MAKALAH

Mikro propagasi dan analisis profil protein oleh SDS-PAGE dari

Gracilaria changii (Rhodophyta, Solieriaceae)

MATA KULIAH
BIOLOGI MOLEKULER
KELOMPOK 03

1. EMRE ANWAR SIDIQ G0C221009

2. WIDIAVIKA MAULIDA G0C221015
3. SYAFFARINA WAHYU AZMI G0C221018
4. ALIF FAHRI G0C221026

UNIVERSITAS MUHAMMADIYAH SEMARANG

FAKULTAS KEPERWATAN DAN KESEHATAN JURUSAN
TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIK
TAHUN 2021/2022
i
Page

i
 ABSTRAK

Rumput laut Gracilaria changii terutama penting sebagai sumber agar-agar dengan
aplikasi luas dalam industri makanan. Tingginya permintaan agar-agar menyebabkan
penipisan G. changii secara bertahap dalam sumber daya alam. Pembentukan budaya in vitro
G. changii memiliki peran penting dan memungkinkan eksplantasi G. changii tumbuh secara
optimal dalam kondisi terkendali untuk menyediakan pasokan bibit yang konstan,
berkelanjutan dan cukup untuk pertanian Gracilaria. Penelitian ini berfokus pada kultur
mikropropagasi G. Changii di mana berbagai eksogen ous factor sinfluencing sea weed
growth werein vestigated:strength of chosen medium Provasoli's enriched seawater (PES),
jenis dan konsentrasi pupuk/biostimulan, suplementasi zat pengatur pertumbuhan tanaman
dan salinitas air laut. Hasilnya dipresentasikan dalam tingkat pertumbuhan harian eksplan
dan analisis data dilakukan dengan menggunakan ANOVA satu arah. Hasilnya
menunjukkan tingkat pertumbuhan G. changii yang tinggi di 25% PES ditambah dengan
5mgL−1 AMPEP, dan salinitas air laut masing-masing berkisar antara 30 dan 40ppt. Profil
protein dari G. changii yang dikultur jaringan dan pertanian yang dibudidayakan diproduksi
oleh elektroforesis gel natrium dodecyl sulfat-poliakrilamida (SDS-PAGE). Hasilnya
menunjukkan tidak ada perbedaan yang luar biasa dalam profil protein dan menunjukkan
kesesuaian kondisi kultur untuk pertumbuhan G. changii. © 2015 Penulis. Diterbitkan oleh
Elsevier B.V. Ini adalah artikel akses terbuka di bawah lisensi CC BY

ii
Page

ii
 KATA PENGANTAR

Dengan menyebut nama Allah SWT yang Maha Pengasih lagi Maha
Penyayang.

Kami panjatkan puja dan puji syukur kehadirat Allah SWT atas segala
karunia dan rahmat yang telah diberikan-Nya sehingga makalah ini dapat tersusun
hingga selesai. Shalawat dan salam tetap tercurahkan kepada Rasulullah dan
junjunan kita Nabi Muhammad SAW.

Makalah ini telah kami susun untuk memenuhi salah satu tugas mata kuliah.
Dalam penyusunannya kami telah berusaha semaksimal mungkin dan mendapatkan
bantuan dari berbagai pihak sehingga dapat memperlancar pembuatan makalah ini.
Untuk itu kami menyampaikan banyak terima kasih kepada semua pihak yang telah
berkontribusi dalam pembuatan makalah ini.

Terlepas dari semua itu, kami menyadari sepenuhnya bahwa masih ada
kekurangan baik dari segi susunan kalimat maupun tata bahasa dan urutan
pembahasannya. Oleh karena itu dengan tangan terbuka kami menerima saran dan
kritik dari pembaca dan tim pengajar agar kami dapat memperbaiki makalah ini.

Akhir kata kami berharap semoga makalah tentang “dapat memberikan

manfaat dan menambah khazanah ilmu maupun inspirasi terhadap pembaca.

