IDENTIFIKASI SENYAWA KIMIA DAUN BIDARA (ZiziphusmauritianaLam)

DARI KABUPATEN TIMOR TENGAH SELATAN PROVINSI NTT

SECARA KROMATOGRAFI LAPIS TIPIS DAN KROMATOGRAFI KOLOM

*)Alfreds Roosevelt, **)Amandus L G I Sapu Ghari

*)Akademi Farmasi Sandi Karsa Makassar
**)Program Studi Farmasi Sandi Karsa Makassar

ABSTRAK

Telah dilakukan penelitian mengenai Identifikasi Senyawa Kimia Daun Bidara (Ziziphus mauritiana Lam) Dari
Kabupaten Timor Tengah Selatan Provinsi Nusa Tenggara Timur Secara Kromatografi Lapis Tipis Dan Kromatografi
Kolom untuk mengetahui senyawa kimia yang terkandung dalam ekstrak daun bidara (Ziziphus mauritiana Lam) yang
berasal dari Kabupaten Timor Tengah Selatan, Provinsi Nusa Tenggara Timur dengan menggunakan metode ekstraksi
maserasi, kromatografi lapis tipis dan kromatografi kolom. Penelitian ini adalah penelitian eksperimen. Dengan
melakukan Uji Identifikasi yaitu Alkaloid, Flavonoid, Tanin, Saponin dan steroid Secara Kromatografi Lapis Tipis Dan
Kromatografi Kolom. Adapun hasil dari penelitian dengan menggunakan metode kualitatif dengan beberapa pengujia
diperoleh yaitu Alkaloid negatif (-), Flavonoid positif (+), Taninpositif (+), Steroid/Terpenoidpositif (+), Saponinpositif
(+). Bercak noda yang terbentuk pada Kromatografi Lapis Tipis berwana merah, hijau kehitaman, ungu, dan kuning.
Sedangkan pada kromatografi kolom fraksi warna yang terbentuk berwarna kuning, hijau, merah, dan putih.

Kata Kunci: Identifikasi, daun Bidara (Ziziphus mauritiana Lam), Kromatografi lapis tipis, Kromatografi kolom.

