SCB1603402 PTA

PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI 2014/2015

Drs. IMAN SANTOSO, M.Phil.
Dra. SITARESMI, M.Sc.

LAPORAN PRAKTIKUM MIKROBIOLOGI

PENGAMATAN MIKROORGANISME DARI UDARA DENGAN
METODE AIR MONITORING

NAMA : Rohmad Joni Pranoto

NPM : 1206247240
KELOMPOK : XB
TANGGAL : 29 Oktober 2014
ASISTEN : Andi Aisyiah Alwie
Husnun Hamidah

UNIVERSITAS INDONESIA
FAKULTAS MATEMATIKA DAN ILMU PENGETAHUAN ALAM
DEPARTEMEN BIOLOGI
DEPOK
2011
 1

PENGECATAN STRUKTUR SEL BAKTERI

I. TUJUAN

1. Mengamati dan mempelajari keberadaan mikroorganisme dari udara dengan

metode air monitoring.
2. Memahami dan mengetahui teknik isolasi mikroorganisme dengan metode air
monitoring.

II. ALAT DAN BAHAN

Peralatan yang digunakan dalam percobaan isolasi mikroorganisme

dengan metode air monitoring tersebut yaitu satu set alat air sampler MAS 100
NT, cawan petri berdiameter 9 cm dengan tinggi 1 – 1,5 cm berisi medium PDA
dan NA. Bahan yang digunakan saat percobaan isolasi mikroorganisme dengan
metode air monitoring yaitu desinfektan alkohol 70% dan kertas tisu.

III. HASIL PENGAMATAN

Hasil pengamatan dapat dilihat pada lampiran.

IV. PEMBAHASAN
Keberadaan mikroorganisme di lingkungan kita sangat melimpah dan
bervariasi. Kondisi lingkungan yang berbeda-beda turut memengaruhi jumlah
dan jenis suatu mikroorganisme yang dominan di lingkungan tersebut
(Gandjar dkk 1992: 17). Mikroorganisme tersebut antara lain dapat berupa
fungi. Fungi dapat dibedakan menjadi tiga jenis berdasarkan morfologinya,
yaitu:
a. Khamir (Yeast)
Khamir merupakan satu-satunya keluarga fungi yang bersifat uniseluler.
Sel khamir umumnya berbentuk seperti bola, oval, atau silindris.Ukuran
sel khamirlebih besar dari sel bakteri sehingga dapat dibedakan secara
mikroskopik, baik melalui ukuran maupun ada tidaknya organel sel,
seperti nukleus.
 2

b. Kapang (Molds)
Kapang merupakan jenis fungi yang memiliki struktur filamen. Filamen
tunggalnya disebut hifa dan selanjutnya hifa akan tumbuh bercabang
membentuk sekumpulan jaring hifa yang disebut miselium.
c. Cendawan (Mushroom)
Mushrooms sama halnya dengan kapang, yaitu fungi filamentousyang
dapat membentuk struktur berukuran besar yang disebut tubuh buah
(fruiting body). Tubuh buah merupakan bagian mushroom yang dapat
dimakan. Sebagian besar mushroom hidup sebagai mikoriza di dalam
tanah.
(Brock dkk. 1994: 846--850).
Salah satu lingkungan yang melimpah keberadaan mikroorganismenya
yaitu lingkungan udara yang ada disekitar manusia. Udara tidak hanya
mengandung partikel gas tetapi juga partikel berupa debu dan partikel
mikroorganisme lainnya seperti sel bakteri, spora jamur, serbuk polen bahkan
virus. Debu dan gas memang bukan medium untuk mikroorganisme tetapi
partikel debu gas tersebut dapat menjadi vektor pembawa mikroorganisme itu
sendiri (Napoli dkk 2012: 1). Pemeriksaan kualitas udara penting dilakukan
terutama dalam dunia industri makanan (Holah 2014: 10) dan rumah sakit
(Napoli dkk 2012: 1). Hal tersebut dilakukan untuk menjaga kualitas produk
makanan dan mengurangi dampak kontaminasi pada pasien.
Proses isolasi mikroorganisme dari udara dapat dilakukan dengan dua
metode sampling, yaitu metode active sampling dan metode passive
sampling(Holah 2014: 10 –11). Metode passive sampling dilakukan dengan
menangkap partikel mikroorganisme udara yang jatuh. Salah satu teknik
passive sampling yaitu teknik settle plate. Teknik tersebut dilakukan dengan
meletakkan petri dish yang berisi medium pertumbuhan secara terbuka dan
diletakkan pada suatu area yang diduga mengandung mikroorganismenya
selama beberapa waktu tertentu(Gandjar dkk. 1992: 20—24; Napoli dkk
2012: 3). Dengan medium tersebut, diharapkan ada mikroorganisme yang
jatuh dari udara ke atas medium tersebut dan tumbuh. Metode active
sampling dilakukan dengan menyedot volume tertentu udara dalam suatu area
 3

dan kemudian di tabrakkan pada medium tumbuh (Sebayang 2014: 19—20).

