ANALISIS HALAL

KOSMETIKA YANG
MENGANDUNG
PORCINE
Nella Novita

METODE ANALISIS PRODUK HALAL

Dr. apt. Rustini, M.Si
Section Break
Insert the Subtitle of Your Presentation
PENDAHULUAN
Secara umum, deteksi komponen
tertentu dalam produk akhir mungkin
terbatas tergantung pada metode
analisis yang digunakan, karena
berbagai komponen dapat dimodifikasi
atau didegradasi oleh perlakuan
termal, fisik, atau kimia selama
pembuatan. DNA adalah bahan yang
relatif stabil untuk berbagai perlakuan
fisik dan kimia.
PCR adalah metode yang cepat, akurat, dan
sangat sensitive yang dapat secara selektif
mengamplifikasi sejumlah kecil DNA target yang
ada dalam suatu produk menggunakan primer
spesifik dari spesies.
real-time PCR (rt-PCR) lebihPlace
cepat, lebih
Your Picture Here
sensitif,
lebih akurat, dan kuantitatif jika dibandingkan
dengan PCR karena tambahan pewarna
fluoresen
Metode rt-PCR tampaknya efektif untuk
mendeteksi komponen porcine (babi)AWESOME dalam
kosmetik.
SLIDE
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Sampel yang diuji: Contents Here

lima paket masker tipe cair, LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.
lima paket masker tipe bubuk, dan
lima krim
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here
Template DNA porcine di ekstrak dengan 6 metode
berbeda. rt-PCR digunakan untuk menentukan batas
Contents Here
Easy to change colors,

deteksi yang sesuai untuk setiap ekstraksi.

photos and Text.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
6 Metode yang digunakan:Contents Here

1. Metode CTAB (CETYL TRIMETHYL AMMONIUM LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.
BROMIDE).
2. Power PrepTM DNA extraction kit
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here
3. QIAamp DNA stool mini kit
4. Wizard genomic DNA purification kit
Contents Here
Easy to change colors,

5. TIANamp genomic DNA Kit

photos and Text.

6. Nucleo spin food kit

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Tabel hasil uji dengan real time PCR

Cosmetics
Contents Here

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Contents Here

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.
Dari hasil uji real time PCR terhadapt 15 produk
didapatkan hasil negatif yang menunjukkan tidak adanya
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here
kandungan porcine dalam kosmetik tersebut
Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Contents Here
Sampel LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

Kontrol: Daging babi mentah dan sosis babi digunakan

CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

Sampel: Lima kosmetik krim mengandung kolagen dibeli

melalui toko online. Satu produk dinyatakan
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

mengandung kolagen babi, satu halal dan tiga lainnya

Contents Here
Easy to change colors,
tidak diketahui sumbernya.
photos and Text.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
1) ekstraksi DNA Cosmetics
Contents Here
DNA diekstraksi dari lima krim kosmetik menggunakan kit
LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

pemurnian DNA Wizard Genomic. Ekstraksi DNA CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

dilakukan sesuai dengan instruksi pabrik dengan sedikit

modifikasi. Sebanyak 600 L larutan Nuclei Lysis
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

ditambahkan ke dalam tabung sentrifus. Selanjutnya, 20

Contents Here
Easy to change colors,
mg babi mentah dan krim ditambahkan ke inti dingin Lisis
photos and Text.

dan diinkubasi pada 65ºC selama 15 menit. Pada suhu

Contents Here

kamar, 200 L larutan pengendapan protein ditambahkan

Easy to change colors,

BRAND
photos and Text.

dan divorteks dengan kecepatan tinggi selama 20 detik.

Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Sampel didinginkan di atas es kering selama 5 menit,
dilanjutkan dengan sentrifugasi selama 4 menit pada
Contents Here

13400 rpm. Supernatan yang mengandung DNA LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

dipindahkan ke tabung mikrosentrifugasi yang berisi 600 L

isopropanol dan dicampur perlahan dengan cara inversi
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

sampai supernatan dihilangkan. Kemudian, pada suhu

Contents Here

kamar, 600L etanol 70% ditambahkan dan dibalik

Easy to change colors,
photos and Text.

perlahan untuk mencuci DNA diikuti dengan sentrifugasi

Contents Here
selama 1 menit. Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Etanol dihilangkan dengan hati-hati. Tabung dikeringkan di
atas kertas penyerap bersih dan diinkubasi pada suhu
Contents Here

65ºC dengan tutup terbuka untuk menguapkan etanol.

