Plant Science 135 (1998) 1-9

tanggapan antioksidan bibit padi terhadap cekaman salinitas

Maribel L. Dionisio-Sese *, Satoshi Tobita 1

Stasiun Subtropical Okinawa, Jepang Pusat Penelitian Internasional untuk Ilmu Pertanian (JIRCAS), Ishigaki,
Okinawa 907, Jepang

Menerima Oktober 1997 14; diterima dalam revisi bentuk 31 Januari 1998; diterima Januari 1998 31

Abstrak

The kemungkinan keterlibatan spesies oksigen aktif dalam mekanisme kerusakan oleh stres NaCl dipelajari di daun empat varietas padi ( Oryza sati 6 Sebuah L.)
menunjukkan sensitivitas yang berbeda untuk NaCl. The bibit padi berumur 3 minggu menjadi sasaran 0, 6 dan 12 dS m - 1 tingkat salinitas selama 1 minggu
setelah itu perbedaan dalam kapasitas antioksidan dan korelasi mungkin, tingkat pertumbuhan dan Na + serapan dari daun dianalisis. pengobatan salinitas tinggi
menyebabkan penurunan tingkat pertumbuhan di semua varietas yang diuji kecuali Pokkali. Varietas garam-sensitif, Hitomebore dan IR28, dipamerkan
penurunan aktivitas superoksida dismutase dan peningkatan aktivitas peroksidase bawah salinisasi tinggi. varietas ini juga dipamerkan peningkatan peroksidasi
lipid dan kebocoran elektrolit serta akumulasi Na + lebih tinggi pada daun bawah stres garam. Berbagai garam-toleran Pokkali Namun, hanya menunjukkan
sedikit peningkatan dan penurunan superoksida dismutase dan aktivitas peroksidase, masing-masing, dan hampir tidak berubah peroksidasi lipid, kebocoran
elektrolit dan Na + akumulasi pada salinisasi. Di sisi lain, diduga garam-toleran Bankat berbagai, yang menunjukkan stimulasi sedikit dalam tingkat pertumbuhan
yang sama dengan Pokkali di tingkat salinitas sedang, dipamerkan Na + akumulasi dan gejala kerusakan oksidatif selama garam stres mirip dengan varietas
garam-sensitif daripada satu garam-toleran. Hasil ini menunjukkan bahwa kerusakan radikal-dimediasi bebas dari membran mungkin memainkan peran penting
dalam toksisitas selular dari NaCl dalam bibit padi dan bahwa mekanisme perlindungan varietas pameran garam-toleran terhadap peningkatan produksi radikal
dengan mempertahankan aktivitas yang spesifik enzim antioksidan. © 1998 Elsevier Science Ireland Ltd. Semua hak dilindungi.

Kata kunci: peroksidasi lipid; Oryza sati 6 Sebuah L .; Stres oksidatif; peroksidase; Salt stres; superoksida dismutase

1. Perkenalan

* Penulis yang sesuai. Hadir alamat: Institute of Biological Sciences, Fakultas Seni
dan Ilmu Pengetahuan, Universitas Filipina di Los Ban~os, Laguna 4031, Filipina.
1 Hadir alamat: Sumber Daya Lingkungan Divisi, JIRCAS, Tsukuba, Ibaraki 305,
Jepang.
Salinitas di tanah atau air semakin penting untuk pertanian
karena menyebabkan kondisi stres untuk tanaman tanaman.
Khusus untuk beras ( Oryza sati 6 Sebuah L.), penduduk asli spesies
rawa dan

0168-9452 / 98 / $ 19,00 © 1998 Elsevier Science Ireland Ltd. Semua hak dilindungi.