Semarang, 01 Juni 2022

Penulis
iii
Page

iii
 DAFTAR ISI

HALAMAN JUDUL ..........................................................................................................i

ABSTRAK...........................................................................................................................ii

KATA PENGANTAR.........................................................................................................iii

DAFTAR ISI.......................................................................................................................4

BAB 1 PEMBAHASAN.....................................................................................................5

A. Pendahuluan.......................................................................................................5
B. Metode...............................................................................................................6
2.1 Persiapan budidaya axenic...........................................................................6
2.2 Pengaruh faktor eksogen terhadap pertumbuhan G. Changii......................7
2.3 Profil protein oleh SDS-PAGE....................................................................8
C. Hasil dan Pembahasan.......................................................................................10
3.1. Pengaruh kekuatan PES..............................................................................10
3.2. Pengaruh pupuk/biostimulan......................................................................11
3.3. Efek fitoregulator........................................................................................12
3.4. Toleransi salinitas.......................................................................................12
3.5. Analisis profil protein oleh SDS-PAGE.....................................................14
D. Kesimpulan........................................................................................................15

DAFTAR PUSTAKA..........................................................................................................16
iv
Page

iv
 BAB 1

PEMBAHASAN

1. Pendahuluan

Aplikasi hidrokoloid yang sedang berkembang, seperti agar,rageenan dan

alginat, dalam industri makanan dan hidrokoloid lainnyaindustri terkait telah
menyebabkan naiknya nilai ekonomiganggang merah (Bixler dan Porse, 2011;
McHugh, 2003; Pickering et al.,2007). Di antara hidrokoloid, agar, yang terutama
diekstraksi dariGracilaria, Gelidium, Pterocladia, Gracilariopsis dan Hydropuntia
sea-gulma, ditandai dengan harga rata-rata tertinggi USD 18 kg−1pada tahun
2009 (Bixler dan Porse, 2011). Agar-agar food grade diekstrak dariRumput laut
Gracilaria adalah yang paling disukai di antara agarophytesdan tercatat untuk
sekitar 80% dari pasokan agar-agar dunia (Bixler andPorsi, 2011; Zemke-White
dan Ohno, 1999).Meningkatnya permintaan agar-agar telah menyebabkan
penipisan yang meluasspesies Gracilaria liar, yang sering diperburuk olehpanen
yang berlebihan dan praktik pertanian yang buruk. Teknologi sepertibudidaya in
vitro dan sporulasi sedang dikembangkan untuklebih meningkatkan produksi
rumput laut Gracilaria.

Proses budidaya in vitro dapat dipengaruhi oleh endogen danfaktor eksogen.

Faktor endogen meliputi karakteristikeksplan seperti umur, sumber, tahap
perkembangan dan fisiologikeadaan ical, sedangkan faktor eksogen termasuk
salinitas, radiasi,fotoperiode, suhu, pH dan komposisimedia (Yokoya
andYoneshigue-Valentin, 2011).Tingkat pertumbuhan yang lebih tinggi dapat
dicapai dengan memantau dan mengendalikan faktor abiotik yang diketahui
mempengaruhi pertumbuhan spesies (Choi et al., 2006; Dawes et al., 1999; Kakita
dan Kamishima, 2006; Yu et al., 2013). Akibatnya, jumlah yang lebih besar bibit
dapat diproduksi dalam waktu yang lebih singkat, sehingga mendukung produksi
rumput laut secara terus menerus untuk tujuan komersial, sambil melestarikan
populasi rumput laut alami (Yokoya dan Yoneshigue-Valentin, 2011). Kultur
5
Page

jaringan dan mikropropagasi teknik gation juga memungkinkan perbaikan dan

5
seleksi genetik bibit unggul yang akan dilakukan yang pada akhirnya dapat
diterapkan untuk budidaya komersial (Baweja et al., 2009). Di antara 22 spesies
rumput laut Gracilaria yang ditemukan di Malaysia, G. changii telah terbukti
potensinya dalam budidaya laut (Lim dan Phang, 2004; Phang et al., 1996).
Spesies ini dapat ditemukan melimpah di negara-negara hutan hujan tropis seperti
Malaysia dan Thailand (Sasidharan et al., 2008). G. changii dilaporkan
menghasilkan kualitas tinggi agar-agar dan oleh karena itu sangat dituntut untuk
industri produksi agar percobaan (Chan et al., 2004).

