Skin smear merupakan suatu test dimana sampel diambil dari potongan halus pada kulit kemudian diberikan pewarnaan terhadap M. Leprae suatu acid-fast bacillus Tujuan Skin Smear Untuk mengonfirmasi diagnosis tersangka kasus lepra Membantu penegakan diagnosa relaps multibakterial pada pasien yang telah ditatalaksana sebelumnya Membantu klasifikasi pasien baru
Note: skin smear adalah tindakan invasif, cuci tangan, gunakan
handscoon, gunakan perlengkapan steril dan blade baru pada tiap pasien Minta pasien untuk duduk dan relax, jelaskan apa yag akan dilakukan dan apa kegunaannya. Pilih sisi yag akan dilakukan tindakan Smear diambil dari dua site saja: 1. Satu lobus telinga. 2. Satu lesi. Pilih lesi yang paling aktif, tetapi tidak di wajah. Ambil apusan di area lesi yang paling aktif(biasanya tepi). Jika tidak ada lesi kulit yang cocok, ambil apusan kedua dari lobus telinga lainnya, atau dari tempat di mana lesi aktif pada awalnya dicatat atau di mana apusan sebelumnya positif. Banyak program secara tradisional mengambil smear dari empat atau bahkan enam site, tetapi dua site sekarang dianggap adekuat dalam banyak kasus. Cara pengambilan sediaan skin smear Cuci tangan dan gunakan handscoon Ambil slide mikroskop baru yang bersih, catat ID pasien pada slide Bersihkan bagian yang akan di smear menggunakan kapas bulat alkohol, biarka mengering Hidupkan lampu spiritus Masukkan blade baru pada scalpel, pastikan blade tidak menyentuh apapun Tekan kulit dengan keras menggunakan ibu jari dan telunjuk untuk menekan perdarahan Buatlah inisisi pada kulit dengan panjang sekitar 5 mm dan kedalaman 2 mm. tetap menekan untuk memastikan potongan tetap tanpa darah Arahkan scalpel 900 terhadap kulit dan tahan pada sudut yang tepat untuk pemotongan. Kikis di bagian dalam sekali atau dua kali dengan sisi pisau bedah, untuk mengumpulkan cairan dan pulp jaringan. Seharusnya tidak ada darah dalam spesimen, karena ini dapat mengganggu pewarnaan dan membaca. Berhenti menekan kulit dan bersihkan perdarahan dengan kapas bulat Sebarkan bahan yang dikerok dari insisi ke slide, di sisi yang sama dengan nomor ID. Sebarkan dengan bagian datar pada pisau bedah, buat lingkaran dengan diameter 8 mm Bersihkan scalpel dengan kapas bulat yang sudah diberi alkohol. Lewatkan blade melewati lampu spiritus selama 3 sampai 4 detik. Biarkan mengering tanpa menyentuh apapun Ulangi tahap diatas untuk site kedua. Usapkan smear dekat dengan smear pertama tanpa menyentuh smear pertama Lepaskan blade dari scalpel dengan aman Tutup luka Biarkan slide mengering selama 15 menit dalam suhu ruangan, jangan terkena cahaya matahari langsung Fiksasi smear dengan melewatkan slide secara perlahan dari lampu spiritus dengan smear menghadap ke atas sebanyak 3 kali. Jangan terlalu panas Letakkan slide pada box slide dan kirimkan ke laboratorium dengan form permintaan smear Cara pewarnaan skin smear Pewarnaan menggunakan metode Ziehl-Neelsen. Carbol Fuchsin 1% akan mewarnai seluruhnya menjadi merah. Mencuci dengan asam alkohol 1 % akan menghapus seluruh warna merah kecuali M.Leprae.m. pewarnaan slide dengan methylene Blue 2% akan membuat leprosy terlihat sebagai batang merah dengan latar biru Peralatan Carbol Fuchsin 1% Penahan Asam Alkohol 1% Rak slide Methylene blue Tissue 0,2% Handscoon Lampu spiritus Jam tangan Air mengalir Sedotan Pewarnaan Sesaat sebelum digunakan, filter 1% larutan carbol fuchsin melalui kertas saring biasa. Cover seluruh slide menggunakan carbol fuchsin 1% Panaskan slide dengan lembut dengan menahan lampu spiritus di bawahnya sampai uap dari carbol fuchsin mulai menguap. Ulangi ini 3 kali selama periode 5 menit. Pastikan pewarna tidak mendidih. Jika pewarna mengering, tambahkan lagi pereaksi dan panaskan lagi. Cuci dengan lembut di bawah air yang mengalir (3). Bilas sampai air pencucian tidak berwarna, meskipun noda akan tetap merah gelap. Decolourising Cover dengan menggunakan asam alkohol 1 % selama 1 menit. Metode alternatif dapat menggunakan asam sulfur 5% selama 10 menit Bilas dengan lembut menggunakan air Counter-staining Cover menggunakan methylene blue 0,2% selama 1 menit Bilas dengan air dan biarkan sile mengering pada rak pengering dengan sisi smear di bawah Slide siap untuk dibaca Cara membaca skin smear Menggunakan mikroskop Letakkan smear pada mikroskop Fokuskan da ngunakan pembesaran objektif 10x Berikan minyak imersi pada smear Tukar ke pembesaran objektif 100x