PII S0168-9452 (98) 00.025-9

2 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9
rawa-rawa air tawar, salinisasi sekunder menjadi kendala produksi
yang semakin serius [1]. Karena sensitivitas yang melekat tanaman
padi terhadap stres garam [2], telah ada minat yang besar dalam
mengembangkan varietas yang tahan terhadap salinitas. De fi
toleransi ning garam, bagaimanapun, adalah cukup sulit karena
sifat kompleks stres garam dan berbagai respon tanaman.
Salah satu perubahan biokimia mungkin terjadi ketika tanaman
mengalami kondisi stres yang berbahaya adalah produksi spesies
oksigen diaktifkan. Kloroplas dan mitokondria dari sel-sel tumbuhan
yang generator intraseluler penting dari spesies oksigen aktif.
Elektron bocor dari rantai transpor elektron dapat bereaksi dengan
O 2 selama metabolisme aerobik normal untuk menghasilkan spesies
oksigen aktif seperti superoksida (O 2
?? -), hidro
gen peroksida (H 2 HAI 2), dan radikal hidroksil ( ?? OH). oksigen singlet ( 1
HAI 2) juga dapat diproduksi melalui aktivasi energik oksigen keadaan
dasar. Spesies ini oksigen sitotoksik yang sangat reaktif dan tidak
adanya mekanisme perlindungan mereka serius dapat
mengganggu metabolisme normal melalui kerusakan oksidatif lipid,
protein dan asam nukleat [3,4]. Untungnya tanaman memiliki
sejumlah enzim antioksidan yang melindungi mereka terhadap efek
merusak dari spesies oksigen aktif. Superoxide dismutase (SOD;
EC1.15.1.1) adalah pemulung utama O 2
?? -,
dan tindakan enzimatik menghasilkan pembentukan H 2 HAI 2 dan O 2. Hidrogen
untuk mendapatkan konduktivitas listrik dari 6 dan 12 dS m - 1, yang
peroksida yang dihasilkan kemudian memulung oleh katalase (EC
1.11.1.6) dan berbagai peroksidase (EC 1.11.1.7). Katalase, yang
tampaknya absen di kloroplas, dismutates H 2 HAI 2 ke dalam air dan
molekul oksigen, sedangkan peroksidase terurai H 2 HAI 2 oleh
oksidasi co-substrat seperti senyawa fenolik dan / atau antioksidan.
Penelitian ini dirancang untuk menentukan, selain dari
pertumbuhan, pengaruh stres garam pada aktivitas enzim
antioksidan, peroksidasi membran lipid, kebocoran elektrolit dan Na
+ Kandungan daun varietas padi menunjukkan perbedaan toleransi
salinitas. Perbandingan tanggapan ini dapat berguna dalam
mengidentifikasi perbedaan terkait dengan kemampuan relatif
masing-masing kultivar untuk mengatasi salinitas. Hasil dari
penelitian ini dapat memberikan informasi tentang kemungkinan
keterlibatan aktif
spesies oksigen dalam mekanisme kerusakan oleh stres NaCl dalam
tanaman padi, dan juga dapat memungkinkan wawasan lebih dalam
mekanisme molekuler toleransi terhadap stres oksidatif
garam-diinduksi.
2. Bahan-bahan dan metode-metode
2.1. bahan tanaman dan perawatan salinitas
Empat varietas padi yang berbeda dalam toleransi garam dan
dikategorikan menjadi dua landraces ecogeographic digunakan.
The landraces japonica yang Hitomebore (garam-sensitif) dan
Bankat (garam-toleran) sedangkan landraces indica terdiri IR28
(garam-sensitif) dan Pokkali (garam-toleran). Biji masing-masing
varietas ditaburkan secara individual dalam lubang dari papan
styrofoam dengan bagian bawah jaring nilon (54 biji dari satu
genotipe ke area 200 × 300 mm merupakan situs). Papan styrofoam
kemudian fl oated pada nampan plastik segi empat setengah fi diisi
dengan 5 l air deionisasi. Mereka kemudian ditempatkan di rumah
kaca di bawah cahaya alami dari suhu hari / malam dipertahankan
pada 28 ° C. Tujuh dan 14 hari setelah tanam, air deionisasi
digantikan, masing-masing, dengan seperempat dan setengah
kekuatan dimodifikasi Yoshida larutan nutrisi [5] disesuaikan
dengan pH 5,8 dengan 1 N KOH. Larutan nutrisi diperbaharui dua
kali seminggu dan air hilang oleh evapotranspirasi adalah
kompensasi untuk oleh penambahan harian air deionisasi. Tiga
minggu setelah tanam, salinisasi diinduksi dengan menambahkan
NaCl dengan satu setengah kekuatan dimodifikasi solusi Yoshida
setara dengan sekitar 60 dan 120 mM NaCl, masing-masing.
larutan nutrisi tanpa penambahan NaCl (0 mM NaCl) sebagai
kontrol, yaitu, konduktivitas listrik adalah sekitar 0 dS m - 1. Pengukuran
dilakukan 7 hari setelah perawatan salinitas. Untuk penentuan
enzim antioksidan dan peroksidasi lipid, sampel daun dipanen,
ditimbang dan disimpan pada
- 80 ° C sebelum analisis. Tes elektrolit kebocoran diukur pada