PENDAHULUAN diimbangi dengan kemampuan daya beli masyarakat

A. Latar Belakang
Indonesia memiliki ribuan jenis tumbuhan yang
tersebar di berbagai daerah. Keanekaragaman hayati
yang ada tersebut dapat dimanfaatkan sebagai bahan
baku obat modern dan tradisional. Masyarakat
Indonesia telah lama mengenal dan memakai obat
tradisional untuk mengobati berbagai macam penyakit
(Fauziah Nugraha. 2016).
Semakin mahalnya harga obat modern dipasaran
merupakan salah satu alasan untuk menggali kembali
penggunaan obat tradisional. Banyak jenis tanaman
obat di Indonesia yang telah dimanfaatkan sebagai
bahan baku obat, sebagian spesies tanaman tersebut
bahkan telah diuji secara klinis kandungan fitokimia,
khasiat dan keamanan penggunaannya (Fauziah
Nugraha. 2016).
Penelitian ilmiah tentang obat-obatan tradisional
di Indonesia masih tertinggal dibandingkan dengan
negara-negara Asia lainnya, seperti Jepang, Korea,
Cina dan India.Akibatnya perkembangan obat
tradisional ditanah air tidak terlampau
pesat.Pemakainya hanya sebatas kalangan
tertentu.Selain itu, obat tradisional juga belum bisa
sepenuhnya diterima oleh kalangan medis (Fauziah
Nugraha. 2016).
Pada zaman dahulu, obat tradisional dikonsumsi
dalam kondisi segar dan masih diolah dengan cara
sangat sederhana. Selain itu, tingkat konsumsi
masyarakat terhadap ramuan tradisional juga masih
tinggi karena saat itu belum banyak obat-obatan kimia
yang diproduksi seperti sekarang.Sementara itu, alasan
pemakaian obat tradisional saat ini lebih disebabkan
semakin tingginya harga obat buatan pabrik yang tidak
Jurnal Farmasi Sandi Karsa Vol. IV No.7 November 2018
(Fauziah Nugraha. 2016).
Tanaman obat merupakan jenis tanaman yang
dipercaya masyarakat mempunyai khasiat dan telah
digunakan sebagai bahan baku obat tradisional. Obat
tradisional digunakan untuk berbagai macam tujuan
seperti menjagakesegaran dan kesehatan tubuh
secarakeseluruhan, menyembuhkan penyakit
tertentu,mengatur kehamilan dan kosmetik (I. A. R.
Astiti Asih.2009).
Salah satu tumbuhan yang digunakan sebagai obat
oleh masyarakat adalah bidara (Ziziphus mauritiana
Lam). Di India masyarakat menggunakan bidara
(Ziziphus mauritiana Lam) sebagai obat diare, kencing
manis, demam dan malaria sedangkan di Malaysia
rebusan kulit kayunya dimanfaatkan sebagai obat sakit
perut dan sebagian masyarakat lagi menggunakan daun
bidara (Ziziphus mauritiana Lam) untuk mengatasi
masalah kecantikan seperti mengatasi jerawat, keriput
dan lingkaran hitam pada bawah mata (Fauziah
Nugraha, 2016).
Golongan kimia dalam suatu sampel penelitian
dapat diketahui dengan uji skrining fitokimia. Skrining
fitokimia merupakan uji kualitatif kandungan senyawa
kimia dalam bagian tumbuhan, terutama kandungan
metabolit sekunder yang diantaranya adalah flavonoid,
alkaloid, saponin, tannin, terpenoid, dan sebagainya.
Skrining fitokimia harus memenuhi beberapa
persyaratan antara lain sederhana, cepat dapat
dilakukan dengan peralatan minimal, bersifat semi
kuantitatif yaitu memiliki batas kepekaan untuk
senyawa yang bersangkutan, selektif terhadap
golongan senyawa yang dipelajari (Nirwana. A.P.
2014).
Upaya untuk memberikan nilai tambah dari
tanaman ini yaitu perlu dilakukan penelitian terhadap
5
kandungan kimia serta khasiatnya, Karena peniliti
ingin membandingkan literatur terkait senyawa daun
bidara (Ziziphus mauritiana Lam) yang ada dengan
tanaman daun bidara yang berasal dari daerah
Kabupaten Timor Tengah Selatan Provinsi Nusa
Tenggara Timur.
Penelitian ini bertujuan mengidentifikasi senyawa
kimia dari daun bidara (Ziziphus mauritiana Lam)
dengan metoda ekstraksi dengan maserasi dan
kromatografi. Diharapkan data kandungan senyawa
kimia pada daun bidara (Ziziphus mauritiana Lam)
tersebut dapat dimanfaatkan untuk ilmu pengetahuan di
bidang farmasi.
B. Rumusan Masalah
Apakah daun bidara (Ziziphus mauritiana Lam)
dari Kabupaten Timor Tengah Selatan Provinsi Nusa
Tenggara Timur memiliki kandungan senyawa kimia?
C. Tujuan Penelitian
Tujuan penelitian ini adalah untuk mengetahui
senyawa kimiayang terkandung dalam ekstrak daun
bidara (Ziziphus mauritianaLam)yang berasal dari
