).

Trichoderma spp. merupakan jamur yang distribusinya paling luas di antara

jamur tanah, karena terdapat pada berbagai substansi yang ada di dekat tanah
pertanian, hutan, padang rumput dan lingkungan lain seperti kayu tebang atau yang
telah lapuk. Trichoderma sp. dapat menghasilkan enzim β-1,3 glukanase dan
kitinase yang dapat menyebabkan degradasi dan lisis pada dinding sel (Budiarti dan
Widyastuti, 2011).
Penta dan Mujoko (2010 dalam Rulinggar et al., 2016) menyatakan bahwa
kombinasi agensia hayati Streptomyces sp., Gliocladium sp. dan Trichoderma
harzianum dapat menghambat perkembangan intensitas penyakit Fusarium
oxysporum f.sp. lycopersici hingga 78% dibandingkan perlakuan masing-masing
antagonis berkisar 50%-56%.
 9

2.2.3. Potensi Trichoderma spp. sebagai Entomopatogen

Pengendalian secara hayati dinilai tepat dikarenakan telah banyak penelitian

yang membuktikan bahwa penggunaan B. bassiana dan Trichoderma sp. mampu
untuk membunuh serangga hama. Herlinda (2012) dalam (Septiana, 2015)
menyatakan bahwa Trichoderma spp. efektif dalam menekan populasi nimfa hama
kutu putih papaya (Paracoccus marginatus) sebesar 82,86 % selama 4 hari setelah
penyemprotan.
Trichoderma hamatum selain berpotensi sebagai antagonis patogen juga
berpotensi sebagai entomopatogen hama kutu kapas (Aphis Gossypii) (Mona et al.,
2016). Mona et al. (2016) menyatakan bahwa semakin tinggi konsentrasi
Trichoderma hamatum dapat meningkatkan mortalitas pada hama kutu kapas. Hal
ini selaras dengan penelitian Sahebani dan Hadavi (2008 dalam (Mona et al., 2016)
menunjukkan perbedaan konsentrasi T. harzianum (102-108 spora/ml) menurunkan
infeksi nematode dibandingkan kontrol. T. album menyebabkan mortalitas hingga
100% pada hama tungau merah. Trichoderma harzianum merupakan salah satu
jamur yang dapat diisolasi dari umpan ulat dan rayap (Suciatmih et al., 2015).

2.3. Fusarium oxysporum

Fusarium oxysporum merupakan patogen tular tanah. Patogen tular tanah

adalah kelompok mikroorganisme yang siklus hidupnya berada didalam tanah dan
memiliki kemampuan untuk menginfeksi perakaran atau pangkal batang, walaupun
beberapa patogen tular tanah ini dapat menghasilkan spora udara sehingga dapat
menyebar ke areal yang lebih luas (Berlian et al., 2016). Serangan penyakit layu
fusarium masih tergolong tinggi dan mempunyai penyebaran yang sangat luas
karena tahan terhadap lingkungan kritis, mampu bertahan hidup didalam tanah
dalam jangka waktu lama, bahkan dalam keadaan tanpa adanya tanaman inang. Hal
ini disebabkan patogen mampu membentuk miselium, mikrokonidium,
makrokonidium, maupun klamidospora (Cahyaningrum et al., 2017).
Patogen Fusarium oxysporum dapat bertahan dalam tanah tergantung dari
banyak atau sedikitnya sisa-sisa akar dan kayu yang tertinggalcahya dalam tanah,
dan dari berbagai faktor yang mempengaruhi pembusukan. Jamur Fusarium
 10

oxysporum merupakan penyebab penyakit layu dan busuk batang pada berbagai
jenis tanaman pangan, hortikultura dan perkebunan. Inang dari patogen ini adalah
sayuran, bawang, kentang, tomat, kubis, lobak, petsai, sawi, temu-temuan,
semangka, melon, pepaya, salak, krisan, anggrek, kacang panjang, cabai, ketimun,
jambu biji, dan jahe. Tanaman lain yang diketahui menjadi inang patogen ini adalah
kelapa sawit, kelapa, lada, vanili, dan kapas (Semangun, 2004).
Jamur Fo mempunyai banyak bentuk khusus yang disebut dengan forma
specialis (f.sp.), seperti: f.sp. asparagi yang menyerang asparagus; f.sp.
callistephi yang menyerang tanaman aster; f.sp. cubense penyebab
penyakit layu Panama pada pisang; f.sp. dianthi penyebab penyakit
layu pada anyelir; f.sp. lycopersici penyebab penyakit layu pada tomat; f.sp.
melonis penyebab penyakit layu fusarium pada melon; f.sp. niveum penyebab
penyakit layu fusarium pada semangka; f.sp. tracheiphilum penyebab penyakit
layu pada kedelai; dan f.sp. zingiberi sebagai penyebab penyakit kuning pada jahe.
Gejala tanaman yang terserang Fusarium sp. adalah tanaman layu, daun kering
tanpa disertai perubahan warna menjadi kuning, infeksi parah menyebabkan daun
gugur hingga mengalami kematian sehingga tanaman tidak mampu berproduksi
(Sudantha, 2009).

2.3.1. Klasifikasi Fusarium sp.

Penyakit layu fusarium disebabkan oleh patogen F. oxysporum. menurut

Agrios (1996) dalam Djaenuddin (2011), cendawan F. oxysporum tergolong
kedalam Kingdom : Mycetae; Divisi : Deutromycota; Kelas : Deutromycetes; Ordo
: Hyphales (Moniliales); Family : Tuberculariaceae; Genus : Fusarium; Spesies :
Fusarium oxysporum.
Sutejo et al. (2008) menjelaskan bahwa miselium F.oxysporum bersekat,
konidiofor bersekat, mikrokonidia satu sel, bentuknya agak bulat, berukuran 6-15
x 2,5-4 µm; makrokonidia mempunyai 3–5 sekat, bentuknya seperti bulan sabit,
berukuran 25-33 x 3,5-5,5 µm. Klamidospora bulat, terbentuk di ujung maupun
tengah hifa, berukuran 8,75–14,5 µm. Djaenuddin (2011) menjelaskan bahwa, daur
hidup F. oxysporum mengalami fase patogenesis dan saprogenesis. Pada fase
 11

patogenesis, cendawan hidup sebagai parasit pada tanaman inang. Apabila tidak
terdapat tanaman inang, patogen hidup didalam tanah sebagai saprofit pada sisa
tanaman dan masuk fase saprogenesis, yang dapat menjadi sumber inokulum untuk
menimbulkan penyakit pada tanaman lain. Penyebaran propagul dapat terjadi
melalui angin, air tanah, serta tanah terinfeksi dan terbawa oleh alat pertanian dan
manusia.

a b

Gambar 2.1. Konidia pada Fusarium oxysporum (a)

Mikrokonidium (b) Makrokonidium (Fourie et
al., 2011)

Isolat Fusarium oxysporum merupakan patogen dengan spektrum penyebaran

yang luas. Koloni Fusarium oxysporum berwarna putih atau disertai dengan warna
ungu atau merah muda pada pusat koloninya. Pada isolat yang membentuk
sporodokium dalam jumlah banyak, koloni akan berubah dari putih menjadi oranye.
Hasil pengamatan secara makroskopis Fusarium oxysporum membentuk koloni
yang berbeda pada media tumbuh yang sama. Hal ini menunjukkan bahwa jamur
ini tidak stabil dan mudah sekali mengalami mutasi. Sehingga warna koloni tidak
dapat dijadikan acuan untuk identifikasi Fusarium oxysporum. Namun hal ini dapat
dihindari dengan menggunakan teknik monospora, metode ujung hifa, serta dengan
tidak melakukan sub kultur (Cahyaningrum et al., 2017).

2.3.2. Gejala Penyakit

Nurzannah et al. (2014) menyatakan bahwa penyakit ini ditemukan pada

setiap stadia pertumbuhan tanaman, mulai benih berkecambah (seed borne disease),
tanaman muda, hingga tanaman dewasa. Tanaman dewasa yang terinfeksi gejala
pertama kali terlihat layu, daunnya berwarna kuning. Serangan lebih lanjut
 12

menyebabkan tanaman mati dan pangkal batang berwarna coklat. Pembusukan

mulai dari akar sampai pangkal batang di atas permukaan tanah. Apabila batang
dibelah melintang maupun membujur jaringan pembuluh berubah warna coklat.

Djaenuddin (2011) juga menjelaskan bahwa gejala yang tampak pada

tanaman terserang patogen ini, layu diawali bagian daun tua diikuti oleh daun yang
lebih muda. Kelayuan didahului dengan menguningnya daun, terutama daun-daun
bawah yang dekat dengan permukaan tanah. Tepi bawah daun menjadi kuning tua
(layu), merambat ke bagian dalam secara cepat sehingga seluruh permukaan daun
tersebut menguning. Nekrosis pada daun diawali dari bagian pinggir daun hingga
tulang daun.
 III. GAMBARAN UMUM LOKASI KULIAH KERJA PROFESI

3.1. Sejarah dan Profil Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman

Perkebunan (BBPPTP) Surabaya

Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan (BBPPTP)

Surabaya merupakan Unit Pelaksana Teknis (UPT) Pusat yang pembentukannya
berasal dari penggabungan (penataan organisasi) Balai Proteksi Tanaman
Perkebunan (BPTP) Jawa Timur dan Balai Pengawasan dan Pengujian Mutu Benih
Perkebunan Jawa Timur (BP2MB) Jawa Timur berdasarkan Peraturan Menteri
Pertanian Nomor 08 Permentan/OT 140/2/2008 tentang Organisasi dan Tata Kerja
Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan(BBPPTP) Surabaya.
Secara struktur BBPPTP Surabaya bertanggung jawab kepada Direktorat
Jenderal Perkebunan dan secara teknis dibawah pembinaan Direktorat
Perlindungan Tanaman Ditjenbun dan Direktorat Perbenihan Ditjenbun. Kehadiran
jajaran perbenihan dan perlindungan perkebunan sangat diperlukan sebagai
asuransi (jaminan) atas keselamatan agribisnis dan pemenuhan tuntutan pasar
dunia.

3.2. Keadaan Sekitar Wilayah BBPPTP Surabaya

BBPPTP Surabaya terletak di pintu gerbang sebelah timur Kota Jombang,

tepatnya di Jl. Raya Mojoagung No. 52 Dusun Ngrowo, Desa Gambiran,
Kecamatan Mojoagung, Kabupaten Jombang, Jawa Timur. Batas wilayah yang
mengelilingi kantor BBPPTP Surabaya antara lain :
Sebelah Utara : Desa Babut Sumobito, Desa Betek dan Desa Mancilan
Sebelah Selatan : Desa Janti
Sebelah Barat : Desa Tejo
Sebelah Timur : Desa Kauman dan Desa Demangan

13
 14

Desa Gambiran terletak pada ketinggian 37 mdpl, dengan topografi daerah

sebagian besar merupakan daratan. Suhu rata-rata 26.3 °C dengan curah hujan rata-
rata 1730 mm.

a b

Gambar 3.1. Kantor Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan
(BBPPTP) Surabaya (a) Tampak Atas (b) Tampak Depan

3.3. Wilayah Kerja BBPPTP Surabaya

Wilayah kerja BBPPTP Surabaya di bidang perbenihan meliputi: Provinsi

Jawa Timur, Provinsi Jawa Tengah, Provinsi DIY, Provinsi Jawa Barat,Provinsi
Banten, Provinsi Banten, Provinsi Bali, Provinsi Nusa Tenggara Barat, Provinsi
Nusa Tenggar Timur, Provinsi Sulawesi Selatan, Provinsi Sulawesi Selatan,
Provinsi Sulawesi Tenggara, Provinsi Sulawesi Barat, Provinsi Sulawesi Tengah,
Provinsi Sulawesi Utara, Provinsi Gorontalo, Provinsi Papua, dan Provinsi papua
Barat. Sedangkan wilayah kerja BBPPTP Surabaya dibidang proteksi meliputi:
Provinsi Jawa Timur, Provinsi Jawa Tengah, Provinsi DIY, Provinsi Jawa Barat,
Provinsi Bali, Provinsi Nusa Tenggara Barat, Provinsi Nusa Tenggara Timur.

