BAB I
PENDAHULUAN
A. Latar Belakang
memerlukan makanan untuk dapat tumbuh seperti makhluk hidup pada umumnya.
senyawa kimia untuk dapat tumbuh dengan baik. Senyawasenyawa kimia tersebut
yang akan menentukan ciri khas dari masingmasing jenis bakteri berdasarkan
Mikroorganisme ada yang mempunyai ciriciri sel tumbuhan dan ada yang
mempunyai ciriciri sel binatang dan keduaduanya. Ciri utama yang membedakan
mikroorganisme tertentu dari yang ain adaah organisasi bahan selulernya, sehingga
dapat dibedakan menjadi dua kategori utama yaitu eukariotik dan prokariotik.
teliti spesies tertentu dan ciri terpenting yang dapat dilakukan dalam mengidentifikasi
dan mengkarakterisasi suatu bakteri yaitu uji fermentasi karbohidrat, uji MRVP, uji
katalase, uji polisakarida, uji produksi indol, uji hidrolisis gelatin, uji H2S motilitias, uji
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
B. Rumusan Masalah
2. Apa perubahan yang terjadi pada uji MRVP (MethylRed Voges Proskauer)?
C. Maksud Pratikum
D. Tujuan Pratikum
E. Manfaat Praktikum
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
BAB II
KAJIAN PUSTAKA
A. Teori Umum
Mikroba ada yang mempunyai ciriciri sel tumbuhan dan ada yang
mempunyai ciriciri sel binatang dan keduaduanya. Ciri utama yang membedakan
mikroba tertentu dari yang ain adaah organisasi bahan selulernya, sehingga semua
protista mempunyai dua kategori utama yaitu eukariotik dan prokariotik. Pemilihan sel
prokariotik dan eukariotik didasarkan atas penggunaan elektron mikroskop yang dapat
perubahan yang khas dan adanya seleksi terhadap bakteri tertentu, sebenarnya telah
yang dimaksud uji biokimia berikut adaah dimaksudkan untuk identifikasi secara teliti
terhadap spesies tertentu, dan ciri terpenting adalah memperhatikan reaksi ensimatis
fisiologis berdasarkan reaksi biokimia. Macam atau jenis biokimia dipengaruhi oleh
faktor atau sifat mikroorganisme, jenis media dan faktor lingkungan. (Harti, 2015)
sitrase dan moeku sitrat dan medium Simmon’s Citrate Agar dengan indikator
bromotimo bue pada pH 6,9 akan berwarna hijau dan pada pH 7,6 akan berubah
menjadi biru. Inkubasi uji sitrat dengan medium tersebut diperukan suhu 35°C selama
2448 jam. Dimana secara umum uji sitrat positif terhadap spesies dari genus
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Enterobacter, Citrobacter, Klebsiella (kecuali Klebsiella rhinoscleromatis), Proteus dan
Salmonella enteritis dan negatif untuk Salmonella typhi, S.parathypi A, S. pullorum dan
Hasil uji fermentasi karbohidrat menggunakan medium triple iron sugar yang
perubahan warna media dari merah menjadi kuning; terbentuknya gas ditandai dengan
menghasilkan enzim sistein desulfurase yang akan menghidrolisis asam amino sistein
menjadi gas H2S dan produk akhir seperti bakteri Proteus vulgaris dan Salmonella
typhimurium. Inkubasi uji hasi H2S dengan medium Sulphide indole and Motility (SIM)
sampai pH mencapai 4,5 sehingga medium akan menjadi berwarna merah dengan
adanya merah metil, uji VogesProskauer yang menunjukkan pembentukan asetil metil
seperti yang dimiliki oleh Enterococcus faecalis. Enzim yang dapat memecah senyawa
hidrogen peroksida (H2O2) dan akan membebaskan molekul oksigen. Oleh karena itu,
bila medium miring (slant culture) ditambahkan ke dalamnya hidrogen peroksida, maka
(Syauqi, 2017)
menjadi merah bila ditambahkan reagen kovak. Sedangkan bakteri yang bergerak atau
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
motil dengan tanda difusi dan penyebaran koloni serta mengeruhkan medium. (Syauqi,
2017)
Pada proses fermentasi pada medium TSIA akan dihasilkan asam format yang
bantuan enzim formate hydrogenase. Berdasarkan hasil pengamatan dari uji TSIA
tidak ditemukan medium yang terangkat atau pecah. Hal ini menunjukkan bahwa
B. Uraian Bahan
1. Glukosa Broth
Pemerian : Hablur tidak berwarna, serbuk hablur atau serbuk granul putih,
Kelarutan : Sangat mudah larut dalam air mendidih, mudah larut dalam air,
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Pemeriaan : Serbuk, kuning kemerahan hingga cokelat, bau khas tetapi
tidak busuk.
