Anda di halaman 1dari 11

Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

Akses terbuka

Jurnal Gangguan Darah

Mengulas artikel

Perbandingan antara Giemsa, Harris Hematoxline &


Eosin dan Lieshman Stain pada Gambar Darah Perifer
Ali AS1*, Dafaalla AAEA1dan Eltyeb Babeker YM1
Abstrak
Laboratorium Ilmu Kedokteran, Hematologi dan
Hematologi Imuno Elim, Universitas Elmahadi, Sudan Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif komparatif yang dilakukan
* Penulis yang sesuai:Ali AS, Ilmu Laboratorium Medis, dengan membandingkan morfologi gambaran darah tepi dengan pewarnaan
Hematologi dan Imunohematologi Universitas Elimam giemsa lieshman dan harris hematoxline dan eosin. Penelitian dilakukan di
Elmahadi, Sudan fakultas ilmu laboratorium kedokteran Universitas El-imam El-Mahdi, di kota
Kosti - negara bagian Nil putih, Kosti berjarak 315 km dari Khartoum ke selatan
Diterima:02 Maret 2018;Diterima:16 April 2018; Sudan, luas total 39701km dan populasi sekitar 159500. Itu terletak di selatan
Diterbitkan:23 April 2018 Khartoum di tepi barat sungai Nil putih. Jembatan Kosti menghubungkan
antara Kosti dan Rabak yang merupakan ibu kota negara bagian, Kota ini
memiliki pelabuhan Nil penting di Sudan yang menghubungkan antara Sudan
selatan dan Sudan. Durasi studi Dari September hingga November/2017.
Populasi sasaran penelitian ini adalah mahasiswa Teknologi Laboratorium
Medik Universitas Elemam Almahdi.

Pada semua jenis pewarnaan morfologi sel darah putih, sel darah merah, dan
trombosit normal. perbedaan warna sel darah merah dan granula sitoplasma sel
darah putih. Pada pewarnaan Lieshman, sel darah merah diwarnai dengan warna
merah pucat. Pada pewarnaan Giemsa sel darah merah diwarnai dengan warna abu-
abu pucat. Pada pewarnaan hematoxline, sel darah merah diwarnai dengan warna
merah kuat. Pada pewarnaan hematoxline dan eosin, granula sitoplasma sel darah
putih diwarnai sebagai berikut: neutrofil diwarnai dengan pink halus, dengan warna
ungu muda atau melanggar warna nukleus, limfosit: sitoplasma biru dengan nukleus
warna ungu muda. Eosinofil: granul merah saja. Monosit biru: sitoplasma abu-abu
dengan inti vakuola bening. Pada pewarnaan Giemsa dan lieshman sel darah putih
terwarnai granula sitoplasma sebagai berikut: neutrofil terwarnai ungu halus dengan
warna melanggar inti, limfosit: pewarnaan sitoplasma biru pucat dengan kromatin
inti kental. Eosinofil: granula sitoplasma berwarna oranye-merah. Monosit: diwarnai
oleh sitoplasma biru-abu-abu dengan inti bening. Dan Trombosit pada pewarnaan
Giemsa diwarnai dengan warna ungu pada pewarnaan Lieshman Trombosit diwarnai
dengan warna ungu-biru dan pada hematoxline & Eosin diwarnai dengan warna
merah oranye. Jenis pewarnaan berbeda pada granula sitoplasma sel darah putih,
keberadaan deposit dan latar belakang pewarnaan. Pada pewarnaan Giemsa:
granula sitoplasmik dari total 50 film darah 35 yang mewakili 70% valid muncul dan
15 mewakili 30% tidak muncul. Latar belakang dari total 50 sampel darah 40 film
darah valid jelas yang mewakili sekitar 80%, sedangkan 10 film tidak jelas yang
mewakili sekitar 20%. Dan deposit film darah noda 40 tidak memiliki deposit yang
mewakili sekitar 80%,

Pada pewarnaan Lieshman granula sitoplasmik dari total 50 film darah 33


yang valid muncul yang mewakili sekitar 66%, sedangkan 17 film darah tidak
muncul yang represi berakhir sekitar 33%. Latar belakang 32 film darah valid
jelas yang mewakili 64% sedangkan 18 tidak jelas mewakili sekitar 34% dari
total film darah. dan endapan film darah 33 tidak ada dari endapan yang
mewakili sekitar 66%, sedangkan 17 film darah terdapat endapan noda yang
mewakili sekitar 34% dari total film darah. Pada pewarnaan hematoxline &
Eosin granula sitoplasma dari 50 film darah 50 valid bening yang mewakili
sekitar 100%. Latar belakang film darah 50 adalah valid jelas yang mewakili
sekitar 100% dari total film darah. Endapan film darah stain 50 tidak memiliki
endapan noda yang mewakili sekitar 100% dari total film darah.

pengantar perubahan sedikit peningkatan dan penyempurnaan teknologi modern


telah meningkatkan ketersediaan pewarna Romanowsky komersial
Film darah bernoda adalah salah satu tes yang paling banyak dan
berkualitas baik. Pembuat slide otomatis dan semi otomatis [1].
sering digunakan di dunia. Sejak diperkenalkan pada akhir abad
kesembilan belas, elemen dasar dari preparasi dan analisis film darah telah: Solusi Noda Wright-Giemsa dikembangkan oleh Romanowsky

J Blood Disord - Volume 5 Edisi 1 - 2018 ISSN Kutipan:Ali AS, Dafaalla AAEA dan Eltyeb Babeker YM. Perbandingan antara Pewarnaan Giemsa, Harris Hematoxline & Eosin
2379-8009|www.austinpublishinggroup.com dan Lieshman pada Gambar Darah Perifer.J Gangguan Darah. 2018; 5(1): 1051.
Ali dkk.© Semua hak dilindungi undang-undang
Ali AS
Grup Penerbitan Austin

pada tahun 1891. Dia mengamati bahwa kombinasi pewarna ini memberikan pewarnaan memeriksa pengaruh metode ini pada film darah tepi.
selektif yang sangat baik pada film darah. Juga pada tahun 1891, Giemsa memodifikasi
Tinjauan Literatur
pewarnaan Leishman untuk memberikan intensitas pewarnaan yang lebih baik dan detail