3.4. Visi, Misi, Motto dan Jargon BBPPTP Surabaya

3.4.1. Visi
Visi yang dimiliki oleh Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman
Perkebunan (BBPPTP) Surabaya adalah “ Menjadi Balai yang profesional dalam
meningkatkan pelayanan prima dibidang perbenihan dan proteksi tanaman
perkebunan.
 15

3.4.2. Misi
Misi yang dijalankan oleh BBPPTP Surabaya dalam tercapainya visi yang
dimiliki antara lain :
1. Mengoptimalkan pengawasan pelestarian plasma nutfah, mutu benih, peredaran
benih, hasil rekayasa genetika dan pemanfaatan agensia pengendali hayati.
2. Mengoptimalkan pengujian mutu benih dalam rangka uji layak edar, introduksi,
ex import, export dan rekayasa genetika dan agensia pengendali hayati.
3. Mengoptimalkan pengujian adaptasi observasi dalam rangka pelepasan varietas
dan pengujian penilaian manfaat kelayakan benih dalam rangka penarikan
varietas.
4. Mengembangkan metode pengujian mutu benih, sertifikasi benih, pengawasan
peredaran benih, teknik identifikasi OPT, pengendalian OPT penerapan PHT,
penanggulangan gangguan usaha perkebunan dan dampak anomali iklim.
5. Pengembangan jaringan dan kerjasama antar laboratorium penguji mutu benih
dan antar laboratorium proteksi tanaman perkebunan.
6. Meningkatkan bimbingan teknis penerapan sistem manajemen mutu
laboratorium pengujian mutu benih dan proteksi tanaman perkebunan.
7. Mengoptimalkan pelayanan teknis dan pengembangan informasi perbenihan dan
proteksi tanaman perkebunan.

3.4.3. Motto

Motto dari Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan

(BBPPTP) Surabaya yaitu “ TANGGAP, CEPAT, AKURAT”. BBPPTP Surabaya
terus berupaya dan bertekad untuk berkembang lebih maju sebagai UPT Balai Besar
yang memiliki peran sebagai pusat pengembangan teknologi benih dan sertifikasi
tanaman perkebunan serta penanggulangan gangguan usaha perkebunan dengan
teknologi proteksi menggunakan agensia hayati.

3.4.4. Jargon
BBPPTP Surabaya selain memiliki visi, misi dan motto juga memiliki jargon
yaitu berupa kalimat yang membuat lebih bersemangat untuk bekerja dan lebih
kompak dalam melakukan kegiatan. Jargon yang dimiliki BBPPTP Surabaya
 16

adalah ketika salah satu pemimpin berteriak “BBPPTP Surabaya!” maka wajib
menjawab “Sahabat setia petani”.

3.5. Struktur Organisasi BBPPTP Surabaya

Susunan organisasi BBPPTP Surabaya secara struktural dipimpin oleh

Kepala Balai yang membawahi Kepala Sub Bagian Tata Usaha, Kepala Bidang
Perbenihan, Kepala Bidang Proteksi serta kelompok jabatan fungsional (Gambar
2). Kepala bidang perbenihan dibantu oleh seksi pelayanan teknik dan informasi
serta juga dibantu oleh seksi jaringan laboratorium perbenihan. Begitu pula dengan
kepala bidang proteksi yang dibantu oleh seksi pelayanan teknik dan informasi serta
oleh seksi jaringan laboratorium proteksi. Bagan struktur organisasi yang berada di
BBPPTP Surabaya secara umum yaitu :

Gambar 3.2. Struktur Organisasi BBPPTP Surabaya

Kepala Balai, kepala sub bidang, kepala seksi dan koordinator kelompok
jabatan fungsional membupnyai tugas dan kewajiban yaitu menerapkan prinsip
koordinasi, integrasi, dan sinkronisasi baik di lingkungan satuan organisasi
BBPPTP Surabaya maupun dengan instansi lain yang sesuai dengan bidang tugas
masing-masing. Setiap pimpinan satuan organisasi memiliki tanggung jawab dalam
memimpin, mengawasi, mengkoordinasi, memberi bimbingan, mengontrol dan
petunjuk pelaksanaan tugas bawahannya. Sub bagian tata usaha membawahi bagian
kepala bidang perbenihan dan bidang proteksi tanaman yang mempunyai tugas
melaksanakan urusan kepegawaian, keuangan, tata usaha serta rumah tangga.
 17

Tugas dari bidang perbenihan yaitu melaksanakan pemberian pelayanan

teknik kegiatan pengawasan dan pengembangan pengujian, pengelolaan data dan
informasi, pemberian bimbingan teknis penerapan sistem manajemen mutu dan
manajemen laboratorium, serta pengembangan jaringan kerjasama laboratorium uji
mutu benih tanaman perkebunan. Bidang perkebunan dibagi menjadi dua bidang,
yaitu seksi pelayanan teknik dan informasi dan seksi jaringan laboratorium
perbenihan.
Tugas dari bidang proteksi yaitu melaksanakan pemberian pelayanan teknik
kegiatan analisis teknis dan pengembangan proteksi tanaman terhadap OPT,
pengelolaan data dan informasi, pemberian bimbingan teknis penerapan sistem
manajemen mutu dan laboratorium, serta pengembangan jaringan kerjasama
laboratorium proteksi tanaman perkebunan. Bidang proteksi dibagi menjadi dua
bidang, yaitu seksi pelayanan teknik dan informasi dan seksi jaringan laboratorium
proteksi.
Kelompok jabatan fungsional terdiri dari dua kelompok jabatan yaitu jabatan
fungsional pengawas benih tanaman dan jabatan fungsional pengendalian
organisme pengganggu tumbuhan. Fungsi kelompok jabatan fungsional
pengawasan benih tanaman yaitu pengawasan pelestarian plasma nutfah tingkat
nasional, dan pelaksanaan pengujian mutu benih perkebunan intoduksi, eks impor,
dan yang akan diekspor, serta rekayasa genetika. Kelompok jabatan fungsional
pengendalian organisme pengganggu tumbuhan mempunyai tugas untuk
pelaksanaan identifikasi organisme pengganggu tanaman (OPT) perkebunan, dan
pelaksanaan analisis data serangan dan perkembangan situasi OPT serta faktor yang
mempengaruhi.

3.6. Pelayanan Publik

BBPPTP Surabaya memiliki satuan unit kerja yang dibagi menjadi tiga
bagian utama dalam pelaksanaan pelayanan publik terutama pada petani atau
masyarakat perkebunan. Pelayanan yang diberikan pada setiap bagian yang ada
antara lain sebagai berikut:
 18

3.6.1. Sub Bagian Tata Usaha

Bagian tata usaha memberikan pelayanan kepada publik dalam bentuk
sebagai berikut:
1. Pengelolaan PNPB pada kegiatan : sertifikasi dan pengujian mutu benih serta
penyediaan APH
2. Kerjasama antar dinas terkait di bidang perkebunan

3.6.2. Bidang Perbenihan

Bidang perbenihan memberikan pelayanan pada publik dalam bentuk sebagai
berikut:
1. Pemeriksaan lapang sumber benih dalam rangka pemberian sertifikat layak edar.
2. Monitoring dan evaluasi sumber benih.
3. Pengawasan peredaran benih.
4. Pengujian mutu benih perkebunan dalam rangka penerbitan label benih.
5. Kerjasama antar laboratorium dalam rangka pengembangan pengujian mutu
benih.
6. Publikasi informasi perbenihan tanaman perkebunan.
3.6.3.Bidang Proteksi
Bidang proteksi memberikan pelayanan pada publik dalam bentuk sebagai
berikut:
1. Identifikasi gangguan usaha perkebunan dalam rangka penanggulangan resiko
usaha perkebunan.
2. Pengembangan APH dan Pupuk Hayati Mikoriza.
3. Pengujian mutu APH.
4. Publikasi informasi perlindungan tanaman perkebunan.

3.7. Tugas Pokok dan Fungsi BBPPTP Surabaya

Peraturan Menteri Pertanian Nomor: 08/Permentan/ot.140/2/2008 tentang

Organisasi dan Tata Kerja Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman
Perkebunan (BBPPTP). BBPPTP Surabaya melakukan tugas pokok dan fungsi
tersendiri. Tugas dan fungsi yang dilaksanakan oleh BBPPTP Surabaya yaitu
sebagai berikut:
 19

3.7.1. Tugas pokok

Tugas pokok yang wajib dilaksanakan oleh BBPPTP Surabaya antara lain:
1. Melaksanakan pengawasan, pengembangan, pengujian mutu benih.
2. Melaksanakan analisis teknik dan pengembangan proteksi tanaman
perkebunan.
3. Memberikan bimbingan teknis penerapan sistem manajemen mutu dan
laboratorium.
3.7.2. Fungsi
Selain melaksanakan tugas pokok di atas BBPPTP Surabaya juga
menyelenggarakan fungsi antara lain:
1. Pelaksanaan pelestarian plasma nutfa tingkat nasional
2. Pelaksanaan pengujian mutu benih perkebunan introduksi, eks impor dan
yang akan diekspor, serta rekayasa genetik.
3. Pelaksanaan pengujian adaptasi (observasi) benih perkebunan dalam rangka
pelepasan varietas.
4. Pelaksanaan penilaian pengujian manfaat dan kekayaan benih perkebunan
dalam rangka penarikan varietas.
5. Pelaksanaan pengujian mutu dan sertifikasi benih perkebunan dalam rangka
perbenihan sertifikat layak edar.
6. Pelaksanaan pemantauan benih perkebunan yang beredar lintas provinsi.
7. Pelaksanaan pengembangan teknik dan metode pengujian mutu benih
perkebunan dan uji acuan (referee test).
8. Pelaksanaan identifikasi organisme pengganggu tumbuhan (OPT)
perkebunan
9. Pelaksanaan analisis data serangan dan perkembangan situasi OPT serta
faktor mempengaruhi.
10. Pelaksanaan analisis data gangguan usaha perkebunan dan dampak anomali
iklim serta faktor yang mempengaruhi.
11. Pengembangan teknis surveillance OPT penting.
12. Pelaksanaan pengembangan metode pengamatan, model peramalan, taksasi
kehilangan hasil dan teknik pengendalian OPT perkebunan.
 20

13. Pelaksanaan eksplorasi dan inventarisasi musuh alami OPT perkebunan.

14. Pelaksanaan pengembangan teknologi perbanyakan, penilaian kualitas dan
pelepasan agensia hayati OPT perkebunan.
15. Pelaksanaan pengawasan dan evaluasi agensia hayati OPT perkebunan.
16. Pelaksanaan pengembangan teknologi proteksi perkebunan yang berorientasi
pada implementasi pengendalian hama terpadu.
17. Pelaksanaan pengujian dan analisis residu pestisida.
18. Pemberian pelayanan teknik kegiatan perbenihan dan proteksi tanaman
perkebunan.
19. Pengelolaan data dan informasi kegiatan perbenihan dan proteksi tanaman
perkebunan.
20. Pemberian bimbingan teknis penerapan sistem manajemen laboratorium
perbenihan dan proteksi tanaman perkebunan.
21. Pelaksanaan pengembangan jaringan dan kerjasama laboratorium perbenihan
dan proteksi tanaman perkebunan.
22. Pelaksanaan urusan kepegawaian, keuangan tataausaha dan rumah tangga
balai besar.

