KIMIA ANALITIK

MODUL EKSTRAKSI
(ANALYTICAL CHEMISTRY
GARY D. CHRISTIAN, PURNENDU K. DASGUPTA, KEVIN A. SCHUG)

DOSEN PENGAMPU :

Prof. Dr. Hj. Mashuni, S.Si., M.Si.

OL E H :

NAMA : DIAN ANGGRENI

STAMBUK : G2J1 19 002

PROGRAM PASCASARJANA
PROGRAM STUDI PENDIDIKAN IPA
UNIVERSITAS HALU OLEO
KENDARI
2020
 MODUL
KIMIA ANALITIK
 KATA PENGANTAR

Modul ini disusun sebagai bahan ajar mata kuliah Kimia Analitik. Modul ini
membahas tentang metode pemisahan yang digunakan di laboratorium yang berguna
dalam analisis senyawa-senyawa kimia. Modul ini membantu mahasiswa untuk memahami
materi tentang metode pemisahan dalam analisis kimia. Kita mengenal berbagai macam
metode pemisahan yang digunakan di laboratorium misalnya, destilasi, ekstraksi atau
kromatografi. Destilasi merupakan metode pemisahan berdasarkan perbedaan titik didih
larutan. Ekstraksi adalah metode pemisahan yang didasarkan pada perbedaan kelarutan.
Sedangkan kromatografi adalah metode pemisahan berdasarkan perbedaan pola
pergerakan antara fase gerak dan fase diam untuk memisahkan komponen yang berada
pada larutan.
Kompetensi yang diharapkan setelah mempelajari bahan ajar ini adalah dapat
memahami prinsip ekstraksi dan klasifikasi ekstraksi. Sumber penyusunan dari bahan ajar
ini adalah e-Book “Analythical Chemistry” oleh Gary D. Christian, Purnendu K. Dasgupta,
dan Kevin A. Schug serta Douglas A. Skoog, Donald M. West, F. James Holler dan
Stanley R. Crouch. Penyusunan bahan ajar ini tentu masih jauh dari sempurna, sehingga
penyusun berharap adanya kritik dan saran yang sifatnya membangun. Penyusun berharap
semoga bahan ajar ini dapat bermanfaat bagi mahasiswa yang ingin memhami teknik
pemisahan ekstraksi.

Kendari, April 2020

Penyusun
 DAFTAR ISI

Halaman Judul..................................................................................................................i
Kata Pengantar.................................................................................................................ii
Daftar Isi...........................................................................................................................iii
Prinsip Pemisahan dengan Ekstraksi..................................................................................1
Pendahuluan........................................................................................................................1
Tujuan.................................................................................................................................2
Kegiatan Belajar 1..............................................................................................................3
Kegiatan Belajar 2..............................................................................................................7
Latihan...............................................................................................................................19
Daftar Pustaka....................................................................................................................20
 Prinsip Pemisahan dengan Ekstraksi

Pendahuluan

Modul ini mengantarkan anda untuk memahami prinsip dan teori pemisahan
dengan ekstraksi. Ekstraksi adalah suatu teknik pemisahan berdasarkan perbedaan sifat
kelarutannya. Pemisahan terjadi atas dasar kemampuan larutan yang berbeda dari
komponen-komponen tersebut. Ada beberapa metode ekstraksi yaitu ekstraksi padat cair
dan ekstraksi cair-cair. Ekstraksi padat cair atau leaching merupakan metode pemisahan
satu atau beberapa komponen (solute) dari campurannya dalam padatan yang tidak dapat
larut (inert) dengan menggunakan pelarut (solvent) berupa cairan.
Pada ekstraksi cair-cair, satu komponen bahan atau lebih dari suatu campuran
dipisahkan dengan bantuan pelarut. Ekstraksi cair-cair terutama digunakan bila pemisahan
campuran dengan cara destilasi tidak mungkin dilakukan (misalnya karena pembentukan
azeotrop atau karena kepekaannya terhadap panas) atau tidak ekonomis. Oleh karena itu,
untuk dapat mengetahui materi ekstraksi maka anda perlu memahami prinsip dan teori
pemisahan dengan ekstraksi dan penggolongan ekstraksi. Modul ini memuat materi
lengkap tentang ekstraksi.
Tujuan

Setelah mempelajari modul ini diharapkan :

1. Memahami tentang prinsip ekstraksi
2. Mengetahui tentang klasifikasi ekstraksi

Materi modul ini disusun menjadi dua kegiatan belajar, yaitu :

Kegiatan Belajar 1 : Prinsip ekstraksi
Kegiatan Belajar 2 : Klasifikasi ekstraksi

Agar dapat memahami materi modul ini dengan baik serta mencapai kompetensi yang
diharapkan, gunakan strategi belajar sebagai berikut :
1. Bacalah uraian materi setiap kegiatan belajar dengan seksama
2. Lakukan latihan sesuai dengan petunjuk dalam kegiatan ini
3. Cermati dan kerjakan tugas-tugas, gunakan hasil pemahaman yang telah anda miliki
 KEGIATAN BELAJAR 1

Prinsip Pemisahan : Ekstraksi

Teknik kromatografi untuk menganalisis sampel yang kompleks, dimana beberapa

analit dipisahkan pada kolom dan dideteksi saat muncul dari kolom. Tetapi sampel perlu
"dibersihkan" sebelum dimasukkan ke dalam kolom kromatografi. Teknik ekstraksi pelarut
dan ekstraksi fase padat sangat berguna untuk mengisolasi analit dari matriks sampel
kompleks sebelum analisis kromatografi. Ekstraksi pelarut juga berguna untuk penentuan
spektrofotometri.
Ekstraksi pelarut melibatkan distribusi zat terlarut antara dua fase cair yang tidak
larut. Teknik ini sangat berguna untuk pemisahan zat organik dan anorganik yang sangat
cepat. Dalam bab ini, kami membahas distribusi zat antara dua fase dan bagaimana ini
dapat digunakan untuk membentuk pemisahan analitis. Ekstraksi fase padat adalah teknik
dimana gugus fungsi hidrofobik terikat pada permukaan partikel padat dan bertindak
sebagai fase ekstraksi.
Suatu zat terlarut S akan terdistribusi diantara dua fase (setelah dikocok dan
dibiarkan fase-fasenya terpisah) dan dalam batas-batas rasio konsentrasi zat terlarut dalam
dua fase akan menjadi konstan :

