Bundel Ddma Muhammad Riski 05061282025024 Thi A

LAPORAN TETAP
PRAKTIKUM DASAR-DASAR MIKROBIOLOGI AKUATIK
Muhammad Riski
05061282025024
TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN

FAKULTAS PERTANIAN
UNIVERSITAS SRIWIJAYA
2021
HALAMAN PENGESAHAN
LAPORAN TETAP
PRAKTIKUM DASAR-DASAR MIKROBIOLOGI AKUATIK
Sebagai Salah Satu Syarat Untuk Mengikuti Ujian Akhir Praktikum Dasar-dasar
Mikrobiologi Akuatik
Muhammad Riski 05061282025024
Indralaya, April 2021

Asisten I Asisten II
Cindy Oktaviana Nur Ihza Baharudin

05061281924046 05061281924025
Nia Novita Tamara

050611823052 Mengetahui,
Dosen Koordinator Praktikum Dasar-dasar Teknologi Hasil Perikanan
Puspa Ayu Pitayati, S.Pd., M.Si

NIP: 193604122019032011
i
KATA PENGANTAR
Puji syukur kehadirat allah swt yang telah memberikan rahmat dan hidayah-
nya sehingga kami dapat menyelesaikan laporan dasar-dasar mikrobiologi akuatik
ini tepat pada waktunya. Adapun tujuan dari penulisan dari makalah ini adalah
untuk memenuhi standar nilai pada mata kuliah dasar-dasar mikrobiologi
akuatik. Selain itu, laporan ini juga bertujuan untuk menambah wawasan tentang
dasar-dasar mikrobiologi akuatik bagi para pembaca dan juga bagi penulis.
Kami mengucapkan banyak terima kasih kepada asisten dosen dasar-dasar
mikrobiologi akuatik selaku pembimbing praktikum dasar-dasar
mikrobiologi akuatik yang telah memberikan tugas ini sehingga dapat menambah
pengetahuan dan wawasan sesuai dengan bidang studi yang saya tekuni. Kami juga
mengucapkan terima kasih kepada semua pihak yang telah membagi sebagian
pengetahuannya sehingga kami dapat menyelesaikan laporan ini.
Kami menyadari, laporan yang kami tulis ini masih jauh dari kata sempurna.
Oleh karena itu, kritik dan saran yang membangun akan kami nantikan demi
kesempurnaan makalah ini.
Dengan demikian penulis mengucapkan banyak terima kasih.
Indralaya, April 2021
Muhammad Riski
ii
DAFTAR ISI
Halaman
HALAMAN JUDUL .....................................................................................
HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... i
KATA PENGANTAR .................................................................................... ii
DAFTAR ISI .................................................................................................. iii
INSTRUMEN LABORATORIUM MIKROBIOLOGI
BAB 1 PENDAHULUAN
1.1. Latar belakang ........................................................................................... 1

1.2. Tujuan ...................................................................................................... 2
BAB 2 TINJAUAN PUSTAKA .....................................................................
2.1. Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi ..................................................... 3
2.2. Bahan Kimia Laboraturium Mikrobiologi ............................................... 4
2.3. NaOH ........................................................................................................ 5
2.4. Alkohol...................................................................................................... 6
2.5. Colony Counter ......................................................................................... 7
2.6. Erlenmeyer ................................................................................................ 8
BAB 3 PELAKSANAAN PRAKTIKUM .....................................................
3.1. Waktu dan Tempat .................................................................................... 9
3.2. Alat dan Bahan .......................................................................................... 9
3.3. Prosedur Kerja ........................................................................................... 9
BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................
4.1. Hasil .......................................................................................................... 10
4.2 Pembahasan ................................................................................................ 20
iii
BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN ..........................................................
5.1 Kesimpulan ................................................................................................ 22
5.2. Saran .......................................................................................................... 22
STERILISASI ALAT
BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................
1.1.Latar belakang ............................................................................................ 24

1.2.Tujuan ........................................................................................................ 25
2.1. Pengertian Sterilisasi ................................................................................. 26
2.2. Macam-Macam Alat sterilisasi ................................................................. 27
2.3. Sterilisasi Fisika ........................................................................................ 28
2.4. Sterilisasi Kimia ........................................................................................ 29
2.5. Sterilisasi Mekanik .................................................................................... 30
2.6. Autoklaf .................................................................................................... 31
3.1. Waktu dan Tempat .................................................................................... 32
3.2. Alat dan Bahan .......................................................................................... 32
3.3. Prosedur Kerja ........................................................................................... 32
4.1. Hasil .......................................................................................................... 33
4.2. Pembahasan ............................................................................................... 35
5.1. Kesimpulan ............................................................................................... 36
5.2. Saran .......................................................................................................... 36
iv
PREPARASI MEDIA KULTUR JAMUR DAN BAKTERI
BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................
1.1.Latar Belakang ........................................................................................... 38

1.2. Tujuan ...................................................................................................... 39
2.1. Pengertian Media ...................................................................................... 40
2.2. Pengertian Mikroorganisme ...................................................................... 41
2.3. Potato Dextrose Agar (PDA) ................................................................... 42
2.4. Typtic Soy Agar (TSA) .............................................................................. 43
2.5. Nutrient Agar (NA) ................................................................................... 44
2.6. Trypticase Soy Broth (TSB) ...................................................................... 45
3.1. Waktu dan Tempat.................................................................................... 46
3.2. Alat dan Bahan.......................................................................................... 46
3.3. Prosedur Kerja........................................................................................... 46
4.1. Hasil .......................................................................................................... 47
4.2. Pembahasan ............................................................................................... 48
5.1. Kesimpulan ............................................................................................... 49
5.2. Saran .......................................................................................................... 49
METODE ISOLASI DAN KULTUR JAMUR
BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................
1.1.Latar Belakang ........................................................................................... 51

1.2.Tujuan ........................................................................................................ 52
2.1. Isolasi Kultur Jamur .................................................................................. 53
v
2.2. Metode Gores ............................................................................................ 54
2.3. Metode Tuang Dan Sebar ......................................................................... 55
2.4. Tempe........................................................................................................ 56
2.5. Ikan Asin ................................................................................................... 57
3.1. Waktu dan Tempat .................................................................................... 58
3.2. Alat dan Bahan .......................................................................................... 58
3.3. Prosedur Kerja .......................................................................................... 58
4.1. Hasil........................................................................................................ 59
4.2. Pembahasan ............................................................................................... 60
5.1. Kesimpulan ............................................................................................... 61
5.2. Saran .......................................................................................................... 61
METODE ISOLASI DAN KULTUR BAKTERI
BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................
1.1.Latar Belakang ........................................................................................... 63

1.2.Tujuan ........................................................................................................ 64
2.1. Isolasi Kultur Bakteri ................................................................................ 65
2.2. Metode Gores ............................................................................................ 66
2.3. Metode Tuang dan Sebar .......................................................................... 67

2.4. Air Mineral ................................................................................................ 68
2.5. Air Comberan ............................................................................................ 69
3.1. Waktu dan Tempat ...................................................................................70
3.2. Alat dan Bahan .........................................................................................70
vi
3.3. Prosedur Kerja ............................................................................................ 70
4.1. Hasil ........................................................................................................... 72
4.2. Pembahasan ................................................................................................ 74
5.1. Kesimpulan ................................................................................................ 75
5.2. Saran .............................................................................................................75
PERHITUNGAN COLONY BAKTERI
BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................
1.1.Latar Belakang ........................................................................................... 77

1.2.Tujuan ........................................................................................................ 78
2.1. PCA (Plate Count Agar)............................................................................ 79
2.2. Karakteristik Bakteri ................................................................................. 80
2.3. Colony Counter ......................................................................................... 81
2.4. SNI Bakteri .............................................................................................. 82
3.1. Waktu dan Tempat.................................................................................. 83
3.2. Alat dan Bahan ....................................................................................... 83
3.3. Prosedur Kerja.......................................................................................... 83
4.1. Hasil.......................................................................................................... 84
4.2. Pembahasan............................................................................................... 85
5.1. Kesimpulan............................................................................................... 86
5.2. Saran....................................................................................................... 87
DAFTA PUSTAKA.................................................................................... 88
vii
INSTRUMEN LABORATORIUM MIKROBIOLOGI
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang

Mikrobiologi adalah ilmu pengetahuan tentang perkehidupan makhluk-
makhluk kecil yang hanya kelihatan dengan mikroskop (bahasa yunni : mikros =
kecil, bios = hidup, logos = kata atau ilmu ). Makhluk-makhluk kecil itu disebut
mikroorganisme, mikroba, protista atau jasad renik. Antoni Van Leeuwenhoek
(1632-1723) ialah orang yang pertaa kali mengetahui adanya dunia mikroorganisme
itu. Dengan mikroskop ciptaannya ia dapat melihat bentuk makhluk- makhluk kecil
yang sebeumnya itu tidak diduga sama sekali keadaannya (sudaryanto, 1998).
Mikrobiologi ditripkan sebagai ilmu yang mempeajari makhluk hidup berukuran
mikroskopis meliputi bakteri, algae, protozoa, fungi dan virus. Mikrobiologi dapat
dipndang sebagai ilmu dsar yang mempelajari tentang biologi dan mikroba seperti,
fisiologi, taksonomi, ekolog i, dan genetika mikroba serta dapat berperan sebagai
ilmu terapan antara lain mikrobiologi pertanian. Mikrobiologi adalah kaajin tentang
makhluk hidupp (organisme) berukuran kecil untuk daapat dilihat dengan mata
telanjang. Mikroorganisme meliputi protozoa, algae(ganggang), fngi(jamur),
lichenes, bakteri, dan virus. Keseluruhan mikroorganisme tersebut berpengaru
penting pada pertanian (Adanus,2000).
Mikrobiologi dimulai sejak ditemukannya mikroskop dn menjadi bidang yng
sangat penting dalam biologi. Laboraturium mikrobiologi memiliki banyak alat-alat
yang perlu diketahui fungsinya, prinsip dan cara penggunaannya. Misalnya saja
mikroskop yang merupakan alat utama yang sering digunakan di laboraturium
mikrobiologi. Selain peralatan gelas tersebut pada laboraturium mikrobioloi masih
ada sejumlah alat khususnya antara lain autokla” ee, o”en, mikroskop, jarum ose ,
gelas objek, gelas penutup, inkubator, lamina air flow. Dalam menggunakan alat
laboraturium ini, harus sesuai dengan aturan dan fungsi agar tidak mudah rusak,
oleh karena itu awali dengan pengenalan laboraturium terlebih dahulu.
1
Universitas Sriwijaya
Peralatan yang ada dilaboraturium juga dapat mengakibatkan bahaya. Tak
jarang beresiko tinggi bagi praktikum yang sedang melakukan praktikum jika tidak
mengetahui cara dan prosedur penggunaan alat yang akan digunakan. Sebelum alat-
alat dan bahan digunakan dalam praktikum harus di lakukan sterilisasi terlebih
dahulu. Sterilisasi merupakan suatu usaha atau proses untuk membebaskan alat-
alat, bahan dan kemasan dari segala bentuk kehidupan terutama dari
mikroorganisme. Teknik ini merupakan teknik aseptic. Steriisasi alat-alat
pengolahan umuumnya menggunakan panas, baik sterilisasi udara kering maupun
strerilisasi uap air panas. Sterilisasi kering menggunakan oven pada suhu 170-
1800 C selama 2 jam untuk alat-alat gelas (botol, tabung reaksi, cawan Petri, dll)
dan bahan-bahan seperti kapas, kain, kertas. Alat-alat yang akan disterilisasi kering
harus dibungkus kertas agar tidak mengalami kegosongan dan kerusakan pada alat.
Sterilisasi basah dapat dilakukan dengan cara perebusan (suhu 1000 C, selama 5-
10 menit), blansing (suhu 70-850 C selama 7-9 menit) dan menggunakan autoclave,
yaitu alat yang menggunakan uap air jenuh bertekanan 1 atmosfer (1 atm) pada suhu
1210 C selama 15 menit.
1.2.Tujuan
Tujuan praktikum ini adalah untuk memperkenalkan instrumen yang biasa
digunakan untuk kegiatan mikrobilogis baik fungsi maupun penggunaannya.
2
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi

Alat-alat yang digunakan di dalam laboratorium untuk praktikum
mikrobilogi pada dasarnya terbagi menjadi jenis gelas dan mekanik. Peralatan gelas
contohnya tabung erlenmeyer, sedangkan peralatan mekanik contohnya autoklaf.
Pada saat di laboratorium, para laboran mengetahui teknik-teknik dasar di
laboratorium, diantaranya adalah mengetahui cara-cara menggunakan alat-alat
laboratorium dan membersihkannya setelah digunakan sangatlah penting sebelum
seorang laboran melakukan penelitiannya guna mencegah hal-hal yang tidak
diinginkan. Laboratorium Mikrobiologi harus mempunyai sejumlah alat yang dapat
menunjang proses praktikum dan penelitian di dalamnya. Alat-alat tersebut antara
lain autoklaf, oven, spektrofotometer, sentrifugator, inkubator statis, shaker
incubator atau inkubator kocok, waterbath shaker incubator, desikator, transfer box,
anaerobic jar, dan vorteks (Adams, 2000).
Autoklaf adalah sebuah alat yang digunakan untuk melakukan sterilisasi
dengan memanfaatkan panas uap air di bawah tekanan. Autoklaf dapat digunakan
untuk sterilisasi kultur media, jarum suntik, dan larutan yang termostabil
(Cappuccino & Sherman, 2001). Oven adalah alat yang digunakan pula dalam
melakukan sterilisasi. Spektrofotometer adalah alat yang dapat digunakan untuk
mengukur tingkat kekeruhan suatu sampel kultur. Sentrifugator adalah alat yang
digunakan untuk mempelajari struktur dan fungsi suatu komponen sel. Prinsip
kerjanya adalah dengan memisahkan atau memfraksionasi setiap komponen sel
berdasarkan berat jenis dari tiap komponen sel. Inkubator adalah alat yang
digunakan untuk menginkubasi atau mengerami suatu biakan. Desikator adalah alat
yang menjaga suatu material dalam kondisi kering dan menjauhkannya dari uap air.
Microbiological safety cabinet (MSC) adalah suatu tempat atau ruangan yang
didesain untuk memproteksi suatu pekerjaan dari kontaminasi, contohnya adalah
transfer box atau laminar flow. Vorteks merupakan alat yang digunakan untuk
mencampur sejumlah bahan dalam suatu botol (Badrut, 2016).
3
2.2. Bahan Kimia Laboratorium Mikrobiologi
Bahan kimia yang ada di lab jumlahnya relatif banyak seperti halnya jumlah
peralatan. Di samping jumlahnya cukup banyak juga bahan kimia dapat
menimbulkan resiko bahaya cukup tinggi, Di antara begitu banyaknya bahan kimia
yang digunakan di laboratorium, tak jarang Anda akan bergelut dengan bahan kimia
yang terbilang berbahaya. Karena ancaman, Anda harus melihat bahan kimia apa
saja yang berbahaya di laboratorium dan bagaimana dampaknya bagi
kesehatan.Dengan melihat macam-macam bahan kimia yang berbahaya di
laboratorium, maka Anda akan lebih berhati-hati saat bekerja dengan menggunakan
bahan tersebut seperti, Amonia, asam sulfat, asam klorida, formalin, natrium
hidroksida, dan klorofrom. oleh karena itu dalam pengelolaan lab aspek
penyimpanan, penataan dan pemeliharaan bahan kimia merupakan bagian penting
yang harus diperhatikan. Hal umum yang harus menjadi perhatian di dalam
penyimpanan dan penataan bahan kimia diantaranya meliputi aspek pemisahan
(segregation), tingkat resiko bahaya (multiple hazards), pelabelan (labeling),
fasilitas penyimpanan (storage facilities), wadah sekunder (secondary
containment), bahan kadaluarsa (outdate chemicals), inventarisasi (inventory), dan
informasi resiko bahaya (hazard information). Penyimpanan dan penataan bahan
kimia berdasarkan urutan alfabetis tidaklah tepat, kebutuhan itu hanya diperlukan
untuk melakukan proses pengadministrasian (Purwanti, 2009).
Sterilisasi adalah suatu proses untuk mematikan semua organisme yang
terdapat dalam suatu benda (alat ataupun bahan). Tujuan sterilisasi dalam
mikrobiologi adalah mematikan, menghambat pertumbuhan dan menyingkirkan
semua mikroorganisme yang ada pada alat dan bahan yang akan digunakan dalam
suatu pekerjaan guna menciptakan suasana aseptis. Secara umum sterilisasi dapat
dilakukan dengan 3 metode: mekanis, fisis dan ataupun secara kimia. Sterilisasi
mekanis diantaranya menggunakan microfillter, fisis terbagi menjadi 2 penyinaran
dan pemanasan, sedangkan kimia adalah dengan menggunakan bahan kimia
(desinfektan). 5 Bahan, alat dan meja kerja yang akan digunakan dalam praktek di
laboratorium mikrobiologi harus melalui tahap sterilisasi terlebih dahulu, hal ini
bertujuan supaya pekerjaan dikerjakan secara aseptis atau terbebas dari mikroba
pencemar yang tidak diinginkan (Wenny, 2018).
4
2.3. Naoh
Natrium hidroksida, juga dikenal sebagai lindi (lye) dan soda kaustik atau soda
api, adalah suatu senyawa anorganik dengan rumus kimia NaOH. Senyawa ini
merupakan senyawa ionik berbentuk padatan putih yang tersusun
dari kation natrium Na+ dan anion hidroksida OH−. Natrium hidroksida merupakan
bsa akali yang sangat kaustik, mampu menguraikan protein pada suhu lingkungan
biasa dan dapat menyebabkan luka bakar bila terpapar. Senyawa ini sangat larut
dalam air, dan dengan mudah menyerap kelembaban dan karbon dioksida dari
udara. Senyawa ini membentuk hidrat dengan rmus NaOH·nH2O.Senyawa
monohidratnya NaOH·H2O mengkristal dari larutan berair pada rentang suhu antara
12,3 hingga 61,8 °C. "Natrium hidroksida" yang tersedia secara komersial sering
kali merupakan senyawa monohidrat ini, dan data yang dipublikasikan mungkin
merujuk pada senyawa ini dan bukan senyawa anhidratnya. natrium hidroksida di
gunakan di banyak industri: dalam pembuatan pulp dan kertas, teksti, air minum,
sabun dan deterjen, dan sebagain pembersih larutan. Produksi di seluruh dunia pada
tahun 2004 kira-kira mencapai 60 juta ton, sedangka permintaan terhadap senywa
ini mencapai 51 juta ton (Haynes,2011).
Natrium hidroksida di produksi secarandustri sebagai larutan dengan
konsentrasi 50% melalui proses krolalkali elektrolitik. Gasklorin juga di produksi
dalam proses ini. Natrium hidroksida padat diperoleh dari larutan ini dengan
penguapan air. Natrium hidroksida padat paling sering di jual sebagai serpihan,
pelet,dan balok tuang. Pada tahun 2004, produksi dunia senyawa nnatrium
hidroksida diperkirakkan mencapai 60 juta ton, sementara permintaan terhadap
senyawa ini di perkiraan mencapai 51 juta ton dan lain sebagainya. Natrium
hidroksida adalah basa kuat yang populer digunakan daam industri. Natrium
hidroksida di gunakan dalam pembuatan garam natrium dan detergen, pengaturan
pH, dan sintesis organik. Minyak mentah dengan kualitas buruk dapat diolah
dengan natrium hidroksida untuk menghilangkan kotoran sulfur dalam proses yang
dikenal sebagai pencucian kaustik (William,2011).
5
2.4. Alkohol
alkohol (atau alkanol) adalah istilah yang umum untuk senyawa organik apa
pun yang memiliki gugus hidroksil (-OH) yang terikat pada atom karbon, yang ia
sendiri terikat pada atom hidrogen dan/atau atom karbon lain. Alkohol sering
dipakai untuk menyebut etannol, yang juga disebut gain alcohol, dan kadang untuk
minuman yang mengandung alkohol. Hal ini disebabkan karena memang etanol
yang digunakan sebagai bahan dasar pada minuman tersebut, bukan metanol, atau
grup alkohol lainnya. Begitu juga dengan alkohol yang digunakan dalam dunia
farmasi. Alkohol yang di maksud adalah etanol. Sebenarnya alkohol dalam ilmu
kimia memiliki pengertian yang lebih luas lagi. Kelas alkohol yang penting,
dimanametanol dan etanol adalah bagian yang paling sederhana, mencakup semua
senyawa yang memiliki rumus umum CnH2n+1OH. Entimologinya kata alkohol
berasal dari bahasa arab kohl yang berarti bubuk yang digunakan sebagai eyeliner.
Alkohol pada awalnya digunakn untuk bubuk yang sangat halus yang di produksi
melalui sublimasi mineral alami stibnit yuntuk membentuk antimon trisulfida
CnH2n+1OH (Metcalf, 1999)
Alkohol juga dapat digunakan sebagai pengawet untuk hewan koleksi
(yang ukurannya kecil). Alkohol dapat digunakan sebagai bahan bakar otomotif.
Etanol dan metanol dapat dibuat untuk membakar lebih bersih dibanding bensin
atau diasel. Alkohol dapat digunakan sebagai antibeku pada radiator. Alkohol juga
bisa dimanfaatkan untuk menambah penampilan mesin pembakaran dalam.
Metanol dapat disuntikan ke dalam mesin turbocharger dan supercharger, dan ini
akn mendinginkan masuknya udara kedalam pipa masuk, menyediakan massuknya
udara yang lebih padat (Allan A, 1999). Alkohol umumnya berwujud cair dan
memiliki sifat mudah menguap (voatil) tergantung pada panjang rantai karbon
utamanya (semakin pendek rantai C, semakin volatil).kelarutan alkohol dalam air
semakin rendah seiring bertambah panjangnya rantai hidrokarbon. Reaktifitas
alkohol diketahui dari berbagai reaksi seperti : reaksi oksidasi, reaksi pembakaran,
reaksi dengan asam alkanoat, reaksi dengan logam dan lain-lain. Manfaat alkohol
lainnya yaitu metanol / alkohol kayu digunakan sebagai pelarut, bahn bakar, tapi
berbahaya dapat merusak syaraf mata. Etanol digunakan sebagai pelarut, antseptik
(alkohol 70%), bahan dasar minum keras, dll (yulissetyo,2014).
6
2.5. Colony Counter
Colony Counter adalah unit digunakan dalam mikrobiologi untuk
memperkirakan jumlah yang layak bakteri atau jamur sel dalam sampel. Layak
didefinisikan sebagai kemampuan untuk berkembang biak melalui pembelahan
biner dalam kondisi yang terkendali. Penampilan visual koloni dalam kultur sel
memerlukan pertumbuhan yang signifikan, dan saat menghitung koloni tidak pasti
apakah koloni tersebut muncul dari satu sel atau sekelompok sel. Alat ini berfungsi
untuk mengkondisikan suhu bakteri antara 36°C – 38°C dan juga dapat digunakan
untuk menghitung koloni bakteri yang telah terbentuk. Bakteri yang akan di
kembangbiakkan harus diinkubasi terlebih dahulu, hal ini dilakukan agar bakteri
dapat hidup dan membentuk suatu koloni (Winarno et al., 1980).
Bakteri berasal dari kata Latin bacterium jamak adalah kelompok organisme
yang tidak memiliki membran inti sel. Beberapa kelompok bakteri dikenal sebagai
agen penyebab infeksi dan penyakit, sedangkan kelompok lainnya dapat
memberikan manfaat dibidang pangan, pengobatan, dan industri. Struktur sel
bakteri relatif sederhana, tanpa nukleus/inti sel, organel lain seperti mitokondria dan
kloroplas. Hal inilah yang menjadi dasar perbedaan antara sel prokariot dengan sel
eukariot yang lebih kompleks mikrobiologi. Colony counter adalah suatu alat yang
dapat digunakan untuk melakukan perhitungan sel secara cepat dan dapat
digunakan untuk konsentrasi sel yang rendah. Prinsip kerja alat ini yaitu mengontrol
suhu optimum bakteri secara stabil agar dapat berkembangbiak dan membentuk
suatu koloni. Pesawat ini menggunakan pemanasan elemen ( heater ) yang dikontrol
oleh suatu rangkaian kontrol suhu agar suhu tetap stabil. Heater akan bekerja pada
saat sensor suhu kurang dari setting suhu yang telah ditentukan, dan sebaliknya
apabila sensor suhu lebih besar dari setting suhu, maka secara otomatis heater akan
mati. Selain itu pesawat ini juga dapat digunakan untuk menghitung koloni
bakteri.Cawan petri yang berisi dengan koloni bakteri diletakkan pada ruang hitung
yang berada diatas inkubator bakteri. Pada ruang hitung berisi LED yang berfungsi
sebagai sumber cahaya agar objek yang akan dihitung lebih terlihat jelas. Diatas
ruang hitung terdapat LUP yang berguna untuk memperbesar penghilatan terhadap
objek (Hadioetomo, 1993).
7
2.6. Erlenmeyer
Erlenmeyer merupakan alat gelas yang banyak digunakan di laboratorium.
Bentuk Erlenmeyer mirip dengan gelas baker, tetapi mempunyai leher
yangmenyempit. Keuntungan erlenmeyer antara lain dapat mencegah zat cair
tumpahketika dalam proses penguapan serta dapat mengurangi penguapan zat cair
dalam proses pemanasan. Erlenmeyer biasanya digunakan untuk analisis
kuantitatifsecara volumetri (titrasi). Sebuah labu Erlenmeyer, juga dikenal sebagai
labu berbentuk kerucut, adalah jenis labu laboratorium yang banyak digunakan.
Memiliki tubuh berbentuk kerucut, leher silinder dan dilengkapi dengan dasar yang
datar. Alat ini dinamai menurut nama kimiawan asal Jerman Emil Erlenmeyer, yang
menciptakannya pada tahun 1860. Memiliki dasar yang lebar, dan sisi yang
melengkung ke atas, tentunya labu ini bisa dibangun dari plastik atau kaca, dalam
berbagai volume. Mulut labu erlenmeyer dapat mempunyai bibir manik-manik
yang dapat dihentikan menggunakan selembar kapas, karet bug atau gabus atau
jenis stopper lainya. Sebagai alternatif, leher erlenmeyer ini dilengkapi kaca ground
atau konektor lainnya yang digunakan dengan sumbat khusus (Muchtadi, 2010).
Leher yang sempit dan sisi yang meruncing pada labu ini akan memungkinkan
isi labu dicampur dengan cara diputar-putar, tanpa takut tertumpah, dengan begitu
sangat cocok untuk titrasi. Fitur seperti ini juga membuat labu sesuai digunakan
untuk cairan mendidih. Uap panas yang mengembun pada bagian atas labu, akan
mengurangi kehilangan pelarut. Pada dasarnya labu erlenmeyer ini digunakan
sebagai alat untuk mengukur, menyimpan, dan mencampur cairan. Alat
laboratorium yang satu ini merupakan salah satu alat paling umum yang digunakan
di dalam laboratorium kimia. Secara umum, labu erlenmeyer ini banyak digunakan
karena memiliki beberapa fungsi, diantaranya adalah untuk mengukur serta
mencampur bahan-bahan analisa, tempat untuk melakukan titrasi bahan, sebagai
wadah untuk menampung larutan, bahan yang padat maupun caran, meraci dan
melarutkan ( menghomogenan) bahan-bahan komposisi media, erlenmeyer tanpa
tutup asah yang digunakan untuk titrasi dengan pengocokan lemah hingga sedang,
erlenmeyer dengan tutup asah hanya di gunakan untuk titrasi dengan pengocokan
kuat, yang dihubungkan dengan alat destilasi, alat kstraksi, dll (IBS,2019).
8
BAB 3
PELAKSANAAN PRAKTIKUM
3.1. Waktu dan Tempat

