LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI FARMASI

UJI AKTIVITAS ANTIMIKROBA

Ai Nurul Azizah (18330104), Dela Indarani (18330106), Dimas Yusuf Atthariq (18330110), Novita
ventiani (18330109), Jihan Luthfiyah (18330135), Ainun Jariah (19330702)

Fakultas Farmasi – Institut Sains dan Teknologi Nasional

Jakarta, juli 2020

ABSTRAK

Mikrobiologi merupakan sebuah cabang dari ilmu biologi yang mempelajari tentang
mikroorganisme terkecil. Mikrorganisme dapat menyebabkan banyak bahaya dan kerusakan. Hal
itu nampak dari kemampuannya menginfeksi manusia, hewan, serta tanaman, menimbulkan
penyakit yang berkisar dari infeksi ringan sampai kepada kematian, Antibiotik adalah zat kimia
yang dihasilkan oleh fungi dan bakteri yang memiliki khasiat mematikan atau menghambat
pertumbuhan kuman, sedangkan toksisitasnya bagi manusia relatif kecil.

Keywords: Uji Aktivitas; praktikum; mikrobiologi

PENDAHULUAN organisme : bakteri, protozoa, virus serta alga

Mikrobiologi merupakan sebuah cabang dan cendawan mikroskopis.
dari ilmu biologi yang mempelajari tentang Mikrorganisme dapat menyebabkan
mikroorganisme terkecil. Mikrobiologi banyak bahaya dan kerusakan. Hal itu
dimulai sejak ditemukannya mikroskop dan nampak dari kemampuannya menginfeksi
menjadi bidang yang sangat penting. manusia, hewan, serta tanaman, menimbulkan
Mikrobiologi berasal dari bahasa Yunani yang penyakit yang berkisar dari infeksi ringan
memiliki arti sebagai Mikros (kecil), bios sampai kepada kematian. Mikroorganisme
(hidup) dan logos (pengetahuan), Dunia dapat mencemari makanan, dan menimbulkan
mikroorganisme terdiri dari lima kelompok perubahan kimiawi di dalam makanan
tersebut dan dapat menyebabkan makanan Kadang – kadang disebut mikroba atau dalam
tersebut bahasa sehari-hari, mikroba (Volk, 1993).
Antibakteri atau antimikroba merupakan Antimikroba adalah obat yang digunakan
bahan yang dapat membunuh atau untuk memberantas infeksi mikroba pada
menghambat aktivitas mikroorganisme manusia. Sedangkan antibiotika adalah
dengan bermacam – macam cara. Senyawa senyawa kimia yang dihasilkan oleh
antimikroba yang terdiri ataus beberapa mikroorganisme (khususnya dihasilkan oleh
kelompok berdasarkan mekanisme daya fungi) atau dihasilkan secara sintetik yang
kerjanya atau tujuan penggunaannya. Bahan dapat membunuh atau menghambat
antimikroba dapat secara fisik atau kimia dan perkembangan bakteri dan organisme lain.
berdasarkan peruntukannya dapat berupa Secara garis besar antimikroba dibagi menjadi
desinfektan, antiseptic, sanitizer dan dua jenis yaitu yang membunuh kuman
sebagainya (bakterisid) dan yang hanya mengambat
Antimikroba pertama kali ditemukan oleh pertumbuhan (bakteriostatik).
Alexander Fleming pada tahun 1929, yang Antibiotik adalah zat kimia yang
secara tidak sengaja menemukan suatu zat dihasilkan oleh fungi dan bakteri yang
antibakteri yang sangat efektif yaitu penisilin. memiliki khasiat mematikan atau
Penisilin ini pertama kali dipakai dalam ilmu menghambat pertumbuhan kuman, sedangkan
kedokteran pada tahun 1939 oleh Chain dan toksisitasnya bagi manusia relatif kecil.
Florey. Antibiotik ialah suatu bahan kimia Bersamaan dengan peningkatan penggunaan
yang dikeluarkan oleh jasadrenik / hasil antibiotik berbagai permasalahan dapat terjadi
sintesis semi – sintesis seperti halnya pemakaian antibiotik yang
tidak rasional, peningkatan resistensi
KAJIAN PUSTAKA antibiotik.
Mikrobiologi merupakan suatu istilah luas Desinfektar merupakan zat kimia yang
yang berarti studi mengenai organisme hidup digunakan untuk membunuh mikroba patogen
yang terlalu kecil untuk dapat dilihat dengan pada benda – benda, misalnya pada lantai
mata telanjang. Mikrobiologi mencakup studi ruangan, meja operasi dan sebagainya
tentang bakteri (bakteriologi), virus(virulogi),
khamir dan jamur (miko-logi), protozoa ALAT DAN BAHAN
(protozoologi), beberapa ganggang dan Alat-alat yang digunakan dalam praktikum
beberapa bentuk kehidupan yang baik tidak ini yaitu pipet 1ml, cawan petri, kertas
sesuai untuk dimasukkan kedalam kelompok cakram/ saring steril, spreader drigalsky,
tersebut. Bentuk kehidupan yang kecil seperti pinset, dan spirtus. Bahan-bahan yang
itu juga disebut dengan mikroorganisme. digunakan dalam uji aktivitas antimikroba
ialah antibiotic-antiseptik dan desinfektan,
PCA (Plate Count Agar), alcohol 70%, 0,25 ml larutan desinfektan, 0,25 ml
aquadest, bakteri E.coli, dan S.aureus. larutan antiseptic, 0,25 ml antibiotic,
METODELOGI dan 0,25 ml aquadest steril.
5. Inkubasi pada suhu kamar selama 24-48
A. Metode Difusi dengan Kertas Saring jam.
1. Inokulasikan suspense biakan B.subtilis, 6. Amati daerah hambat pertumbuhan
E.coli, dan S.aureus msing-masing di baketri dan ukur diameter zona bening.
atas permukaan agar pada ketiga cawan
petri, masing-masing sebanyak 0,1 ml HASIL DAN PEMBAHASAN
dan sebarkan dengan menggunakan
spreader drigalsky. Hasil
2. Pinset dipijar diatas nyala api spirtus, 1. Tabel diameter zona hambat
ambil kertas saring steril dengan pinset desinfektan (mm)
satu persatu. Celupkan masing masing
Ulang Bakteri Wipol Porstex Fenol Aqua
kertas saring kedalam aquadest seteril,
dest
larutan disinfektan, antiseptic,
dan 1 E.coli 12 16 18,7 0
antibiotic. Biarkan mengering kemudian 2 E.coli 11 14 18,3 0
3 E.coli 12,4 16,5 19,0 0
letakan pada cawan petri yang sama 4 E.coli 11,5 14,8 19,2 0
dengan jarak tertentu. Rata- 11,72 15,3 18,8 0
3. Inkubasi pada suhu kamar selama 24-48Rata
1 S.aureu 15,1 20,1 24 0
jam. Amati daerah hambat pertumbuhan
s
bakteri dan ukur diameter zona bening
2 S.aureu 15,5 20,5 24,7 0
dengan jangka sorong.
s
3 S.aureu 15,0 20,3 24,4 0
B. Metode Difusi dengan Silinder Kaca s
1. Media agar dicairkan, didinginkan 4 S.aureu 15,8 20,6 24,6 0