[S ]1
KD = (1)
[S ]2

dimana KD adalah koefisien distribusi dan subskrip mewakili pelarut 1 (misalnya pelarut
organik) dan pelarut 2 (misalnya air). Jika koefisien distribusi besar, zat terlarut akan
cenderung dipartisi secara kuantitatif dalam pelarut 1.
Peralatan yang digunakan untuk ekstraksi pelarut adalah corong pemisah,
diilustrasikan pada Gambar 1. Zat terlarut diekstraksi dari larutan berair ke dalam pelarut
organik yang tidak larut. Setelah campuran dikocok selama sekitar satu menit, fase
dibiarkan terpisah dan lapisan bawah (pelarut yang lebih padat) ditarik dari pemisahan.
Banyak zat yang sebagian terionisasi dalam lapisan air sebagai asam lemah. Ekstraksi
sekarang menjadi tergantung pada pH larutan. Pertimbangkan, misalnya, ekstraksi asam
benzoat dari larutan berair. Asam benzoat (HBz) adalah asam lemah dalam air dengan
konstanta ionisasi tertentu Ka (diberikan oleh Persamaan 4). Koefisien distribusi dituliskan
dengan persamaan :

[ HBZ ] e
KD = ❑
(2)
[ HBZ ] A ❑

dimana e mewakili eter dan a mewakili pelarut berair. Namun, bagian dari asam benzoat
dalam lapisan berair sebagai Bz− yang tidak dipindahkan ke eter, tergantung pada besarnya
Ka dan pada pH lapisan berair. Oleh karena itu, pemisahan kuantitatif tidak dapat dicapai
ketika berada sebagai Bz−.
1. Rasio Distribusi

Rasio distribusi merupakan rasio konsentrasi semua spesies zat terlarut dalam
setiap fase. Diberikan dengan persamaan :

D = ¿¿ (3)

Kita bisa dengan mudah memperoleh hubungan antara D dan K D dari keseimbangan yang
terlibat. Konstanta keasaman Ka untuk ionisasi asam dalam fase cair diberikan dengan
persamaan :

Ka = ¿ ¿ (4)

Sehingga,

¿ = Ka¿ ¿ ¿ (5)

Dari persamaan 2,

¿ = KD ¿ (6)

Substitusi persamaan 5 dan 6 dalam persamaan 3 :

D = KD¿¿ (7)

KD
D= Ka (8)
1+ ¿
[H ]+¿ a

Persamaan ini memprediksi bahwa ketika [H+]a Ka, D hampir sama dengan KD dan jika
KD besar, asam benzoat akan diekstraksi secara kuantitatif ke dalam lapisan eter, D
maksimum dalam kondisi ini. Sebaliknya, jika [H +] Ka, maka D berkurang menjadi KD
[H+]a/Ka yang akan menjadi kecil dan asam benzoat akan tetap berada di lapisan cair. Yaitu
dalam larutan basa, asam benzoat terionisasi dan tidak dapat diekstraksi. Sedangkan dalam
larutan asam, sebagian besar tidak terdisosiasi.
Persamaan 8, seperti Persamaan 1, memprediksi bahwa efisiensi ekstraksi tidak
tergantung pada konsentrasi asli zat terlarut. Ini adalah hal menarik dari ekstraksi pelarut,
berlaku untuk tingkat pelacak (misalnya radioaktif) dan untuk tingkat makro yang sama,
suatu kondisi yang hanya berlaku selama kelarutan zat terlarut dalam salah satu frasa tidak
terlampaui dan tidak ada reaksi samping seperti dimerisasi zat terlarut yang diekstraksi.
Jika konsentrasi ion hidrogen berubah, efisiensi ekstraksi (D) akan berubah. Pada
contoh ini, konsentrasi ion hidrogen akan meningkat dengan meningkatnya konsentrasi
asam benzoat, kecuali jika buffer asam-basa ditambahkan untuk mempertahankan
konstanta konsentrasi ion hidrogen. Tingkat dimerisasi cenderung meningkat dengan
meningkatnya konsentrasi dan berdasarkan prinsip Le Chatelier, ini akan menyebabkan
keseimbangan bergeser mendukung fase organik dengan peningkatan konsentrasi. Jadi,
efisiensi ekstraksi sebenarnya akan meningkat pada konsentrasi yang lebih tinggi.

2. Persen Diekstraksi

Rasio distribusi D adalah konstan dari rasio volume. Namun, fraksi zat terlarut
yang diekstraksi akan tergantung pada rasio volume kedua pelarut. Jika volume yang lebih
besar dari pelarut organik digunakan, lebih banyak zat terlarut harus larut dalam lapisan ini
untuk menjaga rasio konsentrasi konstan dan untuk memenuhi rasio distribusi.
Fraksi zat terlarut yang diekstraksi sama dengan milimol zat terlarut dalam lapisan
organik dibagi dengan jumlah total milimol zat terlarut. Jadi, persen diekstraksi diberikan
dengan persamaan :

[ S ]0 V
%E = x 100% (9)
0

[s ]0 V +[ S ]
0 a Va

dimana Vo dan Va adalah volume fase organik dan cair. Dapat ditunjukkan dari persamaan
ini bahwa persen yang diekstraksi terkait dengan rasio distribusi adalah :
Jika Va = V0, maka :

100 D
%E = Va (10)
D+( )
V0

100 D
%E = (11)
D+1

Dalam kasus dengan volume yang sama, zat terlarut dapat dipertimbangkan secara
kuantitatif dipertahankan dalam fase cair jika D kurang dari 0,001. Pada dasarnya
diekstraksi secara kuantitatif jika D lebih besar dari 1000. Persentase yang diekstraksi
berubah hanya dari 99,5 menjadi 99,9% ketika D ditingkatkan dari 200 menjadi 1000.