seluler yang halus. Noda, bagaimanapun, membutuhkan proses pewarnaan yang diperpanjang. Noda langit Romano
Solusi Noda Wright-Giemsa telah dikembangkan untuk menggabungkan kecemerlangan luar Noda langit Romano secara universal digunakan dalam hematologi.
biasa dan resolusi detail seluler yang diperoleh dari Pewarnaan Giemsa dengan waktu Mereka terdiri dari Metilen biru, produk oksidatif Metilen biru (Azure A,
pewarnaan yang cepat dari Pewarnaan Wright [2]. Azure B, Azure C dan Thionin) dan pewarna eosin. Giemsa, pewarna yang
umum digunakan tidak cukup menodai sel darah merah, trombosit atau
Pewarnaan Leishman diterapkan dalam teknik pewarnaan konvensional
sitoplasma sel darah putih bila digunakan sendiri. Oleh karena itu, pewarna
untuk mewarnai kromosom secara seragam. Teknik-teknik ini membuat
langit Romano kedua sering digunakan dalam kombinasi dengan Giemsa
sentromer terbatas, sehingga memungkinkan pengukuran panjang kromosom,
dan mengandung pewarna biru untuk mengintensifkan pewarnaan fitur
posisi sentromer, dan rasio lengan. Slide dapat dengan mudah dibedakan dan
nuklir dan granulasi azurofilik dan toksik. Wright, Wright-Giemsa dan May-
diikat oleh sebagian besar prosedur pita. Kromosom yang ditentukan tidak dapat
Grunewald Giemsa adalah kombinasi yang umum digunakan untuk
dibedakan! Pewarnaan Leishman termasuk, sebagai pewarnaan Giemsa dan
pewarnaan Romanowsky. Pewarnaan cepat atau "cepat", dikembangkan
Wright, termasuk dalam kelompok pewarnaan Romanovsky. Ini dianggap
untuk situasi 'stat' atau untuk laboratorium kecil, cukup untuk menilai
sebagai teknik yang mudah dilakukan yang memberikan kontras yang cukup
morfologi sel normal [5].
dapat diterima. Untuk deteksi parasit malaria, pewarnaan Lieshman tampaknya
lebih sensitif daripada misalnya pewarnaan Field [3]. noda Giemsa
Harris hematoxline Newcomer Supply Hematoxline Stain, Harris Modified Penggunaan yang dimaksudkan:Larutan Giemsa dan May Grunewald

adalah hematoxline regresif berkualitas tinggi siap pakai yang tidak memerlukan dimaksudkan untuk digunakan dalam pewarnaan film darah atau film sumsum tulang.

penyaringan, sepenuhnya bebas merkuri dan dapat digunakan dalam platform Solusi adalah untuk “In VitroPenggunaan Diagnostik.” Pewarnaan Giemsa adalah larutan

pewarnaan manual atau otomatis. Formulasi Harris yang dimodifikasi ini buffer thiazineeosinate yang dirancang untuk memberikan warna sel darah yang mirip

mengandung asam asetat glasial untuk pewarnaan nuklir yang lebih tepat dan dengan produk asli yang dijelaskan oleh Giemsa. Ini dapat digunakan secara terpisah

selektif dan etilen glikol untuk meningkatkan stabilitas larutan dan mengurangi atau dalam kombinasi dengan May Grunewald Stain, juga tersedia dari Sigma-Aldrich.

endapan permukaan.

Pewarnaan Hematoxline & Eosin (H&E) rutin digunakan untuk skrining Persiapan:Untuk menyiapkan 500 ml pewarna Giemsa:

spesimen dalam patologi anatomi, serta untuk penelitian, apusan, 1. Bubuk Geimsa 3,8 g
persiapan sentuh, dan aplikasi lainnya. Dua zat pewarna utamanya
menodai semua materi seluler termasuk inti (biru), dan elemen sitoplasma 2. metanol alkohol 250ml
(merah muda). Popularitas pewarnaan ini sebagian besar disebabkan oleh 3. gliserol 250ml.
kesederhanaannya, kemampuannya untuk secara jelas menunjukkan
Penyimpanan:Simpan Giemsa pada suhu kamar (18-26˚C) Label reagen
berbagai macam komponen jaringan yang berbeda, ketergantungan,
mencantumkan tanggal kedaluwarsa [2].
pengulangan, dan kecepatan kita [4].

Dalam penelitian ini kami memodifikasi metode H&E untuk noda Leishman
mewarnai gambar darah tepi. Keterangan:Pewarnaan Leishman diterapkan dalam teknik pewarnaan
konvensional untuk mewarnai kromosom secara seragam. Teknik-teknik ini
Pembenaran
membuat sentromer terbatas, sehingga memungkinkan pengukuran panjang
Gambaran darah tepi merupakan alat penting dalam diagnosis gangguan kromosom, posisi sentromer, dan rasio lengan. Slide dapat dengan mudah
diagnosis hematologi. Jadi untuk melakukan fungsi ini, film darah harus diwarnai dan diikat oleh sebagian besar prosedur pita. Kromosom bernoda
disiapkan dan diwarnai dengan baik. Banyak noda dapat digunakan untuk Orcein tidak dapat dibedakan! Pewarnaan Leishman termasuk, sebagai
pewarnaan gambar darah tepi. misalnya 'Geimsa's, lieshman dan memiliki pewarnaan Giemsa dan Wright, termasuk dalam kelompok pewarnaan
kelebihan dan kekurangan dalam penelitian ini kita akan memeriksa jenis Romanovsky. Ini dianggap sebagai teknik yang mudah dilakukan yang
pewarnaan baru dan membandingkannya dengan pewarnaan hematologi rutin memberikan kontras yang cukup dapat diterima. Untuk deteksi parasit malaria,
untuk pilihan yang terbaik untuk pewarnaan gambar darah tepi. pewarnaan Lieshman tampaknya lebih sensitif daripada pewarnaan Field's [6].

Objektif Penyimpanan:Suhu kamar Jauhkan dari kelembaban.


Tujuan umum:Untuk membandingkan gambaran darah tepi
Persiapan larutan Pewarna Leishman:Campur dan larutkan 0,15 g Eosin-
dengan pewarnaan giemsa, lieshman, Harrishematoxline dan
Metilen biru dalam 100 ml Metanol yang dikeringkan pada 56°C. Ketika noda
eosin.
larut sepenuhnya, keluarkan larutan dari pemanas. (Atau, larutkan di RT
Tujuan khusus semalaman. Tutup wadah dengan Para film untuk mencegah kontaminasi oleh

1. Untuk mengetahui pengaruh pewarnaan giemsa pada darah tepi kelembaban). Setelah larutan mencapai RT bersihkan larutan dengan

film. menggunakan filter kertas man apa kering. Kumpulkan larutan yang telah
disaring dalam botol kaca berwarna cokelat yang bersih dan kering. Umur
2. Untuk mengetahui pengaruh pewarnaan lesishman pada perifer larutan setidaknya 2-3 hari sebelum menggunakannya pertama kali.
film darah.
Simpan larutan Noda Leishman di RT dalam botol tertutup rapat,
3. Untuk metode modifikasi harris hematoxline dan eosin terlindung dari cahaya dan panas. Jangan simpan larutan di dekat botol

