LAPORAN

PRAKTIK BELAJAR LAPANGAN (PBL)

SITOHISTOTEKNOLOGI
LABORATORIUM PATOLOGI ANATOMI DYATNITALIS

DISUSUN OLEH :
KELOMPOK 6 & 7

KEMENTERIAN KESEHATAN REPUBLIK INDONESIA

POLITEKNIK KESEHATAN PALEMBANG
PROGRAM STUDI TEKNOLOGI LABORATORIUM MEDIS
PROGRAM SARJANA TERAPAN
TAHUN AKADEMIK 2022-2023
 HALAMAN PERSETUJUAN

Laporan Praktik Belajar Lapangan (PBL) ini dibuat untuk memenuhi

salah satu syarat menyelesaikan mata kuliah Sitohistoteknologi pada Program
Studi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis. Laporan ini telah disetujui
oleh pembimbing di Prodi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis dan
Pembimbing di Laboratorium Patologi Anatomi DyatNitaLis.

Hari : Selasa-Jumat

Tanggal : 23-26 Mei 2023

NO NAMA JABATAN TANDA TANGAN

1. dr. Wresnindyatsih, M.Kes, SpPA(K) Pembimbing Lahan

2. dr. Nita Hertati, SpPA Pembimbing Lahan

3. dr. Listinawati, SpPA Pembimbing Lahan

4. dr. Riefrini Nurlaili, SpPA Pembimbing Lahan

5. Sandi Prayuda, SE Pembimbing Lahan

6. Juwita Eka Sari, AMAK Pembimbing Lahan

7. Yusmaryani, Amd. Pembimbing Lahan

8. Sri Hartini Harianja, SST, M.Biomed Pembimbing Institusi

9. Drs. Refai, M.Kes Pembimbing Institusi

10. Anton Syailendra, S.Pd, M.Biomed Pembimbing Institusi

11. Ichwa Zarqiya, STr. Kes Pembimbing Institusi

ii
 HALAMAN PENGESAHAN

LAPORAN PRAKTIK BELAJAR LAPANGAN (PBL)

SITOHISTOTEKNOLOGI
LABORATORIUM PATOLOGI ANATOMI DYATNITALIS

Laporan Kelompok Praktik Belajar Lapangan (PBL) ini dibuat untuk

memenuhi salah satu syarat menyelesaikan mata kuliah Sitohistoteknologi pada
Program Studi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis. Laporan ini telah
disetujui oleh pembimbing Institusi dan Pembimbing Lahan Jurusan Teknologi
Laboratorium Medis Poltekkes Kemenkes Palembang.

Palembang, Juni 2023

Mengetahui
Ketua Prodi Sarjana Terapan
Teknologi Laboratorium Medis

Abdul Mutholib, ST, MT

NIP. 19670717198031003

Ketua Jurusan Pembimbing Lahan

Teknologi Laboratorium Medis

Nurhayati, S.Pd., SKM, M.Kes dr. Listinawati, SpPA

NIP. 197009241991032001

iii
 BIODATA MAHASISWA PBL
NO FOTO NAMA NIM ALAMAT NO WA
1.
Jl.Husni Basri
RT01/RW01
Putri Alya kel.Sukamulya,
PO.71.34.2.20.020 0895333875659
Diani kec.Sematang
Borang, Kota
Palembang

2.

Desa Rantau Jaya

Rachma RT02/RW02,
Dhini PO.71.34.2.20.021 kec.Belitang 082307498098
Swarsa Madang Raya,
Oku Timur

3.

Palem Srigading
Rezki Puan Indah 2 Blok I no
PO.71.34.2.20.022 085266373023
Azizah 19, Kenten Laut,
Kota Palembang

iv
4.
Jl.Gotong Royong
III Perum Graha
Sherina
PO.71.34.2.20.023 Kencana Asri M.7 082182468126
Ananda
RT31/RW02,
Kota Palembang

5.
Griya Sejahtera II
Blok.D No.14
Tara Permata RT.02 RW.05,
PO.71.34.2.20.025 081271269590
Irawan Kel. Gunung Ibul
Kec. Prabumulih
Timur

6.

Perumahan
Sukajadi Permai 2
Tarisa
PO.71.34.2.20.026 Blok C No.5 085966105980
Merlinski
RT16/RW05,
Kota Palembang

7.
Jl. Brigjen Hasan
Kasim Nomor 35
Tri Rahma
C, kel.Bukit
Okta PO.71.34.2.20.027 082122735591
Sangkal,
Ramadhan
kec.Kalidoni,
Kota Palembang

v
8. Jl.Kutilang Blok
E2 No.16
RT003/RW001,
Yessynia
PO.71.34.2.20.028 kel.Patih Galung, 085384469125
Agel
kec.Prabumulih
Barat, Kota
Prabumulih

vi
 KATA PENGANTAR
Puji dan syukur kami panjatkan ke hadirat Allah SWT, karena berkat
rahmat dan karunia-Nya sehingga penulis dapat menyelesaikan Laporan Praktek
Belajar Lapangan yang dilaksanakan di Laboratorium Patologi Anatomi
DyatNitaLis. Laporan Praktek Belajar Lapangan ini disusun sebagai salah satu
syarat untuk menyelesaikan tugas mata kuliah Sitohistoteknologi pendidikan di
Program Studi Sarjana Terapan Teknologi Laboratorium Medis.

Laporan ini dibuat berdasarkan hasil praktek belajar di Laboratorium

Patologi Anatomi DyatNitaLis selama 4 hari. Ucapan terimakasih kami
sampaikan kepada Laboratorium Patologi Anatomi DyatNitaLis yang telah
memberikan kesempatan kepada kami untuk melakukan Praktik Belajar Lapangan
untuk memenuhi kegiatan praktikum Sitohistoteknologi.

Harapan kami semoga laporan ini dapat menjadi bahan pembelajaran di

masa yang akan datang, sehingga mahasiswa dapat menerapkan praktikum yang
telah didapatkan kepada instansi pendidikan dan dapat memberi kepuasan kepada
seluruh civitas akademik dan mendukung pencapaian Visi dan Misi Prodi Sarjana
Terapan Teknologi Laboratorium Medis.

Demikian semoga laporan ini dapat dipergunakan sesuai dengan

tujuannya.

Palembang, Juni 2023

Penyusun

vii
 DAFTAR ISI

HALAMAN PERSETUJUAN ................................................................................ ii

HALAMAN PENGESAHAN ................................................................................ iii
BIODATA MAHASISWA PBL ............................................................................ iv
KATA PENGANTAR .......................................................................................... vii
DAFTAR ISI ........................................................................................................ viii
DAFTAR GAMBAR .............................................................................................. x
DAFTAR TABEL .................................................................................................. xi
BAB I PENDAHULUAN ....................................................................................... 1
1.1 Latar Belakang ......................................................................................... 1
1.2 Tujuan Umum........................................................................................... 2
1.3 Tujuan Khusus .......................................................................................... 2
1.4 Manfaat ..................................................................................................... 3
1.5 Tempat dan Waktu Pelaksanaan ............................................................... 3
1.6 Metode Pelaksanaan ................................................................................. 3
1.7 Sejarah Singkat dan Perkembangan Lahan Praktik ...................................... 3
1.8 Visi Misi ........................................................................................................ 3
1.9 Susunan Direksi ............................................................................................ 4
BAB II TINJAUAN PUSTAKA............................................................................. 6
2.1 Laboratorium Patologi Anatomi ............................................................... 6
2.2 Sitologi ..................................................................................................... 7
2.3 Histologi ................................................................................................... 7
2.4 Alur Kerja Laboratorium .......................................................................... 8
2.5 Fiksasi ..................................................................................................... 10
2.6 Teknik Pemotongan ................................................................................ 13
2.7 Pewarnaan Hematoxylin dan Eosin ........................................................ 14
2.8 Pewarnaan Papanicolaou ........................................................................ 15
BAB III HASIL DAN PEMBAHASAN............................................................... 17
3.1 Alur Penerimaan Sampel Patologi Anatomi........................................... 17
3.2 Ukuran Jaringan & Macam-Macam Jaringan........................................ 17

viii
 3.3 Sitologi ................................................................................................... 18
3.3.1 Tiga Jenis Pemeriksaan Sitologi .......................................................... 18
3.3.2 Macam – Macam Fiksasi ..................................................................... 20
3.3.3 Pewarnaan Sitologi............................................................................... 21
3.4 Histopatologi .......................................................................................... 22
3.4.1 Pewarnaan Heamatoxylin Eosin ( HE ) ............................................... 24
3.5 Pengarsipan ............................................................................................ 25
3.6 Limbah Patologi Anatomi ...................................................................... 25
3.7 Peralatan ................................................................................................. 26
3.8 Pemantapan Mutu Internal Laboratorium Patologi Anatomi ................. 38
3.9 Pemantapan Mutu Eksternal Laboratorium Patologi Anatomi .............. 42
BAB IV PENUTUP .............................................................................................. 45
4.1 Kesimpulan ............................................................................................. 45
4.2 Saran ....................................................................................................... 45
DAFTAR PUSTAKA
LAMPIRAN

ix
 DAFTAR GAMBAR
Gambar 1 Pewarnaan Hematoxylin dan Eosin...................................................... 15
Gambar 2 Pewarnaan Papanicolaou ...................................................................... 16
Gambar 3 Centrifuge ............................................................................................ 26
Gambar 4 Waterbath ............................................................................................. 27
Gambar 5 Tissue Embending Center .................................................................... 29
Gambar 6 Cooling Plate ........................................................................................ 30
Gambar 7 Hot Plate ............................................................................................... 31
Gambar 8 Mikrotom .............................................................................................. 31
Gambar 9 Mikroskop ............................................................................................ 34
Gambar 10. Sediaan histologi yang terwarnai dengan baik(A), buruk(B) ............ 40
Gambar 11. Sediaan kolon yang diwarnai H&E memperlihatkan mucin yang
berwarna biru. Untuk menghilangkan warna biru pada mucin dapat dilakukan
dengan cara menurunkan pH pada Hematoxylin .................................................. 40
Gambar 12. Sediaan kulit yang diwarnai H&E. gambar kiri menunjukkan pH
Eosin terlalu tinggi, gambar kanan menunjukkan Eosin yang sesuai dapat
membedakan serat kolagen dan jaringan saraf...................................................... 41
Gambar 13. Sediaan ginjal yang diwarnai H&E. Sel dengan kromatin padat
terdapat pada glomerulus. Sel dengan kromatin halus terdapat pada tubulus....... 41
Gambar 14. Pewarnaan Papanicolou yang tidak baik ........................................... 42
Gambar 15. Pewarnaan Papanicolou yang baik .................................................... 42
Gambar 16. Ketebalan 6 micron (kiri) ketebalan 3 micron (kanan) pada sediaan
lung adenocarcinoma ............................................................................................ 43
Gambar 17. Lipatan pada preparat ........................................................................ 44

x
 DAFTAR TABEL

Tabel 1 Alur Kerja Laboratorium Sitologi........................................... 9

Tabel 2 Alur Kerja Laboratorium Histologi ........................................ 9

xi
 BAB I
PENDAHULUAN
1.1 Latar Belakang
Menurut PERMENKES RI Nomor 411/MENKES/PER/III/2010 menyebutkan
bahwa Laboratorium patologi anatomi merupakan laboratorium yang
melaksanakan pembuatan preparat histopatologi, pulasan khusus sederhana,
pembuatan preparat sitologik, dan pembuatan preparat dengan teknik potong
beku. Pelayanan laboratorium Patologi Anatomi menerima spesimen berupa
jaringan dan/atau cairan tubuh yang didapat dari tubuh pasien dan bermakna klinis
bagi diagnosis suatu penyakit. Pelayanan laboratorium patologi anatomi berperan
sebagai baku emas dalam penegakkan diagnosis yang berbasis perubahan
morfologi sel dan jaringan sampai pemeriksaan imunologik dan molekuler khusus
yang bersumber dari sel maupun jaringan. Patologi Anatomi berperan dalam
mendeteksi kelainan akibat perubahan pada jaringan tubuh dan melakukan
penapisan dari suatu penyakit. Peran laboratorium Patologi Anatomi semakin
meluas mencakup penentuan pilihan terapi dan prediksi prognosis yang sejalan
dengan perkembangan ilmu dan teknologi.