Praktikum Dasar-Dasar Mikrobiologi Akuatik dilaksanakan pada hari
Jumat tanggal 19 februari 2021 pada pukul 08.00 sampai dengan selesai,
dilaksanakan secara online melalui aplikasi tatap muka zoom.
3.2. Alat dan Bahan

Adapun alat dan bahan yang digunakan pada Praktikum Dasar-Dasar
Mikrobiologi Akuatik adalah laptop, handphone, buku tulis, pena.
3.3. Prosedur Kerja

Adapun prosedur kerja yang dilakukan pada praktikum ini sebagai berikut:
1. Pertama praktikan membuka link vidio yang telah diberikan asistensi.
2. Menonton dan menyimak dua video yang telah diberikan asistensi.
3. Praktikan terlebih dahulu memahami modul yang telah di berikan oleh asistensi
sebelum melakukan praktikum.
4. Pahami isi modul dan perhatikan baik-baik perintah yang ada di modul.
9
BAB 4
HASIL DAN PEMBAHASAN
4.1. Hasil
Adapun hasil dari praktikum Instrumen Laboratoriu Mikrobiologi ialah
sebagai berikut:
4.1.1. Peralatan yang umum digunakan di laboratoium mikrobiologi
No Nama alat Gambar alat fungsi Prosedur penggunaan
1. Auto Untuk Auto Clave
Clave mensterilkan menggunakan suhu
bahan,alat,ata dan tekanan tinggi
u instrumen sehingga
dengan memberikan
menggunaka kekuatan yang lebih
n metode besar untuk
penguapan membunuh sel di
dengan suhu bandingkan dengan
bertekanan udara panas biasa.
tinggi.
Cawan ini
2. Cawan Untuk
digunakan sebagai
Petri membiakan
wadah untuk
sel.
penyimpanan serta
dan pembuatan
kultur media.
Alat yang dapat

3. Mikroskop Untuk
memberikan
memperbesar
pembesaran
sehingga praktikan
bayangan.
dapat melihat
10
organism yang tak
kasat mata.
4. Spektrofo Untuk Alat yang

meter mengukur digunakan untuk
energy mengukur suatu
cahaya transmitan atau
secara absorban suatu
relative. sempel.
5. Jarum Untuk Alat yang

Enten mengambil digunakan untuk
biakan mengambil mikroba
Pungi/jamur berupa biakan atau
dan mikroba. pungi.
Untuk Penggunaan sumber

6. Timbanga
mengukur tegangan listrik
n analitik
masa suatu yaitu stalvolt dan
benda dilakukan
penerapan dengan
cara menaruh suatu
media diatasnya
maka akan tertera
angka yang
menunjukan masa
dari bahan tersebut.
11
7. Erlenmeye Untuk Alat yang
r meyimpan digunakan sebagi
dan tempat untuk
mereakikan mereaksikan larutan
larutan.. serta menyimpan
larutan untuk
jangka waktu yang
lama.
Untuk Alat yang

8. Bunsen
menciptakan digunakan untuk
kondisi yang membakar dan
steril. mensterilisaikan
dengan cara
menyalakanya
membakar bagian
sumbu Bunsen.
9. Jarum Ose Untuk Alat ini diguanakn

mengabil dan untuk
memindahka memindahkan/men
n kloni gambil kloni suatu
mikrobia. mikrobia dengan
cara ose
disentuhkan pada
bagian mikrobia
kemudian
menggosokannya
pada kaca preparat
untuk di amati.
12
10. Microwav Untuk Alat ini bekerja
e/pemanas memanaskan dengan gelombang
dan untuk elektromaknetik
mehomogenk yang menimbulkan
an sampel. panas dan getaran.
Untuk Alat ini berbentuk

11. Spatula
mengambil seperti halnya
bahan kimia sendok
yang kecil,pipih,bertangk
berbentuk ai.
padatan dan
di pakai
untuk
mengaduk
larutan.
12. Serologica Pipet yang Alat ini merupakan

digunakan jenis pipet steril
l pipatte
untuk kultur yang bekerja
sel. menggunakan
solusi steril.
Untuk Cara penggunaan

13. Bulb/Filler
menyedot alat ini
larutan. yaitu,menydotkan
larutan yang dapat
di pasang pada
pangkal pipet ukur.
13
14. Coloni Untuk Cara
Counter menghitung menggunakanya
jumlah sertelah On
koloni menyimpan cawan
mikroba dan petri didalamnya
juga yang berisi bakteri
ukurannya. atau jamur ke dalam
kamar
hitung,mengatur
alat penghitung
pada posisi 000 dan
mulai menghitung
dengan
menggunakan
penunjuk sambil
melihat jumlah pada
layar hitung.
15. Kaca Kaca Objek : Kaca Objek

Objek dan Untuk digunakan untuk
kaca menutup menutup objek dan
preprat objek Kaca kaca preparat Untuk
Preparat : meletakan objek.
Untuk
meletakan
objek.
Untuk Alat ini dapat

16. Waterbath
menciptakan mempertahankan
suhu air pada
14
suhu yang kondisi tertentu
konstan. selama selang
waktu yang di
tentukan.
Menggunakan
17. Spider/Bat Untuk
bagian yang
ang L menanam
berbentuk L untuk
mikroba.
menyebarkan
permukaan cairan.
Inkubasi media
18. Incubator Untuk
yang telah di
menyimpan
Tanami mikroba
medium sel
dan untuk
kultur.
menyimpan bahan
pemeriksaan
dimana mikroba
yang terkandung
akan mati bila di
simpan di dalam
lemari es.
Alat ini dugunakan

Untuk
19. Mikropipe untuk
memindahka
t memindahkan
n cairan
cairan dalam jumlah
dalam jumlah
yang mikro secara
yang kecil.
akurat.
15
20. Tabung Sebagai Alat ini dapat
Reaksi. tempat memanaskan media
mereaksikan yang ada di
larutan. dalamna serta
tempat
mereaksukan
larutan.
Tabel 4.1.2. Bahan kimia yang umum digunakan di laboratorium mikrobiologi

No Nama bahan Gambar bahan fungsi Prosedur penggunaan
1. Ammonium Sebagai Bahan ini juga di
nitrat Bahan gynakan sebagai
pembuata campuran bahan
n peledak.
pupuk.
2. Sianida Untuk Digunakan sebagai

melarutka bahan untu pelapisan
n logam. logam,
pembersihan logam dan
serta menghilangkan
emas dari bijinya.
16
Kalium Sebagai Pengunaan kaliun
3. Klorida bahan klorida ini dengan cara

tambahan menelan langsung obat
di dunia secara utuh tidak di
ksehatan. perkenankan
menggunkan sendok
dan diminum seuai
dosis yang di anjurkan
oleh dokter.
Peroksida Sebagai Diguanakan sebagai
4. Organik inisiator insiator raikal dan

untuk untuk membantu
beberapa polimerisasi krilat.
jenis
polimerisi
sasi
5. Karbit Digunaka Dalam dunia industri

n sebagai digunakan sebagai
las karbit pembuatan asetilena
dan juga dan kalsium sianamida
memperce
pat proses
pematang
an pada
buah.
17
Natrium Sebagai Digunakan dalam dunia
6. pengganti kesehatan yaitu sebagai

cairan infus steril yang
tubuh mengandung elektrolit
yang untuk menggantikan
hilang. cairan tubuh yang
hilang di karenakan
beberapa faktor.
Nitrogliserin Untuk Merupakan Obat
7. melebarka golongan nitrtat yang

n bekerja dengan caraba
pembuluh melebarkan pembuluh
darah,sert darah serta
a meningkatkan pasokan
meningkat darahh dan oksigen ke
kan otot jantung.
pasokan
darah dna
oksigen ke
otot
jantung`
Asetilen Untuh Diguanakan untuk

8. mencairka mencairkan dan
n dan meyatuhkan berbagai
meyatuhk jenis logam.
an
berbagai
jenis
logam.
18
Anhidrida Sebagai Digunakan dalam
bahan produksi selulosa
9.
pelarut. asetat,industry
farmasi,pembuatan
filter pada rokok
plastic,pewarna,pestisi
da,rempah rempah dan
industry polishing
logam.
10. Perklorat Sebagai Diguanakan sebagai

obat obat pada dunia
kelenjar kesehatan dan pada
tiroid dan dunia industri sebagai
pada bahan bakar roket
dunia padat.
industry
komponen
bahan
bakaar
roket
padat.
19
4.2 Pembahasan
Dalam Praktikum kali ini yaitu instrumentasi laboratorium mikrobiologi
kita akan membahas tentang alat-alat yang ada dilaboratorium beserta cara
sterilisasi. Cara pengenalan alat pada praktikum ini adalah dengan cara mengamati
alat-alat yang telah dibahas dalam vidio. Setelah mengetahui alat alatnya barulah
kita mengetahui fungsi dari alat-alat tersebut dengan cara menyimak video yang
telah diberikan oleh asisten menjelaskan fungsi-fungsi dari masing masing alat
yang terdapat didalam video tersebut. Dimana alat-alat yang dijelaskan didalam
video yaitu seperti berupa beker glass, tabung reaksi, bolpipet, cawan petri, bunsen,
gelas ukur, erlenmeyer, pipet tetes, dan jarum ose, jadi sebenarnya alat alat
dilaboratorium itu banyak kisaran 30 lebih. Alat-alat laboratorium ini mempunyai
fungsi dan kegunaan masing-masing seperti gelas ukur yang memiliki fungsi untuk
meletakkan dan mengukur volume larutan atau zat cair,beker gelas yang digunakan
sebagai tempat untuk percobaan (difusi osmosis). Tabung reaksi yang digunakan
untuk mereaksikan zat dan labu erlenmeyer yang digunakan sebagai tempat
membuat larutan.
Berdasarkan hasil pengamatan, alat-alat yang digunakan untuk mensterilkan
adalah oven dan autoclave. Oven digunakan untuk mensterilisasi alat-alat yang
terbuat dari. Alat-alat gelas seperti erlenmeyer, cawan petri, tabung reaksi atau alat
gelas lainnya yang ingin dipanaskan harus dibungkus dengan kertas untuk
mencegah terjadi keretakan karena bertumpukkan dengan alat lainnya dan agar
tidak terjadi kontaminasi pada saat pensterilan. Oven merupakan alat sterilisasi
secara fisik yaitu panas kering. pemanasan kering juga bisa menggunakan alat yang
disebut bunsen dan spiritus. Alat lain yang digunakan dalam sterilisasi yaitu
autoclave yang berfungsi untuk sterilisasi dengan pemanasan basah. Autoclave
digunakan untuk mensterilisasi alat-alat gelas, kayu, plastik, larutan dan medium
yang tidak tahan terhadap suhu tinggi. pada pemanasan basah yaitu menggunakan
alat yang disebut autoclave. Sebelum alat-alat dan bahan digunakan dalam
praktikum harus di lakukan sterilisasi terlebih dahulu. Sterilisasi merupakan suatu
usaha atau proses untuk membebaskan alat-alat, bahan dan kemasan dari segala
bentuk kehidupan terutama dari mikroorganisme.
20
peralatan mikrobiologi dibagi menjadi tiga yaitu peralatan gelas,
peralatan non gelas, dan peralatan pemanas. Peralatan gelas adalah peralatan
yang terbuat dari bahan dasar gelas/kaca. Penyusun peralatan non gelas yaitu
logam, porselen/keramik, kayu, dan plastik. peralatan pemanas yaitu peralatan
laboratorium yang digunakan untuk pemanasan, penguapan, dan membantu
melarutkan bahan kimia yang sulit larut sehingga membutuhkan pemanasan.
peralatan Apparatus adalah peralatan instrumentasi yang khusus untuk percobaan
mikrobiologi. Dalam mikrobiologi kita mempelajari materi yang ukurannya
sangat kecil (Mikroskopis) yang hanya bisa dilihat dengan mikroskop. Zat kimia
merupakan zat/senyawa yang memiliki berbagai karakteristik. Oleh karena itu,
perlu dilakukan pelabelan menggunakan simbol-simbol tertentu. kemasan bahan
kimia dapat mengandung 5 atau bahkan lebih simbol bahaya. Namun, kemasan
tanpa simbol bahaya bukan berarti aman untuk digunakan. Selain hal hal tersebut,
bahan kimia terdiri dari tiga yaitu padat, cair dan ga dan juga ahan kimia itu
memiliki sifat mudah terbakar, beracun, mengiritasi, korosif, dan dapat merusak
lingkungan. Maka, bahaya bahaya tersebut dikelompokkan menjadi tiga yaitu,
bahaya fisik, bahaya kesehatan, dan bahaya lingkungan.
Dalam mempelajari ilmu kimia kita perlu diperkenalkan tentang bahan-
bahan kimia. Pengenalan bahan-bahan kimia sangat penting dilakukan untuk
mahsiswa baru, karena hal tersebut merupakan dasar pengetahuan. Laboratorium
kimia merupakan sarana penting untuk pendidikan, penelitian, pelayanan dan uji
mutu. Institusi-institusi pendidikan, industri dan lembaga-lembaga penelitian dan
pengembangan memiliki laboratorium kimia dalam jenis yang berbeda-beda.
Dalam sudut pandang keselamatan kerja di dalam laboratorium, semua
laboratorium tersebut memiliki bahaya dasar yang sama sebagai akibat penggunaan
bahan kimia dan teknik selama bekerja.Adapun hubungannya dengan farmasi yaitu
dimana pembuatan sediaan farmasi yang mana nantinya akan melakukan banyak
pengujian dengan bahan bahan kimia ataupun reaksi kimia. Oleh karena itu di
perlukan wawasan untuk mengetahui alat dan bahan dari laboratorium kimia dasar.
Dengan adanya pengenalan bahan kita dapat mengetahui bahan-bahan yang
sifatnya korosif, asam kuat, asam lemah, basa kuat, basa lemah, mudah meledak,
beracun, mudah terbakar, pelarut dan pengoksidas.
21
BAB V
KESIMPULAN DAN SARAN
5.1 Kesimpulan
1. Memudahkan dalam memahami alat-alat laboratorium dapat kita gunakan waktu
yang relative lama dan dalam keadaan baik. Alat-alat ini perlu dipelihara dengan
baik dan selalu mensterilkannya ketika akan menggunakannya agar tidak terjadi
hal-hal yang tidak diinginkan.
2. Setiap alat yang digunakan dalam praktikum ini memiliki nama dan fungsinya
masing-masing, sehingga diperlukan pengenalan terhadap alat-alat yang akan
digunakan.
3. Penguasaan dan pemahaman dalam penggunaan alat-alat akan sangat membantu
dan menghindari kegagalan dalam praktikum mikrobiologi ini.
4. Ketidak akuratan alat ukur timbangan, salah satunya disebabkan oleh suhu/udara
disekelilingnya. Udara/ suhu dapat mempengaruhi suatu zat yang akan ditimbang.
5. Mikroskop cahaya untuk melihat benda-benda yang sangat kecil seperti
mokroorganisme`
5.2 Saran
Adapun saran yang dapat saya berikan pada praktikum Sterilisasi alat-alat
laboratorium mikrobiologi yaitu, diharapakan agar praktikan lebih kondusif, dan
sebaiknya praktikan memperhatikan betul alat-alat sterilisasi yang digunakan dalam
mikrobiologi agar dapat mengetahui fungsi dan prinsip kerja dari masing-masing
alat tersebut dan juga sebaiknya praktikum ini dilakukan secara offline agar
praktikan mengerti dan lebih tahu tentang alat alat laboraturium mikrobiologi dan
dapat memahami cara dan fungsi ketika melakukan pekerjaan yang berhubungan
dengan alat alat lababoraturium kembali dengan baik.
22
STERILISASI ALAT
23
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang

