Diterjemahkan dari bahasa Inggris ke bahasa Indonesia - www.onlinedoctranslator.

com

ilmu farmasi

Artikel

Memodifikasi Stabilitas dan Karakteristik Permukaan Senyawa

Antosianin yang Digabungkan dalam Nanoliposom dengan
Biopolimer Kitosan
Mina Homayoonfal1, Mohammad Mousavi1, Hossein Kiani1, Gholamreza Askari1, Stephane Desobry2,* dan
Elmira Arab-Tehrany2,*

1 Lab Bioproses dan Biodeteksi (BBL), Departemen Ilmu dan Teknologi Pangan, Universitas Teheran, Karaj
999067, Iran; mina.homayoonfal@gmail.com (MH); mousavi@ut.ac.ir (MM); hokiani@ut.ac.ir (HK);
iraskari@ut.ac.ir (GA)
2 Laboratorium d'Ingyaitunierie des Biomolyaitucules (LIBio), Universitasyaitude Lorraine, 2 Avenue de la Forêt de Haye,
TSA 40602, CEDEX, 54518 Vandoeuvre-lyas-Nancy, Prancis
* Korespondensi: stephane.desobry@univ-lorraine.fr (SD); elmira.arab-tehrany@univ-lorraine.fr (EA-T.)

Kutipan:Homayoonfal, M.; Mousavi,
M.; Kiani, H.; Askari, G.; Desobry, S.;
Arab-Tehrany, E. Memodifikasi
Stabilitas dan Karakteristik Permukaan
Senyawa Antosianin
Digabungkan dalam Nanoliposome oleh
Chitosan Biopolymer.Ilmu farmasi 2022,
14, 1622. https://doi.org/ 10.3390/
pharmaceutics14081622
Abstrak:Dalam studi ini, pendekatan baru diselidiki untuk meningkatkan stabilitas senyawa antosianin (AC)
dengan merangkumnya dalam nanoliposom yang dihasilkan dari lesitin rapeseed bersama dengan lapisan
kitosan. Hasil penelitian menunjukkan bahwa ukuran partikel, mobilitas elektroforesis, efisiensi enkapsulasi, dan
fluiditas membran nanoliposom yang mengandung senyawa antosianin adalah 132,41 nm,
- 3.26mikroM·cm/V·S, masing-masing 42,57%, dan 3,41, yang berubah menjadi 188,95 nm, +4,80mikroM·cm/V·S,
61,15%, dan 2,39 setelah dilapisi dengan kitosan. Hasilnya juga menunjukkan peningkatan stabilitas fisik
dan kimia nanoliposom setelah dilapisi dengan kitosan. Gambar TEM menunjukkan partikel yang
dihasilkan berbentuk bola dan berskala nano, dimana terlihat adanya lapisan kitosan di sekitar
nanopartikel. Uji reologi geser menggambarkan bahwa perilaku aliran nanoliposom diubah dari
Newtonian menjadi penipisan geser setelah penggabungan kitosan. Selanjutnya, kitosan mengurangi
luas permukaan loop histeresis (perilaku tiksotropik). Tes reologi osilasi juga menunjukkan keberadaan
kitosan menyebabkan peningkatan stabilitas mekanik nanoliposom. Hasil penelitian ini menunjukkan
bahwa pelapisan kitosan sangat meningkatkan efisiensi enkapsulasi, serta stabilitas fisik dan mekanik
nanoliposom. Dengan demikian, melapisi nanoliposom AC dengan kitosan merupakan pendekatan yang
menjanjikan untuk memuat AC secara efektif dan meningkatkan stabilitasnya untuk diterapkan dalam
industri farmasi dan makanan.

Editor Akademik: Josyaitu

Kata kunci:kitosan; enkapsulasi; senyawa antosianin; nanoliposom; kemanjuran enkapsulasi
PasarSayatidak Lanao

Diterima: 29 Juni 2022

Diterima: 28 Juli 2022
Diterbitkan: 3 Agustus 2022
Catatan Penerbit:MDPI tetap netral
sehubungan dengan klaim yurisdiksi dalam
peta yang dipublikasikan dan afiliasi
kelembagaan.
Hak cipta:© 2022 oleh penulis.
Pemegang Lisensi MDPI, Basel, Swiss.
Artikel ini adalah artikel akses terbuka
yang didistribusikan di bawah syarat
dan ketentuan lisensi Creative
Commons Attribution (CC BY) (https://
creativecommons.org/licenses/by/
4.0/).
1. Perkenalan
Buah barberry kaya akan fitokimia dengan efek meningkatkan kesehatan, seperti sifat
antikanker dan anti-inflamasi [1]. Senyawa antosianin (AC) dalam barberry, yang bertanggung
jawab atas warna merah pada jusnya, merupakan spesies senyawa fenolik dominan yang ada
dalam buah ini, yang memiliki sifat antioksidan yang cukup besar. Selain itu, mereka memiliki
sifat antimikroba, meningkatkan penglihatan, dan antihipertensi [2]. AC adalah turunan
glikosida dari kation 2-fenil benzopiran (flavylium), dan seperti flavonoid alami lainnya, AC
mempunyai kerangka karbon C.6-C3-C6[3]. AC adalah sekelompok flavonoid polifenol, pigmen
larut air yang paling melimpah, banyak ditemukan pada buah-buahan, sayuran, dan bunga.
Mengingat sifat tidak beracun dan biokompatibilitasnya dengan tubuh manusia, penggunaan
AC sebagai pigmen alami dan antioksidan telah menarik banyak perhatian dalam beberapa tahun
terakhir.4]. Namun demikian, karena senyawa ini tidak stabil selama proses makanan, distribusi,
penyimpanan, atau di saluran pencernaan, potensi peningkatan kesehatannya terbatas. Selain itu,
suhu, pH, keberadaan oksigen, dan enzim juga dapat mempengaruhi

Far maceutika2022,14, 1622. https://doi.org/10.3390/pharmaceutics14081622 https://www.mdpi.com/journal/pharmaceutics

Ilmu farmasi2022,14, 1622 2 dari 21

stabilitas antosianin [5]. Oleh karena itu, mengadopsi strategi yang efektif untuk
meningkatkan efisiensi dan stabilitas AC dalam proses dan kondisi lingkungan yang berbeda
sangatlah penting.
Dalam beberapa tahun terakhir, teknologi enkapsulasi, yang merupakan metode penghantaran
obat yang efektif dalam industri farmasi, telah memperkenalkan dirinya sebagai sarana yang berguna
untuk meningkatkan dan menjaga kualitas, stabilitas, dan ketersediaan hayati senyawa bioaktif yang
sensitif terhadap kondisi eksternal.6]. Memang, enkapsulasi adalah suatu proses di mana zat aktif dilapisi
oleh senyawa pembawa, sehingga diperoleh partikel atau kapsul pada skala mikro atau nano. Teknik
enkapsulasi banyak digunakan dalam industri makanan dan farmasi untuk melapisi senyawa bioaktif dan
menciptakan penghalang pelindung terhadap kondisi lingkungan yang tidak mendukung.7]. Pada
produk akhir enkapsulasi, bioavailabilitas, pelepasan terkontrol, dan penargetan senyawa bioaktif yang
tepat meningkat. Baru-baru ini, nanoenkapsulasi dan pengembangan sistem penghantaran berdasarkan
skala nano untuk senyawa bioaktif semakin diminati karena berbagai kelebihannya, termasuk efisiensi
enkapsulasi yang lebih tinggi, peningkatan bioavailabilitas, stabilitas, dan profil pelepasan yang
berkelanjutan.8].
Di antara berbagai metode, potensi liposom sebagai media enkapsulasi terbukti dalam
mengawetkan, menstabilkan, dan menghasilkan nutraceuticals [9–12]. Liposom adalah vesikel
koloid, mirip dengan membran biologis, dan memiliki struktur fosfolipid. Liposom adalah asosiasi
molekuler sebagai mikro atau nanosfer yang strukturnya satu atau beberapa lapisan ganda lipid
terbentuk di sekitar media berair [13]. Karena karakteristik struktural khusus, kedua jenis molekul
hidrofilik dan hidrofobik dapat dimuat dalam liposom; senyawa hidrofilik terletak di dalam inti air
bagian dalam, sedangkan senyawa hidrofobik mengendap di dalam lapisan ganda lipid [14].
Nanoliposom melindungi senyawa bioaktif sensitif terhadap kondisi lingkungan yang berbeda
berkat sifat amfifiliknya, bersifat biokompatibel, dapat terurai secara hayati, tidak beracun, dan
non-imunogenik. Mereka bahkan dapat meningkatkan bioavailabilitas dan penyerapannya. Oleh
karena itu, mereka telah menemukan aplikasi yang luas sebagai nanocarrier yang ideal di berbagai
bidang, termasuk rekayasa jaringan, dan industri farmasi, makanan, dan kosmetik.15].

Namun demikian, terlepas dari semua kelebihan yang disebutkan, nanoliposom memiliki
masalah waktu paruh yang pendek di saluran pencernaan.16]. Lebih lanjut, terjadinya proses
seperti degradasi, agregasi, fusi, oksidasi, dan hidrolisis fosfolipid mengakibatkan ketidakstabilan
fisiokimianya.17]. Dalam beberapa tahun terakhir, modifikasi struktur permukaan nanoliposom
dengan lapisan polimer dianggap sebagai metode yang menjanjikan untuk memodifikasi efisiensi
dan penerapannya. Mengingat bio-polielektrolit, kitosan dapat digunakan sebagai polimer untuk
melapisi nanoliposom dan meningkatkan efisiensinya [14].
Kitosan adalah biopolimer polisakarida kation yang tersusun dariD-unit glukosamin,
diperoleh melalui deasetilasi kitin, komponen utama dinding sel krustasea, jamur, dan
serangga. Senyawa hidrofilik ini bersifat biodegradable dan biokompatibel, sehingga menarik
sebagai senyawa mukoadhesif [18,19]. Karakteristik ini menyebabkan permeasi biomolekul
yang lebih baik melalui penghalang sistem pencernaan dan usus kecil. Memang benar, berkat
peningkatan karakteristik bio-perekat dan permeasi, pelapisan struktur nano berbasis lipid
dengan kitosan menghasilkan modifikasi bioavailabilitas obat melalui peningkatan waktu
tinggal obat di tempat penyerapan [20]. Perlu diketahui bahwa pelapisan kitosan pada
nanoliposom terjadi melalui interaksi ionik antara gugus amina yang bermuatan positif pada
kitosan dan gugus diasetil fosfat yang bermuatan negatif pada permukaan liposom.21].