Di dalam laboratorium Patologi Anatomik kita mengenal dua komponen besar

dalam pelayanan laboratorium. Dua komponen besar tersebut adalah laboratorium
histopatologi dan laboratorium sitopatologi. Laboratorium histopatologi
merupakan laboratorium yang menangani spesimen berupa jaringan sedangkan
laboratorium sitopatologi menangani spesimen berupa cairan atau bentukan lain
yang mengandung sel-sel untuk dilakukan diagnosis. Namun kadangkala kedua
laboratorium tersebut dapat berkolaborasi menjadi satu ketika spesimen berupa
materi mengandung sel namun diperlakukan seperti sebuah jaringan atau organ
(cytoblock/sitoblok).

Spesimen sitologi diambil dengan tujuan jaringan memeriksa pada tingkat sel.
Spesimen sitologi didapat dari sel yang terlepas (exfoliatif) atau sel yang terlepas
dari jaringan. Jenis spesimen yang paling umum yang diterima di laboratorium
patologi anatomik adalah spesimen cervical Pap Smear, hal ini dikarenakan Pap

1
 2

smear merupakan salah satu program pemerintah dalam menurunkan angka

kanker servic. Selain itu spesimen yang diterima di laboratorium sitologi adalah
spesimen sitologi aspirasi jarum halus (FNA/ Fine Needle Aspiration), dimana sel
didapatkan dari jarum yang sangat tipis yang dimasukkan ke sebuah lesi
berbentuk cairan (misalnya kista tiroid). Selain itu spesimen dapat berasal dari
urin, dahak, cairan cerebrospinal, cairan berasal dari bilasan dan lain sebagainya
yang mengandung materi sel. Lain halnya dengan spesimen untuk laboratorium
histopatologi, dimana spesimen untuk laboratorium histopatologi adalah seluruh
organ yang diambil dari pasien baik berukuran kecil maupun berukuran besar.

Spesimen yang didapatkan di laboratorium patologi anatomi (baik sitopatologi

dan histopatologi) akan diolah dan menghasilkan suatu sediaan mikroskopis yang
menjadikan dasar pelaporan untuk keperluan diagnosis ataupun yang lainnya.

Laboratorium Patologi Anatomi DyatNitaLis merupakan salah satu

laboratorium patologi anatomi yang ada di palembang. Laboratorium yang berdiri
pada 4 januari 2015 itu, dalam setahun dapat memeriksa sekitar 5000 pasien
khusus untuk jaringan patologi, yang berasal dari berbagai rumah sakit di daerah
Sumsel.

1.2 Tujuan Umum

Mahasiswa Jurusan Teknologi Laboratorium Medis Politeknik Kesehatan
Kementerian Kesehatan Palembang diharapkan mengetahui teknik sitologi dan
histologi.

1.3 Tujuan Khusus

Mahasiswa Jurusan Teknologi Laboratorium Medis Politeknik Kesehatan
Kementerian Kesehatan Palembang diharapkan mampu mengetahui dan
melakukan:

a. Teknik histologi : Pemotongan spesimen, fiksasi, memproses jaringan,

merendam jaringan, membuat blok jaringan, pemotongan jaringan,
pewarnaan, memvalidasi kualitas mutu pemeriksaan, IHC
b. Teknik sitologi : Melakukan pembuatan preparat Sitologi, pap smear, dan
 3

memvalidasi kualitas mutu pemeriksaan, Sitogenetika

1.4 Manfaat
Diharapkan dapat bermanfaat bagi pembaca maupun penulis dalam
pengetahuan terhadap sitohistoteknologi, serta dapat melakukan teknik persiapan
dan penanganan spesimen sitohistopatologi.

1.5 Tempat dan Waktu Pelaksanaan

Kegiatan praktik klinik ini dilakukan di :
Tempat : Laboratorium PA DyatNitaLis
Waktu : 23 Mei 2023-26 Mei 2023
1.6 Metode Pelaksanaan
Praktik Belajar Lapangan (PBL) mahasiswa sarjana Terapan Teknologi
Laboratorium Medis terdiri atas pembekalan praktik, praktik penanganan
spesimen (pemotongan gross, fiksasi, pematangan jaringan, penanaman jaringan,
trimming, section, dan pewarnaan), dan pemeriksaan kualitas sediaan yang
dilakukan dengan menggunakan mikroskop.

1.7 Sejarah Singkat dan Perkembangan Lahan Praktik

Laboratorium Patologi Anatomik DyatNitaLis merupakan laboratorium yang
menerima segala jenis pemeriksaan Patologi Anatomik dengan menggunakan alat-
alat pemeriksaan yang memadai. Berlokasi di Jalan Kolonel H. Burlian Ruko No.
7 RT 2 RW 01 (Belakang Bank BRI Pasar KM 5), Kelurahan Sukabangun,
Kecamatan Sukarami, Kota Palembang.
Laboratorium Khusus Patologi Anatomik DyatNitalis didirikan oleh 3 (tiga)
orang Dokter Spesialis Patologi Anatomik dengan mengusung prinsip-
KEBERSAMAAN dan OPTIMIS. Dr. Wresnindyatsih, SpPA(K), M.Kes.. dr.
Nita Hertati, SpPA dan dr. Listinawati, SpPA.
1.8 Visi Misi
Visi
Menjadi sentra diagnostik khusus patologi anatomik yang unggul, terdepan
dan terpercaya di tahun 2025
 4

Misi
1. Memberikan pelayanan Patologi Anatomik yang lengkap, cepat dan
akurat
2. Menjadi mitra dalam pelayanan kesehtan dan penelitian yang terpercaya
dan dapat diandalkan.
1.9 Susunan Direksi

Tempat
Jenis Tanggal
No. Nama Tanggal Pendidikan Jabatan
Kelamin Bergabung
Lahir

Spesialis Patologi
Anatomik
Kebumen, Konsultan Penanggun Jawab
1 dr. Wresnindyatsih Perempuan (SpPAK) 4 Januari 2014
2-8-1971 Utama
Magister
Kesehatan(M.Kes)

Penanggungjawab
Baturaja, Spesialis Patologi
2 dr. Nita Hertati Perempuan 4 Januari 2014 keuangan dan
18-2-1971 Anatomik (SpPA)
ADM

Penanggungjawab
Palembang, Spesialis Patologi pelayanan dan
3 dr. Listinawati Perempuan 4 Januari 2014
6-9-1972 Anatomik (SpPA)
SDM

Palembang, Spesialis Patologi Koordinator mutu

4 dr. Riefrini Nurlaili Perempuan Januari 2017
26-12-1967 Anatomik (SpPA) dan MONEV

Lahat, 18 Spesialis Patologi Kordinator

5 dr. Venni Yuliantini Perempuan Juli 2019
Juli 1978 Anatomik (SpPA) pelayanan harian

Muaradua, Spesialis Patologi

6 dr. Maria Ulfa Perempuan Januari 2020 Staf dokter
24-12-1980 Anatomik (SpPA)

Bandung, Sarjana Ekonomi

6 Elly Suryani Perempuan 4 Januari 2014 Administrasi
30-7-1967 (SE)

Palembang, Sarjana Komputer

7 Nyayu Heni F Perempuan 4 Januari 2014 Manager
19-7-1982 (S.Kom)

Palembang, Sarjana Ekonomi

8 Sandi Prayuda Laki-laki Juli 2017 Teknisi
8-3-1980 (SE)
 5

Ahli Madya Analis

Palembang,
9 Juwita Eka Sari Perempuan Kesehatan Maret 2014 Analis kesehatan
27-3-1991
(Amak)

Palembang, Sarjana
10 Ariono Laki-laki Mei 2017 Administrasi
9-10-1988 Komputer(S.Kom)

Diploma
Palembang,
11 Yusmaryani Perempuan Administrasi Agustus 2018 Teknisi
23-3-1976
(AmD)

Palembang, Sarjana MIPA

12 Siti Fatimah Perempuan Juni 2019 Administrasi
25-1-1992 Kimia (SSi)
 BAB II
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Laboratorium Patologi Anatomi
Menurut PERMENKES RI Nomor 411/MENKES/PER/III/2010
menyebutkan bahwa Laboratorium Patologi Anatomik merupakan laboratorium
yang melaksanakan pembuatan preparat histopatologi, pulasan khusus sederhana,
pembuatan preparat sitologik, dan pembuatan preparat dengan teknik potong
beku. Pelayanan laboratorium Patologi Anatomik menerima spesimen berupa
jaringan dan/atau cairan tubuh yang didapat dari tubuh pasien dan bermakna klinis
bagi diagnosis suatu penyakit. Pelayanan laboratorium Patologi Anatomik
berperan sebagai baku emas dalam penegakkan diagnosis yang berbasis
perubahan morfologi sel dan jaringan sampai pemeriksaan imunologik dan
molekuler khusus yang bersumber dari sel maupun jaringan. Patologi anatomik
berperan dalam mendeteksi kelainan akibat perubahan pada jaringan tubuh dan
melakukan penapisan dari suatu penyakit. Peran laboratorium Patologi Anatomik
semakin meluas mencakup penentuan pilihan terapi dan prediksi prognosis yang
sejalan dengan perkembangan ilmu dan teknologi.