sampel daun yang baru dipanen sementara Na + Penentuan
dilakukan pada sampel daun dikeringkan dalam oven aerasi pada
80 ° C selama 48 jam. Semua analisis dilakukan pada rancangan
acak lengkap dengan empat ulangan. Dalam semua angka-angka
 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9
penyebaran nilai-nilai ditampilkan sebagai kesalahan bar mewakili
kesalahan standar sarana.
2.2. pengukuran pertumbuhan
Tanaman dipilih secara acak dan dengan lembut tumbang untuk
memperkirakan pertumbuhan dengan menembak pengukuran berat
kering. berat kering ditentukan dengan pengeringan dalam oven
aerasi pada 80 ° C selama 48 jam. laju pertumbuhan relatif (RGR)
dihitung dari kenaikan berat kering tanaman pada awal dan pada
akhir pengobatan garam, menggunakan
persamaan RGR = (ln W f - ln W saya)/( t f - t saya)
dimana W adalah bobot kering, t adalah waktu dan subskrip
menunjukkan awal dan fi nal sampling, yaitu, 0 dan 7 hari setelah
perawatan salinitas.
2.3. Persiapan ekstrak
Untuk tes enzim dan estimasi peroksidasi lipid, sampel daun
beku yang digiling menjadi bubuk mendefinisikan dengan nitrogen
cair dan diekstraksi dengan dapar fosfat dingin 50 mM (pH 7,0).
Ekstrak disentrifugasi pada suhu 4 ° C selama 30 menit pada 20000 ×
g dan supernatan yang dihasilkan digunakan sebagai ekstrak
mentah.
2.4. penentuan enzim
Semua analisis spektrofotometri dilakukan pada 25 ° C pada UV
/ cahaya tampak spektrofotometer (U-2000, Hitachi, Tokyo,
Jepang). Jumlah aktivitas SOD, dasar yang adalah kemampuannya
untuk menghambat pengurangan fotokimia tetrazolium biru nitro [6],
diuji mengikuti prosedur yang diuraikan oleh Stewart dan Bewley
[7]. Sebuah campuran reaksi 3 ml mengandung 50 mM bufer fosfat
(pH 7,8), 13 mM metionin, 75 m M nitro tetrazolium biru, 2 m M Ribo fl
avin, 100 mM EDTA, dan 0-100 m l ekstrak enzim. Ribo fl avin
ditambahkan lalu dan tabung terguncang dan ditempatkan 30 cm di
bawah dua tabung 15-W fl uorescent memberikan foton fluks
kepadatan sekitar 40
m mol m - 2 s - 1. Reaksi dibiarkan berjalan selama 10 menit setelah
lampu dimatikan dan tabung ditutup dengan kain hitam. Absorbansi
dengan campuran reaksi dibacakan di 560 nm. Campuran reaksi
non-iradiasi menjabat sebagai
3
mengontrol dan dipotong dari A 560. Campuran reaksi lacking enzim
dikembangkan paling warna dan ini menurun dengan meningkatnya
volume ekstrak menambahkan. log A 560 diplot sebagai fungsi dari
volume ekstrak enzim dalam campuran reaksi. Volume ekstrak
enzim memproduksi 50% penghambatan reaksi dibaca dari grafik
yang dihasilkan. Unit aktivitas SOD adalah didefinisikan sebagai
yang jumlah enzim yang menyebabkan 50% penghambatan tingkat
awal reaksi tanpa adanya enzim.
aktivitas peroksidase ditentukan dengan menggunakan metode
oksidasi guaiacol [8] dalam campuran reaksi 3 ml mengandung 10
mM bufer fosfat (pH
6,4), 8 mM guaiacol, 100-200 m l ekstrak enzim dan 2,75 mM H 2 HAI 2.
Peningkatan absorbansi tercatat sebesar 470 nm dalam waktu 30 s
(fase linear) setelah H 2 HAI 2 ditambahkan [9]. Sebuah unit aktivitas
peroksidase dinyatakan sebagai perubahan absorbansi per menit
dan spesifik aktivitas c fi sebagai unit enzim per protein terlarut mg.
2.5. peroksidasi lipid
Peroksidasi lipid ditentukan dengan mengukur jumlah
malondialdehid (MDA) formasi dengan menggunakan metode asam
thiobarbituric dijelaskan oleh Stewart dan Bewley [7]. Persiapan
ekstrak kasar dicampur dengan volume yang sama dari 0,5% (w / v)
larutan asam thiobarbituric yang mengandung 20% ​(w / v) asam
trikloroasetat. Campuran dipanaskan pada 95 ° C selama 30 menit
dan reaksi dihentikan oleh cepat menempatkan dalam es-mandi.
Campuran didinginkan disentrifugasi pada 10000 × g selama 10
menit, dan absorbansi supernatan pada 532 dan 600 nm
dibacakan. Setelah dikurangi non-spesifik absorbansi pada 600 nm,
konsentrasi MDA ditentukan dengan kepunahan koefisien dari 155
mM - 1 cm - 1.
2.6. elektrolit kebocoran
Untuk menentukan elektrolit kebocoran, 100 sampel daun mg
segar dipotong menjadi 5 mm panjang dan ditempatkan dalam
tabung reaksi yang berisi 10 ml air suling deionisasi. Tabung
ditutupi dengan topi plastik dan ditempatkan dalam bak air
dipertahankan pada suhu konstan 32 ° C. Setelah 2 jam awal
4 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9