Contoh
Dua puluh mililiter larutan cair 0,10 M asam butirat dikocok dengan eter 10 mL. Setelah
lapisan dipisahkan, ditentukan dengan titrasi 0,5 mmol asam butirat tetap dalam lapisan
cair. Berapa rasio distribusinya dan berapa persen yang diekstraksi ?

Jawab :
2,0 mmol asam butirat dan 1,5 mmol diekstraksi. Konsentrasi dalam lapisan eter adalah 1,5
mmol/10 mL = 0,15 M. Konsentrasi dalam lapisan cair adalah 0,5 mmol/20 mL = 0,025
M. Oleh karena itu :
 0,15
D = =6,0
0,025
100 x 6,0
%E = 20
6,0+( )
10
= 75%

Persamaan 10 menunjukkan bahwa fraksi yang diekstraksi dapat ditingkatkan dengan

menurunkan rasio Va/Vo, misalnya, dengan meningkatkan volume fase organik. Namun,
cara yang lebih efisien untuk meningkatkan jumlah yang diekstraksi menggunakan volume
yang sama dari pelarut organik adalah dengan melakukan ekstraksi berturut-turut dengan
volume pelarut organik yang lebih kecil. Misalnya, dengan D 10 dan Va/Vo = 1, persen
yang diekstraksi adalah sekitar 91%. Penurunan Va/Vo menjadi 0,5 (dua kali lipat Vo)
akan menghasilkan peningkatan %E hingga 95%. Tetapi melakukan dua ekstraksi berturut-
turut dengan Va/Vo = 1 akan memberikan ekstraksi keseluruhan 99%.

Contoh
Kita dapat menggambarkan nilai beberapa ekstraksi dari persamaan untuk fraksi analit
yang akan diekstraksi ke dalam fase organik pada n ekstraksi berturut-turut atau bahkan
fraksi analit yang tersisa di dalam air fase setelah n ekstraksi berturut-turut :

1 Va (n−1)
E (fraksi yang diekstraksi) = Dv0 [ + ¿ ¿¿ + V a❑ (12)
DV 0 +V a ¿¿¿

(n−1)
= [ V a❑ (13)
¿¿¿

dimana n adalah jumlah ekstraksi berturut-turut, D adalah rasio distribusi dan Va dan Vo
masing-masing adalah volume fase berair dan organik.
 KEGIATAN BELAJAR 2

Klasifikasi Ekstraksi

1. Ekstraksi Pelarut Logam

Ekstraksi pelarut memiliki salah satu aplikasi yang paling penting dalam
pemisahan kation logam. Dalam teknik ini, ion logam terdistribusi dari fase berair ke fase
organik yang tidak dapat larut dalam air. Ekstraksi pelarut logam ion berguna untuk
menghilangkannya dari matriks yang mengganggu atau secara selektif (dengan bahan
kimia yang tepat) yang memisahkan satu atau sekelompok logam. Teknik ini banyak
digunakan untuk penentuan spektrofotometri ion logam sejak reagen digunakan untuk
mencapai ekstraksi sering membentuk kompleks berwarna dengan ion logam. Ini juga
digunakan dalam spektrofotometri serapan atom nyala untuk memasukkan sampel dalam
pelarut tak berair ke dalam nyala api untuk meningkatkan sensitivitas dan menghilangkan
efek matriks. Pemisahan dapat dilakukan dengan beberapa cara. Molekul organik tanpa
muatan cenderung larut dalam lapisan organik sementara anion bermuatan dari molekul
terionisasi tetap berada di lapisan berair kutub. Ion logam cenderung tidak larut dengan
baik pada lapisan organik. Agar larut, muatannya harus dinetralkan dan sesuatu harus
ditambahkan untuk menjadikannya seperti organik. Ada dua cara utama untuk melakukan
ini.

Ekstraksi Kompleks Ion-Asosiasi

Dalam satu metode, ion logam dimasukkan ke dalam molekul besar dan kemudian
bergabung dengan ion lain dari muatan yang berlawanan untuk membentuk pasangan ion
atau ion logam bergabung dengan ion lain dengan ukuran besar. Sebagai contoh, diketahui
bahwa besi (III) dapat diekstraksi secara kuantitatif dari media asam klorida menjadi dietil
eter. Ada bukti bahwa kompleks kloro besi terkoordinasi dengan atom oksigen pelarut
(pelarut menggantikan air terkoordinasi) dan ion ini berasosiasi dengan molekul pelarut
yang dikoordinasikan dengan proton :

[(C2H5)2O : H+, FeCl4[(C2H5)2O]2-]

Demikian pula, ion uranil UO22+ diekstraksi dari larutan nitrat berair menjadi isobutanol
dengan dua ion nitrat (UO22+, 2NO3−) dengan uranium sedang dilarutkan oleh pelarut
untuk membuatnya seperti pelarut. Permanganate membentuk pasangan ion dengan ion
tetraphenylarsonium [(C6H5)4As+, MnO4-] dan diekstraksi menjadi metilen klorida. Ada
banyak contoh lain dari ekstraksi asosiasi ion.
Pelarut organik terhalogenasi sering digunakan sebagai pelarut ekstraksi pilihan.
Ada kekhawatiran yang cukup besar tentang toksisitasnya dan sebagian besar laboratorium
penggunaan pelarut organik terklorinasi sedang dihilangkan. Pelarut ini cenderung lebih
polar daripada pelarut hidrokarbon dan kadang dapat diganti dengan cairan ionik yang
tidak larut dalam air.
Ekstraksi Kelat Logam

Metode yang paling banyak digunakan untuk mengekstraksi ion logam adalah
pembentukan molekul chelate dengan agen chelating organik. Agen pengkelat
mengandung dua atau lebih kelompok yang kompleks. Banyak dari reagen ini membentuk
kelat berwarna dengan ion logam dan membentuk dasar metode spektrofotometri untuk
menentukan logam. Kelat sering tidak larut dalam air dan akan mengendap. Namun,
biasanya larut dalam organik pelarut seperti metilen klorida. Banyak zat pengendap
organik digunakan sebagai zat pengekstraksi (Christian dkk, 2014).