Di dalam laboratorium patologi anatomik kita mengenal dua komponen

besar dalam pelayanan laboratorium. Dua komponen besar tersebut adalah
laboratorium histopatologi dan laboratorium sitopatologi. Laboratorium
histopatologi merupakan laboratorium yang menangani spesimen berupa jaringan
sedangkan laboratorium sitopatologi menangani spesimen berupa cairan atau
bentukan lain yang mengandung sel-sel untuk dilakukan diagnosis. Namun
kadangkala kedua laboratorium tersebut dapat berkolaborasi menjadi satu ketika
spesimen berupa materi mengandung sel namun diperlakukan seperti sebuah
jaringan atau organ (cytoblock/sitoblok).

Spesimen sitologik didapat dari sel yang terlepas (exfoliatif) atau sel yang
terlepas dari jaringan. Jenis spesimen yang paling umum yang diterima di
laboratorium patologi anatomik adalah spesimen cervical Pap Smear, hal ini
dikarenakan Pap Smear merupakan salah satu program pemerintah dalam
 7

menurunkan angka kanker servik. Selain itu spesimen yang diterima di

laboratorium sitologi adalah spesimen sitologi aspirasi jarum halus FNA (Fine
Needle Aspiration), dimana sel didapatkan dari jarum yang sangat tipis yang
dimasukkan ke sebuah lesi berbentuk cairan (misalnya kista tiroid). Selain itu
spesimen dapat berasal dari urin, dahak, cairan cerebrospinal, cairan berasal dari
bilasan dan lain sebagainya yang mengandung materi sel. Lain halnya dengan
spesimen untuk laboratorium histopatologi, dimana spesimen untuk laboratorium
histopatologi adalah seluruh organ yang diambil dari pasien baik berukuran kecil
maupun berukuran besar.

2.2 Sitologi
Sitologi merupakan salah satu bidang yang berkaitan dengan ilmu yang
mempelajari tentang morfologi selsel secara individual atau sel yang berasal dari
fragmen jaringan yang diamati secara mikroskopis. Sedangkan sitopatologi
merupakan cabang sitologi yang khusus mempelajari tentang kelainan morfologi
akibat jejas atau faktor lainnya (mikroorganisma atau kanker).

Sediaan sitologik dapat dibuat dari berbagai sumber dalam tubuh (urin,
puting, dahak, vagina, sinus, dll) kerokan diperoleh (mukosa bukal, lambung,
saluran pernapasan) dan dari cairan yang terkumpul di dalam tubuh (pleura,
peritoneal, perikardial) bahkan dari aspirasi benjolan tubuh yang terlihat atau
teraba.

2.3 Histologi
Histologi merupakan cabang ilmu biologi anatomi yang di dalamnya
mempelajari susunan struktur sel yang memiliki fungsi fisiologis sama tersusun
dalam suatu jaringan kompleks. Jaringan pada umumnya tersusun atas tiga
komponen yaitu sel, substansi intreseluler dan cairan. Substansi intraseluler
merupakan hasil produksi sel, cairan merupakan komponen yang menonjol karena
65-70% susunan kimia jaringan tubuh tersusun atas air (Mescher, 2016).
 8

2.4 Alur Kerja Laboratorium

Penyedia layanan kesehatan pada umumnya tidak terbiasa dengan cara
kerja laboratorium patologi anatomi. Pengiriman spesimen ke laboratorium
patologi anatomi dimulai dari rangkaian peristiwa yang kompleks dan diakhiri
dengan diagnosis/ interpretasi patologis untuk penunjang diagnosis.

Komponen yang terdapat di laboratorium patologi anatomi berbeda

dengan laboratorium klinik. Di laboratorium patologi anatomi, kita akan
mengenal yang namanya dokter spesialis patologi anatomi (dr.Sp.PA.) atau ahli
patologi, asisten ahli patologi, sitoteknologis dan histoteknologis, sedangkan
untuk di laboratorium patologi klinik kita telah mengenal yang namanya dokter
spesialis patologi klinik (dr.Sp.PK.), teknisi laboratorium kesehatan dan
plebotomis. Ahli patologi atau dokter spesialis patologi anatomi (dr.Sp.PA.)
merupakan seorang dokter dengan keahlian khusus dalam diagnosis dan deteksi
penyakit khususnya di bidnag histopatologi dan sitopatologi. Asisten ahli patologi
adalah seorang yang membantu ahli patologi dengan kompetensi untuk
menggambarkan secara kasar terhadap hasil pembedahan dan biopsi, yang diawasi
dan dimbimbingoleh ahli patologi.

Dalam pengelolaan laboratorium patologi anatomi khususnya di dalam

sistem administrasi sedikit berbeda antara laboratorium sitologi dan laboratorium
histologi. Spesimen yang diterima oleh laboratorium sitologi maupun histologi
memiliki alur yang sedikit berbeda. Adapun alur kerja di laboratorium sitologi
pada umumnya dapat dilihat
 9

Tabel 1 Alur Kerja Laboratorium Sitologi

Sistem adminitrasi yang ada di laboratorium patologi anatomi khususnya

histologi sedikit berbeda dengan laboratorium sitopatologi, walaupun adakalanya
kedua laboratorium itu disatukan. Skema dasar dari sistem laboratorium khusus
histologi adalah sebagai berikut :

Tabel 2 Alur Kerja Laboratorium Histologi

 10

2.5 Fiksasi
Fiksasi jaringan adalah suatu usaha untuk mempertahankan komponen-
komponen sel atau jaringan agar tidak mengalami perubahan dan tidak mudah
rusak. Proses fiksasi ini diharapkan setiap molekul pada jaringan yang hidup tetap
berada pada tempatnya dan tidak ada molekul baru yang timbul. Pada prosesnya
ini tentu tidak akan berjalan dengan sempurna, apabila timbul molekul asing baru
pada jaringannya disebut artefak. Tujuan fiksasi ini agar jaringan tersebut tetap
utuh. Fiksasi harus dilakukan sesegera mungkin setelah pengangkatan jaringan
atau setelah kematian agar tidak terjadi autolisis (Anil & Rejendran, 2008)

Sedangkan untuk membuat suatu sediaan yang baik, sel dan jaringan yang
akan diamati diharapkan sangat mirip dengan kondisi ketika masih hidup. Oleh
karena itu bagian penting dari pada teknik pembuatan sediaan histologik dan
sitologik adalah bagaimana caranya agar sel dan jaringan dapat tetap terjaga
secara alami. Untuk mencapai hal ini, maka jaringan yang diambil dari tubuh atau
sel yang dibuat dengan teknik apusan harus segera diawetkan pada suatu cairan
yang disebut dengan teknik fiksasi. Walaupun pada kasus-kasus apusan, Teknik
fiksasi dapat dilakukan dengan mengeringkan di suhu ruang atau dengan
pemanasan. Menurut definisi, fiksatif mengubah komposisi kimia dan fisik asli
dari jaringan. Selain mengubah sifat kimia sel dan jaringan yang digunakan,
fiksasi dapat juga menyebabkan perubahan fisik pada komponen seluler dan
ekstraselular. Mekanisme kerja dari fiksasi pada dasarnya adalah mengawetkan
bentuk sel dan organel sehingga mendekati bentuk Ketika masih di tubuh. Dengan
pemberian cairan fiksasi, maka akan mengubah komposisi jaringan.

Tujuan umum dari fiksasi jaringan adalah menjaga komponen sel dan
jaringan seperti ketika sel itu masih dalam kondisi hidup. Dalam proses fiksasi
dan langkah-langkah selanjutnya dalam pembuatan sediaan jaringan tentu ada
perubahan substansial pada komposisi dan tampilan komponen sel dan jaringan.
Dan ini kadangkala proses ini menghasilkan sediaan yang cukup jauh dari
keadaan yang ideal. Namun jika dilakukan dengan hati-hati, kita diharapkan dapat
menghasilkan sediaan yang secara karakteristik kimia maupun struktur yang baik
 11

sehingga memungkinkan pengamatan menghasilkan nilai yang maksimal.

Tahapan fiksasi secara umum dapat dituliskan beberapa tujuan sebagai berikut :

1. Menjaga struktur dan komponen kimiawi

2. Pencegahan kerusakan dan kematian
3. Mengeraskan sel dan jaringan
4. Pemadatan
5. Opticaldifernsiasi
6. Efek pewarnaan
7. Menempelkan sel
Adapun sejumlah faktor yang akan mempengaruhi tingkat efektivitas dan
kecepatan fiksasi jaringan adalah suhu/temperatur untuk meningkatkan suhu atau
memanaskan larutan fiksasi akan berbanding lurus terhadap meningkatkan
kecepatan penetrasi larutan fiksatif ke dalam jaringan. Peningkatan suhu dapat
juga mempercepat kecepatan reaksi kimia antara unsur fiksatif dengan sel atau
jaringan. Dampak peningkatan suhu pada larutan fiksatif berpotensi meningkatkan
laju degenerasi jaringan di area yang tidak sulit untuk dihentikan. Fiksasi yang
menggunakan teknik pemanasan disarankan dimulai dari suhu kamar yang
ditingkatkan secara perlahan hingga suhu mencapai 45°C. Suhu ini merupakan
suhu yang dapat diterima dengan baik untuk menjaga morfologi sel dan jaringan
dengan kualitas yang baik. Peningkatan suhu pada larutan fiksasi dapat juga
dilakukan dengan suhu yang lebih tinggi, sampai 65°C, namun perlu diperhatikan
jika waktu yang digunakan harus lebih singkat. Kedua yaitu Penetrasi larutan
Waktu penetrasi optimal untuk proses fiksasi bermacam-macam diantara jenis-
jenis larutan fiksatif yang ada dan juga jenis sel yang ada di larutannya.
Perhitungan waktu penetrasi larutan fiksatif menjadi pertimbangan dalam
“mengejar” waktu autolysis dari sel atau jaringan yang terdapat di pusat terdalam
suatu jaringan tersebut. Waktu penetrasi diharuskan mencapai titik pusat terdalam
sebelum proses autolysis berjalan. Pertimbangan waktu penetrasi selain mengejar
waktu autolysis adalah tingkat sirkulasi penerimaan dan pelaporan spesimen serta
keterbatasan instrument. Ketika bagian dalam dari jaringan tidak sempat terfiksasi
maka akan ada kemungkinan gambaran sediaan mikroskopis yang terdistorsi
 12