3.8. Sarana dan Prasarana

3.8.1. Laboratorium
Sarana penunjang dalam melaksanakan kegiatan tugas pokok dan fungsi
BBPPTP Surabaya sebagai unit pembantu pusat berupa tempat melakukan analisa
dan penelitian yaitu laboratorium. Laboratorium dapat membantu dalam
menunjang kegiatan penelitian dan pelayanan terhadap masyarakat. Setiap
laboratorium dilengkapi dengan sarana dan prasarana yang memadai sesuai dengan
kebutuhan masing-masing laboratorium. Laboratorium dibedakan menjadi dua
yaitu laboratorium perbenihan dan laboratorium proteksi tanaman.
a) Laboratorium perbenihan
Laboratorium perbenihan terdiri dari beberapa laboratorium bagian,
diantaranya adalah Laboratorium Kemurnian Benih, Laboratorium DNA,
Laboratorium Basah, Laboratorium Kering dan Laboratorium Terpadu
 21

b) Laboratorium Proteksi Tanaman

Laboratorium proteksi tanaman juga terdiri dari beberapa laboratorium
bagian, diantaranya adalah Laboratorium Pestisida Nabati, Laboratorium Mikologi,
Laboratorium Virus dan Bakteriologi, Laboratorium Trichogramma, Laboratorium
Nematoda, Laboratorium Mikoriza, Laboratorium Terpadu dan Laboratorium
Predator.

3.8.2. Rumah Kaca (Green House)

BBPPTP Surabaya memiliki tiga tempat rumah kaca yang berada di dalam
lingkup kantor dan dipergunakan sebagai tempat kegiatan penelitian dan pengujian
terhadap produk inovasi pertanian. Rumah kaca pertama terletak di sebelah barat
gedung utama, rumah kaca kedua berada di lantai 2 gedung laboratorium kultur
jaringan, dan rumah kaca yang ketigas ada di sebelah timur laboratorium
Trichogramma.

3.8.3. Perpustakaan
BBPPTP Surabaya mempunyai 1 perpustakaan yang di dalamnya terdapat
koleksi buku-buku pedoman, jurnal-jurnal hasil penelitian dalam bidang
perkebunan, referensi hasil penelitian dan buku penunjang untuk melaksanakan
tugas dan fungsi dari unit pembantu pusat dinas perkebunan.

3.8.4. Gedung Serba Guna

BBPPTP Surabaya memiliki satu Gedung Serba Guna (GSG) yang berfungsi
sebagai gedung yang dapat digunakan sebagai ruang pertemuan, ruang seminar,
rapat atau pertemuan dengan staf atau pegawai di lingkup kantor BBPPTP
Surabaya. Selain digunakan sebagai ruang pertemuan, GSG juga digunakan sebagai
tempat olah raga badminton dan juga digunakan sebagai tempat apel ketika kondisi
cuaca di luar ruangan tidak memungkinkan.

3.8.5. Asrama
BBPPTP Surabaya memiliki gedung asrama yang terdiri dari 18 kamar yang
terbagi menjadi dua lantai. Setiap kamar terdiri dari 2-4 tempat tidur dan kamar
 22

mandi. Asrama ini diperuntukan sebagai tempat menginap bagi tamu luar atau
delegasi dari daerah yang mengadakan pertemuan di BBPPTP Surabaya.

3.8.6. Koperasi

KOBATEKSI merupakan koperasi yang dimiliki oleh kantor BBPPTP

Surabaya. Koperasi ini berperan penting dalam meningkatkan kesejahteraan
anggotanya, karena mampu menyediakan kebutuhan para anggota. Modal koperasi
berasal dari simpanan pokok, simpanan wajib, dan simpanan suka rela. Keuntungan
yang diperoleh koperasi akan kembali kepada para anggotanya berupa Sisa Hasil
Usaha (SHU).

3.8.7. Kantin

BBPPTP Surabaya juga menyediakan kantin sebagai tempat yang

menyediakan makanan dan minuman bagi para pegawai untuk makan pagi dan
makan siang. Kantin mulai buka pukul 06.30-14.00 WIB. Keberadaan kantin ini
sangat bermanfaat karena para pegawai yang tidak membawa bekal makanan dari
rumah tidak perlu mencari makan keluar lingkungan kantor, selain itu makanan
yang disajikan juga sehat dan bergizi.

3.8.8. Mushola

Mushola menjadi fasilitas penunjang yang disediakan oleh BBPPTP

Surabaya bagi pegawai ataupun tamu yang muslim untuk tetap dapat menjalankan
sholat berjama’ah. Fasilitas musholla juga cukup memadai yaitu adanya tempat
wudhu terpisah, kamar mandi, ruangan ber-AC dan tempat lumayan luas.

3.8.9. Tempat Parkir Kendaraan

BBPPTP Surabaya dilengkapi dengan adanya fasilitas parkir yang terpisah
antara kendaraan beroda dua dan beroda empat, sehingga letak kendaraan lebih
tertata rapi. Tempat parkir ini juga aman karena dalam pengawasan satpam yang
selalu sigap dipintu gerbang masuk kantor BBPPTP Surabaya sehingga kendaraan
yang keluar maupun masuk terpantau oleh satpam.
 IV. METODE PELAKSANAAN KULIAH KERJA PROFESI

4.1. Waktu dan Tempat

Kuliah Kerja Profesi (KKP) ini dilaksanakan di Balai Besar Perbenihan dan
Proteksi Tanaman Perkebunan (BBPPTP) Surabaya, Jl. Raya Mojoagung Nomor
52, Kecamatan Mojoagung, Kabupaten Jombang. Waktu pelaksanaan Kuliah Kerja
Profesi mulai tanggal 26 Desember 2018 sampai dengan 25 Januari 2019. Kuliah
Kerja Profesi (KKP) ini dilaksanakan selama hari kerja yaitu hari Senin-Jum’at,
dimulai pukul 07.30 WIB-16.00 WIB (Senin-Kamis) dan 07.30 WIB-16.30 WIB
(Jumat).

4.2. Metode Pengumpulan Data

Pelaksanaan kegiatan KKP terdiri dari beberapa tahapan seperti pengenalan

keadaan umum, praktik langsung di lapangan, diskusi dengan pembimbing lapang
maupun petugas laboran proteksi tanaman BBPPTP Surabaya, pengumpulan data
melalui perhitungan kerapatan spora, viabilitas spora, dan daya hambat APH
terhadap patogen, studi pustaka serta penyusunan laporan KKP.

4.2.1. Pengenalan lokasi Kuliah Kerja Profesi (KKP)

Pengenalan lokasi Kuliah Kerja Profesi (KKP) dan penentuan topik atau
pokok kegiatan yang akan dilakukan selama Kuliah Kerja Profesi (KKP) dengan
pembimbing Balai, pengenalan dan penentuan topik dilakukan pada minggu
pertama kegiatan Kuliah Kerja Profesi (KKP).

4.2.2. Praktik langsung di lapangan

Praktik langsung di lapangan dilakukan dengan mengikuti kegiatan secara

langsung di lapang seperti pelaksanaan kedisiplinan dan peraturan balai, persiapan
pelaksanaan isolasi, peremajaan isolate balai, pemurnian, inokulasi jamur guna
cadangan koleksi (isolat).

23
 24

4.2.3. Diskusi

Kegiatan diskusi dilakukan bersama pembimbing Balai Besar Perbenihan dan

Proteksi Tanaman Perkebunan (BBPPTP) Surabaya, mahasiswa magang maupun
mahasiswa yang sedang melaksanakan penelitian.

4.2.4. Pengumpulan data

Pengumpulan data dilakukan dengan praktik secara langsung dilapangan dan

melakukan diskusi dengan pembimbing lapang perihal tanah hasil eksplorasi yang
digunakan sebagai sampel isolasi tanah, metode isolasi tanah dan media yang
digunakan, perhitungan kerapatan dan viabilitas spora (kualitas spora) serta uji daya
hambat Trichoderma spp. pada patogen Fusarium oxysporum.

4.2.5. Studi pustaka

Kegiatan studi pustaka digunakan sebagai bahan literatur dan sumber

informasi untuk pembuatan proposal maupun landasan teori pelaksanaan kuliah
kerja profesi. Sumber literatur dapat diperoleh dari jurnal, tesis, skripsi, buku
pedoman milik Balai Besar Perbenihan dan Proteksi Tanaman Perkebunan
(BBPPTP) Surabaya maupun karya ilmiah lain terkait uji antagonis maupun
penilaian kualitas Trichoderma spp. yang diukur melalui viabilitas dan kerapatan
spora. Ukuran ideal Trichoderma spp. sebagai agens pengendali hayati (APH)
minimal viabilitas spora 60%, kerapatan spora x 106 spora/ml dan daya hambat
50%.

4.2.6. Penyusunan laporan Kuliah Kerja Profesi (KKP)

Penyusunan laporan Kuliah Kerja Profesi (KKP) dilakukan setelah

menyelesaikan pengumpulan data telah mendapatkan hasil pelaksanaannya.