Ekstraksi Logam Klorida dan Nitrat

Sejumlah spesies anorganik dapat dipisahkan dengan ekstraksi dengan pelarut yang
sesuai. Misalnya, ekstraksi eter tunggal dari larutan asam hidroklorat 6 M akan
menyebabkan eter lebih dari 50% ditransfer ke fase organik, termasuk besi (III), antimon
(V), titanium (III), emas (III) ), molibdenum (IV), dan timah (IV). Ion-ion lain, seperti
aluminium (III) dan kation divalen kobalt, timah, mangan, dan nikel tidak diekstraksi.
Uranium (VI) dapat dipisahkan dari unsur-unsur seperti timbal dan thorium dengan
ekstraksi eter larutan 1,5 M dalam asam nitrat dan jenuh dengan amonium nitrat. Bismut
dan zat besi (III) juga diekstraksi hingga sebagian dari medium ini (Skoog dkk, 2014).

Proses Ekstraksi untuk Chelat Logam

Sebagian besar agen chelating adalah asam lemah yang terionisasi dalam air,
proton terionisasi dipindahkan oleh ion logam ketika kelat terbentuk dan muatan pada
senyawa organik menetralkan muatan pada ion logam. Contohnya adalah
diphenylthiocarbazone (Dithizone), yang membentuk kelat dengan ion timbal :

Praktik yang biasa dilakukan adalah menambahkan agen chelating, SDM ke fase organik.
Ini mendistribusikan antara dua fase dan dalam fase air itu terdisosiasi sebagai asam
lemah. Ion logam, Mn+, bereaksi dengan nR− untuk membentuk MRn kelat yang kemudian
didistribusikan ke fase organik. Rasio distribusi diberikan oleh rasio konsentrasi logam
kelat dalam fase organik dengan konsentrasi ion logam dalam fase air. Persamaan berikut
dapat diturunkan :
D = ¿¿ (12)
dimana K adalah konstanta yang mencakup Ka SDM, Kf MRn dan KD SDM dan MRn.
Perhatikan bahwa rasio distribusi tidak tergantung pada konsentrasi ion logam, asalkan
kelarutan kelat logam dalam fase organik tidak terlampaui. SDM sering berlebihan dan
dianggap konstan. Efisiensi ekstraksi hanya dapat dipengaruhi oleh perubahan pH atau
konsentrasi reagen. Peningkatan konsentrasi reagen 10 kali lipat akan meningkatkan
efisiensi ekstraksi sama dengan peningkatan pH satu unit (penurunan 10 kali lipat dalam
[H+]). Setiap efek lebih besar seiring n menjadi lebih besar. Dengan menggunakan reagen
konsentrasi tinggi, ekstraksi dapat dilakukan dalam lebih banyak larutan asam.
Khelat dari berbagai logam diekstraksi pada nilai pH yang berbeda. Beberapa dapat
diekstraksi pada kisaran pH yang luas sedangkan yang lain hanya diekstraksi dari larutan
alkali. Setelah logam diekstraksi menjadi pelarut organik dan pelarut dipisahkan, logam
tersebut dapat diekstraksi kembali ke dalam lapisan berair, jika diinginkan pada tingkat
yang lebih rendah yang sesuai pH. Proses semacam itu sering disebut sebagai ekstraksi
balik. Dengan penyesuaian pH yang tepat, selektivitas dapat dicapai dalam ekstraksi.
Selain itu, penggunaan agen pengompleks yang mencegah satu ion logam bereaksi
dengan pengkelat agen dapat meningkatkan selektivitas. Untuk alasan toksisitas dan
pembuangan, sebagian besar metode ekstraksi pelarut organik untuk logam telah
digantikan oleh resin fase padat yang mengandung fungsi chelating. Atau metode berbasis
ICP digunakan karena memiliki sensitivitas tinggi dan sedikit gangguan dan tidak
memerlukan ekstraksi. Prinsip-prinsip ekstraksi pelarut terutama ekstraksi sekuensial,
adalah kunci untuk memahami bagaimana kromatografi bekerja, yang pada dasarnya
melalui proses pembagian sekuensial kontinu yang sama.

Gambar 2. Penggambaran skematis operasi Pelarut yang dipercepat instrumen ekstraksi.