konduktivitas listrik medium (EC 1) diukur menggunakan meter
konduktivitas listrik (CM-115, Kyoto Electronics, Kyoto, Jepang).
Sampel diautoklaf setelah itu di 121 ° C selama 20 menit untuk
benar-benar membunuh jaringan dan melepaskan semua elektrolit.
Sampel kemudian didinginkan sampai 25 ° C dan fi nal
konduktivitas listrik (EC 2) diukur. Elektrolit kebocoran (EL)
diungkapkan mengikuti rumus EL = EC 1 / EC 2 ×
100.
2.7. sodium tekad
Untuk penentuan natrium dalam daun, bahan 10 mg kering
dipotong menjadi 1 cm panjang, ditempatkan dalam tabung reaksi
yang berisi 20 ml air suling deionisasi, dan dipanaskan dalam bak
air mendidih selama 1 jam. Tabung kemudian diautoklaf pada suhu
121 ° C selama 20 menit dan didinginkan. Kandungan natrium
dalam 15 kali diencerkan ekstrak ditentukan dengan
spektrofotometri serapan atom (AA-660, Shimadzu, Jepang).
2.8. protein tekad
3.2. Pengaruh salinitas pada SOD dan peroksidase acti 6 ities
Gambar. 2 menggambarkan efek meningkatkan tingkat NaCl
salinitas pada kegiatan SOD dari empat varietas padi setelah
terpapar 1 minggu untuk salinitas. Daun varietas garam-sensitif,
Hitomebore dan IR28, dipamerkan penurunan aktivitas SOD
dengan meningkatnya besarnya stres salinitas. Berbagai japonica
cukup garam-toleran, Bankat, menunjukkan penurunan aktivitas
SOD pada tingkat salinitas tinggi, sedangkan berbagai indica
garam-toleran, Pokkali, tidak menunjukkan penurunan aktivitas
SOD sekali-bahkan sedikit peningkatan aktivitas SOD dapat diamati
dengan meningkatnya salinisasi.
Aktivitas peroksidase, di sisi lain, menunjukkan tren yang
berlawanan berkaitan dengan penggaraman di semua varietas
yang diuji (Gambar. 3). Tidak seperti SOD, aktivitas peroksidase
meningkat dengan meningkatnya tingkat salinitas di Hitomebore
dan IR28 varietas. The Bankat cukup garam-toleran juga
menunjukkan peningkatan aktivitas peroksidase dengan
meningkatnya salinisasi mirip dengan varietas sensitif. Sebuah
penurunan dalam aktivitas peroksidase, namun, diamati di Pokkali
toleran pada peningkatan paparan stres salinitas.