Sterilisasi dalam mikrobiologi adalah suatu proses untuk mematikan semua
organisme yang terdapat pada atau didalam suatu benda. Ketika anda untuk pertama
kalinya melakukan pemindahan biakan bakteri secara aseptik, sesungguhnya anda
telah menggunakan salah satu sterilisasi, yaitu pembakaran. Namun kebanyakan
peralatan dan media yang umum dipakai dalam pekerjaan mikrobiologis akan
menjadi rusak bila dibakar. Untungnya tersedia berbagai metode lain yang efektif.
Ada tiga cara yang umum digunakan dalam sterilisasi yaitu penggunaan panas,
penggunaan bahan kimia dan penyaringan (Filtrasi). Bila panas digunakan bersama
– sama dengan uap air maka disebut sterilisasi panas lembut atau sterilisasi basah,
bila tanpa kelembapan maka disebut sterilisasi panas kering atau sterilisasi kering.
Keberadaan mikroorganisme mereka yang ada di segala tempat menyulitkan para
mikrobiolog untuk memperoleh suatu koloni mikroorganisme tertentu dan yang
sejenis tanpa adanya mikroorganisme lain yang mencampuri koloni tersebut. Kultur
mikroorganisme yang tersusun dari sel-sel sejenis (tuinggal) disebut juga sebagai
kultur murni (Hadioetomo, 1993).
Dalam dunia kesehatan, sterilisasi sangatlah penting dilakukan untuk
memberikan efek terapeutik yang maksimal. Steril artinya bebas dari segala
mikroba baik patogen maupun tidak. Sterilisasi merupakan suatu proses
membebaskan suatu peralatan atau bahan dari mikroorganisme yang tidak
dikehendaki. Proses ini melibatkan aplikasi biocidal agent atau proses fisik dengan
tujuan untuk membunuh atau menghilangkan. Pada prinsipnya sterilisasi dapat
dilakukan dengan 3 cara yaitu secara mekanik, fisik dan kimiawi. Pemilihan
mekanisme sterilisasi yang dilakukan hendaknya disesuaikan dengan sifat bahan
yang akan disterilkan. Sterilisasi secara fisik dilakukan dengan menggunakan
pemanasan, penggunaan sinar UV, sinar X, dan sinar-sinar yang memiliki panjang
gelombang pendek. Sterilisasi secara kimia dilakukan dengan menggunakan bahan-
bahan kimia seperti alkohol, desinfektan, formalin, dan sebagainya (Waluyo, 2004).
24
Bahan kimia yang baik adalah yang memiliki kemampuan membunuh
mikroba secara cepat dengan dosis yang rendah tanpa merusak bahan atau alat yang
disterilkan. Sterilisai secara mekanik (filtrasi) menggunakan suatu saringan yang
berpori sangat kecil (0.22 mikron atau 0.45 mikron) sehingga mikroba tertahan pada
saringan tersebut. Sterilisasi dengan swab dilakukan untuk mengetahui jumlah
mikroba pada permukaan tubuh. Pembiakan mikroba dalam laboratorium
memerlukan medium yang berisi zat hara serta lingkungan pertumbuhan yang
sesuai dengan mikroorganisme. Zat hara digunakan oleh mikroorganisme untuk
pertumbuhan, sintesis sel, keperluan energi dalam metabolisme, dan pergerakan.
Lazimnya, medium biakan berisi air, sumber energi, zat hara sebagai sumber
karbon,nitrogen, sulfur, fosfat, oksigen, hidrogen, serta unsur-unsur lainnya. Dalam
bahan dasar mediumdapat pula ditambahkan faktor pertumbuhan berupa asam
amino, vitamin, atau nukleotida (Lim, 1998).
1.2. Tujuan
Tujuan pratikum ini adalah untuk mengetahui metode sterilisasi dan penerapannya
di laboratorium mikrobiologi.
25
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Pengertian Sterilisasi

Pengertian sterilisasi ini pada umumnya diartikan sebagai proses
pemanasan yang mana dilakukan untuk mematikan segala bentuk organisme.
Satu benda dikatakan steril jika dipandang dari sudut pandang mikrobiologi
ini berarti benda tersebut sudah bebas dari mikroorganisme hidup yang tidak
diinginkan. Inilah pengertian sterilisasi secara singkat. Benda atau substansi
tertentu hanya dapat disebut steril atau tidak steril, tidak pernah terjadi dalam
proses sterilisasi terjadi kondisi setengah steril atau hampir steril. Pengertian
sterilisasi jadi jelas di sini, di mana proses ini berarti membunuh semua jasad
renik yang ada, hingga pada akhirnya tidak ada lagi jasad-jasad renik pada
medium atau substansi tertentu yang dapat berkembang biak. Sterilisasi adalah
suatu proses yang menghancurkan semua bentuk kehidupan mikroba, termasuk
spora, pada permukaan benda mati. Prosesnya dapat berupa pemanasan, pemberian
zat kimia, radiasi, atau filtrasi. Sterilisasi adalah proses pemanasan yang dilakukan
untuk mematikan semua mikroorganisme pada bahan makanan. (Walton, 2008).
Sterilisasi pengemasan hermetis untuk mencegah kontaminasi ulang. Yang
dimaksud pengemasan hermetis adalah pengemasan yang sangat rapat, sehingga
tidak dapat ditembus oleh mikroorganisme, air, ataupun udara. Sterilisasi
merupakan salah satu metode menggunakan uap air pada suhu 211 derajat celcius
selama beberapa waktu tertentu. Tujuan pemanasan adalah memusnahkan bakteri
patogen dan spora bakteri elostridium bolulinum yang berbahaya. Metodesterilisasi
yang paling umum dilakukan menggunakan kaleng atau kemasan tetra pack
Sterilisasi dalam pengertian medis merupakan suatu proses dengan metode tertentu
dapat memberikan hasil akhir, yaitu suatu bentuk keadaan yang tidak dapat
ditunjukkan lagi adanya mikroorganisme hidup. Kualitas hasil sterilisasi peralatan
medis perlu dijaga terus mengingat risiko kontaminasi kembali terutama digunakan
dalam tindakan medis. Prinsipnya sterilisasi dapat dilakukan dengan tiga cara
secara mekanik, fisik dan kimiawi. (Walton, 2008).
26
2.2. Macam – macam Alat Sterilisasi
Sterilisasi adalah suatu proses yang menghancurkan semua bentuk kehidupan
mikroba, termasuk spora, pada permukaan benda mati. Prosesnya dapat berupa
pemanasan, pemberian zat kimia, radiasi, atau filtrasi atau dengan kata lain
sterilisasi adalah proses pemanasan yang dilakukan untuk mematikan semua
mikroorganisme pada bahan makanan. Sterilisasi biasanya di kombinasi dengan
pengemasan hermetis untuk mencegah kontaminasi. Yang dimaksud pengemasan
hermetis adalah pengemasan yang sangat rapat, sehingga tidak dapat ditembus oleh
mikroorganisme, air, ataupun udara. Steril artinya bebas dari segala mikroba baik
patogen maupun tidak. Sterilisasi merupakan suatu proses membebaskan atau
membersihkan suatu peralatan atau bahan dari mikroorganisme yang tidak
dikehendaki. Sterilisasi dalam mikrobiologi merupakan proses penghilangan semua
jenis organisme hidup, dalam hal ini adalah mikroorganisme (protozoa, fungi,
bakteri, microplasma, virus) yang tedapat pada atau di dalam suatu benda. Proses
ini melibatkan aplikasi biocidal agent atau proses fisik dengan tujuan untuk
membunuh atau menghilangkan mikroorganisme. Sterilisasi didesain untuk
membunuh atau menghilangkan mikroorganisme. Target suatu metode inaktivasi
tergantung dari metode dan tipe mikroorganismennya, tergantung dari asam
nukleat, protein, atau membrane mikroorganisme tersebut. Agen kimia untuk
sterilisasi disebut sterilant (Purnawijayanti, 2001).
Pada prinsipnya sterilisasi dapat dilakukan dengan 3 cara yaitu secara
mekanik, fisik dan kimiawi. Pemilihan mekanisme sterilisasi yang dilakukan
hendaknya disesuaikan dengan sifat bahan yang akan disterilkan. Sterilisasi secara
fisik dilakukan dengan menggunakan pemanasan, penggunaan sinar UV, sinar X,
dan sinar-sinar yang memiliki panjang gelombang pendek. Sterilisasi dengan uap
air panas bertekanan, alat ini disebut autoklaf (autoclave) untuk steriliasasi ini alat
dilengkapi dengan katup pengaman. Contoh proses sterilisasi adalah produk olahan
dalam kaleng seperti kornet, sarden dan sebagainya. Lagkah awal yaitu alat diisi
dengan air kemudian bahan dimasukkan. Panaskan sampai mendidih dan dari katup
pengaman keluar air dengan lancar lalu ditutup (Purawijayanti,, 2008).
27
2.3. Sterilisasi Fisika
Sterilisasi secara fisik dapat dibagi menjadi dua jenis, yaitupemanasan dan
penyinaran. Sterilisasi dengan pemanasan yaitu secara pemijaran (dengan api
langsung), panas kering, uap air panas, dan uap air panas bertekanan. Metode yang
pertama yaitu secara pemijaran (dengan api langsung) maksudnya adalah
melakukan kegiatan sterilisasi dengan cara membakar alat yang akan disterilisasi
pada api secara langsung, contoh alat yang dapat disterilisasi dengan metode ini
yaitu jarum inokulum, pinset, batang L, dan alat yang sejenis.Kemudian metode
sterilisasi yang kedua yaitu sacara panas kering.Metode panas kering merupakan
usaha untuk melakukan sterilisasi dengan oven kira-kira 60-1800C.Sterilisasi panas
kering cocok untuk alat yang terbuat dari kaca misalnya erlenmeyer, tabung reaksi
dan alat lainnya yang serupa.Kemudian metode ketiga yang dapat digunakan dalam
kegiatan dterilidadi adalah uap air panas.Uap air panas pada prisip dan konsepnya
mirip dengan mengukus. Bahan yang mengandung air lebih tepat menggungakan
metode ini supaya tidak terjadi dehidrasi. terakhir yang dapat dipakai dalam
kegiatan sterilisasi adalah menggunakan uap air panas bertekanan. Metode uap air
panas bertekanan ini memanfaatkan alat laboratorium yaitu autoklaf (Lay, 1992).
Sterilisasi secara fisik yang dapat dilakukan dengan penyinaran adalah kegiatan
sterilisasi yang memanfaatkan sinar Ultra Violet. Sinar Ultra Violet juga dapat
digunakan untuk proses sterilisasi, salah satu contoh dari sterilisasi dengan metode
penyinaran menggunakan sinar Ultra Violet misalnya untuk membunuh mikroba
yang menempel pada permukaan interior Safety Cabinet dengan memanfaatkan
bantuan dari penyinaran lampu UV. Mula-mula mikroba yang akan dibunuh yang
menempel pada permukaan interior Safety Cabinet disinari dengan mengunakan
lampu UV, mikroba yang akan dbunuh tersebut kemudian akan mengalami
sengatan panas dari sinar UV yng telah diberikan tadi. Kemudian secara perlahan
mikroba akan mengalami kelemahan dan keurangan energi untuk melakukan
perlawanan. Pada fase ini, mikroba yang akan dibunuh langsung mengalami lemah
di sekujur tubuh dan pada akhirnya akan mengalami kematian. Sehingga
pertumbuhan mikroba tidak dapat terjadi lagi pada fase ini dan juga menahannya
laju dari pertumbuhan mikroba kembali (Lay, 1992).
28
2.4. Sterilisasi Kimia
Sterilisasi Kimia digunakan pada alat/bahan yang tidak tahan panas atau untuk
kondisi aseptis (Sterilisasi meja kerja dan tangan). Bahan kimia yang dapat
digunakan adalah Alkohol, khlor. Yodium, asam parasetat, formaldehid, gas etilen
oksida, dll. Alkohol, daya kerjanya adalah mengkoagulasi protein. Biasanya
konsentrasi alkohol yang digunakan dalam sterilisasi ini adalah 70-80 %. Klor, gas
khlor dengan air akan menghasilkan ion hipokloride yang akan mengkoagulasikan
protein sehingga membran sel rusak dan terjadi inaktivasi enzim. Yodium, daya
kerjanya adalah bereaksi dengan tyrosin, suatu asam amino dalam enzim atau
protein mikroorganisme. Formaldehida 8% merupakan konsentrasi yang cukup
ampuh untuk mematikan sebagian besar mikroorganisme. Daya kerjanya adalah
berkaitan dengan amino dalam protein mikroba. Gas etilen oksida, gas ini
digunakan terutama untuk mensterilkan bahan yang dibuat dari plastik.Etilen
oksida merupakan senyawa organik kelompok epoksida dari golongan eter. Et-O
membunuh mikroorganisme melalui reaksi kimia yang dikenal sebagai reaksi
alkilasi. Beberapa parameter sterilisasi gas Et-O meliputi, konsentrasi gas secara
umum semakin tinggi konsentrasi gas maka waktu yang diperlukan sterilisasi akan
semakin cepat. Konsentrasi biasa dinyatakan dalam mg/liter ruang chamber.
Semakin tinggi suhu, semakin cepat reaksi berjalan. Sterilisasi suhu rendah biasa
menggunakan suhu 47-60oC. Kelembaban untuk meningkatkan daya penetrasi gas.
Waktu siklus satu kali proses sterilisasi berkisar antara 2-6 jam, tergantung pada
suhu dan konsentrasi (Ratna, 1985)
Biasanya sterilisasi secara kimiawi menggunakan senyawa desinfektan antara
lain alkohol. Antiseptik kimia biasanya dipergunakan dan dibiarkan menguap
seperti halnya alkohol. Umumnya isopropil alkohol 70-90 % adalah yang termurah
namun merupakan antiseptik yang sangat efisien dan efektif. Penambahan yodium
pada alkohol akan meningkatkan daya disinfeksinya. Dengan menggunakan
iodium, isopropil tidak efektif terhadap spora. Solusi terbaik untuk membunuh
spora adalah campuran formaldehid dengan alkohol, tetapi solusi ini terlalu toksik
untuk dipakai sebagai antiseptik. Pemilihan antiseptik terutama tergantung pada
kebutuhan dari tujuan tertentu serta efek yang dikehendaki. beberapa senyawa
bersifat iritatif dan bervariasi (Ratna, 1985).
29
2.5. Sterilisasi Mekanik
Strerilisasi secara mekanik (filtrasi) menggunakan suatu saringan yang berpori
sangat kecil (0.22 mikron atau 0.45 mikron) sehingga mikroba tertahan pada
saringan tersebut. Proses ini ditujukan untuk sterilisasi bahan yang peka
panas, misalnya larutan enzim dan antibiotik. Jika terdapat beberapa bahan yang
akibat pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan atau
penguraian, maka sterlisasi yang digunakan adalah dengan cara mekanik, misalnya
dengan saringan. Dalam mikrobiologi, penyaringan secara fisik paling banyak
digunakan adalah dalam penggunaan filter khusus misalntya filter berkefeld, filter
chamberlan, dan filter seitz. Jenis filter yang dipakai tergantung pada tujuan
penyaringan dan benda yang akan disaring. Penyaringan dapat dilakukan dengan
mengalirkan gas atau cairan melalui suatu bahan penyaring yang memilki pori-pori
cukup kecil untuk menahan mikroorganisme dengan ukuran tertentu. Saringan akan
tercemar sedangkan cairan atau gas yang melaluinya akan steril. (Jutono, 1980)
Sterilisasi secara mekanik, digunakan untuk beberapa bahan yang akibat
pemanasan tinggi atau tekanan tinggi akan mengalami perubahan, misalnya
adalah dengan saringan atau filter. Sistem kerja filter, seperti pada saringan
lain adalah melakukan seleksi terhadap partikel-partikel yang lewat (dalam
hal ini adalah mikroba Sterilisai secara mekanik (filtrasi) menggunakan suatu
saringan yang berpori sangat kecil (0.22 mikron atau 0.45 mikron) sehingga
mikroba tertahan pada saringan tersebut. Proses ini ditujukan untuk
sterilisasi bahan yang peka panas, misalnya larutan enzim dan antibiotik.
Sterilisasi dengan penyaringan dilakukan untuk mensterilisasi cairan yang
mudah rusak jika terkena panas atu mudah menguap (volatile). Cairan yang
disterilisasi dilewatkan ke suatu saringan ditekan dengan gaya sentrifugasi
atau pompa vakum yang berpori dengan diameter yang cukup kecil untuk
menyaring bakteri. Virus tidak akan tersaring dengan metode ini.Cara kerja
dari sterilisasi ini berbeda dari metode lainnya karena sterilisasi ini
menghilangkan mikroorganisme melalui penyaringan dan tidak
menghancurkan mikroorganisme tersebut. Penyaringan dilakukan untuk
mensterilkan substansi yang peka tehadap panas dan lain-lain (Jutono, 1980).
30
2.6. Autoklaf
Autoklaf adalah alat untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan yg
digunakan dalam mikrobiologi menggunakan uap air panas bertekanan. Tekanan
yg digunakan pada umumnya 15 Psi atau sekitar 2 atm dan dengan suhu 121 °C
(250 °F). Jadi tekanan yg bekerja ke seluruh permukaan benda adalah 15 pon tiap
inchi 2 (15 Psi =15 pounds per square inch). Lama sterilisasi yg dilakukan biasanya
15 menit utk 121 °C. Autoklaf biasanya digunakan dalam bidang mikrobiologi,
kedokteran, body piercing, kedokteran hewan, kedokteran gigi, dan podiatry untuk
mensterilisasi alat-alat dari gelas, sampah medis, kandang hewan, dan media
lisogenik. Terdapat tiga jenis autoklaf, yaitu gravity displacement, prevacuum atau
high vacum, dan steam-flush pressure-pulse. Perbedaan ketiga jenis autoklaf ini
terletak pada bagaimana udara dihilangkan dari dalam autoklaf selama proses
sterilisasi (Bhima, 1998).
Autoklaf merupakan suatu alat pemanas tertutup yang digunakan untuk
mensterilisasi suatu benda menggunakan uap dengan temperatur 121⁰C
sampai 134⁰C dan tekanan maksimum 2 bar(g) (3 bar(abs)) dengan waktu
kurang lebih 45 menit waktu pemanasan dan 15 menit untuk proses sterilisasi.
Penurunan tekanan pada autoklaf berfungsi untuk meningkatkan temperatur
dalam autoklaf sehingga mikroorganisme akan terbunuh. Autoklaf ditujukan
untuk sterilisasi alat yang mengandung endospora, yaitu sel resisten yang
diproduksi oleh bakteri yang tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan
antibiotik. Autoklaf yang sederhana menggunakan sumber uap dari
pemanasan air yang ditambahkan ke dalam autoklaf. Pemanasan air dapat
dilakukan menggunakan kompor atau api bunsen. Autoklaf adalah alat yang
digunakan untuk mensterilkan berbagai macam alat dan bahan dengan
menggunakan tekanan 15 psi (2 atm) dan suhu 121⁰C. Suhu dan tekanan tinggi
yang diberikan kepada alat dan media yang disterilisasi memberikan kekuatan
yang lebih besar untuk membunuh sel dibanding dengan udara panas (Bhima,
1998).
31
BAB 3

Praktikum Dasar-Dasar Mikrobiologi Akuatik dilaksanakan pada hari Jumat
tanggal 26 pada pukul 14.30 WIB sampai dengan selesai, dilaksanakan secara
online melalui aplikasi tatap muka zoom.
3.2. Alat dan Bahan

Adapun alat dan bahan yang digunakan pada Praktikum Sterilisasi yaitu
laptoop, buku, pena, hp sebagai sarana pembelajaran (zoom) dan juga
menggunakan modul.
3.3. Prosedur Kerja

1. Sediakan buku dan alat tulis yang akan digunakan.
2. Masuk ke room zoom untuk melakukan praktikum secara tatap muka lewat
zoom.
3. Mengikuti praktikum dengan mendengarkan penjelasan dari asisten.
32
BAB 4
4.1. Hasil
Hasil yang diperoleh dari praktikum sterilisasi alat yakni sebagai berikut :
No Nama Alat Fungsi alat Gambar Alat
1 Oven Untuk memanaskan ataupun

