1.

Pembuatan Eluen

N-heksan, Etil asetat, Kloroform, Metanol, dan Aquades

Diukur eluen sejumlah perhitungan

yang telah dilakukan

N-heksan dan Kloroform Kloroform,

Etil asetat dan Metanol Metanol, dan
Aquades

a. Dicampur sesuai a. Dicampur sesuai a. Dimasukkan

aquades, lalu
perbandingan perbandingan
masukkan
secara perlahan secara perlahan
setengah metanol
b. Dikocok hingga b. Dikocok hingga
sambil diguncang
larut dan bening larut dan bening
b. Dimasukkan
kloroform dan sisa
metanol sedikit
demi sedikit
sambil diguncang
hingga larut dan
bening

n-heksan : etil Kloroform : Kloroform :

asetat metanol metanol :
(6:4, 7:3, 8:2, (5:1 dan 7:1) aquadest
dan 9:1) (10 : 6 : 0,5)
2. Penyiapan Plat KLT
Fraksi Ekstrak
a. Dilarutkan semua fraksi ekstrak dalam botol fial dengan
kloroform : methanol (1 : 1), ditutup dengan aluminium
foil
b. Dipanaskan plat KLT dalam termoliner dengan suhu
1000C.
c. Dipotong plat KLT dengan Panjang 7 cm dan lebar 2
cm.
d. Diberi garis batas bawah 1 cm dan batas atas ½ cm
menggunakan pensil

Plat KLT 7x2 cm

3. Pengujian KLT
Plat KLT 7x2 cm
a. Dilakukan penotolan larutan fraksi dengan pipa kapiler
pada batas bawah lempeng (dua buah botol yang berbeda
sesuai dengan kedekatan tingkat kepolaran), diberi label
b. Dimasukkan eluen ke masing-masing gelas bening
sampai <1 cm dari permukaan dalam gelas, diberi label
c. Dimasukkan plat KLT yang telah ditotol ke setiap eluen
yang mempunyai tingkat kepolaran yang sama
d. Diamati kenaikan pearut pada plat KLT. Jika telah sampai
pada batas atas, diangkat plat KLT
e. Diangin-anginkan plat KLT hingga kering lalu, diamati
spot warna yang timbul

Spot warna
4. Uji Spektrometer UV VIS
Plat KLT dengan spot warna
a. Diamati plat KLT yang telah kering dibawah sinar
UV 254, 366 nm dan sinar tampak
b. Digambar spot warna pada kertas kalkir yang telah
dipotong sesuai bentuk plat KLT
c. Dijepit menggunakan penjepit tabung plat KLT lalu,
disemprot dengan H2SO4 10%, lalu dipanaskan
dengan pemanasan di dalam termoliner atau
langsung diatas kompor
d. Diamati spot warna yang timbul serta digambar spot
warna pada kertas kalkir
e. Diamati spot warna, jika spot warna tidak jelas atau
tidak terbentuk spot pada plat KLT diulangi dengan
merubah eluen dengan perbandingan yang lain

Spot warna hasil

Spektrometer