Kabupaten Timor Tengah Selatan,Provinsi Nusa
Tenggara Timurdengan menggunakan ekstraksi
maserasi, identifikasi, metode pemisahan kromatografi
lapis tipis dan kromatografi kolom.
D. Manfaat Penelitian
1. Bagi peneliti sebagai acuan menambah
wawasan ilmu pengetahuan tentang identifikasi
senyawa kimia daun bidara (Ziziphus
mauritiana Lam).
2. Sebagai bahan referensi bagi farmasis dalam
melakukan penelitian selanjutnya
METODE PENELITIAN
A. Jenis Penelitian
Jenis penelitian ini yaitu penelitian
eksperimen untuk menunjukkan identifikasi
senyawa metabolit sekunder Daun Bidara (Ziziphus
mauritiana L.) yang terdapat di Kabupaten Timor
Tengah Selatan, Provisi Nusa Tenggara Timur.
B. Waktu Dan Tempat Penelitian
Waktu penelitian ini dilakukan pada Bulan
Oktober tahun 2018 di Laboratorium Fitokimia
Akademi Farmasi Sandi Karsa MakassarProvinsi
Sulawesi Selatan.
C. Alat Dan Bahan
1. Alat-alat yang digunakan
Seperangkat alat maserasi modifikasi
yaitu: Batang pengaduk, Chumber dan penutup
chumber, Corong gelas, cawan porselin,
Erlenmeyer (pyrex), Gelasukur (pyrex), Gelas
kimia (pyrex),Pipet tetes,Rak tabung,Rotary
Efaporator (gucci), Seperangkat Maserasi,
Tabung reaksi, Toples.
2. Bahan-bahan yang digunakan
Jurnal
6 Farmasi Sandi Karsa Vol. IV No.7 November 2018
Aquadest (H2O), Asam Sulfat (H2SO4)
10%, etil asetat, Metanol (CH4O), Lempeng
KLT,N-Heksan, etanol 70%, FeCl3,kertas
saring,lakban, metanol,NaCl, HCI pekat, serbuk
Mg, pereaksi Liberman-bouchardat, pereaksi
Mayer, pereaksi Dragendrof, Silika Gel(GF
254) dan Sampel Ekstrak Daun Bidara(Ziziphus
mauritianaL.).
D. Metode Kerja
1. Pengambilan Sampel
Sampel dikumpulkan di Kabupaten Timor
Tengah Selatan, Provinsi Nusa Tenggara Timur
2. Pengolahan Sampel
Daun Bidara (Ziziphus mauritianaL.) yang
telah dikumpulkan, dibersihkan dengan cara
dicuci di air yang mengalir lalu dipotong-potong
kecil kemudian dikeringkan dengan cara
diangin-anginkan, setelah kering sebagian
diserbukkan lalu dilakukan proses ekstraksi
kemudian dilakukan uji identifikasi kimia.
3. Pembuatan Ekstrak
Ekstraksi Daun Bidara (Ziziphus
mauritiana L.) yaitu dengan menggunakan
metode maserasi dimana alat terlebih dahulu
dicuci dan dibersihkan, kemudian keringkan.
Simplisia yang telah dipotong-potong kecil
sesuai dengan derajat kehalusannya kemudian
ditimbang. Setelah itu, di masukkan ke dalam
toples kemudian ditambahkan dengan methanol
bersamaan dengan simplisia.Setelah toplessudah
terisi dengan cairan penyari dan simplisia toples
di tutup rapat lalu di biarkan sampai kurun
waktu 5 hari dan sesekali di aduk, pelarut
diganti tiap 5 hari sekali dan dilakukan sebayak
3 kali. Filtrat dan endapan dipisahkan,
selanjutnya filtrat diuapkan pada rotavapor
hingga kering dan senyawa di identifikasi
secara kromatografi lapis tipis dan kolom.
4. Pembuatan Pereaksi
a. Larutan pereaksi Dragendrof
Sebanyak 8 gram Bismuth Nitrat
dilarutkan dalam Asam Nitrat 20 ml
kemudian dicampur dengan larutan Kalium
Iodida sebanyak 27,2 gram dalam 50 ml Air
suling. Campuran didiamkan sampai
memisah sempurna.Larutan jernih diambil
dan diencerkan dengan air secukupnya
hingga 100 ml.
b. Larutan pereaksi Bouchardat
Sebanyak 4 gram Kalium Iodida
dilarutkan dalam 20 ml Air suling kemudian
ditambah 2 gram Iodium sambil diaduk
sampai larut, lalu ditambah Air suling
hingga 100 ml.
c. Pereaksi Mayer
Sebanyak 5 gram Kalium Iodida dalam
10 ml Air suling kemudian ditambahkan
larutan 1,36 gram Merkuri (III) Klorida
dalam 60 ml Air suling. Larutan dikocok
dan ditambahkan Air suling hingga 100 ml.
6
 d. Larutan pereaksi Liebarman-Bourchard
20 tetes Asam Asetat Anhidrat dan 1
tetes Asam Sulfat pekat.
E. Identifikasi Kandungan Kimia
a. Pemeriksaan alkaloid
Sebanyak 0,5 gram serbuk simplisia
ditimbang, ditambahkan 1 ml Asam Klorida 2 N
dan 9 ml Air suling, dipanaskan diatas tangas
air selama 2 menit, didinginkan lalu disaring,
filtrat dipakai untuk untuk uji alkaloid. Diambil
3 tabung reaksi, lalu kedalam masing-masing
tabung reaksi dimasukan 0,5 ml filtrat.
1) Pada tabunng 1, ditambahkan 2 tetes
pereaksi Mayer akan terbentuk endapan