Laboratorium mengeringkan alat-alat. Biasanya
digunakan untuk mengeringkan
peralatan gelas laboratorium , zat
kimia maupun pelarut organik
2 Autoclave Untuk mensterilkan bahan, alat

indtrumen atau media dengann
metode penguapan suhu
bertekanan tinggi bersuhu 121
derajat celcius dan tekanan 15 lbs
(2 atm)
3 Tabung reeaksi
Untuk mereaksikan 2 zat atau lebih
4 Cawan petri Sebagai wadah penyelidikan tropi

dan juga untuk mengkultur bakteri,
khamir, spora atau biji-bijian
5 Alkohol Untuk mensterilisasikan tangan

dan alat-alat yang ada di
laboraturium
6 Bunsen
Untuk menciptakan kondisi yang
steril
33
7 Water Bath Untuk memanaskan bahan atau
cairan kimia
34
4.2. Pembahasan
Sterilisasi adalah proses pemanasan untuk menghilangkan mikroorganisme
pengganggu. Sterilisasi terbagi atas tiga yakni sterlisasi secara mekanik, secara
fisik, dan secara kimiawi. Alat yang digunakan untuk proses sterlisisasi mekanik
yakni dengan alat filter berupa saringan dengan pori-pori yang kecil. Cara ini
digunakan untuk bahan yang peka terhadap panas. Sterilisasi fisik yakni dengan
cara pemanasan dan penyinaran. Pemanasan terdiri atas dua, yakni pemanasan
basah dan pemanasan kering. Pada pemanasan basah, alat yang digunakan yaitu
autoklaf dan pemanasan kering yang digunakan yaitu oven. Untuk penyinaran, alat
yang digunakan berupa sinar UV. Sedangkan untuk sterilisasi secara kimiawi,
digunakan bahan–bahan kimia. Sterilisasi dengan oven memiliki keuntungan yaitu
lebih efektif untuk bahan yang harus selalu dalam keadaan kering, dapat
mensterilkan bahan tanpa harus membasahi, tidak tergantung tekanan dan dapat
mencapai suhu sangat tinggi sekali yaitu 200oC. Sterilisasi dengan autoklaf
memiliki keuntungan sebagai berikut, efektif untuk sebagian besar
mikroorganisme.
Kelemahannya adalah bahan atau alat harus dibungkus dengan kertas agar
tidak basah, karena kertas yang digunakan akan cepat mongering pada suhu kamar.
Harus memperhatikan tekanan agar tidak “over pressure” sehingga bida meledak.
Tidak dapat mensterilkan bahan yang harus selalu kering, dimana mikrobia yang
ada didalamnya tidak dapat ditembus oleh uap dan tetap bertahan hidup. Autoklaf
ditujukan untuk membunuh sel resisten (endospora) yang diproduksi oleh bakteri.
Endospora adalah sel yang tahan terhadap pemanasan, kekeringan, dan antibiotik.
Peralatan yang umumnya disterilisasi terbuat dari bahan gelas atau kaca, plastik dan
besi. Dalam melakukan sterilisasi perlu diketahui mana alat yangterbuat dari bahan
yang tahan dan tidak tahan panas maupun bahan yang memiliki batas panas
maksimal yang mampu diterimannya. Hal ini bertujuan agar peralatanyang
disterilkan tidak rusak, misalnya saja untuk mensterilkan peralatan plastikdengan
menggunakan sterilisasi panas kering, sudah tentu yang terjadi adalah hal-hal yang
tidak diinginkan seperti rusaknya peralatan tersebut. Dalam praktikum ini
digunakan dua metode sterilisasi yaitu sterilisasifisik dan sterilisasi kimia.
35
BAB V
5.1 Kesimpulan
Kesimpulan yang didapat dari praktikum tentang sterilisasi alat ini adalah
sebagai berikut.
1. Sterilisasi adalah proses penghilangan mikroba,
2. Metode sterilisasi antara lain secara fisika, kimia, mekanik.
3. Sterilisasi secara fisik dapat dilakukan menggunakan udara panas atau uap air
panas dengan tekanan tinggi temperaturnya 121 oC.
4. Sterilisasi secara mekanik yaitu menggunakan saringan atau filter.
5. Sterilisasi kering menggunakan oven sedangkan sterilisasi basah menggunakan
autoklaf.
5.2. Saran
Saran saya pada praktikum kali ini adalah sebaiknya diakukan secara offline
agar praktikan dapat benar benar mengerti cara sterilisasi dan dapat mengenal betul
alat dan bahan yang harus disiapkan sebelum proses sterilisasi
36
PRREPARASI MEDIA KULTUR JAMUR DAN BAKTERI
37
BAB 1
PENDAHULUAN
1.3. Latar Belakang

Mikroorganisme terdapat di berbagai tempat seperti tanah, debu, air, udara,
kulit dan selaput lendir. Mikroorganisme dapat berupa bakteri, fungi, protozoa dan
lain-lain. Mikroorganisme mudah terhembus udara dan menyebar ke mana-mana
karena ukuran selnya kecil dan ringan. Selama ini kendala yang umum dihadapi
para peneliti adalah tingginya kontaminasi kultur in vitro. Pada penelitian mikologi,
tingkat kontaminasi dapat mencapai 100%. Untuk itu perlu dilakukan usaha-usaha
pengendalian. Langkah awal usaha ini adalah identifikasi jenis-jenis
mikroorganisme sumber kontaminasi dan mengetahui jenis paling dominan.
.Medium pembiakan penyubur bakteri dibuat dari medium pembiakan dasar dengan
penambahan zat-zat lain untuk mempersubur pertumbuhan bakteri tertentu, yang
pada medium pembiakan dasar tersebut tidak dapat tumbuh dengan baik.
Mikroorganisme memanfaatkan nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang
dirakit untuk menyusun komponen sel. Untuk keperluan ini kedalam medium
pembiakan dasar sering ditambahkan darah, serum, cairan tubuh, ekstrak hati, otak
dan sebagainya. Beberapa bakteri dapat hidup baik pada medium yang sangat
sederhana yang hanya mengandung garam organik, karbohidrat, protein dan
ditambah dengan sumber karbon organik, seperti gula (Ari, 2001).
Mikroalga dalam akuakultur merupakan sumber pakan alami yang digunakan
pada sektor pembenihan. Selain dimanfaatkan dalam akuakultur mikroalga saat ini
telah menjadi bahan alternatif penghasil energy atau biodiesel, kosmetik dan obat-
obatan Berdasarkan habitatnya mikroalga ada yang hidup di air tawar, air payau
dan bahkan air laut. Alga meliputi organisme eukariot yang uniselular dan
multiselular. Nama Alga berasal dari bahasa latin yang artinya rumput laut
(seaweed). Organisme ini dapat berfotosintesis karena memiliki pigmen-pigmen
fotosintesis seperti pigmen fotosintetik hijau (klorofil), biru kehijauan (fikobilin),
coklat (fikosantin), dan merah (fikoeritrin) sehingga pada perairan, alga menjadi
produsen primer yang menyediakan nutrisi bagi organisme lainnya (Mckane 1985).
38
Media semi sintetik seperti PDA memiliki kandungan karbohidrat yang cukup
sehingga baik digunakan untuk pertumbuhan jamur. Media ini cukup banyak
dibutuhkan dalam pembiakkan jamur baik di dalam laboratorium maupun dalam
bidang pertanian. Namun harga dari media ini cukup mahal selain itu tidak semua
toko bahan kimia menyediakan, sedangkan kebutuhan media PDA semakin banyak
sehingga diperlukan alternatif lain untuk menggantikan media biakan jamur
tersebut. Sumber karbon yang berasal dari karbohidrat, banyak dimanfaatkan oleh
para peneliti untuk membuat media alternatif pertumbuhan jamur. Salah satunya
adalah penelitian Kwoseh et al yang memanfaatkan sumber karbohidrat dari pati
singkong sebagai pengganti media kultur Aspergillus niger dan Fusarium
oxysporum dengan hasil kedua jamur tersebut mampu tumbuh dengan baik. Selain
itu, penelitian Amadi et al (2012) menggunakan sumber karbohidrat dari ubi jalar
putih dan ungu, cocoyam, dan ubi yang digunakan sebagai media pertumbuhan
Aspergillus niger dan Aspergillus carbonarius (Novary, 1999).
1.4.Tujuan
Tujuan dari praktikum ini adalah untuk mengetahui berbagai media tumbuh
bakteri dan jamur serta mempelajari pembuatan media tumbuh baik media alami
maupun media buatan.
39
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Pengertian Media

Media adalah suatu bahan yang terdiri dari campuran zat-zat hara (nutrient)
yang digunakan untuk membiakkan mikroba. Media terdapat bermacam-macam
yang dapat digunakan untuk isolasi, perbanyakan, pengujian sifat-sifat fisiologis
dan perhitungan jumlah mikroba maupun untuk transport specimen dari suatu
tempat ke tempat pemeriksaan mikrobiologi. Mikroorganisme memanfaatkan
nutrisi media berupa molekul-molekul kecil yang dirakit untuk menyusun
komponen sel. Dalam pemeriksaan mikrobiologi, media menjadi suatu hal yang
penting agar mikroba yang dapat hidup dan menentukan bahwa mikroba yang
diperiksa adalah benar-benar mikroba yang dicari atau yang diharapkan.Upaya
pembiakan mikroorganisme memerlukan kondisi lingkungan yang sesuai agar
bakteri dapat berkembang dengan baik. Dalam pertumbuhannya, mikroorganisme
memerlukan bahan-bahan organik dan ion-ion pendukung sebagai sumber energi
dan katalis (Morse & Meitzner, 2010). Faktor-faktor yang penting bagi proses
pembiakan mikroorganisme yaitu nutrisi, oksigen dan gas lain, kelembaban, pH
media, suhu, serta kontaminan. Media yang baik untuk pembiakan mikroorganisme
harus mengandung unsur-unsur seperti karbon, nitrogen, fosfat inorganic, sulfur,
logam, air, dan mineral (Zimbro et al. 2009).
Media atau yang biasa kita sebut medium adalah suatu bahan yang tersusun
atas campuran nutrient yang dipergunakan untuk menumbuhkan mikroba,
pengujian sifat fisiologi, untuk isolasi dan memperbanyak jumlah mikroba serta
untuk perhitungan jumlah mikroba. Persyaratan medium agar mikroba cepat
tumbuh pertama adalah medium harus mengandung semua nutrisi yang diperlukan
mikroba. Kedua medium harus mempunyai tekanan osmosis, tegangan muka serta
pH yang sesuai. Dan yang terakhir, media tidak mengandung zat penghambat dan
harus dalam keadaan steril. Untuk penanaman mikroba perlu diperhatikan nutrisi
mikroba tersebut serta kebutuhan akan udara atau oksigen. Dikenal ada dua cara
penanaman yaitu dengan mikroba aerob dan mikroba anaerob (Riefer, 2017).
40
2.2. Pengertian Mikroorganisme
Mikroorganisme atau mikroba adalah organisme yang berukuran sangat kecil
sehingga untuk mengamatinya diperlukan alat bantuan. Mikroorganisme disebut
juga organisme mikroskopik. Mikroorganisme sering kali bersel tunggal
(uniseluler) maupun bersel banyak (multiseluler). Namun, beberapa protista bersel
tunggal masih terlihat oleh mata telanjang dan ada beberapa spesies multisel tidak
terlihat mata telanjang. Definisi Mikroorganisme atau “ Mikroba ” merupakan
organisme yang berukuran sangat kecil sehingga untuk mengamatinya diperlukan
alat bantuan. Mikroorganisme disebut juga organisme mikroskopik,
Mikroorganisme sering kali ber sel tunggal ( uni seluler ) maupun bersel banyak (
multi seluler ). Namun, beberapa protista bersel tunggal masih terlihat oleh mata
telanjang dan ada beberapa spesies multisel tidak terlihat mata telanjang. Ilmu yang
mempelajari mikroorganisme disebut mikrobiologi, orang yang bekerja di bidang
ini disebut mikrobiolog.Mikroorganisme merupakan semua makhluk yang
berukuran beberapa mikron atau lebih kecil lagi. Yang termasuk golongan ini
adalah bakteri, cendawan atau jamur tingkat rendah, ragi yang menurut sistematik
masuk golongan jamur, ganggang, hewan bersel satu atau protozoa, dan virus yang
hanya nampak dengan mikroskop elektron (Dwidjoseputro, 1990).
Bidang mikrobiologi pangan tidak hanya menyangkut aspek mikrobiologi
kerusakan, penyakit bawaan,dan kontrol efektif pangan, tetapi juga menyangkut
informasi dasar ekologi, fisiologi, metabolisme, dan genetika mikroba. Kelompok
mikroorganisme dalam pangan terdiri atas beberapa spesies dan strain bakteri,
khamir, kapang, dan virus yang berperan penting dalam pangan karena
kemampuannya. Kemampuan tersebut menyebabkan kerusakan dan penyakit
bawaan pangan, serta digunakan untuk produksi pangan dan aditif pangan.
Mikroorganisme umumnya terdapat di mana-mana, seperti di dalam tanah, di
lingkungan akuatik, berkisar dari aliran air sampai lautan, dan atmosfer (Pelczar
dan Chan, 1986). Mikroorganisme tersebut mempunyai beberapa peranan salah
satunya mikroorganisme yang hidup dalam tanah dapat membantu pembentukan
struktur tanah yang mantap, karena mikroorganisme tanah dapat mengeluarkan
(sekresi) zat perekat yang tidak mudah larut dalam air (Hardjowigeno, 1992).
41
2.3. PDA
Potato Dextrose Agar (PDA) Merupakan media yang digunakan sebagai
isolasi dan budidaya jamur yang menjadi ciri penting dari pertumbuhan jamuryaitu
ciri-ciri morfologi dan juga warna jamur. Media PDA tersebut dari ekstrak kentang
dengan penambhan sumber karbohidrat berupa dextrose, Media dengan konsistensi
yang padat yang berguna untuk menyimpan stok murni dan menghitung koloni
jamur yang tumbuh. Termasuk media semi alamiah karena dalam pembuatannya
menggunakan bahan alami dari kentang yang tidak diketahui kandungannya dan
bahan sintetik yaitu glukosa. Fungsi dari Komposisi Media PDA (Potato Dextrose
Agar) yaitu Potato extract atau ekstrak kentang merupakan sumber karbohidrat atau
makanan bagi biakan pada media PDA (Potato Dextrose Agar), Dextrose atau
gugusan gula baik itu monosakarida maupun polisakarida merupakan penambah
nutrisi bagi biakan pada media PDA (Potato Dextrose Agar) dan agar merupakan
bahan media atau tempat tumbuh bagi biakan yang baik, karena mengandung cukup
air. Media Potato Dextrose Agar (PDA) memiliki fungsi secara umum untuk
menjadi media pertumbuhan atau pembiakan mikroorganisme jenis jamur (Astina,
2016).
potato dextrose agar merupakan salah satu media yang baik digunakan untuk
membiakkan suatu mikroorganisme, baik itu berupa cendawan/fungsi, bakteri,
maupun sel mahluk hidup. Media PDA merupakan jenis media biakan dan memiliki
bentuk/ konsistensi padat (solid). PDA digunakan untuk enumerasi yeast dan
kapang dalam suatu sampel atau produk makanan. PDA mengandung sumber
karbohidrat dalam jumlah cukup yaitu terdiri dari 20% ekstrak kentang dan 2%
glukosa sehingga baik untuk pertumbuhan kapang dan khamir tetapi kurang baik
untuk pertumbuhan bakteri. Komposisinya PDA berupa kentang (4 g/L (berasal dari
200 gr kentang)), dektrose (15 g/L) dan aquades 1L. Dalam mikrobiologi media
PDA (Potato Dextrose Agar) digunakan untuk menumbuhkan atau
mengidentifikasi yeast dan kapang. Dapat juga digunakan untuk enumerasi yeast
dan kapang dalam suatu sampel atau produk makanan. PDA mengandung sumber
karbohidrat dalam jumlah cukup yaitu terdiri dari 20% ekstrak kentang dan 2%
glukosa sehingga baik untuk pertumbuhan kapang dan khamir tetapi kurang baik
untuk pertumbuhan bakteri (Winda, 2009).
42
2.4. TSA (Tryptic Soy Agar)
Trypticase Soy Agar adalah agar non selektif yang dapat digunakan secara
luas untuk menumbuhkan dan mengisolasi bakteri fastidious dan non-fastidious,
namun tanpa suplementasi darah tidak dapat menumbuhkan bakteri yang sangat
fastidious. TSA dapat digunakan untuk melakukan kultur secara aerob maupun
anaerob. TSA adalah agar base yang direkomendasikan WHO untuk melakukan
kultur S. pneumoniae. Komposisi TSA per liter adalah 15 gram pancreatic digest of
casein, 5 gram papaic digest of soybean meal, 15 gram agar, dan 5 gram NaCl. Agar
ini memiliki pH 7.3 ± 0.2 pada suhu 25°C. Pancreatic digest of casein adalah kasein
yang telah dihidrolisis secara parsial oleh enzim yang berasal dari pancreas
menghasilkan pepton yang dikenal sebagai tryptone. Tryptone memiliki kadar
nitrogen yang tinggi dan karbohidrat yang rendah, menjadi sumber utama nitrogen
pada TSA dan mengandung asam amino triptofan. Papaic digest of soybean meal
atau soytone merupakan hidrolisat soybean flour dengan enzim pepaya yang
memiliki kadar karbohidrat tinggi.TSA tidak dapat digunakan sebagai media isolasi
spesimen klinis yang mengandung berbagai jenis patogen, kecuali disuplementasi
dengan 5% darah.Tidak terdapat karbohidrat tambahan pada TSA, sehingga dapat
digunakan untuk menentukan hemolisis bakteri.Karbohidrat tambahan pada media
pertumbuhan S. pneumoniae dapat menyebabkan pH lebih cepat menjadi asam yang
merupakan hasil metabolisme energi oleh bakteri (Afnia Maulidina, 2011).
TSA merupakan media kultur universal, hampir semua jenis bakteri bisa
tumbuh pada media ini . media ini mengandung banyak nutrsi sehingga media ini
sering digunakan untuk membiakan bakteri dan untuk menyimpan bakteri tersebut.
Trypticase Kedelai Agar digunakan untuk medium pertumbuhan dengan tujuan
pegawainya morfologi koloni,mengembangkan kultur murni, pertumbuhan untuk
tes biokimia. TSA juga biasa digunakan untuk penghitungan jumlah bakteri. TSA
juga merupakan media agar yang digunakan untuk kegiatan pengisolasian dan
pembudidayaan berbagai macam mikroorganisme yang bersifat aerobik. Medium
ini digunakan untuk berbagai tujuan yang mencakup pemeliharaan stok budidaya,
isolasi berbagai macam spesiesmikroorganisme (Waluyo, 2008).
43
2.5. NA ( Nutrient Agar)
Nutrient Agar (NA) adalah salah satu contoh media yang sering digunakan
untuk menumbuhkan dan mengembangbiakkan bakteri. Sementara itu, Potato
Dextrose Agar (PDA) merupakan media yang sering digunakan untuk
menumbuhkan dan mengembangbiakkan yeast dan kapang. Nutrient Agar (NA)
merupakan media biakan yang dibuat dari ekstrak beef, pepton, dan agar,
sedangkan Potato Dextrose Agar (PDA) dibuat dari kentang dan agar. Menurut
Radji (2011), karbohidrat sangat dibutuhkan oleh bakteri karena karbohidrat
merupakan substrat utama untuk metabolisme bakteri. Hampir setengah berat
kering suatu bakteri merupakan unsur karbon. Karbon dapat ditemukan dalam
senyawa karbohidrat, sehingga karbohidrat sangat berperan penting untuk
mendukung pertumbuhan bakteri. Nutrient Agar dibuat dari campuran ekstrak
daging dan peptone dengan menggunakan agar sebagai pemadat.. Dalam hal iniagar
digunakan sebagai pemadat, karena sifatnya yang mudah membeku
danmengandung karbohidrat yang berupa galaktam sehingga tidak mudah
diuraikan olehmikroorganisme (Porang, 2016).
Nutrient Agar atau NA merupakan salah satu media yang umum digunakan
dalam prosedur bakteriologi seperti uji biasa dari air, sewage, produk pangan, untuk
membawa stok kultur, untuk pertumbuhan sampel pada uji bakteri, dan untuk
mengisolasi organisme dalam kultur murni. Hal ini berguna karena tetap solid
bahkan pada suhurelatif tinggi. Juga, bakteri tumbuh di nutrient agar tumbuh di
permukaan, dan jelasterlihat sebagai koloni kecil. Didalam kaldu nutrisi, bakteri
tumbuh dalam cairan, dan dipandang sebagai zat pekat bukan rumpun sejelas
dibedakan. Cara membuat media Nutrient Agaratau NA yaitu dengan cara
menimbang bubuk media Nutrient Agar atau NA sebanyak 11,5 gram dan
dilarutkan dengan menggunakan aquadest sebanyak lima ratus mililiter, kemudian
diaduk dan dihomogenkan dengan bantuan pemanasan kompor listrik, dicek pH
media Nutrient Agar Setelah itu media disterilisasi dengan autoclave selama lima
belas menit dalam suhu 121ºC dan bila media tidak akan segera digunakan
sebaiknya media disimpan dalam kulkas, dan jika media hendak digunakan untuk
pemeriksaan bakteriologi,media dipanaskan dahulu dengan kompor listrik dan
dituang kedalam petridisk (Kusnadi, 2003).
44
2.6. TSB (Trypticase Soy Broth)
Trypticase Soy Broth atau TSB adalah media yang diperkaya untuk tujuan
umum, untuk isolasi, dan penumbuhan bermacam mikroorganisme. Media ini
banyak digunakan untuk isolasi bakteri dari spesimen laboratorium dan akan
mendukung pertumbuhan mayoritas bakteri patogen. Media TSB mengandung
kasein dan pepton kedelai yang menyediakan asam amino dan substansi nitrogen
lainnya yang membuatnya menjadi media bernutrisi untuk bermacam
mikroorganisme tersebut. Dekstrosa adalah sumber energi dan natrium klorida
mempertahankan kesetimbangan osmotik. Dikalium fosfat ditambahkan sebagai
buffer untuk mempertahankan pH Media Tryptic Soy Broth (Insani, 2011).
Tryptic Soy Broth media tujuan umum sering disebut sebagai kedelai
kasein medium digest, disingkat dengan TSB. Media ini awalnya dikembangkan
untuk digunakan tanpa darah dalam menentukan efektivitas sulfonamide terhadap
pneumocci dan organisme lainnya. Tryptic Soy Broth atau TSB dianjurkan untuk
pengujian kontaminan bakteri dalam kosmetik dan sesuai dengan standar yang
ditetapkan dalam makanan dan industri. Tryptic Soy Broth atau TSB dipilih oleh
USDA Hewan dan Tumbuhan Kesehatan Layanan direkomendasikan oleh Komite
Nasional untuk standar laboratorium Klinik (NCCLS) untuk inokulum persiapan
dalam tes harddisk difusi. Tryptic Soy Broth atau TSB ditambah dengan SPS dan
CO adalah kaldu yang sangat baik untuk kultur darah di klinik aplikasi. Zat
makanan yang dibutuhkan bakteri pada umumnya sangat bervariasi, dapat
berbentuk senyawa-senyawa organik sederhana atau senyawa-senyawa organik
komplek (majemuk). Untuk melakukan hal ini, haruslah dimengerti jenis-jenis
nutrien yang diisyaratkan oleh bakteri dan juga macam lingkungan fisik yang
menyediakan kondisi optimum bagi pertumbuhannya. Media buatan merupakan
tempat hidup bagi mikroba. Medianya adalah jenis agar TSA dan TSB yang
merupakan media kultur universal, hampir semua jenis bakteri bisa tumbuh pada
media ini. Pada pembuatan media hal penting yang harus dilakukan adalah
mensterilkan tempat, alat, dan tangan menggunakan alkohol. Hal ini agar
lingkungan menjadi aseptis bebas dari mikroba. Pada umumnya mikroba menyukai
media yang di dalamnya mengandung banyak gizi yang cukup tinggi (Insani, 2011).
45
BAB 3