Sejauh ini kitosan digunakan untuk melapisi nanoliposom dalam berbagai penelitian. Hassan
dkk. (2016) menggunakan kitosan untuk melapisi nanoliposom yang mengandung kurkumin [22].
Gibis dkk. (2016) menggunakan senyawa ini untuk melapisi nanoliposom, termasuk senyawa
polifenol [23]. Hao dkk. menggunakan kitosan untuk melapisi nanoliposom yang mengandung
kuersetin flavonoid [24]. Selain itu, berbagai penelitian menunjukkan bahwa sistem liposom dapat
meningkatkan stabilitas fisikokimia AC. Oleh karena itu, berbagai metode, seperti metode hidrasi
film, dikombinasikan dengan teknik homogenisasi karbon dioksida superkritis, tekanan tinggi, atau
ultrasonik. Selain itu, dalam sebagian besar penelitian, sintetis atau murni
Ilmu farmasi2022,14, 1622 3 dari 21

fosfolipid kedelai dalam kombinasi dengan kolesterol diterapkan untuk persiapan AC-
nanoliposom [25,26]. Namun, belum ada penelitian yang dilaporkan mengenai enkapsulasi
AC buah barberry dalam nanoliposom yang dilapisi kitosan dengan metode hidrasi yang
dikombinasikan dengan ultrasonik dan homogenisasi tekanan tinggi dengan menggunakan
senyawa lesitin alami untuk meningkatkan stabilitas fisikokimia dan sifat struktural
nanoliposom AC. .
Penelitian ini bertujuan untuk merangkum AC dalam nanoliposom yang terdiri dari
fosfolipid lesitin rapeseed sebagai sumber lesitin alami dan meningkatkan atribut struktural
dan fisikokimia nanoliposom yang disiapkan dengan lapisan kitosan. Dalam hal ini, berbagai
karakteristik sampel yang dihasilkan dipelajari melalui ukuran dan muatan permukaan
partikel, TEM, FTIR, geser, dan uji perilaku aliran osilasi.

2. Bahan-bahan dan metode-metode

2.1. Bahan
Buah barberry segar dibuat dari Birjand, Iran. Untuk menjaga sifat fisikokimia, buah
dikeringkan pada suhu kamar. Lesitin rapeseed disediakan melalui pendekatan ekstraksi
enzimatik tanpa menggunakan pelarut organik apa pun. Kitosan (sumber cangkang
udang, tingkat deasetilasi hingga 75%) dibeli dari Sigma-Aldrich (Tokyo, Jepang). Bahan
kimia lainnya antara lain asam asetat, heksana, kloroform, etanol, metanol, BF3/metanol,
asetonitril, 1-(4-Trimetilamonium-fenil)-6-fenil-1,3,5-heksatrien (TMA-DPH), natrium
sitrat, asam sitrat, kalium klorida, dan natrium asetat, yang dipasok dari Sigma -Aldrich
(Paris, Prancis) dan Fisher Scientific (Paris, Prancis). Semua bahan kimia memiliki tingkat
analitis.

2.2. Metode
2.2.1. Komposisi Asam Lemak
Untuk mengidentifikasi komposisi asam lemak fosfolipid lesitin lobak, pertama-tama
dibuat metil ester asam lemak. Kemudian, pemisahan metil ester yang berbeda dilakukan
menggunakan alat kromatografi gas yang dilengkapi dengan detektor ionisasi nyala
(Perichrom, Saulx-lyas-Chartreux, Perancis). Suhu injektor dan detektor diatur pada 250◦C [27
]. Campuran asam lemak nabati digunakan untuk mengidentifikasi asam lemak lesitin
rapeseed (PUFA dari sumber nabati; Supelco, Sigma-Aldrich, Bellefonte, PA, USA). Hasilnya
disajikan sebagai rata-rata±SD

2.2.2. Kelas Lipid dari Lesitin Rapeseed

Kelas lipid lesitin rapeseed ditentukan oleh perangkat Iatroscan (Iatron
Laboratories Inc., Tokyo, Jepang). Pertama, sampel terlihat pada Chormarod (kabel
kuarsa dengan lapisan silika). Kemudian Chromarod terkena campuran pelarut antara
lain heksana, dietil eter, dan asam format selama 20 menit, kemudian dikeringkan pada
suhu 100◦C selama 1 menit. Akhirnya, lipid netral dideteksi oleh Iatroscan. Pada tahap
selanjutnya, campuran pelarut polar, termasuk kloroform, metanol, dan amonia,
digunakan untuk identifikasi lipid polar. Kemudian, perangkat lunak internal ChromStar
digunakan untuk interpretasi hasil [28].

2.2.3. Mempersiapkan Ekstrak Antosianin Barberry

Buah barberry yang dikeringkan dan dibersihkan digunakan untuk menyiapkan ekstrak AC.
Pertama, buah dicampur dengan air ultra murni dengan perbandingan 1:5, kemudian diaduk
menggunakan homogenizer Ultra-Turrax (T-25 Basic, IKA-Werk, Staufen, Germany) dengan kecepatan
12.000 rpm selama 5 menit. Tahap selanjutnya partikel padat dan pengotor dihilangkan menggunakan
sistem filtrasi vakum dan selulosa asetat dengan ukuran pori 10, 8, 3, 1, 0,45, dan 0,2mikrom, sehingga
diperoleh ekstrak bening. Akhirnya ekstrak dipekatkan menggunakan penguap vakum putar hingga Brix
45◦.
Ilmu farmasi2022,14, 1622 4 dari 21

2.2.4. Mempersiapkan Nanoliposom Dilapisi Kitosan

Untuk menyiapkan nanoliposom yang dilapisi dengan kitosan, ekstrak pekat barberry dan
lesitin rapeseed dicampur dengan air deionisasi dengan perbandingan 4,5w/ay% dan 3w/ay%,
masing-masing. Campuran yang telah disiapkan diaduk selama 4 jam dalam atmosfer inert
(nitrogen), dan kemudian kitosan (1w/ay%) bersama dengan asam asetat (1w/ay%) ditambahkan ke
dalam campuran yang sudah disiapkan. Sekali lagi, campuran yang telah disiapkan diaduk selama
1 jam dalam atmosfer inert (nitrogen). Perlu disebutkan bahwa rasio ekstrak antosianin terhadap
lesitin lobak, serta lesitin lobak terhadap kitosan, masing-masing adalah 1,5:1 dan 3:1. Pada tahap
selanjutnya, untuk menyiapkan suspensi koloid nanoliposom, dilakukan homogenisasi dalam dua
tahap. Tahap pertama, sampel dihomogenisasi menggunakan ultrasonik homogenizer (probe
berdiameter 13 mm untuk sampel dengan volume 50 mL) pada frekuensi 40 kHz dan daya 40%
selama 4 menit (1 detik hidup dan 1 detik mati) . Pada tahap selanjutnya, sampel dihomogenisasi
menggunakan mikrofluidizer pada tekanan 1250 bar dalam delapan siklus berturut-turut [22].
Terakhir, empat spesies nanoliposom, antara lain tanpa lapisan kitosan dan ekstrak antosianin, LP-
FR-UH, nanoliposom yang mengandung ekstrak antosianin tanpa lapisan kitosan, LP-AC-UH,
nanoliposom tanpa ekstrak antosianin dengan lapisan kitosan, LP-FR- CH, dan nanoliposom
dengan ekstrak antosianin dan pelapis kitosan, LP-AC-CH, diproduksi dan karakteristiknya
diperiksa sebagai berikut.

2.2.5. Ukuran Partikel dan Indeks Polidispersitas Nanoliposom

Rata-rata diameter hidrodinamik dan indeks polidispersitas (PDI) nanoliposom
diperiksa melalui perangkat Malvern Zetasizer Nano ZS (Malvern Instruments, Malvern,
UK) dalam mode hamburan cahaya dinamis (DLS). Pertama, sampel dicampur dengan
air ultra murni dengan perbandingan 1:400. Selanjutnya ditempatkan di dalam covet
berbentuk silinder vertikal dengan diameter 10 mm. Pengukuran dilakukan pada sudut
hamburan 173◦dan suhu 25◦C. Selanjutnya, indeks bias dan luas serapan sampel
dianggap masing-masing 1,471 dan 0,01 [29]. Untuk semua sampel, pengukuran
dilakukan dengan tiga ulangan, dan hasilnya dilaporkan sebagai nilai rata-rata±SD.

2.2.6. Mobilitas Elektroforesis

Seperti halnya ukuran partikel, mobilitas elektroforesis nanoliposom diukur dengan
perangkat Malvern Zetasizer Nano ZS dan teknik hamburan cahaya elektroforesis (ELS).
Pertama, sampel dicampur dengan air ultra murni dengan perbandingan 1:400 dan
kemudian ditempatkan di dalam sel elektroforesis kapiler sekali pakai yang berisi elektroda
tembaga dengan menggunakan jarum suntik [30]. Pengujian dilakukan pada suhu 25◦C dan
hasil akhirnya dilaporkan sebagai nilai rata-rata±SD (empat ulangan untuk setiap sampel).

2.2.7. Efisiensi Enkapsulasi (EE)

Untuk menghitung persentase AC yang dimasukkan ke dalam struktur nanoliposom, sampel
disentrifugasi selama 1 jam dan 4◦C pada 50.000 rpm, sehingga diperoleh dua fase terpisah: AC
yang tidak terenkapsulasi terakumulasi di fase atas, sedangkan nanoliposom mengendap di
permukaan bawah. Untuk menghilangkan jejak senyawa lesitin, fase atas dicampur dengan
kloroform dengan perbandingan 1:1 dan, setelah diaduk, disentrifugasi selama 10 menit dan 4◦C
pada 10.000 rpm. Konsentrasi AC pada fase atas dihitung menggunakan Persamaan (1) berikut [31
,32]:
[ ]
(A510-A700)pH 1-(A510-A700)pH 4,5×MW×DF×1000
Konsentrasi AC (mg/L) = (1)
ε×L
Dalam persamaan di atas, A510dan A700adalah serapan pada panjang gelombang masing-
masing 510 nm dan 700 nm, MW adalah berat molekul sianida 3-glikosida (449,2 g/mol), DF adalah
faktor pengenceran, ε adalah serapan molar sianida 3-glikosida (26,900) , dan saya
Ilmu farmasi2022,14, 1622 5 dari 21

adalah panjang jalur sel (1 cm). Absorbansi diukur dengan spektrofotometer UV-Visible
(Varioskan®Flash, Thermo Fisher Scientific Inc., Essone, Prancis)
Selanjutnya untuk menghitung kandungan antosianin total, seperti yang telah disebutkan
sebelumnya, nanoliposom didegradasi dengan cara dicampur dengan kloroform, dan dihitung
kandungan antosianinnya [33]. Akhirnya, efisiensi enkapsulasi (EE) diukur menggunakan
Persamaan (2).

Konsentrasi AC total-konsentrasi AC yang tidak terbungkus

EE (%) = ×100 (2)
Konsentrasi AC total

2.2.8. Fluiditas Membran

Fluiditas membran nanoliposom diukur menggunakan metode yang diusulkan oleh
Hassan et al. [22] Metode ini didasarkan pada penentuan tingkat fluoresen senyawa TMA-
DPH. Dalam hal ini, larutan TMA-DPH pertama dibuat dalam etanol dan ditambahkan ke
sampel sedemikian rupa sehingga akhirnya konsentrasi 4mikroM dan 0,2 mg/mL-1
akan diperoleh masing-masing untuk probe dan lipid. Campuran yang dihasilkan, setelah 1
jam diaduk dalam kegelapan dan pada suhu laboratorium, dituangkan ke dalam pelat mikro
hitam (180mikroL di dalam setiap sumur). Memang benar, selama ini, TMA-DPH dan
nanoliposom bereaksi satu sama lain, dimana probe fluoresensi didistribusikan secara
vertikal dan horizontal di antara lapisan lipid. Penentuan tingkat fluoresensi sampel
nanoliposom dilakukan menggunakan Tecan INFINITE 200R PRO (Austria) yang dilengkapi
dengan polarizer fluoresen. Dengan pengadukan konstan pada suhu 25◦C (kondisi
lingkungan), sampel dieksitasi dan dipancarkan masing-masing pada 360 nm dan 430 nm.
Setelah analisis data dengan perangkat lunak Magellan 7 (Tecan Group Ltd., Mannedorf,
Swiss), intensitas polarisasi setiap sampel (P) dihitung menggunakan Persamaan (3) berikut:

SAYA‖-GL⊥
P= (3)
SAYA‖+2GI⊥

Dalam hubungan ini, saya‖dan saya⊥mewakili tingkat intensitas fluoresen paralel

dan tegak lurus terhadap bidang eksitasi. G menunjukkan faktor transmisi, yang
dikaitkan dengan fitur perangkat. Kebalikan dari polarisasi, (1/P), dianggap sebagai
fluiditas membran.

