5
CLINICAL SIGNIFICANCE OF Staphylococcus
epidermidis
In neonates, negative blood culture results at 36hr after collection may be used as a basis for discontinuation of antibiotic treatment following NICE (National Institute for health and Care
Excellence) guidance on antibiotic use in early onset neonatal infection. It has been suggested that 36hr is sufficient incubation to rule out sepsis in asymptomatic neonates, however blood
cultures collected from neonates < 72hr old may require longer incubation. (5)
Pemeriksaan Mikrobiologi Klinik
• Berbeda dengan pemeriksaan laboratorium lain,
pemeriksaan mikrobiologi: “a science of interpretive
judgment that is becoming more complex”
IDSA Guidelines. Clin. Inf. Diseases Advance Access published July 10, 2013
Hasil Pemeriksaan Mikrobiologi
Tatalaksana Pasien dengan Infeksi
• Terapi antibiotik empirik berdasarkan antibiogram
lokal atau data epidemiologi
Test ordering
Result transcription
Order transcription
Result delivery
Patient preparation Sample testing
Result review
Specimen collection
Action taken on basis
Specimen identification of result
Specimen transport
• Transportasi Spesimen
Kurir
• Penerimaan/Penolakan Spesimen
Lab
IDSA Guidelines. Clin. Inf. Diseases Advance Access published July 10, 2013
PRINSIP PENGELOLAAN SPESIMEN
Lepaskan jarum
2. …….
… prinsip pengelolaan spesimen
3. …..
… prinsip pengelolaan spesimen
4. …..
… prinsip pengelolaan spesimen
Tindakan asepsis
17
PEMERIKSAAN ANAEROB
Spesimen :
Medium transport anaerob
thioglikolat dimasukkan
kantong anaerob
Spesimen
Eksudat atau material lain yang diambil dari luka di
permukaan, abses, luka bakar, kista, ulkus
Swab vagina, serviks dan uretra
21
20/Jan/06; 06.00 10/Maret/06; 10.00
Sarti, Wanita, 60 th, Suto, Laki, 35 th
Darah 1 dari 2;
Biakan aerobik
Abses; Anaerob
20/Jan/06; 06.30
Sarti, Wanita, 60 th, 20/Jan/06; 08.20
Darah 2 dari 2; Hidayat, Laki, 60 th,
Biakan aerobik Urin; Biakan aerobik
22
URIN
• Pemeriksaan semikuantitatif
• Sampel:
– Mid stream urine ( Clean catch urine, urin porsi tengah)
– Supra pubic puncture – terutama kultur anaerob
– Urin kateter
• Transport :
– Dalam 2 jam, suhu ruang
– > 2 jam : lemari es 40C (bukan freezer)
Cara pengumpulan spesimen urin
JELASKAN!
urin pertama di pagi hari
Spesimen di 2/3 pertengahan urin
dikeluarkan
Penis/vulva dibersihkan dengan air
sabun atau tissue basah steril
Cara pengumpulan spesimen urin
2. Urin Kateter
• bukan dari catheter bag
Juni 2006
Cara pengumpulan spesimen urine
FESES
+ 10 gram/ 1 sendok teh, dalam wadah bersih,
jangan tercampur dengan urin.
Feses berdarah atau berlendir, ambil bagian
berdarah/ berlendir
… spesimen saluran cerna
• USAP HIDUNG
– Masukkan swab sekurangnya 1 cm ke dalam
lobang hidung atau bila ada lesi ambil di pinggir
lesi
• SPUTUM
– Bukan saliva !!!
– Mukolitik dan inhalasi sebelumnya
– Bangun tidur – berkumur dengan air
matang – batuk dalam
– Wadah steril
… saluran napas bawah
• Bronchoscopic
– Broncho-alveolar lavage (BAL)
– Bronchial washing
– Protected Brush Specimen (PBS)
– Transbronchial biopsy specimens
• Lung aspirates
– Lesions or abcess cavities located in the
periphery of the lung
• Tipe bacteremia
• Waktu pengambilan spesimen
• Metode pengambilan spesimen
• Volume
• Jumlah spesimen
• Interpretasi
Bacteremia
Kapan ?
Ambil spesimen darah sedekat mungkin dengan waktu
demam. Jumlah bakteri menurun ketika suhu tubuh
menurun.
Bacteremia
Level
Suhu
30
0 Waktu (min) 60
Efek Volume
100
90
80
70
60
% Relative 50
Yield 40
30
20
10
0
5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
*Reprinted from Infectious Disease Clinics of North America, Vol 16, M.L. Towns and L. B. Reller, Diagnostics
methods: Current best practices and guidelines for isolation of bacteria and fungi in infective endocarditis, p.
363-376(2002) with permission from Elsevier.
41
Jumlah Set
2-3 set spesimen akan dapat meningkatkan
angka deteksi~99% episode sepsis.
48
Faktor yang Mempengaruhi Interpretasi Hasil
• Spesimen:
– Kualitas
• Penanganan, transportasi, penerimaan
– Lab: Peran bagian penerimaan spesimen>>
• Makroskopis
• Mikroskopis: pewarnaan Gram
– Kuantitas
– Jenis/asal spesimen: organ tubuh?
Faktor ……
• Teknis pemeriksaan:
– Pemeriksaan mikroskopis
– Pemilihan medium pertumbuhan
– Pemilihan cara inkubasi: suhu dan lama inkubasi;
aerob/anaerob; tekanan O2
– Pemilihan koloni
– Metode identifikasi
– Metode uji kepekaan
– Kontrol kualitas: medium, metode identifikasi dan uji
kepekaan
Faktor ……
• Pembacaan hasil:
– Kesesuaian pemeriksaan mikroskopis (Gram) dan
hasil identifikasi
– Bakteri mono- atau polimikroba?