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 02


Ali AS
Grup Penerbitan Austin

mengandung asam. Jika disimpan dengan benar, larutan Pewarna Leishman stabil Tabel 1:Persiapan larutan.
selama kira-kira. 3 bulan [6]. hematoxline 2,5 g

Harris Hematoxline Alkohol mutlak 25 ml

Kata hematoxline berasal dari kata Yunani kuno Haimato (darah) dan Xylon (kayu),
tawas kalium 50 gram

mengacu pada warna merah gelapnya dalam keadaan alami, dan metode pembuatannya dari Air sulingan 500 ml
kayu. Hematoxline adalah pewarnaan histologis yang paling banyak digunakan. Popularitasnya oksida merkuri 1,25 gatau
didasarkan pada kesederhanaan komparatif dan kemampuannya untuk menunjukkan sejumlah
Natrium iodida 0,5 g
besar struktur jaringan yang berbeda. Itu dapat disiapkan dengan berbagai cara. Ini mewarnai
Asam asetat glasial 20 ml
nukleus biru/hitam, dengan detail intranuklear yang baik, sedangkan Eosin mewarnai

sitoplasma [7]. Hematoxline diekstraksi dari kulit pohon logwood (Haematoxylon


dapson 1985) (Tabel 1).
campechianum). Ketika teroksidasi membentuk hematin, senyawa yang membentuk kompleks

berwarna kuat dengan ion logam tertentu, terutama garam Fe (III) dan Al (III). Haematein (ejaan Persiapan solusi:Tawas yang sebelumnya telah dilarutkan dalam aquades
AS) atau haematein adalah turunan teroksidasi dari hematoxline, yang digunakan dalam hangat dalam labu takar 2 liter. Campuran dengan cepat dididihkan dan oksida
pewarnaan. Hematin tidak harus bingung dengan hematin, yang merupakan pigmen yang merkuri hematoxline dilarutkan dalam alkohol absolut, dan kemudian
mengandung besi berwarna coklat sampai hitam yang dibentuk oleh dekomposisi hemoglobin. ditambahkan ke de atau natrium iodida kemudian ditambahkan perlahan dan
Dalam Indeks Warna (tetapi tidak di tempat lain), haematein disebut haematein, sebuah kata hati-hati. Mencelupkan labu ke dalam air dingin atau ke bak cuci berisi es yang
membingungkan yang secara keliru menyiratkan bahwa senyawa tersebut adalah amina. pecah akan mendinginkan noda dengan cepat. Saat larutan dingin, asam asetat
Hematin bersifat anionik, memiliki afinitas yang buruk terhadap jaringan, dan tidak memadai ditambahkan, dan pewarna siap digunakan segera. Asam asetat glasial adalah
sebagai pewarna nukleus tanpa adanya mordan. Mordan yang berguna untuk hematoxline opsional tetapi penyertaannya memberikan pewarnaan inti yang lebih tepat dan
adalah garam Aluminium, Besi dan Tungsten. dan tidak memadai sebagai pewarna nuklir tanpa selektif. Seperti kebanyakan hematoxline tawas yang matang secara kimiawi,
kehadiran mordan. Mordan yang berguna untuk hematoxline adalah garam Aluminium, Besi kualitas pewarnaan nuklir mulai memburuk setelah beberapa bulan. Deteriorasi
dan Tungsten. dan tidak memadai sebagai pewarna nuklir tanpa kehadiran mordan. Mordan ini ditandai dengan terbentuknya endapan pada noda yang disimpan pada tahap
yang berguna untuk hematoxline adalah garam Aluminium, Besi dan Tungsten. ini noda tersebut harus disaring terlebih dahulu sebelum digunakan, dan waktu
pewarnaan mungkin perlu ditingkatkan. Untuk hasil terbaik, adalah bijaksana
Kation mordan/logam memberikan muatan positif bersih ke kompleks
untuk menyiapkan sejumlah kecil pewarna setiap bulan, meskipun ini mungkin
dyemordant dan memungkinkannya untuk mengikat jaringan anionik.
tidak ekonomis kecuali hanya sejumlah kecil yang disiapkan setiap kali [9].
Hematoklin diproduksi dari hematoxline dalam dua cara:

Oksidasi alami (pematangan)


larutan stok eosin
1. Dengan paparan udara dan cahaya.
1. Eosin Y 1 g.
2. Proses lambat (3-4) bulan.
2. Air suling, 100 ml.
3.
3.
Solusi yang dihasilkan mempertahankan kemampuan pewarnaannya untuk waktu yang lama
Campur untuk larut.
waktu.
Aplikasi:Larutan hematoxline Harris banyak digunakan di bidang
4. Ehrlich & Delafield's adalah contohnya.
histologi dan sitologi sebagai komponen pewarnaan hematoxlineeosin.
Oksidasi kimia:Dengan menggunakan oksidator kimia yang Pada dasarnya, ini mengungkapkan struktur nuklir di kedua nukleoprotein
mengubah hematoxline menjadi hematin segera [8]. dan asam nukleat dalam sampel jaringan manusia.

Hematoxline Harris (Harris 1900): Hematoxline tawas ini secara Prinsip: Hematoxline sendiri merupakan senyawa tanpa sifat
tradisional dimatangkan secara kimiawi dengan oksida merkuri. Karena pewarnaan. Ini adalah produk oksidasinya, hematin, yang
merkuri oksida sangat beracun, tidak ramah lingkungan, dan memiliki efek memberikan sifat pewarnaan pada larutan. Oksidasi dapat dihasilkan
jangka panjang yang merusak dan korosif pada beberapa mesin baik secara spontan, atau dengan induksi. Opsi pertama lambat
pewarnaan otomatis, natrium atau kalium iodida sering digunakan sebagai karena melibatkan oksidasi alami melalui udara dan cahaya. Metode
pengganti oksidasi. kedua, cepat atau seketika, melibatkan penggunaan zat pengoksidasi
seperti merkuri atau yodium, namun, ini mengurangi daya tahan noda
Harris adalah hematoxylin tujuan umum yang berguna dan memberikan
karena hematin juga dapat teroksidasi. Oleh karena itu, solusi
pewarnaan nuklir yang sangat jelas, dan untuk alasan ini telah digunakan,
hematoxline di mana oksidasi diinduksi kurang tahan lama, tetapi
sebagai pewarnaan progresif, dalam sitologi eksfoliatif diagnostik. Dalam praktek
mereka tidak memerlukan proses pematangan untuk mencapai hasil
histologis rutin, umumnya digunakan secara regresif, tetapi dapat berguna bila
yang memadai; mereka dapat digunakan secara praktis sesaat setelah
digunakan secara progresif. Saat menggunakan Harris shematoxylin sebagai
persiapannya. Untuk mengurangi masalah yang disebabkan oleh
pewarna progresif, pembilasan asam asetat-alkohol memberikan metode yang
penggunaan zat pengoksidasi, meningkatkan konsentrasi etanol dan
lebih terkontrol dalam menghilangkan noda berlebih dari komponen jaringan
menurunkan pH larutan. Kedua strategi diadopsi dalam formulasi asli
dan slide kaca. Alkohol asam klorida tradisional bertindak cepat dan tanpa
larutan Harris Hematoxline. Dalam beberapa kasus, modifikasi ini
pandang bulu, lebih sulit dikendalikan, dan dapat menghasilkan noda nuklir
tidak cukup untuk mempertahankan aktivitas pewarnaan setelah
ringan. Larutan asam asetat 5-10%, dalam Alkohol 70-95%, melepaskan molekul
mewarnai banyak sampel, mungkin karena zat pengoksidasi telah
pewarna dari sitoplasma/nukleoplasma sambil menjaga kompleks asam nukleat
menghabiskan hematin dan karena jumlah sampel yang tinggi yang
tetap utuh (Feldman & memerlukan pewarnaan.