Beberapa parameter eksogen diselidiki untuk meningkatkan laju

pertumbuhan mikropropagasi G. changii, yaitu. kekuatan PES media, jenis dan
konsentrasi pupuk/biostimulan, konsentrasi zat pengatur tumbuh dan salinitas.
Selain itu, profil protein dari budidaya jaringan dan budidaya pertanian G. changii
diproduksi dan dibandingkan untuk menguji efek dari berbagai lingkungan
budaya pada ekspresi protein mereka. yang dihasilkan hasilnya selanjutnya dapat
digunakan untuk meningkatkan produksi G. changii bibit untuk pertanian
komersial.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1. Persiapan budidaya axenic

Budidaya pertanian laut Rumput laut G. changii komersial yang sehat dan bebas
penyakit dikumpulkan dari Semporna, Sabah dan segera dipindahkan ke Institut
Penelitian Bioteknologi, Universitas Malaysia Sabah. Setelah tiba, sampel
dibersihkan untuk menghilangkan alga epifit dan dibilas dengan air laut yang
diautoklaf. Sterilisasi permukaan dilakukan menurut Yong et al. (2014a). Sampel
diinkubasi dalam larutan antibiotik: 100 mg L-1 penisilin G dan 100 mg L-1
streptomisin sulfat dalam 50% media air laut (PES) yang diperkaya Provasoli
(Provasoli, 1968) selama 48 jam. Sampel kemudian dicuci dengan 3,0 g L-1
povidone iodine dan 15% etanol selama 30 detik, diikuti dengan pembilasan
dengan air laut yang diautoklaf. Rumput laut tersegmentasi dengan panjang 10 cm
6
Page

dan ditempatkan dalam fotobioreaktor yang dikembangkan menurut Yong et al.

6
(2014a) dengan air laut yang diautoklaf di bawah fotoperiode 12 jam dan suhu 25
± 1 C.

2.2. Pengaruh faktor eksogen terhadap pertumbuhan G. changii

Empat faktor eksogen yang berbeda: kekuatan PES, pupuk komersial/biostimulan,

zat pengatur tumbuh, dan salinitas dipelajari untuk memahami pengaruhnya
terhadap pertumbuhan G. changii in vitro. Segmen rumput laut berukuran sekitar
5 mm (0,02 g) digunakan sebagai bahan eksplan untuk setiap percobaan.
Sebanyak 5 eksplan dikultur dalam wadah kultur Fernbach dengan 100 mL media
untuk setiap kondisi percobaan. Percobaan dilakukan dalam rangkap tiga.

a) Lima konsentrasi PES yang diuji: 0, 25, 50, 75, dan 100%. Air laut
yang diautoklaf hanya digunakan sebagai kontrol. Kekuatan medium yang
dioptimalkan kemudian digunakan untuk melakukan studi optimasi
parameter berikutnya.

b) Tiga pupuk atau biostimulan ekstrak rumput laut coklat komersial:

bubuk ekstrak tumbuhan laut Acadian (AMPEP), GF600 (GF), dan ekstrak
rumput laut alami Gofar (NSE) diuji secara individual pada konsentrasi
yang berbeda dari 5, 10, dan 15 mg L−1 dalam media PES yang
dioptimalkan. Media kultur tanpa pupuk/biostimulan digunakan sebagai
kontrol. Konsentrasi optimal dari pupuk/biostimulan terpilih kemudian
digunakan untuk studi optimasi parameter berikutnya.

c) Kombinasi asam fenilasetat (PAA) dan 6-bensilaminopurin (BAP)

dalam rasio konsentrasi yang berbeda diuji dalam PES yang dioptimalkan
dan media pupuk/biostimulan. Studi faktorial dilakukan pada rentang
konsentrasi 0, 0,1, 0,3, dan 0,5 mg L−1. Media kultur tanpa fitoregulator
digunakan sebagai kontrol. Konsentrasi yang dioptimalkan dari zat
pengatur tumbuh yang dipilih kemudian diterapkan untuk uji salinitas.
7
Page