Sebagian dan Tingkat penetrasi zat pengikat tergantung pada karakteristik difusi
dan variasi dari materi satu ke materi lainnya. Ketiga yaitu Dimensi spesimen
merupakan salah satu hal yang harus diperhatikan. Hal ini berhubungan dengan
waktu optimal jaringan terfiksasi dari seluruh sisi dan juga proses difusi dari
larutan yang digunakan dalam pematangan jaringan. Selain itu, kita mengetahui
bahwa ukuran ketebalan dari kaset jaringan adalah 5 mm. Jaringan diharapkan
dapat bergerak bebas di dalam kaset dan tidak ada kontak antara jaringan dan
kaset itu sendiri. Ketika jaringan itu menempel dengan kaset, maka proses fiksasi
dan pematang jaringan akan menjadi lama karena dimensi spesimen menjadi
berkurang. Keempat yaitu Rasio antara volume larutan fiksasi terhadap spesimen
menjadi hal yang harus diperhatikan. Hal ini berhubungan dengan penurunan
konsentrasi larutan fiksasi dan kecepatan penetrasi. Makin sedikit larutan fiksasi
yang digunakan, maka konsentrasi akhir ketika terjadi kondisi isotonic akan
menurun dengan drastic, dan tentunya akan mengurangi kecepatan penetrasi. Lain
halnya ketika larutan fiksasi besar perbandingannya terdapat spesimen, maka
konsentrasi akhir ketika isotonic tidak bergitu bermakna dan kecepatan penetrasi
terjaga. Perbandingan yang telah teruji adalah 1:20 untuk spesimen:larutan fiksasi.
Namun jika Anda ingin fiksasi menjadi lebih baik dilihat dari waktu dan kualitas,
maka rasio yang disarankan adalah 1:50. Kelima Tingkat keasaman suatu larutan
(pH) dapat menjadi penting ketika larutan yang digunakan dalam fisasi
mengandung formaldehid. pH yang diberikan diharapkan sesuai dengna pH sel
yaitu 6,8-7,2. Ketika kondisi larutan fiksasi mengandung Formaldehidakan
membentuk asam format dan menghasilkan larutan asam yang akan bereaksi
dengan hemoglobin dan menghasilkan pigmen artefak (asam Hematin
Formaldehid). Namun ketika larutan fiksasi memiliki pH basa, maka
kemungkinan yang terjadi adalah sel yang mengalami pembengkakan. Pada kasus
tertentu asam kadang-kala diperlukan seperti penggunaan asam asetat maupun
asam pikrat (Bouin). Hal ini biasa dilakukan ketika waktu fiksasi diharapkan lebih
cepat dibanding penggunaan formalin atau karena penggunaan lainnya seperti
peningkatan kekontrasan, namun perlu diperhatikan ketika pemberian larutan
 13

yang bersifat asam dalam waktu yang lama, akan membuat sel mengkerut dan
lebih rentan terhadap kerusakan fisik.
Terdapat beberapa cara agar fiksasi terjadi secara optimal diantaranya
yaitu, ketika kondisi jaringan masih segar, segeralah masukkan jaringan ke dalam
cairan seperti formalin. Jangan biarkan jaringan mengering di udara. Pastikan
semua jaringan terrendam dalam larutan fiksasi, pastikan ketebalan jaringan tidak
melebihi 4 mm.
Terdapat 2 macam jenis fiksasi, yaitu fiksasi basah fiksasi coating, fiksasi
kering dan fiksasi khusus. Fiksasi basah merupakan tindakan fiksasi dimana
sediaan sitologik masih dalam kondisi basah atau lembab. Metode ini adalah
metode yang ideal untuk menjaga suatu sediaan sitologik baik sitologi ginekologi
ataupun sitologi non-ginekologi. Fiksatif Coating merupakan fiksasi yang
dilakukan untuk pengganti fiksatif basah. Fiksasi ini dilakukan dengan
memberikan aerosol (penyemprotan) pada spesimen sitologi yang dibuat secara
konvensional maupun dengan metode berbasis cairan. Fiksasi ini terdiri dari
alkohol dan polietilen glicol yang berfungsi sebagai pelapis dari sediaan sitologik.
Fiksasi kering merupakan fiksasi yang dilakukan pada sediaan sitologik yang
dilakukan dengan mengeringkan sediaan tersebut di udara terbuka (udara kering)
atau dengan bantuan pemanasan hingga kering (penggunaan hotplate dengan suhu
maksimum 50°C). Sediaan sitologik harus diproses dan dikeringkan dengan
segera untuk menghindari munculnya artefak. Salah satu keuntungan dari fiksasi
ini adalah pembuatan dan pewarnaan yang cepat (2-3 menit). Sedangkan fiksasi
khusus dibagi menjadi 2, fiksasi carnoy dan fiksasi cair. Fiksasi camoy adalah
fiksasi yang dikhususnya untuk spesimen yang hemoragik. Fiksasi cair Fiksasi ini
merupakan fiksasi yang baik ketika akan membuat "cell block" ataupun dalam
pengamatan sel dalam kondisi segar (penggunaan di parasit, mikologi dan lain
sebagainya). (Khristian & Inderiati. 2017).

2.6 Teknik Pemotongan

Untuk mendapatkan pita jaringan yang baik harus melalui dua tahap
pemotongan yang harus dilakukan secara berurutan. Tahap tersebut ialah, tahap
 14

potong kasar dan potong halus. Kedua tahap ini harus dilakukan secara teliti jika
tidak dapat menyebabkan artefak pada pita jaringan yang dapat mempersulit
proses pengamatan.
A. Potong Kasar
Proses potong kasar atau trimming merupakan proses awal pemotongan
blok jaringan yang bertujuan untuk membuang kelebihan paraffin yang menutupi
jaringan sehingga permukaan jaringan dapat terbuka dan bisa dihasilkan pita
jaringan yang utuh. Dikatakan potong kasar, dikarenakan pada proses ini
mikrometer diatur pada ketebalan yang cukup tinggi yaitu pada 15-30μm. Pada
proses ini perlu dilakukan dengan teliti karena jika tidak dapat mengakibatkan
artefak pada pita jaringan. Pastikan blok jaringan sudah diseting di belakang pisau
sehingga blok tidak langsung terpotong tebal, karena dapat menyebabkan blok
pecah dan merusak jaringan di dalamnya.
B. Potong Halus
Proses potong halus ini bertujuan untuk menghasilkan pita jaringan
dengan ketebalan tertentu. Blok jaringan yang akan dipotong harus didinginkan
terlebih dahulu untuk memberikan suhu yang stabil pada blok paraffin dan
jaringan. Ketebalan pita jaringan untuk jaringan hasil pembedahan rutin ialah 3-4
μm. Idealnya hasil pemotongan yang baik akan saling menempel satu sama lain
membentuk pita dengan ketebalan yang sama. Namun pita yang terbentuk dapat
memiliki ketebalan yang bervariasi meskipun dipotong pada skala yang sama.
Variasi ketebalan pita jaringan ini dipengaruhi banyak factor seperti suhu, sudut
penempatan pisau, dan kecepatan pemotongan, juga pengalaman teknisi. Perlu
dilakukan pelatihan berulang-ulang untuk dapat konsisten meghasilkan pita
jarigan yang baik secara dan efisien.

2.7 Pewarnaan Hematoxylin dan Eosin

Pewarnaan yang paling sering digunakan pada pemeriksaan histopatologi
adalah pewarnaan Hematoxylin dan Eosin. Pewarnaan hematoksilin dan eosin
(atau pewarnaan H&E) adalah salah satu pewarnaan jaringan utama yang
digunakan dalam histologi. Ini adalah noda yang paling banyak digunakan dalam
 15

diagnosis medis dan sering kali merupakan standar emas ; misalnya, ketika ahli
patologi melihat biopsi dari dugaan kanker , bagian histologis cenderung diwarnai
dengan H&E.

Gambar 1 Pewarnaan Hematoxylin dan Eosin

H&E adalah kombinasi dari dua pewarnaan histologis: hematoxylin dan

eosin. Hematoxylin menodai nuklei sel biru, dan eosin menodai matriks
ekstraseluler dan sitoplasma merah muda, dengan struktur lain mengambil
berbagai corak, rona, dan kombinasi warna-warna ini. Noda menunjukkan tata
letak umum dan distribusi sel dan memberikan gambaran umum struktur sampel
jaringan. Oleh karena itu, ahli patologi dapat dengan mudah membedakan antara
bagian inti dan sitoplasma dari suatu sel.

2.8 Pewarnaan Papanicolaou

Pewarnaan Papanicolaou salah satu pewarnaan yang lazim digunakan pada
pemeriksaan sitologi, karena pewarnaan ini dapat mewarnai inti sel dengan sangat
jelas sehingga dapat mempermudah untuk melihat inti sel apabila terjadi
kemungkinan keganasan.
George Nicholas Papanicolaou adalah pelopor dalam menjelaskan
karakteristik fisiologi dan sitologi dari sistem reproduksi wanita. la terkenal
karena menciptakan tes Papanicolaou, umumnya dikenal sebagai Pap smear, yang
merevolusi deteksi dini kanker serviks. (Siang Yong Tan, 2015)
 16

Gambar 2 Pewarnaan Papanicolaou

Papanicolaou merupakan pewarnaan universal yang digunakan untuk

ginekologi dan pemeriksaan sitologi non-ginekologi. Terutama digunakan pada
skrining kanker mulut dan leher Rahim tanpa gejala populasi dan dalam tindak
lanjut pasien dengan kanker. Tes Pap mengurangi kejadian kanker serviks hingga
70 dinegara maju (Rahesti, 2019)
 BAB III
HASIL DAN PEMBAHASAN
3.1 Alur Penerimaan Sampel Patologi Anatomi
1. Sampel diterima di meja registrasi, meliputi :
a. Nomor Urut
b. Tanggal Pemeriksaan Sampel
c. Usia
d. Jenis Kelamin
e. Dokter Pengirim
f. Asal RS Pengirim
g. Asal Jaringan
h. Ukuran Jaringan
2. Kemudian buat nomor PA sesuai dengan urutan
3. Bawa sampel ke laboratorium untuk dianalisis dan dilakukan pemeriksaan
sesuai prosedur
4. Hasil dibaca oleh dokter spesialis patologi anatomi
5. Hasil diprint out dan di fotocopy
6. Kemudian tulis dibuku registrasi (No urut, identitas pasien, tgl
pemeriksaan sampel dll) seperti yang dilakukan diawal.
7. Hasil dikirim kembali ke Rumah Sakit pengirim.

3.2 Ukuran Jaringan & Macam-Macam Jaringan

1. Ukuran Jaringan :
a. Kecil : < 3cm
b. Sedang : 3-5 cm
c. Besar : > 8 cm
2. Macam – Macam Jaringan
a. Jaringan Masektomi
Proses operasi untuk mengangkat seluruh jaringan payudara.
 18

b. Jaringan Histektomi
Prosedur Pengangkatan seluruh bagian rahim baik tubuh rahim
hingga leher rahim (serviks)

c. Jarinngan Kolostomi
Tindakan Pembuatan lubang dibagian perut Sebagai saluran
Pembuangan Kotoran/Feses. Prosedur Kolostomi biasanya dilakukan pada
pasien yang tidak dapat buang air besar (BAB) dengan normal. akibat
adanya masalah di usus besar anus/rektum.

d. Jaringan Kistektomi
Pengangkatan Kista dari Ovarium. Dalam beberapa kasus,
Ovarium mungkin perlu diangkat Juga hai ini disebut juga dengan
Ooforektomi

e. Jaringan Lapartomi
Prosedur bedah dengan membuat sayatan di dinding perut
dilakukan untuk men diagnosis serta mengobati masalah pada organ di
dalam perut, seperti masalah pencernaan dan gangguan di organ hati,
pankreas, limfa, dan empedu

3.3 Sitologi
Ilmu yang mempelajari sel yang berasal dari caran tubuh, asites, pleura, cairan
kista, pus, sputum, darah, urine, apusan Pap smear, FNAB / FNAC.