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 03


Ali AS
Grup Penerbitan Austin

Keuntungan utama dan 45 derajat.


Formulasi yang Lebih Baik
4. Bawa slide penyebar kembali ke tetesan darah sampai
1. Kontras yang lebih baik dan kekuatan fiksasi warna yang lebih baik. kontak dibuat dengan setetes darah

2. Peningkatan kapasitas untuk memproses lebih banyak sampel. 5. Pindahkan slide penyebar ke depan pada slide, sehingga noda adalah
dibuat dengan panjang sekitar 3 sampai 4 cm. Apusan harus setengah
Bebas merkuri
ukuran slide, tanpa tonjolan, dan "tepi bulu" harus mengarah ke ujung
1. Berkontribusi pada pelestarian lingkungan. apusan.

2. Lebih aman bagi pengguna [10]. 6. Labeli ujung slide yang buram dengan yang terakhir dari pasien
nama dan inisial depan, nomor spesimen, dan tanggal.
Prosedur smear perifer
Prinsip:Ketika diferensial otomatis tidak memenuhi kriteria 7. Biarkan apusan mengering sepenuhnya.
yang ditentukan yang diprogram ke dalam instrumen hematologi 8. Lanjutkan dengan pewarnaan. Pewarnaan manual Wright tidak ditemukan
otomatis, teknolog/teknisi harus melakukan penghitungan
sering dalam pengaturan laboratorium klinis. Sebagian besar laboratorium klinis
diferensial manual dari apusan yang disiapkan. Ada dua jenis
memiliki otomatisasi.
apusan darah: apusan baji dan apusan pintal. Apusan baji akan
dibahas dalam prosedur ini. Apusan dibuat dengan menempatkan Instrumen pewarnaan terpasang pada penganalisis CBC otomatis mereka.
setetes darah pada kaca objek yang bersih dan menyebarkan Jika tidak ada pewarna otomatis yang terpasang pada penganalisis, masih ada
tetesan tersebut menggunakan kaca objek lain secara miring. alat pewarnaan yang terpisah [11].
Slide kemudian diwarnai dan diamati secara mikroskopis. Apusan
Pewarnaan film darah:Sebelum pewarnaan, sel harus
perifer yang diwarnai dengan baik akan menunjukkan latar
difiksasi ke kaca objek dengan metanol bebas aseton, baik sendiri
belakang sel darah merah sebagai oranye merah. Sel darah putih
atau dalam larutan dengan pewarna. Penambahan larutan buffer
akan muncul dengan inti biru ungu dengan butiran merah ungu
ke pewarna mengubah pH larutan dan mengionisasi reaktan
di seluruh sitoplasma. Apusan perifer yang dibuat dengan baik
untuk memulai proses pewarnaan yang bergantung pada pH.
dan terdistribusi dengan baik akan memiliki area penghitungan
Elemen seluler asam seperti nukleoprotein, asam nukleat dan
pada bagian tipis dari apusan baji yang kira-kira 200 sel darah
protein sitoplasma primitif, bereaksi dengan pewarna dasar, biru
merah tidak bersentuhan.
metilen dan produk oksidatifnya. Unsur-unsur ini adalah basofilik
Reagen dan peralatan dan variasi noda biru. Elemen seluler dasar seperti molekul
1. Slide kaca (buram) hemoglobin dan beberapa konstituen sitoplasma dalam leukosit,
memiliki afinitas untuk pewarna asam, eosin. Unsur-unsur ini
2. Tongkat aplikator kayu bersifat asidofilik dan berwarna oranye-merah. Neutrofil memiliki
3. DIFF-SAFE (peralatan yang dirancang untuk menghindari pelepasan karakteristik pewarnaan netral dan pewarnaan campuran warna
tabung atas) ungu atau merah muda, mewakili kombinasi gugus molekul asam
dan basa.
Pengumpulan dan penyimpanan spesimen
Metode pewarnaan manual
1. Spesimen EDTA atau EDTA Microtainer.
Metode celup (Cepat):Metode dip adalah metode pewarnaan cepat
2. Smear terbuat dari EDTA. yang menggunakan buffer pewarna Wright-Giemsa yang dimodifikasi

3. Microtainer dalam waktu 1 jam setelah pengumpulan.


dalam metanol pada pH 6,8. Slide direndam dalam noda dalam stoples
coplin untuk jangka waktu yang ditentukan pengguna. Pewarnaan Wright-
4. EDTA darah dalam waktu 2 sampai 3 jam.
Giemsa harus tetap tertutup rapat dalam stoples coplin saat tidak
5. Periksa semua Microtainers untuk gumpalan dengan tongkat aplikator. digunakan dan diganti saat artefak air muncul di sel darah merah (lihat:
Penyebab dan Koreksi Penyimpangan Noda).
Kontrol kualitas:Slide acak diambil setelah diwarnai dan
teknolog/teknisi memeriksa kualitas pewarnaan untuk leukosit Catatan: Waktu pewarnaan dapat ditingkatkan untuk detail seluler yang lebih besar sesuai

dan sel darah merah, trombosit, dan distribusi sel [11]. kebutuhan.