(Courtesy Thermo Fisher Inc.) Urutan khas temporal memuat sel dan mengisi pelarut (0,5-
1 menit) panas dan bertekanan (5 mnt), ekstraksi statis (5 mnt) dan sebelumnya, siram
dengan pelarut segar (0,5 mnt), bersihkan dengan nitrogen (1–2 mnt) extract siap dalam
12–14 menit (Courtesy Thermo Fisher Scientific Inc.)
2. Ekstraksi yang Dipercepat dan Dipandu dengan Microwave

Ekstraksi pelarut yang dipercepat adalah teknik untuk ekstraksi analit yang efisien
dari matriks sampel padat menjadi pelarut. Sampel dan pelarut ditempatkan dalam wadah
tertutup dan dipanaskan 50 hingga 200◦C. Tekanan tinggi memungkinkan pemanasan di
atas titik didih dan suhu tinggi mempercepat disolusi analit di dalam pelarut. Baik waktu
ekstraksi dan volume pelarut yang dibutuhkan sangat berkurang selama ekstraksi atmosfer.
Dalam ekstraksi berbantuan gelombang mikro (MAE), pelarut dipanaskan oleh
energi gelombang mikro. Kinetika ekstraksi dipengaruhi oleh suhu dan pilihan pelarut atau
campuran pelarut. Pemanasan atmosfer untuk ekstraksi terbatas pada titik didih pelarut.
Suhu bejana tertutup pada 175 psig biasanya mencapai 150°C dibandingkan dengan titik
didih 50 hingga 80°C untuk pelarut yang biasa digunakan. Campuran pelarut dapat
digunakan selama salah satunya menyerap energi gelombang mikro. Beberapa pelarut
transparan microwave, misalnya heksana dan tidak panas, tetapi campuran heksana dan
aseton memanas dengan cepat.
Bejana tertutup harus lembam terhadap pelarut dan transparan microwave.
Beberapa bejana sampel dapat ditempatkan dalam oven pada saat yang sama untuk
beberapa ekstraksi. Ekstraksi gelombang mikro juga dapat dilakukan pada tekanan
atmosfer tanpa perlu bejana bertekanan. Siklus pemanasan dan pendinginan digunakan
untuk mencegah perebusan pelarut. Teknik ini juga mengurangi waktu ekstraksi secara
substansial.

3. Ekstraksi Fase Padat

Ekstraksi cair-cair sangat bermanfaat tetapi memiliki keterbatasan tertentu. Pelarut

ekstraksi terbatas pada yang tidak larut air (untuk sampel berair). Emulsi cenderung
terbentuk ketika pelarut dikocok dan volume pelarut yang relatif besar digunakan yang
menyebabkan masalah pembuangan limbah yang besar. Operasi sering dilakukan secara
manual dan mungkin memerlukan ekstraksi kembali. Banyak pelarut yang digunakan
untuk ekstraksi dan saat ini dianggap berbahaya. Dalam teknik ini, suatu jenis gugus fungsi
organik terikat secara kimiawi pada permukaan padat, misalnya, bubuk silika. Contoh
umum adalah ikatan rantai C18 pada silika dengan ukuran partikel pada urutan 40 μm. Ada
berbagai jenis fase yang tersedia dengan berbagai polaritas. Fase padat yang sama
digunakan dalam kromatografi cair kinerja tinggi digunakan untuk ekstraksi fase padat
kecuali dalam ukuran partikel yang lebih besar.
Fase bubuk umumnya ditempatkan dalam kartrid kecil, mirip dengan jarum suntik
plastik. Sampel ditempatkan dalam kartrid dan dipaksa melalui pendorong (tekanan
positif) atau vakum (tekanan negatif) atau dengan sentrifugasi (lihat Gambar 3). Melacak
molekul organik yang dapat diekstraksi, diprioritaskan pada kolom dan dipisahkan dari
matriks sampel. Kemudian dapat dielusi dengan pelarut seperti metanol dan akhirnya
dianalisis, misalnya, dengan kromatografi. Akan lebih terkonsentrasi sebelum analisis
dengan menguapkan pelarut. Sifat fase ekstraksi, khususnya jenis gugus fungsi terikat,
dapat bervariasi untuk memungkinkan ekstraksi berbagai kelas senyawa. Gambar 4
mengilustrasikan fase terikat berdasarkan gaya van der Waals, ikatan hidrogen dan
elektrostatik.
Ketika partikel silika terikat dengan fase hidrofobik, mereka menjadi "tahan air"
dan harus dikondisikan untuk berinteraksi dengan sampel air. Ini dilakukan dengan
melewatkan metanol atau pelarut serupa melalui sorben unggun. Pelarut menembus ke
dalam lapisan dan memungkinkan molekul air dan dianalisis berdifusi ke dalam fase
terikat. Setelah pengkondisian, air dilewatkan untuk menghilangkan pelarut berlebih
sebelum menambahkan sampel. Polystyrenedivinylbenzene atau pendukung berbasis
polimer lainnya juga umum digunakan, terutama untuk fase SPE berbasis penukar ion.
SPE yang berbasis gugus chating (iminodiacetate, 8-hydroxyquinoline) banyak digunakan
untuk ekstraksi online atau off-line dan prekonsentrasi logam bekas, misalnya dari air laut.

Gambar 3. Kartrid dan jarum suntik fase padat untuk elusi tekanan positif

Gambar 4. Ekstraksi fase padat menggunakan interaksi nonpolar, polar dan elektrostatik
(Diadaptasi dari N. Simpson, Am. Lab., Agustus, 1992, hal. 37)
 AC
Mengkondisikan sorben sebelum aplikasi sampel, memastikan retensi senyawa yang dapat
diproduksi kembali (isolat)

Penyimpanan
Isolat teradsorpsi
Konstituen matriks yang tidak diinginkan
Komponen matriks yang tidak diinginkan lainnya

Bilasan
Bilas kolom untuk menghapus komponen matriks yang tidak diinginkan
 Elusi
Isolat yang dimurnikan dan terkonsentrasi yang siap untuk dianalisis komponen, yang
tidak diinginkan tetap ada

Gambar 5. Prinsip ekstraksi fase padat (Dari N. Simpson, Am. Lab., Agustus, 1992, hlm.
37. Direproduksi dengan izin dari Amerika Laboratory, Inc.)

Gambar 5 mengilustrasikan urutan khas dalam ekstraksi fase padat. Setelah pengkondisian,
analit dan konstituen sampel lainnya diadsorpsi pada unggun ekstraksi sorben. Langkah
pembilasan menghilangkan beberapa konstituen yang tidak diinginkan, sementara elusi
menghilangkan analit yang diinginkan, mungkin meninggalkan konstituen lain di
belakang, tergantung pada kekuatan relatif interaksi dengan fase padat atau kelarutan
dalam pelarut elusi. Prosedur semacam itu digunakan untuk penentuan senyawa organik
dalam air minum dalam metode Badan Perlindungan Lingkungan (EPA).

