SPEKTROSKOPI EMISI NYALA

(FLAME EMISSION SPECTROSCOPY)

Prof. Dr. Harrizul Rivai, M.S.

Guru Besar Kimia Farmasi

Fakultas Farmasi, Universutas Andalas

DAFTAR ISI

25.1 Pendahuluan

25.2 Teori

25.3 Instrumentasi

25.3.1 Fotometer Api Sederhana

25.3.2 Fotometer Api Standar Internal

25.3 Aplikasi Spektroskopi Emisi Api dalam analisis Farmasi

25.4.1 Uji Natrium, Kalium, dan Kalsium dalam serum darah dan air

25.4.2 Pengujian Barium, Kalium dan Natrium dalam Kalsium Asetat

25.4.3 Tes Serumpun

25.1 PENDAHULUAN

Garam logam (atau senyawa logam) setelah dilarutkan dalam pelarut yang sesuai ketika dimasukkan
ke dalam nyala api (misalnya: asetilen terbakar dalam oksigen pada 3200 °C), berubah menjadi
uapnya yang pada dasarnya mengandung sebagian besar atom logam. Beberapa atom logam gas
seperti itu biasanya dinaikkan ke tingkat energi tinggi tertentu yang memungkinkannya untuk
memungkinkan emisi ciri karakteristik radiasi logam: misalnya - warna nyala api khas logam yang
sering ditemui dalam senyawa organik sederhana seperti: Na - kuning, Ca - bata-merah; Ba- hijau-
apel. Ini membentuk dasar fundamental yang awalnya disebut Flame Photometry, tetapi belakangan
ini dikenal sebagai Flame Emission Spectroscopy (FES).

Ini sangat jelas bahwa proporsi yang relatif besar dari atom logam gas akan tetap dalam keadaan
dasar yaitu, dalam bentuk tidak tereksitasi. Telah diamati bahwa atom keadaan dasar tersebut akan
menyerap energi radiasi yang berkaitan dengan panjang gelombang sumber dayanya sendiri. Oleh
karena itu, ketika cahaya yang memiliki panjang gelombang resonansi yang sama dibuat melewati
nyala api yang terdiri dari atom-atom tersebut, maka sebagian cahaya harus diserap. Lebih lanjut,
tingkat atau derajat penyerapan akan berbanding lurus dengan jumlah total keadaan dasar yang ada
dalam nyala api. Dan inilah dasar dari Spektroskopi Serapan Atom (SSA).

Spektrum emisi yang diperoleh terdiri dari sejumlah garis yang sebenarnya berasal dari atom atau
ion tereksitasi yang dihasilkan; dan langkah-langkah ini dapat ditampilkan secara diagram seperti
yang ditunjukkan pada Gambar 25.1.

1
 Gambar 25.1: Representasi diagram dari spektrum emisi dari atom atau ion tereksitasi

Berbagai langkah (I hingga VII) pada Gambar 25.1 di atas dijelaskan sebagai berikut:

Langkah-I: Sampel cairan yang mengandung senyawa logam yang sesuai (M+ A–) disedot nyala api,
dengan demikian mengubahnya menjadi uap atau tetesan cairannya,

Langkah-II: Penguapan uap (atau tetesan) menimbulkan residu padat yang sesuai,

Langkah-III: Terjadi penguapan residu padat ke dalam bentuk gasnya,

Langkah-IV: Disosiasi keadaan gas menjadi atom penyusunnya, yaitu: M (gas) + A (gas) berlangsung,
yang awalnya dalam keadaan dasar,

Langkah-V: Eksitasi termal beberapa atom ke tingkat energi masing-masing yang lebih tinggi pada
akhirnya akan mengarah pada kondisi di mana mereka memancarkan energi (emisi
nyala) yang diukur dengan Flame Emission Spectroscopy (FES), dan

Langkah-VI: Penyerapan energi radiasi oleh beberapa atom ke tingkat energi yang lebih tinggi
memungkinkan mereka untuk memancarkan energi (penyerapan atom) yang diukur
dengan Spektroskopi Serapan Atom (SSA).

25.2 TEORI

Prinsip dasar Flame Emission Spectroscopy (FES) dapat dijelaskan ketika sampel cairan yang
mengandung larutan garam logam yang diteliti dimasukkan ke dalam nyala api, langkah-langkah
berikut biasanya berlangsung secara berurutan, yaitu:

(i) pelarut menguap meninggalkan garam padat yang sesuai,

(ii) garam padat mengalami penguapan dan diubah menjadi bentuk gas masing-masing, dan

(iii) disosiasi progresif sebagian atau semua molekul gas menimbulkan atom netral bebas atau
radikal.