sampai suhu kurang lebih 40oC. s

Rata- 15,35 20,3 24,4 0
2. Teteskan 0,1 ml suspense inoculum
Rata
kedalam cawan petri steril.
3. Tuang agar secara aspetik ke dalam 2. Tabel diameter zona hambat antiseptic
setiap cawan petri yang sudah ditetesi. (mm)
4. Letakan 4 buah silinder kaca steril
Ula Bakt Lifeb An Det Aquad
diatas medium agar dengan
ng eri uoy tis tol est
menggunakan pinset steril. Masukan ke
1 E.coli 12,4 14, 16,6 0
masing masing silinder kaca dengan
6
menggunakan pipet, ukur sebanyak : 2 E.coli 12,6 14, 16,8 0
 0 ure
3 E.coli 12,0 14, 15,9 0
us
6 2 S.a 20,3 11,9 16,7 0
4 E.coli 12,8 14, 16,3 0
ure
2
us
Rat 12,45 14, 16,4
3 S.a 20,0 11,8 16,9 0
a- 3
ure
Rat
us
a 4 S.a 20,1 12,2 16,6 0
1 S.aur 10,4 13, 17,0 0
ure
eus 9
us
2 S.aur 10,2 13, 16,8 0
Ra 20,15 11,9 16,7
eus 4
ta-
3 S.aur 10,0 13, 16,6 0
Ra
eus 7
4 S.aur 10,3 13, 16,8 0 ta
eus 6
Rat 10,22 13, 16,8 Perhitungan
a- 6
Rumus Pengukuran zona hambat (mm) =
Rat
(a + b ) : 2
a
1. Tabel diameter zona hambat

