Pengujian Bioekivalensi Tablet Konvensional Ketokonazol 200 mg (Onofin-K®) Produksi

Farmacéuticos Rayere S.A, Meksiko Nomor Batch 2652 Dibandingkan Dengan Tablet
Konvensional Ketokonazol 200 mg (Nizoral®) Produksi Janssen-Cilag S.A., Meksiko
Dengan Nomor Batch 1HDX5

Kelompok 10

Syafira Hz 260112200011

Dwi Prihastuti 260112200103

Nur Diana Hadad 260112200029

Hammam H. 260112200065

Sarah Syafira 260112200109

PROGRAM STUDI PROFESI APOTEKER

FAKULTAS FARMASI

UNIVERSITAS PADJADJARAN

JATINANGOR

2020
 PROTOKOL UJI BIOEKIVALENSI
No. Protokol : KEL-10-2020/A
Revisi : 01
Tanggal Efektif : 20 Oktober 2020

SPONSOR LAB KLINIK

Farmaceuticos Rayere S.A., Bélgica
508, Portales Nte, Benito Juárez, 03300
Benito Juarez, CDMX, Mèksiko
PENYELENGGARA UJI
BIOEKIVALENSI
Farmaceuticos Rayere S.A., Bélgica
508, Portales Nte, Benito Juárez, 03300
Benito Juarez, CDMX, Mèksiko
Research Center of Clinical
Pharmacology in the Hospital General de
Mexico, Dr. Balmis 148, Doctores,
Cuauhtémoc, 06720 Ciudad de México
TEMPAT PELAKSANAAN
PENELITIAN, ANALISIS DAN
STATISTIK,
Research Center of Clinical
Pharmacology in the Hospital General de
Mexico, Dr. Balmis 148, Doctores,
Cuauhtémoc, 06720 Ciudad de México

Tim Peneliti :
Principal Investigator G. Marcelın-Jimenez
Co-Investigator Jose Hernandez
Medical Doctor Alionka P. Angeles
Study Director Lillian McGragger
Quality Manager Lin Manuel Miranda

i
 SINOPSIS PENELITIAN

Studi dilakukan pada 24 Sukarelawan wanita sehat untuk membandingkan bioavailabilitas

dua merek tablet ketokonazol (200 mg); Onofin-K® (Farmaceuticos Rayere S.A., Meksiko)
sebagai tes dan NIZORAL® (Janssen-Cilag, Meksiko) sebagai referensi produk. Penelitian
dilakukan di Pusat Penelitian Farmakologi KlinikHospital General de Mexico di Kota
Meksiko. Dua tablet (400 mg) diberikan sebagai dosis tunggal dengan 250 ml air setelah
puasa semalam 12 jam pada dua hari perawatan dipisahkan dengan wash out 1 minggu.
Setelah pemberian dosis, sampel darah dikumpulkan selama 12 jam. Plasma dipanen
dianalisis untuk ketoconazole dengan metode HPLC yang dimodifikasi dan divalidasi
dengan deteksi UV pada kisaran 400–14000 µg/ml, menggunakan 200 ml plasma dalam
waktu 2,5 menit. Farmakokinetik itu parameter AUC0--t AUC0--a Cmax, Tmax dan t1/2
ditentukan dari konsentrasi plasma baik formulasi maupun hasil yang didiskusikan. AUC0-t,
AUC0-a dan Cmax diuji untuk bioekivalensi setelah data transformasi log, dan tidak ada
perbedaan signifikan yang ditemukan baik di Interval kepercayaan klasik 90% atau dalam
uji Anderson dan Hauck (p<0,05). Berdasarkan statistik Analisis, disimpulkan bahwa
Onofin-K® adalah bioekuivalen dengan NIZORAL®