3.3.1 Tiga Jenis Pemeriksaan Sitologi

1. Pemeriksaan Sitologi Pap smear
Untuk mengetahui ada tidaknya kanker Serviks atau proses
Pramalignansi pada Seorang Pasien. Berasal dan swab leher rahim yang
dilakukan oleh dokter. Sp.PA, Dokter bidan, Perawat, dan ATLM.

a. Kriteria :
1) Untuk usia yang 30 tahun ke atas
2) Sudah pernah melakukan hubungan seksual
 19

3) Tidak dalam keadaan menstruasi

4) Hari ke-14 dari hari pertama menstruan terakhir
5) Tidak melakukan hubungan seksual (Puasa)
b. Adapun hal yang harus ditanyakan kepada Pasien dan dicatat :
1) Tanggal menstruasi terakhir
2) Siklus menstruasi
3) Berapa kali hamil dan melahirkan Pernah tidak keguguran
c. Dokter Sp. PA melakukan tindakan dgn Cara Pasien ditidurkan dalam
keadaan mengangkang dengan memasukkan spekulum locor bebek ke
Vagina.
d. Lokasi yang diambil :
1) Ektoserviks (alat yg digunakan ialah wooden spatula)
2) Endoserviks (alat yang digunakan ialah cyto brush)
e. Cara Pengambilan
1) Ektoserviks (bagian bibir/luar vagina)
a) Masukkan wooden spatula ke bibir/luar vagina
b) Putar sebanyak 10x searah jarum jam
c) Oleskan ke objek glass (dibuat hapusan)
d) Lakukan fiksasi basah dgn alkohol 96% (15-30 menit)
e) Selanjutnya Pewarnaan papanicula
2) Endoserviks (bagian dalam vagina)
Prosedurnya sama dengan ektoserviks hanya beda pada alat
yang digunakan

2. Pemeriksaan FHAB (Fine Needle Aspiration Blopsy) /FNAC

a. Dilakukan dengan biopsi jorum halus, tindakan pengambilan sampel
dari benjolan yang ada di tubuh pasien yg besarnya teraba /
superficial.
b. Dapat berupa :
1) Infeksi, terbagi menjadi Akut dan Kronis, Kronis terbagi menjadi
spesifik dan non spesifik
2) Tumor, terbagi menjadi Jinak (angkat) dan Ganas (kemo-angkat)
 20

c. Sebelum sampel diambil untuk itu dilakukan Pemeriksaan

makroskopir dahulu.
- Cara Pengambilan :
1) Diambil menggunakan spuit 10 cc dengan Piston ukuran jarum
yg sangat kecil, 2-3x tusuk.
2) Buat sediaan hapus
3) Lakukan fiksasi kering, diwarnai dengan MDT (Morfologi
Darah Tepi)
3. Pemeriksaan Sitologi Cairan
Berasal dari cairan tubuh untuk mengetahui ada atau tidaknya sel
keganasan dalam cairan tubuh/ada atau tidaknya sel kanker/Pra kanker.

a. Prosedur Kerja
1) Lakukan pencocokan sampel dengan lembar formulir.
2) Dilihat secara makroskopis, dan mendeskipsikan cairan dalam bentuk
narasi.
3) Cairan dipindahkan ketabung centrifuge
4) Centrifuge selama 15-30 menit kecepatan 1.500 rpm.
5) Buang supernatant, dan homogenkan sedimen
6) Sedimen dibuat sediaan apus

3.3.2 Macam – Macam Fiksasi

1. Fiksasi Basah
Digunakan untuk pewarnaan papanicolou. Sediaan Langsung
direndam dalam alkohol 96% selama 15 menit.. Tidak boleh terkena udara
dan kering (Untuk Pap smear dan sitology)
2. Fiksasi Kering
Digunakan untuk pewarnaan MDT atau Diff Quick. Sediaan
Dibiarkan kering, lalu fiksasi dengan methanol (Untuk FNAB dan
sitology)
 21

3.3.3 Pewarnaan Sitologi

1. Papanicolaou, menggunakan Fiksasi Basah

Setelah fiksasi dengan alkohol 96% seloma 15 menit, lalu :

1) Celupkan dalam alkohol 96% (5 celup)

2) Alkohol 80% (5 celup/5 menit)
3) Alkohol 75% (5 celup/5 menit)
4) Cuci dengan air mengalir (5 menit)
(Proses 1-4 merupakan Rehidrasi)
5) Rendam dalom Hematoxsilin Eosin (5-10 menit)
(Untuk mewarnai inti biru)
6) Cuci dengan air mengalir (5 menit)
7) Celupkan dalam lithium (1 Celup)
8) Cuci dengan air mengalir (3 menit)
9) Celupkan dalam HCL (1 celup)
10) Rendam ke dalam EA 50% (3-5 menit)
11) Bilas dengan alkohol 96 % (5-10 menit)
12) Rendam dalam OG 6% (3-5 menit)
13) Bilas dengan alkohol 96% (5-10 Celup)
14) Bilas dengan alkohol 96 % (5-10 celup)
15) Bilas dengan alkohol 96% (5-10 celup)
16) Keringkan, lalu celupuan dalam xylol (5-10 celup)
(Xylol untuk deparanisasi cair, untuk menghilangkan sisa paraffin)

17) Mounting (entelan dan deck glass).

2. MDT (Morfologi Darah Tepi), menggunakan Fiksasi Kering

Fiksasi dikeringkan terlebih dahulu.

1) Rendam dalam Metanol. (5-10celup/5 menit)

2) Rendam dalam Eosin (5-10celup/5 menit)
 22

3) Methylene Blue (5-10 celup)

4) Cuci dengan air mengalir
5) Keringkan, lalu bacadi mikroakop
Catatan :

Jika kualitas warna baik, lanjutkan poses mounting, jika belum baik
lakukan pewarman ulang baru lakuan proses mounting.

Perbedaan tahapan mounting :

1. Papanicolaou
Setelah pewarnaan lakukan tahap mounting lalu lanjut pemeriksaan di
mikroskop.

2. MDT
Setelah proses pewarnaan telah selesai, dilakukan proses pembacaan
terlebih dahulu dimikroskop, jika sudah baik lanjut ke tahap mounting.

3.4 Histopatologi
Salah satu pelayanan pemeriksaan laboratorium Patologi Anatomi dari sampel
berupa jaringan operasi/biopsy, kerokan. Pemeriksaan ini berfungsi untuk melihat
perubahan morfologi sel dan jaringan.

1. Tahap Administrasi -> Sama dengan penjelasan awal

2. Pemotongan Gross :
a. Lihat Mikroskopis terlebih dahulu seperti Ukuran, Warna, Banyak
jaringan (3 dimensi )
b. Potong bagian normal dan bagian yang dicurigai dengan ketebalan
0,5cm, vol 4cc, lalu catat pada form dengan berapa potong ( CUP ),
Beberapa kaset dan sisa yang habis
c. Pemotongan Jaringan ( Tissue Prossecing ) 12 tabung yaitu :
1) Formalin ( 1,5 jam )
2) Formalin (1,5 jam )
3) Alkohol 96% (40 menit )
4) Alkohol 96% (40 menit )
 23

5) Ethanol ( 1 jam )
6) Ethanol ( 1 jam )
7) Xylol (1 jam )
8) Xylol (1 jam )
9) Xylol (1 jam )
10) Parrafin Cair ( 1 jam )
11) Parrafin Cair ( 1 jam )
12) Parrafin Cair ( 1 jam )
d. Penanaman Jaringan/ Blok parrafin ( Tissue Embedding ) :
1) Tuangkan parrafin cair ½ kedalam base mold
2) Posisikan jaringan sesuai yang diharapkan/ orientasi
3) Dinginkan dasar dan basemold sehingga posisi tidak berubah
4) Tutup dengan kaset jaringan
5) Tuangkan parrafin cair Kembali hingga batas base mold dengan
kuat tertutup
- Diletakan diatas woling plate untuk di dinginkan
- Mikrotomi ( Pemotongan Jaringan )
- Atur Posisi Kaset di mikrotom dan posisikan tuas pemotong
dengan ketebalan
Catatan :

1) Potong Kasar (Timming) : 5-10 mm

2) Potong Halus (Sectioning) : 0,5-2 mm
3) Waterbath (40-45◦C) : Membentangkan/ Merenggangkan vita
parrafin untuk proses pewarnaan pada objek glass
4) Hot Plate (60-65◦C) : Untuk menghilangkan sisa air pada objek
glass Dan Untuk Mencairkan parrafin dan menekatkan jaringan.
 24

3.4.1 Pewarnaan Heamatoxylin Eosin ( HE )

1) Xylol ( 5 Menit )
2) Xylol ( 5 Menit )
3) Xylol ( 5 Menit )
4) Keringkan Suhu Kamar
5) Ethanol ( 3Menit )
6) Ethanol ( 3 Menit )
7) Alkohol 96% ( 3 Menit )
8) Alkohol 96% ( 3 Menit )
9) Cuci dengan air mengalir
10) Rendam dalam hamatoxylin mayer/ Eosin ( 12 Menit )
11) Cuci dengan air mengalir ( 3 Menit )
12) Alkohol 70 % ( 6 Celup )
13) Alkohol 80% ( 6 Celup )
14) Eosin ( 2 Celup )
15) Alkohol 96% ( 6 Celup )
16) Alkohol 96% ( 6 Celup )
17) Ethanol ( 5 Celup )
18) Bersihkan dan Keringkan
19) Celup Xylol ( 4 Celup )
20) Mounting
21) Siap Dibaca Dokter PA
Sediaan Histopatologi Dan Sitologi yang sudah ada atau dilakukan
pengecekkan kualitas sediaan secara berskala dibawah mikroskop.
Di Nilai atau Di Cek Sediaaanya :
a. Ada/ Tidaknya artefak
b. Kualitas Pewarnaan
c. Ada/ Tidaknya lipatan
d. Ada/ Tidaknya sisa parrafin
e. Apakah jaringan sudah cukup baik/belum
Sediaan yang sudah dibaca oleh dokter SP.PA kemudian diketik
 25

dan di print sebanyak 2 rangkap, 1 rangkap dikirim ke RS

Pengririm Dan 1 rangkap disimpan untuk arsip.

3.5 Pengarsipan
Arsip dikatagorikan menjadi 2 yaitu :

1. Arsip Kering
1) Arsip Dokumen soft copy dan hard copy ( Min – 10 th )
2) Arsip Blok Parrafin ( Min 5 th )
3) Arsip Slide ( Min 5 th )
Arsip disusun Berdasarkan dari nomor terkecil ke terbesar
disimpan ke tempat khusus.

