Penilaian toksisitas oral akut

dan subkronis dari

Combretum micranthum
(Combretaceae) pada tikus
Wistar

Jurnal Uji Toksikologi

REVERENSI

● M. Kpemissi et al., “Acute and subchronic

oral toxicity assessments of Combretum
micranthum (Combretaceae) in Wistar
rats,” Toxicol. Reports, vol. 7, no. January,
pp. 162–168, 2020, doi:
10.1016/j.toxrep.2020.01.007.
Latar Belakang Penelitian
• Combretum micranthum (CM) (Combretaceae) banyak digunakan dalam
pengobatan tradisional di seluruh Afrika Barat untuk pengobatan diabetes,
hipertensi, peradangan, malaria dan penyakit hati.
• Dalam penelitian terbaru menunjukkan bahwa CM memiliki potensi
nefroprotektif pada diabetes mellitus, hipertensi, dan gangguan ginjal.
• Namun, sejauh ini tidak ada penelitian sistematis mengenai profil toksisitasnya
yang telah dilaporkan
 Combretum micranthum
(CM)
Combretum micranthum adalah spesies tanaman
berbunga dalam keluarga Combretaceae. Ia adalah
pokok renek yang dikenali sebagai kinkeliba di
Benin, Burkina Faso, Senegal, Mali dan Gambia di
pelbagai dialek wilayah, di mana ia sering dijumpai
di semak dan di bukit-bukit di Afrika. Digunakan
secara tradisional di Senegal dan Mali untuk
keletihan, penyakit hati, sakit kepala,
penyembuhan, penyakit darah, penurunan berat
badan, barah, masalah tidur, dan terutama
digunakan untuk puasa oleh Mourides di Senegal.
Ini adalah salah satu tanaman kekuatan dalam
perubatan Nigeria dan digunakan untuk merawat
gangguan hati.
 Metode Penelitian
01 03
Ekstraksi Tumbuhan Uji toksitas akut
In vivo

02 04
Uji Hematologi dan Pemeriksaan histologi.
Biokimia Sampel jaringan dari
ginjal, hati, paru-paru
 Ekstraksi

Sampel Ekstraksi Evaporasi

•Sampel yang •Sampel (830 gram) •Filtrat diuapkan di

dikumulkan merupakan
daun dari tanaman
Combretum micranthum
(CM)
• Sampel kemudian dicuci
dan dikeringkan serta
dihaluskan
dimaserasi dalam
etanol-air (8:2 v/v)
selama 72 jam
bawah vakum pada 45
°C dengan rotary
evaporator Rendemen
ekstrak
hidroalkoholCombretum
micranthum (CM) adalah
12,15%.
 UJI IN VIVO
Tikus Wistar Uji Toksitas Akut Pretreatmen Uji Toksitas Sub
Kronis

•Dakma •Hewan-hewan •Semua hewan •Ekstrak CM yang

penelinian ini secara acak dipuasakan dilarutkan dalam
dilakukan dengan dibagi menjadi semalaman, air suling,
menggunakan dua kelompok tetapi dengan diberikan secara
tikus wistar jantan menurut jenis akses gratis ke oral sekali sehari
dan betina kelamin mereka air dan ditimbang selama 28 hari
• Berat 200-250 Gr (n = 10; 5 jantan sebelum berturut-
dan 5 betina per pemberian turut.Grup 1
kelompok).Grup 1 ekstrak (Tikus kontrol)
(Kontrol) menerima air
menerima air suling; Grup 2
suling secara (CM 500mg/kg)
oral; Grup 2 mendapat ekstrak
(Toksisitas akut) dengan dosis 500
menerima dosis mg/kg; Grup 3
batas ekstrak CM (CM1000 mg/kg)
5 g/kg. mendapat ekstrak
dengan dosis
1000 mg/kg.
Uji In Vivo
After Treatment Pengorbanan Pengamatan