Praktikum Preparasi Media Kultur Jamur dan Bakteri dilaksanakan pada hari
Jumat tanggal 5 Maret 2021 pada pukul 13.30 sampai dengan selesai, dilaksanakan
secara online melalui aplikasi tatap muka zoom.
3.2. Alat dan Bahan

Mikrobiologi Akuatik adalah pena, buku, kertas HVS, pensil, penggaris, hp, laptop.
3.3. Prosedur Kerja

1. Mempersiapkan alat dan bahan yang di butuhkan.
2. Membaca dan memahami modul dan cara kerja.
3. Melihat dan memahami video yang telah di berikan.
4. Mendengarkan penjelasan materi yang diberikan asisten.
46
BAB 4
4.1. Hasil
Adapun hasil dari praktikum Preparasi Media Kultur Jamur dan Bakteri
adalah sebagai berikut.
Tabel 4.1.1. Hasil Praktikum Pengamatan Preparasi Media Kultur Jamur dan
Bakteri
NO. Nama Media Gambar Keterangan
1. PDA Penicillium chrysogenum di PDA
2. TSA menumbuhkan dan mengisolasi

bakteri fastidious dan non-
fastidious
3. NA Koloni bakteri yang tumbuh pada
medium NA amilum
4. TSB kolonial kasar, dan halus pada
bakteri Enterobacter cloacae
47
4.2 Pembahasan
Alat dan bahan yang digunakan pada Praktikum Preparasi Media Kultur
Jamur dan Bakteri adalah Kaldu ikan dengan dosis 200 gram per liter, agar
rumah tangga yang plain (agar Swallow), Erlenmeyer, pipet volumetric,
autoklaf, cawan petri, kulkas, kentang 200 gram, gula pasir 100 gram, agar 14
sampai 15 gram, air atau aquades 1000 mililiter, pisau, kompor, panci, saringan
dan stirrer. Media yang akan dibuat yaitu TSA atau Tryptic Soy Agar dan PDA
atau Media Potato Dextrose Agar. Potato dextrose agar atau PDA merupakan
salah satu media yang baik digunakan untuk membiakkan jamur. Pembuatan
Potato Dextrose Agar (PDA) yaitu dengan cara mengupas kentang dan
mencucinya sampai bersih terlebih dahulu terus ditimbang. Kentang direbus
sampai menjadi lunak dan kemudian diambil sarinya atau airnya dan kemudian
dicampur dengan agar. Bakteri yang akan dikembangkan atau ditumbuhkan
diletakkan pada cawan petri dan kemudian diisolasi agar bakteri tersebut dapat
tumbuh dengan baik tanpa terkontaminasi dengan zat lain seperti fungi dan
virus lainnya yang dapat menyebabkan kegagalan didalam kegiatan kultur
bakteri.
TSA atau Tryptic Soy Agar merupakan media yang digunakan untuk
medium pertumbuhan bakteri. TSA atau Tryptic Soy Agar dibuat dari bahan
dasar ikan yang di ambil kaldunya.. Proses pembuatan TSA dimulai dari
membersihkan ikan sampai bersih. Setelah bersih filletkan ikan dengan diambil
dagingnya saja karena yang digunakan hanyalah bagian dagingnya saja. Potong
daging ikan membentuk potongan dadu. Pembuatan kaldu ikan dilakukan
dengan dosis 200gram/liter dengan lama waktu perebusan 45 menit pada suhu
85°C setelah mendidih. Kaldu ikan yang sudah jadi diendapkan sampai dingin
pada suhu 4°C selama semalam. Ambil kaldu dan pindahkan ke erlenmeyer dan
selanjutnya tambahkan agar rumah tangga dengan dosisi satu gram per liter dan
didihkan. Setelah itu sterilisasi erlenmeyer pada autoklaf pada suhu 121°C
selama lima belas menit. Tuang media pada cawan petri dan selanjutnya simpan
media dalam kulkas. Berdasarkan hasil yang di dapat pembuatan kaldu ikan
belum begitu maksimal.
48
BAB V
5.1 Kesimpulan
Berikut adalah kesimpulan yang didapatkan dari praktikum Preparasi Media
Kultur Jamur dan Bakteri
1. Potato Dextrose Agar (PDA) adalah media yang digunakan sebagai media
tumbuh dari jamur.
2. Triptic Soy Agar (TSA) adalah media yang digunakan sebagai media tumbuh
bakteri.
3. Alat-alat yang digunakan haruslah dalam keadaan sudah steril agar mencegah
terjadinya kegagalan didalam kegiatan kultur bakteri dan jamur.
4. Setiap mikroorganisme membutuhkan nutrisi makanan
5. Jumlah antara air dan agar harus sesuai prosedur supaya bias membeku dan
ditumbuhi.
5.2 Saran
Saran pada praktikum kali ini adalah agar waktu yang digunakan saat
praktikum dapat digunakan dengan seefisien mungkin, sehingga menjadi lebih
bermanfaat dan praktikan menjadi lebih kondusif lagi. Dan sebaiknya diakukan
secara offline agar praktikan dapat benar benar mengerti dan dapat mengenal betul
alat dan bahan yang harus disiapkan sebelum paktkm berlangsng.
49
METODE ISOLASI KULTUR JAMUR
50
BAB 1
PENDAHULUAN
1.5. Latar Belakang

Jamur atau fungi terdiri dari kapang dan khamir. Jamur adalah organisme
heterotrofik, mereka memerlukan senyawa organic untuk nutrisinya. Bila mereka
hidup dari benda organik mati yang terlarut mereka disebut saprofit. Jamur
mempunyai dinding sel yang kaku dan berbentuk uniseluler atau multiseluler
sebagian mempunyai ukuran yang mikroskopis sedangkan yang lainnya
mempunyai ukuran yang cukup besar seperti jamur merang. Jamur tidak
mengandung klorofil sehingga tidak berfotosintesis. Fungi tidak menelan
makanannya tetapi harus berupa nutrient yang larut agar dapat diabsorpsi. Fungi
yang multiseluler menghasilkan filament yaitu struktur mikroskopis seperti benang
yang disebut hifa. Kumpulan hifa disebut miselium, fungi uniseluler yang terkenal
adalah ragi dengan berbagai bentuk seperti bulat hingga oval, elips hingga ke
bentuk filament. Jamur sudah tidak asing lagi bila kita lihat misalnya warna biru
dan hijau pada buah jeruk dan keju warna putih seperti bulu pada roti, jamur di
lapangan.Jamur adalah organisme eukariotik (mempunyai inti sel) tidak
mempunyai klorofil, mempunyai spora, struktur somatik atau talus berupa sel
tunggal (uniseluler) dan umumnya berupa filament atau benang-benang bercabang
(multiseluler), berkembangbiak secara seksual dan aseksual, dinding sel umumnya
terdiri dari kitin dan selulosa atau keduanya. Jamur merupakan organisme yang
tidak mempunyai klorofil sehingga ia tidak mampu untuk memproduksi makan
sendiri karena jamur tidak bisa memanfaatkan karbondioksida sebagai sumber
karbonnya. Karbon berasal dari sumber anorganik misalnya glukosa. Oleh karena
itu jamur memerlukan senyawa organic baik dari bahan organic mati maupun dari
organisme hidup sehingga jamur dikatakan heterotroph. Jamur hidup dan
memperoleh makanan dari bahan organic mati dinamakan saprofit, sedangkan yang
hidup dan memperoleh makanan dari organisme hidup dinamakan parasite.
Beberapa spesies dapat menggunakan nitrogen, itulah sebabnya mengapa medium
biakan untuk jamur biasanya berupa pepton, suatu produk protein yang terhidrolisis
(Kusnadi, 2003).
51
Jamur adalah sel mikroskopis yang tumbuh memanjang seperti benang yang
dikenal dengan hifa. Diameter hifa hanya beberapa micrometer, tetapi dapat
tumbuh memnjang hingga mencapai beberapa meter. Hifa yang tumbuh
membentuk masa disebut misellium atau tebal menyerupai kawat dan disebut
sebagai rhizomorphs yang tampak seperti akar. Jamur yang tumbuh dengan cara
memperpanjang hifa pada ujungnya dikenal sebagai pertumbuhan apical atau pada
bagian tengah hifa yang disebut pertumbuhan iterkalar. Hifa pada beberapa kapang
mempunyai penyekat melintang atau septa dan adanya septa ini dipergunakan untuk
identifikasi. Hifa tersebut memanjang diatas atau tembus melalui medium dimana
kapang itu tumbuh (Soekarto, 2008).
Saprofit merupakan jamur pelapuk dan pengubah susunan zat organic yang
mati. Jamur saprofit menyerap makanannya dari organisme yang telah mati seperti
kayu tumbang dan buah jatuh. Sebagian besaar jamur saprofit mengeluarkan enzim
hydrolase pada substrat makanan untuk mendekomposisi molekul kompleks
menjadi molekul sederhana sehingga mudah diserap oleh hifa. Selain itu juga hifa
dapat langsung menyerap bahan makanan organic dalam bentuk sederhana yang
dikeluarkan inangnya. Saprofit menghancurkan sisa-sisa tumbuhan dan hewan
yang kompleks menguraikannya menjadi zat-zat kimia yang lebih
sederhanameningkatkan kesuburannya. Sebaliknya mereka juga dapat merugikan
kita bilamana mereka mebusukkan kayu, tekstil, makanan dan bahan-bahan lain
(Anonim, 2008).
1.6.Tujuan
Praktikum ini bertujuan untuk melihat pertumbuhan fungsi yang dihasilakn
dari isolasi langsung serta meningkatkan dalam teknik isolasi fungi.
52
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1 Isolasi kultur jamur
jamur terdiri dari kapang dan khamir. Jamur adalah biota heterotrofik,
mereka meminta senyawa organik untuk nutrisinya. Bila mereka hidup dari benda
organik mati yang terlarut mereka disebut safrofil. Jamur memiliki dinding sel yang
kaku dan berbentuk uniseluler atau multiseluler sebagian memiliki ukuran yang
mikroskopis sedangkan yang lainnya mempunyai ukuran yang cukup besar seperti
jamur merang. Jamur tidak mengandung klorofil jadi tidak berfotosintesis. Jamur
tidak makan makanannya tetapi harus terdiri gizi yang larut agar-agar bisa
diabsorpsi. Jamur yang multiseluler menghasilkan filamen yaitu struktur
mikroskopis seperti benang yang disebut hifa. Kumpulan hifa disebut
miselium,jamur uniseluler yang terkenal adalah ragi dengan berbagai bentuk seperti
bulat hingga lonjong,elips hingga bentuk filamen. Jamur sudah tidak asing lagi
kapan kita lihat misalnya warna biru dan hijau pada buah jeruk dan keju warna putih
seperti bulu pada roti jamur dilapangan (Syaroni,2014).
Jamur adalah habitat eukariotik(memiliki inti sel) tidak memiliki klorofil,
memiliki spora, struktur somatic atau lereng terdiri sel tunggal dan umum terdiri
filamen atau benang-benang bercabang, berkembangbiak secara seksi dan aseksual,
dinding sel umumnya terdiri dari kitin dan selulosa atau antara jamur merupakan
habitat yang tidak memiliki klorofil jadi besar besaran tidak mampu memproduksi
makan sendiri karena jamur tidak bisa memanfaatkan karbondioksida sebagai
sumber karbonnya. Karbon kehadiran dari sumber anorganik misalnya Gram. Oleh
karena itu meminta senyawa organik baik dari bahan organik mati juga jadi budaya
hidup jadi jamur disajikan heterotroph. Jamur ini ada yang hidup dan terima
makanan dari habitat hidup da nada pula yang menerima makanan dari organik mati
seperti sisa-sisa hewan atau tumbuhan. Jamur hidup dan terima makanan dari bahan
organik mati dinakan saprofil, sedangkan yang hidup dan terima makanan dari
habitat hidup dinamakan parasite. Beberapa spesies bisa menggunakan nitrogen.
Jamur lebih tahan terhadap pH suasana asam jika dibandingkan dengan bakteri
(Rachman, 2005).
53
2.2 Metode Gores
Metode gores umumnya digunakan mengisolasi koloni mikroba pada cawan
agar sehingga didapatkan koloni terpisah dan merupakan biakan murni. Dasar
metode ini yaitu dengan menggoreskan suspensi bahan yang mengandung mikroba
pada permukaan medium agar yang sesuai pada cawan petri. Setelah inkubasi maka
pada bekas goresan akan tumbuh koloni-koloni terpisah yang mungkin berasal dari
1 sel mikroba, sehingga dapat diisolasi lebih lanjut. Penggoresan yang sempurna
akan menghasilkan koloni yang terpisah. Metode ini mempunyai dua keuntungan,
yaitu menghemat bahan dan waktu. Metode cawan gores yang dilaksanakan
dengan baik kebanyakan akan menyebabkan terisolasinya mikroorganisme yang
diinginkan. Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah.
Inoculum digoreskan dipermukaan media media gar mutrien dalam cawan petri
dengan jarum pindah. Diantara garis-garis goresan akan terdapat sel sel yang cukup
terpisah sehingga dapat tumbuh menjadi koloni (Solikah, Ed Lusi,2019).
Teknik ini lebih menguntungkan jika ditinjau dari sudut ekonomi dan waktu,
tetapi memerlukan keterampilan-keterampilan yang diperoleh dengan latihan.
Penggoresan yang sempurna akan menghasilkan koloni yang terpisah. Inokulum
digoreskan di permukaan media agar nutrien dalam cawan petri dengan jarum
pindah (lup inokulasi). Di antara garis-garis goresan akan terdapat sel-sel yang
cukup terpisah sehingga dapat tumbuh menjadi koloni. Cara penggarisan dilakukan
pada medium pembiakan padat bentuk lempeng. Bila dilakukan dengan baik teknik
inilah yang paling praktis. Dalam pengerjaannya terkadang berbeda pada masing-
masing laboratorium tapi tujuannya sama yaiitu untuk membuat goresan sebanyak
mungkin pada lempeng medium pembiakan. Ada beberapa teknik dalam metode
goresan, antara lain metode gores T, kuadrant, sinambung dan radiant. Metode
gores atau streak plate menggunakan loop ose dan menggoreskannya ke permukaan
medium agar dengan pola tertentu dengan harapan pada ujung goresan, hanya sel-
sel bakteri tunggal yang terlepas dari ose dan menempel ke medium. Sel-sel bakteri
tunggal ini akan membentuk koloni tunggal yang kemudian dapat dipindahkan ke
medium selanjutnya agar didapatkan biakan murni (Waluyo, 2007).
54
2.3 Metode tuang dan sebar
Metode cawan tuang, cara lain untuk memperoleh koloni murni dari populasi
campuran mikroorganisme adalah dengan mengencerkan specimen dalam medium
agar yang telah dicairkan dan didinginkan (±500C) yang kemudian dicawankan.
Karena konsentrasi sel-sel mikroba di dalam specimen pada umumnya tidak
diketahui sebelumnya, maka pengenceran perku dilakukan beberapa tahap sehingga
sekurang-kurangnya satu diantara cawan tersebut mengandung koloni terpisah
diatas permukaan ataupun di dalam agar. Metode ini memboroskan bahan dan
waktu namun tidak memerlukan keterampilan tinggi (Hadioetomo, 1993).
Metode tebar,stetes inoculum diletakkan dalam sebuah medium agar nutrient
dalam cawan petri dan dengan menggunakan batang kaca yang bengkok dan steril.
Inokulasi itu disebarkan dalam medium batang yang sama dapat digunakan dapat
menginokulasi pingan kedua untuk dapat menjamin penyebaran bakteri yang
merata dengan baik. Pada beberapa pinggan akan muncul koloni koloni yang
terpisah-pisah. Sedangkan metode tuang, cara lain untuk memperoleh koloni murni
dari populasi campuran mikroorganisme adalah dengan mengencerkan specimen
dalam medium agar yang telah dicairkan dan didinginkan yang kemudian
dicawankan. Karena konsentrasi sel-sel mikroba di dalam specimen pada umumnya
tidak diketahui sebelumnya, maka pengenceran perlu dilakukan beberapa tahap
sehingga sekurang-kurangnya satu diantara cawan tersebut mengandung koloni
terpisah diatas permukaan ataupun dialam agar. isolasi menggunakan media cair
dengan cara pengenceran. Dasar melakukan pengenceran adalah penurunan jumlah
mikroorganisme sehingga pada suatu saat hanya ditemukan satu sel di dalam tabung
(Winarni,1997)
Pengenceran sampel sama seperti pada cara penuangan dengan memipet
sebanyak 0,1 ml cairan dari botol pengencer dan biakan cairan mengalir keatas
permukaan agar. Cairan sample disebarkan dengan penyebar yang terbuat dari
gelkan. Pada tehnik ini steririlasi penyebar dilakukan dengan mencelupkan kedalam
alkohol dan kemudian dipanaskan sehingga terbakar habis. Penyebar didinginkan
dahulu sebelum dugunakan untuk menyebar cairan sampai pada prmukaan agar
lempengan tersebut. (Waluyo, 2008).
55
2.4 Tempe
Tempe adalah salah satu produk fermentasi yang umumnya berbahan baku
kedelai yang difermentasi dan mempunyai nilai gizi yang baik. Fermentasi pada
pembuatan tempe terjadi karena aktivitas kapang Rhizopus oligosporus. Fermentasi
pada tempe dapat menghilangkan bau langu dari kedelai yang disebabkan oleh
aktivitas dari enzim lipoksigenase. Fermentasi kedelai menjadi tempe akan
meningkatkan kandungan fosfor. Hal ini disebabkan oleh hasil kerja enzim fitase
yang dihasilkan kapang Rhizopus oligos porus yang mampu menghidrolisis asam
fitat menjadi inositol dan fhosfat yang bebas. Jenis kapang yang terlibat dalam
fermentasi tempe tidak memproduksi toksin, bahkan mampu melindungi tempe dari
aflatoksin. Tempe mengandung senyawa antibakteri yang diproduksi oleh kapang
tempe selama proses fermentasi (Cahyadi, 2007). secara umum tempe berwarna
putih, dikarenakan pertumbuhan miselia kapang yang merekatkan biji-biji kedelai
sehingga terbentuk tekstur yang memadat. Tempe memiliki aroma yang khas
dikarenakan adanya degradasi dari komponen-komponen dari kedelai itu sendiri
(Dewi dan Aziz, 2009).
Sejarah Awal sebelum tahun 1875 Tempe mungkin berasal dari pulau Jawa
setidaknya beberapa abad yang lalu. Makanan ini bisa disebut ini produk pengganti
daging, karena mereka memiliki banyak tekstur yang sama dengan daging, rasa,
dan kandungan protein yang tinggi seperti makanan daging (Limando dkk., 2007).
Kata tempe diduga berasal dari bahasa jawa kuno. Pada zaman jawa kuno terdapat
makanan berwarna putih terbuat dari tepung sagu yang disebut tumpi. Tempe segar
yang juga berwarna putih terlihat memiliki kesamaan dengan makanan tumpi
tersebut (Badan Standarisasi Nasional, 2012). Secara umum, tempe berwarna putih
karena pertumbuhan miselia kapang yang merekatkan biji-biji kedelai sehingga
terbentuk tekstur yang memadat. Kaum vegetarian di seluruh dunia banyak yang
telah menggunakan tempe sebagai pengganti daging. Akibatnya, saat ini tempe
tidak hanya diproduksi di Indonesia tetapi juga di banyak tempat di dunia. Berbagai
penelitian di sejumlah negara, seperti Jerman, Jepang, dan Amerika Serikat.
Indonesia juga sekarang berusaha mengembangkan galur (strain) unggul Rhizopus
untuk menghasilkan tempe yang lebih cepat, berkualitas, memperbaiki kandungan
gizi tempe (Anwar, 2013).
56
2.5 Ikan asin
Ikan asin adalah ikan yang telah diawetkan dengan cara penggaraman.
Pengawetan ini sebenarnya terdiri dari dua proses, yaitu proses penggaraman dan
pengeringan. Tujuan utama dari penggaraman sama dengan tujuan proses
pengawetan atau pengolahan lainnya, yaitu untuk memperpanjang daya tahan dan
daya simpan ikan (Simanjuntak, 2012). Ikan asin termasuk salah satu jenis makanan
yang sangat digemari oleh masyarakat Indonesia dan merupakan salah satu unsur
penting dalam peningkatan gizi yang relatif murah. Meskipun memiliki gizi yang
cukup tinggi, ikan asin sering dianggap makanan masyarakat golongan ekonomi
lemah. Tetapi saat ini ikan asin telah diterima oleh masyarakat golongan ekonomi
menengah keatas. Bahkan produk-produk ikan asin tertentu dapat dikategorikan
sebagai makanan mewah. Ikan hasil pengolahan dan pengawetan umumnya sangat
disukai oleh masyarakat karena produk akhirnya mempunyai ciri-ciri khusus yakni
perubahan sifat-sifat daging seperti bau (odour), rasa (flavour), bentuk (appereance)
dan tekstur (Simanjuntak, 2012).
Ada dua cara proses pengawetan ikan menurut produk pengolahan yaitu
secara tradisional dan secara moderen. Pengawetan ikan secara tradisional yaitu
penggaraman, pengeringan, pemindangan pengasapan, peragian dan pendiginan
ikan, sedangkan secara moderen yaitu pengalengan pembekuan (Antoni, 2010)`
Ikan asin termasuk salah satu jenis makanan yang sangat digemari oleh masyarakat
Indonesia dan merupakan salah satu unsur penting dalam peningkatan gizi yang
relatif murah. Meskipun memiliki gizi yang cukup tinggi, ikan asin sering dianggap
makanan masyarakat golongan ekonomi lemah. Tetapi saat ini ikan asin telah
diterima oleh masyarakat golongan ekonomi menengah keatas. Bahkan produk-
produk ikan asin tertentu dapat dikategorikan sebagai makanan mewah. Ikan hasil
pengolahan dan pengawetan umumnya sangat disukai oleh masyarakat karena
produk akhirnya mempunyai ciri-ciri khusus yakni perubahan sifat-sifat daging
seperti bau (odour), rasa (flavour), bentuk (appereance) dan tekstur. Adanya
kontaminasi bakteri staphylococcus aureus pada ikan asin yang sulit mati walaupun
dilakukan pemanasan harus diuji lebih lanjut di Laboratorium sebelum masyarakat
mengkonsumsi (Mandal, 2006).
57
BAB 3