Pemerian : Berbau dan berasa pada lidah. Kaldu daging sapi konsentrat
cahaya.
Produksi : Difco TM
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Rumus Molekul : H2O
Pemerian : Cairan jernih, tak berwarna, tidak berbau, dan tak berasa.
2. Laktosa Broth
Kelarutan : Mudah larut daam air secara perlahan-lahan, praktis tidak larut
dalam etanol
Pemerian : Cairan jernih, tak berwarna, tidak berbau, dan tak berasa.
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Pepton (Ditjen POM Edisi V, 2014)
tidak busuk.
Pemerian : Berbau dan berasa pada lidah. Kaldu daging sapi konsentrat
cahaya.
Produksi : Difco TM
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
3. Mannitol Broth
Pemerian : Cairan jernih, tak berwarna, tidak berbau, dan tak berasa.
tidak busuk.
Pemerian : Berbau dan berasa pada lidah. Kaldu daging sapi konsentrat
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
pada suhu rendah dalam hampa udara sampai terbentuk residu
cahaya.
Produksi : Difco TM
4. Strarch Agar
tidak busuk.
Pemerian : Berbau dan berasa pada lidah. Kaldu daging sapi konsentrat
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
lemak, dengn cara merebus dalam air dan menguapkan kaldu
cahaya.
Produksi : Difco TM
Pemerian : Tidak berbau atau bau lemah, berasa musilago pada lidah.
Kelarutan : Tidak larut dalam air dingin, dan larut dalam air mendidih.
Produksi : Difco TM
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Rumus Molekul : I2
Rumus Molekul : K - OH
amonia
C. Uraian Sampel/Bakteri
Kingdom : Bacteria
Subkingdom : Negibacteria
Phylum : Proteobacteria
Class : Gammaproteobacteria
Order : Enterobacteria
Family : Enterobacteriaceae
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Genus : Salmonella
D. Prosedur Kerja
1. Hidrolisis Polisakarida
a. Cairkan media Strach Agar dalam penangas air, biarkan suhunya turun sampai
30-40˚C.
c. Bagilah setiap cawan petri dengan spidol menjadi sejumlah bagian bila
diperlukan.
d. Inokulasikan setiap bagian cawan petri masing-masing dengan biakan bakteri uji
tertentu.
f. Tetesi cawan petri yang berisi medium Strach Agar dengan larutan iodium dan
2. Fermentasi Karbohidrat
b. Satu seri medium tidak diinokulasikan dengan bakteri uji dan digunakan sebagai
control.
c. Tandailah setiap tabung dengan nama medium dan nama bakteri yang
diinokulasikan.
d. Amati terjadinya reaksi perubahan warna dan terbentuknya gas pada tabung
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
3. Uji TSIA
a. Diambil 1 ose biakan uji secara aseptis dengan menggunakan ose bulat yang
telah dipijarkan.
b. Goreskan di atas permukaan media agar miring TSIA, kemudian pada ujung
c. Inkubasi selama 1x24 jam dalam incubator suhu 37˚C. Untuk mengamati
perubahan warna pada bult dan slant. Kemudian lanjutkan inkubasi hingga 7 hari
5. Inokulasikan masing-masing bakteri uji ke dalam medium SIM agar tegak dengan
7. Amati terbentuknya warna hitam sepanjang tusukan pada medium sebagai tanda
8. Produksi Indol
a. Inokulasikan bakteri uji ke dalam medium tripton cair 1%. Beri kode agar tidak
tertukar.