2.2.9. Mikroskop Elektron Transmisi

Morfologi dan struktur mikro nanoliposom dipelajari melalui metode pewarnaan negatif
dan mikroskop elektron transmisi (TEM). Pertama, untuk mengurangi pengaruh konsentrasi,
sampel diencerkan dengan air suling sekitar 30 kali. Kemudian sampel yang telah diencerkan
dicampur dengan larutan amonium molibdat 2% (sebagai zat pewarna negatif) dengan
perbandingan 1:1 dan dibiarkan pada suhu kamar. Campuran yang dihasilkan ditempatkan
pada kisi-kisi tembaga yang dilapisi karbon formvar selama 5 menit (mesh 200, diameter 300
mm). Sampel tambahan dihilangkan dengan kertas saring dan kisi-kisi dikeringkan pada suhu
kamar. Akhirnya, gambar sampel yang diwarnai direkam oleh mikroskop elektron transmisi
Phillips CM20 dengan tegangan 200 kV dan menggunakan kamera Olympus TEM CCD [34].

2.2.10. Spektroskopi Fourier Transform Inframerah (FTIR).

Spektrum FTIR dicapai dengan menggunakan spektrometer FTIR pertengahan Tensor 27
(Bruker, Jerman) yang dilengkapi dengan detektor DTGS (Deuterated Triglycine Sulfate) dan modul
berlian ATR (Attenuated Total Reflectance). Untuk menentukan spektrum FTIR sampel, kecepatan
pemindaian disesuaikan pada frekuensi 20 kHz, sedemikian rupa sehingga 128 pemindaian
dilakukan untuk setiap sampel dalam rentang bilangan gelombang 400–4000 cm.-1dan resolusi 2
cm-1pada suhu kamar. Sebelum setiap pengujian, spektrum referensi (udara) dicatat. Kemudian,
sejumlah kecil sampel yang diliofilisasi ditempatkan pada kristal berlian sel optik,
Ilmu farmasi2022,14, 1622 6 dari 21

dan setidaknya tiga tes terpisah dilakukan untuk setiap sampel. Kemudian, semua spektrum yang
diperoleh dinormalisasi dengan perangkat lunak OPUS (Bruker, Karlsruhe, Germany) [31].

2.2.11. Karakteristik Reologi

Studi reologi dilakukan oleh Kinexus pro rheometer (Malvern Instruments, Orsay,
Perancis). Selama pengujian reologi, untuk meminimalkan perubahan kelembapan, sistem
pengukuran dan sampel dilapisi dengan ruang kelembapan. Sebelum setiap analisis, setiap
sampel dibiarkan dalam keadaan istirahat selama 5 menit, hingga mencapai kondisi
kesetimbangan. Tes berikut dilakukan untuk setiap sampel.

Tes Perilaku Aliran

Untuk mengukur viskositas shear-steady dan tegangan geser, geometri kerucut dan bidang
(1◦, 50 mm) digunakan. Untuk menentukan viskositas geser pada kondisi tunak, laju geser
ditingkatkan dalam kisaran 10-3–103S-1. Kemudian, data tegangan geser terhadap laju geser
dilengkapi dengan model hukum pangkat (Persamaan (4)).

=kγN (4)

Dalam persamaan ini, σ adalah tegangan geser (Pa), k adalah indeks konsistensi, dan n menunjukkan
indeks perilaku aliran.
Selanjutnya, untuk memperkirakan perilaku plastik sampel nanoliposom, akar kuadrat
tegangan geser diplot terhadap akar kuadrat laju geser, yang datanya dilengkapi dengan
model berbasis struktur, model Casson (Persamaan (5)).

(σ)0,5= k0C+ kC(γ)0,5 (5)

Pada Persamaan (5), tegangan luluh Casson (σ0C) dan viskositas plastik Casson (ηcasson)
dihitung melalui σ0C= (k0C)2dan ηcasson= (kC)2, masing-masing.
Selain itu, untuk mengevaluasi adanya kerugian histeresis dinamis, tegangan geser pertama kali
dinaikkan dari 10-3Pa menjadi 0,5 Pa dan kemudian diturunkan ke nilai awal dalam waktu 30 menit.

Reologi Osilasi
Untuk mengevaluasi sifat mekanik nanoliposom, pertama-tama, kisaran viskoelastik
linier nanoliposom ditentukan. Dalam hal ini, rentang regangan geser ditingkatkan dari 0,1%
menjadi 1000% pada frekuensi 0,5 Hz. Berdasarkan pengujian ini, tingkat regangan yang
berada dalam rentang linier (10%) dipertimbangkan untuk pengujian sapuan frekuensi (0,01–
10 Hz). Untuk analisis ini, viskometer kerucut dan bidang (diameter 20 mm dengan jarak
antar bidang 500mikrom) digunakan. Kemudian, variasi penyimpanan (G') dan kerugian (G“)
modul dengan ketinggian frekuensi diukur pada regangan konstan. Tes reologi osilasi diukur
pada 25◦C.

3. Hasil dan Pembahasan

3.1. Komposisi Asam Lemak
Hasil analisis asam lemak lesitin rapeseed menunjukkan bahwa asam lemak tak jenuh
tunggal merupakan jenis yang paling menonjol, sedangkan asam lemak tak jenuh ganda dan asam
lemak jenuh masing-masing menyumbang 35,09 dan 6,14% dari total kandungan asam lemak.
Sementara itu, asam lemak lesitin rapeseed yang paling banyak terdapat pada asam oleat, asam
linoleat, dan asam palmitat.

3.2. Kelas Lipid

Evaluasi golongan lipid lesitin rapeseed dengan metode kromatografi lapis tipis
menunjukkan kandungan lipid netral dan polar lesitin rapeseed masing-masing sebesar
73,96% dan 26,31%. Lebih lanjut, fosfatidilkolin, fosfatidiletanolamin, dan
fosfatidilinositol merupakan fosfolipid penyusun lesitin lobak.
Ilmu farmasi2022,14, 1622 7 dari 21

3.3. Ukuran Partikel dan PDI

Hasil ukuran partikel nanoliposom yang dibuat menggunakan teknik gabungan
sonikasi dan mikrofluidisasi disajikan pada Tabel1.

Tabel 1.Rata-rata ukuran partikel, PDI, potensi zeta, dan fluiditas membran nanoliposom buatan.

Sampel Ukuran Partikel (nm) PDIP Mobilitas Elektroforesis (mikroM·cm/V·S) EE (%)

LP-FR-UH 121.60±3.72D 0,198±0,022B - 3.49±0,11C -
LP-AC-UH 132.41±3.04C 0,224±0,020ab - 3.26±0,05D 42.57±2.08B
LP-FR-CH 261,50±8.69A 0,258±0,017A + 4.51±0,09B -
LP-AC-CH 188,94±6.15B 0,197±0,014B + 4,80±0,10A 61.15±2.32A
Semua data direpresentasikan sebagai mean±SD. PDI: indeks polidispersitas, EE: kemanjuran enkapsulasi. Huruf yang
berbeda (a,b,c,d) menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05) antar variabel respon.

Seperti yang dapat diamati, ukuran partikel rata-rata nanoliposom LP-FR-UH dan LP-AC-
UH masing-masing adalah 121,60 nm dan 132,41 nm. Sebaliknya, setelah dilapisi dengan
kitosan, nilai tersebut meningkat masing-masing menjadi 261,5 nm dan 188,94 nm untuk
sampel LP-FR-CH dan LP-AC-CH. Peningkatan ukuran partikel disebabkan oleh interaksi
antara lipid dan kitosan: tentu saja, kitosan, suatu kopolimer yang terdiri dari N-asetil-D
-glukosamin danD-glukosamin, karena adanya gugus amina, memiliki muatan positif dalam
lingkungan asam. Karena sifat kimianya yang khusus ini, kitosan dapat berinteraksi dengan
senyawa bermuatan negatif atau senyawa kaya elektron.35,36]. Oleh karena itu, dapat
disimpulkan bahwa terjadi interaksi elektrostatik antara gugus kepala fosfolipid
dan gugus fungsi khusus kitosan, NH+ 3, serta interaksi hidrofobik
antara rantai hidrokarbon lipid dan kitosan, menghasilkan pengembangan lapisan kitosan di
sekitar nanoliposom, dan masuknya ke bagian bilayer nanoliposom pada akhirnya
menyebabkan peningkatan ukuran partikel nanoliposom yang dilapisi [37]. Meskipun ukuran
partikel rata-rata nanoliposom LP-AC-CH lebih besar daripada sampel LP-AC-UH, hal yang
penting adalah berkurangnya ukuran partikel sampel ini dibandingkan dengan sampel LP-FR-
CH. Sejauh ini, kitosan telah digunakan dalam berbagai penelitian untuk pelapisan
nanoliposom [22,24,38]. Semua penelitian menunjukkan peningkatan diameter partikel
nanoliposom berlapis polimer, seiring dengan penambahan senyawa bioaktif atau farmasi,
yang tidak sesuai dengan hasil penelitian ini. Hal ini kemungkinan disebabkan adanya
interaksi antara kitosan, antosianin, dan fosfolipid. Memang karena adanya gugus hidroksil
pada struktur senyawa antosianin, gugus fosfat pada struktur nanoliposom, dan gugus
hidroksil serta amina pada struktur kitosan, kemungkinan terbentuknya interaksi hidrogen
dan elektrostatis antar senyawa tersebut. meningkat [22,25,31]. Luas dan intensitas gaya
tarik-menarik ini sedemikian rupa sehingga menyebabkan kompresi struktur nanoliposom
atau pengurangan ukuran partikel dibandingkan dengan sampel yang tidak diberi muatan.
Selama konversi struktur berlapis menjadi vesikel, senyawa ini mengendap di antara pori-pori
molekul yang tercipta. Mungkin, penambahan ekstrak kitosan dan antosianin secara
bersamaan ke dalam sistem menghasilkan peningkatan kekakuan dinding vesikel, dan
dengan demikian mengurangi penggabungan dan ukuran partikel sistem. Lebih lanjut,
adanya senyawa-senyawa tersebut mengakibatkan meningkatnya kepadatan susunan
molekul fosfolipid sehingga memperkecil ukuran partikel.39].