menggumpal berwarna putih atau kuning.
2) Pada tabung II, ditambahkan 2 tetes pereaksi
Dragendorff, akan terbentuk endapan
berwarna coklat atau jingga kecoklatan.
3) Pada tabung III, ditambahkan 2 tetes
pereaksi Bouchardat, akan terbentuk
endapan berwarna coklat sampai kehitaman.
Alkaloid dianggap positif jika terjadi
endapan atau paling sedikit dua atau tiga
percobaan diatas (DIRJEN POM, 1995).
b. Pemeriksaan flavonoid
Sebanyak 10 gram serbuk simplisia
ditimbang, dilarutkan 100 ml air panas,
dididihkan selama 5 menit dan disaring dalam
keadaan panas, ke dalam 5 ml filtrat
ditambahkan 0,1 gram serbuk Mg dan 1 ml
HCL pekat dan 2 ml Amil alkohol, dikocok dan
dibiarkan memisah. Flavonoid positif jika
terjadi warna merah, kuning, jingga, pada
lapisan amil (DIRJEN POM, 1995).
c. Pemeriksaan tanin
Sebanyak 0,5 gram serbuk simplisia
ditimbang, ditambahkan 10 ml air suling lalu
disaring, filtratnya diencerkan dengan air
sampai tidak berwarna. Larutan diambil
sebanyak 2 ml dan ditambahkan 1-2 tetes
pereaksi Besi (III) Klorida dan (HCl) 1%. Jika
terjadi warna biru atau hijau kehitaman
menunjukan adanya tannin (DIRJEN POM,
1995).
d. Pemeriksaan steroid
Sebanyak 1 gram serbuk simplisia
ditimbang, dimaserasi dengan 20 ml N-heksan
selama 2 jam, lalu disaring. Filtrat diuapakan
dalam cawan penguap.Pada sisa ditambahkan
20 tetes Asam Asetat Anhidrat dan 1 tetes Asam
Sulfat pekat (pereaksi Lieberman-Burchard).
Timbul warna biru atau hijau menunjukan
adanya steroid (DIRJEN POM, 1995).
e. Pemeriksaan saponin
Sebanyak 0,5 gram serbuk simplisia
ditimbang, dimasukkan kedalam tabung reaksi
dan ditambahkan 10 ml Air suling panas,
didinginkn kemudian dikocok kuat kuat selama
10 detik. Saponin positif jika terbentuk buih
atau busa yang selama tidak kurang dari 10
Jurnal Farmasi Sandi Karsa Vol. IV No.7 November 2018
menit setinggi 1-10 cm, dan dengan
penambahan 1 tetes larutan Asam Klorida 2 N
buih tidak hilang (DIRJEN POM, 1995).
F. Metode Pemisahan
1. Kromatografi lapis tipis ( KLT )
Pemisahan dengan KLT digunakan untuk
mencari fase gerak yang terbaik yang akan
digunakan dalam kromatografi kolom. Fase
diam yang digunakan pada KLT adalah silika
gel GF254 dan sebagai fase gerak digunakan
nheksana, kloroform, etil asetat dan n-
butanol.Bejana kromatografi sebelum
digunakan untuk elusi, terlebih dahulu
dijenuhkan dengan fase geraknya. Sedikit fraksi
positif flavonoid yaitu fraksi n-heksana
dilarutkan dengan pelarutnya (eluen yang akan
dipakai) kemudian ditotolkan(I.A.R. Astiti Asih,
2009).
Pada plat kromatografi lapis tipis dengan
menggunakan pipa kapiler. Setelah kering lalu
dimasukkan dalam bejana.Bila fase gerak telah
mencapai batas yang ditentukan, plat diangkat,
dan dikeringkan di udara terbuka.Sebagai
penampak noda digunakan asam sulfat.Noda
yang terbentuk diamati dengan lampu UV 254
nm kemudian dihitung Rf-nya (I. A. R. Astiti
Asih.2009).
2. Kromatografi kolom
Fase diam yang digunakan pada
kromatografi kolom adalah silika gel,
sedangkanfase geraknya digunakan fase gerak
yang memberikan pemisahan terbaik pada KLT
(I. A. R. Astiti Asih.2009).
Silika gel 60 (70-100) Mesh terlebih dahulu
dipanaskan dalam oven pada suhu 1100C,
kemudian ditambahkan sedikit fase geraknya
sehingga menjadi bubur.Pelarut (fase gerak
yang digunakan) dimasukkan ke dalam kolom
sampai hampir penuh dan keadaan kran kolom
tertutup.Setelah itu kecepatan aliran kolom
diatur dan bubur dimasukkan sedikit demi
sedikit ke dalam kolom sampai seluruh bubur
masuk ke dalam kolom.Setelah bubur masuk,
fase diam ini dielusi hingga homogen (kolom
ini didiamkan selama 1 hari sehingga diperoleh
pemampatan yang sempurna).Sementara itu
sampel dilarutkan dalam pelarut, kemudian
sampel dimasukkan dengan hati-hati melalui
dinding kolom dan aliran fase gerak
diatur.Begitu sampel masuk ke dalam fase diam,
fase gerak ditambahkan secara kontinyu sampai
terjadi pemisahan.Eluen ditampung pada
botolpenampung fraksi setiap 3 mL,
kemudiankeseluruhan fraksi yang dihasilkan
dilakukan KLT penggabungan (I. A. R. Astiti
Asih.2009).
7
 0,32
HASIL DAN PEMBAHASAN = = 0,64
5