Prosedur Metode pewarnaan otomatis

1. Masukkan dispenser DIFF-SAFE melalui bagian atas ini Pewarna slide Hema-Tek - Miles ilmiah (pewarna tipe pelat):

tabung dipegang dalam posisi tegak. Pewarna geser Hema-Tek adalah pewarna geser atas bangku mandiri yang
menggunakan Pak Pewarna Hema-Tek. Tiga sakelar penginderaan dipicu
2. Balikkan tabung dan berikan tekanan pada secara berurutan untuk mengaktifkan tiga pompa larutan yang
ujung slide yang buram. Saat tetesan darah muncul, hentikan memberikan volume terukur dari larutan noda, buffer, dan bilas dari paket
tekanan.
noda. Wright-Giemsa Pak paling sering digunakan. Slide dimajukan oleh
3. Menggunakan slide kedua (slide penyebar), tempatkan tepi dua spiral konveyor paralel dengan larutan pewarna, buffer, dan bilas yang
slide kedua terhadap permukaan slide dengan sudut antara 30 dipompa antara film darah dan pelat.

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 04


Ali AS
Grup Penerbitan Austin

Catatan: neutrofil terwarnai granul pink-oranye dan ungu, basofil terwarnai


warna biru dan granul hitam ungu, eosinofil terwarnai warna merah
1. Slide dapat ditambahkan secara acak jika diperlukan
dan granul jingga. trombosit diwarnai dengan warna ungu.
2. proses pewarnaan memakan waktu sekitar sepuluh menit
Pewarnaan Lieshman:Dalam Versi: MM2/130108
3. Fase waktu adalah konstan menemukan bahwa: Sel darah merah diwarnai oleh: Inti merah
muda sampai coklat. limfosit diwarnai oleh: dalam, biru tua
4. Volume pompa disesuaikan pengguna dengan kenop kontrol
hingga biru-ungu Sitoplasma limfosit: biru muda Inti neutrofil,
5. rasio noda/penyangga 1:2 diinginkan leukosit inti polimorf: biru tua hingga biru-ungu Butiran leukosit
inti polimorf neutrofilik: merah Inti leukosit eosinofil: biru violet
6. Prosedur pembersihan dan perawatan harian sangat penting
Butiran leukosit eosinofilik: merah tua Inti leukosit basofilik: ungu
penting untuk mencegah artefak deposit noda
biru.
Pewarna geser otomatis Hemastainer - Miles ilmiah (pewarna tipe celup):Ini
Pewarnaan hematoxline dan eosin:Belum ada penelitian sebelumnya untuk penggunaan
adalah instrumen pewarnaan otomatis yang menodai hingga lima puluh slide sekaligus.
pewarna ini di laboratorium hematologi. Pewarnaan ini digunakan secara rutin di laboratorium
Slide dimasukkan ke dalam keranjang slide dan dicelupkan ke masing-masing dari enam
histopatologi. Kami memodifikasinya dan digunakan di laboratorium hematologi untuk pewarnaan
stasiun dalam proses pewarnaan. Lima pengatur waktu individual yang dapat
gambar darah tepi yang memberikan hasil yang dapat diandalkan.
disesuaikan mengontrol lima stasiun pertama. Keenam stasiun tersebut terdiri dari:
metanol, pewarna, pewarna kedua, bilas buffered-water, bilas buffer fosfat dan terakhir, Bahan dan metode
pengeringan udara paksa. Dua pewarna yang biasa digunakan dalam pewarna adalah
Desain studi
May-Grunewald dan Giemsa yang diencerkan.
Studi deskriptif
Pewarna slide otomatis Midas II- Diagnostik EM (pewarna tipe
celup):Instrumen ini adalah pewarna slide otomatis yang menodai hingga Area studi
dua puluh slide sekaligus. Slide dimuat ke dalam ember dan didaur ulang Penelitian dilakukan di kota kosti -sementara negara bagian Nil, kosti
melalui enam stasiun: metanol, noda, noda kedua, bilas air, bilas buffer berjarak 315 km dari Khartoum ke selatan wilayah negara bagian Sudan di
fosfat, diikuti oleh stasiun pengeringan. Lima stasiun pertama 39701km dan populasi sekitar 159500 [2008].
menggunakan pengatur waktu individual yang dapat disesuaikan. Pewarna
Populasi studi
Midas II serupa dalam pengoperasiannya dengan Hemastainer.
Populasi sasaran penelitian ini adalah relawan mahasiswa kedokteran
Catatan: di universitas elemam almahdi.

1. Slide tidak dapat ditambahkan setelah proses pewarnaan dimulai. Durasi studi
2. Proses pewarnaan memakan waktu kurang lebih dua puluh menit. Mulai September hingga November 2017.

3. Menghasilkan kualitas yang baik, pewarnaan yang dapat direproduksi [13]. Kriteria inklusi

Penelitian sebelumnya
Individu yang sehat tanpa gangguan hematologi.

Pewarnaan Giemsa: Clarke Dr. Gwendolyn -prephral Film Kriteria pengecualian


darah: estimasi dan tinjauan sel pewarnaan, Setiap individu menderita gangguan hematologi.
CPSAALQEP.MAY.2003 menemukan bahwa Sel darah merah
Persetujuan etis
Salmon pink Nuclei of neutrophils Deep bluepurple Butiran
spesifik neutrofil, butiran limfosit ungu muda atau ungu, butiran Pengambilan sampel dilakukan atas kesepakatan individu.

trombosit. Butiran Spesifik Basofil Ungu tua Butiran Spesifik


Contoh
Eosinofil Oranye Sitoplasma limfosit Biru Sitoplasma Monosit Biru-
Jumlah sampel yang kami ambil 2ml dari masing-masing individu kesehatan dalam
abu-abu (tampilan kaca dasar).
antikoagulan EDTA.
Ramadas Nayak, Sharada Rai, Astha Gupta,Essentials in Hematology
Ukuran sampel
and Clinical Pathology Edisi Pertama 2012. Menemukan bahwa: Sel darah
merah diwarnai dengan warna merah; granula sitoplasma darah putih Sampel dikumpulkan dari 50 individu kesehatan.

diwarnai sebagai berikut: Neutrofil diwarnai oleh granula sitoplasma ungu


Diagnosa laboratorium
halus. Basofil diwarnai dengan granul bernoda gelap. Monosit terwarnai
Giemsastain
sitoplasma biru keabu-abuan pucat. Limfosit diwarnai dengan sitoplasma
biru pucat dan nukleus saja. Trombosit diwarnai dengan warna ungu. Prosedur

Giemsa May-Grunewald:
Dacia, Sir JV, Lewis, SMHematologi Praktis7thedisi, halaman 77 sampai 81,
1. Encerkan Pewarnaan Giemsa 1:20 dengan air deionisasi. Untuk lebih biru
Churchill Livingstone, 1991 menemukan bahwa: Pewarnaan film darah dengan
pewarnaan, air buffer pada pH 7,2 dapat digunakan di tempat air
pewarnaan Romano sky sel darah merah diwarnai dengan warna pink tua,
deionisasi.
granula sitoplasma darah putih diwarnai sebagai berikut: limfosit diwarnai
dengan warna biru, monosit diwarnai oleh warna abu-abu-biru, 2. Tempatkan slide di May-Grunewald Stain selama 5 menit.