Kartrid SPE

Sorben SPE dikemas dalam tong jarum suntik polypropylene dengan kemasan 500
mg khusus dalam 3 atau 5 mL tabung jarum suntik. Jarum suntik 1 mL lebih kecil yang
dikemas dengan 100 mg karena berkurangnya sampel dan kebutuhan pelarut dan waktu
pembersihan yang lebih cepat dan bedengan yang lebih kecil hingga 10 mg tersedia.
Kemasan yang lebih kecil tentu saja memiliki kapasitas lebih kecil. Yang lebih besar
mungkin diperlukan untuk menyiapkan volume sampel besar. Lingkungan seperti air yang
tercemar yang memiliki sejumlah besar kontaminan yang harus dihilangkan.
Kartrid SPE digunakan untuk isolasi dan konsentrasi obat dari sampel biologis dan
biasanya diproses dalam batch 12 hingga 24 menggunakan manifold vakum (Gambar 6).
Ada sistem penanganan cairan otomatis untuk meningkatkan efisiensi. Kartrid SPE
umumnya dianggap hanya untuk sekali pakai. Namun, biaya dapat menjadi masalah yang
signifikan jika sejumlah besar sampel akan diproses.

TIPS PIPA SPE

Tip pipet SPE memberikan cara yang mudah untuk memproses sejumlah kecil
sampel dan dapat digunakan untuk mempertahankan material yang tidak diinginkan atau
lebih umum untuk mempertahankan analit secara selektif dan kemudian mengelusinya
dengan pelarut. Reproduksibilitas perangkat ini sangat tergantung pada keterampilan
operator dan desain asli ini sebagian besar telah hilang. SPE ujung pipet yang ada (a)
mengandung bed sorbent monolithic berpori (tidak memerlukan dukungan bed, misalnya
Seri OMIX dari Agilent mampu menangani sampel 500 nL dan digunakan terutama untuk
pemurnian protein dan peptida), atau (B) dikemas sangat longgar. Sampel dengan pelarut
atau pereaksi lain yang ditambahkan, disedot melalui bed yang longgar yang membentuk
bubur. Udara kemudian disedot melalui bubur untuk mencampurnya dengan seksama.
Cairan tersebut kemudian dikeluarkan dan sorben mempertahankan konstituen yang tidak
diinginkan atau (c) memasang sorben di dinding bagian bawah ujung yang memungkinkan
sedikitnya 100- sampel nL untuk diproses.

Gambar 6. Manifold vakum 16-Port digunakan dengan fase padat tabung ekstraksi

SPE DISKS

Ujung pipet SPE area cross-sectional kecil cenderung tersumbat oleh sampel
protein. Jadi, ekstraktan fase padat juga tersedia dalam bentuk filter (disk ekstraksi
Empore TM) dimana 8-μm partikel silika disatukan ke dalam jaring PTFE [poli
(tetrafluoroetilen)] serat. Disk berbasis fiberglass, yang lebih kaku, juga tersedia. Disk area
cross-sectional yang lebih besar dengan kedalaman bed yang lebih pendek memungkinkan
laju aliran yang lebih tinggi untuk sampel volume besar dengan konsentrasi analit yang
rendah, biasanya ditemui dalam analisis lingkungan. Disk kurang rentan terhadap saluran
yang ditemukan dengan kartrid yang dikemas. Cenderung tersumbat jika sampel
mengandung bahan partikulat sehingga prefilter mungkin harus digunakan. Kartrid disk
juga tersedia seperti kartrid biasa.

96-TEMPAT SPE BAIK

Kromatografi cair dikombinasikan dengan spektrometri massa banyak digunakan

untuk analisis obat secara selektif dan sampel dapat dijalankan selama 1 hingga 3 menit.
Jadi, diperlukan cara pembersihan sampel yang lebih cepat untuk memproses sejumlah
besar sampel. Pelat mikrotiter banyak digunakan untuk memproses sampel dalam jumlah
besar dalam instrumen otomatis.
Sampel diproses menggunakan manifold vakum atau sentrifuga menggunakan
pembawa lempeng mikro. Kolom SPE adalah 1 hingga 2 mL, dengan 10 hingga 100 mg
pengemasan partikel sorben. Penentuan massa ditentukan oleh volume pelarut dan elusi
serta kapasitas untuk konstituen matriks analit dan sampel. Penggunaan prosedur SPE
yang optimal membutuhkan penyelidikan berbagai fase stasioner, massanya, volume
pengkondisian, beban sampel, pelarut pencuci dan elusi, dan ukuran sampel.

Sorben Lainnya untuk Ekstraksi Fase Padat

Sorben tersedia dalam rantai panjang (C20 dan C30) untuk isolasi molekul
hidrofobik. "Universal sorbents" telah dikembangkan yang akan mengubah sekelompok
senyawa yang serupa secara struktural. Contoh pada Gambar 8a adalah polimer sintetik N-
vinylpyrrolidone (bagian atas molekul) dan divinylbenzene (bagian bawah), yang
menyediakan hidrofilisitas untuk pembasahan dan hidrofobisitas untuk retensi analit. Versi
tersulfonasi (Gambar 8b) adalah sorben mode campuran yang memiliki pertukaran ion dan
sifat ekstraksi pelarut dan akan mempertahankan sejumlah obat asam, netral dan basa.