A. Hasil Penelitian
B. Pembahasan
1. Hasil Uji Identifikasi
Penelitian ini dilakukan untuk mengetahui
Tabel I. Hasil pemeriksaan identifikasi kandungan
kandungan kimia daun Bidara (Ziziphus mauritiana
senyawa kimia ekstrak methanol daun Bidara
Lam.) yang terdapat di Kabupaten Timor Tengah
(Ziziphus mauritiana Lam) yang berasal dari
Selatan, Provisi Nusa Tenggara Timur mennggunakan
kabupaten Timor Tengah Selatan Provinsi Nusa
metode Kromatografi lapis tipis dan kromatografi
Tenggara Timur.
kolom.
Cara pembuatan simplisia daun Bidara (Ziziphus
Pemeriksaan Pereaksi Hasil Pengamatan Ket.
Senyawa Pelarut Pengamatan Pustaka mauritiana Lam.) pertama-tama panen daun sekitar
jam 07.00-10.00 pagi kemudian dilakukan sortasi
Alkaloid Mayer Ada endapan Endapan Positif basah untuk memisahkan kotoran-kotoran atau bahan-
kuning kuning bahan asing yang tua dengan yang muda serta bahan
Bouchardat Tidak ada Endapan Negative
endapan coklat yang ukurannya lebih besar atau lebih kecil tahap
coklat selanjutnya pencucian dengan air mengalir kemudian
Dragendorft Tidak ada Endapan Negative perajangan (dipotong-potong kecil) selanjutnya
endapan jingga pengeringan dengan sinar matahari kemudian
jingga
Saponin HCl pekat Berbusa Berbusa Positif
dilakukan sortasi kering maka didapatkan hasil
Steroid Eter Merah Merah Positif simplisa. Cara pembuatan ekstak daun Bidara (Ziziphus
Liberman- mauritiana Lam.) adalah dengan metode maserasi
bouchard dengan pelarut methanol.
Tannin FeCl3 Hijau Hijau Positif Salah satu upaya dalam pencarian tumbuhan
kehitaman kehitaman
Flavonoid Serbuk Mg Kuning dan Merah, Positif yang berkhasiat obat tersebut dapat dilakukan dengan
HCl pekat merah kuning, uji kualitatif. Uji kualitatif adalah mengidentifikasi zat-
C5H11OH atau jingga zat kimia, mengenai unsur-unsur atau senyawa yang
terdapat dalam suatu sampel.Identifikasi kandungan
Table II. Hasil Kromatografi Lapis Tipis senyawa kimia yaitu pemeriksaan berdasarkan reaksi
Nama Eluen Gambar kimia antara kandungan tumbuhan dengan
sampel menggunakan pereaksi.Pada penelitian ini dilakukan
beberapa uji yaitu uji alkaloid, uji steroid, uji tanin, uji
Daun n-heksan : saponin dan uji flavonoid.
Bidara metanol Pada uji alkaloid dengan menggunakan tiga
(7:3) pereaksi yaitu pereaksi mayer, dragendorf dan
bouchardat, dimana hasil yang didapatkan pada
n-heksan : pereaksi Mayer terjadi endapan kuning, pada pereaksi
metanol Bouchardat tidak terjadi endapan coklat dan pada
(3:7) pereaksi Dragendrof tidak terjadi endapan, Hasil
penelitian yang dilakukan menunjukkan daun Bidara
(Ziziphus mauritiana Lam.) negatif mengandung
alkaloid.Pada pembuatan pereaksi Mayer, larutan
merkurium(II) klorida ditambah kalium iodide akan
bereaksi membentuk endapan merah merkurium(II)
iodide. Jika kalium iodide ditambahkan berlebih maka
2. Perhitungan akan terbentuk kalium tetraiodomerkurat(III). Alkaloid
a. Polar mengandung atom nitrogen yang mempunyai pasangan
𝑛𝑜𝑑𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑡𝑒𝑟𝑏𝑒𝑛𝑡𝑢𝑘 elektron bebas sehingga dapat digunakan untuk
Perhitungan nilai 𝑅𝑓 =
𝑗𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑢 𝑛𝑜𝑑𝑎 membentuk ikata-ikatan kovalen koordinat dengan ion
𝑛𝑜𝑑𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑡𝑒𝑟𝑏𝑒𝑛𝑡𝑢𝑘
Noda 1 nilai Rf = logam. Pada uji alkaloid dengan pereaksi Mayer,
𝑗𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑢ℎ 𝑛𝑜𝑑𝑎
0,1 diperkirakan nitrogen pada alkaloid akan bereaksi
= = 0,02
5 dengan ion logam K+ dari kalium tetraiodomerkurat(II)
𝑛𝑜𝑑𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑡𝑒𝑟𝑏𝑒𝑛𝑡𝑢𝑘
Noda 2 nilai Rf = membentuk kompleks kalium-alkaloid yang
𝑗𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑢ℎ 𝑛𝑜𝑑𝑎
0,2 mengendap.
= = 0,04
5 Pada uji saponinidentifikasi berbentuk buih
noda yang terbentuk
Noda 3 nilai Rf = sehingga jika ditambahkan dengan air panas dan HCl
jarak tempuh noda
0,3 lalu dikocok maka akan terbentuk buih yang dapat
= = 0,06 bertahan selama 10 menit. Hasil penelitian yang
5
b. Non polar dilakukan menunjukkan adanya buih atau busa dimana
𝑛𝑜𝑑𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑡𝑒𝑟𝑏𝑒𝑛𝑡𝑢𝑘
Noda 1 nilai Rf = daun Bidara (Ziziphus mauritiana Lam.) ini positif
𝑗𝑎𝑟𝑎𝑘 𝑡𝑒𝑚𝑝𝑢ℎ 𝑛𝑜𝑑𝑎
mengandung saponin.Timbulnya busa pada uji ini