4.3. Metode Analisis Data

Dokumentasi pelaksanaan kegiatan digunakan sebagai bahan pembahasan

dan membandingkan seluruh kegiatan yang dilakukan selama KKP di BBPPTP
Surabaya dengan standar skala nasional maupun internasional. Selain itu, data
 25

kuantitatif didapatkan dari perhitungan setiap parameter pengamatan, baik dari

kerapatan spora, viabilitas spora, dan uji daya hambat (antagonis) antara
Trichoderma spp. pada Fusarium oxysporum.
V. PELAKSANAAN KARAKTERISASI Trichoderma spp. PADA TANAH
TANAMAN PERKEBUNAN DI BALAI BESAR PERBENIHAN DAN
PROTEKSI TANAMAN PERKEBUNAN (BBPPTP) SURABAYA

5.1. Eksplorasi Trichoderma spp. pada tanah komoditas perkebunan

5.1.1. Pengambilan sampel tanah

Pengambilan sampel tanah dilakukan oleh Tim Laboratorium Proteksi

Tanaman BBPPTP Surabaya. Langkah-langkah yang dilakukan untuk pengambilan
sampel tanah sebagai berikut :

1. Mencari tanah yang diduga terdapat keberadaan Trichoderma spp. sebagai

agens hayati (tanah supresif) pada tanah tanaman kakao, kopi, dan cengkeh
2. Memilih tanaman yang sehat dan mengambil tanah ± 100-200 gram beserta akar
tanaman disekitar rhizosfer (perakaran) tanaman, kemudian disimpan dalam
plastik
3. Menjaga kelembaban tanah dengan memberikan air secukupnya agar faktor
abiotik bagi mikroba dapat terpenuhi
4. Menghaluskan tanah dengan menggunakan mortar dan mengayak dengan
ayakan 2 mm
5. Memasukkan tanah kedalam plastik dan memberi label yang terdapat keterangan
asal tanah, komoditas yang ditanam, dan waktu pengambilan sampel tanah
6. Sampel tanah siap diisolasi melalui metode pengenceran maupun metode tebar

5.2. Persiapan media PDA sebagai media tumbuh Trichoderma spp.

5.2.1. Pembuatan media PDA

Media yang digunakan untuk isolasi tanah, pemurniaan, peremajaan, uji

viiabilitas spora APH dan uji antagonis antara Trichoderma spp. dan Fusarium
oxysporum adalah Potato Dextrose Agar (PDA). Langkah-langkah yang dilakukan
untuk pembuatan media PDA sebagai berikut :
1. Menimbang serbuk PDA instan 39 gr/L aquadest untuk pembuatan media PDA
satu resep (Gambar 5.1a)
26
 27

2. Menuangkan serbuk PDA ke dalam gelas beaker yang berisi satu liter aquadest
(Gambar 5.1b)
3. Memanaskan media pada hotplate dan mengaduknya menggunakan spatula
agar homogen
4. Menunggu media PDA berubah warna hingga coklat kekuningan
5. Mematikan hot plate ketika media telah berubah warna
6. Menuangkan PDA pada Erlenmeyer 100 ml dan 250 ml. kemudian menutupnya
menggunakan kapas dan kertas atau alumunium foil untuk sterilisasi media
menggunakan autoclave selama ± 15 menit pada suhu 121oC.

a b
a b

Gambar 5.1. Pembuatan media PDA (a) Menimbang media

PDA dengan menggunakan neraca analitik
sebanyak 39 gram (b) Menuangkan media
kedalam gelas beaker yang berisi aquadest

5.2.2. Plating media PDA

Plating PDA dilakukan di LAF (Laminar Air Flow) dan alat bahan yang
digunakan dalam kondisi steril. Sebelum memulai plating PDA, LAF harus
dipastikan dalam kondisi steril dengan cara menyemprotkan alkohol 70% (Gambar
5.2a) dan membersihkannya menggunakan tisu (Gambar 5.2b) serta menyalakan
UV selama satu jam. Kondisi ruangan, alat dan bahan, serta praktikan harus steril.
Hal ini bertujuan untuk meminimalisir terjadinya kontaminasi pada media.
Menuangkan media PDA pada cawan petri sebanyak 10 gram menggunakan spet.
Kelebihan plating menggunakan spet adalah ketebalan media antar cawan petri
homogen. Namun hal ini rawan akan kontaminasi, sehingga ukuran media saat
 28

plating sering dilakukan dengan cara mentaksir (Gambar 5.2c). Erlenmeyer berisi
100 ml media PDA cukup untuk plating 10 cawan petri.

a b c

Gambar 5.2. Sterilisasi LAF (a) Menyemprotkan alkohol 70% pada LAF (b)
Mengeringkan LAF menggunakan tisu (c) Plating media PDA

5.3. Sterilisasi alat

5.3.1. Persiapan sterilisasi alat

1. Memasukkan seluruh alat seperti erlenmeyer, tabung reaksi, cawan petri, dan
lain-lain kedalam panci yang berisi air sabun
2. Memanaskan panci yang berisi alat-alat dengan kompor sampai mendidih.
Kemudian mendiamkannya sampai dingin
3. Mencuci peralatan hingga bersih dan meniriskannya
4. Mengeringkan peralatan dengan tisu dan membungkusnya dengan kertas
(Gambar 5)
5. Memasukkan peralatan yang telah dibungkus kedalam keranjang autoclave
untuk sterilisasi alat
 29

Gambar 5.3. Membungkus cawan petri menggunakan

kertas dengan halaman berwarna putih

5.3.2. Sterilisasi alat dan bahan menggunakan autoklaf hyrayama tipe HVE-
50

1. Menghubungkan steker dengan stop kontak.

2. Menekan tombol on dan menggesernya menjadi unlock, kemudian membuka
autoklaf (Gambar 5.4.)
3. Melihat kondisi air, apabila kurang dari batas garis, segera menambahkan air
hingga batas garis
4. Memasukkan keranjang yang berisi media atau alat dan menutup autoklaf
dengan rapat dan menggeser menjadi lock
5. Mengatur mode pada autoklaf, memilih “agar” untuk media agar, memilih
“solid” untuk media padat (jagung, sekam, dedak, dan sebagainya) dan alat,
memilih “liquid” untuk sterilisasi dalam bentuk cairan. Kemudian menekan
tombol start
6. Autoklaf akan bekerja 15 menit dengan suhu 121oC untuk sterilisasi alat dan
bahan. Apabila sudah complete, menunggu suhu sampai turun kurang dari 50oC.
7. Ketika suhu sudah mencapai 50oC, menekan stop dan menggeser menjadi
unlock. Mengambil keranjang yang berisi media dan alat, kemudian
mengeluarkannya dari autoklaf dan klik off, serta mencabut steker dari stop
kontak.
8. Media dan alat siap digunakan.
 30

Gambar 5.4. Sterilisasi alat dan bahan menggunakan

autoklaf dengan menggunakan autoklaf
hyrayama tipe HVE-50

5.4. Isolasi tanah

5.4.1. Pengenceran sampel tanah

1. Menyiapkan alat dan sampel tanah kakao, kopi, dan cengkeh sebagai bahan
untuk isolasi tanah (Gambar 5.5)
2. Menghaluskan sampel tanah kakao, kopi, dan cengkeh menggunakan mortar
(Gambar 5.6a)
3. Menimbang sampel tanah kakao, kopi, dan cengkeh yang telah dihaluskan
sebanyak 1 gram kemudian menuangkannya pada test tube yang telah ditambah
10 ml aquadest
4. Memvorteks test tube yang telah berisi tanah dan aquadest selama 3 menit (10o)
(Gambar 5.6b)
5. Melakukan pengenceran bertingkat hingga 10-3 (Gambar 5.6c) dengan cara :
a) Mengambil larutan stok sebanyak 1 ml dan memasukannya pada test tube ke
2 yang telah berisikan aquadest 9 ml dan memvorteks kembali test tube
tersebut selama 3 menit. Hal tersebut disebut dengan pengenceran 10-1
b) Melakukan kegiatan secara berulang hingga pengenceran 10-3. Tujuan
pengenceran tersebut agar mikroorganisme yang tumbuh dalam media tidak
terlalu rapat.
 31

Gambar 5.5. Sampel tanah tanaman (kiri ke kanan)

kakao asal Wonosalam, cengkeh asal
Nganjuk, dan kopi asal Probolinggo

a b c

Gambar 5.6. Pengenceran tanah (a) Menghaluskan tanah menggunakan mortar

(b) Menghomogenkan tanah yang telah dihaluskan dengan aquadest
steril (c) Melakukan pengenceran bertingkat hingga 10-3

5.4.2. Isolasi tanah

1. Menyiapkan alat dan bahan yang akan digunakan

2. Menghidupkan LAF dan sterilisasi LAF dengan menggunakan alkohol 70%
serta menyalakannya sinar UV selama 1 jam
3. Memasukan bahan-bahan yang akan digunakan untuk isolasi tanah
4. Mengambil hasil pengenceran 10-2 dan 10-3 sebanyak 0,2 ml menggunakan spet
(Gambar 5.7.) dan meratakan pada cawan petri yang telah berisi media PDA
menggunakan L glass masing-masing 2 ulangan. Melakukan langkah yang
sama pada sampel tanah lainnya
 32

5. Menutup kembali cawan petri dengan menggunakan cling wrap

6. Mematikan LAF dan membersihkannya menggunakan alkohol 70% dan sinar
UV
7. Mengamati pertumbuhan koloni Trichoderma spp. pada media PDA.

Gambar 5.7. Isolasi suspensi hasil pengenceran 10-2

dan 10-3 menggunakan spet
5.5. Identifikasi Trichoderma spp. hasil isolasi tanah

Identifikasi merupakan tahapan yang dilakukan untuk memastikan atau

mengetahui bahwa isolat yang telah ditemukan dari hasil isolasi merupakan
Trichoderma spp. Identifikasi dilakukan secara makroskopis dengan melihat
pertumbuhan koloni Trichoderma spp. pada media PDA (Gambar 5.8.) dan
mikroskopis melalui pengamatan morfologi Trichoderma spp. menggunakan
mikroskop (Gambar 5.9.)
 33

a b c

d e f

Gambar 5.8. Hasil isolasi tanah pada 7 HSI (hari setelah inkubasi) (a)
Tanah cengkeh hasil pengenceran 10-2 (b) Tanah kopi
hasil pengenceran 10-2 (c) Tanah kakao hasil pengenceran
10-2 (d) Tanah cengkeh hasil pengenceran 10-3 (e) Tanah
kopi hasil pengenceran 10-3 (f) Tanah kakao hasil
pengenceran 10-3

Gambar 5.9. Morfologi Trichoderma spp. secara

mikroskopis pada perbesaran 10x100
 34

5.6. Pemurnian Trichoderma spp. dan Peremajaan Fusarium sp. untuk Uji
Antagonis

5.6.1. Pemurnian Trichoderma spp. hasil isolasi tanah

Pemurnian dilakukan apabila hasil isolasi tumbuh Trichoderma spp. namun
dalam media tersebut tumbuh mikroorganisme lain (terjadi kontaminasi) untuk
mempermudah pengamatan pertumbuhan Trichoderma spp. Langkah-langkah
pemurnian Trichoderma spp. sebagai berikut :
1. Membuka LAF dan menyalakan lampu pada LAF, kemudian menyemprotkan
alkohol 70% dan mengeringkannya menggunakan tisu
2. Mematikan lampu LAF dan menyalakan sinar UV selama 1 jam untuk
menyiapkan LAF dalam kondisi aseptik
3. Mematikan sinar UV dan menyiapkan media dalam cawan petri, nyala api
bunsen, jarum ose dan alkohol 70%
4. Mengambil koloni Trichoderma spp. pada media hasil isolasi tanah dan
menumbuhkannya pada media dalam cawan petri menggunakan ose (Gambar
5.11.)
5. Mengamati pertumbuhannya hingga muncul isolat murni Trichoderma spp.
(Gambar 5.12abc)
5.6.2. Peremajaan Fusarium oxysporum
Peremajaan isolat Fusarium oxysporum milik BBPPTP Surabaya dilakukan
untuk persiapan uji antagonisme/ daya hambat Trichoderma spp. pada Fusarium
oxysporum. Langkah-langkah peremajaan Fusarium oxysporum sebagai berikut :
1. Membuka LAF dan menyalakan lampu pada LAF, kemudian menyemprotkan
alkohol 70% dan mengeringkannya menggunakan tisu
2. Mematikan lampu LAF dan menyalakan sinar UV selama 1 jam untuk
menyiapkan LAF dalam kondisi aseptik
3. Mematikan sinar UV dan menyiapkan media dalam cawan petri, nyala api
bunsen, jarum ose dan alkohol 70%.
4. Mengambil koloni Fusarium oxysporum pada media miring isolat milik
BBPPTP Surabaya dan menumbuhkannya pada media dalam cawan petri
menggunakan ose (Gambar 5.11)
 35