e. Kocoklah perlahan-lahan dan biarkan tabung berada dalam posisi tegak supaya
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
f. Adanya indol dapat diketahui dengan timbulnya warna merah tua pada lapisan
9. Uji Katalase
a. Bersihkan gelas objek, teteskan beberapa tetes larutan H2O2 di atas objek
tersebut.
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
BAB III
METODE KERJA
Adapun alat yang digunakan dalam praktikum yaitu cawan petri, tabung
reaksi, spoit, kapas, lampu spiritus, korek api, ose lurus, ose bulat, plastik wrap, pipet
enterica), Laktosa Broth (LB)Glukosa Broth (GB) Manitol broth, Strach agar, Tripton
cair, MR-VP, Tripton cair, SIM, TSIA, Simmon citrit agar, Reagen KOH, Reagen
B. Cara Kerja
1. Hidrolisis polisakarida
Media starch dituangkan ke dalam cawan petri dan dibiarkan hingga memadat.
Digoreskan dengan 1 ose bakteri uji. Lalu diinkubasikan selama 48 jam pada suhu
370C. Kemudian, ditetesi cawan petri dengan larutan iodium dan diamati perubahan
yang terjadi.
2. Fermentasi karbohidrat
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Dimasukkan 1 ose bakteri uji pada masing-masing tabung reaksi yang berisi
medium glukosa, laktosa, dan sukrosa. Kecuali tabung kontrol tidak diinokulasikan
Dimasukkan 1 ose bakteri uji ke dalam medium Mr. Kemudian diinkubasikan selama
24-48 jam pada suhu 370C. Selanjutnya diamati perubahan yang terjadi.
5. Uji TSIA
Diambil 1 ose bakteri uji dengan ose bulat yang telah disterilkan. Lalu digoreskan
pada permukaan medium TSIA miring. Pada ujung goresan media ditusuk dengan
ose secara tegak lurus. Dan diinkubasi selama 24 jam pada suhu 37 0C dan diamati
Ditusukkan 1 ose bakteri uji secara tegak lurus ke dalam media SIM agar tegak,
kecuali tabung kontrol. Kemudian diinkubasikan selama 24 jam pada suhu 37 0C.
7. Produksi indol
Diinokulasikan bakteri uji ke dalam media tripton cair 1% kecuali tabung kontrol.
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
kovac ke dalam setiap tabung. Selanjutnya dikocok perlahan-lahan dan dibiarkan
tabung berada dalam posisi tegak. Dan diamati perubahan yang terjadi.
8. Uji katalase
Disiapkan objek gelas, diambil 1 ose bakteri uji dan disimpan di atas objek gelas,
Dimasukkan 1 ose bakteri uji ke dalam medium simmon kecuali tabung kontrol.
Kemudian diinkubasikan selama 24 jam pada suhu 370C. Dan diamati perubahan
yang terjadi.
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
BAB IV
A. Hasil
No Pengerjaan Hasil
Fermentasi Karbohidrat
Glukosa Broth +
1.
Laktosa Broth +
Mannitol Broth +
MRVP (MethylRed – Voges Proskauer)
2. - MethylRed +
- Voges Proskauer -
3. Uji Katalase (H2O2) +
4. Uji Polisakarida (Strach Agar) -
5. Produksi Indol (Tripton cair) -
6. Hidroisis Gelatin (Gelatin Agar) Tidak dikerjakan
H2S-Motilitas (SIM Agar)
- Indol -
7.
- BIant -
- H2S -
Uji TSIA (Triple Sugar Iron Agar)
- SIant +
8.
