PEMBACAAN DAN PELAPORAN SEDIAAN DARAH MALARIA

SPO No. 01D

1. Tujuan

Untuk menggambarkan prosedur standar pembacaan dan identifikasi parasit malaria yang dari
pewarnaan Giemsa. Identifikasi spesies dan tahapan parasit malaria dan penentuan kepadatannya
sangat penting untuk manajemen klinis pasien malaria, uji efikasi obat, survei, dan kontrol epidemiologi
malaria program.

2. Alat dan Bahan

 Mikroskop standar dengan lensa okuler 10x perbesaran dan lensa objektif 10x, 40x, dan 100x;
 SD yang telah diwarnai dengan Giemsa;
 Minyak imersi (Lihat SPO No. 4: Uji Kualitas Minyak Imersi);
 Tisu lensa;
 Logbook / buku register malaria;
 2 buah tally counter;
 Formulir hasil laboratorium pasien;
 Alat tulis;
 Kalkulator untuk menghitung jumlah parasit

3. Prosedur

Diagram Alir Deskripsi Aktivitas

1. Siapkan SD yang akan dibaca dan letakkan
di atas meja sediaan mikroskop.
2-3. Teteskan minyak imersi ke atas SD tebal
pada tanda X.
4-6. Periksalah SD dengan pembesaran 100x
sampai eritrosit terlihat jelas. Lakukanlah
secara sistimatis seperti pada gambar hingga
minimal 100 lapangan pandang.
SD tebal berfungsi untuk menemukan parasit
dan memastikan ada tidaknya infeksi campur.
7. Siapkan SD yang akan dibaca dan letakkan
di atas meja sediaan mikroskop.
8-9. Teteskan minyak imersi ke atas SD tebal
pada tanda X.
10-15. Periksalah SD dengan pembesaran 100x
sampai eritrosit terlihat jelas. Lakukanlah
secara sistimatis seperti pada gambar hingga
minimal 100 lapangan pandang, bahkan dapat
dilihat hingga 400 lapangan pandang.
SD tipis berfungsi untuk mengkonfirmasi
spesies parasit dan stadium parasit.
Perbedaan pembacaan SD tebal dan tipis:
SD tebal
Pembacaan SD tebal.
1. SD diletakkan pada meja sediaan mikroskop.
2. Lihat SD dengan lensa objektif 10x dan fokuskan
lapangan pandang pada bagian tepi SD tebal
(tanda X pada gambar).
3. Teteskan minyak imersi pada bagian bertanda X
(Lihat SPO No. 03: Uji Kualitas Minyak Imersi).
4. Ganti lensa objektif dengan pembesaran 100x.
5. Fokuslah ke lapangan pandang dengan memutar
mikrometer sampai eritrosit terlihat jelas (lihat
gambar).
6. Pemeriksaan rutin SD tebal dinyatakan negatif
apabila tidak ditemukan parasit pada 100
lapangan pandang. Bila ditemukan parasit,
pemeriksaan dilanjutkan dengan 100 lapangan
pandang untuk memastikan ada tidaknya infeksi
campur.
Pembacaan SD tipis.
7. SD diletakkan pada meja sediaan mikroskop.
8. Lihat SD dengan lensa objektif pembesaran 10x
dan fokuskan lapangan pandang pada bagian
yang bertanda X.
9. Teteskan 1 tetes minyak imersi pada bagian yang
bertanda X (Lihat SPO No. 03: Uji Kualitas
Minyak Imersi).
10. Ganti lensa objektif dengan pembesaran 100x.
11. Fokuskan lapangan pandang dengan memutar
micrometer sampai eritrosit terlihat jelas.
12. Periksa SD dengan sistematis (lihat gambar).
13. Pemeriksaan dilakukan sampai 100 lapangan
pandang untuk menentukan spesies, dapat
dilihat hingga 400 lapangan pandang.
14. SD tipis digunakan untuk mengkonfirmasi
spesies parasit dan stadium parasit.
 15. Pembacaan di SD tipis.
a. Sel darah merah (eritrosit): 5 juta/µl
Hasil Pemeriksaan
Ditemukan Parasit Malaria
Tidak
Ditemukan Ʃ leukosit Ʃ Parasit
Parasit Pf Pv Po Pm Mix Pk Stadium
Malaria
b. Sel darah putih (leukosit): 6-8 ribu/µl

SD tipis
B1. Leukosit multilobul (neutrophil,
eosinophil, basofil)
B2. Leukosit non-multilobul (monosit,
limfosit)
c. Trombosit

d. Stadium trofozoit: stadium yang paling

umum ditemukan dan disebut stadium
cincin. Warnanya bervariasi dari kuning
pucat hingga coklat kehitaman.

e. Stadium skizon: inti membelah secara

aseksual tanpa melibatkan kelamin jantan
dan betina.