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 05


Ali AS
Grup Penerbitan Austin

3. Tempatkan slide di Working Phosphate Buffer atau Trizma® Buffer larutan karbonat selama 30 detik sampai 1 menit.
(20-70 mol/L). PH 7.2, selama 1,5 menit.
10. Cuci dengan air keran yang mengalir selama 5 menit.
4. Tempatkan slide dalam larutan Giemsa encer dari langkah 1 selama 15-20
11. Bilas dengan alkohol 95%, 10 celup.
menit.
12. Counter stain dalam larutan eosin-phloxine selama 30 detik untuk
5. Bilas slide SINGKAT dalam air DEIONIZED.
1 menit.
6. Keringkan udara dan evaluasi.
13. Dehidrasi melalui alkohol 95%, 2 perubahan mutlak
Giemsa standar alkohol, dan masing-masing 5 menit.

1. Perbaiki slide dalam metanol 5-7 menit. 14. Pemindahan xilem dalam 2 kali pergantian, masing-masing 5 menit.

2. Udara kering.
15. Pasang dengan media pemasangan berbasis xilem.

3. Encerkan Pewarnaan Giemsa 1:20 dengan air deionisasi. kaleng warna Hasil Inti harus biru, sitoplasma merah muda menjadi merah [14-16].
divariasikan dengan pengenceran dalam buffer.
Metode histologis ini menyebabkan penghancuran sel darah merah
4. Noda film selama 15-60 menit.
Metode pewarnaan film darah tipis
5. Bilas dalam air deionisasi.
1. Memperbaiki film darah tipis dengan metanol absolut.
6. Keringkan udara dan evaluasi.
2. Film darah tertutup oleh Harrishematoxline 5 menit.
Giemsa noda cepat
3. Dicuci oleh DW.
1. Tempatkan film darah kering udara di Pewarna Giemsa yang tidak diencerkan selama 1-2

menit. 4. Tambahkan Eosin selama 10 detik.

2. Tempatkan dalam air deionisasi selama 2-4 menit tergantung pada 5. Cuci oleh DW.
preferensi warna.
Noda Leishman
3. Bilas dalam air deionisasi.
Contoh Protokol Pewarnaan:
4. Keringkan udara dan evaluasi.
Pewarnaan darah menurut Lieshman (teknik penyamaran):
Karakteristik kinerja
1. Gunakan apusan yang setipis mungkin dan dikeringkan dengan udara.

Nuclei akan bervariasi dalam nuansa ungu. Pewarnaan sitoplasma akan


2. Tutupi noda sepenuhnya dengan larutan Leishman's Stain.
bervariasi dalam nuansa biru hingga merah muda muda. Butiran halus
Noda selama 2 menit.
kemerahan sampai ungu mungkin ada di sitoplasma beberapa jenis sel. Basofil
akan menunjukkan butiran hitam biru tua di sitoplasma. Eosinofil akan 3. Tambahkan dua kali jumlah air suling dan aduk dengan
menunjukkan butiran oranye terang di sitoplasma. Sel darah merah harus berputar-putar. Inkubasi minimal 10 menit
berwarna merah muda hingga oranye. Jika hasil yang diamati berbeda dari hasil
yang diharapkan, silakan hubungi Layanan Teknis Sigma-Aldrich untuk bantuan
4. Bilas secara menyeluruh dengan air suling.

[12]. 5. Keringkan slide menggunakan kertas blotting dan keringkan dengan udara.

Hematoxline Harris 6. (Opsional) untuk pemasangan, sertakan slide dalam balsam. (Kanada

Prosedur pewarnaan:
balsam asli produk AppliChem No.A0569) atau Malinol netral [6].

1. Deparafinisasi bagian, 2 perubahan xilem, 10 menit


setiap.
Peralatan
1. Gelas kaca 75.25.
2. Rehidrasi dalam 2 perubahan alkohol absolut, 5 menit
setiap. 2. Slide penyebar.

3. Alkohol 95% selama 2 menit dan alkohol 70% selama 2 menit. 3. kepompong.

4. Cuci sebentar dalam air suling. 4. EDTA antikoagulan.


5. Pewarnaan dalam larutan Harris hematoxylin selama 8 menit. 5. Jarum suntik.

6. Cuci dengan air keran yang mengalir selama 5 menit. 6. Minyak.

7. Diferensiasi dalam alkohol asam 1% selama 30 detik. 7. mikroskop cahaya.

8. Cuci air kran yang mengalir selama 1 menit. Analisis data


9. Kebiruan dalam air amonia 0,2% atau lithium jenuh Dilakukan oleh program spa

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 06


Ali AS
Grup Penerbitan Austin

Presentasi data Meja 2:Granula sitoplasma sel darah putih: Dari 50 film.

Hasil disajikan sebagai tabel. Giemsa Lieshman DIA

Jernih 35 (70%) 33 (66%) 50 (100%)


Hasil
Tidak jelas 15 (30%) 17 (34%) 0 (0%)
Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif yang dilakukan di Laboratorium Ilmu
Kedokteran Universitas EL-Imam El-mahdi Fakultas Ilmu Kedokteran Universitas EL- Tabel 3:Deposit Noda: Dari 50 film.