i
 DAFTAR ISI
SINOPSIS......................................................................................................................................... i
DAFTAR ISI................................................................................................................................... ii
DAFTAR ANGGOTA TIM PENELITI DAN PERSONALIA STUDI............................................................................................................................... iv
PERSETUJUAN SPONSOR......................................................................................................................... v
PERSETUJUAN PENELITI........................................................................................................................vi
1. PENDAHULUAN..................................................................................................................................... 7
1.1 SIFAT FSIKOKIMIA................................................................................................................ 6
1.2 FARMAKOLOGI...................................................................................................................... 6
1.3 FARMAKOKINETIKA.............................................................................................................7
1.4 REAKSI TIDAK DIINGINKAN...............................................................................................7
1.5 INTERAKSI...............................................................................................................................7
2. TUJUAN.................................................................................................................................................... 9
3. INFORMASI OBAT..................................................................................................................................9
3.1 OBAT UJI...................................................................................................................................9
3.2OBAT KOMPARATOR.............................................................................................................9
3.3 DATA EKIVALENSI FARMASETIK......................................................................................9
3.4 UJI DISOLUSI TERBANDING................................................................................................9
1. Parameter Uji Disolusi............................................................................................................. 10
2. Parameter Kerja HPLC atau spektrofotometer........................................................................ 10
4. RENCANA PENELITIAN...................................................................................................................... 10
4.1 DESAIN PENELITIAN KLINIS.............................................................................................10
4.1.2 Desain Penelitian.................................................................................................................10
4.1.3 Kondisi Penelitian...............................................................................................................10
4.1.4 Kriteria Inklusi, Eksklusi, Batasan Aktivitas......................................................................10
a. Kriteria Inklusi................................................................................................................. 10
b. Kriteria Eksklusi.............................................................................................................. 10
c. Batasan Aktivitas..............................................................................................................11
4.1.4. Standardisasi Kondisi Subjek15 ...........................................................................11
4.1.5. Pemberian Obat.....................................................................................................12
4.1.6. Kriteria Penghentian Subjek (drop-out)................................................................12
4.1.7. Pemeriksaan Kesehatan ........................................................................................12
4.1.8. Subjek Penelitian dan Jumlah Subjek...................................................................12
4.1.9. Sampel dan Waktu Sampling ...............................................................................12
4.1.10. Volume Darah ....................................................................................................13
4.1.11. Pemantauan Kondisi Subjek...............................................................................13
4.2. TATA LAKSANA PENELITIAN ............................................................................13
4.2.1. Pemilihan dosis.....................................................................................................13
4.2.2. Identitas Pemberian Produk Pengujian.................................................................13
4.2.3. Randomisasi .........................................................................................................13
4.2.4. Ketersamaran (Blinding) ......................................................................................13
4.2.5. Periode Washout...................................................................................................13
4.2.6. Volume Air yang Diminum..................................................................................13
4.3. PENCATATAN KLINIS DAN KEAMANAN...........................................................14
4.4. PARAMETER FARMAKOKINETIK .......................................................................14

ii
 4.5. ANALISIS STATISTIK DAN INTERPRETASI DATA ..........................................15
4.6. METODE ANALISIS DAN VALIDASI....................................................................16
4.7. DATA QUALITY ASSURANCE (QA).........................................................................16
4.7.1. Sebelum Uji Bioekivalensi....................................................................................16
4.7.2. Selama Uji Bioekivalensi .....................................................................................16
4.7.3. Setelah Uji Bioekivalensi .....................................................................................16
5. SUMBER ACUAN....................................................................................................................17

6. RIWAYAT REVISI...................................................................................................................17

iii
 DAFTAR ANGGOTA TIM PENELITI DAN PERSONIL STUDI

Nama Jabatan Alamat E-mail Nomor

G. Marcelın- Principal Avenida gabmarcelin@hotmail.com +52-1-55-
Jimenez Investigator Tecnologico 2701, 28418923
Col. El Marquez,
32610
Jose Co- Priv. 5 De Mayo jorallo@upv.es +52-1-55-
Hernandez Investigator Col. Moderno 3123539
Apodaca 400-a
Alionka P. Medical sarmiento, 97167, gabmarcelin@hotmail.com. +52-1-55-
Angeles Doctor yucatan 3423423
Lillian Study 3841 Oak Ridge Lillian_12@gmail.com +52-1-55-
McGragger Director Drive 5856767
Lin Manuel Quality Division del Norte, crespo@teerico.com +52-1-55-
Miranda Manager no 04 2523425
Miyu Ottavia Marketing Nonpriv De Siento, miyuotta@mail.kaust.com +52-1-55-
no a1 31086123
Pineyro- Marketing Melcor Ochampo, l.pineyro@lajoyaisd.net +52-1-55-
Garza E Ciudad 21937043
Gómez Silva BA/BE Unit Viuda de San GomezSilvaE@yahoo.com +52-1-55-
Roman 14203213
Lopez- BA/BE Unit libertad no. 42 a, Lopez- +52-1-55-
Sanchez sta clara, 55540 Sanchez@mail.liber.com 9890954
Jake Peralta BA/BE Unit cardinal no. 108 JakePeralta@brooklyn.com +52-1-55-
s/n, paso blanco, 8461426
20900