3. Tabel diameter zona hambat antibiotic disenfektan (mm)

(mm) E.coli
- Wipol : 12+11+12,4+11,5/4 = 11,73 mm
Ul Bak Ciprof Peni Tetra Aqu
- Porstex : 16+14+16,5+14,8/4 = 50,2 mm
an teri loxaci cilin cyclin ades
- Fenol : 18,7+18,3+19,0+19,2/4 = 60,8 mm
g n -G e t
1 E.c 16,8 20,2 12,9 0 S.aureus
oli - Wipol : 15,1+15,5+15,0+15,8/4 = 49,55 mm
2 E.c 16,6 20,0 12,3 0
- Porstex : 20,1+20,5+20,3+20,6/4 = 66,05
oli
mm
3 E.c 16,2 20,4 12,8 0
- Fenol : 24+24,7+24,4+24,6/4 = 79,25 mm
oli
4 E.c 16,4 20,6 12,5 0
oli 2. Tabel diameter zona hambat antiseptic
Ra 16,5 20,3 12,6 (mm)
ta- E.coli
Ra - Lifebouy : 12,4+12,6+12,0+12,8/4 = 40,2
ta mm
1 S.a 20,2 12,0 16,8 0
- Antis : 14,6+14,0+14,6+14,2/4 = 46,75 mm
- Dettol : 16,6+16,8+15,9+16,3/4 = 53,38 mm Senyawa antimikroba terdiri atas beberapa
kelompok berdasarkan mekanisme daya
S.aureus
kerjanya dan tujuan penggunaannya. Bahan
- Lifebouy : 10,4+10,2+10,0+10.3/4 = 33,18
antimikroba dapat berupa desinfektan,
mm
antiseptic, sterilizer, sanitizer, dan sebagainya.
- Antis : 13,9+13,4+13,7+13,6/4 = 44,4 mm
Pada bidang farmasi, bahan antibakteri
- Dettol : 17,0+16,8+16,6+16,8/4 = 54,6 mm
dikenal dengan sebutan antibiotic yakni suatu
substansi kimia yang di produksi oleh
3. Tabel diameter zona hambat antibiotic
mikroba serta bisa menghambat pertumbuhan
(mm)
pada mikroba lain. Senyawa anti bakteri
E.coli
tersebut bisa bekerja sebagai bakteriostatik,
- Ciprofloxacin : 16,8+16,6+16,2+16,4/4 =
bakterilitik dan bakterisidal.
53,7 mm
Wipol dengan kandungan bahan aktif pine
- Penicllin-G : 20,2+20,0+20,4+20,6/4 =
oil yang memiliki banyak senyawa yang aktif
65,75 mm
dapat mengurangi peradangan, meningkatkan
- Tetacycline : 2,9+12,3+12,8+12,5/4 = 41,13
mood melalui aroma yang dihasilkan serta
mm
memiliki kemampuan disenfektan yang
S.aureus
bagus.
- Ciprofloxacin : 20,2+20,3+20,0+20,1/4 =
Fenol berfungsi dalam pembuatan obat-
65,35 mm
obatan (bagian dari produksi aspirin,
- Penicllin-G : 12,0+11,9+11,8+12,2/4 =
pembasmi rumput liar, dan lainnya). Selain
38,75 mm
itu fenol juga berfungsi dalam sintesis
- Tetacycline : 16,8+16,7+16,9+16,6/4 =
senyawa aromatis yang terdapat dalam batu
54,55 mm
bara.
Pembahasan Porstex yang mengandung bahan aktif
asam klorida, asam klorida sendiri pada
Pada praktikum kali ini kami mengamati
produk rumah tangga berguna sebagai seperti
tentang uji aktivitas antimikroba dengan
pembersih porselen. Disini dapat dilihat
tujuan untuk menguji aktivitas antimikroba
perbandingan bahwa desinfektan yang paling
dari bahan-bahan yang diujikan dengan
baik untuk bakteri E.coli (gram negative)
metode difusi dengan kertas saring dan
adalah porstex dan untuk bakteri S.aureus
metode difusi dengan silinder kaca.
(gram positif) ialah fenol.
Antimikroba adalah bahan atau zat yang dapat
Sabun antiseptik mengandung komposisi
membunuh atau menghambat aktivitas
khusus yang berfungsi sebagai antibakteri. Di
mikroorganisme dengan bermacam-macam
dalam sabun, triclosam dan triclocarban
cara.
merupakan zat anti bakteri yang paling sering
ditambahkan. Bahan inilah yang berfungsi
mengurangi jumlah bakteri yang berbahaya