7
 d) Kondisi salinitas yang berbeda: 0, 10, 20, 30, dan 40 ppt diuji pada
media PES yang dioptimalkan, pupuk/biostimulan, dan media suplemen
pengatur tumbuh. Eksplan diberi perlakuan selama 4 minggu pada setiap
kondisi percobaan. Media kultur diganti seminggu sekali dan bobot
eksplan dicatat. Tingkat pertumbuhan harian G. changii ditentukan
menurut Yong et al. (2013b) menggunakan rumus GR = [(Wt/W0)1/t -1] ×
100% dimana W0 adalah berat segar awal, dan Wt adalah berat segar akhir
eksplan setelah t hari kultur. Analisis varians satu arah (ANOVA)
dilakukan untuk setiap kelompok perlakuan untuk memverifikasi apakah
perbedaan antara sampel kontrol dan sampel yang diberi perlakuan
signifikan secara statistik. Analisis statistik dilakukan dengan
menggunakan software paket statistik SPSS versi 16, (SPSS, Chicago, IL).

2.3. Profil protein oleh SDS-PAGE

Eksplan G. changii dikultur dalam media PES 25% yang dilengkapi

dengan 5 mg L−1 AMPEP di bawah salinitas 30 ppt selama 14 hari. Media kultur
diganti setiap minggu. G. changii yang dibudidayakan di lahan dikumpulkan dari
lokasi yang sama dan tidak mengalami kondisi kultur in vitro. Prosedur analisis
dilakukan menurut Yong et al. (2013a). Eksplan dari kultur jaringan dan budidaya
pertanian G. changii ditimbang dan dihomogenkan, masing-masing, dalam
nitrogen cair dengan mortar dan alu yang telah dibekukan. Buffer sampel
ditambahkan dengan perbandingan berat sampel terhadap buffer sampel adalah
3:1. Kira-kira, 330 mL buffer sampel terdiri dari 0,5 M Tris–HCl (pH 6,8), 20,2%
(v/v) gliserol, 0,0001% (b/v) (bromophenol blue), 0,04% (b/v) SDS, 0,03% (b/v)
dithiothreitol (DTT) dan 0,04% (v/v) 2-mercaptoethanol ditambahkan ke 1 g
masing-masing sampel. Supernatan dari setiap sampel dikumpulkan dan
dipindahkan ke tabung baru setelah sentrifugasi pada 10.000 × g selama 2 menit.
Supernatan kemudian direbus pada suhu 95 C selama 5 menit. Sampel yang
8

direbus disimpan dalam es sebelum dimasukkan ke dalam gel.

Page

8
Gel pengencer 11,25% disiapkan sesuai dengan Laemmli (1970) yang
mengandung 1,5 M Tris-HCl (pH 8,8), 20% SDS, 10% amonium persulfat dan
TEMED. Gel penyusun (4,8%) dibuat menggunakan 0,5 M Tris–HCl (pH 6,8),
20% SDS, 10% amonium persulfat dan TEMED. Elektroforesis dilakukan pada
150 V selama 9 jam menggunakan Hoefer SE600 Ruby Standard Vertical
Electrophoresis Unit (Amersham Biosciences) dengan menjalankan penyangga
yang terdiri dari 25 mM basa Tris, 192 mM glisin dan 3 mM SDS. Menggunakan
penanda protein ditentukan oleh Nacalai Tesque. Gel diwarnai dengan 0,5%
Coomassie Brilliant Blue R-250 dalam metanol 45% (v/v), 10% (v/v) asam asetat
selama satu jam dan didestained selama 12 jam dalam metanol 20% (v/v) dan
10% (v/v) asam asetat. Gel dicuci dengan air suling sampai jernih sebelum dilihat.
Terakhir gel dilihat dan difoto dengan Alpha Innotech Alphaimager HP
MultiImage II.

9
Page

9
3. Hasil dan diskusi Respon

pertumbuhan rumput laut pada parameter yang diuji ditemukan variabel dan
pertumbuhannya tergantung pada parameter eksogen dievaluasi.

