REVIEW JURNAL INTERNASIONAL TUMPAHAN MINYAK DI PESISIR

DAN LAUT

“Bioremediation of Coastal and Marine Pollution due to Crude Oil using a

Microorganism Bacillus Subtilis”

Disusun oleh :
Anggun Nur Angraeni 153800020

Dosen Pembimbing :
Muhammad Al Kholif S.T M.T

Mata Kuliah :
Konservasi Lingkungan

JURUSAN TEKNIK LINGKUNGAN

FAKULTAS TEKNIK SIPIL DAN PERNCANAAN
UNIVERSITAS PGRI ADI BUANA SURABAYA
2018
REVIEW :

Pelepasan minyak mentah di pesisir dan laut selama kegiatan eksploitasi dan
transportasi laut menyebabkan terjadinya kontaminan di lingkungan laut sehingga
menyebabkan terjadinya pencemaran lingkungan yang serius karena keberadaan senyawa
organic beracun yang tumpah atau tertinggal di pesisir dan laut pada kegiatan tersebut. Sifat
non-volatile pada minyak mentah dapat menimbulkan ancaman besar bagi ekosistem darat
dan laut.
Salah satu teknologi yang berpotensi, memiliki nilai ekonomis, efisien dan ramah
lingkungan dalam mengatasi permasalahan tumpahan minyak di pesisir yakni dengan
Biodegradasi. Pada Penelitian ini, degradasi tumpahan minyak dilakukan dengan
menggunakan biosurfaktan untuk memproduksi mikroorganisme Bacillus subtilis untuk
mendapatkan degradasi maksimal. Bacillus subtilis diisolasi dari situs polimer sampah,
Chennai, India digunakan untuk degradasi minyak mentah. Kepatuhan mikroba yang tinggi,
permukaan pengurangan ketegangan, aktivitas emulsifikasi, produksi jumlah yang lebih
tinggi dari biosurfaktan, stabilitas biosurfaktan yang dihasilkan pada kondisi lingkungan yang
ekstrim, pengurangan viskositas dan tingkat tinggi degradasi menunjukkan potensi
mikroorganisme untuk pengobatan tumpahan minyak
Penelitian ini berfokus pada kinerja Bacillus subtilis untuk mengetahui perubahan
sifat fisika-kimia untuk degradasi minyak mentah lilin. Potensi Bacillus Subtilis untuk
memperbaiki lingkungan akibat tumpahan minyak ditunjukkan dengan menganalisis sifat,
seperti :
 Pertumbuhan bakteri pada minyak lilin mentah,
 Interaksi bakteri dan minyak mentah,
 produksi biosurfaktan,
 Tegangan permukaan, aktivitas
 Emulsifikasi,
 Degradasi dan pengurangan viskositas minyak mentah lilin.
Minyak mentah lilin itu diperoleh dari aset ladang minyak Mehsana, Gujarat, India.

Kondisi mikroorganisme dan Budaya

1. Bacillus subtilis YB7 sebelumnya terisolasi oleh Arutchelvi et al. (2009) dari polimer
situs dump, Chennai, India
2. Sebuah aliquot dari 1 mL inokulum dipindahkan ke dalam media bersama dengan 2%
(v/v) minyak mentah lilin dalam 250 labu mL kerucut dan diinkubasi secara aerob
dalam shaker (Orbitek, Scigenics Biotech, India) pada kecepatan 180 rpm.
3. Inkubasi dilakukan pada suhu kamar. Kandungan media terdiri dari 0,3 g kalium
dihidrogen fosfat, 0,6 g disodium hidrogen fosfat, 0,2 g amonium klorida, 0,5 g
natrium klorida, 0,8 g glukosa, 0,01 g magnesium sulfat hepta hidrat dan 200 mL air
suling. Dengan kemurnian bahan kimia sekitar 99%
4. Sebuah termos tanpa minyak mentah menjabat sebagai sampel kontrol. Sampel
dikumpulkan dari termos pada interval waktu yang teratur untuk menentukan
pertumbuhan, sifat permukaan, dan pengukuran viskositas dan analisis degradasi.
minyak mentah lilin
 Gambar 1 menunjukkan berbagai peralatan yang digunakan untuk menyimpulkan
biodegradasi
1. Analisis Pertumbuhan
Pertumbuhan bakteri adalah kebutuhan primer untuk melaksanakan biodegradasi.
Populasi mikroba secara langsung menyumbang produksi biosurfaktan bertanggung jawab
untuk membantu degradasi hidrokarbon. Tingkat pertumbuhan mikroorganisme diukur
menggunakan biomassa berat kering dan koloni membentuk unit (CFU). Biomassa berat
kering diukur dengan prosedur yang dilaporkan oleh Arjol et al. (2014) dan CFU
diperkirakan sesuai dengan metode yang dilaporkan oleh Tehrani dan Herfatmanesh (2015).
Hasil yang didapatkan :
. Biomassa berat kering mencapai 2,11 g / L ketika CFU mencapai maksimal, dan steady state
dicapai lebih lanjut. Hal ini disimpulkan bahwa pertumbuhan meningkat pada hari ke-12 dan
dipelihara sampai hari ke-15 dan menurun setelahnya. CFU mencapai nilai maksimum 28 ×
106 /mL kultur bakteri.