Atom netral yang dihasilkan dieksitasi oleh energi panas api yang cukup tidak stabil, dan karenanya
secara instan memancarkan foton dan akhirnya kembali ke keadaan dasar (yaitu, keadaan energi
yang lebih rendah). Spektrum emisi yang dihasilkan yang disebabkan oleh foton yang dipancarkan
dan pengukuran selanjutnya membentuk dasar fundamental FES.

Persamaan Bohr: Jika kita mempertimbangkan dua tingkat energi terkuantisasi misalnya, lebih tinggi
sebagai E2 dan lebih rendah sebagai E1, radiasi yang diberikan selama transisi dari E2 ke E1 dapat
diekspresikan dengan persamaan berikut:

2
 E2 - E1 = h ν ... (a)

dimana, h = konstanta Planck, dan

ν = Frekuensi cahaya yang dipancarkan,

sekarang, frekuensi v dapat didefinisikan sebagai berikut:

ν = c/λ ...(b)

dimana, c = Kecepatan cahaya, dan

λ = Panjang gelombang radiasi yang diserap.

Menggabungkan persamaan (a) dan (b) kita memiliki:

E2 – E1 = hc/λ

λ = hc/E2 – E1 … (c)

Ekspresi (c) adalah persamaan Bohr yang memungkinkan kita menghitung:

• Panjang gelombang radiasi yang dipancarkan yang merupakan karakteristik atom dari unsur
tertentu yang awalnya dipancarkan,
• Panjang gelombang radiasi yang dikeluarkan dari nyala api menunjukkan unsur-unsur yang
mungkin ada dalam nyala api itu, dan
• Intensitas radiasi dapat mengukur jumlah pasti dari unsur-unsur yang ada.

Persamaan Boltzmann: Fraksi atom bebas yang tereksitasi termal, atau dengan kata lain, hubungan
antara keadaan dasar dan kuantum keadaan tereksitasi secara eksklusif diwakili oleh persamaan
Boltzmann yang diberikan di bawah ini:

dimana, N1 = Jumlah atom dalam keadaan tereksitasi (tingkat energi tinggi),

N0 = Jumlah atom keadaan dasar,

g1/g0 = Rasio bobot statistik untuk keadaan dasar dan keadaan tereksitasi,

E = Energi eksitasi (= hυ),

k = Konstanta Boltzmann, dan

T = Suhu (dalam Kelvin).

Dari persamaan (d) dapat dilihat bahwa:

• Fraksi atom yang tereksitasi (N1) hanya bergantung pada suhu nyala (T), dan
• Rasio N1/N0 tergantung pada energi eksitasi (∆E).

Oleh karena itu, fraksi atom yang tereksitasi sangat bergantung pada suhu nyala api sehingga
menekankan pentingnya pengendalian suhu dalam Flame Emission Spectroscopy (FES).

25.3 INSTRUMENTASI

Ada dua jenis Flame Photometers yang digunakan dalam Flame Emission Spectroscopy (FES), yaitu:

(a) Fotometer Nyala Sederhana, dan

3
(b) Fotometer Nyala Standar Internal.

Kedua instrumen tipikal ini akan dibahas secara singkat di sini dengan menyoroti berbagai
komponen dan rincian prosedurnya.

25.3.1 FOTOMETER NYALA SEDERHANA

Sketsa garis dari fotometer nyala sederhana ditunjukkan pada Gambar 25.2.

Gambar 25.2: Tata Letak Fotometer Nyala sederhana

[Corning model 410 Flame Photometer didasarkan pada pola ini].

Keterangan:

A = Saluran masuk untuk Udara terkompresi,

B = Saluran keluar pembuangan (untuk mempertahankan kepala tekanan konstan di Ruang

pencampuran),

C = Sampel cair (disedot ke dalam Nebulizer),

D = Inlet untuk Bahan Bakar-Gas ke Laminar-Flow-Burner,

E = Nebulizer untuk menyemprotkan sampel cairan,

F = Ruang Pencampur untuk Bahan Bakar Gas, Udara Terkompresi, dan Sampel Cairan Atom,

G = Pembakar,

H = Api,

I = Lensa cembung,

K = Filter optik untuk mengirimkan hanya garis kuat elemen, dan

L = Amplifier untuk memperkuat impuls listrik yang lemah dan perangkat pembacaan
langsung bawaan.