2. Arsip Basah
Berupa sisa jaringan yang disimpan kedalam container khusus dan
diberi label nomor ( min 3 bulan ) label berisi tanggal,No. PA, No. Urut,
Dan Kode Sampel.

3.6 Limbah Patologi Anatomi

Limbah Patologi Anatomi Terdiri Dari :

1. Limbah jaringan : Dibuang sekitar 3 bulan sekali dan diambil oleh

pihak ketiga ( dipisahkan cairn dengan kotak )
2. Limbah Cairan : Ditampung dalam drigen/ IPAL ( Instalasi
Pembuangan Air Limbah ), Kemudian dibuang setiap 3 bulan sekali
oleh pihak ke 3
3. Blok Parrafin : Dibuang setaip 5 tahun sekali dan diambil oleh pihak
ke 3
4. Limbah/ Infeksius : Ditampung dalam plastic kuning
5. Limbah Benda Tajam : Ditampung dalam safety Box
Semua Limbah akan dimusnahkan dengan insenator oleh pihak
ketiga dan pihak laboratorium akan pembayar biaya buangan limbah
berdasarkan berat limbah yang diperoleh.
 26

3.7 Peralatan
A. Centrifuge
Centrifuge yang digunakan di Laboratorium Patologi Anatomi
Dyatnitalis bermerk Gemmy PLC 05.

Gambar 3 Centrifuge

a. Prinsip Kerja : Memisahkan Pertikel yang terkandung di dalam

suatu larutan menurut ukuran, bentuk, kerapatan molekul,
viskositas dari medium tersebut serta kecepatan rotor.
b. Cara Kerja :
1) Colokkan alat pada stop kontak.
2) Siapkan sample yang akan diputar dan letkkan secara simetris
dan seimbang.
3) Jika persiapan sample telah selesai nyalakan mesin.
4) Kemudian set waktu yang diinginkan, timer akan berhenti
dengan sendirinya sesuai dengan waktu yang telah di set.
5) Pilih kecepatam dengan memutar speed.
6) Alat akan langsung berputar ditandai dengan lampu operation
menyala.
7) Tunggu sampai alat berhenti berputar lalu keuarkan sample.
8) Matikan alat dengan meneka tombol power.
 27

B. Waterbath

Gambar 4 Waterbath

Waterbath adalah peralatan laboratorium yang terbuat dari wadah berisi air
panas. Alat ini digunakan untuk menginkubasi sampel dalam air pada suhu
konstan selama periode waktu yang lama. Sebagian besar waterbath memiliki
antarmuka digital atau analog untuk memungkinkan pengguna mengatur suhu
yang diinginkan, tapi beberapa water bath memiliki suhu yang dikontrol oleh arus
yang melewati sensor(anggap saja mikrokontroller). Pemanfaatan water bath
meliputi pemanasan reagen, peleburan substrat atau inkubasi kultur sel.

a. Prinsip Kerja Mengubah energi listrik menjadi energi panas. Energi panas
tersebut disalurkan ke air pada bak, yang kemudian akan digunakan untuk
memanaskan
b. Cara Kerja :
1) Buka penutup waterbath, lalu isi dengan menggunakan air suling atau
aquadest, jangan menggunakan air sumur atau air PDAM. Isikan pada
chamber waterbath. Pastikan air yang diisikan ciukup tidak kurang dan
tidak juga berlebihan.
2) Hubungkan waterbath kesumber daya atau listrik, kemudian nyalakan
tombol power keposisi on.
3) Lakukan pengaturan suhu sesuai dengan kebutuhan dan lakukan pula
pada pengaturan waktu pemanasan. Tekan tombol start dan biarkan
proses pemanasan berjalan sesuai dengan waktu yang ditentukan.
4) Setelah proses berakhir,tambahkan air suling jika dirasa sudah melewati
 28

batas minimum
5) Kosongkan water bath jika sudah tidak digunakan. Hati-hati ketika
membuang air dari pipa outlet,dikhawatirkan masih panas dan
membahayakan sekitar
6) Matikan power dan cabut sumber daya pada waterbath jika tidak
digunakan dalam waktu yang cukup lama. Tutup supaya chamber tetap
bersih.
a. Cara Perawatan Waterbath :
1) Untuk perawatan, bersihkan alat hanya dengan lap bersih yang
dibasahi air kemudian lap dengan kain kering setiap selesai
menggunakan alat
2) Box kontrol jangan sampai tersiram atau kemasukkan air karena
dapat berakibat tersengat tegangan listrik (berbahaya) atau alat akan
menjadi rusak.
3) Cara rutin air dapat diganti atau ditambahi +/-2 bulan sekali.
b. Cara Penyimpanan Waterbath :
1) Sebagai media pemanas digunakan air suling (jangan
menggunakan air sumur, karena menyebabkan korosi
2) Selesai digunakan (jika menggunakan listrik) matikan arus listrik
dan dicabut dari arus listrik.
3) Jika hendak disimpan air (media pemanas) dikosongkan
c. Kalibrasi :
Paling tidak dilakukan dua kali per tahun (2x/tahun).
Termometer waterbath harus dicek oleh pertugas yang bertanggung
jawab untuk hal ini atau seorang yang diberi tugas oleh Kepala
Laboratorium dengan menggunakan thermometer terkalibrasi. Interval
uji penyimpanan (deviasi) harus didokumentasikan atau dicatat pada
buku peralatan.

Bila alat teroperasi tanpa mengindahkan sudu yang diinginkan,

prosedur ini tidak perlu dilakukan, alat harus diberi label yang sesuai
untuk ini.
 29

C. Tissue Embeding Center

Gambar 5 Tissue Embending Center

a. Prinsip Kerja : Saat akan melakukan pengoperasian alat, suhu yang

diinginkan untuk reservoir paraffin, tangki penampungan jaringan dan
tahap kerja diatur
b. Cara Kerja :
1) Hidupkan alat dan tunggu beberapa saat.
2) Tekan manual.
3) Tekan pause pada saat tutup processor sudah berada di atas
4) Saat tutup processor menutup segera tekan pause atau tekan p2 atau
p1 auto.
5) Tekan auto.
c. Cara Mengeluarkan Keranjang dari Tissue Processor :
1) Tekan pause.
2) Tekan manual.
3) Saat menutup processor sudah berada diatas, tekan pause
4) Lepaskan keranjang.
5) Tekan Manual
 30

D. Cooling Plate

Gambar 6 Cooling Plate

a. Prinsip Kerja : Digunaka dilaboratorium histologi untuk mendinginkan

cetakan embedding dan blok paraffin. Dan dapat menangani hingga 60
blok sekaligus, sedangkan suhu permukaan pendingin dapat dipilih
antara -5 dan -15°c sebagai kompresor yang kuat menjalankan sistem
pendingin.
b. Cara Kerja : Gel pendingin tingkat lanjut memungkinkan iceberg
mempertahankan suhu yang lebih dingin untuk waktu yang lebih lama.
Pelat dingin yang didinginkan sebelumnya hingga 5 jam akan
memungkinkan pengguna untuk mendinginkan blok selama jangka
waktu hingga 4jam pada suhu kamar sebelum mikrotom.
 31

E. Hot Plate

Gambar 7 Hot Plate

a. Prinsip Kerja: Memanaskan sampel dan untuk berbagai kegiatan lainnya.

Pelat panas secara konseptual sederhana-permukaan datar dengan elemen
pemanas.
b. Cara Kerja:
1) Siapkan sampel yang akan dipanaskan
2) Letakkan sampel ke dalam Erlenmeyer, gelas beaker atau sediaan apus
dengan cara ditaruh saja
3) Hidupkan hotplate, putar pengatur suhu secara perlahan
4) Sesuaikan suhu yang diinginkan
F. Mikrotom

Gambar 8 Mikrotom

a. Prinsip Kerja: menyayat jaringan sehingga menjadi bagian yang sangat

tipis sebelum ditempelkan pada permukaan slide kemudian diperiksa
dibawah mikroskop.
b. Pemotongan (mounting) yaitu babak pemotongan blok preparat dengan.
 32

menggunakan mikrotom Sebelum memperagakan pemotongan

serangkaian persiapan yang harus dilakukan adalah:
1) Persiapan pisau mikrotom Pisau mikrotom harus diasah sebelum
dipakai agar jaringan dapat dipotong dengan patut dan tidak koyak
sehingga didapatkan jaringan yang patut. Pisau mikrotom kemudian
diletakan pada tempatnya di mikrotom dengan sudut tertentu.
Rekatkan blok parafin pada holder dengan menggunakan spatula
atau scalpel. Letakkan tempat duduk blok parafin beserta blok
preparat pada tempatnya pada mikrotom
2) Persiapan Kaca Objek Kaca objek yang akan direkatkan preparat
harus telah dicoated (disalut) dengan zat perekat seperti albumin
(putih telur). gelatin atau tespa
3) Persiapan Waterbath atau wadah ada pokoknya air hangat dengan
temperatur 37-40°C
4) Persiapan sengkelit atau kuas.
c. Teknik pemotongan parafin yang mengandung preparat yaitu sebagai
berikut:
1) Rekatkan blok paraffin yang mengandung preparat pada tempat
duduknya di mikrolom. Tempat duduk blok paraffin beserta blok
paraffinnya kemudian diletakkan pada pemegangnya (holder)
pada mikrotom dan dikunci dengan kuat
2) Letak pisau mikrotom pada tempatnya dan tata sudut
kemiringannya. Kebanyakan sudut kemiringan berkisar 20-30
derajat
3) Tata ketebalan potongan yang diminta, kebanyakan dipakai
ketebalan selang 5-7 mikrometer.
4) Gerakkan blok preparat ke arah pisau sedekat mungkin dan
potonglah blok preparat secara teratur dan ritmis. Buang pita-pita
paraffin yang awal tanpa jaringan sampai kita mendapatkan
potongan yang mengandung preparat jaringan
5) Pita paraffin yang mengandung jaringan lalu dialihkan secara
 33

hati-hati menggunakan sengkelit atau kuas kedalam water bath

yang temperaturnya diatur 37-40°C dan biarkan beberapa saat
sampai pita paraffin tersebut mengembang
6) Setelah pita paraffin terkembang dengan patut, tempelkan pita
paraffin tersebut pada kaca objek yang telah dicoated dengan cara
memasukkan kaca objek itu kedalam water bath dan
menggerakkannya ke arah pita paraffin. Dengan menggunakan
sengkelit atau kuas pita paraffin ditempelkan pada kaca objek.
Setelah melekat kaca objek digerakkan keluar dari waterbath
dengan hati-hati agar pita parafin tidak melipat.
7) Letakkan kaca objek yang ada pokoknya pita paraffin di atas
hotplate dengan temperatur 40-45°C, biarkan selama beberapa
jam. Cara lainnya yaitu dengan melewatkan kaca objek di atas api
sehingga pita paraffin melekat ketat di atas kaca objek.
8) Setelah air kering dan pita paraffin telah melekat dengan kuat,
simpan kaca objek ada pokoknya potongan paraffin dan jaringan
sampai saatnya untuk diwarnai.
d. Perawatan Mikrotom
Mikrotom sebaiknya ditutup dengan plastik, atau dibawa masuk ke
kotaknya jika tidak sedang digunakan. Jangan memindahkan mikrotom
dengan cara memegang bagian yang dapat memperagakan usaha,
karena dapat menggangu akurasinya. Sebelum dan sesudah digunakan,
sebaiknya mikrotom dibersihkan dari serpihan parafin dengan cara
melap dengan kain lap yang telah dibasahi dengan xilol. Mikrotom
harus selalu diminyaki untuk mencegah keausan dan kemacetan.
 34