iv
 PERSETUJUAN SPONSOR

Pengujian Bioekivalensi Tablet Konvensional Ketokonazol 200 mg (Onofin-K®) Produksi

Farmacéuticos Rayere S.A, Meksiko Nomor Batch 2652 Dibandingkan Dengan Tablet
Konvensional Ketokonazol 200 mg (Nizoral®) Produksi Janssen-Cilag S.A., Meksiko
Dengan Nomor Batch 1HDX5

Sponsor: Farmaceuticos Rayere S.A.

Saya, atas nama Farmaceuticos Rayere S.A. telah membaca, mengerti, dan menyetujui protokol
ini. Kami setuju untuk memenuhi semua persyaratan yang menjadi kewajiban sponsor dan
ketentuan lain berdasarkan Good Laboratory Practice (GLP) dan Good Clinical Practice (GCP).

Perwakilan Sponsor,

Apt. Yuliana Rahwan

Tanggal : ___________

v
 PERNYATAAN PENELITI

Pengujian Bioekivalensi Tablet Konvensional Ketokonazol 200 mg (Onofin-K®) Produksi

Farmacéuticos Rayere S.A, Meksiko Nomor Batch 2652 Dibandingkan Dengan Tablet
Konvensional Ketokonazol 200 mg (Nizoral®) Produksi Janssen-Cilag S.A., Meksiko
Dengan Nomor Batch 1HDX5

Sponsor: Farmaceuticos Rayere S.A.

Saya, yang bertanda tangan di bawah ini, telah membaca dan mengerti protokol ini dan setuju
untuk melaksanakan uji bioekivalensi berdasarkan protokol ini dan mematuhi semua persyaratan
yang menjadi kewajiban peneliti dan ketentuan lain berdasarkan Good Laboratory Practice
(GLP) dan Good Clinical Practice (GCP).

Disetujui oleh

Principal Investigator, Medical Doctor,

G. Marcelın-Jimenez Alionka P. Angeles

Tanggal: ___________ Tanggal : _________

Quality Manager,

Lin Manuel Miranda

Tanggal:__________

vi
Pengujian Bioekivalensi Tablet Konvensional Ketokonazol 200 mg (Onofin-K®) Produksi
Farmacéuticos Rayere S.A, Meksiko Nomor Batch 2652 Dibandingkan Dengan Tablet
Konvensional Ketokonazol 200 mg (Nizoral®) Produksi Janssen-Cilag S.A., Meksiko
Dengan Nomor Batch 1HDX5

1. PENDAHULUAN
Tablet Onofin-K® merupakan produk tablet dengan bahan aktif ketokonazol dari
Farmaceuticos Rayere S.A., México yang akan melalui uji bioekivalensi dengan
NIZORAL® sebagai obat komparator atau produk referensi. Obat ini diujikan terhadap
24 sukarelawan dengan kondisi jasmani sehat berjenis kelamin perempuan. Penelitian ini
dilakukan di Pusat Penelitian Farmakologi di Rumah Sakit General de Mexico di kota
Mexico.
1.1. SIFAT FISIKOKIMIA
Ketokonazol memiliki nama kimia (cis-1-acetyl-4-[4-[[2-(2,4-dichloro-phenyl)-2-
(1H-imidazol-1-ylmethyl)-1,3,-dioxolan-4-yl]methoxy]phenyl]piperazine dengan bobot
molekul 531.4 g/mol. Ketokonazol memiliki pemerian serbuk hablur, putih, dan tidak
berbau. Ketokonazol mengandung tidak kurang dari 98,0% dan tidak lebih dari 102,0%
C26H28Cl2N4O4, dihitung terhadap zat yang telah dikeringkan.