3.1. Pengaruh kekuatan PES

G. changii explants yang dikultur pada 25% PES yang diperkaya air laut
umumnya tumbuh lebih baik dan menunjukkan tingkat pertumbuhan tertinggi
(5,52±0,23% hari−1) (Gbr. 1a). Tingkat pertumbuhan terendah diperoleh dari
eksplan yang dibudidayakan di media yang diperkaya PES 50 dan 75% (masing-
masing 0,71±0,29% hari−1 dan 0,95±0,25% hari−1). Kekuatan PES yang rendah
juga ditemukan lebih cocok untuk spesies Gracilaria dalam penelitian sebelumnya
seperti yang dilaporkan oleh Ursi et al. (2008). Karya ini menunjukkan bahwa
efek promosi pertumbuhan terlihat menggunakan konsentrasi PES yang lebih
rendah. Ferreira et al. (2006) melaporkan bahwa tingkat pertumbuhan yang lebih
tinggi diamati untuk kekuatan rendah media seperti PES. Sebagian besar solusi
yang diperkaya dikembangkan untuk ganggang beriklim sedang sebagai mereka
terpapar konsentrasi nutrisi yang tinggi di laut beriklim sedang. Namun, G.
changii adalah spesies rumput laut asli di Malaysia dan beradaptasi dengan air
oliogotrofik tropis yang mengandung konsentrasi nutrisi yang lebih rendah
dibandingkan dengan laut beriklim sedang (Eppley, 1972; Phang, 2006). Dilusi
media PES terbukti ideal untuk mencapai tingkat pertumbuhan yang lebih baik
untuk G. changii. Tingkat kelangsungan hidup eksplan G. changii untuk tes ini
adalah 100% dan tidak ada perbedaan morfologis yang jelas atau kelainan yang
diamati pada eksplan.
10
Page

10
3.2. Pengaruh pupuk/biostimulan

Tingkat pertumbuhan harian yang dihitung pada berbagai jenis

pupuk/biostimulan dan konsentrasinya mengungkapkan bahwa 5mgL−1 AMPEP
optimal untuk pertumbuhan eksplan G. changii (4,72±0,44% hari−1), diikuti oleh
5mgL−1 GF, kontrol, dan 15mgL−1 NSE (4,62±0,88% hari−1, 3,73±0,58%
hari−1, dan 3,60±0,45% hari−1, masing-masing), seperti yang ditunjukkan pada
Gambar. 1b. Namun, tidak ada perbedaan yang signifikan pada pertumbuhan
eksplan antara perlakuan 5mgL−1 AMPEP dan 5mgL−1 GF. Aplikasi pupuk dan
kompleks organik dalam budidaya rumput laut memiliki efek positif yang
menjanjikan pada pertumbuhan (Borlongan et al., 2011; Garcia-Reina et al., 1991;
Hurtado et al., 2009; Loureiro dkk., 2010; Yong et al., 2014a,b; Yunque dkk.,
2011). Pupuk terdiri dari makro dan mikronutrien yang penting untuk
pertumbuhan alga merah (Hurtado et al., 2009). Ekstrak rumput laut coklat
komersial telah diperiksa mengandung auksin (Crouch et al., 1992), sitokinin
(Stirk dan Staden, 1997) dan regulator pertumbuhan tanaman lainnya yang
seharusnya meningkatkan pertumbuhan positif (Crouch dan Staden, 1993).
11

Hormon pertumbuhan alami dalam makroalagal, seperti poliamin, putrescine,

Page

spermidine dan spermine, adalah found to promote callus formation and

11
regeneration in in vitro cultivated seaweed (Baweja et al., 2009). AMPEP contains
nutrients of nitrogen, asam fosfat dan kalium larut (K2O) yang mendukung
pertumbuhan kalus dan inisiasi tunas (Hurtado et al., 2009) dan berpotensi
menghambat pertumbuhan beberapa epifit (Loureiro et al., 2010).