pada kulit. Sabun antiseptic memiliki
kemampuan dalam menghambat pertumbuhan
bakteri, baik bakteri gram positif maupun
gram negative.
Bakteri yang digunakan dalam praktikum
kali ini yaitu E.coli dan S.aureus.
Escherichia coli (E. coli) adalah bakteri
batang gram negatif yang termasuk dalam
golongan Enterobacteriaceae dan bersifat
anaerob fakultatif. E. coli merupakan salah
satu faktor penularan infeksi terutama melalui
jalur fekal-oral.
Staphylococcus aureus (S. aureus) adalah
bakteri yang bersifat komunal dan ada pula
yang bersifat patogen pada manusia. S.
aureus didapatkan secara normal pada nasal
(hidung) 20-50% populasi manusia. S. aureus
masuk ke dalam tubuh manusia melalui luka
(lesi), sistem pencernaan dan kulit.
Diameter daya hambat menunjukkan sifat
dari desinfektan dan antibakteri dengan
beberapa tingkatan yaitu : pada diameter > 20
mm menunjukkan daya hambat sangat kuat,
diameter 10-20 mm menunjukkan daya
hambat kuat, diameter 5-10 menunjukkan
daya hambat cukup (medium), serta diameter
< 5 mm menunjukkan daya hambat lemah.
1. Diameter zona hambat desinfektan
Pada tabel pertama mengamati diameter
zona hambat desinfektan. Desinfektan adalah
bahan kimia yang dapat menghambat
pertumbuhan atau mematikan sel vegetatif
tetapi belum tentu sporanya, digunakan pada
benda tidak hidup. Contohnya meja, keramik,
alat – alat gelas, dll. Sampel yang digunakan
pada tabel 1 yaitu wipol, porstex dan fenol.
Dari hasil sampel wipol rata-rata yang
telah di dapat pada E.coli adalah 11,72 mm
dan S.aureus 15,35 mm. Daya hambat E.coli
lebih kecil dibandingkan dengan S.aureus,
tetapi E.coli dan S.aureus sama-sama
menunjukkan daya hambat yang kuat. Lalu
pada sampel ke dua yaitu portex rata-rata
S.aureus lebih besar dibandingkan dengan
E.coli dengan hasil 20,3 dan 15,3. Daya
hambat yang ditunjukkan kuat. Pada sampel
ketiga yaitu fenol rata-rata S. aureus yang
hasilkan lebih besar dibandingkan E.coli yaitu
24,4 dan 18,8, berdasarkan tingkatannya
S.aureus memiliki daya hambat yang sangat
kuat, sedangkan pada E.coli menunjukkan
daya hambat yang kuat saja.
2. Diameter zona hambat antiseptic
Pada tabel kedua mengamati diameter zona
hambat antiseptic. Antiseptic adalah bahan
kimia yang dapat mencegah atau menghambat
pertumbuhan mikroorganisme. Digunakan
pada tubuh bagian luar atau kulit. Sampel
yang digunakan yaitu lifebuoy, antis, dan
dettol.
Dari hasil sampel lifebuoy rata-rata yang
telah di dapat pada E.coli yaitu 12,45 mm dan
S.aureus 10,22 mm. Dari tingkatan nya bakeri
E.coli dapat menunjukkan daya hambat yang
kuat sedangkan pada S.aureus menunjukkan
daya hambat cukup atau medium. Lalu pada
sampel kedua yaitu antis rata-rata yang di
dapat pada E.coli 14,3 mm dan S. aureus 13,6 bakterinya telah menjadi kebal terhadap obat,
mm. Ini menunjukkan daya hambat yang kuat dimana obat tidak bekerja lagi terhadap
pada kedua bakteri tersebut. Sedangkan pada kuman – kuman tertentu, yang memiliki daya
sampel ketiga yaitu dettol rata-rata yang tahan lebih kuat disebut resisten. Sedangkan
diperoleh pada E.coli 16,4 mm dan S.aureus yang terakhir pada sampel tetracyclin