5. Mengamati pertumbuhannya hingga muncul isolat murni Fusarium oxysporum

(Gambar 5.12d)

Gambar 5.10. Pemurnian Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman

Perkebunan

Gambar 5.11. Peremajaan Isolat Fusarium oxysporum milik BBPPTP Surabaya

 36

a b

c d

Gambar 5.12. Hasil Pemurnian Trichoderma spp. pada

isolasi tanah tanaman perkebunan (a)
kakao (b) cengkeh (c) kopi (d) Hasil
peremajaan Fusarium oxysporum milik
BBPPTP Surabaya

5.7. Pelaksanaan uji antagonis antara Trichoderma spp. dan Fusarium

oxysporum

1. Menyiapkan cawan petri hasil plating media PDA dan memberi tanda pada
bagian bawah cawan petri sesuai dengan gambar berikut (Gambar 5.13a) :
Perlakuan Kontrol

Keterangan : A = Antagonis (Trichoderma spp.), P = Patogen (Fusarium

oxysporum)
 37

2. Mengambil isolat Trichoderma spp. yang telah siap untuk diuji antagoniskan
dengan diameter 0,5 cm menggunakan bor gabus (Gambar 5.13b)
3. Meletakkan hasil plong jamur Trichoderma spp. pada media PDA dengan jarak
2 cm dari tepi petridish (Tanda A)
4. Mengambil isolat F. oxysporum yang sudah siap untuk diuji antagoniskan
dengan diameter 0,5 cm menggunakan bor gabus
5. Meletakan potongan jamur F.oxysporum pada media PDA dengan jarak 2 cm
dari tepi petridish (tanda P)
6. Mengulangi langkah 3 dan 4 pada cawan petri berisi media PDA yang berbeda
sebagai kontrol (3 cawan petri untuk isolat Trichoderma spp., 3 cawan petri
untuk isolat Fusarium oxysporum, dan 3 cawan petri untuk antagonis
Trichoderma spp. dengan Fusarium oxysporum)
7. Melakukan langkah 3 hingga 6 untuk masing-masing isolat. Sehingga
didapatkan 3 ulangan antagonis pada setiap isolat
8. Mengamati pertumbuhan koloni masing-masing jamur hingga terjadi kontak
antara jamur antagonis dan patogen selama 7 hari
9. Mengukur jari-jari koloni jamur patogen pada cawan petri perlakuan (patogen
dengan antagonis) dan kontrol (patogen tanpa antagonis)
10. Menghitung persentase penghambatan dengan rumus sebagai berikut:
(𝑑1−𝑑2)
Z= x 100 %
𝑑1

Keterangan :
Z = persentase penghambatan
R1 = diameter patogen tanpa antagonis (kontrol)
R2 = diameter patogen dengan antagonis (perlakuan)
 38

Gambar 5.13. Persiapan uji antagonis antara Trichoderma spp. dan Fusarium
oxysporum (a) Memberi garis 2 cm dari tepi kanan dan kiri untuk
uji antagonis dengan metode dual culture (b) Menginokulasikan
Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum

a b c

Gambar 5.14. Hasil uji antagonisme antara Trichoderma spp. dan

Fusarium oxysporum pada tanaman (a) Kakao (b) Kopi (c) Cengkeh
 39

5.8. Perhitungan kerapatan spora Trichoderma sp. dan Fusarium oxysporum

1. Melakukan pemanenan Tricoderma sp. atau Fusarium oxysporum dengan cara

memberikan 10 ml aquadest dan memasukannya pada cawan petri yang berisi
isolat Trichoderma spp. atau Fusarium oxysporum dan memoles dengan
menggunakan kuas atau ose pada permukaan media (Gambar 5.15.)
2. Memindahkan hasil panen pada cawan petri lalu memvorteks selama 3 menit
(100 atau stok), mengulangi hal tersebut pada test tube berikutnya dengan
mengisi aquadest pada test tube sebanyak 9 ml dan memasukan 1 ml dari hasil
stok pada test tube berikutnya (pengenceran 10-1), mengulangi hal tersebut
hingga sampai pengenceran 10-3
3. Menyiapkan Haemocytometer tipe Neubauer dan meletakkannya pada meja
benda mikroskop. Menutup dengan cover glass
4. Mengambil suspensi spora sebanyak 0,2 ml pada pengenceran 10-2
menggunakan jarum suntik
5. Mengamati dengan perbesaran 40x, untuk mendapatkan bidang hitung pada
Haemocytometer (Gambar 5.16a)
6. Memindahkan suspensi spora secara perlahan pada bidang hitung dengan jarum
suntik melalui 2 sisi Haemocytometer hingga memenuhi kanal kemudian
mendiamkan agar posisi stabil
7. Memfokuskan spora pada bidang hitung
8. Menghitung jumlah spora yang terdapat pada kotak hitung (a+b+c+d+e) dengan
perbesaran 40x dengan menggunakan hand counter dan mencatat hasil
kerapatan spora pada bidang a, b, c, d dan e. Melakukan langkah yang sama
untuk perhitungan spora Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum (5.16c dan
d)
9. Spora yang terletak pada garis batas kotak hitung hanya dihitung pada sisi kiri
dan atas kotak hitung tersebut
10. Mengulangi langkah 8 pada bidang hitung 2. Bidang hitung 1 dan 2 dianggap
sebagai 1 ulangan. Setiap isolat Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum
diulang sebanyak 3 kali
11. Membersihkan Haemocytometer dengan alkohol 70% dan tisu
 40

12. Mengulangi langkah ke 4 untuk mencari 3 ulangan yang selisihnya tidak lebih
dari 10, baik antar kotak, bidang, dan ulangan
13. Menghitung jumlah spora/ml setelah diketahui banyaknya spora pada kotak
perhitungan dengan rumus sebagai berikut :
𝑥
𝑆= × 103
𝐿 × 𝑡 × 𝑑
Keterangan :
S : jumlah spora/ml
X : jumlah spora yang dihitung
L : luas kotak hitung (0,04 x 5 = 0,2 mm2)
t : kedalaman bidang hitung (0,1mm)
d : faktor pengenceran
103 : volume suspensi yang dihitung (1 ml = 103 mm3)
14. Menghitung rata-rata jumlah spora pada kedua ulangan
Perhitungan dilakukan dengan tujuan untuk mengetahui produksi spora
masing-masing isolat Trichoderma spp. hasil eksplorasi tanah tanaman kakao, kopi,
dan cengkeh. Untuk megetahui teknik perhitungan spora menggunakan
haemocytometer tipe neubauer chamber dapat dilihat pada gambar 5.14a dan 5.14b.

a b
Gambar 5.15. Teknik Perhitungan kerapatan spora menggunakan alat haemocytometer.
(a) cara menyuntikan suspensi pada haemocytometer tipe neubauer
chamber, (b) teknik diagonal sampling yang digunakan dalam acuan
pengamatan
 41

Gambar 5.16. Pemanenan Trichoderma spp.

dan Fusarium oxysporum
untuk perhitungan kerapatan
spora dan viabilitas spora

a
a
b
a
c

d
a
a b e
a

a a a

c d

Gambar 5.17. Perhitungan kerapatan spora menggunakan haemocytometer (a)

Mencari bidang hitung pada haemocytomer (b) Bidang hitung yang
digunakan yaitu a, b, c, d, dan e (c) Spora Fusarium oxysporum (d)
Spora Trichoderma spp.
 42

5.9. Perhitungan Viabilitas Trichoderma spp.

1. Menyiapkan media PDA pada cawan petri
2. Memotong media PDA menggunakan bor gabus berukuran diameter 0,5 cm
3. Meletakan hasil plong media PDA menggunakan jarum ose diatas gelas benda.
Setiap gelas benda berisi 3 media PDA sebagai ulangan untuk satu isolat
Trichoderma spp, melakukan langkah yang sama untuk isolat Trichoderma spp.
4. Meneteskan suspensi spora hasil pengenceran 10-2 sebanyak 1 tetes dengan
menggunakan jarum suntik 1 ml pada masing
5. Menutup meddia PDA dengan menggunakan cover glass.
6. Menyiapkan petridish yang didalamnya telah diisi tisu yang telah disemprot
aquadest. Melipat tisu tersebut dan menaruhnya pada bagian dalam disebelah
pinggir petridish
7. Meletakan gelas benda yang telah berisi media PDA ke dalam petridish dan
inkubasikan antara 16 – 18 jam (Gambar 5.17a)
8. Mengamati spora yang berkecambah dan tidak menggunakan mikroskop pada
perbesaran 10x40 (Gambar 5.17b)
9. Mengitung daya kecambah spora dengan rumus sebagai berikut :
𝑗𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑠𝑝𝑜𝑟𝑎 𝑏𝑒𝑟𝑘𝑒𝑐𝑎𝑚𝑏𝑎ℎ
10. Viabilitas = × 100%
𝑡𝑜𝑡𝑎𝑙 𝑠𝑝𝑜𝑟𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑎𝑚𝑎𝑡𝑖

11. Mengulangi langkah 9-10 untuk kedua potongan media yang lain
12. Menghitung rata-rata viabilitas spora dari ketiga potongan media tersebut

a b

Gambar 5.18. Uji viabilitas spora Trichoderma spp. (a) Menginkubasikan petri
untuk perhitungan viabilitas spora selama 18 jam (b) Pengamatan
dan perhitungan viabilitas spora secara mikroskopis
 43

a b c

Gambar 5.19. Viabilitas spora Trichoderma spp. pada tanah tanaman (a) Kakao (b)
Kopi (c) Cengkeh dengan perbesaran 10x40

Gambar 5.20. Viabilitas spora Fusarium oxysporum dengan perbesaran 10x40

5.10. Hasil

5.10.1. Karakterisasi Trichoderma spp. berdasarkan kerapatan spora

Trichoderma spp.
Tabel 5.1. Kerapatan Spora Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman
Perkebunan
Isolat Kerapatan Spora
No
Komoditas Asal (108 spora/ml)
1 Cengkeh Kec. Sawahan, Kab. Nganjuk 1,07
2 Kakao Wonosalam 2,20
3 Kopi Probolinggo 4,88
 44

Kerapatan Spora (108 spora/ml)

6.00
5.00
4.00 4.88

3.00
2.00
2.20
1.00
1.07
0.00
Cengkeh Kakao Kopi

Gambar 5.21. Grafik Kerapatan Spora Trichoderma spp.

pada Tanah Tanaman Perkebunan

5.10.2. Karakterisasi Trichoderma spp. berdasarkan viabilitas spora

Trichoderma spp.