Gambar 1. Struktur Kimia Ketokonazol

1.2.FARMAKOLOGI
Ketokonazol bekerja sebagai agen antijamur dengan cara menghambat enzim
sitokrom P450 14α-demetilase. Enzim ini bertanggung jawab untuk menghambat

7
biosintesis trigliserida dan fosfolipid oleh jamur. Lebih khusus lagi, ketokonazol
menghambat sintesis lanosterol, prekursor yang diperlukan untuk biosintesis ergosterol.
Ergosterol merupakan molekul yang dibutuhkan untuk menjaga keutuhan membran
jamur. Tanpa ergosterol, fluiditas membran meningkat, yang pada gilirannya mencegah
pertumbuhan jamur.
1.3. PROFIL FARMAKOKINETIKA
Profil farmakokinetika dari ketokonazole menghasilkan kadar plasma yang cukup
untuk menekan berbagai aktivitas jamur dengan waktu sekitar 1-2 jam untuk mencapai
puncak dari konsentrasi plasma. Absorpsi dari ketokonazol oral sangat bergantung pada
kondisi pH, dimana absorpsi ketokonazol paling baik pada kondisi pH rendah. Obat ini
tersebar luas ke jaringan termasuk cairan sendi yang meradang, tendon, saliva, sebum,
cerumen, empedu, feses, urin, testis, kulit dan jaringan lunak Pengikatan protein plasma:
Kira-kira 99%, terutama pada albumin. Metabolisme dilakukan secara ekstensif di hati
melalui oksidasi, oksidatif-O-dealkilasi dan hidroksilasi aromatik oleh isoenzim CYP3A4
menjadi metabolitnya yang tidak aktif. Ekskresi dari ketokonazole terutama dikeluarkan
melalui feses dan obat ini memerlukan waktu 2 jam sebagai waktu paruh eliminasi awal,
dan 8 jam sebagai waktu paruh eliminasi terminal.
1.4. REAKSI TIDAK DIINGINKAN
Penggunaan ketokonazol oral dilaporkan memiliki resiko kerusakan hati serius
(drug induced liver injury), masalah kelenjar adrenal, dan interaksi berbahaya dengan
obat-obatan lain.
1.5. INTERAKSI OBAT
Eplerenone : meningkatkan resiko hiperkalemia dan hipotensi
Telitromisin dan klaritromisin: peningkatan resiko hepatotoksisitas dan perpanjangan
interval QTc
Felodipine dan nisoldipine : meningkatkan resiko udema dan gagal jantung kronis
Parasetamol : peningkatan resiko kerusakan hati
Antasida : mengurangi absorpsi obat
CYP3A4 inducer (rifampisin): mengurangi konsentrasi plasma
Antivirus : meningkatkan level serum

8
2. TUJUAN
Meneliti dan menilai bioekivalensi produk Tablet Onofin-K® dengan obat komparator
NIZORAL® dengan berdasarkan pada penentuan konsentrasi senyawa aktif asal (unchanged
compound) dan/atau metabolit.

3. INFORMASI OBAT
3.1 OBAT UJI
Nama obat : Tablet Onofin-K®
Komposisi : Ketokonazol 200 mg
Ukuran Bets : Skala Industri
No. Batch : 2652
Produksi : November 2002
Kedaluwarsa : November 2004
Produsen : Farmacéuticos Rayere S.A., Kota Meksiko, Meksiko.
3.2 OBAT KOMPARATOR
Nama obat : Tablet Nizoral®
Komposisi : Ketokonazol 200 mg
Ukuran Bets : Skala Industri
No. Batch : 1HDX5
Produksi : Agustus 2004
Kedaluwarsa : Agustus 2006
Produsen : Janssen-Cilag, S.A. Puebla, Meksiko.
3.3 DATA EKIVALENSI FARMASETIK
Obat uji (Tablet Onofin-K) dan Obat referensi (Nizoral) memiliki bahan aktif
yang identik, baik secara jenis, kekuatan, bentuk sediaan serta jalur penghantaran. Kedua
obat memiliki zat aktif yang sama yakni ketokonazol, kekuatan obat yang sama yakni 200
mg, bentuk sediaan yang sama yakni tablet konvensional dan jalur penghantaran yang sama
yakni secara oral.
3.4 UJI DISOLUSI TERBANDING
1. Parameter Uji Disolusi