3.3. Efek fitoregulator

Anehnya, efek phytoregulators pada in vitro G. changii dapat diabaikan. Hasil

penelitian menunjukkan bahwa penerapan PAA dan BAP tidak meningkatkan laju
pertumbuhan G. changii dalam kombinasi konsentrasi yang diuji. Tingkat
pertumbuhan harian tertinggi sebesar 6,04±1,03% hari−1 diamati dalam eksplan
kontrol (Gbr. 1c). Banyak penelitian telah dilakukan pada aplikasi phytoregulators
pada spesies alga merah tetapi penggunaan phytoregulators masih tetap tidak
jelas. Kinetin terbukti paling efisien dalam pertumbuhan G. tenuistipitata
sementara respons terbaik G. perplexa diamati dengan kombinasi IAA, 2,4-D dan
kinetin (Yokoya et al., 2004). Hayashi et al. (2008) dan Yong et al. (2014a)
melaporkan respons positif Kappaphycus alvarezii terhadap penambahan
phytoregulators di media budaya. Namun, dengan praktik G. changii dalam
penelitian ini, efeknya tidak signifikan. Hasil serupa diamati dalam G. textorii
yang tidak merespon phytoregulators (Huang dan Fujita, 1997). Efek dari
phytoregulators lain dan kombinasinya dengan rentang konsentrasi yang lebih
luas pada pertumbuhan spesies Gracilaria layak untuk diselidiki di masa depan

3.4. Toleransi salinitas

Semua eksplan G. changii tumbuh antara 10 dan 40ppt dan pertumbuhan optimal
diamati dalam kisaran salinitas antara 30 dan 40ppt. Tingkat pertumbuhan
maksimum pada 30 dan 40ppt masing-masing adalah 6,66±1,50% dan
6,65±1,70%, (Gbr. 1d). Saat ini studi tentang toleransi salinitas disepakati dengan
temuan sebelumnya pada delapan spesies Gracilaria dengan pertumbuhan optimal
pada 35ppt (Raikar et al., 2001). Menurut Bird dan McLachlan (1986), genus
12

Gracilaria dari rentang geografis yang luas tumbuh dengan baik pada salinitas dari
Page

15 hingga 60ppt tetapi secara optimal pada salinitas sekitar 30ppt. Dalam

12
 penelitian ini, paparan eksplan terhadap
salinitas yang lebih rendah (0-20ppt) mengakibatkan pengurangan pertumbuhan
dan karakteristik pertumbuhan yang tidak sehat dengan kualitas kultur yang
memburuk (peningkatan tingkat pemutihan). Tingkat kelangsungan hidup eksplan
di bawah salinitas rendah (0-20ppt) adalah nol setelah 14 hari paparan. Salinitas
dilaporkan menjadi salah satu faktor yang mempengaruhi pertumbuhan rumput
laut yang dibudidayakan (Kaliaperumal et al., 1993). Salinitas memberikan
pengaruh kuat pada kapasitas fotosintesis maksimum rumput laut (Ding et al.,
2013; Shameel, 1980; Wong dan Chang, 2000). Salinitas rendah dapat
menyebabkan stres yang menyebabkan berkurangnya efisiensi fotosintesis
(Beauchamp, 2012), ), menyebabkan penurunan tingkat pertumbuhan, yang dapat
dijelaskan melalui penghambatan pembelahan sel selama paparan yang lama
13

terhadap salinitas rendah dan kemudian menyebabkan pertumbuhan terhambat

Page

(Graham dan Wilcox, 2000)