Tabel 5.2. Viabilitas Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman Perkebunan

Isolat Viabilitas Spora

No
Komoditas Asal (%)

1 Cengkeh Kec. Sawahan, Kab. Nganjuk 84,33

2 Kakao Wonosalam 88

3 Kopi Probolinggo 99

Viabilitas Spora (%)

105
100
95 99

90
85 88
80 84.33

75
Cengkeh Kakao Kopi
Gambar 5.22. Grafik Viabilitas spora Trichoderma spp.
pada sampel tanah tanaman perkebunan
 45

5.10.3. Karakterisasi Trichoderma spp. berdasarkan antagonismenya

terhadap Fusarium oxysporum

Tabel 5.3. Antagonisme Trichoderma spp. Hasil Isolasi Tanah Tanaman

Perkebunan
Isolat Rata-rata penghambatan
Komoditas Asal (%)
Cengkeh Kec. Sawahan, Kab. Nganjuk 52,38
Kakao Wonosalam 58,85
Kopi Probolinggo 77,78

Daya Hambat (%)

100.00
80.00
77.78
60.00
58.85
40.00 52.38
20.00
0.00
Cengkeh Kakao Kopi

Gambar 5.23. Grafik Uji Antagonis Trichoderma spp.

pada Fusarium oxysporum
 VI. PEMBAHASAN

Kegiatan kuliah kerja profesi (KKP) tentang karakterisasi Trichoderma spp.

hasil eksplorasi tanah tanaman perkebunan, yaitu tanah tanaman cengkeh, kakao,
dan kopi bertujuan untuk mengaplikasikan ilmu yang didapatkan selama kuliah
pada instansi BBPPTP Surabaya. Kegiatan KKP dilaksanakan di laboratorium
mikologi, BBPPTP Surabaya. Kegiatan yang telah dilaksanakan selama KKP
dibandingkan dengan standar pelaksanaan kerja di laboratorium. Standar yang
menjadi acuan dapat berskala nasional maupun internasional. Standar Nasional
Indonesia (SNI) merupakan standar yang digunakan pada skala nasional, sedangkan
International Organization for Standardization (ISO) untuk standar berskala
internasional.

Karakterisasi isolat Trichoderma spp. merupakan serangkaian kegiatan yang

sistematis dan bersifat aseptik. Karena dalam setiap kegiatannya dilaksanakan
secara berurutan dan sebagian besar dilakukan di Laminar Air Flow (LAF) untuk
meminimalisir terjadinya kontaminasi. Kegiatan karakterisasi Trichoderma spp.
terdiri atas sterilisasi, pembuatan media PDA, pengenceran, isolasi tanah, uji
kualitas spora (kerapatan dan viabilitas spora), dan antagonisme spora Trichoderma
spp. pada Fusarium oxysporum.

6.1. Sterilisasi

Alat dan bahan yang digunakan harus dalam keadaan steril sehingga sebelum
digunakan, alat dan bahan harus melewati proses sterilisasi terlebih dahulu. Hal ini
bertujuan untuk meminimalisir tumbuhnya kontaminan. Alat dan bahan sebelum
disterilisasi, dibungkus menggunakan kertas dan kapas. Cawan petri dibungkus
menggunakan kertas dengan bagian dalam halaman kertas yang berwarna putih,
tidak terdapat tulisan bertinta. Sedangkan alat yang berisi media maupun alat yang
memiliki mulut botol disumbat menggunakan kapas dan dibungkus dengan kertas
atau aluminium foil.

46
 47

Sterilisasi alat dan bahan menggunakan autoklaf hyrayama tipe HVE-50

kapasitas 110 liter atau cukup untuk ± 300 alat dengan mode yang dapat
disesuaikan. Mode agar untuk sterilisasi media agar, solid untuk alat maupun media
padat, dan liquid untuk cairan. Sebelum memulai proses sterilisasi, wajib mengecek
kondisi air yang terdapat pada autoklaf. Kuantitas air yang kurang dari batas
minimal dapat mengganggu proses sterilisasi, karena sterilisasi menggunakan
autoklaf termasuk sterilisasi basah sehingga air harus ditambahkan hingga
mencapai garis yang terdapat pada autoklaf.

Sterilisasi menggunakan autoklaf merupakan jenis sterilisasi basah dengan

prinsip kerja berupa tekanan uap sebesar 1,5 atm pada suhu 121oC selama ± 15
menit. Sterilisasi alat dilakukan terlebih dahulu sebelum seluruh kegiatan
karakterisasi Trichoderma spp. pada tanah hasil eksplorasi tim laboratorium
proteksi BBPPTP Surabaya. Sedangkan sterilisasi bahan dilakukan setelah media
PDA dibuat. Kegiatan sterilisasi yang dilakukan selama KKP telah memenuhi
standar yang ditetapkan oleh ISO 7218 : 2007 tentang persyaratan umum dan
panduan untuk pemeriksaan mikrobiologi. Karena suhu, tekanan, lama proses
sterilisasi yang dilakukan selama KKP sesuai dengan kegiatan sterilisasi alat dan
bahan yang tercantum pada ISO 7218 : 2007.

6.2. Pembuatan media PDA

Media PDA merupakan media alternatif untuk menumbuhkan mikroba,

khususnya jamur. Pembuatan media Potato Dextrose Agar (PDA) sebagai media
pertumbuhan Trichoderma spp. komposisinya telah diatur dalam ISO 16000-17:
2018. Namun, komposisi yang diatur dalam ISO adalah media non instan
sedangkan media yang digunakan selama KKP adalah PDA instan. Komposisi
bahan yang tertera pada kemasan adalah 200 gram ekstrak kentang, 20 gram
dekstrose, dan 15 gram agar dalam 1L. Untuk membuat 1 resep media PDA
dilakukan dengan cara melarutkan 39 gram bubuk PDA instan pada 1000 ml
aquadest. Hal ini sesuai dengan petunjuk penggunaan yang tertera pada kemasan.
Kemudian memanaskan media diatas hot plate dan mengaduknya menggunakan
 48

spatula hingga mengental dan menuangnya pada erlenmeyer untuk sterilisasi bahan
menggunakan autoklaf.

6.3. Pengenceran bertingkat

Pengenceran bertingkat merupakan tahap yang dilakukan sebelum dilakukan

isolasi tanah tanaman kakao, kopi, dan cengkeh. Wasteson dan Hornes (2009)
menyatakan bahwa pengenceran bertingkat bertujuan untuk memperkecil atau
mengurangi jumlah mikroba yang tersuspensi dalam cairan. Yunita et al. (2015)
mengungkapkan bahwa penentuan besarnya atau banyaknya tingkat pengenceran
tergantung kepada perkiraan jumlah mikroba dalam sampel. Banyaknya jumlah
mikroba yang terdapat pada sampel diindikasikan dengan keruhnya larutan
tersebut. Sehingga semakin keruh larutan, semakin banyak tingkat pengenceran
yang dilakukan untuk mengurangi kepadatan mikroorganisme didalamnya.

Pengenceran bertingkat memiliki perbandingan 1 : 9 untuk sampel dan

pengenceran pertama maupun selanjutnya, sehingga pengenceran berikutnya
mengandung 1/10 sel mikroorganisme dari pengenceran sebelumnya. Pengenceran
bertingkat yang dilakukan selama KKP dilakukan hingga 10-3 dalam kondisi
aseptik. Metode pengenceran bertingkat hingga 10-3 dianggap cukup untuk berbagai
macam kepentingan, seperti isolasi, perhitungan kerapatan spora, viabilitas spora,
dan daya hambat APH pada patogen.

6.4. Isolasi

Isolasi adalah penanaman mikroorganisme yang terdapat di alam dan

menumbuhkannya dalam suatu medium buatan, baik media cair maupun padat.
Prinsip isolasi mikroba adalah memisahkan satu jenis mikroba (mikroba primer)
dengan mikroba lainnya yang berasal dari berbagai macam jenis mikroba (mikroba
sekunder). Isolasi dilakukan secara aseptik didalam laminar air flow (LAF). Metode
yang digunakan adalah metode sebar (spread plate) dengan menanam hasil
pengenceran 10-3 dan 10-2 masing-masing sebanyak 0,2 ml menggunakan spet
kemudian meratakannya dengan batang L.
 49

Hasil isolasi diinkubasikan pada suhu ruang dan diidentifikasi morfologinya

secara makroskopis melalui warna dan bentuk koloni yang tumbuh pada media,
maupun mikroskopis melalui morfologi hifa, spora, dan fialid. Pemurnian
dilakukan apabila tumbuh koloni mikroba yang karakteristiknya diduga
Trichoderma spp. Selain pemurnian, juga dilakukan peremajaan Fusarium
oxysporum milik BBPPTP Surabaya.

6.5. Pemurnian Trichoderma spp. dan Peremajaan Fusarium oxysporum

Pemurnian bertujuan untuk memurnikan Trichoderma spp. hasil isolasi tanah

dari berbagai macam mikroba sekunder yang tumbuh pada media sehingga
didapatkan biakan murni Trichoderma spp. hasil isolasi tanah tanaman kakao, kopi,
dan cengkeh. Isolat Trichoderma spp. yang dimurnikan adalah hasil pengenceran
10-2 karena Trichoderma spp. yang tumbuh lebih banyak dan luas daripada hasil
pengenceran 10-3. Selain isolasi dan pemurniaan Trichoderma spp. untuk uji
kualitas spora (kerapatan dan viabilitas spora), juga dilakukan peremajaan isolat
Fusarium oxysporum milik BBPPTP Surabaya untuk uji daya hambat Trichoderma
spp. terhadap patogen. Cara ini juga digunakan untuk penyimpanan dan
pemeliharaan isolat mikroba yang belum diketahui cara penyimpanan jangka
panjangnya

Pemurnian Fusarium oxysporum milik BBPPTP Surabaya bertujuan untuk

mendapatkan biakan jamur yang aktif. Karena isolat milik BBPTP berumur lebih
dari tiga bulan dan disimpan dalam lemari pendingin sehingga jamur berada dalam
kondisi inaktif. Kondisi jamur yang inaktif kurang optimal untuk produksi enzim,
sehingga dapat mempengaruhi parameter pengamatan, baik kualitas jamur maupun
uji antagonis (Machmud, 2001). Pemurnian dan peremajaan dilakukan secara
aseptik didalam LAF (laminar air flow) dengan kondisi bunsen yang menyala.

Trichoderma spp. pada tanah tanaman kakao, kopi, dan cengkeh yang telah
dimurnikan dan Fusarium oxysporum milik BBPTP Surabaya yang telah
diremajakan diinkubasikan selama 7 hari dan diamati setiap hari. Inkubasi bertujuan
untuk memberikan waktu tumbuh untuk biakan yang ditanam pada media,
 50

pengamatan yang dilakukan setiap hari bertujuan untuk meminimalisir terjadinya

kontaminasi oleh mikroba sekunder.

6.6. Karakterisasi Trichoderma spp.

Parameter penilaian karakteristik spora Trichoderma spp. sebagai APH

adalah kualitas spora dan daya hambatnya terhadap patogen Fusarium oxysporum.
Selain sebagai penilaian karakteristik, uji kualitas spora dan daya hambatnya
terhadap patogen merupakan penilaian mutu APH menurut SNI 8027.3 : 2014 agar
dapat diproduksi secara massal untuk berbagai kepentingan. Isolat Trichoderma
spp. terlebih dahulu digunakan untuk penilaian daya hambat Trichoderma spp. pada
Fusarium oxysporum, kemudian dilakukan pemanenan Trichoderma spp. untuk
perhitungan kerapatan dan viabilitas spora melalui pengenceran bertingkat hingga
10-3.

Hasil pengenceran 10-3 digunakan untuk perhitungan kerapatan spora dan

10-2 untuk perhitungan viabilitas spora. Apabila hasil perhitungan kerapatan spora
hasil pengenceran 10-3 maupun 10-2 adalah 108 spora/ml, berarti kerapatan spora
yang dimaksud adalah kerapatan spora pada biang (100). Sedangkan yang
digunakan untuk perhitungan viabilitas spora adalah 106 spora/ml maka suspensi
yang digunakan adalah hasil pengenceran 10-2. Hal ini merupakan metode
pengembangan yang dilakukan oleh BBPPTP Surabaya agar dicapai keseragaman
antar ahli OPT BBPPTP Surabaya dalam pengujian mutu APH.