kandungan protein larut dari ekstrak ditentukan menurut metode

Bradford [10] menggunakan assay kit Bio-Rad dengan albumin
serum sapi sebagai standar kalibrasi.

3. Hasil

3.1. Pengaruh salinitas terhadap pertumbuhan

Berdasarkan bobot kering, tingkat pertumbuhan relatif dari

empat O. sati 6 Sebuah varietas mengalami perawatan salinitas 1
minggu ditunjukkan pada Gambar. 1. Varietas yang dianggap
sebagai garam-toleran, yaitu, Bankat dan Pokkali, menunjukkan
pertumbuhan nilai lebih tinggi pada 6 dS m - 1 tingkat salinitas
dibandingkan dengan tanaman non-garam-diperlakukan. Varietas
saltsensitive, Hitomebore dan IR28, di sisi lain, tidak menunjukkan
stimulasi pertumbuhan ini pada tingkat salinitas sedang. Pada 12
dS m - 1 tingkat salinitas, semua varietas yang diuji termasuk Bankat,
kecuali Pokkali,

Gambar. 1. Pengaruh peningkatan salinitas pada tingkat pertumbuhan relatif dalam hal
menunjukkan retardasi pertumbuhan,
bobot kering dari empat varietas padi. Nilai adalah sarana dari empat ulangan dan bar
re fl ecting toleransi garam lebih besar dari Pokkali dibandingkan menunjukkan kesalahan standar.
dengan Bankat.
 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9
Gambar. 2. Pengaruh peningkatan salinitas pada aktivitas SOD dalam daun empat
varietas padi.
3.3. Pengaruh salinitas pada peroksidasi lipid
Efek meningkatkan besarnya stres salinitas terhadap
pembentukan MDA di daun dari empat varietas padi setelah
pengobatan salinitas 1 minggu adalah
Gambar. 3. Pengaruh peningkatan salinitas aktivitas peroksidase pada daun empat
varietas padi.
5
Gambar. 4. Pengaruh peningkatan salinitas pada konten MDA di daun empat varietas
padi.
ditunjukkan pada Gambar. 4. Dengan meningkatnya tingkat stres
salinitas, kandungan MDA meningkat pada varietas sensitif
termasuk Bankat, sehingga menunjukkan peningkatan peroksidasi
lipid. Pokkali, di sisi lain, tidak menunjukkan peningkatan dalam
peroksidasi lipid dengan paparan 1 minggu untuk stres salinitas.
3.4. Pengaruh salinitas pada kebocoran elektrolit
Tingkat kerusakan membran dinilai secara tidak langsung
dengan pengukuran conductometric kebocoran zat terlarut dari sel.
Jumlah kebocoran elektrolit dari daun empat varietas padi
mengalami peningkatan tingkat stres salinitas ditunjukkan pada
Gambar. 5. Hasil dari kedua varietas saltsensitive yang sangat
mirip. Peningkatan besarnya stres salinitas meningkatkan jumlah
kebocoran elektrolit dari daun Hitomebore dan IR28. The Bankat
berbagai menunjukkan kecenderungan yang sama dengan varietas
sensitif sementara tingkat kebocoran elektrolit hampir tidak berubah
di Pokkali.
3.5. Pengaruh salinitas pada Na + serapan
Ada perbedaan varietas ditandai dalam
6 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9

akumulasi Na + beras daun sebagai respon terhadap salinitas.

Varietas garam-sensitif, Hitomebore dan IR28, serta Bankat
menunjukkan peningkatan Na + konten dengan meningkatnya
salinisasi sementara Pokkali tidak menunjukkan ini akumulasi
diucapkan dari Na + saat terpapar 1 minggu salinitas stres (Gambar.
6).

4. Diskusi

upaya telah diberikan dalam pemilihan dan pengembangan

varietas padi tahan terhadap stres salinitas. Kemajuan,
bagaimanapun, tampaknya lambat terutama karena kurangnya
pemahaman mekanisme toleransi garam.

Dalam beras, serta tanaman lainnya, karakteristik agronomi,

seperti kelangsungan hidup, hasil, kerusakan daun dan tinggi
tanaman kriteria yang paling umum digunakan untuk mengukur
Gambar. 6. Pengaruh peningkatan salinitas pada akumulasi Na + dalam daun dari
toleransi garam [11,12]. Hal ini mungkin karena kemudahan
empat varietas padi.
pengukuran dan fakta yang menghasilkan di bawah kondisi garam,
inilah yang akhirnya penting. Telah diusulkan, bagaimanapun,
bahwa mekanisme fisiologis yang mendasari toleransi garam, clusion, adalah kriteria yang lebih relevan untuk meningkatkan toleransi garam
seperti mantan ion dalam tanaman [13].

Hasil analisis Na + isi daun varietas padi yang berbeda dalam

toleransi garam setuju dengan pandangan bahwa ada hubungan
terbalik antara menembak konsentrasi Na + dan toleransi garam
[14]. Berbagai garam-toleran Pokkali tidak menunjukkan
peningkatan yang signifikan dalam akumulasi Na + di daun bahkan
pada tingkat salinitas tinggi sedangkan varietas garam-sensitif
Hitomebore dan IR28 menunjukkan diucapkan akumulasi (Gambar.

6). Menariknya, putatif yang

berbagai garam-toleran Bankat dipamerkan Na + akumulasi di
bawah salinitas mirip dengan varietas saltsensitive. Ini kerentanan
yang berbeda dari varietas padi untuk menembak Na + akumulasi
mungkin telah membawa respon diferensial dalam kegiatan enzim
antioksidan yang terlibat dalam metabolisme oksigen selama stres
garam.

Salinitas menyebabkan fi kan penurunan signifikan dari aktivitas

SOD dalam varietas garam-sensitif serta dalam Bankat sementara di
berbagai garam-toleran Pokkali, aktivitas SOD sedikit meningkat
sebagai respon terhadap pengobatan garam (Gbr. 2). Singha dan