2. Ekstraksi Biosurfaktan
Supernatan kultur setelah membuang biomassa diendapkan menggunakan 6 N HCl,
dan biosurfaktan diekstraksi menggunakan diklorometana. Tahap yang lebih rendah
dikumpulkan, terkonsentrasi menggunakan evaporator vakum rotary (Buchi rota uap, Swiss),
dan ditimbang setelah pengeringan.
Hasil yang didapatkan :
Biosurfaktan telah diamati untuk meningkatkan degradasi minyak mentah (Batista et
al., 2007). Biosurfaktan emulsifies hidrokarbon hadir dalam minyak mentah, dan
meningkatkan kelarutan air, mengurangi tegangan permukaan dan meningkatkan perpindahan
zat berminyak dari media berpori (Banat, 1995).
Produksi biosurfaktan terpantau berada 0,98 g / L dalam 1 hari, dan maksimum 4,1 g /
L dalam 10 hari. Produksi Biosurfaktan juga dikonfirmasi oleh penurunan diamati dalam
tegangan permukaan dan peningkatan emulsifikasi dalam budaya minyak mentah lilin.
 3. Pengurangan Tegangan Permukaan
Sel-sel bakteri dipindahkan dari budaya dengan pemusingan (Model 5804 R,
Eppendorf, India) selama 10 menit pada 10.000 rpm dan supernatan biomassa budaya bebas
digunakan untuk pengukuran tegangan permukaan menggunakan tensiometer (model
DAC11EA, Data fisika, AS).
Hasil yang di dapat :
Tegangan permukaan berkurang sampai 25 mN/m dalam 10 hari dan 21 mN/m dalam
20 hari dan tidak ada perubahan lebih lanjut.

4. Kegiatan Emulsifikasi
Kegiatan emulsifikasi diukur sesuai dengan prosedur yang dilaporkan oleh Cooper
dan Goldenberg (1987). Minyak Tanah (2 ml) dan volume yang sama dari kaldu budaya
diambil dalam tabung tes datar dipercaya. Campuran vortexed dengan kecepatan tinggi
selama 2 menit dengan menggunakan agitator dan dibiarkan selama 24 jam dan ketinggian
lapisan emulsi dan campuran keseluruhan tercatat. Kegiatan emulsifikasi diberikan sebagai
rasio ketinggian lapisan emulsi dan tinggi total campuran.2.7.Bakteri kepatuhan terhadap
hidrokarbon (BATH) assay.
Hasil yang di dapat :
Kegiatan emulsifikasi dilakukan untuk memeriksa interaksi biosurfaktan dengan
minyak mentah dan hidrokarbon lainnya. Biasanya, degradasi mikroba meningkat dengan
peningkatan aktivitas emulsifikasi karena yang terakhir memberikan kontak yang lebih baik
dengan antarmuka minyak dan air mentah. Dalam 1 hari, 60% dari emulsifikasi diamati,
sedangkan maksimum 82% dicapai dalam 15 hari