Hasil yang diperoleh dari indeks distribusi nanoliposom juga ditunjukkan pada Tabel1. Hasilnya
menunjukkan bahwa semua sistem yang diteliti memiliki PDI kurang dari 0,258 dengan puncak
monomodal. Untuk sistem dispersi koloid, PDI yang kurang dari 0,3 adalah ideal, menunjukkan kecilnya
lebar diagram distribusi ukuran partikel [28]. Oleh karena itu, sistem menikmati stabilitas yang dapat
diterima. Hasilnya juga menunjukkan bahwa sampel yang mengandung AC dan kitosan memiliki PDI
lebih kecil dibandingkan sampel yang tidak mengandung AC, dan lebar diagram ukuran partikelnya lebih
kecil. Hal ini mungkin disebabkan oleh interaksi kompleks antara fosfolipid, kitosan, dan AC, seperti yang
disebutkan sebelumnya. Memang benar, hasil interaksi tarik-menarik dalam sistem tiga komponen
menghasilkan peningkatan kompresi
Ilmu farmasi2022,14, 1622 8 dari 21

dalam struktur nanopartikel, meningkatkan homogenitas dan keseragaman, dan akhirnya

menurunkan nilai PDI.

3.4. Mobilitas Elektroforesis

Untuk mengidentifikasi tingkat tolakan elektrostatik antara nanopartikel dan stabilitas
sistem yang dihasilkan, mobilitas elektroforesis sampel dievaluasi dengan hasilnya disajikan
pada Tabel1.
Mobilitas elektroforesis adalah indeks yang dievaluasi untuk menyelidiki karakteristik
fisik sistem penghantaran obat koloid. Karakteristik ini mewakili muatan permukaan partikel
dan merupakan salah satu parameter penting yang mempengaruhi perilaku nanoliposom.
Besarnya mobilitas elektroforesis menjadi alasan stabilitas sistem koloid. Memang benar,
ketika besarnya indeks ini bertambah, gaya tolak menolak antar partikel meningkat; dengan
demikian, kecenderungan partikel untuk berkumpul satu sama lain berkurang, menyebabkan
stabilitas dispersi koloid lebih besar [28,40]. Seperti yang ditunjukkan pada Tabel1, nilai
absolut mobilitas elektroforesis semua sampel lebih besar dari 3. Hal ini menunjukkan
bahwa, karena tolakan elektrostatik yang tinggi di antara nanopartikel, sampel menikmati
stabilitas kinetik yang dapat diterima. Sampel tanpa kitosan memiliki mobilitas elektroforesis
negatif karena adanya gugus fosfat anionik dalam struktur fosfolipid, yang berubah menjadi
positif setelah penambahan kitosan ke sistem koloid. Hasil ini juga dilaporkan dalam
penelitian oleh peneliti lain yang menggunakan kitosan sebagai pelapis sekunder pada
proses enkapsulasi [14,41]. Nilai akhir mobilitas elektroforesis sampel LP-FR-CH dan LP-CH-AC
adalah +4,51mikroM·cm/V·S dan +4,80mikroM·cm/V·S, masing-masing. Nanoliposom yang
mengandung kitosan terbentuk sebagai respons terhadap ikatan yang berbeda, termasuk
van der Waals, hidrogen, dan elektrostatik, di antaranya interaksi elektrostatik antara
polielektrolit bermuatan positif dan kelompok permukaan nanoliposom bermuatan negatif
menarik mereka satu sama lain, menyebabkan pembentukan lapisan tipis di dalam.
permukaan [15,22]. Perubahan mobilitas elektroforesis sampel dari-3.26mikroM·cm/V·S
hingga +4,80mikroM·cm/V·S disebabkan oleh penyerapan gugus kationik polimer kitosan
melintasi permukaan nanoliposom, menunjukkan bahwa nanopartikel telah terlapisi dengan
baik oleh kitosan.

3.5. Efisiensi Enkapsulasi

Efisiensi enkapsulasi (EE) diukur untuk AC yang terperangkap dalam nanoliposom
dengan dan tanpa lapisan kitosan. Hasilnya menunjukkan bahwa penerapan kitosan
menghasilkan peningkatan EE, yaitu meningkat dari 42,57% menjadi 61,15% (Tabel1).
Hasil serupa juga terungkap dalam berbagai penelitian. Hassan dkk. (2016) serta Gibis
dkk. (2014), menemukan bahwa penerapan kitosan untuk melapisi nanoliposom
menyebabkan peningkatan EE [22,38]. Umumnya EE bergantung pada karakteristik
fisikokimia bahan penyusun dinding dan inti nanokapsul. Nanoliposom memiliki inti air dan
lapisan hidrofobik yang sangat tipis [22]. Selama proses enkapsulasi, molekul kitosan
mengendap di permukaan atau menembus bagian bilayer fosfolipid (mengisi ruang kosong),
menyebabkan berkurangnya kebocoran senyawa antosianin dari nanoliposom, sehingga
menyebabkan peningkatan efisiensi enkapsulasi hingga 30,38%.

3.6. Fluiditas Membran

Hasil pengaruh AC dan kitosan terhadap fluiditas membran nanoliposom
ditunjukkan pada Tabel2.
Seperti yang ditunjukkan, sampel LP-AC-UH memiliki fluiditas membran yang lebih sedikit dibandingkan
dengan LP-FR-UH. Lebih lanjut, sampel LP-FR-CH memiliki fluiditas membran yang lebih sedikit dibandingkan
dengan LP-FR-UH. Akhirnya, nanoliposom LP-AC-CH memiliki fluiditas membran yang lebih sedikit dibandingkan
dengan LP-FR-CH. Pada dasarnya, jumlah bilayer yang menyusun membran dan fluiditasnya merupakan ciri
yang secara signifikan mempengaruhi pelepasan senyawa bioaktif dari nanoliposom. Faktor yang paling
berpengaruh terhadap fluiditas membran adalah komponen penyusun liposom dan interaksinya dengan
senyawa lain yang ada dalam sistem.42]. Namun, arus-
Ilmu farmasi2022,14, 1622 9 dari 21

Sifat struktur asam lemak tak jenuh menyebabkan interaksinya dengan lipid lain menjadi kurang
kuat, sehingga meningkatkan fluiditas membran.43]. Oleh karena itu, susunan senyawa eksternal
dalam lapisan ganda fosfolipid menyebabkan keterbatasan pergerakan acak kelompok kepala lipid
dan pada akhirnya mengurangi fluiditas membran. Diakui, polimer kitosan membentuk lapisan
baru di sekitar liposom, kemudian berinteraksi dengan membran bilayer fosfolipid, menyebabkan
kekuatan lapisan ganda lipid, berkurangnya kebebasan gerak rantai asam lemak dan gugus fosfat,
dan, pada akhirnya, fluiditas membran.

Meja 2.Fluiditas membran berbagai formulasi nanoliposom.

Sampel Fluiditas Membran

LP-FR-UH 4.15±0,07A
LP-AC-UH 3.41±0,04B
LP-FR-CH 3.64±0,02C
LP-AC-CH 1.39±0,06D
Semua data direpresentasikan sebagai mean±SD. Huruf yang berbeda (a,b,c,d) menunjukkan perbedaan nyata (P<0,05)
antar variabel respon.

3.7. Mikroskop Elektron Transmisi (TEM)

Kemunculan dan morfologi nanoliposom dengan dan tanpa kitosan dievaluasi
dengan teknik TEM dan hasilnya ditunjukkan pada Gambar.1.

Gambar 1.Ilustrasi skema nanoliposom: (A) nanoliposom tidak dilapisi; (B) nanoliposom berlapis;
gambar TEM nanoliposom; (C) nanoliposom tidak dilapisi; (D) nanoliposom berlapis kitosan. :
senyawa antosianin, :Nanoliposom, : Kitosan.

Seperti yang diilustrasikan, ukuran kedua kelompok nanoliposom berada dalam skala nano.
Selain itu, gambar TEM menunjukkan bahwa nanoliposom yang dibuat melalui metode gabungan
ultrasonografi dan mikrofluidisasi berbentuk vesikel bulat. Selain itu, morfologi nanoliposom yang
dilapisi kitosan menunjukkan adanya lapisan di sekitar vesikel, sedangkan tidak ada kerusakan
yang diamati pada dinding membran setelah pelapisan [22,31,40].

3.8. Stabilitas Nanoliposom

Hasil penyelidikan stabilitas nanoliposom menunjukkan bahwa semua sampel, pada suhu
yang diteliti, menikmati stabilitas yang sesuai dari waktu ke waktu, dan tidak ada perbedaan yang
signifikan antara parameter yang diteliti dibandingkan dengan hari pertama. Hanya pada sampel
LP-AC-UH terjadi penurunan EE yang signifikan yang diamati pada hari ke-30 dan 37.◦C,
Ilmu farmasi2022,14, 1622 10 dari 21

dimana EE mengalami penurunan menjadi 37,84%. Namun, EE sampel LP-AC-CH pada akhir
waktu penyimpanan keduanya adalah 4 dan 37◦C tidak menunjukkan perbedaan yang
signifikan dibandingkan dengan nilai awal. Pada dasarnya, pelepasan senyawa bioaktif dari
nanoliposom sangat bergantung pada fluiditas membran lipid [44]. Penggabungan AC
bersama dengan nanoliposom menyebabkan susunan membran fosfolipid yang terorganisir,
peningkatan pengemasannya, dan akhirnya berkurangnya fluiditas membran (Tabel2).
Memang benar, rantai kitosan menetap di wilayah eksternal dan internal membran
nanoliposom, sehingga mengatur struktur bilayer membran dan mencegah pelepasan
senyawa yang dienkapsulasi.24,45].

3.9. Karakteristik Reologi

3.9.1. Properti Aliran
Dalam uji reologi kondisi tunak, perilaku aliran sampel nanoliposom dengan formulasi
berbeda dievaluasi. Selain itu, data yang diperoleh disesuaikan dengan hukum kekuasaan dan
model Casson (Gambar2), dan parameter yang terkait dengan model ini disajikan pada Tabel3.
Seperti yang ditunjukkan (Gambar2a), tegangan geser mempunyai ketergantungan linier pada laju
geser untuk sampel LP-FR-UH dan LP-AC-UH.

Gambar 2.Perilaku aliran nanoliposom dengan berbagai formulasi : (A) Kurva aliran tegangan geser dan
dilengkapi data dengan model hukum pangkat; (B) data eksperimen dilengkapi dengan model Casson (akar
kuadrat tegangan geser terhadap akar kuadrat laju geser).

Namun penambahan kitosan pada sistem koloid menyebabkan perubahan perilaku aliran.
Seperti yang disajikan pada Tabel3Berdasarkan nilai k, sampel yang dilapisi kitosan mempunyai
viskositas semu lebih tinggi dibandingkan sampel tanpa pelapis kitosan. Lebih jauh lagi, mengenai
nilai n, sampel tanpa dan dengan kitosan masing-masing menunjukkan perilaku Newtonian dan
penipisan geser (pseudoplastik).
Ilmu farmasi2022,14, 1622 11 dari 21

Tabel 3.Karakteristik reologi berbagai sistem nanoliposom.