Jurnal
8 Farmasi Sandi Karsa Vol. IV No.7 November 2018 8
menunjukkan adanya glikosida yang mempunyai
kemampuan membentuk buih dalam air yang
terhidrolisis menjadi glukosa dan senyawa lainnya.
Pada uji steroid yaitu ditambahkan pereaksi
leberman dan bauchardat, di mana hasil yang
didapatkan warna merah, daun Bidara (Ziziphus
mauritiana Lam.)positif mengandung steroid.
Pada uji tanin yaitu ditambahkan NaCl dan
FeCl3dimana hasil yang didapatkan warna hijau
kehitaman, daun Bidara (Ziziphus mauritiana Lam.)
positif mengandung tanin.Identifikasi tanin
menggunakan besi(III)klorida dan hasil yang diperoleh
adalah sampel positif mengandung tanin dengan
memberikan efek perubahan warna yakni warnahijau
kehitaman. Penambahan ekstrak dengan FeCl3 dalam
air menimbulkan warna biru, merah ungu atau hitam
yang kuat. Terbentuknya warna tersebut setelah
penambahan FeCl3 tanin akan bereaksi dengan ion
Fe3+ membenk senyawa kompleks.
Identifikasi terakhir yang dilakukan yaitu
identifikasi flavonoid, pada identifikasi flavonoid
didapatkan hasil berwarna kuning dan merah dimana
daun Bidara (Ziziphus mauritiana Lam.)ini positif
mengandung flavonoid.Pada identifikasi flavonoid
menggunakan uji Wilstater menunjukkan perubahan
warna menjadi jingga yang berarti positif adanya
flavonoid. Magnesium dan asam klorida pada uji
Wilstater bereaksi membentuk gelembung-gelembung
yang merupakan gas H2, sedangkan Logam Mg dan
HCl pekat pada uji ini berfungsi untuk mereduksi inti
benzopiron yang terdapat pada struktur flavonoid
sehingga terbentuk perubahan warna menjadi merah
atau jingga.
Kemudian dilanjutkan dengan kromatografi lapis
tipis (KLT) dimana metode ini bertujuan sebagai uji
penegasan atau untuk pemisahan berdasarkan proses
mirgrasi dari komponen-komponen senyawa diantara
dua fasae yaitu fase diam dan fase gerak. Dimana fase
gerak berupa pelarut (eluen) dan fase diam berupa
lempeng KLT yang terbuat dari silika gel.
Pada proses kromatografi lapis tipis (KLT)
digunakan 2 pelarut yaitu, n-heksan dan metanol
dengan perbandingan 7 : 3. Sebelum melakukan proses
pemisahan secara KLT, lempeng KLT terlebih dahulu
dipanaskan dalam oven dengan suhu 1100 C selama 30
menit. Kemudian eluen dijenuhkan dalam chamber
menggunakan kertas saring.
Selanjutnya lempeng silika gel ditotolkan dengan
ekstrak metanol daun Bidara (Ziziphus mauritiana
Lam.), lalu dimasukan kedalam chamber. Setelah itu
chamber ditutup dan dibiarkan hingga terelusi ke atas
sampai batas elusi yang telah dibuat. Setelah terelusi
sempurna lempeng dikeluarkan dan diangin- anginkan
hingga kering.Selanjutnya pemeriksaan terhadap noda
yang terbentuk pada permukaan lempeng KLT
dibawah sinar UV pada panjang gelombang 254 nm.
Noda yang terpisah dari elusi menggunakan KLT,
selanjutnya diukur nilai Rf-nya. Nilai Rf (retention
factor). Nilai Rf didapatkan berdasarkan rumus :
noda yang terbentuk
nilai Rf =
jarak tempuh noda
Jurnal Farmasi Sandi Karsa Vol. IV No.7 November 2018
Pada pelarut polar diperoleh sebanyak 3 noda
untuk noda 1 nilai Rf 0,02, dan noda 2 nilai Rf 0,04
dan noda 3 nilai Rf 0,06. Untuk non polar hanya 1
noda dengan nilai Rf 0,64. Diduga senyawa saponin,
steroid, tannin dan flavonoid karena adanya adanya
noda berwarna merah,hijaukehitaman, agak keunguan