9
 Uji Disolusi dilakukan dengan mengukur filtrat larutan uji menggunakan medium
disolusi 900 mL. Medium Disolusi bisa dengan larutan HCL pH 1.2, Dapar asetat pH 4.5,
atau dapar fosfat 6,8. Disolusi dilakukan dengan alat tipe 2 (paddle) yang kecepatannya
sebesar 50 rpm selama 45 menit (BPOM, 2015)
2. Parameter Kerja HPLC atau spektrofotometer
Bioavailabilitas ketokonazol juga dipelajari dengan metode HPLC. Untuk metode HPLC
digunakan hubungan konsentrasi sampel dan respon detektor (area puncak dan
ketinggian). Untuk hubungan linieritas, kurva kalibrasi harus digambar. Penting untuk
menggunakan sejumlah standar yang memadai untuk mendefinisikan hubungan antara
respon dan konsentrasi.

4. RENCANA PENELITIAN
4.1 DESAIN PENELITIAN KLINIS
4.1.1 Desain Penelitian
Desain penelitian menggunakan crossover design dengan dua perlakuan, dua periode, dua
urutan, double-blind, dan secara acak pada 24 relawan wanita yang sehat.
4.1.2 Kondisi Penelitian
Penelitian dilakukan dengan kondisi puasa. Makan malam dilakukan pada pukul 08.00 pm
dan puasa semalaman selama 12 jam sebelum pemberian obat.
4.1.3 Kriteria Inklusi, Kriteria Eksklusi dan Batasan Aktivitas
a. Kriteria Inklusi
- Subyek berumur antara 18-45 tahun.
- Berat badan dalam kisaran normal (IMT = 18-25 kg/m2).
- Subyek sehat berdasarkan pemeriksaan fisik, klinis/laboratorium dan riwayat
kesehatan.
- Tekanan darah sistolik 90-120 mmHg, tekanan darah diastolik 60-80 mmHg;
- Denyut nadi normal 60-100 bpm.
- Memiliki hasil pemeriksaan EKG normal.
- Memiliki hasil pemeriksaan rontgen dada normal.
- Bersedia menandatangani informed consent.
b. Kriteria Eksklusi

10
 - Riwayat hipersensitivitas terhadap obat yang diuji dan golongannya.
- Perokok berat (merokok > 10 batang per hari).
- Wanita hamil.
- Wanita menyusui.
- Ketergantungan alkohol atau obat-obatan.
- Gangguan absorpsi usus dan diare.
- Gangguan fungsi hati dan ginjal.
- Hasil tes serologi positif untuk HBsAg, anti-HCV, anti-HBV, anti-HAV dan
anti-HIV pada saat screening.
- Mendonasikan atau kehilangan darah 500 mL (atau lebih) dalam waktu 3 bulan
sebelum hari pertama obat diberikan.
- Mengikuti studi klinik/uji bioekivalensi lain dalam waktu 3 bulan menjelang
studi dilaksanakan.
- Mengonsumsi obat lain apapun selama 2 minggu sebelum penelitian.
- Mengonsumsi alkohol, kopi, teh, kola, coklat atau jus buah selama 24 jam
sebelum penelitian.
c. Batasan Aktivitas
Hanya diperbolehkan berbicara, menonton televisi, atau membaca hingga 4 jam
setelah pemberian obat (kecuali ketika pengambilan darah dan ke toilet). Empat
jam setelah pemberian obat subyek diperbolehkan melakukan aktivitas ringan
(sholat, makan dan mandi) atau berbaring.
4.1.4 Standardisasi Kondisi Subyek
- Subyek tidak boleh minum obat apapun sejak dua minggu sebelum penelitian
dimulai dan selama penelitian berlangsung sampai selesai sampling terakhir
(kecuali obat uji yang diberikan sesuai jadwal).
- Subyek berpuasa selama 12 jam sebelum pemberian obat.
- Subyek tidak boleh mengonsumsi makanan dan minuman yang dapat
mempengaruhi disposisi obat (seperti alkohol dan minuman ringan yang
mengandung kafein) sekurang-kurangnya 24 jam sebelum pemberian obat dan
selama sampling.