Praktikum Dasar-Dasar Mikrobiologi Akuatik dilaksanakan pada hari
Jumat tanggal 12 Maret 2021 pada pukul3.30 sampai dengan selesai, dilaksanakan
3.2. Alat dan Bahan

Mikrobiologi Akuatik adalah kertas HVS, pena, pensil, laptop, handphone,
penggaris.
3.3. Prosedur Kerja

1. Siapkan alat dan bahan yang digunakan saat melakukan praktikum.
2. Pakai alat pengaman berupa masker dan sarung tangan untuk memastikan
pembuatan media tetap steril.
3. Sterilisasi cawan petri dengan Bunsen gerakan memutar dengan tangan kiri dan
encerkan PDA dengan melakukan pemanasan dengan Bunsen
4. Setelah steril, masukkan media PDA hingga merata di permukaan cawan.
Pengisian jangan terlalu sedikit dan jangan terlalu banyak.
5. Panaskan kembali media dengan Bunsen tutup dengan plastic warping dan
tunggu hingga media mengeras.
6. Setelah media keras ambil jamur ose dan gores beberapa kali pada tempe
kemudia gores pada media dengan garis zigzag tidak putus.
7. Kemudian tutup rapat media dan lapisi dengan plastic warping. Tunggu hingga
jamur bertumbuh di media.
58
BAB 4
4.1. Hasil
Adapun hasil dari praktikum judul praktikum adalah sebagai berikut.
4.1. Hasil
Hasil dari praktikum dasar-dasar mikrobiologi akuatik tentang isolasi dan

kultur jamur dapat dilihat dalam tabel 4.1.1.
Tabel 4.1.1. hasil praktikum isolasi dan kultur jamur

No Nama sampel Gambar
1 Tempe
2 Ikan asin
59
4.2. Pembahasan
Pada praktikum kali ini mengenai metode isolasi dan kultur jamur, kita dapat
mengetahui dan memahami metode isolasi dan kultur pada jamur. Isolasi
merupakancara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba tertentudari
lingkungannya, sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni. Isolasi
mikrobia pada prinsipnya adalah memisahkan suatu jenis mikrobia dengan jenis
mikrobia lainnya dengan asal mikrobia yang terdiri dari berbagai macam
spesies.Hal ini dapat dilakukan dengan menumbuhkan pada media padat. Pada
media padat ini sel-sel akan membentuk suatu koloni sel yang tetap Media yang
digunakan pada isolasi dan kultur pada jamur yaitu media PDA(Potato Dextrose
Agar). Isolasi jamur menggunakan tempe sebagai sampelnya. pada isolasi jamur
menggunakan tempe. Jamur tempe adalah salah satu mikroorganisme semi anaerob
dan organism saprofit. Hal ini dapat dilihatakan kebutuhan jamur tempe berupa
udaradan sumber makanannya. Jamur tempe merupakan organisme yang
membutuhkan sedikit sekali udara dan sumber makanan yang berasal dari jasad
mati, oleh karena itu jamur tempe dapat diisolasi pada media PDA (Potato Dextros
Agar). Terlebih dahulu sterilkan tangan dan tempat akan melakukan isolasi dengan
menggunakan alkohol agar steril pada saat pratikum ini.
Hidupkan bunsen dengan menggunakan korek api. Pertama tuang media agar
sedikit demi sedikit kedalam cawan petri, tutup dengan menggunakan plastik warp
dan bunsen, tunggu beberapa menit sampai agar cukup keras. Setelah dilihat agar
sudah cukup keras atau sudah dapat melakukan penggoresan ambil goresan tempe
sedikit dengan menggunakan kawat dan setelah itu lakukan penggoresan pada
media yang telah di ajarkan. Setelah selesai tutup kembali media dengan
menggukan plastik warp dan bunsen. Hal ini dilakukan untuk menumbuhkan jamur.
Isolasi pun selesai dan cawan yang berisi isolat kemudian di simpan dan tunggu
beberapa hari sampai jamur dalam cawan tumbuh dan berkembangbiak. Apabila
jamur tumbuh disekitar tempat diletakkan nya isolat maka isolasi yang dilakukan
berhasil. Tetapi apabila tumbuh jamur yang jaraknya jauh dari tempat diletakkan
nya isolat maka jamur tersebut telah terkontaminasi. Hal ini terjadi karena pada saat
melakukan isolasi keadaan dan lingkungan sekitar tidak steril.
60
BAB V
1.1 Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang didapat setelah melakukan praktikum ini adalah
sebagai berikut:
1. Saat melakukan praktikum praktikan harus diam agar tidak terjadi
kontaminasi, sterilkan tangan untuk melakukan isolasi dengan
menggunakan alkohol agar steril.
2. Jamur tempe adalah salah satu mikroorganisme semi anaerob dan organism
saprofit.
3. Jamur adalah organisme hidup yang tidak mempunyai klorofil
sehingga mirip dengan tumbuhan sederhana.
4. Berbagai macam kandungan dalam tempe mempunyai nilai obat, seperti
antibiotika untuk menyembuhkan infeksi dan antioksidan pencegah
penyakit.
5. Jamur tempe merupakan organisme yang membutuhkan sedikit sekali udara
dan sumber makanan yang berasal dari jasad mati.
6. Isolasi jamur dapat dilaksanakan dengan menggunakan media PDA . jamur
yang diisolasi adalah jamur yang ada dalam roti, udara, dan tnah. Pada jamur
yang ada di udara dideteksi bahwa merupakan jamur rhizophus. Pada roti
terdeteksi jamur rhizhopus, torula dan aspergilus. Pada tanah terdeteksi
jamur penicillium, clodosporrium, rhizhopus, dan fusarium.
7. Teknik isolasi jamur harus dilakukan secara aseptic agar tidak
terkontaminasi mikroba. Dapat juga digunakan antimikrobia pada media.
5.2 Saran
Diharapakan praktikan lebih memahami langkah kerja praktikum, dan
sebaiknya praktikan memperhatikan cara menggoreskan pada media dengan baik
dan benar agar jamur dapat tumbuh dan tidak terkena kontaminan, praktikan lebih
kondusif dan asisten dapat merangkum hasil dari praktikum secara garis besar.
61
METODE SOLASI KULTUR BAKTERI
62
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1. Latar Belakang

Isolasi bakteri merupakan suatu cara untuk memisahkan atau memindahkan
mikroba tertentu dari lingkungannya sehingga diperoleh kultur murni atau biakan
murni. Kultur murni ialah kultur yang sel-sel mikrobanya berasal dari pembelahan
dari satu sel tunggal. Kultur murni atau biakan murni sangat berguna didalam
mikrobiologi, yaitu untuk menelaah dan mengidentifikasi mikroorganisme,
termasuk penelaahan ciri-ciri kultural, morfologis, fisiologis, maupun serologis,
memerlukan suatu popolasi yang terdiri dari satu macam mikroorganisme
saja.Sebelum mengisolasi, harus diketahui mikroba apa yang akan diisolasi dan
habitatnya menentukan sampel dan media apa yang akan digunakan. Pemilihan
mikroba sebagai sumber enzim mempunyai beberapa keuntungan bila
dibandingkan yang diisolasi dari tanaman ataupun hewan. (Waluyi, 2007).
Ada beberapa cara umum yang dapat dilakukan dengan cara goresan (steak
plate), cara taburan atau tuang (pour plate), serta mikromanipulator (the
micromanipulator methods). Secara alami, bakteri di alam ditemukan dalam
populasi campuran. Hanya dalam keadaan tertentu saja populasi ini ditemukan
dalam dalam keadaan murni . Untuk dapat mempelajari sifat biakan, morfologi, dan
analisis lain, maka organisme yang akan diteliti harus dapat dipisahkan.
Diadakannya percobaan isolasi ini adalah untuk memelihara suatu mikroorganisme
yaitu bakteri dan media yang ada serta membedakan bahwa setiap mikroorganisme
memiliki peranan yang berbeda dalam kehidupan, baik yang merugikan maupun
yang menguntungkan. Media berfungsi untuk menumbuhkan mikroba, isolasi,
memperbanyak jumlah, menguji sifat-sifat fisiologi dan perhitungan jumlah
mikroba, dimana dalam proses pembuatannya harus disterilisasi dan menerapkan
metode aseptis untuk menghindari kontaminasi pada media. Pada praktikum ini,
Media yang digunakan untuk mengisolasi jamur adalah medium PDA dan media
yang digunakan untuk mengisolasi bakteri adalah media NA. Dalam melakukan
pengamatan bakteri dan jamur dalam tanah, dapat dilakukan di dalam laboratorium
(Ani, 2002).
63
Prinsip dasar dari teknik isolasi ini adalah untuk memisahkan mikrobia untuk
mendapatkan biakan murni yang akan diamati. Dalam praktikum ini, medium
tumbuh jamur dan bakteri yang digunakan adalah medium PDA (Potato Dextros
Agar) dan medium NA (Nutien Agar). Medium PDA biasanya digunakan untuk
mengisolasi jamur dan NA biasanya digunakan untuk mengisolasi bakteri.Prinsip
pada metode isolasi jamur dan bakteri hampir sama, yaitu pengenceran yang
dilakukan pada praktikum ini adalah pengenceran 103. Hal tersebut bertujuan untuk
memperoleh suspensi jenis mikroorganisme spesies tertentu dan dalam jumlah
koloni yang cukup. Oleh karena itu, pentingnya praktikum pada kegiatan kali ini
dimaksudkan agar praktikan dapat memahami pemurnian mikrobia dalam
kehidupan. Isolasi adalah cara untuk memisahkan atau memindahkan mikroba
tertentudari lingkungannya, sehingga diperoleh kultur murni atau biakan murni.
Kultur murni ialah kultur yang sel-sel mikrobianya berasal dari pembelahan dari
satu sel tunggal. Isolasi dapat dilakukan dengan dua metode yaitu metode cawan
tuang dan metode cawan gores. Isolasi adalah cara untuk memisahkan atau
memindahkan mikroba tertentudari lingkungannya, sehingga diperoleh kultur
murni atau biakan murni. Kultur murni ialah kultur yang sel-sel mikrobianya
berasal dari pembelahan dari satu sel tunggal (Ani, 2002).
1.2. Tujuan
Tujuan praktikum ini adalah meningkatkan kemampuan mahasiswa melakukan
isolasi dan kultur bakteri yang bersumber dari lingkungan akuatik.
64
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Isolasi Kultur Bakteri
Isolasi adalah mengambil mikroorganisme yang terdapat di alam dan

menumbuhkannya dalam suatu medium buatan. Prinsip dari isolasi mikroba adalah
memisahkan satu jenis mikroba dengan mikroba lainnya yang berasal dari campuran
bermacam-macam mikroba. Hal ini dapat dilakukan dengan menumbuhkannya
dalam media padat sel-sel mikroba akan membentuk suatu koloni sel yang tetap pada
tempatnya. Isolasi bakteri atau biakan yang terdiri dari satu jenis mikroorganisme
dikenal sebagai biakan murni atau biakan aksenik. Biakan yang berisi lebih dari
satu macam mikroorganisme dikenal sebagai biakan campuran, jika hanya terdiri
dari dua jenis mikroorganisme, yang dengan sengaja dipelihara satu sama lain
dalam asosiasi, dikenal sebagai biakan duajenis. Pada permulaannya tabung atau
cawan petri harus dalam keadaan steril lalu setelah itu dimasukkan mikroba yang
diinginkan, tabung atau cawan harus dilindungi terhadap kontaminasi dari luar.
Sumber utama pencemaran dari luar adalah udara, yang banyak mengandung
mikroorganisme yang berterbangan. Bentuk cawan petri, dengan tutup yang saling
menyelubungi, dirancang untuk mencegah pencemaran udara (Suriawaria, 2005).
Media agar merupakan substrat yang sangat baik untuk memisahkan campuran
mikroorganisme sehingga masing-masing jenisnya menjadi terpisah-pisah.
Teknik yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme pada media agar
memungkinkannya tumbuh dengan agak berjauhan dari sesamanya, juga
memungkinkan setiap selnya berhimpun membentuk koloni, yaitu sekelompok
massa sel yang dapat dilihat dengan mata telanjang. Bahan yang diinokulasikan
pada medium disebut inokulum, dengan menginokulasi medium dengan metode
cawan gores atau media cawan tuang, sel-sel mikroorganisme akan terpisah sendiri-
sendiri. Setelah inkubasi, sel-sel mikroba individu memperbanyak diri secara cepat.
Koloni dapat terlihat oleh mata telanjang (Buckle, 2007).
65
2.2. MetodeGores
Teknik Penanaman dengan Goresan (Streak) dapat didefenisikan sebagai
suatu metode yang dapat digunakan untuk mengisolasi suatu mikroorganisme dari
campurannya atau meremajakan kultur ke dalam media-meida baru. Ada beberapa
tekhnik yang dapat digunakan dalam melakukan metode gores ini yaitu dengan
metode goresan sinambung, metode goresan huruf T dan metode goresan kuadran.
Semua metode ini memiliki cara kerja yang berbeda-beda, namun memiliki fungsi
dan tujuan yang sama yaitu sama-sama digunakan untukd dapat mengisolasi suatu
mikroorganisme dari campurannya atau meremajakan kultur ke dalam media-meida
baru. Metode goresan sinambung dapat didefenisikan sebgai suatu metode yang
dapat dilakukan untuk melakukan perkembang biakan mikroba dengan prosedur
kerjanya yaitu inokulum loop (jarum ose) yang telah disterilisasi menggunakan
Bunsen disentuhkan pada koloni bakteri dan gores secara berulang- ulang sampai
setengah permukaan agar. Lalu cawan petri diputar 180odan dilanjutkan dengan
goresan sampai habis (Hidayat, 2006).
Goresan sinambung dapat didefenisikan sebgai suatu metode yang dapat
dilakukan untuk melakukan perkembang biakan mikroba yang umumnya
digunakan bukan untuk mendapatkan koloni tunggal, melainkan untuk peremajaan
ke cawan atau medium baru. Kemudian goresan T dapat didefenisikan sebgai suatu
metode yang dapat dilakukan untuk melakukan perkembang biakan mikroba yang
dapat dilakukan dengan prosedur kerjanya yaitu cawan petri dibagi menjadi 3
bagian terlebih dahulu menggunakan spidol dan daerah tersebut diinokulasi dengan
streak zig-zag. Jarum ose dipanaskan dan disterilisasikan serta didinginkan dalam
suhu ruang, lalu di streak zig-zag pada daerah berikutnya. Kemudian goresan
quadran (Streak quadrant) hampir sama dengan goresan T, Goresan quadran
(Streak quadrant) dapat didefenisikan sebgai suatu metode yang dapat dilakukan
untuk melakukan perkembangbiakan mikroba yang dilakukan hamper sama seperti
metode goresan huruf T namun berpola goresan yang berbeda yaitu dibagi empat.
Daerah 1 merupakan goresan awal sehingga masih mengandung banyak sel
mikroorganisme. Goresan selanjutnya dipotongkan atau disilangkan dari goresan
pertama sehingga jumlah semakin sedikit dan akhirnya terpisah-pisah menjadi
koloni tunggal (Kusnadi, 2003).
66
2.3. Metode Tuang dan Sebar
Metode tuang atau pour plate dilakukan dengan dua cara, yaitu dengan
mencampur suspensi bakteri dengan medium agar pada suhu 50ºC kemudian
menuangkannya pada petridishatau dengan menyemprotkan suspensi pada dasar
petridish, kemudian menuangkan medium agar keatasnya dan diaduk. Setelah agar
mengeras, bakteri akan berada pada tempatnya masing-masing dan diharapkan
bakteri tidak mengelompok sehingga terbentuk koloni tunggal.Teknik ini
memerlukan agar yang belum padat dan dituang bersama suspensi bakteri ke dalam
cawan petri dan dihomogenkan lalu dibiarkan memadat. Hal ini akan menyebabkan
sel-sel bakteri tidak hanya terdapat pada permukaan agar saja tapi juga di dalam
atau dasar agar sehingga bisa diketahui sel yang dapat tumbuh dipermukaan agar
yang kaya O2 dan di dalam agar yang tidak banyak begitu banyak mengandung O2
(Hadioetomo,2011).
Prosedur kerjanya adalah petridish, tabung pengenceran yang akan ditanam
dan media padat yang masih cair disiapkan. Kemudian 1 ml suspensi bakteri
diteteskan secara aseptis ke dalam cawan kosong· Lalu medium yang masih cair
dituang ke dalam petridish lalu petridish di putar membentuk angka 8 agar suspensi
bakteri dan media homogen, kemudian diinkubasi. Metode sebar atau spread plate
dilakukan dengan menyemprotkan suspensi ke atas medium agar kemudian
menyebarkannya secara merata dengan trigalski. Dengan ini diharapkan bakteri
terpisah secara individual, kemudian dapat tumbuh menjadi koloni tunggal. Metode
sebar dilakukan dengan cara mengambil sejumlah kecil cairan yang mengandung
campuran mikroba dan meletakannya di medium padat, kemudian cairan diratakan
pada permukaan medium dengan menggunakan spatel bentuk L atau spatel
drygalski. Metode tuang dilakukan dengan cara mencairkan medium dan
memasukkan beberapa ose bahan cair yang akan diperiksa ke dalam medium yang
telah dicairkan tadi, kemudian medium yang sudah diinokulasi di tuang ke cawan
petri yang steril dan digoyang-goyang hingga merata. Setelah terbentuk koloni,
biakan murni dapat dibuat dengan cara mengambil beberapa ose dari koloni tersebut
dan dipindahkan ke medium steril yang lain (Sutedjo,2015).
67
2.4. Air Mineral
Air adalah sebuah zat yang ada di alam yang dalam kondisi normal di atas
permukaan bumi berbentuk cair, akan membeku pada suhu di bawah nol derajat
celcius dan mendidih pada suhu seratus derajat celcius. Ahli kimia
mendefinisikannya terdiri dari dua unsur yaitu oksigen dengan dua ‘lengan’
menggandeng hidrogen membentuk satu kesatuan disebut molekul Air yang ada di
alam ini pada hakekatnya semua adalah timbunan molekul-molekul yakni pasangan
oksigen dan dua hidrogen. Air merupakan salah satu kebutuhan pokok manusia dan
keberadaannya dikuasi oleh negara. Hal itu dijelaskan dalam Pasal 33 ayat (3)
Undang-Undang Dasar 1945, bahwa “Bumi dan air dan kekayaan alam yang
terkandung di dalamnya dikuasai oleh negara dan dipergunakan untuk sebesar-
besarnya kemakmuran rakyat (UUD 1945). Air sebagai salah satu kekayaan alam
yang dilindungi negara memiliki banyak manfaat salah satunya sebagai air minum.
Secara umum bagi tubuh manusia air bermanfaat sebagai zat yang membersihkan
tubuh manusia pada saat mandi. (Pitoyo Amrih, 2007)
Sedang secara khusus di dalam tubuh manusia adalah antara lain sebagai media
pembawa dengan cara melarutnya nutrisi-nutrisi yang bersama darah akan
diedarkan ke seluruh organ tubuh yang membutuhkan, termasuk juga melarutnya
sampah dan racun dari sel-sel tubuh untuk dibawa keluar tubuh antara lain melalui
keringat, urine, ingus, dan lain-lain. Air juga berfungsi sebagai penjaga suhu tubuh.
Air berfungsi sebagai regulator atau pengatur panas tubuh. Suhu udara lebih tinggi
dari suhu tubuh, maka sebagian air dalam tubuh akan berkorban menelusup keluar
melalui pori-pori tubuh. Suhu udara lebih rendah dari tubuh, maka air dalam tubuh
berinisiatif sebagai katalisator untuk mengolah beberapa macam zat makanan
sehingga terurai menjadi energi panas untuk menjaga panas tubuh. Air yang
terkandung di dalam otot juga berfungsi sebagai pelumas bagi gerakan-gerakan
tubuh, sehingga ketika seseorang lari-lari pun tidak akan pernah terdengar suara
berisik dari tubuh. Menurut Said Sutomo (2008) air merupakan salah satu
kebutuhan yang sangat vital bagi manusia. Manusia tidak bisa hidup tanpa air. Air
memegang peranan yang amat penting untuk kelangsungan hidup manusia.
Pentingnya air bagi manusia ditunjukkan dari berbagai fungsinya di antaranya
membantu proses pencernaan dan kestabilan tubuh. (Said Sutomo,2008)
68
2.5. Air Comberan
Comberan merupakan salah satu jenis genangan air kotor yang mengendap,
biasanya berasal dari hasil buangan air limbah rumah tangga, seperti buangan air
dari kamar mandi dan dapur. Air comberan identik dengan air yang sangat kotor,
keruh dan juga bau serta tempat berkembang biaknya hewan nyamuk, selain itu
banyak juga terdapat bakteri-bakteri yang hidup di air comberan tersebutr. Got
dan comberan adalah suatu komponen buangan biologis maka dari itu bisa di
katakan air dengan kandungan BOD yang tinggi yang mempunyai sisa-sisa materi
organik dalam jumlah yang sangat besar yaitu nutrien yang umumnya merupakan
senyawa nitrogen dan fosfor yang dibawa oleh sisa - sisa protein dan sel-sel yang
sudah mati. Air comberan juga mengandung beberapa mikroorganisme seperti
contohnya Escerica coli, Salmonella typhy yaitu penyebab terjadinya demam,
Staphylococcus aureus atau Streptococcus pyogenes yaitu penyebab terjadinya
gatal-gatal pada kulit dan jentik - jentik cacingan juga berbahaya apabila kulit kita
terkontaminasi atau makanan yang kita makan terkontaminasi oleh air got tersebut
(Yasmin, 2011).
Air comberan adalah limbah buangan biologis dari hasil mandi dan cuci dapur
tapi lebih cenderung kepada selokan pembuangan. Kandungan tinggi BOD
(oksigen yang terlarut dalam air menjadi karbon dan senywa organik berkat
mikroorganisme) yang mengakibatkan air berbau tidak sedap, serta berwarna hitam
dan keruh. Dampak dari tingginya kandungan BOD dapat memutus kehidupan ikan
dan hewan air tawar lainnya. Ikan tak bisa hidup di air dengan kandungan BOD
yang tinggi, semakin banyak oksigen yang di konversi, maka semakin keruh warna
air dan semakin banyak mikroorganisme dari berbagai famili hidup memanfaatkan
zat-zat karena suasana yang kondusif dengan adanya mineral, tanah , air, sinar
matahari, dan zat-zat kimia. isolasi dan kultur bakteri dapat dilakukan
menggunakan media air comberan karena mengandung bakteri E. coli yang
merupakan singkatan dari Escherichia coli yang mengacu pada sekelompok bakteri
yang biasanya ditemukan dalam makanan dan air. Kebanyakan dari bakteri ini tidak
berbahaya, tetapi beberapa jenis dapat menyebabkan penyakit yang sebagian kecil
tidak begitu berbahaya. ( Fitri, 2011 ).
69
BAB 3