dan kuning setelah disemprot dengan H2SO4.
Berdasarkan (Nafisah dkk., 2014; Miharja dkk.,
2001; Harlis, 2010; Karim dkk., 2015) Hasil KLT yang
menunjukkan adanya senyawa flavonoid yang ditandai
dengan adanya nodaberwarna kuning, hasil yang
menunjukkan adanya senyawa steroid karena adanya
noda berwarna hijau-biru, hasil yang menunjukkan
adanya senyawa taninditandai dengan noda berwarna
hijau kehitaman, hasil yang menunjukkan adanya
senyawa saponin ditandai dengan adanya noda
berwarna merah jambu sampai ungu.Ini terjadi karena
senyawa dalam ekstrak yang terkandung didalam daun
bereaksi dengan eluen yang digunakan sehingga naik
membentuk bercak-bercak noda.
Faktor –faktor yang mempengaruhi gerak noda
dalam KLT dan juga mempengaruhi harga Rf yaitu
sruktur kimia dari senyawa yang sedang dipisahkan,
sifat penyerap dan derajat aktivitasnya,biasanya
aktifitas dicapai dengan pemanasan dalam oven, hal ini
akan mengeringkan molekul-molekul air yang
menepati pusat-pusat serapan dari penyerapan. Adanya
ketebalan dalam ketidakrataan dari lapisan penyerap
bisa menyebabkan aliran pelarut tidak rata dalam
daerah yang kecil dari plat. Jumlah cuplikan yang
digunakan terlalu berlebihan memberiikan penyebaran
noda-noda dengan kemungkinan trbentuknya ekor dan
tak seimbang hingga akan mengakibatkan kesalahan-
kesalahan pada nilai.
Ekstrak daun Bidara (Ziziphus mauritiana Lam)
pada kromatografi lapis tipis menghasilkan 4 bercak
noda, untuk memastikan dan memperkuat hasil uji
identifikasi dan kromatografi lapis tipis maka
dilakukan kromatografi kolom, serbuk silica gel.
Dari berbagai fase gerak yang digunakan, fase
gerak n-heksana :etanol :etil asetat (9:1:0,5) yang
memberikan pemisahanterbaik, sehingga fase ini yang
digunakan dalam kromatografi kolom. Terhadap 2g
ekstrak kental metanoldilakukan proses pemisahan
dengan menggunakan fase diam silika gel 60 (70-100
Mesh) sekitar 100 g (panjang kolom 45cm, diameter
2,3 cm), menggunakan fase gerak n- heksana: etanol :
etil asetat (9:1:0,5).
Hasil dari kromatografi kolom menghasilkan
empat fraksi warna yaitu kuning, hijau, merah
kecoklatan, dan putih.Fraksi warna pada kromatografi
kolom berdasarkan pembentukan bercak noda (warna)
pada lempeng Ktomatografi Lapis Tipis.
PENUTUP
A. Kesimpulan
Berdasarkan hasil penelitian yang telah dilakukan
dapat disimpulkan bahwa pada identifikasi senyawa
kimia melalui metode kualitatif (uji identifikasi) dan
metode pemisahan(uji Kromatografi Lapis Tipis dan
9
Kromatgrafi kolom)daun Bidara (Ziziphus mauritiana
Lam) dari Kabupaten Timor Tengah Selatan Provinsi
Nusa Tenggara Timur mengandung senyawa kimia
tanin, saponin, flavonoid, dan steroid.
B. Saran
Diharapkan untuk penelitian ini dapat di lanjutkan
ke tahap isolasi dan karakteristik senyawa yang
terkandung dalam Daun bidara (Ziziphus mauritiana
Lam.) dari Kabupaten Timor Tengah Selatan Provinsi
Nusa Tenggara Timur.
Maserasi, Refluks dan Sokhletasi. Bukit
Jimbaran. Udayana
Taradipta Roni Made Dewa I. 2015. Uji Aktivitas
Adaptogenik Ekstrak Etanol Daun Bidara
(Zizhiphus mauritiana Auct non Lamk.)
Dengan Metode Swimming Endurance Test
Pada Mencit Galur Balb/C. Bali. Jurusan
Farmasi Fakultas Matematika dan Ilmu
Pengetahuan Alam Universitas Udayana