G. Mikroskop

Gambar 9 Mikroskop

a. Prinsip Kerja : lensa objektif akan membentuk bayangan benda yang

bersifat nyata, terbalik, dan diperbesar Bayangan benda oleh lensa
objektif akan ditangkap sebagai benda oleh lensa okuler. Bayangan inilah
yang tampak oleh mata.
b. Cara Kerja:
1) Letakkan pada meja batu
2) Hubungkan alat dengan stop kontak
3) Tekan tombol ON/OFF
4) Atur cahaya dengan memutar tombol cahaya.
5) Putar bagian makro untuk mendapatkan lapangan Pandang
6) Putar bagian mikro untuk memperjelas lapangan Pandang
7) Putar bagian kondensor untuk pengaturan cahaya.
8) Putar bagian diafragma untuk mengatur kejelasan lapangan pandang
9) Gunakan lensa sesuai kebutuhan (4x, 10x, 40x, 100x) dengan cara
memutar
10) Bersihkan lensa 100x setelah menggunakan imersi
11) Cabut dari listrik lalu tutup mikroskop dengan penutupnya.
c. Prosedur Penggunaan Teaching Mikroskop :
1) Menghidupkan mesin pendingin ruangan dengan menekan tombol
"ON "pada remote,dan atur suhu ruangan sesuai yang diinginkan.
2) Isi buku Absen
 35

3) Tutup plastik mikroskop dibuka dan dilipat dengan baik.

4) Menghidupkan mikroskop
a. Tekan tombol "ON" pada saklar listrik (dibawah meja)
b. Tekan tombol "ON" pada CPU
c. Tekan tombol "ON" pada mikroskop
d. Tekan tombol "ON" pada layar monitor
5) Letakkan sediaan dibawah lensa mikroskop
6) Di awal dengan pembesaran kecil sampai pembesaran maksimal
7) Atur cahaya sesuai yang dinginkan
8) Jika ada sediaan yang ingin didokumentasikan, tekan tombol
"EXPOSE" maka secara otomatis akan tersimpan pada flash disc
transent (hanya menggunakan flash disk transent/tidak boleh
menggunakan flash disk yang lain).
9) Hasil dokumentasi langsung dipindahkan ke komputer residen di
icon mikrofoto dan diberi nama yaitu: nomer slaid dan kesan.
Contoh: 2440-A-12 adenocarcinoma rectum (hasil dokumentasi
ditransent hanya dipindahkan ke komputer residen).
10) Selesal penggunaan, lensa dikembalikan ke posisi pembesaran
rendah. Matikan mikroskop, layar monitor, tombol CPU dan saklar
listrik.
11) Tutup kembali dengan plastik penutup dengan rapi
12) Matikan mesin pendingin ruangan
13) Kunci kembali ruangan mikrofoto dan kunci diletakkan residin.
d. Hal-hal yang perlu di perhatikan bila menggunakan Mikroskop :
1) Selalu membawa mikroskop dengan 2 tangan
2) Bila menggunakan preparat basah, tabung mikroskop selalu dalam
keadaan tegak, berarti meja dalam keadaan datar. Ini berlaku bagi
mikroskop dengan tabung tegak, tidak berlaku untuk mikroskop
dengan tabung miring.
3) Preparat basah harus selalu ditutup dengan gelas penutup
(deckglass) saat dilihat di bawah mikroskop.
 36

4) Selalu menjaga kebersihan lensa-lensa mikroskop termasuk cermin.

5) Bila ada bagian mikroskop yang bekerja kurang baik/hilang segera
laporkan kepada laboran.
6) Tidak dibenarkan melepas lensa-lensa mikroskop dari tempatnya.
7) Setelah selesai digunakan, pasang lensa objektif dengan perbesaran
paling rendah pada kedudukan lurus ke bawah.
e. Bagaimana kita dapat mengamati suatu objek atau preparat dengan
mikroskop?
Langkah yang dilakukan agar kita dapat mengamati suatu objek atau
preparat dengan menggunakan mikroskop.

1) Pastikan meja preparat dalam keadaan datar dan lensa objektif

perbesaran rendah, dipasang pada kedudukan segaris sumbu
dengan lensa okuler.
2) Melihat melalui okuler dengan satu mata (untuk mikroskop
monokuler) dan dua mata (untuk mikroskop binokuler).
Sesuaikan cermin agar sinar cukup tersedia atau nyalakan
lampu serta sesuaikan jumlah sinar yang diperlukan. Sesuaikan
lubang diafragma sehingga sinar yang diterima mata optimal
(tidak terlalu terang atau redup).
3) Jauhkan lensa objektif dari meja preparat dengan memutar
pengatur kasar searah jarum jala. Letakkan preparat di bawah
objektif. Dengan melihat dan samping, sesuaikan lensa objektif
perbesaran rendah pada jarak kira-kira 1 cm dari preparat Lihat
lagi melalui okuler, dan naikkan meja preparat dengan pemutar
kasar
4) Lihat lagi dari samping, dengan hati-hati putar objektif dg
perbesaran yg lebih tinggi (misalnya 45x) pada kedudukannya.
Perhatikan agar lensa tidak menyingung preparat, kmd lihat lagi
melalui okuler dan fokuskan preparat dengan memutar pemutar
halus secara perlahan ke arah berlawanan jarum jam. Sesuaikan
pencahayaan.
 37

5) Amati preparat, apabila perlu digambar

6) Bila pengamatan telah selesai putar revolver objek ke
perbesaran randah, naikkan tabung dan turunkan meja, setelah
itu ambil preparat dari meja preparat
f. Pemeliharaan Mikrokop
1) Mikroskop harus disimpan ditempat sejuk, kering, bebas debu,
bebas dari uap asam-basa. Tempat penyimpanan yang sesuai
adalah kotak mikroskop yang dilengkapi silica gel, yang
bersifat higroskopis sehingga lingkungan mikroskop tidak
lembab. Selain itu dapat pula dalam almari yang diberi lampu.
2) Bagian mikroskop non-optik dapat dibersihkan dengan kain
flanel. Untuk membersihkan debu yang terselip dapat dengan
kuas kecil atau kuas lensa kamera, serta alat semprot atau kuas
lembut.
3) Bersihkan kotoran, berkas jari, minyak dan lain-lain pada lensa
dengan menggunakan kain lensa, tissue atau kain lembut yang
dibasahi sedikit alkohol-ether atau isopropil alkohol. Jangan
sekali-kall membersihkan lensa dengan saputangan atau kain.
4) Bersihkan badan mikroskop dan lengan dengan kain lembut
dengan sedikit deterjen.
5) Sisa minyak imersi pada lensa objektif dapat dibersihkan
dengan xylol (xylene), Hati-hati xylol dapat merusak bahan
plastic
 38

3.8 Pemantapan Mutu Internal Laboratorium Patologi Anatomi

Pemantapan Mutu Internal adalah kegiatan pencegahan dan
pengawasan yang dilaksanakan oleh masing-masing laboratorium secara
terus menerus agar tidak terjadi atau mengurangi kejadian
error/penyimpangan sehingga diperoleh hasil pemeriksaan yang tepat. Hal
ini bertujuan untuk menjaga kualitas sediaan sehingga layak untuk dibaca
dan diagnosis dapat ditegakkan.

Cakupan objek pemantapan mutu internal di Laboratorium

Patologi Anatomimeliputi aktivitas:

a. Tahap pra-analitik
Pada tahap pra-analitik ini mencakup beberapa kegiatan, antara lain:
fiksasi specimen, pengiriman specimen, dientifikasi specimen, data klinik
yang adekuat, dan pencatatan.
b. Tahap analitik
Pada tahap analitik mencakup beberapa kegiatan, antara lain: Intra-
operative frozen section, final diagnose, kualitas potongan histologi,
spesimen hilang selama prosessing, blok dan slide labeling, IHK, TAT dan
frekuensi pengulangannya.
c. Tahap pasca-analitik
Pada tahap analitik mencakup beberapa kegiatan, antara lain: Kesalahan
penulisan, kesalahan verifikasi, kesalahan pengiriman hasil, laporan tidak
lengkap.
d. Turn Around Time (TAT)
Turn Around Time yang perlu diperhatikan meliputi: Frozen section,
biopsi, dan spesimen besar.
1. Pemantauan Mutu Internal Histopatologi
a. Dilakukan pembuatan slide unstained (jaringan yang digunakan yaitu
appendik) yang akan digunakan sebagai control mutu internal.

b. Slide diwarnai dengan Hematoksilin Eosin (HE).

c. Sediaan diberi label QC (Quality Control) dan tanggal

 39

d. Sediaan diperiksa di bawah mikroskop, dinilai berdasarkan kualitas

warna, kontras warna, kontras lipatan dan ketebalan potongan
jaringan.

e. Sediaan yang sudah sesuai dengan mutu dapat dijadikan Standar

penilaian untuk sediaan rutin yang akan diwarnai pada hari yang sama.

f. Jika hasil pulasan slide belum mencapai mutu yang diharapkan, akan
dilakukan perubahan – perubahan sampai diperoleh hasil yang
diharapkan.
2. Hasil Standar Mutu Yang Diharapkan Untuk Sediaan Histopatologi
a. Slide dan kaca penutup bersih, bening, tanpa bercak – bercak buram.
b. Media “mounting” tidak berlebihan.
c. Seluruh jaringan tertutup kaca penutup.
d. Tidak dijumpai gelembung udara atau lipatan.
e. Jaringan tidak pecah – pecah/ retak – retak.
f. Orientasi jaringan benar (untuk organ berongga)
g. Potongan tipis, menampilkan sel yang salin menutupi atau bertumpuk.
h. Potongan dengan ketebalan merata.
i. Tidak ada kontaminasi jaringan lain.
j. Pulasan inti dan sitoplasma jelas kontrasnya.
k. Tidak dijumpai butir – butir udara/cairan di atas jaringan
(dehidrasi pasca pulasan sempurna).
3. Penilaian Kualitas Hematoksilin Eosin
a. Nukleus: zat warna dapat mewarnai nukleus menjadi biru dan dapat
menunjukkan membran nukleus, nukleoli, kromatin, dan nukleus yang
vakuolar dan hiperkromatis.

b. Sitoplasma dan subtansi dasar lainnya: dapat mewarnai dan

membedakan sitoplasma,kolagen, otot, eritrosit, sel darah merah dan
mucin dengan nuansa warna kemerahan.

c. Pada potongan usus, usus buntu dan paru-paru: dapat mewarnai mucin
pada sel epitel, apakah berwarna biru atau terang tergantung pada pH
 40

dari Hematoxylin. Menurunkan pH biasanya dapat dilakukan dengan

menambahkan asam asetat, hal ini secara signifikan dapat mengurangi
warna mucin.

d. Pewarnaan Hematoxylin yang terlalu teroksidasi akan menimbulkan

warna coklat pada elemen-elemen tertentu pada jaringan.