Gambar 7. Piring ekstraksi 96-Well dan manifold vakum dengan plat koleksi. (Atas
perkenan Thermo Labsystems)

Gambar 8. "Sorben universal", struktur kimia Waters 'Oasis (a) HLB dan (b) sorben dari
polimer MXC. Struktur atas dalam (b) adalah propanolol obat dasar yang menunjukkan
 interaksi obat-sorben [dari D. A. Wells, LC GC, 17 (7) (1999) 600. Diproduksi ulang
dengan izin LC.GC]

Fase Polimerik

Selain partikel SPE berbasis silika umum, pendukung berbasis polimer juga
tersedia. Ini memiliki keuntungan yaitu menjadi stabil pada kisaran pH yang luas dan tidak
memiliki residu gugus silanol (gugus hidroksil yang berada di permukaan gel silika yang
tidak dimodifikasi) yang dapat berinteraksi misalnya dengan ion logam atau spesies
kationik lainnya. Partikel-partikel itu berbentuk bulat sedangkan partikel-partikel SPE
yang berbasis silika memiliki bentuk yang tidak beraturan dan partikel-partikel polimer
telah dirancang untuk dapat dibasahi. Biasanya memiliki kapasitas lebih tinggi daripada
partikel berbasis silika.

Tahap Dual

Penggunaan dua fase yang berbeda dapat memperluas jangkauan senyawa yang
diekstraksi. Tiga jenis digunakan yaitu mode campuran, fase layered dan stacked. Dalam
mode campuran, dua jenis fase ikatan kimia dicampur bersama dalam kartrid. Contohnya
adalah campuran C8 dan partikel penukar kation. Dalam mode berlapis, kedua fase yang
berbeda dikemas satu dengan yang lain. Fase yang bertumpuk menggunakan dua kartrid
secara seri untuk menghasilkan pemisahan yang ditingkatkan. Dua mode pertama lebih
mudah disesuaikan dengan otomatisasi karena hanya satu kartrid yang digunakan.

4. Ekstraksi Mikro

Microextraction adalah teknik persiapan sampel yang disederhanakan yang

ditujukan untuk konsumsi pelarut nol atau minimum. Ekstraksi mikro hanya menggunakan
mikroliter atau volume yang lebih kecil dari media ekstraksi. Metode ekstraksi mikro
biasanya mengintegrasikan ekstraksi sampel, pengayaan dan pemurnian dalam satu
langkah tunggal dan dapat dengan mudah digabungkan dengan berbagai instrumen untuk
analisis selanjutnya.
Dibandingkan dengan konvensional atau bahkan beberapa metode persiapan
sampel yang ditingkatkan, metode ekstraksi mikro secara signifikan meningkatkan
efisiensi penggunaan sampel, mengurangi kesalahan dari prosedur multistep dan
menurunkan biaya operasi secara keseluruhan. Meskipun ada banyak format ekstraksi
mikro yang berbeda, umumnya diklasifikasikan sebagai metode berbasis padat dan
berbasis cair yang disebut ekstraksi fase padat mikro.

Mikroekstraksi Fase Solid (SPME)

SPME adalah teknik ekstraksi bebas pelarut, biasanya digunakan untuk

pengumpulan analit untuk penentuan dengan kromatografi gas atau kadang-kadang
kromatografi cair berkinerja tinggi. Gambar 9 menggambarkan rakitan SPME. Fitur utama
dari perangkat ini adalah serat ekstraksi terlindung didalamnya jarum suntik. Serat SPME
khas terbuat dari leburan silika yang dilapisi dengan lapisan tipis (7 μm hingga 100 μm)
polimer amobil atau adsorben padat atau kombinasi. Dalam larutan atau headspace (uap
dalam kesetimbangan dengan larutan dalam sistem tertutup) analit terpapar ke serat dan
mendistribusikan antara matriks sampel dan lapisan serat selama ekstraksi.
Matriks padat, cair atau gas dapat diambil sampelnya dengan SPME. Serat terpapar
pada sampel gas atau cair atau ruang di atas sampel padat atau cair untuk waktu dan suhu
yang tetap. Setelah ekstraksi, serat ditarik kembali ke jarum dan langsung ditransfer ke
port injektor GC, dimana analit secara termal diserap dan dimasukkan ke dalam kolom GC
untuk pemisahan. Untuk analisis LC, serat dapat dimasukkan ke dalam ruang yang
dirancang khusus untuk desorpsi pelarut.
Berbagai serat dan pelapis SPME tersedia dan dapat digunakan untuk menargetkan
analit yang berbeda (Tabel 1). Banyak pelapis yang mirip dengan fase diam kromatografi
gas yang tersedia. Prinsip ekstraksi didasarkan pada "like disolve like” (misalnya efisiensi
ekstraksi yang baik dapat diperoleh dengan serat dengan polaritas yang cocok dengan
analit target). Sebagai contoh, serat yang banyak digunakan didasarkan pada lapisan poli
(dimethylsiloxane) (PDMS) yang relatif nonpolar karena adanya gugus metil. Serat ini
berguna untuk pengambilan sampel senyawa volatil atau semivolatil nonpolar dan dapat
digunakan untuk menentukan komponen rasa dari minuman, makanan dan sejenisnya.
Contoh lain adalah serat dengan lapisan poliakrilat 85 m. Ini lebih polar karena adanya
gugus karboksil sehingga digunakan untuk mengekstraksi senyawa polar seperti fenol.