11
 - Subyek diminta untuk menginap satu malam sebelum penelitian berlangsung dan
dikarantina setelah pemberian obat, lamanya tergantung titik terakhir sampling.
- Pemberian menu makanan yang terkontrol jumlah kalorinya (500-800 kalori)
setelah pemberian obat. Semua subyek akan menerima menu makanan yang
seragam pada setiap periode.
4.1.5 Pemberian Obat
Obat diberikan dalam keadaan puasa pada pagi hari dan dalam posisi duduk dengan 250 mL
air, jus jeruk dan sarapan.
4.1.6 Kriteria Penghentian Subyek (Drop-Out)
- Terjadi efek samping yang berat.
- Muntah dalam kurun waktu kurang dari 4 jam setelah pemberian obat
uji/komparator.
- Diare dengan frekuensi buang air besar >3 kali sehari.
- Tidak mematuhi protokol mengenai diet, alkohol atau obat-obatan.
- Hamil sebelum pelaksanaan uji bioekivalensi.
- Permintaan subyek.
4.1.7 Pemeriksaan Kesehatan
Sehat merupakan salah satu persyaratan kriteria inklusi dinilai terutama menyangkut fungsi
saluran cerna, fungsi jantung, fungsi hati dan fungsi ginjal yang akan diperiksa melalui
pemeriksaan fisik, klinis/laboratorium (hematologi lengkap, fungsi hati, fungsi ginjal, gula
darah), EKG, Rontgen dada dan riwayat penyakit. Selain itu, dilakukan tes serologi untuk
HBsAg, anti-HCV, anti-HBV, anti-HAV dan anti-HIV. Khusus untuk subyek wanita, uji
kehamilan akan dilakukan pada saat screening, dan sebelum minum obat pada setiap periode.
4.1.8 Subyek Penelitian dan Jumlah Subyek
Subyek penelitian merupakan 24 orang wanita sehat yang telah menandatangani informed
consent setelah menerima penjelasan secara detail mengenai penelitian studi bioekivalensi
yang akan dilakukan, termasuk larangan dan rasa yang kurang nyaman yang mungkin
timbul akibat penggunaan obat.
4.1.9 Sampel dan Waktu Sampling
Sampel darah diambil melalui kanula pada 0 jam (sebelum pemberian) dan pada 0,25; 0,5;
0,75; 1; 1,5; 2; 2,5; 3; 4; 6; 9 dan 12 jam setelah pemberian dosis. Sampel dikumpulkan

12
dalam tabung yang mengandung heparin dan disentrifugasi pada 4000 rpm selama 10 menit
pada 4°C, kemudian plasma dipisahkan dalam cryovial berlabel dan dibekukan pada -70°C
sampai analisis kromatografi.
4.1.10 Volume darah
Sampel darah sebanyak 5 mL dalam tabung yang mengandung heparin.
4.1.11 Pemantauan Kondisi Subyek
- Makanan dan minuman yang dikonsumsi.
- Tanda vital (vital sign) subyek, yaitu tekanan darah, denyut nadi, suhu tubuh, dan
laju pernapasan, serta timbulnya kejadian tidak diinginkan.
4.2 TATALAKSANA PENELITIAN
4.2.1 Pemilihan Dosis
Dalam tiap periode, subjek diberikan obat uji atau obat komparator sebanyak 2 tablet (400
mg) dalam dosis tunggal.
4.2.2 Identitas Pemberian Produk Pengujian
Obat uji disebut dengan Test dan dan obat komparator disebut dengan Reference.
4.2.3 Randomisasi
Kelompok perlakuan seimbang dan memiliki jumlah relawan yang sama yang
didistribusikan secara acak ke dalam urutan administrasi produk. Blinded referensi dan
produk uji menggunakan kode identifikasi untuk fase klinis dan analitis penelitian.
Penguraian kode (Decoding) dilakukan sebelum analisis statistik.
4.2.4 Ketersamaran (Blinding)
Subyek tidak mengetahui obat apa yang dikonsumsi pada setiap periode pemberian obat.
Pada saat minum obat, subyek tidak memiliki kesempatan untuk bisa mengidentifikasi obat
mana yang diminum. Obat uji dan obat komparator disamarkan untuk menjamin pengujian
dilaksanakan secara acak dan bebas dari bias.
4.2.5 Periode Washout
Periode washout berlangsung selama 1 minggu pada tiap periode.
4.2.5 Volume Air yang Diminum
Obat diberikan dengan 250 mL air.