13
3.5. Analisis profil protein oleh SDS-PAGE

Tidak ada perubahan visual dalam profil protein antara G. changii yang
dipropagasi mikro dan pertanian yang dibudidayakan diamati (Gbr. 2). Kesamaan
besar diperoleh di antara pola pita utama, variasi pita angka, intensitas pita dan
pola pita, dan tidak ada protein yang diinduksi stres yang diamati. Kesamaan yang
tinggi dalam profil protein antara mikropropagasi dan pertanian yang
dibudidayakan G. changii menunjukkan bahwa eksplan tidak sensitif terhadap
tekanan karena lingkungan yang berbeda. Komposisi rumput laut dapat bervariasi
bahkan dalam spesies yang sama, di bawah lingkungan yang berbeda (media dan
kondisi budaya yang berbeda), menyebabkan serangkaian ekspresi protein yang
berbeda (Contreras et al., 2010; Mahong et al., 2012; Tran et al., 2009; Wang et
al., 2004; Wong et al., 2006; Yong et al., 2013a; Yotsukuraetal.,2012). Organisme
thedifferenceinproteinprofileofan dapat dikaitkan dengan jenis jaringan dan tahap
perkembangan, kondisi internal dan eksternal (Shepard et al., 2000). Profil protein
rumput laut penting untuk memahami perubahan yang terjadi selama
pertumbuhan yang pada gilirannya dapat menyebabkan peningkatan strain kultur.
Tidak ada protein tambahan yang nyata yang diekspresikan menunjukkan
kesesuaian kondisi kultur yang dioptimalkan untuk pertumbuhan G. changii.

14
Page

14
 KESIMPULAN

Kesimpulannya, protokol melibatkan parameter eksogen untuk

mikropropagasiGracilariachangii dioptimalkan berdasarkan harian

laju pertumbuhan eksplan. Kondisi kultur untuk G. changii

ditemukan optimal dalam 25% media PES yang dilengkapi dengan

5 mg L−1 AMPEP dan salinitas 30 ppt. Profil protein terungkap

bahwa tidak ada protein yang diinduksi stres yang diproduksi selama in vitro

kondisi budaya. Penelitian ini akan meningkatkan perbanyakan klon dari bibit
berkualitas tinggi yang akan mengarah pada peningkatan

produksi di agar-agar

15
Page

15
 References

https://www.sciencedirect.com/

Baweja, P., Sahoo, D., Garcia-Jiménez, P., Robaina, R.R., 2009. Seaweed tissue
culture as applied to biotechnology: problems, achievements and prospects.

Phycol. Res. 57, 45–58.

Beauchamp, E., 2012. Effects of UV radiation and salinity on the inertidal

macroalgae Palmaria palmate and Ulva lactuca; effects on photosynthetic
performance, growth and pigments. Plymouth Student Sci. 5, 3–22.

Bird, C.J., McLachlan, J., 1986. The effect of salinity on distribution of species
Gracilaria Grev. (Rhodophyta: Gigartinales): an experimental assessment. Bot.

Mar. 29, 231–238.

Bixler, H.J., Porse, H., 2011. A decade of change in the seaweed hydrocolloids
industry. J. Appl. Phycol. 23, 321–335.

Borlongan, I.A.G., Tibubos, K.R., Yunque, D.A.T., Hurtado, A.Q., Critchley,

A.T., 2011. Impact of AMPEP on the growth and occurrence of epiphytic
Neosiphonia infestation on two varieties of commercially cultivated
Kappaphycus alvarezii grown at different depths in the Philippines. J. Appl.
Phycol. 23, 615–621.

Chan, C.X., Teo, S.S., Ho, C.L., Othman, R.Y., Phang, S.M., 2004. Optimisation
of RNA extraction for Gracilaria changii (Gracilariales, Rhodophyta). J. Appl.
Phycol. 16, 297–301.

Choi, H.G., Kim, Y.S., Kim, J.H., Lee, S.J., Park, E.J., Ryu, J., Nam, K.W., 2006.
Effects of temperature and salinity on the growth of Gracilaria verrucosa and G.
chorda:

with the potential for mariculture in Korea. J. Appl. Phycol. 18, 269–277.

Contreras, L., Moenne, A., Gaillard, F., Potin, P., Correa, J.A., 2010. Proteomic
analysis and identification of copper-stress-regulated proteins in the marine
alga Scytosiphon gracilis (Phaeophyceae). Aquat. Toxicol. 96, 85–89.

Crouch, I.J., Smith, M.T., Staden, J., Lewis, M.J., 1992. Identification of auxins in
a commercial seaweed concentrate. J. Plant Physiol. 139, 590–594.
16
Page

16