6.6.1. Uji kualitas spora

Kualitas spora diukur melalui perhitungan kerapatan dan viabilitas spora.

Perhitungan kerapatan spora bertujuan untuk mengetahui produksi spora dari
masing-masing isolat. Sedangkan perhitungan viabilitas spora bertujuan untuk
mengetahui kemampuan spora berkecambah pada masing-masing isolat.
Hubungan antara perhitungan kerapatan dengan viabilitas spora adalah walaupun
spora yang dihasilkan tinggi, belum tentu spora yang diproduksi memiliki
kemampuan untuk berkecambah, sehingga tidak hanya perhitungan spora saja yang
 51

penting dilakukan tetapi viabilitas spora juga perlu diketahui untuk menentukan
efektivitasnya di lapang.

Mutu Trichoderma spp. sebagai agens pengendali hayati (APH) diatur dalam
SNI 8027.3 : 2014. Standar mutu Trichoderma spp. sebagai APH adalah kerapatan
spora ≥ 106 spora/ml dengan viabilitas spora ≥ 60%. Seluruh isolat Trichoderma
spp. hasil eksplorasi tanah tanaman perkebunan memiliki kualitas melebihi standar
minimal APH yang ditetapkan pada SNI 8027.3 (2014). Hal ini ditunjukkan melalui
hasil perhitungan kerapatan spora isolat cengkeh, kakao, dan kopi berturut-turut
adalah 1.07, 2.22, dan 4,88 (108 spora/ml). Sedangkan untuk viabilitas spora isolat
cengkeh, kakao, dan kopi adalah 84,33%, 88%, dan 99%.

6.6.2. Uji antagonisme atau uji daya hambat Trichoderma spp. dan Fusarium

oxysporum

Uji antagonisme dilakukan dengan menggunakan metode kultur ganda (dual

culture), yaitu menanam biakan Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum pada
media yang sama. Uji antagonisme Trichoderma spp. terhadap patogen
F.oxysporum dilakukan untuk mengetahui efektivitas masing-masing isolat dalam
mengendalikan patogen F.oxysporum secara in vitro. Isolat F. oxysporum yang
digunakan adalah koleksi dari BBPPTP Surabaya dengan kerapatan spora 107
spora/ml dengan viabilitas spora 95%. Selain kualitas spora, nilai antagonism atau
daya hambat merupakan parameter pengujian mutu APH. Nilai antagonism yang
ditetapkan SNI 8027.3 : 2014 adalah ≥ 50%. Hasil uji antagonisme Trichoderma
spp. terhadap patogen F. oxysporum memiliki persentase lebih besar daripada
standar yang ditetapkan. Nilai antagonisme pada tanah cengkeh, kakao, dan kopi
adalah 52,38%, 58,85%, 77,78%. Tingginya nilai antagonisme Trichoderma spp.
disebabkan oleh mekanisme antagonis yang dimiliki oleh APH untuk menekan
kepadatan populasi Fusarium oxysporum.

Antagonisme merupakan kemampuan yang dimiliki oleh APH untuk

menghambat pertumbuhan patogen. Semakin besar daya hambat yang terjadi, maka
semakin tinggi daya antagonis APH tersebut. Perbedaan daya hambat
 52

menggambarkan perbedaan kemampuan dari masing-masing organisme untuk

menghambat pertumbuhan mikrooganisme patogen. Suanda (2016) menyatakan
bahwa perbedaan ini dipengaruhi oleh jenis, jumlah, dan kualitas dari antibiotik
atau zat lain yang dihasilkan Trichoderma spp. yang dapat menghambat
pertumbuhan patogen. Mekanisme antagonis yang dimiliki Trichoderma spp.
sebagai APH adalah kompetisi ruang dan nutrisi, antibiosis, dan parasitisme
(Bukhari dan Safridar, 2018). Namun mekanisme antagonis yang terdapat pada
setiap isolat Trichoderma spp. hasil eksplorasi pada tanah tanaman perkebunan
adalah kompetisi ruang dan nutrisi. Hal ini ditunjukkan pada hari ke-5 pengamatan,
cawan petri telah dipenuhi koloni Trichoderma spp. sehingga Fusarium oxysporum
tidak mampu membentuk koloni lebih luas. Sebagai APH, Trichoderma spp.
memiliki beberapa kelebihan seperti mudah diisolasi, daya adaptasi luas, dapat
tumbuh dengan cepat pada berbagai substrat, cendawan ini juga memiliki kisaran
mikroparasitisme yang luas dan tidak bersifat patogen pada tanaman (HS et al.,
2017).

Isolat Trichoderma spp. pada tanah tanaman kopi asal Probolinggo

menunjukkan hasil yang paling tinggi dalam kerapatan spora, viabilitas spora, dan
persentase antagonisme. Hal ini menunjukkan bahwa isolat tersebut memiliki
efektivitas paling tinggi sebagai APH dalam menekan pertumbuhan Fusarium
oxysporum. Diduga ekosistem pada pertanaman kopi menunjukkan ekosistem
paling optimal untuk pertumbuhan Trichoderma spp.

Syarat tumbuh tanaman kopi adalah kemasaman tanah (pH) 5-7 dan tanaman
kopi tidak menghendaki tanah bersifat basa. Kopi tidak menyukai sinar matahari
langsung dalam jumlah banyak, tetapi menghendaki sinar matahari teratur. Curah
hujan adalah 1500 – 2500 mm per tahun, dengan rata-rata bulan kering 1-3 bulan
dan suhu udara rata‐rata 16‐30 °C. Tinggi lokasi pertanaman kopi arabika berbeda
dengan kopi robusta. Kopi arabika tumbuh optimum mulai 1000 meter diatas
permukaan laut (mdpl). Sedangkan kopi robusta dapat tumbuh kurang dari 1000
mdpl (Ritung et al., 2011). Ekosistem yang terdapat pada pertanaman kopi diduga
paling optimum untuk pertumbuhan Trichoderma spp. Lingkungan yang optimum
 53

untuk pertumbuhan Trichoderma spp. adalah suhu 25-30 oC , pH 3-7, dan

kelembaban 80-90% (Sulistiyono, 2015). Adanya tanaman naungan pada
pertanaman kopi yang berasal dari famili Leguminose turut menambah kebutuhan
hara baik bagi organisme diatas tanah maupun mikroorganisme dibawah tanah
karena dapat memfiksasi N2 di udara melalui simbiosis dengan bakteri Rhizobium
leguminose. Selain itu, seresah kulit kopi mengandung unsur N (Nitrogen), P
(Posfor), Ca (Kalsium) dan K (Kalium), Mg (Magnesium) (Trisilawati dan
Gusmaini, 1999 dalam Z. Berlian, Syarifah, dan Sari, 2015).

Waktu pengambilan sampel tanah merupakan faktor penting yang

mempengaruhi efektivitas APH sebelum diisolasi. Diduga pengambilan sampel
tanah untuk tanaman kakao dan cengkeh lebih awal daripada tanaman kopi,
sehingga mikroba yang terdapat pada tanah kakao dan cengkeh berkurang maupun
menjadi infaktif. Sehingga pada saat Trichoderma spp. pada tanaman kopi diisolasi,
Trichoderma spp. memiliki nilai paling baik dalam hal kualitas maupun aktivitas
antagonisme terhadap Fusarium oxysporum.
 VII. KESIMPULAN DAN SARAN

7.1. Kesimpulan

1. Metode pengujian kualitas spora adalah perhitungan kerapatan dan viabilitas

spora menggunakan suspensi Trichoderma spp. hasil pengenceran 10-2
2. Metode antagonisme Trichoderma spp. dan Fusarium oxysporum adalahi
metode kultur ganda (dual culture)
3. Seluruh isolat Trichoderma spp. memiliki efektivitas melebihi standar yang
ditetapkan SNI 8027.3 : 2014

7.2. Saran

Seluruh isolat Trichoderma spp. hasil eksplorasi memiliki nilai efektivitas

yang tinggi sebagai APH. Sebaiknya, ketiga isolat APH dilanjutkan pada tahap
pembuatan formulasi agar efektif dan mudah diaplikasikan di lapangan bagi petani.

54
 55

DAFTAR PUSTAKA

Al-Sheikh, DR. Abdullah bin Muhammad bin Abdurahman bin Ishaq. (2004) Tafsir
Ibnu Katsir. Jilid 7. Diedit oleh D. Hartono. Surabaya: Pustaka Imam Asy-
Syafi’i.

Ameriana, M. (2008) “Perilaku Petani Sayuran dalam Penggunaan Pestisida Kimia,”

J. Hort, 18(1), Hal. 95–106. doi: 10.21082/Jhort.V18n1.2008.P%P.

Berlian, Intan, Sindu Anarqi , dan Endang Pudjihartati. (2016) “Isolasi , Identifikasi
Dan Antagonisme In Vitro Isolat,” Jurnal Penelitian Karet, 34(2), Hal. 201–212.

Berlian, Zainal, Syarifah dan Devi Selvia Sari. (2015) “Pengaruh Pemberian Limbah
Kulit Kopi (Coffea robusta L.) Terhadap Pertumbuhan Cabai Keriting
(Capsicum annum L.),” Biota, 1(1), Hal. 22–32.

Budiarti, Sri Wahyuni dan S.M. Widyastuti. (2011) “Aktifitas Antifungal Β -1 , 3-

Glukanase Trichoderma reesei pada Fungi Akar Ganoderma philippii,”
Widyariset, 14(2), Hal. 455–460.

Bukhari dan Nuryulsen Safridar. (2018) “Pengaruh Pemberian Trichoderma sp. untuk
Mengendalikan Penyakit Layu Fusarium pada Beberapa Jenis Pisang di Lahan
yang telah Terinfeksi,” Jurnal Ilmiah Pertanian, 15(1), Hal. 23–34.

Cahyaningrum, Hermawati, Nur Prihatiningsih dan Soedarmono. (2017) “Intensitas

dan Luas Serangan Beberapa Isolat Fusarium oxysporum f.sp . Zingiberi pada
Jahe Gajah (The Disease Intensity And Level Of Attack of Fusarium oxysporum
f.sp. Zingiberi on Ginger,” Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia, 21(1), Hal.
16–22. doi: 10.22146/Jpti.17743.

Darmawan, Edy. (2016) Eksplorasi Jamur Entomopatogen Beauveria bassiana,

Metarrhizium Anisopliae, dan Jamur Antagonis Trichoderma sp. pada Beberapa
Sampel Tanah Pertanaman Tembakau. Universitas Negeri Jember.

Sulistiyono, Fitria Dewi. (2015) “Karakteristik Fisiologi Empat Antagonis Isolat

Trichoderma sp. sebagai Agensia Hayati,” Jurnal Sains Natural Universitas
Nusa Bangsa, 5(1), Hal. 24–29.
 56
Fourie G., E.T. Steenkamp, R.C. Ploetz, T.R. Gordon, A. Viljoen. 2011. Current Status
Of The Taxonomic Position Of Fusarium Oxysporum Formae Specialis Cubense
Within The Fusarium Oxysporum Complex. Infection, Genetics And Evolution
11 (2011) 533–542. Doi:10.1016/J.Meegid.2011.01.012.