• Pada akhir 28 hari • Tikus dikorbankan • Pengamatan

pemberian, hewan dengan dislokasi dilakukan selama
dipuasakan serviks pemberian oral
semalaman, tetapi • Organ hati, paru untuk mengamati
memiliki akses dan ginjal diambil gejala toksisitas
gratis ke air. dan segera dicuci • Pengamatan
• Pada hari ke-29, dengan NaCl dilakukan ada organ
mereka dibius setelah treatment
dengan eter dan ubtuk mengetahui
sampel darah dampak CM
diambil dengan terhadap toksisitas
tusukan retro-orbital hati, paru maupun
menggunakan ginjal
tabung kapiler untuk
studi hematologi
dan biokimia.
Metode Uji Hematologi dan Biokimia
Sampel darah Hematologi
• diambil dalam
antikoagulan-
tabung bebas
digunakan untuk
analisis biokimia dan
disentrifugasi pada
3000 rpm selama 10
menit
Biokimia
• hematologi • Serum dipisahkan,
menggunaka disimpan pada -20 °
penganalisis C dan digunakan
hematologi otomatis untuk evaluasi.
• diferensial leukosit Parameter biokimia
dilakukan dengan diperkirakan
mikroskop cahaya menggunakan
setelah pewarnaan penganalisis
hematologi (fiksasi otomatis URIT
dengan May 8021A
Grunewald dan
pewarnaan Giemsa
(Atom Scientific,
UK). Dalam setiap
kasus, 100 sel
dihitung.
Hasil Dan Pembahasan
Pemberian oral ekstrak CM dengan dosis 5000 mg/kg tidak mengakibatkan kematian atau tanda-tanda klinis
toksisitas akut pada tikus seperti yang diamati untuk jangka pendek 48 jam dan jangka panjang 14 hari. 10
ekor tikus (5 jantan dan 5 betina) bertahan hidup sampai akhir periode pengamatan. Tidak ada kelainan yang
ditemukan pada organ pada otopsi. Berat badan tidak berubah selama periode 14 hari
Pembahasan

Pemberian oral ekstrak CM setiap hari pada dosis 500 mg/kg

dan 1000 mg/kg selama 28 hari berturut-turut tidak
menghasilkan perubahan signifikan dalam perilaku
keseluruhan tikus yang diobati dibandingkan dengan kontrol.
Tikus kontrol dan tikus yang diobati tampak sehat secara
seragam dan tidak ada kematian yang diamati selama
periode pengobatan 28 hari. Tidak ada perbedaan dalam
konsumsi makanan dan air yang diamati antara kelompok
tikus.
Hasil Uji Hematologi dan Biokimia
Jantan Betina
HGB(g/dL) 14,93 ± 0,32 15,06 ± 0,49

HCT(%) 47,73 ± 0,77 44,5 ± 1,98

MCT(fL) 56,96 ± 1,15 62,33 ± 1,98

LIM(%) 0,66 ± 0,33 0,33 ± 0,33

Hematologi dan biokimia
pemberian ekstrak secara oral subkronis tidak menghasilkan
perubahan signifikan dalam parameter hematologis tikus
jantan dan betina. Namun, jumlah trombosit meningkat (P
<0,001) pada tikus betina yang diobati. Ekstrak tidak
menyebabkan perubahan signifikan pada enzim hati (AST,
ALT, PAL dan GT), glukosa serum (Glu), kalsium (Ca2+),
fosfor (P), trigliserida (TG), kolesterol total (TC), protein total
(TP), albumin (Alb), kreatinin (CRE) dan urea (UR) pada tikus
jantan dan betina (Meja 2). Secara mikroskopis, tidak ada
perubahan histologis yang diidentifikasi pada organ yang
dievaluasi (Hati, Jantung dan Paru-paru) dari semua
kelompok
Pembahasan Pemeriksaan histologi Sampel
jaringan dari ginjal, hati, paru-paru

Hati Jantung Paru-paru

Pada pemberian dosis
500mg/kg tidak terlihat
perubahan signifikan sel hati
pada 1000mg/kg terlihat
adanya pelebaran pembuluh
pada sel hati
Jaringan otot polos Sel alveoli mengalami
jantung mengalami pelebaran.
perubahan seiring
kenaiakan dari dosis
CM
 KESIMPULAN

Dosis oral hingga 5000 mg/kg ekstrak hidroalkohol daun

CM tidak menunjukkan bukti toksisitas atau kematian
terkait pengobatan pada hewan. Dosis berulang CM
hingga 1000 mg/kg selama 28 hari tidak menunjukkan
perubahan signifikan dalam asupan makanan dan air.
Hematologi, analisis biokimia serum dan histopatologi
pada tingkat sel juga tidak menunjukkan efek yang nyata.
Rasio risiko/manfaat yang dievaluasi dalam penelitian ini
adalah mendukung penggunaan tanaman obat tradisional
ini. Dengan demikian, ekstrak CM dapat digunakan untuk
efek nefroprotektif yang terbukti karena dosis terapi yang
digunakan jauh dari LD50 dan dosis toksik. Efek toksik
pada kesuburan, mutagenisitas, teratogenisitas dan
potensi karsinogenik dapat direalisasikan di asa depan.
TERIMAKA
SIH