Praktikum Dasar-Dasar Mikrobiologi Akuatik dilaksanakan pada hari Jumat
tanggal 19 Maret 2021 pada pukul 13.30 .sampai dengan selesai, dilaksanakan
3.2. Alat dan Bahan

Adapun alat dan bahan yang digunakan pada Praktikum Dasar-Dasar Mikrobiologi
Akuatik adalah sumber inokulan (air kolam, air selokan, air pam dan air minuman
isi ulang/kemasan) dan media yang digunakan adalah TSA (Tryptic Soy Agar)
steril, lup inokulasi (ose), Bunsen dan alkohol
3.3. Prosedur Kerja

3.3.1. Prosedur Kerja Sampel Air Comberan
Adapun prosedur kerja pembuatan isolasi media kultur bakteri untuk sampel
air comberan adalah sebagai berikut:
1. Siapkan alat dan bahan.
2. Ambil air comberan sebanyak 5 ml, masukkan ke dalam tabung reaksi.
3. Empat tabung reaksi yang lain diisi dengan aquadest sebanyak 4 ml pada masing-
masing tabung.
4. Masukkan 1 ml ke tabung nomor 2,3,4 masing-masing sebanyak 1 ml.
5. Ambil cawan petri, sterilkan, tuang TSA hingga merata dan panaskan, tambahkan
hasil dari tabung 4 sebanyak 1 ml.
6. Lapisi dengan plastik wrap, tunggu hingga media mengeras.
70
3.3.2. Prosedur Kerja Sampel Ikan Asin
Adapun prosedur kerja pembuatan isolasi media kultur jamur untuk sampel
ikan asin adalah sebagai berikut:
1. Siapkan alat dan bahan.
2. Buatlah media TSA (Trytic Soy Agar).
3. Sterilkan cawan petri dengan bunsen secara merata. Pada waktu yang sama,
panaskan erlenmeyer yang telah berisi media TSA di atas bunsen.
4. Selanjutnya tuangkan TSA ke dalam cawan petri, tutup kembali dan ratakan
permukaan media dengan cara mensterilkan kembali di atas bunsen.
5. Setelah itu, tutup cawan petri dengan plastik warp.
6. Diamkan sampai media agar memadat.
71
BAB 4
4.1. Hasil
Adapun hasil dari praktikum Metode isolasi kultur bakteri adalah sebagai berikut.
Tabel 4.1.4. Hasil Isolasi dan Kultur Bakteri
No Sampel Jenis Nutrisi Gambar
TPC
1 Air Comberan
(Karbohidrat)
Gambar media TPC
TPC
2 Ikan Asin
(Karbohidrat)
Gambar media TPC
TPC
3 Ikan Asin (Karbohidrat)
Gambar media TPC
72
PDA
4 Tempe
(Protein)
Media PDA
5 Tempe PDA
(Protein)
Media PDA
73
4.2. Pembahasan
Pada praktikum kali ini yaitu tentang metode isolasi dan media bakteri terdapat
berbagai cara untuk mengisolasi bakteri dalam biakan murni yaitu, cara
pengenceran, cara penuangan, carapenggoresan, cara penyebaran, cara pengucilan
satu sel, dan cara inokulasi pada hewan. Bakteri mudah ditemukan di air, udara dan
tanah. Mereka hidup dalam suatu koloni, baik bersimbios, bebas ataupun parasit
pada makhluk hidup. Jumlah bakteri di alam sangat melimpah dengan keragaman
yang sangat tinggi. Untuk mempelajari kehidupan dan keragaman bakteri,
diperlukan suatu usaha untuk mengembakbiakkan bakteri dalam skala
laboratorium. Pengembangbiakkan ini dilakukan dengan menumbuhkan bakteri
dari sumber isolat, seperti tanah, udara, sisa makanan, dan lain-lain, dalam media
yang mengandung nutrisi. Diawali dengan mensterilkan alat-alat yang digunakan
seperti cawan petri dan tabung reaksi seperti memanaskan cawan petri dan tabung
reaksi dengan menggunakan bunsen. Tujuan sterilisasi ini adalah untuk membunuh
bakteri-bakteri yang ada pada cawan petri dan tabung reaksi yang akan digunakan
dalam pembuatan media agar.
Isolasi adalah suatu usaha bagaimana caranya memisahkan senyawa yang
bercampur sehingga kita dapat menghasilkan senyawa tunggal yang murni.Ada
beberapa metode isolasi yang dilakukan pada praktikum kali ini yaitu metode gores
dan metode tuang. Dari berbagai macam metode ini tentu memiliki cara yang
menjadi khasnya masing-masing. Pada pembuatan isolasi untuk air comberan,
digunakan metode tuang. Prinsipnya air comberan terlebih dahulu diencerkan
dengan aquadest agar didapatkan jumlah bakteri yang bisa dihitung, dimana antara
media dan sampel diletakkan kedalam cawan petri yang telah disterilkan. Metode
tuang akan menumbuhkan bakteri diatas permukaan maupun didalam media yang
telah bercampur. Saat media dicampur tutup cawan petri lalu digoyangkan dilantai
yang datar dengan arah seperti membentuk angka delapan. Yang perlu diperhatikan,
saat menuangkan sampel sebaiknya jangan terlalu panas sebab bakteri rentang
terhadap panas. Sedangkan pada pembuatan isolasi untuk ikan asin digunakan
metode penggoresan. Prinsip metode gores, dimana cawan petri yang sudah berisi
media akan digores dengan jarum ose yang sudah dicelupkan kedalam sampel dan
digorekan ke media.
74
BAB 5
5.1. Kesimpulan
Adapun kesimpulan yang didapat setelah melakukan praktikum ini adalah
sebagai berikut:
1. Isolasi suatu mikrobia ialah memisahkan mikrobia tersebut dari lingkungannya
di alam dan menumbuhkannya sebagai biakan murni.
2. Pada beberapa kondisi, jumlah mikroorganisme harus dibatasi, seperti
mikroorganisme pada saluran pembuangan limbah dan juga mikroorganisme
pada makanan yang jumlahnya harus mengikuti standar yang ditetapkan.
3. Untuk memelihara mikroorganisme dibutuhkan media yang harus
mengandung semua zat yang diperlukan untuk pertumbuhannya.
4. Ikan asin memiliki protein sebagi media biakkan untuk bakteri.
5. Teknik Penanaman dengan Goresan (Streak) dapat didefenisikan sebagai suatu
metode yang dapat digunakan untuk mengisolasi suatu mikroorganisme dari
campurannya atau meremajakan kultur ke dalam media-media baru.
6. Ada dua metode isolasi yang digunakkan saat praktikum yaitu metode gores
dan metode tebar.
7. Teknik yang digunakan untuk menumbuhkan mikroorganisme pada media
agar memungkinkannya tumbuh dengan agak berjauhan dari sesamanya, juga
memungkinkan setiap selnya berhimpun membentuk koloni.
8. Sel-sel mikroba individu memperbanyak diri secara cepat sehingga dalam
waktu 18-24 jam terbentuklah massa sel yang dapat dilihat dan dinamakan
koloni.
5.2. Saran
Dalam pelaksaan praktikum ini sebaiknya praktikan lebih kondusif agar yang
dijelaskan oleh asisten dapat di terima dengan baik dan agar alat-alat yang ada
dilaboratorium di tambah agar semua praktikan dapat melihat serta mengetahui cara
penggunaan alat tersebut.
75
PERHITUNGAN COLONY BAKTERI
76
BAB 1
PENDAHULUAN
1.1.Latar Belakang
Perhitungan mikroskop biasa dilakukan dengan metode breed dan petrof-
houser. Metode Breed sering dilakukan untuk menganalisa susu yang mengandung
baktrei dalam jumlah tinggi. Perhitungan metode petrof-hourser dilakukan secara
langsung, dilakukan dengan cara menghitung jumlah sel yang tampak pada
pengamatan menggukan mikroskop. Teknik ini banyak digunakan karena dapat
dilaksanakan dengan cepat dan mudah dengan menggunakan alat yang disebut
counting chamber.Pertumbuhan diukur dari perubahan jumlah sel atau berat sel.
Jumlah sel dapat dihitung dari jumlah sel tebal yang tidak membedakan jumlah sel
hidup atau mati, dan jumlah sel hidup. Jumlah sel mikroba dapat ditentukan secara
langsung dengan pengamatan mikroskopis dalam bentuk sample kering yang
diletakkan dipermukaan gelas benda dan dalam sampel cairan yang menggunakan
metode Counting Chamber ( Yatim, 2009).
Mengisolasi suatu mikroba ialah memisahkan mikroba tersebut dari
lingkungannya di alam dan menumbuhkannya sebagai biakan murni dalam medium
buatan untuk isolasi harus dikethui cara-cara penanaman dan menumbuhkan
mikroba pada medium biakan serta syarat lain untuk pertumbuhannya. Adapun
syarat perhitungan koloni sehingga koloni dapat dihitung yaitu antara lain jumlah
koloni yang akan dihitung tersebut dapat dihitung (bukan merupakan TBUD (tidak
bisa dihitung) atau spreader/ terlalu banyak sehingga tidak dapat dihitung), yang
kedua jumlah koloni termasuk dalam rasional dan yang ke tiga jumlah koloni dapat
antara 30-300.Pada proses perhitungan koloni, langkah pertama yang harus
dilakukan yaitu diambil cawan petri yang berisi medium dan sampel dari incase,
kemudian dihitung koloni bakteri dengan menggunakan koloni counter sehingga
dapat diketahui jumlah koloni.Pada proses isolasi bakteri, langkah pertama yang
dilakukan yaitu cawan petri diambil dari kulkas, kemudian dipijarkan jarum loop
diatas bunsen, diambil 1 bakteri dengan menggunakan jarum loop di cawan
petrinya. (Ibrahim, 2007).
77
Mikroba yang hidup di alam berada dalam bentuk populasi campuran dan
dijumpai sebagai spesies yang tunggal. Dengan dimiliki agar mikroba tersebut
dapat , jadi mudah diperkirakan sifat pertumbuhan ,morfologi dan fisiologi masing-
masing mikroba. Suatu mikroorganisme dalam kehidupannya tidak hanya tumbuh
berdiri sendiri.Namun saling berdampingan dengan mikroorganisme atau
organisme lainnya.Semialnya dalam satu wadah media bisa saja tumbuh beberapa
mikroorganisme secara bersamaan. Sehingga dalam wadah tersebut saling
terkontaminasi oleh adanya mikroorganisme lain. Perhitungan bakteri adalah suatu
cara yang digunakan untuk menghitung jumlah koloni bakteri yang tumbuh pada
suatu media pembiakan. Secara mendasar ada dua cara penghitungan bakteri, yaitu
secara langsung dan secara tidak langsung. Ada beberapa perhitungan secara
langsung, antara lain membuat preparat dari suatu bahan (preparat sederhana
diwarnai atau tidak) dan penggunaan ruang hitung (Andi, 2007).
Sedangkan perhitungan secara tidak langsung hanya mengetahui jumlah
mikroorganisme pada suatu bahan yang masih hidup saja (viable count). Pada tiap
perhitungan bakteri ketepatan berkurang dengan meningkatnya konsentrasi sel-sel.
Colony bakteri adalah sekumpulan dari bakteri-bakteri yang sejenis yang
mengelompok menjadi satu, perhitungan jumlah colony bakteri berfungsi untuk
mengetahui jumlah populasi bakteri dalam suatu bahan, semisal makanan,
minuman, air minum, dan lain sebagainya, dan juga berfungsi untuk menentukan
populasi suatu bakteri dalam tubuh, sehingga dapat mengetahui dosis obat yang
digunakan. Cara perhitungaan ini didasarkan pada anggapan bahwa sel-sel
mikroorganisme yang terdapat dalam sampeljika dibiarkan akan membentuk suatu
colony bakteri yang nampak dan terpisah. Jadi yang terhitung adalah kuman yang
hidup dan dapat tumbuh membentuk suatu suasana media yang disediakan, pada
sampel yang di periksa tidak semua jenis bakteri hidup dan dapat tumbuh dalam
suasana incubate yang disediakan Colony Counter adalah alat yang berfungsi untuk
menghitung jumlah colony bakteri, agar mempermudah (Suyatno,2014).
1.1 Tujuan
Tujuan dari praktikum ini adalah mahassiswa bisa mengetahui berbagai
macam cara untuk menghitung jumlah sel dari biakkan suatu bakteri.
78
BAB 2
TINJAUAN PUSTAKA
2.1. Plate Count Agar ( PCA )
Medium pertumbuhan mikroorganisme terdiri atas campuran nutrisi
(nutrient) untuk mendukung pertumbuhan dan perkembang biakan
mikroorganisme. Koloni mikroorganisme yang tumbuh dipermukaan medium
mempermudah para peneliti untuk menentukan jumlah populasi. Jumlah populasi
ditentukan berdasarkan jumlah koloni tunggal yang tampak.Menurut teori, satu sel
mikroorganisme baik itu sel bakteri atau fungi dapat membentuk satu koloni
tunggal. Dengan membandingkan jumlah koloni yang tumbuh dipemukaan
medium dapat digunakan untuk mengestimasi total sel mikroorganisme awal yang
terdapat pada suatu sampel. Metode perhitungan ini dikenal dengan sebutan Total
Plate Count dan biasanya menggunakan medium khusus bernama Plate Count
Agar (PCA ) dalam perhitungan bakteri (Waluyo, 2009).
Plate count agar (PCA) adalah substrat bakteriologis yang digunakan untuk
menentukan jumlah total bakteri aerob hidup dalam sampel. Ini bukan media
selektif. Jumlah bakteri dinyatakan sebagai unit pembentuk koloni per gram (CFU
/ g), dalam sampel padat dan per ml (CFU / ml) dalam sampel cair. Teknik yang
disarankan adalah teknik tuang piring. Sampel diencerkan dan pengenceran yang
sesuai ditambahkan dalam cawan Petri. Agar cair steril ditambahkan ke pelat ini
dan pelat diputar perlahan untuk memastikan pencampuran sampel dengan agar
yang seragam. Pelat diinkubasi pada suhu 20 atau 30 ° C dalam tiga hari. Setelah
inkubasi, jumlah koloni dihitung di atas piring dengan 25-250 koloni, yang
dianggap memberikan hasil paling akurat. Saat menghitung jumlah bakteri
sebenarnya dalam sampel, faktor pengenceran harus dipertimbangkan. Plate Count
Agar juga disebut Tryptone Glucose Yeast Agar atau Casein-Peptone Dextrose
Yeast Agar. Mediumnya mengandung enzim kasein yang menyediakan asam
amino, nitrogen, karbon, vitamin dan mineral untuk pertumbuhan organisme.
Ekstrak ragi terutama memasok vitamin B kompleks. Glukosa adalah karbohidrat
yang dapat difermentasi (Collyn and Lyne, 1987).
79
2.2. Karakteristik Bakteri
Bakteri adalah oragnisme bersel tunggal yang hidup bebas dan
mampu bereproduksi sendiri tenrapi menggunakan hewan sebagai pejamu untukm
endapatkan makanan.Bateri tidak memiliki inti sel. Bakteri terdiri atassitoplasma
yang dikelilingi oleh sebuah dinding sel yang saku yang terbuat darisuatu zat
khusus yang disebut peptidoglikan.Di dalam sitoplasma terdapatterdapat materi
genetik, baik DNA maupun RNA, dan struktur intrasel yangdiperlukan untuk
metabolisme energi (Corwin, 2009). Bakteri mempunyai suatu cakupan luas
envronmental dan kebutuhan bergizi.Kebanyakan bakteri mungkin adalah
ditempatkan ke dalam salah satu dari tigakelompok berdasar pada tanggapan
mereka ke oksigen berupa gas. Bakteri aerobik tumbuh dengan subur di hadapan
oksigen dan memerlukan untuk keberadaan dan pertumbuhan dilanjutkan mereka
anaerobes, menyukai bertumbuh di hadapan oksigen, tetapi dapat melanjut untuk
tumbuh tanpa itu. Bakteri adalah nama sekelompok mikroorganisme yang termasuk
prokaryotae yang bersel satu, berkembang biak dengan membelah diri dan bahan
genetiknya tidak terbungkus dalam membran inti (Corwin, 2009).
Pada umumnya bakteri tidak mempunyai klorofil, kecuali beberapa species
tertentu yang mempunyai pigmen fotosintesis. Oleh karena itu, ada bakteri yang
hidupnya heterotrof dan ada juga bacteria yang hidup autotrof. Bakteri heterotrof
dapat dibedakan menjadi bakteri yang hidup sebagai parsit dan saprofit, Sedangkan
bakteri autotrof dapat dibedakan berdasarkan atas sumber energi yang digunakan
untuk mensentetis makanannya menjadi bakteri fotoautotrof dan
kemoautotrof.Bakteri dapat hidup dimana saja, ada yang merugikan manusia,
hewan maupun tumbahan. Namun demikian ada juga bakteri yang menguntungkan
bagi umat manusia. Bakteri dapat ditemukan di hampir semua tempat:
di tanah, air, udara, dalam simbiosis dengan organisme lain maupun sebagai
agen parasit (patogen), bahkan dalam tubuh manusia. Bagian tubuh bakteri pada
umumnya dapat dibagi atas 3 bagian yaitu dinding sel, protoplasma (di dalamnya
terdapat membran sel, mesosom, lisosom, DNA, endospora), dan bagian yang
terdapat di luar dinding sel seperti kapsul, flagel, pilus. Diantara bagian bagian
tersebut ada yang selalu didapatkan pada sel bakteri, yaitu adalah membran sel, ada
juga ribosom dan juga termasuk DNA (Hendri, 2014).
80
2.3.Colony Center
Colony counter adalah suatu alat yang dapat digunakan untuk melakukan
perhitungan sel secara cepat dan dapat digunakan untuk konsentrasi sel yang
rendah. Pada mulanya diperuntukkan untuk menghitung sel darah. Memiliki garis-
garis mikroskopis pada permukaan kaca. Luas total dari chamber adalah 9 mm2.
Chamber tersebut nantinya akan ditutup dengan coverslip dengan ketinggian 0.1
mm di atas chamber floor. Penghitungan konsentrasi sel ini bergantung pada
volume di bawah coverslip. Pada chamber terdapat 9 kotak besar berukuran 1 mm2
dan kotak-kotak kecil, di mana satu kotak besar sama dengan 25 kotak kecil
sehingga satu kotak besar tersebut memiliki volume sebesar 0.0001 ml Cara kerja
colony counter ini adalah dengan memanfaatkan lup untuk memperbesar koloni
atau dengan menandai beberapa koloni yang terdapat pada cawan petri
menggunakan bulpoint yang terdapat pada colony counter. Colony Counter pada
umumnya masih bersifat manual, hanya mengandalkan daya ingat petugas
laboratorium yang menjadi alat pengetahuan yang aktif (Erdo Banu 2019)
. Secara umum jenis bakteri secara gram dapat dibedakan menjadi dua, yaitu
gram positif dan gram negatif. Bakteri yang mempunyai gram negatif mempunyai
zat lipid yang sangat mudah larut selama pencucian dengan menggunakan alkohol,
sehingga pori yang ada pada dinding sel membesar sehingga menyebabkan
permeabilitas pada dinding sel menjadi besar, dan zat warna yang diserap menjadi
mudah untuk dilepaskan sehingga bakteri menjadi tidak berwarna. Sedangkan
bakteri gram positif mempunyai sifat yang berbeda jika dibandingkan dengan
bakteri gram negatif, dimana bakteri gram positif pada saat proses pencucian
dengan alkohol mengalami denaturasi protein pada dinding sel nya. Sehingga
menyebabkan protein menjadi keras dan kaku, kemudian pori akan menjadi kecil
dan permeabilitas menjadi kurang sehingga kristal violter tetap dipertahankan dan
mengakibatkan muncul warna ungu. Bakteri Gram negatif memiliki dinding sel
berupa lapisan tipis peptidoglycan, yang diselubungi oleh lapisan tipis outer
membrane yang terdiri dari lipopolysaccharide (LPS). Daerah antara peptidoglycan
dan lapisan LPS disebut periplasmic space (hanya ditemui pada Gram negatif)
adalah zona berisi cairan atau gel yang mengandung berbagai enzymes dan nutrient-
carrier proteins. Bakteri Gram .(Staf Pengajar FKUI, 1993).
81
2.4. SNI ALT (Angka Lempeng Total)
Angka Lempeng Total ALT adalah pertumbuhan bakteri mesofil aerob setelah
sampel diinkubasi dalam perbenihan yang cocok selama 24-48 jam pada suhu 37
℃. Dalam pengujian ALT digunakan metode pour plate dengan cara
menginokulasikan bakteri pada media agar tuang pada suhu 45 ℃ dalam cawan
petri. Ketika agar memadat, sel-sel bakteri tidak dapat bergerak dalam agar dan
akan tumbuh menjadi koloni SNI, 1992. Angka lempeng total merupakan salah satu
cara untuk menghitung cemaran mikroba. Prinsip pada metode hitungan cawan
adalah jika sel jasad renik yang masih hidup ditumbuhkan pada medium agar, maka
sel jasad renik tersebut akan berkembang biak membentuk koloni yang dapat dilihat
langsung dan dapat dihitung dengan menggunakan mata tanpa mikroskop. Metode
hitungan cawan merupakan cara yang paling sensitif untuk menentukan jumlah
jasad renik karena beberapa hal yaitu : 1. Hanya sel yang masih hidup yang dapat
dihitung. 2. Beberapa jenis jasad renik dapat dihitung satu kali. 3. Dapat digunakan
untuk isolasi dan identitas jasad renik karena koloni yang terbentuk mungkin
berasal dari jasad renik yang menetap menampakkan pertumbuhan yang
spesifik dan juga sangat baik (Fardiaz, 1992)
Pengujian mikrobiologi diantaranya meliputi uji kuantitatif untuk menetukan
mutu dan daya tahan suatu makanan, uji kualitatif bakteri patogen untuk
menentukan tingkat keamanannya, dan uji bakteri indikator untuk mengetahui
tingkat sanitasi makanan tersebut . Metode kuantitatif digunakan untuk mengetahui
jumlah mikroba yang ada pada suatu sampel, umumnya dikenal dengan Angka
Lempeng Total ALT. Uji ALT dan lebih tepatnya ALT bakteri aerob mesofil atau
anaerob mesofil menggunakan media padat dengan hasil akhir berupa koloni
bakteri yang dapat diamati secara visual dan dihitung dalam satuan koloni cfu per
mlg atau koloni 100ml. Cara yang digunakan antara lain dengan cara tuang dan
tetes dan cara sebar BPOM RI, 2008. Uji ALT dapat digunakan untuk menghitung
banyaknya bakteri yang tumbuh dan berkembang pada sampel , juga sebagai acuan
yang dapat menentukan kualitas dan keamanan jamu gendong. Jamu gendong
dikatakan berkualitas apabila tidak ada sama sekali cemaran mikroba yang tumbuh
atau apabila ada maka jumlahnya haruslah berada di batas yang sudah ditentukan
oleh pihak dari BPOM RI 2014 (Fardiaz, 1992).
82
BAB 3
3.1. Tempat Dan Waktu