Imam El-mahdi 50 sampel darah diambil dari mahasiswa relawan sehat dalam wadah Giemsa Lieshman DIA
EDTA. Film darah tipis dibuat dari sampel ini (tiga film) dari masing-masing sampel dan Absen 35 (70%) 33 (66%) 50 (100%)
diwarnai dengan Giemsa, lieshman dan H&E komentar film ini sebagai berikut. Pada
Hadiah 15 (30%) 17 (34%) 0 (0%)
semua jenis pewarnaan morfologi sel darah putih, sel darah merah, dan trombosit
normal. Perbedaan warna sel darah merah dan granula sitoplasma sel darah putih. Tabel 4:Latar Belakang: Dari 50 film.
Pada pewarnaan Lieshman, sel darah merah diwarnai dengan [warna merah pucat]. Giemsa Lieshman DIA
Pada pewarnaan Giemsa, sel darah merah diwarnai dengan [warna abu-abu pucat] dan
Jernih 35 (70%) 32 (64%) 50 (100%)
pada pewarnaan hematoxline, sel darah merah diwarnai dengan [warna merah kuat].
Tidak jelas 15 (30%) 18 (36%) 0 (0%)
Pada pewarnaan Lieshman, sel darah merah diwarnai dengan [warna merah pucat].
Pada pewarnaan Giemsa, sel darah merah diwarnai dengan [warna abu-abu pucat] dan
Tabel 5:Waktu & Biaya: Sekitar 30 ml setiap noda.
pada pewarnaan hematoxline, sel darah merah diwarnai dengan [warna merah kuat].
Giemsa Lieshman DIA
Pada pewarnaan hematoxline dan eosin, granula sitoplasma sel darah menghabiskan waktu 10 menit 10 menit 6 menit
putih diwarnai sebagai berikut: neutrofil diwarnai dengan pink halus,
Biaya 3.5 SDG 19.5SDG 40SDG
dengan warna ungu muda atau melanggar warna nukleus, limfosit:
sitoplasma biru dengan nukleus warna ungu muda. Eosinofil: granul merah (Tabel 2-5) (Lampiran).
saja. Monosit biru: sitoplasma abu-abu dengan inti vakuola bening.
Diskusi
Dalam studi komparatif deskriptif ini diambil 50 sampel darah dari
Pada pewarnaan Giemsa dan lieshman sel darah putih terwarnai
sukarelawan sehat siswa film darah tipis dibuat dari sampel ini (tiga
granula sitoplasma sebagai berikut: neutrofil terwarnai ungu halus
film) dari masing-masing sampel dan diwarnai dengan Giemsa,
dengan warna nukleus melanggar, limfosit: pewarnaan sitoplasma
lieshman dan H&E komentar film ini sebagai berikut di semua jenis
biru pucat dengan kromatin inti kental. Eosinofil: granul sitoplasmik
noda morfologi sel darah putih, sel darah merah, dan trombosit
jingga – merah. Monosit: diwarnai oleh sitoplasma biru-abu-abu
normal. perbedaan warna sel darah merah dan granula sitoplasma sel
dengan inti bening.
darah putih.
Trombosit pada [pewarnaan giemsa diwarnai dengan warna ungu] pada
Pada pewarnaan Lieshman, sel darah merah diwarnai dengan [warna merah pucat]. Pada
pewarnaan Lieshman platelet diwarnai dengan [warna ungu-biru] dan pada
pewarnaan Giemsa, sel darah merah diwarnai dengan [warna abu-abu pucat] dan pada pewarnaan
hematoxline & Eosin diwarnai dengan [warna merah kasar]. Jenis pewarnaan berbeda
hematoxline, sel darah merah diwarnai dengan [warna merah kuat].
dalam granula sitoplasma sel darah putih, deposit dan latar belakang pewarnaan.
Pada pewarnaan hematoxline dan eosin, granula sitoplasma sel darah
Pada pewarnaan Giemsa tampak granula sitoplasmik dari 50 film
putih diwarnai sebagai berikut: neutrofil diwarnai dengan pink halus,
darah 35 valid yang mewakili sekitar 70% sedangkan 15 tidak muncul
dengan warna ungu muda atau melanggar warna nukleus, limfosit:
yang mewakili sekitar 30% dari total film darah, background 40 film
sitoplasma biru dengan nukleus warna ungu muda. Eosinofil: granul merah
darah valid jelas yang mewakili sekitar 80%, sedangkan 10 film tidak
saja. Monosit biru: sitoplasma abu-abu dengan inti vakuola bening.
jelas yang mewakili sekitar 20%. Dan endapan film darah noda 40
tidak ada dari endapan yang mewakili sekitar 80%, sedangkan 10 film
darah menyajikan endapan yang mewakili sekitar 20% dari total film Pada pewarnaan Giemsa dan lieshman sel darah putih terwarnai
darah. granula sitoplasma sebagai berikut: neutrofil terwarnai ungu halus
dengan warna nukleus melanggar, limfosit: pewarnaan sitoplasma
Pada pewarnaan Lieshman muncul granula sitoplasma dari 50 film
biru pucat dengan kromatin inti kental. Eosinofil: granul sitoplasmik
darah 33 yang valid yang mewakili sekitar 66%, sedangkan 17 film
jingga – merah. Monosit: diwarnai oleh sitoplasma biru-abu-abu
darah tidak muncul yang mewakili sekitar 33% dari total film darah.
dengan inti bening.
Latar belakang 32 film darah valid jelas yang mewakili 64% sedangkan
18 tidak jelas mewakili sekitar 34% dari total film darah. dan endapan Trombosit pada [pewarnaan Giemsa diwarnai dengan warna ungu] pada
film darah 33 tidak ada dari endapan yang mewakili sekitar 66%, pewarnaan Lieshman platelet diwarnai dengan [warna ungu-biru] dan pada
sedangkan 17 film darah terdapat endapan noda yang mewakili hematoxline & Eosin diwarnai dengan [warna merah kasar]. Jenis pewarnaan berbeda
sekitar 34% dari total film darah. dalam granula sitoplasma sel darah putih, deposit dan latar belakang pewarnaan.

Pada pewarnaan hematoxline & Eosin granula sitoplasma dari 50 Pada pewarnaan Giemsa tampak granula sitoplasmik dari 50 film
film darah 50 valid bening yang mewakili sekitar 100%. Latar belakang darah 35 valid yang mewakili sekitar 70% sedangkan 15 tidak muncul
film darah 50 adalah valid jelas yang mewakili sekitar 100% dari total yang mewakili sekitar 30% dari total film darah, background 40 film
film darah. Endapan film darah noda 50 tidak ada endapan noda yang darah valid jelas yang mewakili sekitar 80%, sedangkan 10 film tidak
mewakili sekitar 100% dari total film darah jelas yang mewakili sekitar 20%. Dan deposit noda 40

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 07


Ali AS
Grup Penerbitan Austin

Film darah tidak ada dari deposit yang mewakili sekitar 80%, limfosit diwarnai oleh: biru muda Inti neutrofil, leukosit inti
sedangkan 10 film darah menyajikan deposit yang mewakili sekitar polimorf: biru tua hingga biru-ungu, Butiran leukosit inti
20% dari total film darah. polimorf neutrofilik diwarnai oleh: merah Inti leukosit eosinofil
diwarnai oleh: biru violet Butiran leukosit eosinofilik diwarnai
Pada pewarnaan Lieshman muncul granula sitoplasma dari 50 film
dengan warna merah tua Inti leukosit basofilik diwarnai
darah 33 yang valid yang mewakili sekitar 66%, sedangkan 17 film darah
dengan: warna biru violet.
tidak muncul yang mewakili sekitar 33% dari total film darah.