Secara umum, Fotometer nyala dirancang dan dimaksudkan terutama untuk melakukan pengujian
unsur-unsur seperti: Natrium, Kalium, Kalsium, dan Litium yang memiliki kemampuan untuk

4
mengeluarkan spektrum nyala api yang mudah tereksitasi dengan intensitas yang cukup untuk
deteksi cepat oleh fotosel.

Prosedur: Udara terkompresi dan tersaring (A) pertama kali dimasukkan ke dalam Nebulizer (E) yang
menciptakan tekanan negatif (hisap) yang memungkinkan sampel cairan (C) masuk ke alat
penyemprot (E). Jadi, ia bercampur dengan aliran udara sebagai tetesan halus (kabut) yang masuk ke
dalam pembakar (G). Bahan bakar gas (D) yang dimasukkan ke ruang pencampuran (F) pada tekanan
tertentu bersentuhan dengan udara dan campuran dinyalakan. Akibatnya, radiasi dari api yang
dihasilkan (H) dibuat melewati lensa cembung (I) dan akhirnya melalui filter optik (J) yang
memungkinkan secara khusus karakteristik radiasi dari elemen yang diperiksa melewati fotosel (K) .
Akhirnya, keluaran dari fotosel diperkuat secara memadai (L) dan selanjutnya diukur pada perangkat
pembacaan digital sensitif yang sesuai.

Corning model 410 Flame Photometer

25.3.2 FOTOMETER NYALA STANDAR INTERNAL

Tata letak fotometer nyala standar internal diilustrasikan pada Gambar 25.3.

Gambar 25.3: Tata Letak Fotometer Nyala Standar Internal.

5
A = Saluran masuk untuk udara terkompresi,

B = Saluran Masuk untuk Asetilena (Bahan Bakar-Gas),

C = Sampel cairan disedot dengan alat penyemprot,

D = Nyala api,

E = Cermin,

F = Filter optik untuk memungkinkan transmisi hanya satu garis kuat elemen,

G = Amplifier untuk memperkuat arus listrik yang lemah,

H = A Null detector untuk merekam intensitas elemen yang diteliti dan standar internal (Lithium),

I = A potensiometer terkalibrasi,

J1 = Garis karena 'sampel'

J2 = Garis karena Standar Internal 'Lithium', dan

K1 & K2 = Photocells untuk mengubah energi cahaya menjadi impuls listrik.

Penggunaan fotometer nyala standar internal tidak hanya menghilangkan efek yang terlihat dari
fluktuasi sesaat dalam karakteristik nyala yang dihasilkan oleh variasi oksidan atau tekanan penuh,
tetapi juga kesalahan yang disebabkan karena perbedaan tegangan permukaan dan viskositas
diminimalkan hingga sebagian besar.

Prosedur: Dalam contoh khusus ini 'Litium' digunakan sebagai standar internal dan konsentrasi yang
sama ditambahkan secara bersamaan ke sampel dan larutan standar. Larutan sampel (C) yang
memiliki standar internal (Litium) disedot dengan alat penyemprot dan semprotan halus dengan
demikian dimasukkan ke dalam nyala api (D). Radiasi yang dipancarkan kemudian dilewatkan melalui
filter (F) dan kemudian dikumpulkan oleh cermin (E). Radiasi yang dipancarkan yang dipantulkan dari
cermin dibagi menjadi dua bagian: bagian pertama disebabkan oleh standar internal (Lithium),
sedangkan bagian kedua muncul karena elemen yang diperiksa. Kedua garis ini J1 dan J2 dilewatkan
melalui masing-masing fotosel K1 dan K2 dimana energi cahaya diubah menjadi impuls listrik. Impuls
listrik ini biasanya sangat lemah dan lemah dan karenanya, mereka diperkuat oleh penguat yang
sesuai (G) secara individual dan kemudian dimasukkan ke dalam alat pendeteksi umum (H) yaitu,
'Detektor nol' - sehingga memungkinkannya untuk catat intensitas elemen yang sedang diteliti dan
juga standar internal (Lithium) secara akurat menggunakan potensiometer yang dikalibrasi (I).

Singkatnya, fotometer nyala standar internal memberikan hasil langsung dan simultan sehubungan
dengan rasio intensitas.

25.4 APLIKASI SPEKTROSKOPI EMISI NYALA DALAM ANALISIS FARMASI

Beberapa contoh khas 'spektroskopi emisi nyala' diberikan di bawah ini.