Praktikum Dasar-Dasar Mikrobiologi Akuatik Program Studi Teknologi Hasil
Perikanan, Fakultas Pertanian, Universitas Sriwijaya dilaksanakan pada hari Jumat,
26 Maret 2021, pukul 13.30 WIB sampai dengan selesai, dilaksanakan secara online
melalui aplikasi tatap muka zoom.
3.2. Alat Dan Bahan

Adapun alat yang digunakan pada praktikum ini adalah cuvvette, pipet tetes,
inkubator, spektrofotometer,dan juga tabung reaksi. Untuk bahan yang digunakan
yaitu sampel bakteri (isolat air laut,tawar, ikan sakit, serta Aeromonas Hydrophila
dan juga Aeromonas Salmonicida ), Plate Count Agar (PCA), Phosphate Buffer
Salin (PBS), dan Larutan Mc Farland.
3.3. Prosedur Kerja

Berikut adalah prosedur kerja yang dilakukan pada Praktikum Perhitungan
Koloni Bakteri ini adalah sebagai berikut :
1. Diencerkan 3 tabung PCA dalam air mendidih.
2. Didinginkan agar didalam penagas air (50oC) selama 5-10 menit.
3. Setelah air dingin, dituangkan media agar kedalam petridish dan membiarkan
media agar membeku, menandai petridish dengan nama dan tingkat pengenceran.
4. Dibuat seri pengenceran 10-1 10-3 dari sampel bakteri. Pipet 0,1 ml cairan masing-
masing pengenceran tersebut kedalam petridish yang sesuai.
5. Gunakan spreder untuk meratakan suspensi diatas permukaan lempeng agar.
6.Membungkus petridish dengan menggunakan kertas pembungkus dan
masukkanlah kedalam inkubator 35oC dalam posisi terbalik selama 24-48 ja
7. Menghitung koloni pada petri yang mempunyai kisaran 25-250 koloni.
8.Hitunglah jumlah bakteri hidup dengan suatu cara menghilangkan faktor
pengenceran yang digunakan dengan 10 (karena volume suspensi bakteri yang
dimasukkan kedalam petri hanya 0,1 ml. Hasil akhir pengalihan merupakan jumlah
bakteri yang hidup dalam satuan yang disebut colony-forming unit/ml (CFU/ml).
83
BAB 4
4.1. Hasil
Hasil dari praktikum instrumentasi laboratorium mikrobiologi disajikan pada
tabel 4.1.1.
Tabel 4.1.1. Hasil Praktikum pengamatan instumentasi mirobiologi
No Nama sampel Gambar
1 Air comberan
2 Air kolam
84
4.2 Pembahasan
Pada praktikum perhitungan koloni bakteri kita akan menghitung berapa jumlah
koloni yang hidup pada sebuah cawan petri baik dilakukan perhitungan duplo atau
tunggal saja. Peralatan yang digunakan pada saat perhitungan bakteri diantaranya
yaitu terdapat cawan petri yang berfungsi untuk menumbukan bakteri yang akan
diamati atau dihitung, yang kedua yaitu inkubator yang berfungsi untuk
menginkubasi bakteri yang sudah ditumbuhkan dalam cawan petri dan
menyimpannya dalam suhu yang telah ditentukan dan diinginkan, dan yang terakhir
adalah alat yang sangat penting untuk perhitungan bakteri yaitu colony counter.
Colony counter ini berfungsi untuk membantu mengitung bakteri yang sudah
ditumbuhkan didalam cawan petri, alat ini sangat membantu untuk menghitung
jumlah koloni, cara menggunakan alat ini yaitu dengan menghidupkan alat tersebut
dan meletakkan cawan petri pada tempat yang telah disediakan akan terdapat sidanr
yang akan membantu perhitungan koloni dan juga terdapat kaca pembesar untuk
memperbesar koloni yang akan dihitung.
Sedangkan bahan yang digunakan dalam perhitungan bakteri ini diantaranya
yaitu dengan menggunakan media agar yaitu Triptic Soy Agar (TSA) dan juga
menggunakan beberapa sampel diantaranya yaitu air comberan dan juga air kolam.
Bakteri sangat membutuhkan protein untuk bakteri dapat bertahan hidup, maka dari
itu bakteri membutuhkan media yang banyak mengandung protein yang sangat
melimpah agar bakteri dapat bertahan hidup, maka dari itu media yang digunakan
adalah Triptic Soy Agar (TSA) karena media ini terbuat dari kaldu ikan, maka dari
itu media tersebut banyak mengandung protein yang sangat dibutuhkan oleh bakteri
untuk berkembang biak. Triptic Soy Agar (TSA) ini terbuat dari kaldu ikan yang
sudah didinginkan dan kemudain kaldu tersebut ditambahkan dengan agar-agar
rumah tangga dan kemudian dididihkan dengan menggunakan hot plate dan juga
bantuan sirrer untuk mengaduk media didalam erlenmeyer. Kemudian media
ddsterilakn dengan menggunakan autoclave agar media yang digunakan tidak
terkontaminasi dari bakteri yang tidak kita ininkan dan juga agar media dapat
mnegeras karena agar-agar akan mengeras apabila agar-agar tersebut dipanaskan
terlebih dahulu lalu media didiamkan sampai media dingin tetapi tidak terlalu
dingin agar media tidak mengeras seperti agar.
85
Pada praktikum ini membahas tentang perhitungan colony.Metode Breed
sering dilakukan untuk menganalisa susu yang mengandung baktrei dalam jumlah
tinggi. Perhitungan metode petrof-hourser dilakukan secara langsung, dilakukan
dengan cara menghitung jumlah sel yang tampak pada pengamatan menggukan
mikroskop. Teknik ini banyak digunakan karena dapat dilaksanakan dengan cepat
dan mudah dengan menggunakan alat yang disebut counting chamber.Pertumbuhan
diukur dari perubahan jumlah sel atau berat sel. Jumlah sel dapat dihitung dari
jumlah sel tebal yang tidak membedakan jumlah sel hidup atau mati, dan jumlah sel
hidup. Mengisolasi suatu mikroba ialah memisahkan mikroba tersebut dari
lingkungannya di alam dan menumbuhkannya sebagai biakan murni dalam medium
buatan untuk isolasi harus dikethui cara-cara penanaman dan menumbuhkan
mikroba pada medium biakan serta syarat lain untuk pertumbuhannya. Adapun
syarat perhitungan koloni sehingga koloni dapat dihitung yaitu antara lain jumlah
koloni yang akan dihitung tersebut dapat dihitung (bukan merupakan TBUD (tidak
bisa dihitung) atau speared tersebut.
Medium pertumbuhan mikroorganisme terdiri atas campuran nutrisi (nutrient)
untuk mendukung pertumbuhan dan perkembang biakan mikroorganisme. Koloni
mikroorganisme yang tumbuh dipermukaan medium mempermudah para peneliti
untuk menentukan jumlah populasi. Jumlah populasi ditentukan berdasarkan
jumlah koloni tunggal yang tampak.Menurut teori, satu sel mikroorganisme baik
itu sel bakteri atau fungi dapat membentuk satu koloni tunggal. Dengan
membandingkan jumlah koloni yang tumbuh dipemukaan medium dapat digunakan
untuk mengestimasi total sel mikroorganisme awal yang terdapat pada suatu
sampel. Identifikasi mikroorganisme yang baru saja diisolasi sangat memerlukan
perincian, deskripsi, dan perbandingan yang sangat rinci dan jelas dengan deskripsi
yang telah dipublikasikan sebelumnya untuk jasad-jasad renik lain yang
mempunyai kesamaan jenis. Identifikasi bakteri dapat dilakukan dengan dua cara
baik secara morfologi ataupun secara fisiologi, identifikasi yang dilakukan secara
morfologi dapat meliputi bentuk koloni, struktur koloni, bentuk sel, ukuran sel, dan
pewarnaan bakteri. Pengamatan morfologi kemudian dapat dibagi lagi menjadi dua
yaitu pengamatan secara makroskopis dan mikroskopis.
86
BAB 5
5.1 Kesimpulan
Berikut adalah kesimpulan yang didapatkan dari praktikum perhitungan koloni
bakteri adalah sebagai berikut :
1. Peralatan yang digunakan dalam penghitungan koloni bakteri ini adalah cawan
petri, inkubator dan yang paling penting adalah colony counter
2. Bahan-bahan yang digunakan dalam perhitungan bakteri sebagai penumbuhan
bakteri adalah media Triptic Soy Agar (TSA) dan sampel berupa air comberan dan
juga air kolam
3. Metode yang digunakan dalam penggoresan pada penghitungan bakteri ini adalah
metode gores sinambung
4 Alat yang digunakan untung menghitung jumlah koloni bakteri adalah colony
counter.
5. Inkubasi dilakukan selama 24 sampai 48 jam didalam alat inkubator yang sudah
diatur suhunya
5.1 Saran
Saran yang didapatkan pada praktikum perhitungan bakteri ini adalah,
seharusnya pada perhitungan bakteri dilakukan pengenceran dengan metode angka
lempeng total dan membuat pengenceran secara duplo agar dapat dilakukan
penghitungan dengan metode angka lempeng total yang sesuai padaSNI.
87
DAFTAR PUSTAKA
Ahmad, syaifudin. 2017. Makalah Oven Laboratorium (online)

https://id.sribd.com/document/336693379/makalah-oven-laboratorium
(diakses pada tanggal 23 Februari 2020)
Aldi. 2016. Sterilisasi Secara Mekanik (online)
https://id.scribd.com?304966975/sterilisasi-secara-mekanik (diakses pada
tanggal 23 Februari 2020)
Andriani, Ririn.2016.Pengenalan Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi Untuk
MengatasiKeselamatan Kerja dan Keberhasilan Praktikum. Fakultas
Farmasi,
Universitas Halu Oleo.
Arisanti. 2014. Fungsi Alat Sterilisasi.(online). http://academia.edu/fungsi-alat-
sterilisasi.html? (diakses pada tanggal 9 Februari 2020)
Astina. 2016. Media Umum Potato Dextrose Agar PDA. (Online). http://
www.academia.edu/9066334/MEDIA_UMUM_Potato_Dextrose_Agar_P
DA. (Diakses pada tanggal 15 Maret 2021).
Azis, alimul H.2006.Pengantar Kebutuhan Dasar Manusia. Salemba Medika :
Jakarta.
Bhima. 1998. Mikrobiologi umum. Universitas Muhammadiyah.
Budimarwanti. 2011. Pengelolaan Alat dan Bahan di Laboratorium Kimia.
Yogyakarta: UNY.
Devita, Monica. 2018. Medium Pertumbuhan Mikroorganisme (online)
https://www.academia.edu/9427089/media_pertumbuhan_
mikroorganisme (diakses pada tanggal 01 Maret 2020)
Epria, Primsa. 2015. Pengertian Mikroskop (online).
https://id.scribd.com/doc/226506792/pengertian-mikroskop-lengkap.
(diakses pada tanggal 18 Februari 2020)
Fatmariza, M. Inayati, N. 2017. Tingkat Kepadatan Media Nutrient Agar
Terhadap Pertumbuhan Bakteri Staphylococcus Aureus. (Online).
http://jambs.poltekkes-mataram.ac.id/index.php/home/article/view/88
Fauzi, i 2014 Laporan praktikum instrumentasi mikrobiologi
https://www.academia.edu/8583046/Instrumentasi_Labolatorium_Mikrobi
ologi
Hadioetomo. 1993. Mikrobiologi Dasar Dalam Praktik. Jakata: PT. Gramedia P.
Hadioetomo, R.S., 1993, Mikrobiologi Dasar dalam Praktek, Teknik dan Prosedur
Dasar Laboratorium, Gramedia Pustaka Utama: Jakarta.
88
Hafsari, A. R., & Asterina, I. (2013). Isolasi dan identifikasi kapang endofit dari
tanaman obat surian (Toona sinensis). Jurnal Istek, 7(2).
Haynes, William M., ed. 2011 natrium hidroksida
https://id.wikipedia.org/wiki/Natrium_hidroksida#cite_note-Kirk-23
Juliantina, F. 2020. Media. (Online).
https://www.gurupendidikan.co.id/mikroorganisme/
Kusnadi, dkk., 2003, Mikrobiologi, UMY Pres: Yogyakarta.Metcalf, Allan A. 1999
Alkohol https://id.wikipedia.org/wiki/Alkohol
Kusnadi. 2003. Mikrobiologi. JICA Universitas Pendidikan Indonesia: Bandung.
Lay, W. 1992. Biologi untuk Universitas. Erlangga: Jakarta.
Purnawijayanti, H.A. 2001. Sanitasi Higine dan Keselamatan Kerja dalam
Pengelolahan Makananan. Kanisius Yogyakarta Qiuza, M 2011
Pengenalan sarana dan prasarana laboraturium mikrobiologi
https://melaniecianjur96.wordpress.com/2011/12/07/pengenalan-sarana-
dan-prasarana-laboraturium-mikrobiologi/
Pelczar, M. J., Chan, E, C, S., 2007, Dasar-Dasar Mikrobiologi,
Hadioetomo, ed., Jakarta, Universitas Indonesia Press.
Pratiwi, Sylvia., T., 2008, Mikrobiologi Farmasi, Jakarta, Erlangga Pribadi, Eko
Ratna, 1985. Mikrobiologi Dasar. Jakarta: Gramedia
Pramudiarja U. 2012, Tiap Masuk Ruangan, 1 Manusia Sumbang 37 Juta Bakteri.
Terdapat pada http://hot.detik.com. Diakses Pada 10 Maret 2021
Rudin, B 2015 Laporan praktikum mikrobiologi-pengenlan alat alat laboraturium
https://www.academia.edu/17017778/LAPORAN_PRAKTIKUM_MIKROB
IOLOGI_PENGENALAN_ALAT_ALAT_LABORATORIUM\
Setiawan, S. 2021. Pengertian Mikroorganisme. (Online).
https://www.gurupendidikan.co.id/mikroorganisme/
Surya, W 2018 Paktek Dasar Mikrobiologi Universitas Andalas
Tamam, B 2016 Pengenalan jenis dan fungsi alat-alat laboraturium mikrobiologi
https://generasibiologi.com/2016/11/pengenalan-alat-laboratorium-
mikrobiologi-dan-fungsinya-beserta-gambarnya.html
Teguh. (2008). Alkohol dalam tubuh. http://www.Scribd.com diakses tanggal 23
Oktober 2013
Walton, R.E. dan Torabinejad, M. 2008. Prinsip dan Praktik Ilmu Endosian Edisi
Tiga. Buku Kedokteran EGC. Jakarta.
W. B. Ensiklopedia, “Autoclave,” 2017. [Online]. Available:
Https://Id.Wikipedia.Org/Wiki/Autoklaf. Diakses Pada 10 Maret 2021.
Widhy, P 2009 Alat dan bahan kimia dalam laboraturium ipa
http://staffnew.uny.ac.id/upload/198307302008122004/pengabdian/plthn-
penggunaan-alat-lab.pdf
89
Widyasmorowati, W., Indrayudha, P., Mayasari, F. H., 2010, Petunjuk
Praktikum Mikrobiologi Farmasi, Universitas Muhammadiyah
Surakarta
Yuliani, R., 2006, Handout Kuliah Mikrobiologi: Uji Sensitivitas dan
Resistensi Antibiotik,Fakultas Farmasi, Universitas
Muhammadiyah Surakarta
Yulisman.2016. Pengertian Seterilisasi dalam Mikrobiologi. (online).
https://www.jakbelajar.com/2016/10/pengertian-sterilisasi-dalam.html.
90

Bundel Ddma Muhammad Riski 05061282025024 Thi A

Diunggah oleh

Informasi Dokumen

Judul Asli

Hak Cipta

Format Tersedia

Bagikan dokumen Ini

Bagikan atau Tanam Dokumen

Opsi Berbagi

Apakah menurut Anda dokumen ini bermanfaat?

Apakah konten ini tidak pantas?

Hak Cipta:

Format Tersedia

Bundel Ddma Muhammad Riski 05061282025024 Thi A

Diunggah oleh

Hak Cipta:

Format Tersedia

LAPORAN TETAP

PRAKTIKUM DASAR-DASAR MIKROBIOLOGI AKUATIK

TEKNOLOGI HASIL PERIKANAN

Muhammad Riski 05061282025024

Indralaya, April 2021

Cindy Oktaviana Nur Ihza Baharudin

Nia Novita Tamara

Puspa Ayu Pitayati, S.Pd., M.Si

Dengan demikian penulis mengucapkan banyak terima kasih.

Indralaya, April 2021

HALAMAN JUDUL .....................................................................................

HALAMAN PENGESAHAN ....................................................................... i

KATA PENGANTAR .................................................................................... ii

DAFTAR ISI .................................................................................................. iii

INSTRUMEN LABORATORIUM MIKROBIOLOGI

1.1. Latar belakang ........................................................................................... 1

2.1. Alat-Alat Laboratorium Mikrobiologi ..................................................... 3

2.2. Bahan Kimia Laboraturium Mikrobiologi ............................................... 4

2.3. NaOH ........................................................................................................ 5

2.5. Colony Counter ......................................................................................... 7

2.6. Erlenmeyer ................................................................................................ 8

BAB 3 PELAKSANAAN PRAKTIKUM .....................................................

3.1. Waktu dan Tempat .................................................................................... 9

3.2. Alat dan Bahan .......................................................................................... 9

3.3. Prosedur Kerja ........................................................................................... 9

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................

4.1. Hasil .......................................................................................................... 10

4.2 Pembahasan ................................................................................................ 20

5.1 Kesimpulan ................................................................................................ 22

5.2. Saran .......................................................................................................... 22

BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................

1.1.Latar belakang ............................................................................................ 24

2.1. Pengertian Sterilisasi ................................................................................. 26

2.2. Macam-Macam Alat sterilisasi ................................................................. 27

2.3. Sterilisasi Fisika ........................................................................................ 28

2.4. Sterilisasi Kimia ........................................................................................ 29

2.5. Sterilisasi Mekanik .................................................................................... 30

2.6. Autoklaf .................................................................................................... 31

BAB 3 PELAKSANAAN PRAKTIKUM .....................................................

3.1. Waktu dan Tempat .................................................................................... 32

3.2. Alat dan Bahan .......................................................................................... 32

3.3. Prosedur Kerja ........................................................................................... 32

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................

4.1. Hasil .......................................................................................................... 33

4.2. Pembahasan ............................................................................................... 35

BAB 5 KESIMPULAN DAN SARAN ..........................................................

5.1. Kesimpulan ............................................................................................... 36

5.2. Saran .......................................................................................................... 36

BAB 1 PENDAHULUAN ..............................................................................

1.1.Latar Belakang ........................................................................................... 38

2.1. Pengertian Media ...................................................................................... 40

2.2. Pengertian Mikroorganisme ...................................................................... 41

2.3. Potato Dextrose Agar (PDA) ................................................................... 42

2.4. Typtic Soy Agar (TSA) .............................................................................. 43

2.5. Nutrient Agar (NA) ................................................................................... 44

2.6. Trypticase Soy Broth (TSB) ...................................................................... 45

BAB 3 PELAKSANAAN PRAKTIKUM .....................................................

3.1. Waktu dan Tempat.................................................................................... 46

3.2. Alat dan Bahan.......................................................................................... 46

3.3. Prosedur Kerja........................................................................................... 46

BAB 4 HASIL DAN PEMBAHASAN ..........................................................

4.1. Hasil .......................................................................................................... 47

4.2. Pembahasan ............................................................................................... 48