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

Setelah selesai, 25L larutan rehidrasi DNA ditambahkan

dan DNA direhidrasi dengan menginkubasi semalaman
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

pada suhu 40C. DNA yang diekstraksi disimpan pada suhu

Contents Here

2-8 0C untuk analisis lebih lanjut

Easy to change colors,
photos and Text.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
2) Kuantifikasi dan kemurnian DNA
Cosmetics
Kualitas dan kuantitas bahan DNA yang diekstraksi
Contents Here

ditentukan secara spektrofotometri, menggunakan

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.
Spektrofotometer BioDrop DUO UV/VIS. Konsentrasi
DNA ditentukan dengan absorbansi UV pada 260 nm dan
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here
kemurnian DNA yang diekstraksi ditentukan oleh rasio
absorbansi pada 260 dan 280 nm. 0,5 L rehidrasi DNA
Contents Here
Easy to change colors,

ditempatkan pada detektor dan disajikan sebagai

photos and Text.

sampel kosong diikuti dengan sampel DNA yang

Contents Here

diekstraksi.
Easy to change colors,

BRAND
photos and Text.

Contents Here You can simply impress your audience

and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
3) Analisis kualitatif DNA dengan
Cosmetics
Makeupelektroforesis gel
Cosmetics
Gel agarosa 1,0% (b/v)Contents
digunakan
Here
untuk menentukan
keberadaan DNA dan ukuran produk PCR. Gel ditempatkan
LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

diruang elektroforesis dan ditambahkan dengan buffer 1 ×

CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

TAE. Kemudian, 10 L masing-masing sampel untuk analisis

disiapkan dan dimasukkan ke dalam jalur dengan
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

menggunakan mikropipet. Semua gel agarosa dalam

Contents Here

percobaan ini menggunakan penanda ukuran DNA 1kb Gene

Easy to change colors,
photos and Text.

Ruler Ladder (Thermo Fisher Scientific, Amerika Serikat) dan

Contents Here

dijalankan pada 99V selama 35 menit. Proses dilanjutkan

Easy to change colors,

BRAND
photos and Text.

dengan visualisasi gel menggunakan Bio-Rad Universal Hood

You can simply impress your audience
Contents Here
II Gel Doc System dan diperoleh citra digital.
Easy to change colors,
and add a unique zing and appeal to
your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
4) Oligonukleotida Primer Contents Here

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

Primer PCR untuk amplifikasi DNA babi seperti yang

dijelaskan oleh Rodriguezdkk.(2003). Primer oligonukleotida
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

yang digunakan dalam penelitian ini adalah primer DNA

Contents Here
spesifik babi 12SFW dan 12SP (Tabel 1). Set primer ini
Easy to change colors,
photos and Text.
menghasilkan amplikon dengan panjang masing-masing
387 bp. Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Hasil Penelitian Contents Here

Analisis DNA hasil ekstraksi produk kosmetik pada BioDrop

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

DUO UV/VIS Spektrofotometer menunjukkan rasio

absorbansi pada 260 dan 280 nm berada pada kisaran 1,0-
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

1,4 yang menunjukkan kontaminasi dengan protein. Asal usul

Contents Here

DNA yang diisolasi dapat mencerminkan kemurnian DNA

Easy to change colors,
photos and Text.

yang buruk.
Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Hasil Penelitian Contents Here

Berdasarkan analisis elektroforesis, pada kisaran suhu 40ºC

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

sampai 50ºC, seluruh jalur (2-13) gel pada Gambar 2

menunjukkan adanya fragmen DNA babi yang diharapkan
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

yaitu sekitar 387 bp. Hal ini menunjukkan bahwa DNA

Contents Here
berhasil diamplifikasi. Pada kisaran suhu antara 50ºC hingga
Easy to change colors,
photos and Text.
60ºC memperlihatkan fragmen DNA babi yang terlihat tetapi
mulai dari jalur 10 hingga 13 pita menjadi gelap
Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Hasil Penelitian Contents Here
Amplifikasi PCR DNA yang diisolasi dari krim LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,

kosmetik dengan suhu annealing 44,4 C menghasilkan CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

387 bp produk PCR yang diamplifikasi dari gen 12S rRNA

dengan menggunakan primer spesifik babi.
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

Hasil yang diperoleh menunjukkan bahwa proses ekstraksi

Contents Here

dan persiapan untuk reaksi PCR menggunakan metode PCR

Easy to change colors,
photos and Text.