16,8 mm memiliki daya hambat yang kuat. menghambat sintesis protein. Rata-rata yang
diperoleh pada bakteri E.coli yaitu 12,6 mm
3. Diameter zona hambat antibiotic yang status sensivitasnya adalah resisten, dan
Pada tabel ketiga diameter zona hambat pada bakteri S.aureus 16,7 mm adalah
antibiotic. Antibiotic adalah senyawa yang intermediet.
dihasilkan oleh mikroorganisme tertentu yang
dapat menghambat pertumbuhan atau KESIMPULAN
mematikan mikroorganisme dan digunakan
Berdasarkan kesimpulan diatas dapat
pada jaringan tubuh makhluk hidup dapat
disimpulkan:
berupa oral, iv, atau topikal. Sampel yang
digunakan ialah ciprofloxacin, penicillin-G,  Antimikroba adalah bahan atau zat
dan tetracycline. yang dapat membunuh atau
Sampel pertama pada tabel ketiga adalah menghambat aktivitas
ciprofloxacin. Ciprofloxacin bekerja dengan mikroorganisme dengan bermacam-
menghambat mekanisme kerja yang umum macam cara.
enzim DNA girase yang berperan dalam  Fenol berfungsi dalam pembuatan
pembelahan sel bakteri Dari hasil rata-rata obat-obatan (bagian dari produksi
pada sampel ciprofloxacin pada E.coli aspirin, pembasmi rumput liar, dan
diperoleh 16,5 mm dan pada S. aureus 20,15 lainnya). Fenol juga berfungsi dalam
mm. Status sensivitas ciprofloxacin pada sintesis senyawa aromatis yang
kedua bakteri sama berdasarkan pedoman terdapat dalam batu bara.
Clinical Laboratory Standard International  Perbandingan bahwa desinfektan yang
adalah intermediet atau keadaan dimana obat paling baik untuk bakteri E.coli (gram
hanya dapat menghambat bakteri, tetapi tidak negative) adalah porstex dan untuk
dapat membunuhnya. Lalu pada sampel kedua bakteri S.aureus (gram positif)
yaitu penicillin – G menghambat sintesis atau ialahfenol.
merusak dinding sel bakteri. Rata-rata yang  Escherichia coli (E. coli) adalah
diperoleh pada bakteri E.coli yaitu 20,3 mm bakteri batang gram negatif yang
yang status sensivitasnya adalah intermediet, termasuk dalam golongan
sedangkan pada bakteri S.aureus memperoleh Enterobacteriaceae dan bersifat
rata-rata 11,9 mm yang status aktivitas anaerob fakultatif.
  Staphylococcus aureus (S. aureus)
adalah bakteri yang bersifat komunal
dan ada pula yang bersifat pathogen
pada manusia.
SARAN
Sebaiknya saat praktikum disediakan
bakteri lain, supaya dapat mengetahui bakteri
yang sangat cocok pada beberapa bahan
antimikroba yang digunakan. Dan praktikan
harus memperhatikan dengan benar prosedur
praktikum agar tidak terjadi kesalahan pada
hasil praktikum, serta praktikan harus lebih
teliti saat mengamati warna dan mengukur
zona hambat yang terbentuk.
DAFTAR PUSTAKA
Volk, Wesley., 1993. “ Mikrobiologi Dasar “.
Jakarta : Erlangga.
Lutfi, Ahmad, 2004. “ Kimia Lingkungan,
Mikroorganisme “. Departemen
Pendidikan Nasional : Jakarta.
Peleczar, Michael J, 1986, Dasar-Dasar
Mikrobiologi. UI-Press, Jakarta.
Hadioetomo, Ratna Siri. 1993. Mikrobiologi
Dasar dalam Praktek. Jakarta: Gramedia
Pustaka Utama.
Djide, M.N, 2003. Mikrobiologi Farmasi,
Jurusan Farmasi UNHAS : Makassar.
Dwidjoseputro, 2003. Dasar-dasar
Mikrobiologi. Djambatan : Jakarta.