Model Daya Rendah Model Kasson

Sampel
k (Pa·SN) N R2 k0C(Pa·S) kC(MPa·S) R2
LP-FR-UH 0,001±0,0002 1.007±0,0932 0,9997 0,676±0,036 0,961±0,004 0,9949
LP-AC-UH 0,001±0,0004 1.009±0,0724 0,9998 0,529±0,049 1.089±0,025 0,9956
LP-FR-CH 0,018±0,0005 0,899±0,0319 0,9895 1.936±0,009 9.025±0,169 0,9846
LP-AC-CH 0,027±0,0002 0,860±0,0293 0,9832 2.304±0,081 10.404±0,289 0,9964

Penelitian yang berbeda telah melaporkan bahwa dispersi koloid umumnya

menunjukkan perilaku reologi dalam Newtonian hingga perilaku pseudoplastik [46–48].
Menurut persamaan Einstein, viskositas dispersi berbanding lurus dengan viskositas
fasa kontinu, dimana reologi sistem koloid lebih dipengaruhi oleh karakteristik fasa
tersebut. Dalam penelitian ini, air merupakan komponen dominan dispersi nanoliposom.
Selanjutnya berdasarkan nilai indeks konsistensi sampel LP-FR-UH dan LP-AC-UH dapat
disimpulkan bahwa viskositas sampel tersebut mirip dengan air (0,001 Pa·S). Dalam
sampel ini, keteguhan viskositas dengan peningkatan laju geser menunjukkan bahwa
sistem mengandung partikel kecil yang belum terkoagulasi, sehingga menunjukkan
stabilitas sistem.46,47,49].
Kehadiran kitosan di satu sisi menyebabkan peningkatan viskositas sistem (nilai k:
0,027) dengan mempengaruhi sifat-sifat fase kontinu. Di sisi lain, interaksi jaringan
kristal fase lipid dan biopolimer juga dapat mempengaruhi reologi dispersi koloid. Gaya
tarik-menarik antara lesitin dan kitosan mendorong terbentuknya lapisan kitosan dan
meningkatkan viskositas sistem.50,51].

Timbulnya perilaku shear thinning disebabkan oleh adanya penggabungan atau adanya
senyawa pengental pada sistem. Dalam kasus terakhir, penurunan viskositas dengan
peningkatan laju geser dikaitkan dengan degradasi interaksi antarmolekul komponen
polimer dan sistem koloid yang pada akhirnya mengakibatkan peningkatan mobilitas rantai
kitosan dan perilaku pseudoplastik. Di sisi lain, penerapan gaya geser menyebabkan
pelepasan fase kontinyu (air) yang terperangkap dalam rantai kitosan, sehingga menipiskan
dispersi dan mengurangi viskositasnya.52,53].
Seperti yang ditunjukkan pada Tabel2, untuk keempat sistem koloid yang diteliti, data
eksperimen tegangan-regangan disesuaikan dengan model Casson (R2> 0,9846), mewakili
perilaku plastis sampel. Oleh karena itu, tegangan luluh di atas nol menunjukkan resistensi
sampel terhadap gaya eksternal sebelum dialirkan [54]. Dalam rangkaian pengujian ini,
tegangan luluh dan viskositas plastik meningkat setelah nanoliposom dilapisi dengan
kitosan. Besarnya tegangan luluh dikaitkan dengan kekuatan interaksi antar partikel dalam
jaringan struktur mikro tiga dimensi nanoliposom. Oleh karena itu, sebagaimana
dikonfirmasi oleh hasil, kehadiran kitosan dalam sistem menyebabkan stabilitas vesikel yang
lebih baik dalam keadaan istirahat melalui interaksi dengan komponen lain (senyawa
antosianin dan struktur lipid).
Selanjutnya, ketergantungan waktu dari perilaku aliran sampel nanoliposom telah ditunjukkan
pada Gambar3A. Seperti yang diilustrasikan, semua sampel menunjukkan perilaku tiksotropik. Namun
demikian, area loop histeresis pada sampel dengan kitosan menurun secara signifikan, menunjukkan
stabilitas tinggi dari sampel tersebut. Memang benar, nanoliposom yang dilapisi dengan kitosan memiliki
karakteristik tiksotropik yang lebih sedikit sehingga memiliki kemampuan yang lebih besar dalam
memperbaiki strukturnya setelah mengatasi gaya geser. Area loop histeresis akibat perilaku rheopectic
(tanpa kehadiran kitosan) kemungkinan disebabkan oleh disosiasi vesikel sebagai respons terhadap
geser. Memang benar, lapisan kitosan yang dikembangkan di sekitar nanoliposom mengarah pada
stabilitas pembuluh darah, mencegah deformasi pembuluh darah sebagai respons terhadap gaya geser [
55,56].
Ilmu farmasi2022,14, 1622 12 dari 21

Gambar 3.(A) Ketergantungan waktu terhadap perilaku aliran nanoliposom dengan berbagai formulasi; (B)
Viskositas geser pada laju geser rendah.

Angka3b menunjukkan viskositas sampel pada nilai laju geser yang sangat rendah sedemikian rupa
sehingga semua sampel tidak memiliki perilaku Newton. Hal ini juga diamati bahwa viskositas geser nol
nanoliposom meningkat dari 7,27 Pa·S sampai 27,01 Pa·S setelah dilapisi dengan kitosan. Hal ini menunjukkan
bahwa pada nilai yang lebih kecil dari laju geser kritis atau tegangan luluh, terdapat hambatan tak terhingga
terhadap aliran. Memang benar, ketika laju geser meningkat cukup untuk mengatasi gerak Brown, partikel-
partikel sistem diposisikan sepanjang medan, di mana mereka akan memiliki resistensi yang lebih kecil
terhadap aliran dan secara alami viskositasnya akan lebih rendah.57].

3.9.2. Karakteristik Geser Osilasi

Hasil pengujian sapuan frekuensi (Gambar4) mengungkapkan bahwa di seluruh sampel LP-
FR, LP-AC, LP-FR-CH, dan LP-CH-AC, seiring dengan peningkatan frekuensi, modul penyimpanan,
dan modul viscose bertambah. Modul penyimpanan (G') adalah kriteria untuk tingkat energi yang
disimpan dan dipulihkan dalam setiap siklus deformitas (pengerahan gaya), yang mencerminkan
komponen perilaku viskoelastik pseudo-padat. Di sisi lain, modul viscose (G“) menunjukkan tingkat
energi yang hilang dalam setiap siklus dan menggambarkan komponen cairan semu tersebut.
Dalam penelitian ini, semua sampel pada frekuensi rendah memiliki G“nilai lebih tinggi dari G', dan
menunjukkan perilaku pseudo-liquid. Dalam keadaan ini, energi yang diperlukan untuk deformasi
material telah hilang sebagai viskositas [54]. Seperti yang diilustrasikan pada Gambar4, di semua
sampel, secara bertahap seiring dengan peningkatan frekuensi, G'dan G“kurva saling bersilangan,
sehingga kecenderungan perilaku pseudo-solid meningkat. Dalam penelitian tersebut, hal ini
diamati pada sampel tanpa kitosan dan sampel dengan kitosan pada frekuensi masing-masing
sekitar 0,4 Hz dan 0,03 Hz. Pengamatan ini mewakili kemampuan kitosan-
Ilmu farmasi2022,14, 1622 13 dari 21

mengandung sampel dalam pembentukan gel [53]. Seperti yang ditunjukkan, perilaku
viskoelastik vesikel lipid tidak dipengaruhi oleh ekstrak antosianin yang dienkapsulasi,
sedangkan pengaruh kitosan terhadap karakteristik ini terlihat jelas. Kehadiran kitosan dalam
sistem mengakibatkan peningkatan G'dan G“dan akhirnya meningkatkan sifat mekanik
nanoliposom [54]. Berbagai faktor, termasuk ukuran nanopartikel, sifat mekanik lapisan
kitosan, dan interaksinya, dapat menyebabkan peningkatan stabilitas liposom dengan lapisan
sekunder. Seperti disebutkan sebelumnya, kitosan bertindak sebagai lapisan pelindung dan
mengurangi deformasi lapisan fosfolipid. Biasanya, stabilitas mekanik dispersi liposom
dipengaruhi oleh berbagai interaksi vesikel lipid, termasuk van der Waals, tolakan
elektrostatik, dan tolakan entropi jarak jauh. Ketika sistem lapisan ganda lipid memiliki
lapisan kitosan, interaksi yang disebutkan di atas semakin intensif dan berkontribusi
terhadap stabilitas mekanis.58].

Gambar 4.Frekuensi sapuan sampel nanoliposom berbeda pada strain 10%.

3.10. Analisis FTIR

Analisis FTIR dilakukan sebagai teknik non-destruktif untuk mengidentifikasi dan
menganalisis kelompok fungsional nanoliposom dari lesitin rapeseed, kitosan, dan ekstrak
antosianin, dan interaksinya dalam rentang bilangan gelombang 440–4000 cm-1.-1. Hasil
pengujian ini ditampilkan secara terpisah pada Gambar5Dan6.
Ilmu farmasi2022,14, 1622 14 dari 21

Pada spektrum FTIR kitosan seperti terlihat pada Gambar5, puncak yang diamati
dalam kisaran 3000–3700 cm-1terkait dengan ikatan regangan hidroksil serta ikatan
regangan NH simetris dan asimetris pada gugus amina. Vibrasi ikatan karbonil (C=O)
gugus Amida CONHR (Amida Sekunder) tercatat pada jarak 1631 cm-1demikian juga
sebagai gugus amina terprotonasi, NH+3, pada bilangan gelombang 1543 cm-1. Di sisi lain
Di sisi lain, pita serapannya adalah 852–1203 cm1dikaitkan dengan struktur sakarida.
Selanjutnya puncaknya pada 1022 cm-1dan 1066cm-1terkait dengan getaran regangan
CO [59,60].

Gambar 5.Spektrum FTIR antosianin, fosfolipid, dan kitosan.

Ilmu farmasi2022,14, 1622 15 dari 21

Gambar 6.Spektrum FTIR kitosan-fosfolipid, antosianin-fosfolipid, antosianin-kitosan.

Angka5menunjukkan spektrum FTIR dari pita utama yang membentuk vesikel

fosfolipid. Pita lebar hadir dalam kisaran bilangan gelombang 3045–3722 cm-1mewakili
keberadaan OH. Puncaknya muncul pada 1743 cm-1menunjukkan vibrasi ulur gugus
karbonil ester fosfolipid (-C=O). Ikatan serapan yang termasuk dalam vibrasi regangan
ikatan rangkap karbon-karbon alkena, C=C terdeteksi pada
1651 cm-1. Getaran PO yang simetris dan asimetris- 2terungkap pada 1224 cm-1
dan 1081cm-1. Selanjutnya, pita tersebut hadir pada 1064 cm-1dan 1163cm-1ditugaskan untuk
ikatan regangan CO-OC yang simetris dan asimetris. Akhirnya, pitanya menjadi 975 cm-1
mewakili getaran regangan asimetris N(CH3)3[61,62].
Pada spektrum FTIR ekstrak antosianin (Gambar5), pita pada 600–1045 cm-1
menunjukkan adanya cincin aromatik, sedangkan 1028 cm-1terkait dengan transformasi
cincin aromatik CH. 1051cm-1disebabkan oleh getaran regangan ester COC,
Ilmu farmasi2022,14, 1622 16 dari 21