Hartanto, Shinta dan Eti Heni K. (2016) “Uji Antagonis 5 Isolat Trichoderma Dari
Rizosfer Pinus Sp Terhadap Pertumbuhan Cendawan Colletotricum sp. Penyebab
Penyakit Antraknos Pada Cabai Secara In Vitro,” In Prosiding Symbion
(Symposium On Biology Education), Prodi Pendidikan Biologi, FKIP,
Universitas Ahmad Dahlan, Hal. 205–212.

Herliyana, Elis Nina, Ratna Jamilah, dan Darmono Taniwiryono. (2013) “Uji In-Vitro
Pengendalian Hayati oleh Trichoderma spp. terhadap Ganoderma yang
Menyerang Sengon,” Jurnal Silvikultur Tropika, 04(3), Hal. 190–195.

HS, Gusnawaty, Muhammad Taufik, La Ode Santiaji Bande, dan Agus Asis Jurusan.
(2017) “Efektivitas Beberapa Media untuk Perbanyakan Agens Hayati
Trichoderma sp.,” 17(1), Hal. 70–76.

Ikhsan, Muhammad. (2013) “Hubungan Antara Tingkat Kekerasan dan Waktu

Pemecahan Daging Buah Kakao (Theobroma cacao L.).”

Jamilah, Ratna. (2011) Potensi Trichoderma Harzianum (T38) Dan Trichoderma

Pseudokoningii (T39) Sebagai Antagonis Terhadap Ganoderma Sp. Penyebab
Penyakit Akar Pada Pohon Sengon (Paraserianthes Falcataria (L) Nielsen.),
Institut Pertanian Bogor. Skripsi. Departemen Silvikultur Fakultas Kehutanan
Institut Pertanian Bogor. Bogor

Juliana, Umrah, dan Asrul. (2017) “Pertumbuhan Miselium Trichoderma sp. pada
Limbah Cair Tempe dan Limbah Air Kelapa,” Biocelebes, 12(2), Hal. 52–59.

Hasanah, Fitriana Uswatun. (2012) Evaluasi Kesesuaian Lahan Untuk Tanaman

Cengkeh (Eugenia aromatica L.) di Kecamatan Jatinom Kabupaten Klaten.
Skripsi. Fakultas Geografi Universitas Muhammadiyah Surakarta. Surakarta

Kiptantiyawati, Nuri. (2016) Pertumbuhan Tanaman Cengkeh (Syzygium aromaticum

(L.) Merr Perr) Belum Menghasilkan pada Berbagai Dosis Pupuk Organik dan
Intensitas Naungan, Institut Pertanian Bogor Press. Skripsi. Departemen
Agronomi dan Hortikultura Fakultas Pertanian Institut Pertanian Bogor.
Bogor.doi: 10.29244/Agrob.3.1.87-94.
 57
Machmud, Muhammad. (2001) “Teknik Penyimpanan dan Pemeliharaan Mikroba,”
Buletin Agrobio, 4(1), Hal. 24–32.

Mona, Khaleil, El-Mougith, Abdou, Hashem, Halim and Lokma Noha. (2016)
“Biocontrol Potential Of Entomopathogenic Fungus, Trichoderma hamatum
Against The Cotton Aphid, Aphis Gossypii,” IOSR Journal Of Environmental
Science Ver. II, 10(5), Hal. 2319–2399. Doi: 10.9790/2402-105021120.

Nurzannah, Sri Endah, Lisnawita dan Darma Bakti. (2014) “Potensi Jamur Endofit
Asal Cabai Sebagai Agens Hayati Untuk Mengendalikan Layu Fusarium
(Fusarium Oxysporum) Pada Cabai Dan Interaksinya,” Jurnal Online
Agroekoteknologi, 2(3), Hal. 1230–1238. Tersedia Pada: Neliti.Com.

Prastowo, B., E. Karmawati, Rubijo, Siswanto, C. Indrawanto Dan S. J. Munarso. 2010.

Budidaya dan Pascapanen Kopi. Pusat Penelitian dan Pengembangan Per-
Kebunan. Bogor

Putra, Yusuf Setiawan. (2015) Pengelolaan Pembibitan Kopi Arabika (Coffea arabica
L.) Di Kebun Kalisat Jampit, Ptpn XII, Bondowoso, Jawa Timur. Skripsi.
Departemen Agronomi dan Hortikultura Fakultas Pertanian Institut Pertanian
Bogor. Bogor.

Rahmani, Ikhsan Nur, Danang Lelono, Kuwat Triyana. (2018) “Klasifikasi Kakao
Berbasis e-nose dengan Metode Neuro Fuzzy,” Indonesian Journal of
Electronics and Instrumentation Systems (IJEIS), 8(1), Hal. 49–60. doi:
10.22146/Ijeis.25512.

Ritung, S. et al. (2011) Petunjuk Teknis Evaluasi Lahan Untuk Komoditas Pertanian.
Revisi 2011. Bogor: Balai Besar Penelitian dan Pengembangan Sumberdaya
Lahan Pertanian. doi: 10.1039/C6qm00199h.

Rulinggar, Nia, Mujoko, Tri Mujoko dan Indriya Radiyanto. (2016) “Formulasi
Streptomyces sp. dan Trichoderma sp. Berbahan Dasar Media Beras Jagung,
Bekatul, dan Kompos,” 5(1).

Saputri, Eli, Lisnawita dan Mukhtar Iskandar Pinem. (2015) “Enkapsulasi Beberapa
Jenis Trichoderma sp. pada Benih Kedelai untuk Mengendalikan Penyakit
Sclerotium rolfsii Sacc.,” Jurnal Online Agroekoteknologi, 3(3), hal. 1123–1131.
 58
Semangun, H. 2004. Pengantar Ilmu Penyakit Tanaman Pangan Indonesia. Gadjah
Mada University Press. Yogyakarta.

Septiana, Eris. (2015) “Jamur Entomopatogen : Potensi dan Tantangan sebagai

Insektisida Alami terhadap Serangga Perusak Tanaman dan Vektor Penyakit
Manusia,” 1(1), hal. 28–32.

Suanda, I Wayan. (2016) “Karaktrerisasi Morfologis Trichoderma sp. Isolat JB dan

Daya Antagonisme terhadap Patogen Penyebab Rebah Kecambah (Sclerotium
rolfsii Sacc.) pada Tanaman Tomat,” in Prosiding Seminar Nasional MIPA 2016,
hal. 251–257.

Suciatmih, Titik Kartika dan Sulaeman Yusuf. (2015) “Jamur Entomopatogen dan
Aktivitas Enzim Ekstraselulernya,” Berita Biologi, 2(14), hal. 131–142.

Sutejo, Ade Mahendra, Achmadi Priyatmojo, dan Arif Wibowo. (2008) “Identifikasi
Morfologi Beberapa Spesies Jamur Fusarium,” 14(1), hal. 7–13.

Taufik, Muhammad, Gusnawaty HS., Leni Triana, dan Asniah. (2014) “Karakterisasi
Morfologis Trichoderma spp. Indigenus Sulawesi Tenggara,” Agroteknos, 4(2),
hal. 87–93.

Utami, Muheni Rizki. (2015) Penentuan Bobot Jenis dan Kadar Eugenol Total serta
Kelarutan dalam Etanol dari Minyak Daun Cengkih (Syzygium aromaticum L.).
Tugas Akhir. Program Studi Diploma III Analisis Farmasi dan Makanan Fakultas
Farmasi Universitas Sumatera Utara. Medan

Widyastuti, S. M., Sumardi, dan P. Sumantoro. (2001) “Efektivitas Trichoderma spp.

sebagai Pengendali Hayati terhadap Tiga Patogen Tular Tanah pada Beberapa
Jenis Tanaman Kehutanan,” Jurnal Perlindungan Tanaman Indonesia, hal. 98–
107. doi: 10.22146/JPTI.10072.

Yunita, Merisa, Yusuf Hendrawan, Rini Yulianingsih. (2015) “Analisis Kuantitatif

Mikrobiologi pada Makanan Penerbangan (Aerofood ACS) Garuda Indonesia
Berdasarkan TPC (Total Plate Count) dengan Metode Pour Plate,” Jurnal
Keteknikan Pertanian Tropis dan Biosistem, 3(3), hal. 237–248. Tersedia pada:
https://jkptb.ub.ac.id/index.php/jkptb/article/view/289.
 59
LAMPIRAN

Lampiran 1. Perhitungan Kerapatan Spora Trichoderma spp. pada Tiga

Tanah Tanaman Perkebunan dengan Pengulangan

Kerapatan Spora
Isolat
No (108 spora/ml) Jumlah Rerata
Tanaman Asal I II III

1 Kakao Wonosalam 2,15 2,05 2,40 6,60 2,20

2 Kopi Probolinggo 4,80 4,70 5,15 14,65 4,88
Kec. Sawahan, Kab.
3 Cengkeh 1,05 1,25 0,90 3,20 1,07
Nganjuk

Lampiran 2. Perhitungan Viabilitas spora Trichoderma spp. pada Tiga Tanah

Tanaman Perkebunan dengan Pengulangan

Isolat Viabilitas (%)

No Jumlah Rerata
Tanaman Asal I II III
1 Kakao Wonosalam 89 90 85 264 88,00
2 Kopi Probolinggo 100 97 100 297 99,00
Kec. Sawahan, Kab.
3 Cengkeh 85 80 88 253 84,33
Nganjuk
 60
Lampiran 3. Perhitungan Uji Daya Hambat Trichoderma spp. pada Tiga
Tanah Tanaman Perkebunan dengan Pengulangan
Jari-jari patogen (perlakuan) Jari-jari patogen (kontrol)
Isolat
Hari ke- Hari ke-
Tanaman Asal 1 2 3 4 5 1 2 3 4 5
Kakao Wonosalam 0,43 0,67 1,27 1,47 1,43 0,40 0,87 1,57 1,97 3,48
Kopi Probolinggo 0,30 0,60 1,23 1,83 0,67 0,30 0,60 1,23 1,83 3,00
Kec.
Cengkeh
Sawahan 0,45 0,77 1,27 1,90 1,33 0,45 0,77 1,27 1,90 2,80
Kab.
Nganjuk

Rerata jari patogen hari terakhir (perlakuan)

Kakao 1,43
Kopi 0,67
Cengkeh 1,33

Rerata jari patogen hari terakhir (kontrol)

Kakao 3,48
Kopi 3,00
Cengkeh 2,80

1. Uji Daya Hambat Tanah Cengkeh

(𝑅1 − 𝑅 2)
𝑍𝑐𝑒𝑛𝑔𝑘𝑒ℎ = × 100%
𝑅1

(2,80 − 1,33)
= × 100%
2,80
= 52,38 %
 61
2. Uji Daya Hambat Tanah Kakao

(𝑅1 − 𝑅 2)
𝑍𝑘𝑎𝑘𝑎𝑜 = × 100%
𝑅1

(3,48 − 1,43)
= × 100%
3,48
= 58,85 %

3. Uji Daya Hambat Tanah Cengkeh

(𝑅1 − 𝑅 2)
𝑍𝑘𝑜𝑝𝑖 = × 100%
𝑅1

(3,00 − 0,67)
= × 100%
3,00
= 77,78 %
 62
Lampiran 1. Surat keterangan selesai Kuliah Kerja Profesi (KKP)
 63

Lampiran 2. Kartu bimbingan Kuliah Kerja Profesi (KKP)

 64

Lampiran 3. Kartu Monitoring dan Evaluasi Keaktifan Kuliah Kerja Profesi

(KKP)