SARMILA
70100116101
PENGERTIAN
2
“ Yang dimana saat sekarang ini pcr juga digunakan untuk mendiagnosis
penyakit COVID-19.
. PCR digunakan untuk identifikasi penyakit genetik, infeksi oleh virus,
diagnosis dini penyakit seperti AIDS, Genetic profiling in forensic, legal
and bio-diversity applications, biologi evolusi, Site-directed mutagenesis of
genes dan mRNA Quantitation di sel ataupun jaringan.
3
KOMPONEN UTAMA PCR
4
LANJUTAN
DNA template: Ukuran target amplifikasi biasanya kurang dari 1000 pasangan basa (bp) atau 1KB, Hasil
amplifikasi yang efisien antara 100-400bp.
Primer spesifik: rimer disusun dari sintesis oligonukleotida sepanjang 15-32bp dan primer ini harus mampu
mengenali urutan yang akan diamplifikasi.
Enzim DNA yang termostabil: Enzim ini bersifat thermostabil dan diisolasi dari Thermus aquaticus. Aktivitas
polimerisasi DNAnya dari ujung-5’ ke ujung-3’ dan aktivitas enzimatik ini mempunyai waktu paruh sekitar 40
menit pada 95ºC.
Buffer PCR: Buffer standar untuk PCR tersusun atas 50mM KCl, 10mM Tris-Cl (pH8.3) dan 1.5mM MgCl2
Ion mg2+:Konsentrasi ion magnesium dalam PCR buffer merupakan faktor yang sangat kritikal, karena
kemungkinan dapat mempengaruhi proses annealing primer, temperatur dissosiasi untai DNA template, dan
produk PCR.
Therma cycler: PCR thermal cycler pertama kali dikembangkan oleh perusahaan PerkinElmer sebagai
pemegang paten asli.
5
JENIS JENIS PCR
Restriction fragment lengh
Inverse-PCR Nes
polymorphim
Random amplified
Quantitative –PCR Reverse transcriptase
polymorphie DNA
6
7
Thanks!
8