sedangkan puncaknya pada 1259 cm-1dikaitkan dengan peregangan cincin piran,

struktur khas senyawa flavonoid. Pita pada 1400 cm-1terkait dengan transformasi CO,
1589 cm-1, dan 1701cm-1mengalokasikan masing-masing ke gugus C=C dan C=O pada
cincin aromatik. Pita lebar pada 2985–3710 cm-1terkait dengan gugus OH dari fenol dan
getaran gula [59,63,64].
Setelah nanoliposom dilapisi dengan kitosan, interaksi antara polisakarida dan lipid
diperiksa dengan FTIR. Spektrum FTIR nanopartikel fosfolipid-kitosan disajikan pada
Gambar6. Hasil penelitian menunjukkan bahwa terbentuknya kompleks antara liposom
dan kitosan mengakibatkan perubahan jangkauan dan intensitas pita serapan gugus
OH. Hal ini disebabkan oleh adanya lebih banyak gugus hidroksil dan kemungkinan
terbentuknya ikatan hidrogen antarmolekul baru [65]. Gugus fosfat merupakan salah
satu gugus fungsi yang terdapat dalam struktur nanoliposom yang mampu membentuk
ikatan dengan amino polisakarida (kitosan) melalui interaksi elektrostatik. Hasilnya juga
menunjukkan bahwa pita serapan gugus fosfat liposom bergeser ke frekuensi yang lebih
tinggi (dari 1224 cm-1hingga 1232cm-1), menunjukkan bahwa interaksi dengan ligan
polimer mengakibatkan dehidrasi gugus fosfat. Memang ciri khasnya
pita kitosan pada 1543 cm-1terkait dengan getaran gunting NH+ 3terprotonasi
gugus amina, bergeser ke frekuensi yang lebih tinggi pada 1554 cm-1-1. Perubahan ini
menunjukkan bahwa sebagian besar ikatan hidrogen pada gugus fosfat terputus karena
interaksi elektrostatik dengan gugus amina kitosan [22]. Gugus karbonil merupakan situs lain
yang berpotensi menempel pada kitosan. Golongan ini mempunyai muatan negatif sebagian
pada atom oksigen. Interaksi antara liposom dan kitosan menghasilkan perubahan besar
pada wilayah terkait penyerapan gugus karbonil dan perpindahan pita serapan ke frekuensi
yang lebih tinggi (dari 1732 hingga 1755 cm-1). Posisi pita serapan ini menunjukkan
penurunan kelompok hidrasi yang cukup besar. Hasil ini menunjukkan degradasi beberapa
ikatan hidrogen karena keterlibatan gugus karbonil dengan gugus kationik polimer, mirip
dengan gugus fosfat nanoliposom. Dengan demikian, pengamatan ini menunjukkan bahwa
karbonil dan fosfat liposom bertindak sebagai tempat pembentukan ikatan dengan kitosan.
Hasil penelitian juga menunjukkan bahwa pita serapan termasuk golongan karbonil amino,
bilangan gelombang 1631 cm-1, tidak ada dalam sampel LP-FR-CH. Pengamatan ini
dimungkinkan karena gugus fungsi ini bergabung dengan gugus karbonil fosfolipid,
sehingga menyebabkan eliminasi puncak pada 1631 cm-1.-1[22,41,62].
Spektrum FTIR terkait sampel LP-AC-UH juga ditunjukkan pada Gambar6. Seperti yang
dapat dilihat, berbagai puncak diamati pada spektrum serapan yang berkaitan dengan AC
dan liposom. Beberapa puncak yang terkait dengan ekstrak liposom dan antosianin tetap
tidak berubah, sementara beberapa lainnya mengalami beberapa variasi. Posisi gugus
karbonil lipid setelah penempelan senyawa antosianin berubah dan bergeser dari 1743 cm-1
sampai 1730cm-1. Namun, gugus fosfat lipid berubah dari 1224 cm-1-1hingga 1240cm-1.
Selain itu, penampakan wilayah yang berhubungan dengan gugus OH juga berubah.
Pembatasan pita OH dikaitkan dengan perkembangan ikatan hidrogen. Puncak OH AC
bergeser sebanyak 17 cm-1menuju bilangan gelombang yang lebih rendah dengan adanya
liposom. Hal ini mungkin disebabkan oleh putusnya ikatan hidrogen dan terbentuknya ikatan
hidrogen antara gugus OH antosianin (fenolik dan gula) dan gugus fungsi fosfolipid (fosfat
dan karboksil) [59]. Popova dkk. (2016) menyimpulkan bahwa senyawa fenolik amfifilik lebih
suka terletak pada antarmuka air-lipid lapisan ganda lipid dan dekat dengan gugus P=O dan
C=O, sehingga sumbu longitudinalnya akan tersusun sejajar dengan bidang lapisan ganda
lipid. Dalam keadaan ini, gugus OH pada cincin gula membentuk ikatan P=O, dan gugus OH
fenolik membentuk ikatan hidrogen dengan gugus C=O. Karena gugus OH fenolik memiliki
fleksibilitas orientasi yang lebih rendah, maka struktur aglikon memainkan peran yang lebih
penting dalam membangun ikatan hidrogen dengan gugus C=O dibandingkan dengan P=O [
59]. Puncaknya antara 1498 cm-1dan 1662cm-1terkait dengan cincin fenolik yang ada dalam
struktur antosianin. Puncaknya pada 1701 cm-1terkait dengan getaran C=O dipengaruhi oleh
keberadaan lipid dan transfer ke frekuensi yang lebih rendah. Hal ini menunjukkan bahwa
gugus karbon yang ada pada cincin C fenolik antosianin membentuk hidrogen
Ilmu farmasi2022,14, 1622 17 dari 21

berikatan dengan molekul lipid. Seperti yang dapat diamati, pada 1375 cm-1, puncak baru tercipta
dengan intensitas serapan rendah pada struktur nanoliposom yang mengandung ekstrak
antosianin. Pita serapan ini mungkin termasuk dalam getaran regangan -N=O. Memang, N(CH3)3
kelompok hadir dalam struktur lesitin sangat elektrofilik dan mengandung orbital kosong. Gugus
ini membentuk ikatan Datif lemah dengan pasangan elektron bebas gugus OH pada struktur
antosianin. Kemudian, karena efek resonansi elektron π pada cincin benzena, untuk sementara
berubah menjadi ikatan -N=O lemah, menciptakan puncak baru pada 1375 cm-1[66].
Ada kemungkinan lain munculnya 1.375 cm-1puncak. Penyerapan
pita 1259 cm-1dalam antosianin (cincin aromatik CO) dan 1228 cm-1(PO- 2asimetris
peregangan) dalam lipid pada senyawa akhir telah berubah menjadi 1240 cm-1dan 1375cm-1[
67]. Kemungkinan lain dapat dipertimbangkan untuk kejadian ini. Memang ikatan eter CO
mempunyai muatan positif dan orbital kosong serta cenderung membentuk ikatan dengan
senyawa bermuatan negatif. Sebaliknya, pita 1228 cm-1milik fosfat dan memiliki muatan
negatif. Mungkin saja, interaksi antara dua gugus fungsi tersebut menghasilkan integrasi
keduanya. Namun demikian, reaksi gugus eter cincin piran antosianin tidak hanya terjadi
pada gugus fosfat, dan dapat menimbulkan reaksi dengan gugus lain yang bermuatan
negatif. Ini juga berlaku untuk gugus fosfat [59]. Secara keseluruhan, reaksi yang mungkin
terjadi pada kedua gugus fungsi mengakibatkan pergeseran puncaknya dan tumpang tindih
puncak yang tercipta.
Juga diamati bahwa puncak regangan simetris milik CO-OC berfungsi
2dalam
kelompok dan PO - spektrum IR nanoliposom tidak ada di LP-AC-SH. Bulu-
selanjutnya, puncak getaran regangan asimetris CO-OC telah bergeser menjadi 1180 cm-1. Hal ini
dapat disebabkan karena kedua gugus tersebut mempunyai potensi untuk membentuk ikatan
hidrogen dengan gugus OH yang berada di dalam struktur ekstrak antosianin, dimana intensitas
perkembangan interaksi mengakibatkan terjadinya perpindahan atau hilangnya puncak-puncak.
22].
Angka6menunjukkan spektrum FTIR terkait interaksi antara kitosan dan antosianin.
Seperti yang dapat diamati, tahun 1631 cm-1puncak yang berasosiasi dengan pita karbonil
dari gugus Amida CONHR dan puncak yang termasuk dalam gugus karbonil dari cincin
aromatik AC pada 1703 cm-1tidak ada dalam sampel akhir. Hasil ini menunjukkan
pengembangan ikatan hidrogen antara kitosan dan antosianin [22,31].
Di sisi lain, puncak berkaitan dengan getaran gunting NH+ 3dalam kitosan dan
puncak yang terkait dengan getaran C=C pada cincin aromatik tidak ada pada sampel akhir.
Namun dalam rentang 11.134–1803 cm-1, puncak dengan 1404 dan1562 cm-1sentralitas telah
terbentuk. Memang benar, alasan utama perubahan ini adalah partisipasi kelompok-kelompok
tersebut dalam interaksi hidrogen, yang akibatnya mungkin berupa pergeseran puncak-puncak ini
atau integrasinya satu sama lain.

4. Kesimpulan
Dalam penelitian ini, untuk pertama kalinya, metode baru dalam mengenkapsulasi AC
menggunakan lesitin rapeseed dan kitosan diselidiki. Hal ini menunjukkan bahwa AC berhasil
dienkapsulasi di dalam nanoliposom yang dilapisi kitosan. Selanjutnya pada penelitian ini
dilakukan karakteristik fisikokimia dan struktur nanoliposom, serta nanoliposom yang dilapisi
kitosan sebelum dan sesudah enkapsulasi senyawa antosianin. Peningkatan ukuran partikel
dan muatan permukaan liposom menunjukkan perubahan karakteristik permukaan
nanoliposom setelah dilapisi dengan kitosan melalui interaksi antara polimer dan liposom.
Selain itu, gambar TEM mengkonfirmasi keberadaan lapisan kitosan di sekitar nanoliposom.
Berkurangnya fluiditas membran dengan adanya senyawa antosianin dan kitosan
menunjukkan penurunan mobilitas rantai asam lemak sehingga menyebabkan berkurangnya
kebocoran senyawa target ke luar nanoliposom. Studi reologi dan perilaku aliran
nanoliposom menunjukkan bahwa kehadiran kitosan menyebabkan perubahan perilaku dari
Newtonian menjadi pseudo-plastik, berkurangnya perilaku tiksotropik, dan meningkatkan
stabilitas dispersi koloid nanoliposom. Selain itu, perilaku reologi osilasi menunjukkan
stabilitas mekanik yang lebih besar pada sampel nanoliposom dengan kitosan
Ilmu farmasi2022,14, 1622 18 dari 21

lapisan. Hasil uji FTIR menunjukkan bahwa interaksi nanoliposom dengan kitosan meliputi
interaksi elektrostatis (antara gugus amonium kationik kitosan dengan gugus fosfat anionik
nanoliposom), hidrogen, dan hidrofobik. Interaksi yang sama terjadi antara AC dan liposom,
dengan perbedaan hanya interaksi elektrostatik yang terjadi antara oksigen cincin eter
antosianin yang bermuatan positif dan gugus fosfat yang bermuatan negatif nanoliposom.
Namun interaksi antara antosianin dan kitosan hanya bersifat hidrofobik dan hidrogen.
Sebagai kesimpulan, dapat dinyatakan bahwa pelapisan nanoliposom AC dengan kitosan
meningkatkan karakteristik struktural dan stabilitas fisikokimia AC, yang dapat menjadi
strategi yang menjanjikan untuk memanfaatkan senyawa tersebut dalam produk yang
meningkatkan kesehatan. Dalam penelitian selanjutnya, tujuannya adalah untuk
mengevaluasi perilaku pelepasan senyawa antosianin dari liposom AC yang dilapisi atau tidak
dilapisi kitosan dalam simulasi saluran pencernaan.