assay yang dioptimalkan dengan primer spesifik spesies

Contents Here

(12SP dan 12SFW) berhasil diamplifikasi

Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Kesimpulan Cosmetics
Deteksi DNA babi dalam krim
Contentskosmetik
Here berhasil diamplifikasi
pada 387 bp. Studi ini menunjukkan bahwa proses ekstraksi
LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

dan preparasi PCR menggunakan metode PCR assay

optimasi dengan primer spesifik spesies (12SP dan 12SFW)
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

berhasi dan berpotensi digunakan untuk otentikasi halal

Contents Here
kosmetik. Selain itu, meskipun bahan baku babi dalam krim
Easy to change colors,
photos and Text.
kosmetik mengalami proses fisik dan kimia yang tinggi,
jumlah DNA yang kecil tetap terdeteksi dan produk tetap
Contents Here
Easy to change colors,
haram menurut peraturan Islam
BRAND di Malaysia.
photos and Text.

Contents Here You can simply impress your audience

and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Analisa porcine dapat dilakukan dengan:
1. Spektroskopi Fourier transform
Contents Here infrared (FTIR)

berdasarkan perbedaan gugus fungsi dalam hal LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.
panjang
gelombang 4000-650 cm-1. Dengan puncak gugus amida I
(1700–1600 cm-1) and Amide-II (1565–1520 cm-1)
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

2. Liquid chromatography
Contents Here
Kromatografi cair menggunakan UV-Vis atau
Easy to change colors, detektor
photos and Text.
fluoresensi biasanya digunakan untuk diferensiasi porcine
berdasarkan komposisi asam amino.
Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Analisa porcine dapat dilakukan dengan:
Contents Here

3. Liquid chromatography-tandem mass spectrometry (LC-

LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

MS/MS)
Prinsip: Kesamaan yang tinggi dalam komposisi asam amino
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

Marker porcine yang berhasil diindentifikasi:

Contents Here
a. SAGISVPGPMGPSGPR pada m/z 1466.8,
Easy to change colors,
photos and Text.
b. PGPPGPAGAR at m/z 876.5,
c. GEAGPQGAR at m/z 842.4Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Contents Here

Analisa porcine dapat dilakukan dengan: LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

4. Dengan metode ELISA

Prinsip dalam metode ini didasarkan pada antigen-
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

antibinotdeyraction. Oleh karena itu, diperlukan persiapan

Contents Here
antibodi spesifik baik antibodi monoklonal poliklonal untuk
Easy to change colors,
photos and Text.
antigen target.
Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
Dari analisa 3 artikel di atas, dapat ditarik kesimpulan, bahwa
untuk menganalisa dan mengidentifikasi
Contents Here kandungan porcine
pada kosmetik dapat dilakukakn dengan banyak cara seperti:
LOREM IPSUM DOLOR SIT AMET,
CU USU AGAM INTEGRE IMPEDIT.

1. Real time PCR

2. Spektrofotometri FTIR
Place Your Picture Here And Send To Back Place Your Picture Here

3. LC
Contents Here
4. LC MS Easy to change colors,
photos and Text.
5. ELISA
Dan banyak lagi metode lain. Dimana setiap metode memiliki
Contents Here
Easy to change colors,
kelebihan dan kelemahan masing-masing
BRAND
photos and Text.

Contents Here You can simply impress your audience

and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.
Makeup
Cosmetics
Makeup
Cosmetics
REFERENSI Contents Here

Kim, Y. S., Yu, H. K., Lee, B. Z., & Hong,LOREM K. W. (2018).

IPSUM Effect
DOLOR of DNA extraction methods on the detection of
SIT AMET,
porcine ingredients in halal cosmetics usingINTEGRE
CU USU AGAM real-time PCR. Applied Biological Chemistry, 61(5), 549-
IMPEDIT.

555.
Rohman, A., Windarsih, A., Erwanto, Y., & Zakaria, Z. (2020). Review on analytical methods for analysis of
porcine gelatine in food and pharmaceutical products for halal authentication. Trends in Food Science
Place Your Picture&Here And Send To 101,
Technology, Back 122-132. Place Your Picture Here

Zabidi, A. R., Fauzi, F. N., Abd Razak, F. N., Rosli, D., Jamil, M. Z. M., WK, W. I., & Yahaya, N. (2020).
Screening porcine
Contents DNA in collagen cream cosmetic products. Food Research.
Here
Easy to change colors,
photos and Text.

Contents Here
Easy to change colors,
photos and Text.
BRAND
Contents Here You can simply impress your audience
and add a unique zing and appeal to
Easy to change colors, your Presentations.
photos and Text.