13
4.3 PENCATATAN KLINIS DAN KEAMANAN
Kejadian tidak diinginkan yang bersifat serius akan dilaporkan kepada sponsor, komite
etik, dan Badan POM dalam kurun waktu 1 x 24 jam, diikuti dengan laporan tertulis yang
terperinci dalam 5 hari kerja.
4.4 PARAMETER FARMAKOKINETIK
4.4.1 Definisi
Parameter farmakokinetik dalah besaran yang diturunkan secara matematik dari
hasil pengukuran kadar obat atau metabolitnya didalam darah atau urin. Parameter
farmakokinetik ditentukan dari perhitungan secara matematis dari dari data kinetika obat
yang berasal dari plasma atau urin yang telah diberi obat melalui berbagai rute pemberian,
baik secara ekstravaskuler dan intravaskuler.
4.4.2 Cara Penentuan
Parameter farmakokinetik ditentukan oleh penilaian data non kompartemen dengan
program komputer WinNonlin (WinNonlin Version 3.1). Waktu paruh eliminasi (T1/2),
Area undercurve yang diektrapolasi (AUC0-∞ ), dan AUC0-t didapatkan dari hasil output
perangkat lunak. Konsentrasi maksimum (Cmax) dan Waktu Cmax (Tmax) diperoleh secara
eksperimental dengan observasi.
4.5 ANALISIS STATISTIK DAN INTERPRETASI DATA
4.5.1 Analisis Data Transformasi Log (Cmaks, AUC0-t, AUC0-∞)
Parameter farmakokinetik utama, yaitu Cmaks, AUC0-t, AUC0-∞ dianalisis
berdasarkan perhitungan 90% confidence interval atau confidence limit interval
(CLI) untuk rasio parameter farmakokinetik obat uji terhadap obat komparator.
Nilai Cmaks, AUC0-t, AUC0-∞ ditransformasi ke dalam bentuk desimal logaritmik,
kemudian dianalisis dengan metode analisis variansi dua arah dengan batas
kebermaknaan 5% (two-way ANOVA, α = 5%).
4.5.2 Analisis Data Tmaks
Parameter farmakokinetik dihitung dengan mempertimbangkan data plasma, dosis
ekstravaskular tunggal dalam model non-kompartemen, menggunakan perangkat
lunak WinNonlin versi 3.1
4.5.3 Analisis Data T1/2

14
 Parameter farmakokinetik dihitung dengan mempertimbangkan data plasma, dosis
ekstravaskular tunggal dalam model non-kompartemen, menggunakan perangkat
lunak WinNonlin versi 3.1
4.5.4 Power
Power merupakan probabilitas untuk menerima bioekivalensi dengan benar. Nilai
power yang diambil adalah 80% (dua arah).
4.5.5 Kriteria Penilaian Bioekivalensi
Obat uji disimpulkan bioekivalen dengan obat komparator apabila hasil
perhitungan CLI untuk parameter UTAMA berada di dalam rentang antara
80,00% dan 125,00%.
4.6 METODE ANALISIS DAN VALIDASI
4.6.1 Metode Deteksi
Konsentrasi Ketokonazol dalam plasma ditentukan dengan menggunakan metode
HPLC dengan detektor UV-Vis pada rentang 400 - 14000 ng/mL.
4.6.2 Deskripsi Metode
a. Preparasi Sampel
200 µl sampel plasma dimasukkan ke dalam tabung mikrosentrifugasi 1.5 mL
kemudian ditambahkan 300 µl asetonitril (4°C)untuk deproteinasi, kemudian
sampel di vortex selama 30 detik pada kecepatan tinggi selanjutnya sampel di
sentrifugasi pada 17500 x g selama 5 menit kemudian supernatan diambil dan
dipindahkan ke tabung HPLC
b. Sistem Kromatografi
Semua pelarut yang digunakan adalah HPLC grade Pelarut dan reagen kimia
lainnya berasal dari J.T. Baker (Divisi Mallinckrodt, Xalostoc, Mexico).
Standar ketokonazol diperoleh dari Rayere Pharmaceuticals, Mexico. Sistem
HPLC berasal dari Waters Co. (MA, USA) dan terdiri dari solvent delivery
binary pump (mod. 1525), autosampler (mod. 717), detektor UV-VIS (mod.
2487) dan (Methaterm, Methachem. Tech., Inc.). Integrasi dilakukan dengan
menggunakan perangkat lunak MillenniumⓇ 32 (Waters Co.).
Pemisahan kromatografi dilakukan dengan menggunakan XTerraⓇ MS C18,
4.6 x 100 mm, kolom partikel 5 mm (Waters). Fase gerak terdiri dari 0,05 M