Kontribusi Penulis:Konseptualisasi, MH, EA-T., SD dan MM; Metodologi, MH; Perangkat Lunak,
MH, HK dan GA; Validasi, MM, EA-T. dan SD; Analisis Formal, MH, HK dan GA; Investigasi, MH, EA-T.
dan SD; Sumber Daya, EA-T. dan SD; Kurasi Data, MH dan HK; Penulisan—Persiapan Draf Asli, MH;
Penulisan—Review dan Editing, MH, HK dan E-T.; Visualisasi, MH; Pengawasan, MM, EA-T., SD, HK
dan GA; Administrasi Proyek, MM, EA-T., SD dan HK; Akuisisi Pendanaan, E-T. dan SD Semua penulis
telah membaca dan menyetujui versi naskah yang diterbitkan.

Pendanaan:Penelitian ini tidak menerima pendanaan eksternal.

Pernyataan Dewan Peninjau Kelembagaan:Tak dapat diterapkan.

Pernyataan Persetujuan yang Diinformasikan:Tak dapat diterapkan.

Pernyataan Ketersediaan Data:Data yang disajikan dalam penelitian ini tersedia atas permintaan yang
masuk akal kepada penulis terkait.

Ucapan Terima Kasih:Kami ingin mengucapkan terima kasih atas dukungan dari Kementerian Pendidikan
Tinggi, Penelitian dan Inovasi Perancis dan Kementerian Ilmu Pengetahuan, Penelitian, dan Teknologi Iran.

Konflik kepentingan:Para penulis menyatakan tidak ada konflik kepentingan.

Referensi
1. Javad-Mousavi, SA; Hemmati, AA; Mehrzadi, S.; Hosseinzadeh, A.; Houshmand, G.; Nooshabadi, MRR; Mehrabani, M.; Goudarzi, M. Efek
perlindungan dariBerberis vulgarisekstrak buah terhadap fibrosis paru yang diinduksi Paraquat pada tikus.Bioma. Apoteker.2016,81,
329–336. [Referensi Silang] [PubMed]
2. Končić, MZ; Kremer, D.; Karlović, K.; Kosalec, I. Evaluasi aktivitas antioksidan dan kandungan fenolikBerberis vulgarisTanahBerberis
kroatikaHorvat.Kimia Makanan. beracun.2010,48, 2176–2180. [Referensi Silang] [PubMed]
3. Chen, J.; Tao, X.; Zhang, M.; Matahari, A.; Zhao, L. Sifat dan stabilitas nanopartikel albumin serum antosianin-sapi blueberry.J.Ilmu.
Pertanian Pangan.2015,95, 1570.[Referensi Silang] [PubMed]
4. Wang, W.; Jung, J.; Tomasino, E.; Zhao, Y. Optimalisasi ekstraksi pelarut dan bantuan ultrasonik untuk berbagai buah kaya antosianin dan
pengaruhnya terhadap komposisi antosianin.LWT-Ilmu Makanan. Teknologi.2016,72, 229–238. [Referensi Silang]
5. Munin, A.; Edwards-Lyaituvy, F. Enkapsulasi senyawa polifenol alami; sebuah ulasan.Ilmu farmasi2011,3, 793–829. [Referensi
Silang] [PubMed]
6. Wang, W.; Jung, J.; Zhao, Y. Mikroenkapsulasi nanokristal kitosan-selulosa untuk meningkatkan efisiensi enkapsulasi dan stabilitas antosianin buah
yang terperangkap.Karbohidrat. Polim.2017,157, 1246–1253. [Referensi Silang] [PubMed]
7. Devi, N.; Sarmah, M.; Khatun, B.; Maji, TK Enkapsulasi bahan aktif dalam koaservat kompleks polisakarida-protein. Adv. Sains Antarmuka
Koloid.2017,239, 136–145. [Referensi Silang]
8. Shishir, MRI; Xie, L.; Matahari, C.; Zheng, X.; Chen, W. Kemajuan dalam enkapsulasi mikro dan nano senyawa bioaktif menggunakan biopolimer
dan transporter berbasis lipid.Tren Ilmu Makanan. Teknologi.2018,78, 34–60. [Referensi Silang]
9. Gibis, M.; Vogt, E.; Weiss, J. Enkapsulasi ekstrak biji anggur polifenol dalam liposom berlapis polimer.Fungsi Pangan.2012,3, 246–254. [
Referensi Silang]
10. Zou, L.-Q.; Liu, W.; Liu, W.-L.; Liang, R.-H.; Li, T.; Liu, C.-M.; Cao, Y.-L.; Niu, J.; Liu, Z. Karakterisasi dan bioavailabilitas nanoliposom
polifenol teh dibuat dengan menggabungkan metode injeksi etanol dengan mikrofluidisasi dinamis tekanan tinggi.
J.Pertanian. Kimia Makanan.2014,62, 934–941. [Referensi Silang]
Ilmu farmasi2022,14, 1622 19 dari 21

11. Oskoueian, E.; Karimi, E.; Noura, R.; Ibrahimi, M.; Shafaei, N.; Karimi, E. Enkapsulasi nanoliposom dari fraksi fenolik yang diperkaya dari
kulit pistachio dan aktivitas antioksidan, anti-inflamasi, dan anti-melanogeniknya.J. Mikroenkapsul.2020,37, 1–13. [Referensi Silang]

12. Chen, M.; Li, R.; Gao, Y.; Zheng, Y.; Liao, L.; Cao, Y.; Li, J.; Zhou, W. Enkapsulasi polifenol hidrofobik dan kelarutan rendah menjadi nanoliposom
dengan metode berbasis pH: Naringenin dan naringin sebagai senyawa model.Makanan2021,10, 963.[Referensi Silang]
13. Katouzian, I.; Jafari, SM Nano-enkapsulasi sebagai pendekatan yang menjanjikan untuk pengiriman yang ditargetkan dan pelepasan vitamin yang terkontrol. Tren Ilmu
Makanan. Teknologi.2016,53, 34–48. [Referensi Silang]
14. Cuomo, F.; Cofelice, M.; Venditti, F.; Ceglie, A.; Miguel, M.; Lindman, B.; Lopez, F. Pencernaan in-vitro dari liposom berlapis kitosan yang
mengandung kurkumin.Selancar Koloid. B Biointerface2018,168, 29–34. [Referensi Silang]
15. Li, R.; Deng, L.; Cai, Z.; Zhang, S.; Wang, K.; Li, L.; Ding, S.; Zhou, C. Liposom dilapisi dengan kitosan tiolasi sebagai pembawa obat kurkumin.
Materi. Sains. bahasa Inggris C2017,80, 156–164. [Referensi Silang]
16. Lagu, J.-W.; Liu, Y.-S.; Guo, Y.-R.; Zhong, W.-X.; Guo, Y.-P.; Guo, L. Nano–Liposom Berisi Ganda dengan Kurkumin dan Tetrandrine:
Persiapan, Karakterisasi, Hepatotoksisitas dan Efek Anti-Tumor.Int. J.Mol. Sains.2022,23, 6858.[Referensi Silang]
17. Taman, SN; Jo, NR; Jeon, SH Liposom berlapis kitosan untuk meningkatkan permeasi resveratrol pada kulit.J.Ind.Eng. kimia.2014,20, 1481–1485. [
Referensi Silang]
18. Karim, N.; Shishir, MRI; Chen, W. Dekorasi permukaan nanoliposom bermuatan neohesperidin menggunakan kitosan dan pektin untuk
meningkatkan stabilitas dan pelepasan terkontrol.Int. J.Biol. makromol.2020,164, 2903–2914. [Referensi Silang]
19. Hasan, M.; Elkhoury, K.; Kahn, CJ; Arab-Teheran, E.; Linder, M. Persiapan, karakterisasi, dan kinetika pelepasan nanoliposom berlapis
kitosan yang merangkum kurkumin dalam lingkungan simulasi.Molekul2019,24, 2023.[Referensi Silang]
20. Shishir, MRI; Karim, N.; Ya ampun, V.; Xie, J.; Zheng, X.; Chen, W. Nanoliposom terkonjugasi pektin-kitosan sebagai sistem pengiriman yang
menjanjikan untuk neohesperidin: Karakterisasi, perilaku pelepasan, serapan seluler, dan sifat antioksidan.Hidrokol Makanan.2019,95, 432–
444. [Referensi Silang]
21. Shin, GH; Chung, SK; Kim, JT; Joung, HJ; Park, HJ Pembuatan nanoliposom berlapis kitosan untuk meningkatkan sifat mukoadhesif
kurkumin menggunakan metode injeksi etanol.J.Pertanian. Kimia Makanan.2013,61, 11119–11126. [Referensi Silang]
22. Hasan, M.; Messaoud, GB; Michaux, F.; Tamayol, A.; Kahn, C.; Belhaj, N.; Linder, M.; Arab-Tehrany, E. Liposom berlapis kitosan
yang merangkum kurkumin: Studi interaksi lipid-polisakarida dan perilaku nanovesikel.Adv.RSC.2016,6, 45290–45304. [
Referensi Silang]
23. Gibis, M.; Ruedt, C.; Weiss, J. Pelepasan polifenol biji anggur secara in vitro yang dienkapsulasi dari liposom yang tidak dilapisi dan dilapisi
kitosan.Res Makanan. Int.2016,88, 105–113. [Referensi Silang]
24. Hao, J.; Guo, B.; Yu, S.; Zhang, W.; Zhang, D.; Wang, J.; Wang, Y. Enkapsulasi kuersetin flavonoid dengan nano-liposom berlapis kitosan.
LWT-Ilmu Makanan. Teknologi.2017,85, 37–44. [Referensi Silang]
25. Zhao, L.; Temelli, F. Persiapan liposom yang mengandung antosianin menggunakan metode karbon dioksida superkritis yang ditingkatkan.Inovasi. Ilmu Makanan.
Muncul. Teknologi.2017,39, 119–128. [Referensi Silang]
26. Matahari, Y.; Chi, J.; Ya, X.; Wang, S.; Liang, J.; Yue, P.; Xiao, H.; Gao, X. Nanoliposom sebagai sistem pengiriman antosianin:
karakterisasi fisikokimia, serapan seluler, dan sifat antioksidan.Lwt2021,139, 110554.[Referensi Silang]
27. Ackman, R. Komentar tentang metode resmi yang menggunakan boron trifluorida dalam pembuatan metil ester asam lemak minyak ikan.Selai.
Kimia Minyak. sosial.1998,75, 541–545. [Referensi Silang]
28. Bouarab, L.; Maherani, B.; Kheirolomoom, A.; Hasan, M.; Aliakbarian, B.; Linder, M.; Arab-Tehrany, E. Pengaruh komposisi lesitin-
lipid pada sifat fisiko-kimia nanoliposom yang sarat dengan molekul hidrofobik.Selancar Koloid. B Biointerface 2014,115, 197–
204. [Referensi Silang]
29. Elkhoury, K.; Sanchez-Gonzalez, L.; Lavrador, P.; Almeida, R.; Gaspar, V.; Kahn, C.; Cleymand, F.; Arab-Teheran, E.; Mano, JF Hidrogel
nanokomposit Gelatin methacryloyl (GelMA) yang menyematkan liposom naringin bioaktif.Polimer2020,12, 2944.[Referensi Silang]