Latar belakang 32 film darah valid jelas yang mewakili 64%


Kesimpulan
sedangkan 18 tidak jelas yang mewakili sekitar 34% dari total film Hasil penelitian menyimpulkan bahwa hematoxline dan eosin diperoleh hasil
darah. dan endapan film darah 33 tidak ada dari endapan yang yang reliabel untuk pewarnaan gambar darah tepi dibandingkan dengan
mewakili sekitar 66%, sedangkan 17 film darah terdapat endapan pewarnaan giemsa dan lieshman dengan metode modifikasi dan NEW. Dan kami
noda yang mewakili sekitar 34% dari total film darah. Pada pewarnaan meningkatkan bahwa Harris hematoxline adalah pewarnaan terbaik dengan
hematoxline & Eosin granula sitoplasma dari 50 film darah 50 valid semua situasi seperti penampilan umum dan warna sel dan morfologi dan latar
bening yang mewakili sekitar 100%. Latar belakang film darah 50 belakang dan keberadaan deposit. Di sisi lain, pewarnaan terbaik digunakan
adalah valid jelas yang mewakili sekitar 100% dari total film darah. untuk penghitungan diferensial dan perkiraan morfologi sel.
Endapan film darah noda 50 tidak ada endapan noda yang mewakili
sekitar 100% dari total film darah.
Rekomendasi

Dalam sebagian besar perjanjian studi Clarke, Dr. Gwendolyn,


1. Lebih banyak studi harus dilakukan.

Film Darah Perifer: Pewarnaan, Estimasi dan Tinjauan Sel, CPSA 2. Lebih banyak modifikasi untuk metode pewarnaan H&E.
ALQEP: Mei, 2003.
3. Periksa kemungkinan penambahan eosin ke harris
Clarke, Dr. Gwendolyn, Film Darah Perifer: Pewarnaan, hematoxline untuk membuat metode pewarnaan satu langkah.
Estimasi dan Tinjauan Sel, CPSA ALQEP: Mei, 2003. Sel darah
Referensi
merah Salmon pink Inti neutrofil Biru tua-ungu Butiran
1. Clarke Dr. Gwendolyn-prephral Film darah: estimasi dan tinjauan sel
spesifik neutrofil, butiran ungu muda atau limfosit ungu, pewarnaan, CPSAALQEP. MUNGKIN. 2003.
butiran trombosit. Granula Spesifik Basofil Ungu tua Granul
2. Romanowsky DL, St. Petersburg Med. Wshr. 1891; 16: 297-302.
Spesifik Eosinofil Oranye Sitoplasma limfosit Biru Sitoplasma
Monosit Biru Abu-abu (tampilan kaca dasar) 3. Versi: MM2/130108.

4. Carson Freida L, Christa Hladik Cappellano. Histoteknologi: Sebuah Teks


Sitoplasma neutrofil Merah muda muda Sitoplasma trombosit Ungu-biru
Selfinstructional. edisi ke-4 Chicago: ASCP Press. 2015; 113-114.
sampai ungu. Penelitian ini merupakan penelitian deskriptif yang dilakukan di
5. Sheehan Dezna C, Barbara B. Hrapchak. Teori dan Praktek Histoteknologi. St
laboratorium IL-Imam Universitas El-Mahdi Fakultas Ilmu Kedokteran Universitas
Louis: Mosby. 1980. 142-144, 153-154.
Negeri Surabaya 50 sampel darah diambil dari mahasiswa relawan sehat dalam
wadah EDTA. 6. Dacie JV, Lewis SM. Hematologi Praktis, Churchill Livingstone. 1991; 54-
79.
Ramadas Nayak, Sharada Rai, Astha Gupta Edisi pertama 2012, dalam
7. Leishman WB. Catatan tentang metode sederhana dan cepat untuk menghasilkan pewarnaan
penelitian ini sependapat dengan saya, sel darah merah diwarnai dengan warna Romanowsky pada film darah malaria dan lainnya. Sdr Med J. 1901; 2: 757-758.
merah; granula sitoplasma darah putih diwarnai sebagai berikut:
8. Modifikasi yang dikembangkan oleh Newcomer Supply Laboratory.

Neutrofil diwarnai oleh granula sitoplasma ungu halus. Basofil 9. MOHAMMED AE. Teknik Histologi Rutin. edisi satu. 76.
diwarnai dengan granul bernoda gelap. Monosit terwarnai sitoplasma
10. Bancroft John D, Marilyn Gamble. Teori dan Praktek Teknik Histologi. 6thed.
biru keabu-abuan pucat. Limfosit diwarnai dengan sitoplasma biru Oxford: Churchill Livingstone Elsevier. 2008: 123-125.
pucat dan nukleus saja. Trombosit diwarnai dengan warna ungu.
11. PanReac Química SLU Garraf, 2Polígono Pla de la Bruguera E-08211 Castellar
del Vallès Barcelona. Spanyol.

Barbara j Bain, Imelda Bates, Michael A Laffan dan S.Mitchell Lewis 12. Hematologi dalam Praktek Betty Ciesla, MS, MT (ASCP) SH Fakultas, Program
11th Edition 2011 sependapat dengan saya bahwa pewarnaan film darah Teknologi Kedokteran Universitas Negeri Morgan Baltimore, Maryland
Asisten Profesor Villa Julie CollegeStevenson, Maryland.
dengan pewarnaan romanowisky sel darah merah diwarnai dengan warna
pink tua, granula sitoplasma darah putih diwarnai sebagai berikut: limfosit 13. Hematologi: Prinsip dan Prosedur, Edisi Keenam, Brown AB, Lea & Febiger,
Philadelphia.
terwarnai biru, monosit terwarnai abu-abu-biru, neutrofil terwarnai pink-
oranye dan granul ungu, basofil terwarnai warna biru dan granul hitam 14. O'Connor, Barbara H, Sebuah Atlas Warna dan Instruksi Manual Morfologi Sel
ungu, eosinofil terwarnai warna merah dan granul jingga. trombosit Perifer. 1984: 15-18.

diwarnai dengan warna ungu. 15. Ramadas Nayak, Sharada Rai, Astha Gupta, Esensi dalam Hematologi dan
Patologi Klinik Edisi Pertama. 2012.
Leishman's Eosin-Ethylene blue Product No. A4277 setuju dengan saya
16. Kiernan JA. Metode Histologi dan Histokimia: Teori dan Praktek. edisi ke-4
sel darah merah diwarnai dengan warna pink muda sampai coklat Warna
Bloxham, Inggris: Scion. 2008.
inti, limfosit diwarnai oleh: dalam, biru tua sampai biru-ungu Sitoplasma

Kirimkan Naskah Anda|www.austinpublishinggroup.com J Gangguan Darah5(1): id1051 (2018) - Halaman - 08

Anda mungkin juga menyukai