Plasmid merupakan DNA ekstrakromosomal yang berbeda karakternya dengan DNA

kromosomal. Bentuk plasmid adalah sirkuler double helix dengan ukuran 1 kb sampai lebih
dari 200 kb. Plasmid merupakan potongan melingkar DNA yang ukuranya kecil (kurang lebih
2000 sampai 10000 pasangan basa) yang berisi informasi genetik yang penting untuk
pertumbuhan bakteri. Pada bakteri jumlah plasmid yang dimiliki bervariasi ataupun tidak
memiliki plasmid. Plasmid bisa tidak terdapat pada bakteri yang biasa karena plasmid tidak
mempengaruhi ketahanan hidup bakteri tersebut. Plasmid hanya memberikan sifat istimewa
yang dimiliki oleh bakteri tersebut misalnya resistensi terhadap antibiotik. Beberapa
karakteristik dari plasmid yang patut diketahui antara lain: dapat ditransfer ke bakteri lain dan
memiliki ORI (Origin of replication) sehingga mampu mereplikasi diri tanpa pengaturan dari
DNA kromosom. Replikasi dimulai dari titik ORI hingga semua plasmid tereplikasi. DNA
ekstrakromosomal yang terjadi secara alamiah pada bakteria, yeast, dan beberapa sel
eukaryotik yang berada secara simbiotik maupun parasitik pada sel inang (Russel,1994).
Plasmid biasanya digunakan dalam teknologi DNA rekombinan menggunakan E.
coli sebagai host, sehingga dalam rekayasa genetika plasmid sering digunakan sebagai vektor
untuk membawa gen-gen tertentu yang diinginkan ke dalam suatu sel inang. Gen-gen tersebut
selanjutnya akan mengekspresikan produk komersial tertentu seperti insulin, interferon,
dan berbagai enzim (Stanfield, 1996).

1.

Berdasarkan fungsinya plasmid dapat dikelompokkan menjadi:

Fertility- F plasmids.
Merupakan plasmid yang dapat ditransfer dari satu sel ke sel bakteri lain untuk proses
konjugasi.

2.

Resistance- R plasmids.
Mengandung gen yang resisten terhadap antibiotik atau racun dan inhibitor

pertumbuhan lainnya.
3. Plasmid penyandi bacteriocins.
Bacteriocins adalah senyawa yang diproduksi oleh bakteri untuk menghambat
pertumbuhan atau bakteri lain yang spesises atau galurnya berbeda.
4. Degradative plasmids.
Merupakan plasmid yang mampu mencerna substansi yang tidak biasa, contoh toluen
dan asam salisilat.
5. Virulence plasmids.
Merupakan plasmid yang menjadikan bakteri tersebut patogen.
berdasarkan jumlah plasmid di dalam sel dapat dibedakan menjadi:
1. Low copy number plasmid dimana dalam satu sel hanya mengandung satu atau
beberapa plasmid saja.

2. High copy number dimana dalam satu sel mengandung banayak plasmid hingga
ribuan. Contohnya bakteri E.coli.
Plasmid memiliki bentuk yang beragam, antara lain:
1.

Supercoiled (covalently closed-circular).

DNA plasmid berbentuk sirkular dengan bentuk rantai yang terpilin.
2.
Relaxed circular.
Kedua ujung DNA menyatu dan berbentuk sirkuler.
3.
Supercoiled denature.
Kedua ujung DNA menyatu tapi pasangan basanya tidak sempurna.
4.
Nicked open circular.
Rantai DNA yang terpotong pada salah satu sisi saja.
Teknik isolasi plasmid yang baik sangat dibutuhkan terutama untuk studi genetik
terhadap gen-gen yang terdapat pada plasmid dan pengembangan teknologi DNA
rekombinan. Dalam isolasi DNA plasmid biasanya diperoleh plasmid dalam 3 topologi, yaitu:
covalently closed circulair (ccc), open circulair (oc), dan linier (l). Isolasi plasmid bertujuan
untuk mengisolasi atau memisahkan plasmid dari molekul-molekul lain yang terdapat di
dalam sel (Yoni Suryani, dkk. 2011).
Inti dari isolasi plasmid bakteri adalah menghancurkan membran sel sehingga semua
organel sel dapat keluar. Sehingga didapatkan DNA kromosomal serta DNA ekstrakromosmal
(plasmid). Untuk memperoleh plasmid saja harus dilakukan pemurnian dari debris membran
sel, organel sel, dan pengotor lainnya. Metode yang dapat digunakan untuk isolasi plasmid
antara lain yaitu boiling lysis, lysis with detergent, mechanical lysis, alkaline lysis, dan
enzimatic digestion.
Proses isolasi DNA diawali dengan proses ekstraksi DNA. Hal ini bertujuan untuk
memisahkan DNA dengan partikel lain yang tidak diinginkan. Proses ini harus dilakukan
dengan hati hati, sehingga tidak menyebabkan kerusakan pada DNA. Untuk mengeluarkan
DNA dari sel, dapat dilakukan dengan memecahkan dinding sel, membran plasma dan
membran inti baik dengan cara mekanik maupun secara kimiawi.
Penambahan detergen dalam isolasi DNA dapat dilakukan karena detergen dapat
menyebabkan rusaknya membran sel, melalui ikatan yang dibentuk melalui sisi hidrofobik
detregen dengan protein dan lemak pada membran membentuk senyawa lipid protein
kompleks ( Machfud, 2006 ).

DAFTAR PUSTAKA
Choirul Machfud. 2006. Pendidikan Multikultural. Yogyakarta : Pustaka Pelajar.
Russell, P.J. 1994. Fundamentals of genetics. New York: Harper Collins CollegePublishers
Stanfield WD, Jaime SC, Raul JC. 1996. Molecular and Cell Biology. New York: Mc GrawHill.
Suryani, Yoni, dkk. 2011. Petunjuk praktikum biologi sel dan molekuler. Yogyakarta: FMIPA
UNY.