Pewarnaan bakteri

Sri utami lakoro

432417044
 Pewarnaan gram
Pewarnaan Gram merupakan
suatu teknik pewarnaan untuk
membedakan jenis bakteri
berdasarkan sifat kimiawi dan
fisik dinding sel yang berupa
peptidoglikan. Perbedaan struktur
peptidoglikan pada dinding sel
bakteri akan memberikan
perbedaan warna. Perbedaan ini
akan mengklasifikasikan bakteri
menjadi 2 kelompok utama, yaitu
kelompok bakteri Gram positif
(+) dan Gram negatif (-). 
 Bakteri Gram
Positif

Bakteri Gram Positif adalah

bakteri yang dinding selnya
menyerap warna violet dan
memiliki lapisan peptidoglikan
yang tebal.dan hanya memiliki
satu membran
Ciri –ciri Bakteri
Gram positif

1. Dinding nya tersusun atas

peptidoglikan dan asam teikoat
2. Bentuk sel bulat, batang atau filamen
3. Cara bereproduksi dengan
pembelahan biner
4. Kebanyakan alat geraknya
Contoh Bakteri Gram Positif
1. Costridium Tetani, penyebab penyakit
tetanus
2. Bacillus Cereus, penyebab kerecunan
3. Staphylococcus Aureus, penghasil
pigmen kuning
4. Clostridium Perfringens,
Bakteri Gram
negative

adalah bakteri yang dinding selnya

menyerap warna merah, dan memiliki
lapisan peptidoglikan yang tipis. Lapisan
peptidoglikan pada bakteri Gram negatif
terletak diruang periplasmik dan
memiliki dua membran yaitu membran
luar dan dalam
Ciri –ciri Bakteri
Gram negative

1. Memiliki sistem mebran ganda

2. Kandungan lipid rendah
3. Lebih tahan terhadap penisilin
4. Kebutuhan nutrien relatif
sederhana
Contoh bakterigram negatif
1. Azotobacter
2. Rizhobium leguminosarum
3. Neisseria gonorrhoeae
4. Haemopilus influenzae
5. Pseudomonas aeruginosa
6. Salmonella typhi
7. Helicobacter pylori
Perbedaan bakterigram positif dan
negatif

Bakteri gram positif

1.hanya mempunyai membran plasma tunggal yang
dikelilingi dinding sel tebal berupa peptidoglikan.
2.Sekitar 90 persen dari dinding sel tersebut tersusun atas
peptidoglikan sedangkan sisanya berupa molekul lain
bernama asam teikhoat.
3.Kandungan lipid rendah
4.Lebih menghambat warna basa
5.Kebutuhan nutrien lebih kompleks
6.Lebih sensitif terhadap penisilin
Bakteri gram negatisve
1. Memiliki sistem membran ganda di mana
membran pasmanya diselimuti oleh membran luar
permeabel
2. Bakteri ini mempunyai dinding sel tebal berupa
peptidoglikan, yang terletak di antara membran
dalam dan membran luarnya
3. Kandungan lipid tinggi
4. Kurang menghambat warna basa
5. Kebutuhan nutrien lebih sederhana
6. Lebih tahan terhadap penisilin
 Tahapan/langkah – langkah pewarnaan bakteri

Tahapan pewarnaan positif

•Siapkan kultur murni bakteri yang akan diwarnai.

•Secara aseptis ambil 1 ulasan jarum ose kultur
bakteri pada permukaan kaca preparat.
•Ratakan degan menggunakan akuades steril
menggunakan jarum ose.
•Fiksasi panas dengan cara melewatkan kaca
preparat diatas api bunsen sebanyak 3 kali. Fiksasi
digunakan untuk mematikan bakteri namun tetap
mempertahankan bentuk dan komponen sel.
•Teteskan peawarna primer (Kristal Violet) secara
merata pada ulasan bakteri, dan tunggu selama 20
detik.
•Bilas pewarna primer menggunakan akuades steril
dan tunggu hingga cukup kering.
•Setelah kering, tutup permukaan ulasan dengan
penutup kaca dan sampel siap diamati dibawah
mikroskop.
 
Tahapan pewarnaan negative

•Siapkan kultur murni bakteri yang akan diwarnai.

•Secara aseptis ambil 1 ulasan jarum ose kultur
bakteri pada permukaan kaca preparat.
•Ratakan degan menggunakan akuades steril
menggunakan jarum ose.
•Fiksasi panas dengan cara melewatkan kaca
preparat diatas api bunsen sebanyak 3 kali. Fiksasi
digunakan untuk mematikan bakteri namun tetap
mempertahankan bentuk dan komponen sel.
•Teteskan peawarna primer (safranin) secara merata
pada ulasan bakteri, dan tunggu selama 20 detik.
•Bilas pewarna primer menggunakan akuades steril
dan tunggu hingga cukup kering.
•Setelah kering, tutup permukaan ulasan dengan
penutup kaca dan sampel siap diamati dibawah
mikroskop.
 
Terimakasih