5. Bakteri Kepatuhan Terhadap Hidrokarbon (BATH) assay

Hidrofobisitas permukaan sel (CSH) dari strain ditentukan menurut prosedur yang
dilaporkan dilaporkan oleh Ron dan Rosenberg (2002). sel bakteri dipindahkan dengan
sentrifugasi selama 20 menit pada 12.000 × g dan dicuci dengan dapar fosfat untuk
memisahkan zat-zat ekstraselular. Suspensi dihapus bakteri sel (4 mL) dicampur dengan 1
mL heksadekana dalam tabung reaksi dan vortexed (Spinix vortex shaker, Tarsons, India)
selama 5 menit, dan tetap tidak terganggu selama 30 menit untuk memungkinkan pemisahan
fase. Kepadatan optik dari lapisan air diukur pada panjang gelombang 600 nm menggunakan
spektrofotometer UV (Model V 550, Jasco, Jerman).
Hasil yang di dapat :
CSH terpantau berada 82% dalam satu hari dan kemudian mencapai steady state. CSH
merupakan indikasi potensi bakteri untuk tumbuh pada substrat hidrofobik (Chakraborty et
al., 2010). Biodegradasi biasanya terhalang karena bioavailabilitas yang tidak memadai dari
zat hidrofobik untuk mikroorganisme. The biosurfaktan yang dihasilkan oleh bakteri
berperilaku sebagai ikatan antara bakteri dan minyak mentah, dan mendukung koneksi dari
mikroba pada substrat hidrokarbon, dan meningkatkan CSH (Xia et al., 2013). Hasil
percobaan menunjukkan bahwa biosurfaktan diproduksi di hadapan minyak mentah lilin
dapat meningkatkan interaksi antara sel bakteri dan minyak mentah, sehingga mempercepat
degradasi.
 6. Pengukuran Viskositas
Viskositas minyak mentah lilin selama periode degradasi diukur dengan Rheometer
(Anton Parr Modular Kompak Rheometer (MCR 52), Austria) dilengkapi dengan dua
kesenjangan geometri (sistem silinder konsentris). Sel-sel bakteri disentrifugasi pada suhu
kamar selama 10 menit pada 10000 xg dan bakteri supernatan kultur bebas diuji untuk
penurunan viskositas.
Hasil yang didapat :
Perlakuan minyak mentah lilin dengan bakteri meningkatkan fluiditas minyak mentah.
Penurunan viskositas ditemukan menjadi sekitar 25% dalam satu hari dan mencapai sekitar
60% dalam 8 hari, dan mencapai kondisi mapan setelahnya. Semakin banyak pengurangan
viskositas diamati antara hari 4 sampai 8. Hal ini disebabkan alasan bahwa bakteri telah
mencapai pertumbuhan maksimum selama periode itu.

7. Ekstraksi hidrokarbon sisa

Minyak mentah lilin terdegradasi dari supernatan kultur diekstraksi menggunakan etil
asetat dan fase pelarut diuapkan sampai kering dengan menggunakan rotary evaporator
vakum (R-210 rotavapor, Buchi, Swiss). Ekstrak kering kemudian terkonsentrasi
menggunakan etil asetat. Ekstrak pekat dianalisis dengan Gas kromatografi-mass
spektroskopi (GC-MS) (JEOL, USA).
Laju degradasi minyak mentah meningkat seiring dengan meningkatnya waktu inkubasi.
Degradasi minyak mentah lilin terpantau berada 62% dalam 1 hari dan 80% setelah 10 hari,
dan tidak berubah setelah itu. Laju degradasi tumbuh pesat antara hari 1 dan 10. Namun, laju
degradasi tidak meningkat setelah hari 10. Pada hari 10, jumlah bakteri telah mencapai
maksimum 28 × 106 CFU / mL, dan sama dipertahankan selama seminggu sesudah itu
menurun. Degradasi minyak mentah mengikuti tren yang sama seperti pertumbuhan mikroba.
Menurut Bordenave et al. (2007)
Bakteri individu bisa memetabolisme minyak mentah hanya untuk hidrokarbon terbatas dan
biodegradasi lengkap membutuhkan campuran kelompok bakteri yang berbeda. Berbeda
dengan ini, hasil mengungkapkan bahwa individu Bacillus subtilis bisa menurunkan berbagai
hidrokarbon hadir dalam minyak mentah.
4.Kesimpulan
Dengan pengetahuan degradasi minyak mentah menggunakan bakteri dalam
percobaan skala laboratorium, akan ada kemungkinan untuk mengembangkan pendekatan
untuk menggunakan bakteri untuk menghilangkan hidrokarbon dari air yang tercemar. Semua
hasil menunjukkan bahwa bakteri yang dipilih dalam penelitian kami adalah menguntungkan
untuk bioremediasi lokasi yang terkontaminasi dengan hidrokarbon minyak bumi. Komposisi
kimia dari minyak mentah sebelum dan sesudah pertumbuhan bakteri dengan GC-MS telah
membuktikan bahwa komponen minyak mentah telah digunakan sebagai sumber karbon dan
energi, dan merupakan indikasi yang baik untuk bioremediasi minyak mentah cocok untuk
lingkungan pesisir dan laut degradasi minyak mentah dan pengurangan viskositas diamati
menjadi 80% dan 60%, masing-masing, dalam 10 hari.