- BIant -
- H2S -
9. Uji penggunaan Sitrat (Simmon Citrit Agar) +
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
B. Pembahasan
mikroorganisme. Salah satunya yaitu dengan senyawa kimia yang digunakan untuk
katalase, uji polisakarida, uji produksi indol, uji H2S motilitas, uji TSIA dan uji
penggunaan sitrat.
Adapun tujuan dari praktikum ini yaitu untuk mengetahui karakteristik suatu
Pada uji fermentasi karbohidrat baik medium glukosa broth, laktosa broth, dan
mannitol broth didapatkan hasil positif pada masing-masing medium yang ditandai
dengan perubahan warna dari merah ke kuning disertai dengan terbentuknya gas pada
tabung durham.
Pada uji Mr-Vp, didapatkan hasil yaitu pada uji methyl red yang ditandai dengan
perubahan warna dari kuning ke merah yang menandakan positif dan pada uji Voges
proskauer tidak mengalami perubahan warna dari merah ke warna kehijauan yang
menandakan negatif.
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Pada uji katalase hasil yang didapatkan yaitu positif, dimana terbentuknya
Pada uji hidrolisis polisakarida yang menggunakan medium starch agar, hasil
yang didapatkan yaitu hasil negatif, dimana pada medium tidak terbentuknya zona
Pada uji produksi indol yang menggunakan medium tripton cair hasil yang
Pada uji H2S-Motilitas yang menggunakan medium SIM agar, hasil yang
didapatkan yaitu negatif pada masing-masing untuk medium. Dimana tidak terbentuk
cincin merah sebagai penanda indol, medium tidak berwarna hitam sebagai penanda
Pada pengujian TSIA yang menggunakan medium TSIA (TripIe Sugar Iron
Agar), hasil yang didapatkan yaitu slant positif, dimana terjadi perubahan warna
menjadi merah. Sementara pada blant didapatkan hasiI negatif karena tidak berwarna
merah, dan pada H2S didapatkan hasil negatif karena medium tidak berwarna hitam.
Pada uji penggunaan sitrat hasil yang didapatkan yaitu positif, dimana terjadi
perubahan warna pada medium daIam tabung reaksi yaitu dari hijau menjadi hijau biru.
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
BAB V
PENUTUP
A. Kesimpulan
medium.
2. Pada uji Mr-Vp, didapatkan hasil yaitu pada uji methyl red yang ditandai dengan
perubahan warna dari kuning ke merah yang menandakan positif dan pada uji
4. Pada uji hidrolisis polisakarida yang menggunakan medium starch agar, hasil
5. Pada uji produksi indol yang menggunakan medium tripton cair hasil yang
6. Pada uji H2S-Motilitas yang menggunakan medium SIM agar, hasil yang
7. Pada pengujian TSIA yang menggunakan medium TSIA (TripIe Sugar Iron
Agar), hasil yang didapatkan yaitu slant positif, dimana terjadi perubahan warna
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
menjadi merah. Sementara pada blant didapatkan hasiI negatif karena tidak
berwarna merah, dan pada H2S didapatkan hasil negatif karena medium tidak
berwarna hitam.
8. Pada uji penggunaan sitrat hasil yang didapatkan yaitu positif, dimana terjadi
perubahan warna pada medium daIam tabung reaksi yaitu dari hijau menjadi
hijau biru.
B. Saran
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
DAFTAR PUSTAKA
Ditjen POM, 1979. Farmakope Indonesia Edisi III. Jakarta : Kementrian Kesehatan
Republik Indonesia
Ditjen POM, 1995. Farmakope Indonesia Edisi IV. Jakarta : Kementrian Kesehatan
Republik Indonesia
Fardiaz, Srikandi. 2006. Polusi Air dan Udara. Yogyakarta : Penerbit Kansius
Press
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
LAMPIRAN
A. Foto Sampel
Suspesi bakteri SE
B. Foto Hasil
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
Uji Mr Uji Vp
C. Komposisi Medium
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
LAMPIRAN LITERATUR
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188
KARAKTERISTIK MIKROORGANISME
RIDHATUL AZIZAH
SURYA ISLAMIATI SIRMAS
15020180188