25.4.1 UJI NATRIUM, KALIUM DAN KALSIUM DALAM SERUM DARAH DAN AIR

(i) Larutan standar kalium dan natrium, kira-kira 500 ppm: Timbang secara akurat 0,95 g KCl kering
dan 1,25 g NaCl kering ke dalam labu ukur 1 liter yang terpisah. Larutkan dalam air dan encerkan
hingga mencapai tanda.

6
(ii) Larutan kalsium standar, kira-kira 500 ppm: Timbang secara akurat 1,25 g CaCO3, yang telah
dikeringkan pada 110 °C, ke dalam gelas piala 500 mL. Tambahkan sekitar 200 mL air suling dan 10
mL HCl pekat. Tutupi gelas piala dengan kaca arloji selama penambahan asam untuk mencegah
hilangnya larutan saat CO2 berkembang. Setelah larutan selesai, pindahkan secara kuantitatif ke
dalam labu ukur 1 liter dan encerkan hingga tanda dengan air suling.

(iii) Penyangga radiasi* untuk penentuan natrium: Siapkan larutan jenuh CaCl2, KCl, MgCl2, dalam
urutan itu.

(iv) Penyangga radiasi untuk penentuan kalium: Siapkan larutan jenuh NaCl, CaCl2 dan MgCl2, dalam
urutan itu.

(v) Penyangga radiasi untuk penentuan kalsium: Siapkan larutan jenuh NaCl, KCl, MgCl2 dalam
urutan tersebut.

*Penyangga radiasi digunakan untuk meminimalkan efek masing-masing ion pada intensitas emisi
ion lainnya.

Prosedur

(a) Penyiapan kurva kerja: Pindahkan 5 ml penyangga radiasi yang sesuai ke setiap rangkaian
labu ukur 100 mL. Tambahkan volume larutan standar yang akan mencakup konsentrasi
yang berkisar antara 0 hingga 100 ppm. Encerkan hingga 100 mL dengan air suling dan aduk
rata. Ukur intensitas emisi sampel ini dengan mengambil setidaknya tiga bacaan untuk
masing-masing sampel. Di antara setiap set pengukuran, aspirasi air suling melalui burner.
Perbaiki nilai rata-rata untuk luminositas latar belakang, dan buat kurva kerja dari data ini.
(b) Analisis serum darah/sampel air: Siapkan sebagian besar sampel seperti yang dijelaskan
pada paragraf (a) di atas. Jika perlu, gunakan standar untuk mengkalibrasi respons
spektrometer ke kurva kerja. Kemudian ukur intensitas emisi untuk sampel yang tidak
diketahui. Setelah mengoreksi data untuk latar belakang, tentukan konsentrasi dengan
perbandingan dengan kurva kerja.

25.4.2 PENGUJIAN BARIUM, KALIUM DAN NATRIUM DALAM KALSIUM ASETAT

Teknik spektroskopi emisi nyala digunakan untuk menentukan konsentrasi ion Ba, K, dan Na dengan
mengukur intensitas emisi pada panjang gelombang tertentu dengan uap atom dari unsur yang
dihasilkan dari kalsium asetat yaitu dengan memasukkan larutannya ke dalam nyala api.

25.4.2.1 Untuk Pengukuran Emisi

Masukkan air ke dalam generator uap atom, sesuaikan pembacaan instrumen ke nol, masukkan
larutan yang paling pekat ke dalam generator dan sesuaikan sensitivitas untuk memberikan
pembacaan yang sesuai; sekali lagi masukkan air atau larutan yang ditentukan ke dalam generator
dan jika pembacaannya konstan, sesuaikan kembali, jika perlu, ke nol.

25.4.2.2 Metode Penambahan Standar

Berbagai langkah tersebut adalah sebagai berikut:

(1) Tempatkan di masing-masing tidak kurang dari tiga labu ukur yang sama volume larutan
bahan yang diperiksa, disiapkan sebagai berikut:
a. Siapkan larutan 5,0 % w/v dan gunakan larutan barium ASp*, yang diencerkan
dengan air yang sesuai untuk membuat larutan standar.