16-20. Jumlah parasit dihitung berdasarkan

jumlah leukosit pada SD tebal.
a. Jika tidak ditemukan parasit malaria:
 1 tally counter digunakan untuk f. Stadium gametosit: stadium seksual yang
menghitung lapangan pandang akan menjadi kemalin jantan dan betina.
 1 tally counter lainnya digunakan Bentuknya dapat bulat atau seperti pisang
untuk menghitung leukosit. tergantung spesies.
b. Jika ditemukan parasit malaria:
 1 tally counter digunakan untuk
menghitung jumlah leukosit
 1 tally counter lainnya digunakan
untuk menghitung jumlah parasit
 c. Jumlah standar leukosit dalam darah
adalah 8000, jika ada pemeriksaan
darah dan diketahui jumlah leukosit
dalam darah yang sebenarnya, angka
tersebut lah yang digunakan dalam
perhitungan
d. Gametosit dan skizon juga
diperhitungkan dalam perhitungan
jumlah parasit
Menghitung Jumlah Parasit
16. Jumlah parasit/μl darah dihitung berdasarkan
jumlah leukosit pada SD tebal (standar =
8,000/μl). Untuk penghitungan parasit
diperlukan 2 buah tally counter. Satu tally
counter untuk menghitung parasit, dan yang
lainnya untuk menghitung leukosit.
17. Bila pada 200 leukosit ditemukan 100 parasit
atau lebih, catat hasilnya per 200 leukosit.
18. Bila pada 200 leukosit hanya ditemukan 99
parasit atau kurang, lanjutkan pemeriksaan
sampai menjadi 500 leukosit, catat hasilnya per
500 leukosit.
19. Jadi jumlah parasit dalam 1 μl darah:

20. Apabila penghitungan parasit dilakukan

terhadap 200 leukosit maka jumlah parasit
dikalikan 40. Bila penghitungan parasit dilakukan
terhadap 500 leukosit, jumlah parasit dikalikan
16.
21. Catat spesies dan tahapan yang diobservasi,
serta contoh perhitungan jumlah parasit dalam
darah (lihat penjelasan di bawah)
21. Catat spesies dan tahapan yang
diobservasi, serta contoh perhitungan
jumlah parasit dalam darah

Setelah pemeriksaan sediaan darah dilakukan hasilnya dilaporkan dalam bentuk urutan dan format
sebagai berikut (Lampiran):
1. Wilayah, Provinsi atau kecamatan dimana pemeriksaan dilakukan
2. Alamat lengkap pasien (jalan, RT/RW, dsb)
3. Nama, umur dan jenis kelamin pasien
4. Kode SD
5. Hasil pemeriksaan:
a) Tidak ditemukan parasit malaria
b) Ditemukan parasit malaria
 Spesies parasit malaria
 Stadium parasit malaria
 Jumlah parasit malaria

Contoh perhitungan jumlah parasit:

1. Contoh 1.
 Jumlah tropozoit Plasmodium falciparum dalam sediaan darah = 155
 Jumlah leukosit dalam sediaan darah = 208
  Hitung parasit:
 155 / 208 x 8000 = 5962 parasit/µL darah
2. Contoh 2.
 Jumlah gametosit P. falciparum + trofozoit P. vivax = 360 parasit (semua stadium)
 Jumlah leukosit dalam sediaan darah = 202
 Hitung parasit:
 360 / 202 * 8000 = 14257 parasit/µL darah

4. SPO Terkait
 SPO No. 04: Uji Kualitas Minyak Imersi

5. Daftar Pustaka
 Kementerian Kesehatan RI, Ditjen P2P, Direktorat P2PTVZ. 2016. Modul Peningkatan Kemampuan
Teknis Mikroskopis Malaria.
 Kementerian Kesehatan RI, Ditjen P2P, Direktorat P2PTVZ. 2017. Pedoman Teknis Pemeriksaan
Parasit Malaria.

Contoh tabel pelaporan hasil pemeriksaan malaria (Lampiran)

 Hasil Pemeriksaan Hitung Parasit
Umur
Ditemukan Parasit Malaria (leukosit standar
No. Ʃ Tidak
= 8000)
No. Tanggal Register Nama Pasien Alamat Pasien Kode SD Lapangan Ditemukan Ʃ leukosit Ʃ Parasit Keterangan
Rumus:
Lab L P Pandang Parasit Pf Pv Po Pm Mix Pk Stadium
Ʃ parasit /
Malaria
Ʃ leukosit * 8000
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25