Metode active sampling dapat dilakukan dengan beberapa teknik, salah
satunya yaitu impact, impingement and filtration samplers. Metodeactive
sampling dapat dilakukan dengan suatu alat yang disebut air sampler air
monitoring system MAS 100NT produk dari perusahaan Merck.
Karakteristik air sampler tersebut ada dua yaitu memberikan kekuatan
tarikan dengan kecepatanimpactdengan proses tabrakan antara volum udara
dan medium memiliki berjalan sesuai syarat yaitu harus mampu menjebak
viable particles dari udara dan mampu mempertahankan viabilitas partikel
tersebut sehingga tidak mengalami kerusakan dan kedua yaitu harus memiliki
physical efficiency dan biological efficiency.Physical efficiency adalah
kemampuan dalam menangkap berbagai ukuran partikel baik partikel yang
berupa mikroorganisme, partikel pembawa mikroorganisme atau partikel saja.
Biological efficiency adalah kemampuan air sampler untuk membawa
partikel viabel pembawa mikroba (Sebayang 2014: 19—20).
Kedua metode sampling tersebut memiliki kelebihan dan kekurangan
masing-masing. Metode passive sampling memberikan kelebihan teknik yang
mudah dilakukan yang hanya bermodalkan cawan petri berisi medium
tumbuh sehingga lebih efisien, namun metode tersebut juga memiliki banyak
kekurangan diantaranya hasilnya yang kurang akurat, sangat dipengaruhi oleh
faktor-faktor lain seperti turbulensi udara, ukuran partikel yang terlalu kecil
tidak akan tertangkap, lama perlakuan akan menghasilkan hasil yang berbeda.
Metode tersebut juga tidak dapat mengukur jumlah mikroorganisme yang ada
di udara karena itu hasilnya bersifat kualitatif (Sebayang 2014: 22). Metode
active sampling memberikan kelebihan diantaranya yaitu hasil dengan presisi
tinggi, dapat diketahui jumlah mikroorganisme per volum udara, dan tidak
terpengaruh faktor turbulensi serta ukuran partikel yang kecil. Kekurangan
dari metode air sampler ini terletak pada harga produk alatnya yang mahal,
sebagai contoh produk air samplerMAS 100NT dari Merck tersebut berharga
sekitar 128 juta per unit.
Percobaan isolasi mikroorganisme dari udara menggunakan metode air
sampler tersebut dilakukan di laboratorium Fisiologi Departemen Biologi
 4

Universitas Indonesia sekitar pukul 10 pagi dengan jumlah praktikan dalam

ruangan sebanyak 20 mahasiswa dan satu orang lecture dari Merck yaitu Ibu
Gianina Miranda Sebayang. Pengambilan sampel dilakukan pada empat spot
yaitu depan kelas, sayap kiri dan sayap kanan kelas, serta belakang kelas.
Kelompok kami mendapat bagian sayap kiri kelas yang dekat dengan
ventilasi dan air exhaust. Percobaan dilakukan dengan sterilisasi tempat kerja
dan alat. Secara garis besar alat tersebut terdiri atas 3 bagian yaitu tutup yang
terdiri atas lubang perforasi berukuran 0,6 mm sebanyak 300 lubang, bagian
badan yang terdiri atas tempat peletakan cawan petri berukuran 99 mm atau
60 mm dan sebuah lengan penyangga, serta bagian monitor touchscreen yang
memberikan informasi mengenai volume udara yang masuk, lampu indikator
berjalan (biru) dan berhenti proses (merah) serta tombol start. Setelah alat
disterilisasi, medium agar dibuka dan diletakkan pada badan alat kemudian
ditutup dengan tutup alat yang berlubang, setelah itu alat dihidupkan dengan
menekan tombol start. Saat alat beroperasi maka lampu indikator warna biru
akan menyala dan udara akan mulai tersedot sebanyak 100 liter. Ketika
proses terganggu lampu indikator akan menyala merah dan proses terhenti.
Ketika proses selesai, pada medium agar akan tercetak pola unik sesuai
jumlah lubang yang ada pada tutup alat. Medium yang telah diproses
kemudian di inkubasi (Merck 2014: 3—4).
Pengamatan hasil percobaan dilakukan pada waktu 24 jam dan 48 jam
setelah proses. Berdasarkan hasil pengamatan pada waktu 24 jam diperoleh
120 koloni bakteri/khamir pada medium PDA dan 207 koloni bakteri/khamir
ditambah 1 koloni kapang pada medium NA, sedangkan pada pengamatan 48
jam diperoleh 138 koloni bakteri/khamir ditambah 9 koloni kapang pada
medium PDA dan 280koloni bakteri/khamir ditambah 11 koloni kapang.
Berdasarkan pengamatan tersebut dapat dilihat bahwa pada medium NA lebih
banyak ditumbuhi oleh mikroorganisme dibanding dengan medium PDA.Hal
tersebut dikarenakan medium tersebut digunakan pada isolasi yang pertama
kali dilakukan sehingga mikroorganismenya lebih banyak dibanding pada
medium PDA yang dilakukan pada isolasi kedua yang mikroorganismenya
telah berkurang karena isolasi yang pertama. Bakteri/khamir dan kapang
 5