7
 b. Siapkan larutan 1,25 % b/v dan gunakan larutan kalium ASp**, yang diencerkan
dengan bahan yang sesuai, untuk membuat larutan standar.
c. Siapkan larutan 1,0 % b/v dan gunakan larutan natrium ASp***, yang diencerkan
dengan air yang sesuai, untuk membuat larutan standar.
(2) Tambahkan ke semua labu kecuali satu kuantitas terukur dari larutan standar yang
ditentukan (bertanda *; **; ***; di atas) untuk menghasilkan rangkaian larutan yang
mengandung peningkatan jumlah elemen yang ditentukan.
(3) Encerkan isi setiap labu hingga volume yang dibutuhkan dengan air.
(4) Setelah instrumen dikalibrasi seperti yang diarahkan di atas, masukkan setiap larutan ke
dalam generator tiga kali dan catat pembacaan yang stabil. Jika generator adalah nyala api,
cuci peralatan secara menyeluruh dengan air; jika tungku digunakan, nyalakan setelah setiap
pemasukkan.
(5) Plotkan rata-rata pembacaan terhadap konsentrasi pada grafik yang sumbu-sumbu
berpotongan pada elemen yang ditambahkan nol dan pembacaan nol.
(6) Ekstrapolasi garis lurus yang menghubungkan titik-titik tersebut sampai memenuhi sumbu
konsentrasi yang diekstrapolasi. Jarak antara titik ini dan perpotongan sumbu menunjukkan
konsentrasi unsur (misalnya Mg, K, Na) yang ditentukan dalam larutan zat yang diperiksa.

* Larutan Barium ASp: Larutkan 1.778 g BaCl2 dalam air secukupnya untuk menghasilkan 1000 mL.
Encerkan dengan air sehingga 1 mL mengandung 1 mg Ba.

** Larutan Kalium ASp: Larutkan 1.144 g KCl, sebelumnya dikeringkan pada suhu 100 ° hingga 105 °
selama 3 jam, dalam air secukupnya hingga menghasilkan 1000 mL. (Ini berisi 600 mcg K dalam 1
mL).

*** Larutan Natrium ASp: Larutkan 0,5084 g NaCl, sebelumnya dikeringkan pada suhu 100 ° hingga
105 ° selama 3 jam, dalam air secukupnya hingga menghasilkan 1000 mL. (Ini mengandung 200 mcg
Na dalam 1 mL).

25.4.2.3 Batasan elemen yang ada dalam sampel kalsium asetat

Mg: Tidak lebih dari 500 ppm Mg;

K: Tidak lebih dari 0,1 % K, dan

Na: Tidak lebih dari 0,5 % Na.

25.4.3 UJI SERUMPUN

Zat berikut, yaitu: magnesium asetat; kalium sitrat; potasium hidroksida ; kalium nitrat dan natrium
klorida juga dapat diuji untuk masing-masing unsurnya seperti yang ditunjukkan pada Tabel 25.1 di
bawah ini. Namun, semua larutan masing-masing dari bahan farmasi tersebut dan larutan
standarnya harus disiapkan seperti yang ditentukan dalam BP (1993) secara ketat untuk
mendapatkan hasil terbaik.

8
 Tabel 25.1: Pengujian Zat Farmasi menurut Spektrofotometri Emisi Nyala (atau FES)

No Nama Unsur Kuantitas yang ditentukan (% b/v) Batas

Senyawa yang ditentukan*
ada
1 Magnesium K; Na; Untuk K = 0,50; untuk Na = 1,00 < 0,10 % K; <
asetat 0,50 % Na
2 Kalium Na Untuk Na = 1 mg; Na per mL air suling < 0,3 % Na
asetat
3 Kalium Na Untuk Na = 1,0 g dalam 50 mL air suling + 5 mL < 1,0 % Na
hidroksida H2SO4 5 M. Encerkan hingga 100 mL dengan air
suling. Encerkan 1 mL hingga 10 mL dalam air
suling.
4 Kalium nitrat Na Untuk Na = 1.0 dan pengukuran pada 589 nm < 0,1 % Na
5 Natrium K Untuk K = 1,0 < 500 ppm
klorida
*
British Pharmacopea, Vol I dan II, 1993

LATIHAN TEORITIS DAN PRAKTIS

1. Apa itu 'Fotometri Nyala'? Jelaskan!

2. Diskusikan aspek teoritis dari spektroskopi nyala:
a. Persamaan Bohr, dan
b. Persamaan Boltzmann.
3. Apa dua jenis Fotometer Nyala yang biasa digunakan dalam Flame Emission Spectroscopy
(FES)? Gambarkan mereka secara individual dengan tata letak yang rapi dan jelaskan modus
operandinya.
4. Bagaimana Anda menguji natrium, kalium dan kalsium dalam serum darah dan air? Jelaskan!
5. Jelaskan pengujian Ba, K dan Na dalam kalsium asetat menggunakan 'metode penambahan
standar'.
6. Diskusikan pengujian zat farmasi berikut dengan metode FES:
(i) Magnesium asetat, (ii) Kalium nitrat, (iii) Kalium nitrat, dan (iv) Natrium klorida.