Gambar. 5. Pengaruh peningkatan salinitas pada tingkat kebocoran elektrolit daun dari Choudhuri [15] juga mengamati bahwa NaCl menurun SOD aksi
empat varietas padi. partisipatif
 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9
ivity di bibit padi. Karena mereka tidak melaporkan sensitivitas varietas
garam diferensial, itu mungkin bahwa mereka menggunakan varietas
garam-sensitif.
Salinitas juga penurunan aktivitas SOD dalam daun, kloroplas
dan mitokondria dari tanaman kacang polong [16,17]. Hernandez et
al. [18] melaporkan bahwa aktivitas katalitik dari isozim SOD dari
tanaman kacang tunggak menurun sebagai fungsi dari konsentrasi
garam in vitro. Meskipun kompartemensi Na + dalam daun dan di
dalam sel tidak ditentukan dalam penelitian ini, kandungan ion
tinggi dan penurunan paralel dalam kegiatan SOD ditemukan dalam
daun tanaman padi salinized konsisten dengan kemungkinan
bahwa garam secara langsung menghambat katalisis in vivo.
Namun, kemungkinan lain bahwa penghambatan aktivitas SOD
bawah stres garam merupakan konsekuensi dari sebuah sintesis
berubah dan akumulasi enzim kurang aktif pada tanaman
garam-diperlakukan tidak dapat sepenuhnya dikesampingkan.
Penurunan yang diamati dalam aktivitas SOD dalam varietas padi
garam-sensitif salinized, termasuk Bankat, pada gilirannya, bisa
mengurangi kemampuan bibit untuk mengais-ngais O 2
?? - radikal mendukung sebuah accumula-
tion spesies radikal oksigen, yang dapat menyebabkan kerusakan
membran. Luasnya kerusakan membran dipantau dengan
mengukur jumlah thiobarbituric-asam-reaktif materi (MDA)
dihasilkan ketika asam lemak tak jenuh ganda pada membran
menjalani peroksidasi. Berbeda dengan Pokkali garam-toleran, ada
peningkatan yang diamati dari MDA di semua varietas yang diuji
bila terkena NaCl stres (Gambar. 4). Dengan menghasilkan
perubahan dalam asam lemak tak jenuh yang mempengaruhi
struktur membran dan sifat, ini ditingkatkan pembentukan radikal
bebas dan peroksidasi lipid di bawah stres garam dalam varietas
garam-sensitif mungkin juga telah membawa peningkatan
permeabilitas membran atau hilangnya integritas membran, yang
dibuktikan dengan peningkatan zat terlarut kebocoran (Gbr. 5).
Berbagai peneliti berurusan dengan nasi [21] dan tanaman lainnya
[22,23] juga melaporkan peningkatan aktivitas peroksidase dalam
kultivar garam-sensitif di bawah tekanan garam. Hal ini tidak jelas
apakah peningkatan yang diamati dalam aktivitas peroksidase bawah
stres garam
7
adalah karena peningkatan aktivitas gen encoding peroksidase atau
peningkatan aktivasi enzim yang sudah ada. Mittal dan Dubey [21]
menyarankan bahwa salinitas mempengaruhi terutama sintesis de
novo dari enzim sejak penghambatan dalam kondisi vitro dan
aktivasi dalam kondisi vivo diamati pada kultivar garam-sensitif.
Lopez et al. [24], bagaimanapun, telah menunjukkan bahwa
peningkatan garam-diinduksi dalam kegiatan askorbat peroksidase
pada tanaman lobak tidak disertai dengan peningkatan yang sesuai
pada tingkat mRNA, menunjukkan bahwa ekspresi askorbat
peroksidase garam-diinduksi mungkin adalah konsekuensi dari
peristiwa pasca-transkripsi .
Selain dari fungsi mereka dalam metabolisme oksigen aktif,
peroksidase pada tanaman juga terlibat dalam biosintesis dinding
sel [25] termasuk
ligni fi kasi dan suberization [26,27].
bukti yang menunjukkan bahwa aktivitas peroksidase yang tinggi
berkorelasi dengan penurunan pertumbuhan tanaman [9,28,29]. Ini
mungkin dikaitkan dengan peroksidase katalisis konversi ferulic
acid untuk diferulic asam pada polisakarida, yang feruloylation dari
hemiselulosa, atau insolubilization glikoprotein menyebabkan
dinding sel-kaya hidroksiprolin kaku [30-32]. Secara morfologi,
gejala yang paling khas cedera garam untuk tanaman adalah
pertumbuhan terbelakang karena penghambatan pemanjangan sel
[33], sehingga tanaman kerdil. Meskipun mekanisme fisiologis dan
biokimia lain yang terlibat, penurunan diamati pertumbuhan padi
varietas garam-sensitif termasuk Bankat di bawah tingkat salinitas
tinggi mungkin kemudian sebagian karena kenaikan
garam-diinduksi aktivitas peroksidase.
Hasil penelitian ini menunjukkan bahwa ada perbedaan besar
antara pertumbuhan dan tanggapan antioksidan dari empat varietas
padi untuk pengobatan salinitas. Selama stres garam varietas
garam-sensitif dikenal, Hitomebore dan IR28, dipamerkan daun
tinggi Na + akumulasi mengakibatkan gejala kerusakan oksidatif
seperti penurunan aktivitas SOD, peningkatan peroksidasi lipid dan
kebocoran elektrolit, peningkatan aktivitas peroksidase dan
penurunan laju pertumbuhan. Salinitas Namun, hanya memiliki efek
minimal terhadap daun Na + akumulasi dan metabolisme
antioksidan dalam berbagai garam-toleran dikenal, Pokkali, dan
tingkat pertumbuhan yang sedikit ditingkatkan pada tingkat salinitas
sedang. Itu
8 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9
toleran diduga garam berbagai Bankat bagaimanapun,
menunjukkan stimulasi sedikit dalam tingkat pertumbuhan yang