berkoloni sesuai dengan pola-pola unik yang terbentu sebelumnya, hal

tersebut mengindikasikan bahwa mikroorganisme masuk ke dalam alat dan
menempel pada medium melalui lubang yang ada pada tutup alat. Hasil yang
diperoleh secara active sampling melalui metode air sampler tersebut
menunjukkan hasil koloni mikroorganisme yang lebih banyak dibanding
metode settle plate yang dulu telah kami lakukan. Hal tersebut dikarenakan
pada metode air sampler tersebut sampel udara sengaja disedot secara aktif
oleh air sampler sehingga partikel yang ada di udara ikut tersedot, sedangkan
pada metode settle plate teknik hanya mengandalkan mikroorganisme yang
jatuh ke dalam medium sehingga apabila ada turbulensi udara yang
menyebabkan partikel tidak jatuh maka akan mendapatkan hasil yang nihil,
atau misalkan jatuh maka partikel yang jatuh tersebut belum tentu mewakili
semua partikel/mikroorganisme yang ada pada suatu area tertentu.
Hasil yang diperoleh pada percobaan dengan air sampler tersebut
kemudian dikonversi dengan tabel William Feller lalu dihitung berdasarkan
rumus berikut:
𝐶𝐹𝑈 (𝑝𝑎𝑑𝑎 𝑡𝑎𝑏𝑒𝑙 𝐹𝑒𝑙𝑙𝑒𝑟)
x 1000
𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑢𝑑𝑎𝑟𝑎 𝑦𝑎𝑛𝑔 𝑑𝑖𝑠𝑎𝑚𝑝𝑙𝑖𝑛𝑔

Hasil perhitungan yang diperoleh pada pengamatan ke 48 jam yaitu jumlah

koloni bakteri/khamir pada medium NA sebanyak 8050 cfu/ m3, koloni
kapang sebanyak 110 cfu/m3, sedangkan pada medium PDA koloni
bakteri/khamir sebanyak 1840 cfu/m3 dan koloni kapang sebanyak 90 cfu/m3.

V. KESIMPULAN
1. Keberadaan mikroorganisme yang ada di udara dapat dideteksi
menggunakan metode active sampling dengan menggunakan teknik air
sampler.
2. Teknik air sampler yang digunakan pada air monitoring dilakukan
dengan menarik sejumlah volum udara ke dalam air sampler lalu
ditabrakkan dengan medium agar.
 6

VI. DAFTAR ACUAN

Brock, T.D., M.T. Maargan, J.M. Martindo, J. Parker. 1994. Biology of

microorgansims. Ed ke-7, Prentice Hall, New Jersey: xvii + 909 hlm.
Gandjar, I., I. M. Koentjoro, W. Mangunwardoyo & L. Soebagya. 1992.
Pedoman praktikum mikrobiologi dasar. Jurusan Biologi FMIPA-UI,
Depok: vii + 87 hlm.
Napoli, C. , V. Marcotrigiano and M.T. Montagna. 2012. Air sampling procedures
to evaluate microbial contamination: a comparison between active and
passive methods in operating theatres.BMC Public Health 12: 594
 7

LAMPIRAN 1
Hasil Pengamatan

MEDIUM 24 JAM 48 JAM

Bakteri/khamir Kapang Bakteri/khamir Kapang
PDA 120 0 138 9
NA 138 1 280 11

PENGHITUNGAN

1. Pengamatan ke 48 jam diperoleh

- Volume udara sampel : 100 liter
- Medium NA
Koloni bakteri/khamir : 280 koloni  Tabel Feller: 805
Koloni kapang : 11 koloni  Tabel Feller: 11
- Medium PDA
Koloni bakteri/khamir : 138 koloni  Tabel Feller: 184
Koloni kapang : 9 koloni  Tabel Feller: 9
2. Penghitungan sesuai rumus:

𝐽𝑢𝑚𝑙𝑎ℎ 𝑘𝑜𝑙𝑜𝑛𝑖 𝑠𝑒𝑠𝑢𝑎𝑖 𝑡𝑎𝑏𝑒𝑙 𝑓𝑒𝑙𝑙𝑒𝑟

𝑣𝑜𝑙𝑢𝑚𝑒 𝑢𝑑𝑎𝑟𝑎 𝑠𝑎𝑚𝑝𝑒𝑙
x 1000

Medium NA:
805
Koloni bakteri/khamir: x 1000 = 8050 cfu/m3
100

11
Koloni kapang : 100 x 1000 = 110 cfu/m3

Medium PDA:
184
Koloni bakteri/khamir : 100 x 1000 = 1840 cfu/m3

9
Koloni kapang : 100 x 1000 = 90 cfu/m3
 8

LAMPIRAN 2

Gambar 1. Hasil pengamatan ke 24 jam

[sumber: dokumen pribadi]

Gambar 2. Hasil pengamatan ke 48 jam

[sumber: dokumen pribadi]