B
Gambar 10. Sediaan histologi yang terwarnai dengan baik(A), buruk(B)

Penilaian kualitas harian pewarnaan H&E dapat dilakukan

pada organ usus besar (kolon), kulit dan ginjal.

a. Kolon: dapat membedakan serat otot dan kolagen.

Pewarnaan mucin yang tidak tepat, jika mucin terwarnai biru maka
langkah yang dapat dilakukan adalah menurunkan pH Hematoxylin.
Pewarnaan yang jelas terhadap nukleus sel epitel vesikuler.

b. Kulit: dapat menunjukan butiran keratohialin yang

berwarna biru, dapat membedakan keratin dari kolagen dan saraf,
memperlihatkan batas papiler pada dermis

Gambar 11. Sediaan kolon yang diwarnai H&E memperlihatkan mucin yang berwarna
biru. Untuk menghilangkan warna biru pada mucin dapat dilakukan dengan cara
menurunkan pH pada Hematoxylin
 41

Gambar 12. Sediaan kulit yang diwarnai H&E. gambar kiri menunjukkan pH Eosin terlalu
tinggi, gambar kanan menunjukkan Eosin yang sesuai dapat membedakan serat kolagen
dan jaringan saraf

a. Ginjal: mengidentifikasi membran basal dan tubulus kontortus.

Ginjal mempunyai keragaman sel yang luas dari mulai sel yang
mempunyai kromatin padat (glomerulus) hingga sel yang
mempunyai kromatin seperti debu (sel kuboidal ditubulus
pengumpul).

Gambar 13. Sediaan ginjal yang diwarnai H&E. Sel dengan kromatin padat terdapat pada
glomerulus. Sel dengan kromatin halus terdapat pada tubulus

4. Pemantauan Mutu Internal Sitologi

Menggunakan slide spesimen pasien pada hari tersebut dan
dilaksanakan pada saat melakukan proses pewarnaan papanicolaou setelah
perendaman dalam larutan hematoksilin (evaluasi intensitas hematoksilin
dengan menggunakan mikroskop).
5. Hasil Standar Mutu Yang Diharapkan Untuk Sediaan Sitopatologi
a. Apusan cukup tipis.
b. Fiksasi adekuat, tidak ada sel yang degeneratif akibat terlambat fiksasi.
c. Pewarnaan inti tidak terlalu pekat.
d. Kontras baik, metakhroharsia pada giemsa baik.
 42

e. Dehidarasi baik.
f. Tertutupoleh 1 kaca penutup.
g. Mounting tidak berlebihan, namun menutupi seluruh permukaan sel.

Gambar 14. Pewarnaan Papanicolou yang tidak baik

Gambar 15. Pewarnaan Papanicolou yang baik

3.9 Pemantapan Mutu Eksternal Laboratorium Patologi Anatomi

Pemantapan Mutu Eksternal adalah kegiatan yang diselenggarakan

secara periodik oleh pihak lain di luar laboratorium yang bersangkutan
untuk memantau dan menilai penampilan suatu laboratorium dalam bidang
pemeriksaan tertentu.

Wajib dilakukan setiap satu tahun sekali melalui Badan Penjamin

Mutu Pelayanan Patologi Anatomi Indonesia (BPMPPI) di bawah
naunganPerhimpunan Dokter Spesialis Patologi Anatomi.

Adapun tujuan dari dilakukannya pemantapan mutu eksternal adalah

mampu meningkatkan mutu pengolahan spesimen menjadi blok parafin dan slide
dengan pewarnaan Hematoksilin – Eosin sesuai Standar sehingga gambaran
morfologik jelas dan mudah dibaca dan dapat dilanjutkan untuk pemeriksaan
teknologi canggih lainnya, seperti imunohistokimia dan tehnologi DNA.
 43

Mekanisme berlangsungnya PME, antara lain:

a. Penilaian dilakukan secara survei

b. Laboratorium peserta mengirimkan contoh blok parafin dan
slide denganpewarnaan Hematoksilin – Eosin dari blok
tersebut.
c. Laboratorium mengisi dan menyertakan lembaran protokol
pengolahanjaringan yang dilakukan untuk membuat contoh
blok parafin yang dikirim.
d. Contoh jaringan yang dikirim adalah: Jaringan otot polos
(leiomioma), kelenjar getah bening, dan kulit/usus (organ
berongga).
e. Parameter Penilaian

1. Standar Mutu Pemotongan Blok Parafin Dan Pewarnaan

Hematoksilin Eosin
A. Fiksasi
a) Jaringan terfiksasi sempurna
b) Tidak tampak lisis
B. Pengolahan sampai menjadi blok paraffin
a) Tidak tampak bercak – bercak putih dalam blok
b) Tidak tampak fragmentasi/kerapuhan
c) Tidak dijumpai efek termal/kering
d) Orientasi jaringan pada embeding, menampilkan semua
lapisansecara lengkap
C. Pemotongan blok parafin
a) Tipis, sel tidak bertumpuk (ketebalan 1 sel ---maksimal 5
mikron )
b) Ketebalaln Merata

Gambar 16. Ketebalan 6 micron (kiri) ketebalan 3 micron

(kanan) pada sediaan lung adenocarcinoma
 44

c) Tanpa lipatan

Gambar 17. Lipatan pada preparat

d) Tidak ada goresan (venetian blind phenomeron ----

mata pisauyang tidak tajam)
e) Tidak ada kontaminan jaringan lain.

D. Pulasan dan Mounting

a) Kontras warna hematoksilin dan eosin cukup jelas
b) Sediaan jernih/bersih, dehidrasi pasca eosin sempurna
c) Tidak ada sel udara pada mounting
d) Mounting media tidak berlebihan
e) Seluruh jaringan tertutup oleh kaca penutup
f) Tidak ada bercak/sidik jari/”mounting media pada
slide, terutamadi atas kaca penutup
 BAB IV
PENUTUP
4.1 Kesimpulan
Patologi Anatomi merupakan spesialisasi medis yang bertujuan untuk
menegakkan diagnosis penyakit yang berdasarkan makrokopis, mikroskopis dan
molekuler terhadap sel, jaringan, cairan dan organ. Pemeriksaan laboratorium
patologi anatomi terdiri dari pemeriksaan laboratorium histopatologi dan
pemeriksaan laboratorium sitohistologi. Laboratorium histopatologi merupakan
laboratorium yang menangani spesimen berupa jaringan yang berasal dari
manusia sedangkan laboratorium sitohistologi merupakan pemeriksaan sel berupa
spesimen berupa cairan atau bentukan lain yang mengandung sel sel untuk
dilakukan diagnosis. Tahapan teknik fiksasi merupakan langkah awal membuat
suatu sedian yang baik supaya mempertahankan struktur jaringan atau cairan
tersebut serupa dengan asalnya.

4.2 Saran
Demikian laporan Praktik Belajar Lapangan (PBL) ini kami buat untuk
memenuhi nilai kami, besar harapan kami laporan ini agar bermanfaat bagi
pembaca. Apabila ada keterbatasan kata atau kurangnya referensi mohon
dimaafkan. Oleh karena itu saran dan kritik sangan membangun agar laporan ini
dapat disusun menjadi lebih baik lagi.
 DAFTAR PUSTAKA
Alwi, M. A. (2016). Fiksasi 2 Minggu Pada Gambaran Histologi Organ Ginjal,
Hepar, Dan Pankreas Tikus, Skripsi

Anonim. DyatNitaLis Laboratorium Khusus Patologi Anatomik untuk Periksa

Sampel dari Operasi. Rimaunews, diakses pada tanggal 31 Mei 2023
https://rimaunews.co.id/dyatnitalis-laboratorium-khusus-patologi-anatomik-untuk-
periksa-sempel-dari-oprasi/30/01/2022/

Bancroft JD dan Gamble M. (2008). Theory and Practice of Histological

Techniques: Immunohistochemical Techniques. United State: Churchill
Livingstone Elsevier p.433-53.

Erick K, Dewi I, Oktober 2017. Bahan Ajar Teknologi Laboratorium Medis

SITOHISTOTEKNOLOGI Edisi Tahun 2017

Fatimah, F. (2017, Oktober 03). Pemeriksaan Histopatologi. Retrieved from

Rumah Sakit Umum Daerah Tani Dan Nelayan.
http://rstn.boalemokab.go.id/berta-135-pemeriksaan-histopatologi.html

Harjana, T. (2011), Buku Ajar Histologi. Yogyakarta Universitas Negeri

Yogyakarta.

Khristian, Erick., Inderiati, Dewi (2017). Bahan Ajar Teknologi Medis

Sitohistoteknologi. Jakarta: Badan Pengembangan dan Pemberdayaan Sumber
Daya Manusia.

Kroemer, G. (2005). Classification of cell death: recommendations of the

nomenclature committee on cell death. Cell Death Differ. 12: 1463-1467.

Miranti, (2010) Pengolahan jaringan untuk penelitian hewan coba. http://eprints

Undip, ac. Id./22187/1/01 terkini-drika-01-04.pdf Diakses Tanggal 03 juni 2023.

Newannyart. (2019, Desember). Papanicolaou Smear. Retrieved from Harvard

Health Pubishing: https://www.health.harvard.edu/womens-health/pap-test-
papanicolaou-smear
Rahesti, E.(2019). Perbandingan Kualitas Hasil Pewarnaan Papanicolaou
Menggunakan Orange-G Baru Dengan Kadaluwarsa Perpus Unimus, Universitas
Muhammadiyah Semarang

Siang Yong Tan, Y. T. (2015, Oktober). Penemu Pap Smear Retrieved from
SingaporeMedicalJournal:https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC46139
36/

Wonodirekso, S. 2003, Penuntun Praktikum Histologi, Edisi 1. Jakarta Pusat

Penerbit Dian Rakyat.

Zuraida & Alamnur, M. M., 2019. Perbandingan Hasil Preparat Patologi Anatomi
jringan Kelenjar Getah Bening antara Proses Autometic dan Manual. Jurnal
Ilmiah Analis Kesehatan, pp. 82-87.
 LAMPIRAN

Potong gross Proses trimming

Proses embedding Proses pewarnaan

 Pengecekan kuaitas sediaan

Foto bersama pembimbing lahan

CONTOH PME LAB PA DYATNITALIS