sama dengan Pokkali tetapi menunjukkan respon fisiologis
terhadap garam stres mirip dengan varietas garam-sensitif. Jadi di
bawah stres garam, rendah Na + akumulasi dan SOD dan
peroksidase kegiatan relatif tidak berubah, dengan membawa
sekitar kapasitas tidak berubah untuk oksigen radikal dan
pemeliharaan membran sel serta fungsi dinding sel, bisa
menjelaskan toleransi NaCl varietas padi toleran atas yang sensitif.
Ucapan Terima Kasih
Penulis ingin mengucapkan terima kasih kepada Drs Takaharu
Hayashi dan Shigeo Yashima, kepala sekarang dan mantan
Internasional Bagian Kerjasama Penelitian, masing-masing, untuk
dukungan manajerial mereka. Karya ini dilakukan ketika penulis
pertama diberikan sebuah Visiting Research Fellowship di
Subtropical Station Okinawa, Jepang Internasional Pusat Penelitian
Ilmu Pertanian, Departemen Pertanian, Kehutanan dan Perikanan,
Jepang.
Referensi
[1] M. Akbar, FN Ponnamperuma, tanah Saline Selatan dan
Asia Tenggara sebagai tanah sawah potensial, Strategi Penelitian Beras untuk
Masa Depan, IRRI, Manila, Filipina,
1980, hlm. 265-281.
[2] LE Francois, EV Maas, respon Tanaman dan mengelola-
ment pada tanah garam yang terkena dampak, di: M. Pessarakli (Ed.),
Handbook of Plant dan Tanaman Stres, Marcel Dekker, New York, 1994, hlm
149-181..
[3] KJA Davies, kerusakan Protein dan degradasi oleh oxy-
gen radikal aspek I. Umum, J. Biol. Chem. 262 (1987) 9895-9901.
[4] I. Fridovich, Efek biologik dari radikal superoksida,
Lengkungan. Biochem. Biophys. 247 (1986) 1-11. [5] T. Mae, metode kultur Beras
untuk percobaan III. laboratorium yang
budaya skala tory beras, Plant Cell Tek. 3 (1993) 211-215.
[6] C. Beauchamp, I. Fridovich, superoksida dismutase: im-
tes terbukti dan assay berlaku untuk akrilamida gel, Anal. Biochem. 44 (1971)
276-287.
[7] RC Stewart, JD Bewley, lipid peroksidasi terkait
dengan penuaan dipercepat dari sumbu kedelai, Tanaman Physiol. 65 (1980)
245-248.
[8] B. Chance, C. Maehly, Assay katalase dan peroksidase,
Metode Enzymol. 11 (1955) 764-775. [9] TM Lee, YH Lin, Perubahan larut dan
sel dinding-
kegiatan peroksidase terikat dengan pertumbuhan padi anoksia-diperlakukan ( Oryza
sati 6 Sebuah L.) koleoptil dan akar, Tanaman Sci. 106 (1995) 1-7.
[10] MM Bradford, Sebuah metode yang cepat dan sensitif untuk
kuantisasi jumlah mikrogram protein memanfaatkan prinsip protein-pewarna
mengikat, Anal. Biochem. 72 (1976) 248-254.
[11] S. Lutts, JM Kinet, J. Bouharmont, Perubahan di pabrik
Menanggapi NaCl selama pengembangan padi ( Oryza sati 6 Sebuah L.) varietas
yang berbeda dalam perlawanan salinitas, J. Exp. Bot. 46 (1995) 1843-1852.
[12] AR Yeo, ME Yeo, SA Bunga, TJ Bunga, Screen-
ing beras ( Oryza sati 6 Sebuah L.) genotipe untuk karakter fisiologis berkontribusi
terhadap ketahanan salinitas, dan hubungan mereka dengan kinerja secara
keseluruhan, theor. Appl. Genet. 79 (1990) 377-384.
[13] CL Noble, ME Rogers, Argumen untuk penggunaan
kriteria fisiologis untuk meningkatkan toleransi garam pada tanaman, Tanaman
Tanah 146 (1992) 99-107. [14] AR Yeo, TJ Bunga, perbedaan varietas di beracun
yang
ity ion natrium dalam beras daun, Physiol. Menanam. 59 (1983) 189-195.
[15] S. Singha, MA Choudhuri, Pengaruh salinitas (NaCl)
stres pada H 2 HAI 2 metabolisme dalam Vigna dan Oryza bibit, Biochem. Physiol.
P fl Anzen. 186 (1990) 69-74. [16] JA Hernandez, E. Olmos, FJ Corpas, F. Sevilla,
LA
Del Rio, Salt-diinduksi stres oksidatif dalam kloroplas tanaman kacang,
Tanaman Sci. 105 (1995) 151-167. [17] JA Hernandez, FJ Corpas, M. Gomez, LA
Del Rio,
F. Sevilla, Salt-diinduksi stres oksidatif dimediasi oleh spesies oksigen aktif
dalam mitokondria daun kacang, Physiol. Menanam. 89 (1993) 103-110.
[18] JA Hernandez, LA Del Rio, F. Sevilla, Salt stres-in
teknya perubahan dalam isozim superoksida dismutase di daun dan mesofil
protoplas dari Vigna unguiculata ( L.) Walp, New fitol. 126 (1994) 37-44. [19] M.
Tal, MC Shannon, Efek dehidrasi dan tinggi
Suhu pada stabilitas membran daun Lycopersicon esculentum, L. cheesmanii, L.
peru 6 ianum dan
Solanum PENNELLI, Z. P fl anzenphysiol. 112 (1983) 411-415.
[20] H. Borochov-Neori, A. Borochov, Respon melon
tanaman untuk garam. I. Pertumbuhan, morfologi dan membran akar properti, J.
Tanaman Physiol. 139 (1991) 100-105. [21] R. Mittal, RS Dubey, Perilaku
peroksidase beras:
perubahan aktivitas enzim dan isoform dalam kaitannya dengan toleransi garam,
Tanaman Physiol. Biochem. 29 (1991) 31-40. [22] A. Kalir, G. Omri, A.
Poljakoff-mayber, Peroksidase dan
aktivitas katalase dalam daun portulacoides Halimione terkena salinitas, Physiol.
Menanam. 62 (1984) 238-244. [23] IS Sheoran, OP Garg, kuantitatif dan kualitatif
perubahan peroksidase selama perkecambahan kacang hijau di bawah stres
garam, Physiol. Menanam. 46 (1979) 147-150. [24] F. Lopez, G. Vansuyt, F.
Casse-Delbart, P. Fourcroy,
aktivitas peroksidase askorbat, bukan tingkat mRNA, adalah
 ML Dionisio-Sese, S. Tobita / Ilmu Tanaman 135 (1998) 1-9 9