15
 disodium hidrogen ortofosfat dan asetonitril (50:50 v/v) disesuaikan hingga
pH 6.0 dengan asam asetat glasial. Sebanyak 50 ml supernatan diinjeksikan ke
dalam sistem HPLC dan analisis dijalankan pada kecepatan aliran 1,5
ml/menit, suhu autosampler dipertahankan pada 15°C, suhu kolom dikontrol
pada 30°C dan detektor ditetapkan pada 240 nm . Sampel dihitung
menggunakan tinggi puncak vs konsentrasi dalam model regresi log-log.
4.6.3 Validasi Metode Analisis
Kurva kalibrasi standar dibuat dengan spiking drug-free human pool plasma
dengan konsentrasi ketokonazol 400, 1000, 4000, 8000, 12000 dan 16000 ng/ml.
Larutan stok ketokonazol dibuat setiap minggu dengan melarutkan 10 mg standar
ketokonazol dalam 10 ml metanol untuk mencapai konsentrasi 1000 µg/ml;
larutan ini dipertahankan pada 4°C. Larutan kerja Ketokonazol dibuat setiap hari
dengan pengenceran 1:10 larutan stok dengan air kadar ultra murni (18
megaohm.cm). Titik kontrol kualitas pada level rendah, sedang dan tinggi (2000,
6000 dan 10000 ng/ml) digunakan untuk menentukan recovery absolut serta
within-day dan between-day presisi dan akurasi. Stabilitas, batas kuantifikasi dan
selektivitas juga dievaluasi.
4.7 DATA QUALITY ASSURANCE
Ada beberapa data yang perlu dikumpulkan oleh bagian departemen QA dalam penelitian
bioekivalensi ini, yaitu sebagai berikut:
4.7.1 Sebelum Uji Bioekivalensi
1. Dokumen
2. Proses informed consent dan screening
3. Randomisasi dan dispensing sampel obat uji dan komparator
4. Penyiapan bahan-bahan dan alat yang digunakan selama proses, termasuk pelabelan
4.7.2 Selama Uji Bioekivalensi
1. Pemberian sampel obat kepada subjek
2. Pengambilan dan penanganan sampel biologis
3. Pemantauan diet, waktu tidur, aktivitas, dan kondisi vital subjek
4.7.3 Setelah Uji Bioekivalensi

16
 1. Pelaporan kejadian tidak diinginkan yang terjadi selama uji bioekivalensi
berlangsung kepada sponsor dan komite etik.
2. Proses analisis sampel.
3. Kesesuaian data sumber dengan kromatogram uji bioekivalensi, Formulir Laporan
Kasus/Case Report Form (CRF), dan Laporan uji Bioekivalensi.
4. Perhitungan data statistik.

5. SUMBER ACUAN
1. Marcelín-Jiménez G, Hernández J, Angeles AP, Contreras L, Hinojosa M, Rivera L,
Martínez-Rossier L, Amancio O, Fernández A. Bioequivalence evaluation of two
brands of ketoconazole tablets (Onofin-K and Nizoral) in a healthy female Mexican
population. Biopharm Drug Dispos. 2004 Jul;25(5):203-9. doi: 10.1002/bdd.399. PMID:
15248189.

6. RIWAYAT REVISI

Revisi Tgl Efektif Deskripsi

01 20 Oktober 2020 -

17