Gambar 9. Skema perangkat ekstraksi mikro fase padat [Dari C. L. Arthur, D. W. Potter,
K. D. Buchholz, S. Motlagh, dan J. Pawliszn, LC GC
Tabel 1. Pelapis serat SPME dan aplikasinya
Pelapisan serat Analit
Polydimethylsiloxane (PDMS) Analit non polar
Polydimethylsiloxane/Divinylbenzene Komponen polar (misalnya amina)
(PDMS/DVB)
Polyacrylate Sangat polar (Fenol)
Carboxen/ Polydimethylsiloane Gas/analit volatil
(CAR/PDMS)
Carbowax/Divinylbenzene (CW/DVB) Analit polar (misalnya alkohol)
DVB/CAR/PDMS Berbagai polaritas (baik untuk rentang C3-
C20)
Carbowax/Tempalated resin (CW/TPR) Untuk aplikasi HPLC
(diadaptasi dari catatan aplikasi Supelco)

Mikroekstraksi Fase Cair (LPME)

LPME adalah bentuk miniaturisasi ekstraksi cair-cair (LLE), biasanya

menggunakan pelarut kurang dari 10 μL. Namun, berbeda dengan LLE yang bertujuan
untuk mengekstraksi semua analit target, LPME hanya mengekstraksi sebagian kecil analit
dari matriks sampel. LPME dengan mudah dilakukan menggunakan kromatografi jarum
suntik, kolom kapiler atau hanya tabung sampel. Pengaturan LPME yang khas melibatkan
penempatan tetesan pelarut pada ujung microsyringe (yang representatif ditunjukkan pada
Gambar 10, tanpa lapisan organik terpisah tetesannya adalah pelarut organik). Setelah
ekstraksi, tetesan pelarut yang dikumpulkan biasanya ditarik kembali ke jarum suntik dan
dianalisis menggunakan instrumen kromatografi atau spektroskopi. Untuk meningkatkan
stabilitas tetesan pelarut, pelarut dapat diisi dalam segmen kecil serat berlubang misalnya,
dari polipropilen berpori dan kemudian dilekatkan pada jarum suntik untuk ekstraksi.
Pelarut yang larut dalam air seperti toluena, oktanol, oktan, heptana dan n-dodecana sering
digunakan. Campuran pelarut juga dapat digunakan dan lebih cocok dengan polaritas
analit sehingga meningkatkan efisiensi ekstraksi.
LPME dapat digunakan untuk mengekstraksi senyawa terionisasi melalui
pengaturan tiga fase yang meliputi larutan sampel (fase donor), pelarut organik dan
penurunan fase air (fase akseptor) yang dicelupkan ke dalam fase organik. Lapisan tipis
fase organik memisahkan sampel air dan fase akseptor (lihat Gambar 10). Untuk senyawa
dengan gugus fungsi asam, pH larutan sampel disesuaikan sebelum ekstraksi ke nilai
setidaknya tiga unit lebih rendah dari pKa analit. Dalam kondisi ini, analit asam dalam
bentuk terprotonasi dan dapat dengan mudah diekstraksi dengan pelarut organik. Untuk
fase akseptor, pH harus basa dan menunjukkan kelarutan yang lebih tinggi dalam fase
akseptor berair. Demikian pula untuk senyawa dengan gugus fungsi dasar, pH larutan
donor disesuaikan dengan basa dan fase akseptor menjadi asam. Proses ini
mengintegrasikan ekstraksi (dari sampel ke pelarut organik) dan ekstraksi balik (dari
pelarut organik ke fase akseptor berair) menjadi satu langkah. Tetesan air yang diperoleh
kemudian dapat dianalisis dengan menggunakan instrumen seperti HPLC atau
elektroforesis kapiler. LPME tiga fase telah digunakan untuk menentukan fenol, amina
aromatik dan residu farmasi terionisasi dari sampel air serta obat-obatan terlarang seperti
metafetamin dari sampel urin.

Gambar 10. Pengaturan ekstraksi mikro fase cair

5. Ekstraksi Fase Padat (SPNE)

SPNE adalah teknik prakonsentrasi yang muncul baru-baru ini dan dikembangkan
untuk ekstraksi air dan prakonsentrasi hidrokarbon aromatik polisiklik (PAH). Ekstraksi
PAH didasarkan pada adsorpsi PAH pada permukaan Au nanopartikel. Prosedur ekstraksi
terdiri dari pencampuran mikroliter sampel air dengan mikroliter larutan encer Au NPs
dengan diameter partikel rata-rata 20 nm. Meskipun SPNE pada awalnya dikembangkan
untuk PAH, beberapa fitur menjadikan pendekatan ini sebagai alternatif yang menarik
untuk ekstraksi umum polutan organik dalam sampel air. Ini termasuk biaya analisis yang
rendah dan penggunaan pelarut organik yang lebih rendah melalui prosedur eksperimental
yang ramah lingkungan. Volume air yang kecil diperlukan untuk ekstraksi polutan
kuantitatif yang memfasilitasi sentrifugasi simultan untuk pemantauan rutin sejumlah
sampel (Christian dkk, 2014).
Latihan

1. Apa yang dimaksud dengan koefisien distribusi dan rasio distribusi ?

2. Jelaskan metode untuk pemisahan anilin, C6H5NH2, bahan organik dari nitrobenzene,
C6H5NO2 (sangat beracun) !
3. Jelaskan dua sistem ekstraksi pelarut utama untuk ion logam. Berikan contoh masing-
masing !
4. Jelaskan proses keseimbangan yang terlibat dalam ekstraksi pelarut logam kelat !
5. Berapakah konsentrasi kelat logam terbesar yang dapat diekstraksi menjadi pelarut
organik ?
6. Jelaskan pengaruh pH dan konsentrasi pereaksi pada ekstraksi pelarut logam kelat !
7. Apa dasar dari ekstraksi pelarut yang dipercepat ?
8. Apa dasar dari ekstraksi berbantuan gelombang mikro ?
9. Apa perbedaan ekstraksi fase padat dan ekstraksi pelarut ?
10. Apakah yang dimaksud dengan microfase solid ? Bagaimana cara kerja
microextraction cair-cair dispersif ?
 DAFTAR PUSTAKA

Christian, Gary D., dkk. (2014). Analytichal Chemistry. Textbooks. Printed in the United
States of America.

Skoog, Douglas A., dkk. (2014). Fundamentals of Analytical Chemistry. Textbooks.

Printed in the United States of America.