ditingkatkan dalam garam-menekankan Raphanus sati 6 kami tanaman, Physiol. Menanam. 97 Physiol. 99 (1992) 872-878.
(1996) 13-20. [29] X. Zheng, RB Van Huystee, Peroxidase-diatur elon-
integrasi [25] J. Negrel, J. Lherminier, Peroxidase-dimediasi gation segmen dari hipokotil kacang tanah, tanaman Sci. 81 (1992) 47-56.
tyramine ke dinding sel xilem daun tembakau, Planta 172 (1987) 494-501.

[30] SC Fry, Cross-linkage polimer matriks dalam tumbuh yang

[26] A. Polle, T. Otter, F. Seifert, apoplastic peroksidase dan dinding sel angiospermae, Annu. Rev. Tanaman Physiol. 38 (1986) 205-219.
ligni fi kasi di jarum Norwegia cemara ( abies Picea L.), Tanaman Physiol. 106
(1994) 53-60.
[31] U. Kutschera, R. Hoss, M. Frohlich, T. Hoson, Analisis
[27] KE Espelie, VR Franceschi, PE Kolattukudy, Im
respon pertumbuhan koleoptil padi udara tumbuh perendaman, Bot. Acta 106
lokalisasi munocytochemical dan tentu saja saat penampilan dari peroksidase
(1993) 164-169. [32] S. Waffenschmidt, JP Woessner, K. Beer, UW Goode-
anion terkait dengan suberization pada luka-penyembuhan jaringan umbi
kentang, tanaman Physiol. 81 (1986) 487-492.
nough, Isodityrosine silang menengahi insolubilization dari dinding sel di Chlamydomonas,
Plant Cell 5 (1993) 809-820.
[28] JW MacAdam, CI Nelson, RE Sharp, Peroxidase
aktivitas di zona daun pemanjangan fescue tinggi. distribusi I. Tata Ruang
[33] RH Nieman, Perluasan kacang daun dan suppres- nya
aktivitas peroksidase ionik terikat di genotipe berbeda dalam panjang zona
pemanjangan, Tanaman sion oleh salinitas, Tanaman Physiol. 40 (1965) 156-161.