30. Hasan, M.; Latifi, S.; Kahn, CJ; Tamayol, A.; Habibey, R.; Passeri, E.; Linder, M.; Arab-Tehrany, E. Peran positif nanoliposom salmon
yang mengandung kurkumin pada kultur neuron kortikal primer.Maret Narkoba2018,16, 218.[Referensi Silang]
31. Zhao, L.; Temelli, F.; Chen, L. Enkapsulasi antosianin dalam liposom menggunakan karbon dioksida superkritis: Pengaruh konsentrasi antosianin
dan sterol.J.Fungsi. Makanan2017,34, 159–167. [Referensi Silang]
32. Ge, J.; Yue, P.; Chi, J.; Liang, J.; Gao, X. Pembentukan dan stabilitas nanokompleks bermuatan antosianin yang dibuat dengan kitosan hidroklorida
dan karboksimetil kitosan.Hidrokol Makanan.2018,74, 23–31. [Referensi Silang]
33. Ge, J.; Yue, X.; Wang, S.; Chi, J.; Liang, J.; Matahari, Y.; Gao, X.; Yue, P. Nanokompleks terdiri dari turunan kitosan dan β-Lactoglobulin
sebagai pembawa antosianin: Persiapan, stabilitas dan bioavailabilitas in vitro.Res Makanan. Int.2019,116, 336–345. [Referensi Silang]
[PubMed]
34. Maherani, B.; Arab-Teheran, E.; Rogalska, E.; Korchowiec, B.; Kheirolomoom, A.; Linder, M. Studi konformasi getaran, kalorimetri, dan
molekuler tentang interaksi calcein dengan model membran lipid.J. Nanopartikel Res.2013,15, 1792.[Referensi Silang]
35. Liu, W.; Liu, J.; Liu, W.; Li, T.; Liu, C. Peningkatan stabilitas pencernaan fisik dan in vitro dari sistem pengiriman polielektrolit berdasarkan
nanoliposom berlapis alginat-kitosan lapis demi lapis.J.Pertanian. Kimia Makanan.2013,61, 4133–4144. [Referensi Silang]
36. Liu, W.; Liu, W.; Ya.; Peng, S.; Wei, F.; Liu, C.; Han, J. Stabilitas tekanan lingkungan mikroenkapsul berdasarkan liposom yang dihiasi
dengan kitosan dan natrium alginat.Kimia Makanan.2016,196, 396–404. [Referensi Silang]
Ilmu farmasi2022,14, 1622 20 dari 21

37. Wydro, P.; Krajewska, B.; Hąc-Wydro, K. Kitosan sebagai pengikat lipid: Studi monolayer Langmuir tentang kitosan-interaksi lipid.
Biomakromolekul2007,8, 2611–2617. [Referensi Silang]
38. Gibis, M.; Zeeb, B.; Weiss, J. Pembentukan, karakterisasi, dan stabilitas ekstrak kembang sepatu yang dienkapsulasi dalam liposom berlapis-lapis. Hidrokol
Makanan.2014,38, 28–39. [Referensi Silang]
39. Muhammad, A.; Weston, N.; Coombes, A.; Fitzgerald, M.; Perrie, Y. Formulasi liposom obat yang sukar larut dalam air:
Optimalisasi pemuatan obat dan analisis stabilitas ESEM.Int. J.Pharm.2004,285, 23–34. [Referensi Silang]
40. Teheran, EA; Kahn, CJ; Baravian, C.; Maherani, B.; Belhaj, N.; Wang, X.; Linder, M. Elaborasi dan karakterisasi nanoliposom
berbahan dasar kedelai; lesitin rapeseed dan salmon: Aplikasi pada kultur sel.Selancar Koloid. B Biointerface2012,95, 75–81. [
Referensi Silang]
41. Zhou, F.; Xu, T.; Zhao, Y.; Lagu, H.; Zhang, L.; Wu, X.; Lu, B. Liposom berlapis kitosan sebagai sistem pengiriman untuk meningkatkan stabilitas dan
bioavailabilitas oral acteoside.Hidrokol Makanan.2018,83, 17–24. [Referensi Silang]
42. Maherani, B.; Arab-Teheran, E.; Kheirolomoom, A.; Reshetov, V.; Stebe, MJ; Linder, M. Optimasi dan karakterisasi formulasi
liposom dengan desain campuran.Analis2012,137, 773–786. [Referensi Silang]
43. Maherani, B.; Arab-Teheran, E.; Kheirolomoom, A.; Cleymand, F.; Linder, M. Pengaruh komposisi lipid pada sifat fisikokimia nanoliposom
yang merangkum antioksidan dipeptida alami L-carnosine.Kimia Makanan.2012,134, 632–640. [Referensi Silang]
44. Brandl, M.Liposom sebagai Pembawa Obat: Pendekatan Teknologi; Elsevier: Amsterdam, Belanda, 2001.
45. Hua, W.; Liu, T. Persiapan dan sifat niosom tidak berbahaya yang sangat stabil dalam sistem Span 80/PEG 400/H2O.Selancar Koloid. Sebuah Fisikokimia.
bahasa Inggris Asp.2007,302, 377–382. [Referensi Silang]
46. Alison, L.; Ruhs, PA; Tervoort, E.; Teleki, A.; Zanini, M.; Isa, L.; Studart, AR Pickering dan stabilisasi jaringan emulsi biokompatibel menggunakan
nanopartikel silika yang dimodifikasi kitosan.Langmuir2016,32, 13446–13457. [Referensi Silang]
47. Calero, N.; Muñoz, J.; Cox, PW; Heuer, A.; Guerrero, A. Pengaruh konsentrasi kitosan terhadap stabilitas, struktur mikro dan sifat reologi emulsi O/
W yang diformulasikan dengan minyak bunga matahari tinggi oleat dan protein kentang.Hidrokol Makanan.2013,30, 152–162. [Referensi
Silang]
48. Klongdee, S.; Thonggam, M.; Klinkesorn, U. Reologi dan struktur mikro emulsi minyak tuna yang distabilkan lesitin yang mengandung kitosan
dengan berbagai konsentrasi dan ukuran molekul.Biofisika Makanan.2012,7, 155–162. [Referensi Silang]
49. De Haas, K.; Blom, C.; Van den Ende, D.; Duit, M.; Haveman, B.; Mellema, J. Perilaku reologi dispersi vesikel bilayer lipid kecil.
Langmuir1997,13, 6658–6668. [Referensi Silang]
50. Dammak, I.; do Amaral Sobral, PJ Investigasi stabilitas fisikokimia dan sifat reologi emulsi rutin yang distabilkan oleh kitosan
dan lesitin.J. Makanan Eng.2018,229, 12–20. [Referensi Silang]
51. Rakyat, PV; Singh, KK Pengembangan dan evaluasi pembawa nanolipid termodifikasi koloid: Aplikasi untuk pemberian tacrolimus
topikal.euro. J.Pharm. Biofarmasi.2011,79, 82–94. [Referensi Silang]
52. Erçelebi, EA; Ibanoğlu, E. Sifat reologi isolat protein whey menstabilkan emulsi dengan pektin dan guar gum.euro. Res Makanan.
Teknologi.2009,229, 281–286. [Referensi Silang]
53.McClements, DJEmulsi Makanan: Prinsip, Praktek, dan Teknik; CRC Press: Boca Raton, FL, AS, 2015.
54. Dragicevic-Kurik, N.; Musim Dingin, S.; Stupar, M.; Milik, J.; Krajišnik, D.; Gitter, B.; Fahr, A. Gel liposom yang mengandung temoporfin:
Sifat viskoelastik dan penetrasi kulit in vitro.Int. J.Pharm.2009,373, 77–84. [Referensi Silang] [PubMed]
55. Madrigal-Carballo, S.; Seyler, D.; Manconi, M.; Mura, S.; Vila, A.; Molina, F. Pendekatan perilaku reologi dan elektrokinetik vesikel lipid
yang ditutupi dengan biopolimer kitosan.Selancar Koloid. Sebuah Fisikokimia. bahasa Inggris Asp.2008,323, 149–154. [Referensi Silang
]
56. Manconi, M.; Mura, S.; Sinico, C.; Fadda, AM; Vila, A.; Molina, F. Pengembangan dan karakterisasi liposom yang mengandung glikol sebagai
pembawa diklofenak.Selancar Koloid. Sebuah Fisikokimia. bahasa Inggris Asp.2009,342, 53–58. [Referensi Silang]
57. Lorenzo, T.; Marco, L. Brownian Simulasi dinamika agregasi partikel koloid bermuatan yang diinduksi geser dengan adanya interaksi
hidrodinamik.J. Ilmu Antarmuka Koloid.2022,624, 637–649. [Referensi Silang] [PubMed]
58. Versluis, P.; Van De Pas, J.; Mellema, J. Pengaruh konsentrasi garam dan konsentrasi surfaktan terhadap struktur mikro dan
reologi fase kristal cair pipih.Langmuir2001,17, 4825–4835. [Referensi Silang]
59. Pereira, VA, Jr.; de Arruda, INQ; Stefani, R. Film kitosan/PVA aktif dengan antosianin dari Brassica oleraceae (Kubis Merah)
sebagai indikator waktu-suhu untuk aplikasi dalam kemasan makanan cerdas.Hidrokol Makanan.2015,43, 180–188. [Referensi
Silang]
60. Wang, X.; Du, Y.; Luo, J. Nanokomposit biopolimer/montmorillonit: Persiapan, sifat pelepasan yang dikontrol obat dan sitotoksisitas.
Nanoteknologi2008,19, 065707.[Referensi Silang]
61. Kuligowski, J.; KuintAs, G.; Garrigue, S.; De la Guardia, M. Penentuan lesitin dan minyak kedelai dalam suplemen makanan menggunakan kuadrat
terkecil parsial – spektroskopi inframerah transformasi Fourier.Talanta2008,77, 229–234. [Referensi Silang]
62. Liu, Y.; Liu, D.; Zhu, L.; Gan, Q.; Le, X. Stabilitas struktur yang bergantung pada suhu dan pelepasan liposom kurkumin berlapis kitosan secara in vitro.Res
Makanan. Int.2015,74, 97–105. [Referensi Silang]
63. Ahmad, M.; Ashraf, B.; Gani, A.; Gani, A. Mikroenkapsulasi antosianin kunyit menggunakan β glukan dan β siklodekstrin:
Karakterisasi mikrokapsul, perilaku pelepasan & potensi antioksidan selama pencernaan in-vitro.Int. J.Biol. makromol.2018,
109, 435–442. [PubMed]
64. Rafiee, Z.; Barzegar, M.; Sahari, MA; Maherani, B. Pembawa nanoliposom untuk meningkatkan bioavailabilitas senyawa fenolik bernilai tinggi dari
ekstrak lambung hijau pistachio.Kimia Makanan.2017,220, 115–122. [Referensi Silang] [PubMed]
Ilmu farmasi2022,14, 1622 21 dari 21

65. Biruss, B.; Dietl, R.; Valenta, C. Pengaruh hormon steroid terpilih terhadap perilaku fisikokimia liposom DPPC. kimia. Fis. Lemak
2007,148, 84–90. [Referensi Silang] [PubMed]
66. Lu, Q.; Li, D.-C.; Jiang, J.-G. Persiapan sistem nanoliposom polifenol teh dan sifat fisikokimianya.J.Pertanian. Kimia Makanan.2011,
59, 13004–13011. [Referensi Silang]
67. HalAsz, K.; CsHaika, L. Ekstrak pomace Black chokeberry (Aronia melanocarpa) diimobilisasi dalam kitosan untuk aplikasi film indikator pH
kolorimetri.Paket Makanan. Umur Simpan2018,16, 185–193. [Referensi Silang]