• Pada spesimen cairan tubuh (darah, LCS, cairan
pleura) monomikroba
• Apakah kontaminasi ? Koloni tumbuh pada goresan
ose?
Kontaminasi, Kolonisasi, dan Infeksi
?
Lab Mikro Klinik 53
Hari-1
• Kultur Darah
• Kultur Sputum
– Hari 1: Pewarnaan Gram: Bakteri batang gram negatif
Epitel <10/LPF
Lekosit >25/LPF
– Hari 2?
– Hari 3?
– Hari 4?
– Hari 5?
54
R.Perawatan Bakteri Jumlah (%)
ICU Acinetobacter baumannii 83 (26)
Sputum Pseudomonas aeruginosa 67 (21)
Klebsiella pneumoniae 56 (18)
Acinetobacter baumannii 48 (15)
complex: A.calcoaceticus
E coli 26
Burkholderia cepacia 15
Stenotropo maltophilia 7
Enterobacter cloacae 7
Staphylococcus aureus 6
Enterobacter aerogenes 5
Total 320
All Isolates Oct 2013 until
Oct 2014 SPUTUM
Bacteri Ac Ac.ba/cal Kl.pneu Ps.aer
a baum co cplx m u E coli
Sen% Sen% Sen% Sen% Sen%
39.8 29.2 92.9 58.2 100.00
AK (33/83) (14/48) (52/56) (39/67) (26/26)
20.5 59.0 57.1 49.3 57.7
GEN (17/83) (8/48) (32/56) (33/67) (15/26)
30.1 29.2 50.00 43.3 46.2
TOB (25/83) (14/84) (28/56) (29/67) (12/26)
18.1 39.3 47.8 15.4
CIP (15/83) 8.3 (4/48) (22/56) (32/67) (4/26)
18.1 71.4 52.2 23.1
LEVO (15/83) 8.3 (4/48) (40/56) (35/67) (6/26)
0.00 0.00 0.00 0.00 0.00
AMP (0/83) (0/48) (0/59) (0/67) (0/26)
0.00 0.00 25.4 0.00 3.9
AMC (0/83) (0/48) (15/59) (0/67) (1/26)
0.00 0.00 18.6 26.9 3.9
AZT (0/83) (0/48) (11/59) (18/67) (1/26)
0.00 0.00 66.1 0.00 38.5
FOX (0/83) (0/48) (39/59) (0/67) (10/26)
0.00 0.00 13.6 0.00 3.9
CEFA (0/83) (0/48) (8/59) (0/67) (1/26)
All Isolates Oct 2013 until
Oct 2014 SPUTUM
Bacteri Ac Ac.ba/cal Ps.aer
a baum co cplx Kl.pneu u E coli
58
Sebelum ada hasil Pemeriksaan Mikro:
Terapi Empirik
• Spektrum antibiotik sesuai kemungkinan penyebab
• Berdasarkan:
– Keparahan manifestasi klinis
– Data epidemiologi, pola mikroba dan kepekaannya
terhadap antibiotik
– Hasil pewarnaan Gram pada spesimen
Hindler A. The basics: Using CLSI Antimicrobial Susceptibility Testing Standards. CLSI.
Contoh pelaporan selektif
Hindler A. The basics: Using CLSI Antimicrobial Susceptibility Testing Standards. CLSI.
Pelaporan Pola Mikroba dan Kepekaannya
• Jenis spesimen
• Ruang rawat
• Pola mikroba
• Pola kepekaan terhadap antibiotik
• Jumlah isolat untuk analisis uji kepekaan:
sebaiknya di atas 30 (setiap spesies)
Organisms N AMS CRO CAZ FEP PZT IMI MEM AMK GEN CIP LVX
Acinetobacter 400 59 14 49 52 53 52 60 75 62 52 53
baumannii
Klebsiella 505 49 58 58 61 82 75 94 94 74 82 73
pneumoniae
Pseudomonas 248 3 4 68 63 52 48 68 74 68 63 62
aeruginosa
Escherichia coli 97 14 25 33 24 73 85 60 62 48 15 18
Staphylococcus 38 92 76 50 76 76 85 67 100 78 72 74
aureus
AMS: Ampicillin-Sulbactam PZT: Piperacillin tazobactam GEN: Gentamicin
CRO: Ceftriaxone IMI: Imipenem CIP: Ciprofloxacin
CAZ: Ceftazidime MEM: Meropenem LVX: Levofloxacin
FEP: Cefepime AMK: Amikacin
RINGKASAN
2. Diagnosis mikrobiologi:
• Pre-analitik: komunikasi SpMK dan klinisi
• Analitik
• Pasca-analitik: komunikasi SpMK dan klinisi
75
RINGKASAN
76
RINGKASAN
77
Mekanisme Resistensi Bakteri
Native
Organisms
Decontamination
Antibiotic Isolation/
Management Barrier
Precautions
Hand Hygiene
Health
Policy
Eradication Surveillance
Emergence Transmission
Perl TM. Gram Negative Bacterial Resistance in Healthcare: The Brave New World Healthcare
Mekanisme Kerja Antibiotik
• Acquired resistance:
– Bacteria that have been sensitive to certain antibiotics
develops resistance
– May happen by mutation or by acquisition of new DNA
• chromosomal mutation and selection is termed vertical
evolution
• Acquisition of new genetic material from other resistant
organisms is termed horizontal evolution
Tenover, FC. The American Journal of Medicine (2006) Vol 119 (6A), S3–S10
Hawkey, P. M BMJ 1998;317:657-660
Leclercq et al. EUCAST expert rules in antimicrobial susceptibility testing. Clin Microbiol Infect. 2011.
Bagaimana Bakteri Mendapatkan Sifat Resistensi?
85