DAFTAR PUSTAKA

Adrianto Andi, Joko Santoso, Edi Suprasetya. 2017.

Uji Effektivitas Antidiare Ekstrak Etanol
Daun Bidara (Ziziphus maurtiana Lam.) Pada
Mencit Jantan (Mus musculus) Dengan
Induksi Oleum Ricini. Yogyakarta.Politeknik
Kesehatan Permata Indonesia

Alan Yohanes, Fitria Lafita Agresa, Yori Yuliandra.

2017. Analisis Kromatografi Lapis Tipis
(KLT) dan Aktivitas Antihiperurisemia
Ekstrak Rebun Schizostachyum brachycladum
Kurz (Kurz) Pada Mencit Putih Jantan.
Sumatera Barat. Universitas Andalas

Asih I. A. R. Astiti. 2009. Isolasi dan Identifikasi

Senyawa Isoflavon dari Kacang Kedelai
(Glycine max). Bali. Jurusan Kimia FMIPA
Universitas Udayana

Aulia Silma Savira, Iyan Sofyan, muchtaridi. 2016.

Penetapan Kadar Simvastatin Menggunakan
Kromatorafi Cair Kinerja Tinggi (Kckt)
:Review. Universitas PadjadjaranFakultas
Farmasi.

Buana Ika. 2015. Kromatografi Kertas dan Kolom.

FK Unissula. Prodi farmasi

Bintoro Adi. 2017. Analisis dan Identifikasi Senyawa

Saponin Dari Daun Bidara (Ziziphus
Mauritania L.). Banten. ITEKIMA

Depkes.(1989). Materia Medika Indonesia. Jilid V.

Jakarta.

Hanani Endang. 2014. Analisis Fitokimia. Jakarta.

EGC

Nugrahwati Fauziah. 2016. Uji Aktifitas Antipiretik

Ekstrak Daun Bidara (Ziziphus Mauritania L.)
terhadap Mencit Jantan (Mus
muculus).Makassar. UIN ALAUDDIN

Putra Bawa A.A, N.W. bogoriani, N.P Diantariani, dan

Ni Luh Utari Samadewi. 2014. Ekstraksi zat
Warna Alam dari Bonggol Tanaman pisang
(Musa paradiasciaca L.) dengan Metode
Jurnal
10 Farmasi Sandi Karsa Vol. IV No.7 November 2018 10